JPH01147366A - 潜血検出用組成物およびそれを用いた検査体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 に産業上の利用分野】 本発明は、潜血検出用組成物および検査体、詳しくは、
尿、糞便および体液中の血液を簡便かつ迅速に検出する
ための検出用組成物およびその検出用組成物を用いて形
成した検査体に関するものである。

に従来の技術】 尿、曲物、胃内容液などの体液、もしくは糞便***物中
の潜血の検出は、多くの病態の診断において非常に貴重
な手段である。

従来から、体液、特に尿中の白液を検出するには、主と
して潜血検査試薬が塗布された検査体が用いられてきた
。この検査体は、使用に際して操作が簡便でしかも判定
が短時間で行なえるという利点がある。

ところが、従来の潜血検出用検査体においては、過酸化
物が血液中の血色素の持つペルオキシダーゼ様作用（ペ
ルオキシダーゼと類似の作用）により分解され、分解時
に発生する酸素が被酸化性指示薬と反応して指示薬を発
色させる原理に基いており、血液中の血色素の持つペル
オキシダーゼ様作用は、ドライケミストリーにおいて満
足な感度と呈色濃度に寄与するには弱いので、この点を
解決する目的で、キノリンおよびキノリン誘導体を含有
させ、ペルオキシダーゼ様作用を協強する（言い換えれ
ば増感する）ようにした試験片が提案されている（特公
昭４１−５６８０号公報）。

しかし、このようにペルオキシダーゼ様作用を協強する
場合、ｏ−トリジンやベンジジンのような高感度の被酸
化指示薬を使用するときは満足な感度と呈色濃度を与え
るが、それ以外の被酸化性指示薬を用いるときは満足な
感度と呈色色濃度が得られない欠点がある。

また、潜血試験片中に含まれる過酸化物は、同時に含ま
れる指示薬やＭ　衝剤との接触によっても分解されるの
で、感度や呈色濃度の低下が起る。

この点を解決し、長期保存性を付与する目的で、ゼラチ
ンを用いた有機ヒドロペルオキシド（行別ヒドロ過酸化
物の意味）のマイクロカプセル化も提案されている（特
公昭５４−１０５２０号公報）。

このような状況下で出願人は先に、被酸化性指示薬、行
別過酸化物、および結合材を溶解若しくは分散させて、
インキ組成物を支持体上に印刷して検査体を製造する方
法を提案している（特開昭５９−　３３７８７号公報）
。

このものは、製造工程が簡略化されており、能率よく試
験片を製造し得る反面、保存性と、感度の点では必ずし
も充分とは言えないものであった。

Ｋ発明が解決しようとする問題点】 本発明は、従来技術を考慮して先に出願人のなした発明
を改良し、潜血検査用組成物および検査体において、■
浸れた感度を有し、高い呈色濃度を有すること、■優れ
た保存安定性を有すること、■低温での乾燥ができて指
示薬の変質劣化を生じないこと、および■塗布方法、特
に、印刷法により検査領域を形成できることをすべて満
足するものを得ることを目的としてなされたもので゛あ
る。

Ｋ問題点を解決するための手段） 本発明は、以上の問題点を解決するために、特定の増感
剤を使用することにより感度と呈色濃度の高い、印刷等
の手段によって簡単に製造することのできる潜血検出用
組成物と検査体を得たものである。

本発明は、過酸化活性物質の存在下で検知可能な応答を
与えることのできる潜血検出用組成物であって、過酸化
物と、被酸化性指示薬と、キノリン若しくはそのｍ　１
体と、トリエタノールアミン塩を含むことを特徴とする
潜血検出用組成物、及び該組成物を支持体上に塗布して
なる潜血検出用検査体に関するものである。

本発明による潜血検出用組成物は、更に詳しくは、過酸
化物、過酸化物及び過酸化活性物質の存在下で検出可能
な応答をなすことができる被酸化性指示薬、上記キノリ
ン若しくはその誘導体とトリエタノールアミン塩とより
なる増感剤、ｐＨ緩衝剤、結合材、および吸水性粉末が
非水溶媒中に溶解若しくは分散されている潜血検出用組
成物であって、必要に応じ、該構成成分を過酸化物を含
む第１のグループと、被酸化性指示薬を含む第２のグル
ープに分け、該第１のグループ又は第２のグループの何
れかを水溶性のマイクロカプセル皮膜材によってマイク
ロカプセル化することもできる。

Ｋ作　　　用】 本発明によれば、公知の増感剤であるキノリン若しくは
キノリン誘導体に増感助剤であるトリエタノールアミン
塩を組合せ併用することによって、潜血検出用組成物の
反応の感度を著しく高くすることができる。

に実　施　例】 以下に、本発明における潜血検出用組成物の各構成成分
について、また、潜血検出用検査体の製造について順を
追って説明する。

過酸化物 過酸化物である有顆ヒドロペルオキシドとしては、その
グループ内に属する良く知られた多くの化合物のうち、
過酸化物に感受性を有する指示薬の存在下に過酸化活性
物質と反応して、色変化または、検査体に吸収されるか
若しくは反射される光の変化などの、検出可能な応答を
することができるものである限り何れも使用できる。本
発明の潜血検出用組成物に使用するものとしては、例え
ば次のようなものがある。

クメンヒドロペルオキシド、ｔ−ブチルヒドロペルオキ
シド、２，５−ジメチルヘキサン−２，５−ジヒドロペ
ルオキシド、ジイソプロピルベンゼンヒドロベルオキシ
ド、若しくはパラメンタンヒドロペルオキシド、などの
単独、またはこれらの混合物である。

このなかでも、クメンヒドロペルオキシドを用いること
が好ましい。

有ｂ１ヒドロペルオキシドは、潜血検出用組成物の固形
分に対して１〜３０重量％、好ましくは、２〜２５重最
％の吊で含有させることができる。

被酸化性指示薬 被酸化性指示薬は、酵素によって酸化されて発色する指
示薬であって、例えばベンジジン類及びＮ−アルキル化
ベンジジン類等の従来既知の化合物を広く用いることが
できる。この内、０−トリジン、３．３’　、５．５’
　−テトラメチルベンジジン、２．７−アザフルオレン
などが好ましく、中でも特に、３．３’　、５．５’　
−テトラメチルベンジジンを用いることが好ましい。

この被酸化性指示薬は、潜血検出用組成物の固形分に対
して０．５〜１０重量％、好ましくは、０．６〜６重量
％のｍで存在することが望ましい。

増感剤 増感剤として、キノリン若しくはその誘導体とトリエタ
ノールアミン塩の混合物を使用することにより、血液の
存在下での潜血検出用検査体の色形成を促進し、感度お
よび呈色濃度を向上することができる。

キノリン若しくはその２４体としては、キノリン、キニ
ン、６−メドキシキノリン、６−メチルキノリン、若し
くは７−メチルキノリンなどが用いられ、この内、６−
メドキシキノリンが特に好ましい。

トリエタノールアミン塩としては、トリエタノールアミ
ンｓａｇ、　　トリエタノールアミンリン酸塩、若しく
はトリエタノールアミン硫酸塩などが用いられるが、こ
の中でも特に、硫酸塩であるラウリル硫酸トリエタノー
ルアミン、ポリオキシエチレンラウリル硫酸トリエタノ
ールアミンを用いることが好ましい。

キノリン若しくはその誘導体は、潜血検出用組成物の固
形分に対して０．５〜１０重争％、好ましくは０．６〜
６重巾％の徂で存在することが望ましい。

また、トリエタノールアミン塩は、潜血検出用組成物の
固形分に対して１〜２０重示％、好ましくは、２〜１５
重量％の吊で存在することが望ましい。

緩衝剤 ｐ＋＋緩衝剤は、上記の被酸化性指示薬が潜血検出用組
成物中で好ましい呈色変化を起こすｐＨの近くのｐＨ値
を保つために用いられる。ｐｌ＋緩衝剤としては、所定
のｐＨ値（例えばｐＨ５）を潜血検出用組成物に与える
ことができるものであればよいが、具体的にはクエン酸
とクエン酸ナトリウムとの引合わせを用いることが好ま
しい。

結合材 結合材は、被検査液中の成分およびｐｌｌ等に影響を及
ぼさず、かつ試薬類、特に被酸化性指示薬に影響を及ぼ
さず、しかも呈色反応を妨げないものであることが要求
される。このような条件を満たすことが確かめられた結
合材としては次のようなものがあり、これらは単独若し
くは二種以上の混合物で用いられる。

ポリエステル＠脂、アルキッド樹脂、ポリウレタン樹脂
、ポリスチレン樹脂、アクリル樹脂、１ボキシ樹脂、塩
化ビニル樹脂、塩化ビニル共重合体樹脂、ポリビニルブ
チラール樹脂、ポリビニルアルコール樹脂、ポリビニル
ピロリドン樹脂、若しくは無水マレイン酸系共重合体樹
脂などの合成樹脂； メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチ
ルセルロ−ス デンプン、多糖類，ゼラヂン，カゼイン、若しくはアル
ギン酸ナトリウムなどの天然高分子が挙げられる。

結合材は、潜血検出用組成物の固形分に対し０、１〜２
０重Φ％、好ましくは０．５〜１唖１％の割合で使用す
ることが望ましい。

吸水性粉末 吸水性粉末は、支持体上に塗布し、乾燥して形成された
検査領域の吸水性を高め、被検査液と試薬組成物との接
触を促進し、支持薬の呈色反応を促進する働きを有する
。

このような吸水性粉末としては、水と接触した場合に極
端な酸性或いはアルカリ性を示すものは好ましくなく、
しかも白色度の高いものが好ましい。具体的には、次の
ようなものが挙げられる。

カオリン、合成シリカ、ガラス、セルロースブロック、
微結晶セルロース、イオン交換セルロース、イオン交換
樹脂，炭酸カルシウム、ｔ！Ａ酸マグネシウム、ケイ酸
アルミニウムなどが使用できる。

吸水性粉末は、潜血検出用組成物の固形分に対し３０〜
９０重量％の割合で使用することが望ましい。

溶　　　媒 溶媒としては、上記の各成分、特に結合材を均一かつ安
定に溶解若しくは分散させることができるものが好まし
い。このような条件を満たす溶媒としては、■ベンゼン
、トルエンなどの芳香族炭化水素、■メヂルエチルケト
ンなどの脂肪族ケトン、■酢酸エヂルなどのエステル類
、■ｎーブタノールなどのアルコール類などの非水溶媒
若しくは■水、または■〜■のものの混合物が挙げられ
る。

しかしながら、潜血検出用組成物としては、支持体上に
塗布した後の乾燥工程を低温、かつ短時間で行なえると
いう点で非水溶媒を使用することが好ましい。非水溶媒
を使用すると、検査体上に塗布し組成物の残留成分に基
因する変質劣化を防止できるという効果もある。

その他の成分 場合によっては、上記各成分のほかに、湿潤剤を潜血検
出用組成物中に配合する。

湿潤剤としては、非イオン性界面活性剤，陰イオン性界
面活性剤，陽イオン性界面活性剤，両性界面活性剤，若
しくはポリエチレングリコール類などが挙げられる。湿
潤剤は、各試薬の分散に役立ち、均一な検査領域の形成
を促進し、水濡れ性を向上させることができる。湿潤剤
は潜血検出用組成物の固形分に対して０．５〜５重量％
の吊で存在することが好ましい。

また、支持薬の呈色色調を更に見やすくするために、例
えばオイルイエロー等の背景色素を添加してもよい。

本発明において使用可能なマイクロカプセルの皮膜材は
、潜血検出用組成物を構成する成分を、有機ヒドロペル
オキシド、増感剤，結合材の一部よりなる第１のグルー
プと、被酸化性指示薬，ｐＨ緩衝剤，吸水性粉末及び結
合材の一部よりなる第２のグループとに分けた場合、第
１のグループに属する成分の何れか、又は第２のグルー
プに属する成分の何れかと混合して良好なエマルジョン
を形成する乳化剤であって、被検査液中の水と接触する
と迅速に崩壊して、内包していた有機ヒドロペルオキシ
ド又は被酸化性指示薬等を呈色反応に関与させる働きを
有するものであることが望ましい。

このような条件を満たすことが確かめられたマイクロカ
プセル皮膜材としては次のようなものがある。

ポリビニルアルコール樹脂，ポリビニルピロリドン樹脂
，ポリアクリルアミド樹脂．若しくはポリ酢酸ビニル樹
脂などの水溶性合成樹脂；メチルセルロース、エチルセ
ルロース、ヒドロキシセルロース、若しくはカルボキシ
メチルセルロース デンブン，多糖類，ゼラチン、カゼイン、アラビアゴム
、若しくはアルギン酸ナトリウムなどの天然高分子など
があり、これらのうち、特にアラビアゴム、カルボキシ
メチルセルロースニルアルコール樹脂が好ましい。

マイクロカプセル皮膜材は、潜血検出用組成物の固形分
に対して２〜７０重量％、好ましくは４〜５０重量％で
存在することが好ましい。

検査体の製造 上記のような潜血検出用組成物は、これをインキ組成物
として用い、支持体上に塗布し、続いて乾燥することに
より潜血検出用領域が形成され、検査体が得られる。

塗布方法としては、印刷法，コーティング法（例えば、
ロールコーティング法，スプレーコーティング法，デイ
ツプコーティング法，ベタコーティング法）などが用い
られる。

本発明においては、潜血検出用組成物の塗布量が比較的
多く、しかも、その塗布量は一定であることが好ましい
ため、シルクスクリーン印刷法。

凹版印刷法，グラビア印刷法などによって潜血検出用組
成物を支持体上に塗布するのが好ましい。

潜血検出用組成物の支持体上への塗布量は、組成物の種
類にもよるが、一般に２〜１５０ｇ／Ｔｒｔ（乾燥時）
であることが好ましい。

叉」Ｌ選 支持体としては、潜血検出用組成物と反応せず、しかも
、指示薬の呈色を阻害しないものであることが好ましい
。

具体的には、紙，合成紙，不織布，若しくは合成樹脂フ
ィルム、または、これらの複合体である紙と合成樹脂フ
ィルムの組み合わせ等の積層体等である。

このような支持体上に潜血検出用領域を形成した検査体
は、スティック状，ロール状，テープ状などの形態に形
成されていてもよい。或いは、支持体自身が被検査液を
採取できる形態、例えば、コツプ状，試験管状，皿状，
トレイ状，スポイト状に形成されていてもよい。

以下、本発明の潜血検出用組成物の調製と検査用試験片
の製造を実施例を挙げて説明する。

実施例１ 下記の潜血検出用組成物のうち、クメンヒドロペルオキ
シド、及び増感剤である６−メドキシキノリンをアラビ
アゴムを用いてマイクロカプセル化し、他の成分を加え
て潜血検出用組成物を調製した。次いで、該潜血検出用
組成物をホモミキサーで微細分散させ、スクリーン印刷
法により厚み３００μｍの白色ポリスチレンシート上に
一辺が５麗の正方形の検査試薬部を印刷し、印刷後６０
℃の温度で４０分間乾燥した。印刷に使用した版の線数
は８０メツシユ、レジストおよびスクリーン紗の厚みの
合計は１３０μｍであった。乾燥後、所定の寸法のステ
ィック状に裁断して検査用試験片を得た。

潜血検出用組成物 クメンヒドロペルオキシド　　　　・・・３．６重量部
６−メドキシキノリン　　　　　　　　　１．０型組部
（以上カプセル内） アラビアゴム　　　　　　　　　　　９．４重塁部３、
３’　、５．５’　− テトラメチルベンジジン　　　　　・・・ｉ．ｓ１１部
クエン酸　　　　　　　　　　　・・・０．５６重ω部
クエン酸すｌ−リウム　　　　　　　・・・２．２川伝
部ラウリル硫酸トリエタノールアミン ・・・１，６２重重吊 ポリエチレングリコール　　　　・・・２．５２垂蚤部
ポリビニルブチラール　　　　　　・・・３．６重吊部
（積水化学製，エスレックＢＸ−１） セルロース微粉末　　　　　　　　・・・２２，４重吊
部（脂化成製，アビセルＴＧ−Ｄ　） ｎ−アミルアルコール　　　　　　・・・３９．７重量
部ブチルセロソルブアセテート　　　・・・１３．０重
量部被検査液として、 ■正常尿 ■０．０６ＩＲｇ／ｄｌのヒトヘモグロビン（シグマ社
製）含有尿 ■０．１５１Ｒｇ／ｄｌのヒトヘモグロビン（シグマ社
製）含有尿 ■０．７５ａｙ／ｄｌのヒトヘモグロビン（シグマ社製
）含有尿 の４種類を準備し、上記で得られた検査用試験片を■〜
■の被検査液中に浸漬し、浸漬後直ちに取り出して１分
間静置した後の検査試薬部の呈色を観察した。

検査試薬部の呈色は均一かつ鮮明であり、呈色濃度は被
検査液中のヒトヘモグロビン濃度の増加に伴って段階的
に高くなり、上記の範囲内で被検査液中の潜血の濃度を
明確に判別可能であった。

呈色し１ζ検査用試験片を室温で５分間静置しても色調
の変化は認められなかった。

また、得られた検査用試験片をガラス容器中に密封し、
４０℃で１２ケ月保存した後に、上記と同様にして試験
を行なったところ、検査試薬部の呈色は保存前と同様に
均一、鮮明、かつ安定であり、被検査液中のヒトヘモグ
ロビン濃度を保存前と同様に明確に判別することが可能
であった。

また、上記■〜■の被検査体とは別に、正常尿ならびに
、正常尿に赤血球を２０個／μλ、５０個／μ℃および
正常尿に赤血球を２５０個／μ℃、それぞれ溶解したも
のを被検査液として準備し、同様にして呈色させたとこ
ろ、検査試薬部には、鮮明且つ安定な斑点が生じ、斑点
の数は被検査液中の赤血球の濃度の増加に伴って段階的
に高くなり、上記の範囲内で被検査液中の赤血球の濃度
を明確に判別可能であった。呈色した検査用試験片を室
温で５分間静置しても色調の変化は認められなかった。

また、得られた検査用試験片をガラス容器中に密封し、
４０°Ｃで１２ケ月保存した後に、上記と同様にして試
験を行なったところ、検査試薬部の呈色は保存前と同様
に鮮明、且つ安定であり、被検査液中の赤血球の濃度を
保存前と同様に明確に判別することが可能であった。

比較例１ 実施例１と同様に、但しラウリル硫酸トリエタノールア
ミンを使用せず、代わりにラウリル’ｆｉＡＷＩｉナト
リウムを使用して、検査用試験片を製造した。

実施例１で用いたの仁同様にして被検査液を試験したと
ころ、検査試薬部の呈色は均一ではあったが、感度なら
びに呈色濃度が低く、低濃度域での被検査液中のヘモグ
ロビン濃度を明確に判別することは困難であった。

実施例２ 実施例１と同様に、但しラウリル硫酸トリエタノールア
ミン１．６２重Φ部の代わりに、ラウリル硫酸ナトリウ
ム１．１３重吊車と塩酸トリエタノールアミン０．７３
重量部を使用して実施例１と同様にして検査用試験片を
製造したところ、同様の呈色を示し、保存性も良好であ
った。

Ｋ弁明の効果】 本発明においては、潜血検出用組成物中にキノリン及び
トリエタノールアミン塩を添加するので、潜血検出用組
成物の感度及び呈色濃度を向上させることができ、低濃
度域でのヘモグロビン並びに赤血球の半定量を可能にす
ることができる。更に又、本発明においては支持体上に
潜血検出用組成物を直接に塗布することより、特に印刷
法により潜血検出用領域を形成できるので、大量生産に
有利であり、検査体の製造工程を簡略化できる。

特許出願人　大日本印刷株式会社 代理人　弁理士　　大　野　克　躬 代理人　弁理士　　大　野　令　子 代理人　弁理士　　大　野　柳之輔

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、過酸化活性物質の存在下で検知可能な応答を与える
   ことのできる潜血検出用組成物であり、過酸化物と、被
   酸化性指示薬と、キノリン若しくはその誘導体と、トリ
   エタノールアミン塩を含むことを特徴とする潜血検出用
   組成物。 ２、トリエタノールアミン塩がラウリル硫酸トリエタノ
   ールアミン、若しくはポリオキシエチレンラウリル硫酸
   トリエタノールアミンの単独若しくは混合物であること
   を特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の潜血検出用
   組成物。 ３、潜血検出用組成物が、更にｐＨ緩衝剤、結合材、及
   び吸水性粉末を含み、各構成成分が非水溶媒中に溶解若
   しくは分散されていることを特徴とする特許請求の範囲
   第１項に記載の潜血検出用組成物。 ４、過酸化活性物質の存在下で検知可能な応答を与える
   ことのできる潜血検出用組成物であり、過酸化物と、被
   酸化性指示薬と、キノリン若しくはその誘導体と、トリ
   エタノールアミン塩を含む潜血検出用組成物が支持体上
   に塗布されていることを特徴とする潜血検出用検査体。 ５、トリエタノールアミン塩が、ラウリル硫酸トリエタ
   ノールアミン、若しくはポリオキシエチレンラウリル硫
   酸トリエタノールアミンの単独若しくは混合物であるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第４項に記載の潜血検出
   用検査体。 ６、潜血検出用組成物が、更にｐＨ緩衝剤、結合材、及
   び吸水性粉末を含み各構成成分が非水溶媒中に溶解若し
   くは分散されていることを特徴とする特許請求の範囲第
   ４項に記載の潜血検出用検査体。