JP7371345B2 - 顕微鏡、及び、顕微鏡の測定方法 - Google Patents
顕微鏡、及び、顕微鏡の測定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7371345B2 JP7371345B2 JP2019073405A JP2019073405A JP7371345B2 JP 7371345 B2 JP7371345 B2 JP 7371345B2 JP 2019073405 A JP2019073405 A JP 2019073405A JP 2019073405 A JP2019073405 A JP 2019073405A JP 7371345 B2 JP7371345 B2 JP 7371345B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cell
- cell mass
- microscope
- slice
- microscope according
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 title claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 43
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 35
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 33
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 20
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 219
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 54
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 23
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 13
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 11
- 210000003520 dendritic spine Anatomy 0.000 description 9
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 9
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 8
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 210000002220 organoid Anatomy 0.000 description 5
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 238000012014 optical coherence tomography Methods 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- -1 second messengers Proteins 0.000 description 1
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
上記実施形態においては、指示部25は、算出された核密度が所定の閾値を下回っている場合には、仮にレーザ強度Iを調整したとしても、正常に核部分を弁別することができるZスライス画像を取得することは不可能であると判断し、Zスタックの測定の終了を指示していた。しかしながら、算出された核密度が所定の閾値を下回っていたとしても、必ずしもZスタックの測定を終了させる必要はない。例えば、図7に示されるように、算出された核密度が所定の閾値を下回っている場合には、それ以降の測定を、核の数を計数するための測定ではなく、細胞の塊の外形(輪郭)を求めるための測定に切り替えることができる。
さらに、上記の説明においては、細胞の構造体として細胞の核を例に挙げて説明してきたが、細胞の構造体は核に限られない。例えば、リソソーム、ゴルジ体、ミトコンドリアなどの細胞小器官(オルガネラ)や、タンパク質、セカンドメッセンジャー、mRNA、遺伝子などでも構わない。
10 顕微鏡装置
20 制御部
30 表示部
40 入力部
100 照明部
120 光学系
140 受光部
160 可動ステージ
Claims (16)
- 対物レンズを含み、光源からの照明光によって、走査部を介して、前記対物レンズの光軸方向に交差する面内において、細胞塊を走査して照射する照明光学系と、
前記細胞塊からの光を、前記走査部を介して受光部へ集光する検出光学系と、
制御部と、を備え、
前記制御部は、前記光軸方向に沿って異なる複数の位置それぞれで、前記走査部により前記照明光を2次元走査して、2次元画像を取得する過程において、
前記細胞塊の第1の位置で取得される前記2次元画像から特定された前記細胞塊を構成する細胞の構造体に関する情報と、予め設定された前記細胞の構造体に関する情報に対する閾値とを比較し、
前記比較した結果に基づいて、前記光軸方向に沿って、前記第1の位置とは異なる第2の位置での2次元画像の取得の中止又は続行を指示する顕微鏡。 - 前記制御部は、前記中止の指示に代えて、前記細胞塊の外形を求めるための画像取得を指示する請求項1に記載の顕微鏡。
- 前記制御部は、前記細胞塊の外形を求めるために取得した画像から特定した前記細胞塊の外形に基づいて、前記細胞塊の体積を算出する請求項2に記載の顕微鏡。
- 前記制御部は、前記細胞塊の外形と、前記外形を求めるための画像取得の指示より前に取得した2次元画像から特定された前記細胞の構造体に関する情報とに基づいて、前記細胞塊の体積を算出する請求項3に記載の顕微鏡。
- 前記制御部は、前記第1の位置と前記第2の位置との間隔よりも広い間隔で、前記光軸方向に沿って、前記外形を求めるための画像取得位置を設定する、請求項2~4のいずれか一項に記載の顕微鏡。
- 前記制御部は、前記中止指示の前に取得した2次元画像から特定された前記細胞の構造体に関する情報に基づいて、前記細胞塊の体積を算出する請求項1に記載の顕微鏡。
- 前記細胞の構造体に関する情報は、前記細胞の構造体の密度、前記細胞の構造体の周囲長、及び前記細胞の構造体の輝度と前記構造体以外の部分の輝度との比率の少なくとも1つである請求項1に記載の顕微鏡。
- 前記細胞の構造体は、前記細胞の内部の構造、又は前記細胞の表面構造である請求項1又は7に記載の顕微鏡。
- 前記細胞の内部の構造は、細胞の核である請求項8に記載の顕微鏡。
- 前記細胞の表面の構造は、表面突起である請求項8に記載の顕微鏡。
- 前記閾値は、前記細胞の構造体の密度の適正範囲、前記細胞の構造体の周囲長の分布の適正範囲、及び前記細胞の構造体の輝度と前記構造体以外の部分の輝度との比率の適正範囲の少なくとも1つである請求項7~10のいずれか一項に記載の顕微鏡。
- 前記細胞塊は、保持部材に配置され、
前記第1の位置は、前記細胞塊と前記保持部材とが接する位置とは、前記光軸方向に沿って異なる位置に設定される請求項1~11のいずれか一項に記載の顕微鏡。 - 前記細胞塊が前記保持部材と接触する位置より前記光軸方向に沿って上側であって、前記細胞塊の前記光軸方向に直交する断面のうち、最も小さい断面積となる位置を前記第1の位置に設定する請求項12に記載の顕微鏡。
- 前記第1の位置は、前記細胞塊と前記保持部材とが接する位置から前記光軸方向に沿って10μm以内の位置に設定される請求項12または13に記載の顕微鏡。
- 前記細胞塊は、組織切片を含む請求項1~14のいずれか一項に記載の顕微鏡。
- 対物レンズを含み、光源からの照明光によって、走査部を介して、前記対物レンズの光軸方向に交差する面内において、細胞塊を走査して照射する照明光学系と、
前記細胞塊からの光を、前記走査部を介して受光部へ集光する検出光学系と、
を備える顕微鏡において、
前記光軸方向に沿って異なる複数の位置それぞれで、前記走査部により前記照明光を2次元走査して、2次元画像を取得する過程において、
前記細胞塊の第1の位置で取得される前記2次元画像から特定された前記細胞塊を構成する細胞の構造体に関する情報と、予め設定された前記細胞の構造体に関する情報に対する閾値とを比較することと、
前記比較した結果に基づいて、前記光軸方向に沿って、前記第1の位置とは異なる第2の位置での2次元画像の取得の中止又は続行を指示することとを含む顕微鏡の測定方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019073405A JP7371345B2 (ja) | 2019-04-08 | 2019-04-08 | 顕微鏡、及び、顕微鏡の測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2019073405A JP7371345B2 (ja) | 2019-04-08 | 2019-04-08 | 顕微鏡、及び、顕微鏡の測定方法 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020171199A JP2020171199A (ja) | 2020-10-22 |
JP2020171199A5 JP2020171199A5 (ja) | 2022-04-12 |
JP7371345B2 true JP7371345B2 (ja) | 2023-10-31 |
Family
ID=72829778
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019073405A Active JP7371345B2 (ja) | 2019-04-08 | 2019-04-08 | 顕微鏡、及び、顕微鏡の測定方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP7371345B2 (ja) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009175334A (ja) | 2008-01-23 | 2009-08-06 | Olympus Corp | 顕微鏡システム、画像生成方法、及びプログラム |
WO2017209079A1 (ja) | 2016-05-30 | 2017-12-07 | 株式会社ニコン | 観察装置および観察方法 |
JP2018066642A (ja) | 2016-10-19 | 2018-04-26 | オリンパス株式会社 | 生体試料の刺激性評価方法 |
WO2018096638A1 (ja) | 2016-11-24 | 2018-05-31 | 株式会社ニコン | 画像処理装置、顕微鏡システム、画像処理方法、およびコンピュータプログラム |
-
2019
- 2019-04-08 JP JP2019073405A patent/JP7371345B2/ja active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009175334A (ja) | 2008-01-23 | 2009-08-06 | Olympus Corp | 顕微鏡システム、画像生成方法、及びプログラム |
WO2017209079A1 (ja) | 2016-05-30 | 2017-12-07 | 株式会社ニコン | 観察装置および観察方法 |
JP2018066642A (ja) | 2016-10-19 | 2018-04-26 | オリンパス株式会社 | 生体試料の刺激性評価方法 |
WO2018096638A1 (ja) | 2016-11-24 | 2018-05-31 | 株式会社ニコン | 画像処理装置、顕微鏡システム、画像処理方法、およびコンピュータプログラム |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2020171199A (ja) | 2020-10-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6912516B2 (ja) | 光パッド顕微鏡 | |
US7304790B2 (en) | Examination apparatus and focusing method of examination apparatus | |
Lo et al. | Fast Fourier transform–based analysis of second-harmonic generation image in keratoconic cornea | |
US8812085B2 (en) | System and method for measuring the ratio of forward-propagating to back-propagating second harmonic-generation signal, and applications thereof | |
US11061216B2 (en) | Microscope and method for microscopic imaging of an object | |
US11237370B2 (en) | Multiple inclined beam line-scanning imaging apparatus, methods, and applications | |
JP6798625B2 (ja) | 定量位相画像生成方法、定量位相画像生成装置およびプログラム | |
Wokosin et al. | Optical workstation with concurrent, independent multiphoton imaging and experimental laser microbeam capabilities | |
JP6178656B2 (ja) | 補償光学素子の設定方法及び顕微鏡 | |
JP2012190021A (ja) | レーザ走査顕微鏡およびその動作方法 | |
CN108801863A (zh) | 可获取溶液中胶体粒子动力学及成像信息的飞秒光镊*** | |
JP2022132488A (ja) | 装置、方法、及びプログラム | |
US20180139366A1 (en) | System and method for light sheet microscope and clearing for tracing | |
JP5963487B2 (ja) | レーザ顕微鏡および観察方法 | |
EP2561405A1 (en) | Methods and apparatus to control acousto-optic deflectors | |
JP2014235407A (ja) | 非線形光学顕微鏡装置 | |
JP6704530B2 (ja) | 撮影制御装置、方法およびプログラム | |
JP7371345B2 (ja) | 顕微鏡、及び、顕微鏡の測定方法 | |
JP7379853B2 (ja) | 顕微鏡、及び、顕微鏡の設定方法 | |
JP6127818B2 (ja) | 補償光学素子の設定方法及び顕微鏡 | |
Mathew et al. | Multimodal optical workstation for simultaneous linear, nonlinear microscopy and nanomanipulation: upgrading a commercial confocal inverted microscope | |
US20180180867A1 (en) | Microscope and setting support method | |
US20210223526A1 (en) | Light-pad microscope for high-resolution 3d fluorescence imaging and 2d fluctuation spectroscopy | |
Paidi et al. | Adaptive optical two-photon fluorescence microscopy probes cellular organization of ocular lenses in vivo | |
JP7391583B2 (ja) | 検査装置及び検査方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220404 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220404 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20230222 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230307 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230425 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230704 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230919 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20231002 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7371345 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |