JP7364252B2 - 網膜保護組成物 - Google Patents
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本発明に用いられるアスタキサンチンは、カロテノイドの一種であり、抗酸化作用はビタミンEの1000倍といわれており、天然物由来のものであっても、合成により得られるものであってもよい。天然物由来のものとしては、例えば、ヘマトコッカス藻等の藻類、エビ・カニ等の甲殻類、サケ・タイ等の魚類などから得られるアスタキサンチンを挙げることができる。天然物由来の抽出物や化学合成品は市販されており、これら市販品を使用することができる。
(甘藷若葉処理物)
甘藷とは、ヒルガオ科に属する植物をいい、一般にサツマイモと呼ばれる。甘藷の品種は、特に限定されるものではなく、例えば、すいおう、ジョイホワイト、コガネセンガン、シロユタカ、サツマスターチ、アヤムラサキ等を挙げることができる。本発明の甘藷若葉処理物としては、甘藷若葉の粉砕物、搾汁、抽出物等の処理物を例示することができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。絞汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することに得ることができ、溶媒としては、例えば、水(熱水)、エタノール、含水エタノールを用いることができる。
葛は、マメ科クズ属のつる性の多年草植物である。葛の花としては、蕾から全開した花までのいずれの過程で採取したものを用いてもよく、各過程で採取したものを混合して用いることもできる。葛の種類としては、特に制限はないが、プエラリア・トムソニイ(Pueraria thomsonii)、プエラリア・ロバータ(Pueraria lobata)、プエラリア・スンバーギアナ(Pueraria thunbergiana)等を例示することができる。本発明の葛の花処理物としては、葛の花の粉砕物、搾汁、抽出物等の処理物を例示することができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。絞汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することに得ることができ、溶媒としては、例えば、水(熱水)、エタノール、含水エタノールを用いることができる。
ビルベリーとは、ツツジ科スノキ属の低灌木種の果実であり、ホワートルベリー、ウィンベリー、ブレーベリー、ヨーロッパブルーベリーと称されることもある。本発明のビルベリー処理物としては、ビルベリーの粉砕物、搾汁、抽出物等の処理物を例示することができる。粉砕物としては、粉末、顆粒等が挙げられる。絞汁や抽出物は、液状であってもよいが、ペースト状や乾燥粉末として用いることもできる。抽出物は、適当な溶媒を用いて抽出することに得ることができ、溶媒としては、例えば、水(熱水)、エタノール、含水エタノールを用いることができる。
没食子酸は、植物由来のものであってもよいが、これに限られない。また、グルタミン酸、ヒスチジン、メチオニン、セリン、チロシン、バリン等のアミノ酸は、塩の形態を含む。塩としては、例えば、ナトリウム塩、塩酸塩等を挙げることができる。
[実施例1]
1.細胞培養
(1)37℃、5%CO2インキュベーター内で、75cm2フラスコを用いて、ヒト網膜色素上皮細胞(ARPE-19)を培養した。培地はDMEM培地とF-12HAM培地を1:1で混合し、FBSが10%となるように調製したものを用いた。
(2)トリプシン処理により浮遊させた細胞を、75cm2フラスコから96well plateの各wellに1.0×104cells/wellの細胞密度で播種した。
(3)37℃、5%CO2インキュベーター内で72時間前培養した。
(4)各wellより培地を除去後、所定濃度に調製した被験物質含有培地を200μLずつ添加し、CO2インキュベーター内で20時間培養した。
(1)20時間培養後、培養した細胞から培地を除去し、CellAmpTM Direct RNA Prep Kit for RT-PCR(Real Time)(Takara製)を用いて、RNAを回収し、N=3のサンプルを混合して1つのRNAサンプルとした。
(2)RNAサンプルをRnase-free waterを用いて3倍希釈した。
(3)検量線を作成するため、1つのサンプルを3倍、9倍希釈した。One Step SYBR(登録商標) PrimeScriptTM RT-PCR Kit II(Perfect Real Time)(Takara製)を用いてPCRを実施した。プライマーはTGFβ1(QIAGEN製)とRPLP0(QIAGEN製)を使用した。
(4)1倍、3倍、9倍希釈したサンプルから作成した検量線を用いて、各サンプルにおける遺伝子発現量を算出した。解析は相対定量により行い、RPLP0(ハウスキーピング遺伝子)を内部標準としてmRNA量を補正した。
葛については、花の熱水抽出物(乾燥粉末)を用いた。
ビルベリーについては、市販品の果実の乾燥粉末を用いた。
ブルーベリーについては、市販品の果実の乾燥粉末を用いた。
下記成分からなるタブレット(200mg)を製造した。
ビルベリー抽出物 60mg
ブルーベリー抽出物 50mg
甘藷若葉末 50mg
ステアリン酸カルシウム 5mg
アルギニン 1.5mg
グルタミン酸 1.5mg
トリプトファン 1mg
シェラック 5mg
ビタミンB6 0.5mg
ビタミンB12 0.5mg
塩化鉄 0.25mg
グルコン酸亜鉛 0.5mg
セルロース 残部
下記混合物300mlをソフトカプセルに封入し、カプセル剤を製造した。
紅花油 50%
ビルベリーエキス 20%
ブルーベリーエキス 15%
ミツロウ 10%
葛の花エキス 2%
水溶性β-カロテン末 0.2%
ビタミンB12 0.01%
ビオチン 0.01%
没食子酸 0.01%
ビタミンE 0.01%
塩化鉄 0.01%
ゼラチン 残部
下記成分を混合して常法により顆粒剤(3000mg)を製造した。
没食子酸 50mg
アスパルテーム 500mg
グルタミン酸 50mg
チロシン 50mg
バリン 30mg
ビタミンC 1000mg
ビタミンD3 10mg
塩化カルシウム 2mg
塩化モリブデン 1mg
デンプン 340mg
麦芽糖 残部
下記成分からなる液剤(30mL)を製造した。
エリスリトール 250mg
ビルベリー抽出物 200mg
カシス抽出物 200mg
ビタミンC 1200mg
クエン酸 150mg
バリン 20mg
ビタミンK 5mg
塩化鉄 0.5mg
水 残部
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- アスタキサンチンを有効成分とする網膜保護用組成物であって、さらにビタミンKを含有することを特徴とする網膜保護用組成物。
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