JP7359997B2 - ヒアルロン酸産生促進剤及びこれを含有するしわ改善剤又は皮膚外用剤 - Google Patents
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Description
1.アセチルスペルミン、アセチルスペルミジン、ジアセチルスペルミジンから選択される1以上を有効成分として含有するヒアルロン酸産生促進剤。
2.アセチルスペルミン、ジアセチルスペルミジンから選択される1以上を有効成分として含有する表皮におけるヒアルロン酸産生促進剤。
3.アセチルスペルミン、アセチルスペルミジン、ジアセチルスペルミジンから選択される1以上を有効成分として含有する真皮におけるヒアルロン酸産生促進剤。
4.1.~3.のいずれかに記載のヒアルロン酸産生促進剤を含有するしわ改善剤。
5.1.~3.のいずれかに記載のヒアルロン酸産生促進剤を含有する皮膚外用剤。
正常ヒト新生児表皮角化細胞を用いてヒアルロン酸産生促進作用を確認した。
プトレシン二塩酸塩;(ナカライテスク社、商品コード29428-01)
スペルミジン三塩酸塩;(ナカライテスク社、商品コード32110-41)
スペルミン四塩酸塩;(ナカライテスク社、商品コード32113-11)
N8-アセチルスペルミジン二塩酸塩;(Sigma-Aldrich社、商品コードA3658)
N1,N8-ジアセチルスペルミジン;(Toronto Research Chemicals Inc、商品コードD367000)
N1-アセチルスペルミン三塩酸塩;(Sigma-Aldrich社、商品コード01467)
正常ヒト新生児表皮角化細胞(NHEK)を表皮角化細胞増殖培地(KGM)を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を1.0×105cells/mLの濃度になるようにKGM培地で希釈した後、96wellプレートに1well当たり100μLずつ播種し、24時間培養した。
培養終了後、KGM培地に所定濃度となるように溶解した被験試料を各wellに100μLずつ添加し、3日間培養した。培養後、各wellの培地中のヒアルロン酸量を、ヒアルロン酸結合タンパクを用いたサンドイッチ法により測定した。試験は、各試料n=5で行った。
ヒト正常線維芽細胞(NB1RGB)を10%FBS(牛胎児血清)含有ダルベッコMEM培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を1.6×105cells/mLの濃度に上記培地で希釈した後、96wellマイクロプレートに1well当たり100μLずつ播種し、一晩培養した。
培養終了後、0.25%FBS含有ダルベッコMEM培地に所定濃度となるように溶解した被験試料を各wellに100μL添加し、3日間培養した。培養後、各wellの培地中のヒアルロン酸量をヒアルロン酸結合タンパクを用いたサンドイッチ法により測定した。試験は、各試料n=5で行った。
ヒアルロン酸産生促進率(%)=A/B×100
A:被験試料添加時のヒアルロン酸量
B:被験試料無添加時のヒアルロン酸量
アセチルスペルミン、アセチルスペルミジン、ジアセチルスペルミジンは、プトレシン、スペルミジン、スペルミンと同等もしくは同等以上のヒアルロン酸産生促進活性を有していた。アセチルスペルミン、ジアセチルスペルミジンは、表皮におけるヒアルロン酸産生促進活性、アセチルスペルミン、アセチルスペルミジン、ジアセチルスペルミジンは、真皮におけるヒアルロン酸産生促進活性に優れていた。
(化粧水)
1.精製水 残余
2.グリセリン 5.0%
3.ジグリセリン 7.0%
4.1,3-ブチレングリコール 5.0%
5.ベタイン 1.0%
6.アセチルスペルミン 0.001%
7.フェノキシエタノール 0.3%
1~7を撹拌混合し、化粧水を得た。
1.精製水 残余
2.ジプロピレングリコール 6.0%
3.PEG-75 0.5%
4.ラフィノース 2.0%
5.フェノキシエタノール 0.2%
6.ペンチレングリコール 1.0%
7.キサンタンガム 0.1%
8.スクワラン 3.0%
9.SIMULGEL NS 2.5%
10.アセチルスペルミジン 0.0001%
11. エタノール 2.0%
6に7を分散させる(分散物)。8と9を混合する(混合物)。分散物を加熱溶解した1から5に徐々に添加し、さらに混合物を添加したのちホモミクサーで撹拌する。冷却後、10、11を加えた後、再度ホモミクサーで撹拌させる。
※SIMULGEL NS(SEPPIC社製;(アクリル酸ヒドロキシエチル/アクリロイルジメチルタウリンNa)コポリマー、スクワラン、ポリソルベート60、水、イソステアリン酸ソルビタンの混合物)
1.オリーブ油 5.0%
2.ホホバ油 1.0%
3.ジメチコン 0.5%
4.ステアリン酸ポリグリセリル-10 1.0%
5.グリセリン 7.0%
6.ジプロピレングリコール 6.0%
7.フェノキシエタノール 0.5%
8.1,3-ブチレングリコール 3.0%
9.キサンタンガム 1.0%
10.カルボキシビニルポリマー 0.1%
11.水酸化カリウム 0.02%
12.ジアセチルスペルミジン 0.002%
13.精製水 残余
8に9を分散させる(分散物)。10を13に撹拌溶解させたものに、分散物を添加、さらに5から7を添加し加熱溶解させる(溶解物)。1から4を加熱溶解させ、溶解物を徐々に添加し、ホモミクサーで撹拌する。次いで、13の一部に11を溶解させたものを添加、冷却後、13の一部に溶解させた12を加えた後、再度ホモミクサーで撹拌させる。
Claims (4)
- アセチルスペルミン、アセチルスペルミジン、ジアセチルスペルミジンから選択される
1以上を有効成分として含有するヒアルロン酸産生促進剤。 - アセチルスペルミン、ジアセチルスペルミジンから選択される1以上を有効成分として
含有する表皮におけるヒアルロン酸産生促進剤。 - アセチルスペルミン、アセチルスペルミジン、ジアセチルスペルミジンから選択される
1以上を有効成分として含有する真皮におけるヒアルロン酸産生促進剤。 - 請求項1~3のいずれかに記載のヒアルロン酸産生促進剤を含有するしわ改善剤。
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