JP7329474B2 - アンチエイジング化粧品組成物 - Google Patents
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Description
本発明を、例を参照して、さらに以下で詳細に説明する。しかしながら、これらの例及び比較例は、本発明を具体的に説明するためにのみ使用され、いかなる様式でも本発明の添付の特許請求の範囲を限定するものと理解されるべきではない。
この例では、老化関連遺伝子の発現に対する、カバノキ樹液原液及び様々な濃縮度を有する濃縮カバノキ樹液の効果を試験し、比較した。
Daxinganling Chaoyue Wild Berry Development Co.,Ltd.から購入した新鮮なカバノキ樹液(シラカバ(Betula Alba)樹液)原液を、低温乾燥装置に導入し、-65℃に冷却し、0.1Paに真空引きし、1.05倍、1.1倍、1.2倍、1.5倍、2倍、4倍、8倍の程度までそれぞれ濃縮した。
実験機器:蛍光定量PCR(Roche)、クリーンベンチ(Su Jing)、CO2インキュベーター(Binder)、マイクロプレートリーダー(BIO-TEK)、マイクロオシレーター。
実験試薬及び材料:ヒト初代線維芽細胞、6ウェル培養プレート、線維芽細胞用培養培地、RNA抽出キット、逆転写キット、Trizol溶解緩衝液等。
(1)接種:細胞を6ウェル培養プレートに5E5細胞/ウェルの密度で接種し、5%CO2を含むインキュベーターで、37℃で一晩インキュベートした;
(2)投与:6ウェル培養プレートの細胞播種率が約60%に達したら、各群の試験物質をそこに添加し、試験物質の各群に6複製ウェルを提供した;
(3)試料回収:5%CO2を含むインキュベーターに、37℃で24時間接種した後、培養培地を廃棄し、各ウェルに1mLのTrizolを添加し、細胞を溶解した後、試料を回収した;
(4)PCR検出:RNAを抽出し、cDNAに逆転写し、蛍光定量PCRによって検出した;
(5)分析:2-ΔΔCT法を使用して結果を計算し、T検定法を統計分析に使用した。
この例では、アンチエイジング関連タンパク質の発現に対する、カバノキ樹液原液及び様々な濃縮度を有する濃縮カバノキ樹液の効果を試験し、比較した。
Daxinganling Chaoyue Wild Berry Development Co.,Ltd.から購入した新鮮なカバノキ樹液(シラカバ(Betula Alba)樹液)原液を、低温乾燥装置に導入し、-65℃に冷却し、0.1Paに真空引きし、1.05倍、1.1倍、1.2倍、1.5倍、2倍、4倍、8倍の程度までそれぞれ濃縮した。
実験機器:クリーンベンチ(Su Jing)、免疫洗浄マイクロプレートウォッシャー(BIO-RAD)、マイクロプレートリーダー(BIO-TEK)、CO2インキュベーター(Binder)。
実験試薬及び材料:ヒト初代線維芽細胞、12ウェル培養プレート、線維芽細胞用培養培地、様々な指標用のELISAキット等。
(1)接種:細胞を12ウェル培養プレートに2E5細胞/ウェルの密度で接種し、5%CO2を含むインキュベーターで、37℃でインキュベートし、培養培地を2日毎に交換した;
(2)投与:12ウェル培養プレートの細胞播種率が約60%に達したら、各群の試験物質をそこに添加し、試験物質の各群に6複製ウェルを提供した;
(3)試料回収:5%CO2を含むインキュベーターに、37℃で48時間接種した後、培養培地を廃棄し、各ウェルに1mLのTrizolを添加し、細胞を溶解した後、試料を回収した;
(4)検出:指標はELISAキットの決定方法に従って決定した。
(5)分析:T検定法を統計分析に使用した。
この例では、組換え3D全層皮膚モデルに対する、カバノキ樹液原液及び様々な濃縮度を有する濃縮カバノキ樹液の効果を試験し、比較した。
Daxinganling Chaoyue Wild Berry Development Co.,Ltd.から購入した新鮮なカバノキ樹液(シラカバ(Betula Alba)樹液)原液を、逆浸透循環装置に導入し、操作圧力を0.5~5barで制御し、温度を20~35℃にし、カバノキ樹液が1.1倍、1.2倍、1.5倍、2倍及び4倍の程度までそれぞれ濃縮されるまで循環させた。
実験機器:クリーンベンチ(Su Jing)、インキュベーター(Binder)、UVA及びUVB照射器、マイクロプレートリーダー(BIO-TEK)、凍結ミクロトーム(Leica)。
実験試薬及び材料:3D全層皮膚モデル(実験室で自作)、様々な指標用のELISAキット、MTT(3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド)キット等。
(1)3D全層皮膚モデルの構築:3D全層皮膚モデルを、ケラチノサイト及び線維芽細胞を使用して構築した;
(2)モデリング及び投与:モデルが工場を出るとき、すなわち0日目に、SSUV照射処理(UVA:30J/cm2;UVB:50mJ/cm2)を毎日行い、次いで、一定量の試料を対応するモデルの表面に施用した;モデル対照では、モデル培養培地のみを施用し、試験物質の各群に6複製ウェルを提供し、1日1回、合計4日間施用を行った;
(3)試料回収及び検出:モデリング及び投与後、培養培地を回収し、ELISAキットを使用してMMP-1(マトリックスメタロプロテイナーゼ1)を決定した;試験物質の各群から3つのモデルを取得し、MTTキットを使用して細胞増殖生存率を決定してMTT値を得て;残りの3つのモデルを組織固定及びIHC染色に供して、表皮と真皮との間の接合部のIV型コラーゲンの含有量を決定した;
(4)分析:T検定法を統計分析に使用した。
アンチエイジングフェイスクリーム組成物の配合を以下の表に示した:
1.油相:原材料4、6、7、8、9、11、12、13、15及び21を油相ポットに添加し、80℃に加熱し、溶解し、よく混合した;
2.原材料2、16及び18を室温でよく混合した;
3.原材料10、14、17、20を室温でよく混合した;
4.水相:原材料1、3及び5を80℃に加熱し、ステップ2からの混合物を添加し、溶解し、よく混合した;
5.乳化:水相と油相を乳化タンクに添加し、80℃に保持し、3000rpmで5分間均質化及び乳化し、乳化が完了したら、原材料19を添加した;
6.攪拌しながら40℃に冷却する際、ステップ3からの混合物を添加し、よく攪拌し、排出してアンチエイジングフェイスクリーム組成物を得た。
アンチエイジングアイクリーム組成物の配合を以下の表に示した:
1.油相:原材料3、5、6、7、9及び11を油相ポットに添加し、80℃に加熱し、溶解し、よく混合した;
2.原材料2及び16を室温でよく混合した;
3.原材料10、14及び17を室温でよく混合した;
4.水相:原材料1、4、8、13、18、19及び20を80℃に加熱し、ステップ2からの混合物を添加し、溶解し、よく混合した;
5.乳化:水相と油相を乳化タンクに添加し、80℃に保持し、3000rpmで5分間均質化及び乳化し、乳化が完了したら、原材料12及び15を添加した;
6.攪拌しながら40℃に冷却する際、ステップ3からの混合物を添加し、よく攪拌し、排出してアンチエイジングアイクリーム組成物を得た。
1)Primosを使用して対象の左右の目尻を撮影し、ソフトウェアを使用して、しわの量、しわの面積、しわの深さ等を含むしわのパラメータを計算した;及び
2)Corneometerを使用して、左右の目尻の皮膚水分量を試験した;
アンチエイジングエマルジョン組成物の配合は以下の通りとした:
1.油相:原材料4、5、6、7、12及び13を油相ポットに添加し、80℃に加熱し、溶解し、よく混合した;
2.原材料2、8及び11を室温でよく混合した;
3.原材料9、10及び16を室温でよく混合した;
4.水相:原材料1、3及び14を80℃に加熱し、ステップ2からの混合物を添加し、溶解し、よく混合した;
5.乳化:水相と油相を乳化タンクに添加し、80℃に保持し、3000rpmで5分間均質化及び乳化し、乳化が完了したら、原材料15を添加した;
6.攪拌しながら40℃に冷却する際、ステップ3からの混合物を添加し、よく攪拌し、排出してアンチエイジングエマルジョン組成物を得た。
アンチエイジングエッセンス組成物の配合を以下の表に示した:
1.原材料1、2、3、4、6、12及び13を乳化タンクに添加し、80℃に保持した;
2.原材料5、10及び11を室温でよく混合した;
3.原材料7、8及び9を室温でよく混合した;
4.原材料14を添加し、pHを調整した;
5.攪拌しながら40℃に冷却する際、原材料15及び16ならびにステップ3からの混合物を添加し、よく攪拌し、排出してアンチエイジングエッセンス組成物を得た。
1)Primosを使用して対象の左右の目尻を撮影し、ソフトウェアを使用して、しわの量、しわの面積、しわの深さ等を含むしわのパラメータを計算した;
2)Corneometerを使用して、左右の目尻の皮膚水分量を試験した;
3)Tewameterを使用して、左右の頬の経表皮水分蒸散量(TEWL値)を試験した。
Claims (3)
- アンチエイジング化粧品組成物における濃縮カバノキ樹液の使用であって、前記濃縮カバノキ樹液が1.1~4倍の濃縮度を有し、
前記アンチエイジング化粧品組成物はさらに添加される水を含まない、使用。 - 濃縮カバノキ樹液を含むアンチエイジング化粧品組成物であって、前記濃縮カバノキ樹液が1.1~4倍の濃縮度を有し、
前記アンチエイジング化粧品組成物はさらに添加される水を含まない、アンチエイジング化粧品組成物。 - アンチエイジング化粧品組成物の総重量基準で18~98重量%の濃縮カバノキ樹液を含む、請求項2に記載のアンチエイジング化粧品組成物。
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C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
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A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
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C211 | Notice of termination of reconsideration by examiners before appeal proceedings |
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C22 | Notice of designation (change) of administrative judge |
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