JP7324300B2 - 前立腺がんのバイオマーカとしてのbmmf1 repタンパク質の使用 - Google Patents
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Description
このような抗Rep抗体群の例を表1に示す:
すべての組織サンプルは、組織バンクの規定及びハイデルベルク大学倫理委員会の承認に基づき、国立腫瘍疾患センター(NCT、ハイデルベルク、ドイツ、ハイデルベルク大学病院病理学研究所)の組織バンクから提供された。
パラフィン包埋組織切片(約4μm厚)を,EDTAエピトープ回収(Sigma E1161)後、Zytomed Chem-Plus HRP Polymer-Kit(Zytomed、POLHRP-100)及びDAB Substrate Kit High Contrast(Zytomed、DAB500plus)を用いて,所定の抗体インキュベーション(表2参照)及びヘマトキシリン対比染色で染色した。スライドはデジタルスライドスキャナー(浜松)でスキャンし、NDP.view2Plusソフトウェア(浜松)を用いて解析した。
組織マイクロアレイTMA105は、国立腫瘍疾患センター(NCT)ハイデルベルクにおいて作製され、好意により提供された。このデータセットでは、120人の患者に対してそれぞれ4つの腫瘍組織が、14人の患者に対してそれぞれ2つの腫瘍周囲組織のスポットが利用可能である。
組織マイクロアレイ(TMA)上のBMMF1 Rep染色の解析では、抗体染色は、染色された細胞の割合(陽性率)と、組織スポットの間質/間隙部分におけるシグナルの強度(I)の2つのパラメータに基づいて特徴付けられた。上皮部分や腫瘍細胞は、一般的にBMMFの陽性化の対象ではないため、解析には含めなかった。BMMF1 Rep染色の陽性度(POS)は、3段階で評価した。0は全く陽性の組織部分がないことを示し、1は1~10%の陽性、2は11~30%の陽性、3は30%以上の陽性細胞が組織スポットの複数の領域に分布していることを示した。強度(I)は以下のように評価した。0=検出されない、1=中程度、2=強い染色。統計解析のため、免疫反応性スコア(IRS)を以下のように算出した。IRS=IxPOS;最小値=0、最大値=6(表3)。
IRS=免疫反応性スコア
これらのスコアリング基準を用いて、BMMF1 Rep染色に基づく腫瘍組織(患者120名)のサンプルは
12%の陰性(IRS 0)
88%が陽性(IRS1以上)[うち75%が有意に陽性=IRS2以上]
29%が陰性(IRS 0)
71%が陽性(IRS1以上)[うち21%が有意に陽性=IRS2以上]
これらの結果は、図5A及び図5Bに棒グラフで示されている。
Claims (6)
- 前立腺がんのバイオマーカとしての、牛肉及び牛乳因子グループ1(BMMF1)Repタンパク質の使用。
- 前記Repタンパク質が、MSBI1ゲノムにコードされたRepタンパク質(MSBI1 Rep)、MSBI2ゲノムにコードされたRepタンパク質(MSBI2 Rep)、CMI1ゲノムにコードされたRepタンパク質(CMI1 Rep)、CMI2ゲノムにコードされたRepタンパク質(CMI2 Rep)又はCMI3ゲノムにコードされたRepタンパク質(CMI3 Rep)である、請求項1に記載の使用。
- 配列番号2又は配列番号3に含まれるエピトープに結合する抗Rep抗体によって、対象からのサンプル中のRepタンパク質を検出するステップを含む、前記対象における前立腺がんの診断又は素因を提供するための方法。
- 前記Repタンパク質に特異的な抗体が、配列番号1のアミノ酸1~136、137~229及び230~324からなる群より選択されるアミノ酸配列内にあるエピトープに結合する、請求項3に記載の方法。
- 対象からのサンプルが、癌性前立腺組織、癌性組織を取り囲む周囲組織及び(良性)過形成からなる群から選択される、請求項3又は4に記載の方法。
- さらに、CD68陽性細胞が抗CD68抗体によってサンプル中で検出される、請求項3~5のいずれかに記載の方法。
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