JP7312171B2 - ピラゾロピリジノン化合物 - Google Patents
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Description
[式中、
A1、A2及びA3は各々独立して、CH、CRa又はNを表し、但しA1、A2及びA3のうち最大2つがCRaを表し得;
C1は、水素又はC1~4アルキルであり;
C2は、水素、C1~4アルキル、ヒドロキシル又はC1~4アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC3~6シクロアルキルを形成し;
Yは、直接的結合、-O-、C(=O)、NRy、S(=O)2又はC1~4アルキルであり;
Ryは水素又はC1~4アルキルであり;
各Raは独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ、C1~6アルコキシ、カルボキシル、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノ、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり;
Rbは、水素、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、C1~6アルコキシ、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C3~6シクロアルキルで、又はフェニルで、又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC1~6アルキルであり;
Dは、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは任意選択により1~5個のRc置換基で置換されており;
各Rcは独立に、オキソ、ハロ、C1~6アルキル、C1~6アルキルオキシ、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロC1~6アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C1~6アルキル-、-C(=O)-O-C1~6アルキルで置換されるC1~6アルキル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC1~6アルキル、C1~6アルキル-C(=O)-、-SO2-C1~6アルキル、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、シアノ、ハロ、C1~6アルコキシ、ハロC1~6アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、オキソ、-SO2-NH2、-SO2-NH(C1~4アルキル)、-SO2-N(C1~4アルキル)2、-NH-C(=O)-C2~6アルケニル、-C(=O)-C1~6アルキル、-C(=O)-C2~6アルケニル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、C3~6シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである]
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
a)1、2、又は3個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したベンゼン環;
b)0、1、2、又は3個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したピリジン環;
c)0、1、又は2個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したピリミジン環;
d)0、1、2、又は3個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したピロール環;
e)0、1、又は2個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したピラゾール環;
f)0、1、又は2個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したイミダゾール環;
g)0、1、又は2個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したオキサゾール環;
h)0、1、又は2個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したイソオキサゾール環;
i)0、1、又は2個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したチアゾール環;
j)0、1、又は2個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したイソチアゾール環;
k)0、1、2、又は3個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したチオフェン環;
l)0、1、2、又は3個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したフラン環;
m)1、2、又は3個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したシクロヘキシル環;及び
n)1、2、又は3個の環ヘテロ原子を含有する5又は6員環に縮合したシクロペンチル環から選択される基であり得る。
[式中、
A1、A2及びA3は各々独立して、CH、CRa又はNを表し、但しA1、A2及びA3のうち最大2つがCRaを表し得;
C1は、水素又はC1~4アルキルであり;
C2は、水素、C1~4アルキル、ヒドロキシル又はC1~4アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC3~6シクロアルキルを形成し;
Yは、直接的結合、-O-、C(=O)、NRy、S(=O)2又はC1~4アルキルであり;
Ryは水素又はC1~4アルキルであり;
各Raは独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ、C1~6アルコキシ、カルボキシル、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノ、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり;
Rbは、水素、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、C1~6アルコキシ、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C3~6シクロアルキルで、又はフェニルで、又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC1~6アルキルであり;
Dは、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは任意選択により1~5個のRc置換基で置換されており;
各Rcは独立に、オキソ、ハロ、C1~6アルキル、C1~6アルキルオキシ、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロC1~6アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C1~6アルキル-、-C(=O)-O-C1~6アルキルで置換されるC1~6アルキル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC1~6アルキル、C1~6アルキル-C(=O)-、-SO2-C1~6アルキル、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、シアノ、ハロ、C1~6アルコキシ、ハロC1~6アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、オキソ、-SO2-NH2、-SO2-NH(C1~4アルキル)、-SO2-N(C1~4アルキル)2、-NH-C(=O)-C2~6アルケニル、-C(=O)-C1~6アルキル、-C(=O)-C2~6アルケニル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、C3~6シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである]
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、
A1、A2及びA3は各々独立して、CH、CRa又はNを表し、但しA1、A2及びA3のうち最大2つがCRaを表し得;
C1は、水素又はC1~4アルキルであり;
C2は、水素、C1~4アルキル、ヒドロキシル又はC1~4アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC3~6シクロアルキルを形成し;
Yは、直接的結合、-O-、C(=O)、NRy、S(=O)2又はC1~4アルキルであり;
Ryは水素又はC1~4アルキルであり;
各Raは独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ、C1~6アルコキシ、カルボキシル、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノ、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり;
Rbは、水素、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、C1~6アルコキシ、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C3~6シクロアルキルで、又はフェニルで、又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC1~6アルキルであり;
D1は、ピペラジン-1-イルであり、上記ピペラジン-1-イルは、任意選択により1~5個のRc置換基で置換されており;
各Rcは独立に、オキソ、ハロ、C1~6アルキル、C1~6アルキルオキシ、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロC1~6アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C1~6アルキル-、-C(=O)-O-C1~6アルキルで置換されるC1~6アルキル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC1~6アルキル、C1~6アルキル-C(=O)-、-SO2-C1~6アルキル、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、シアノ、ハロ、C1~6アルコキシ、ハロC1~6アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、オキソ、-SO2-NH2、-SO2-NH(C1~4アルキル)、-SO2-N(C1~4アルキル)2、-NH-C(=O)-C2~6アルケニル、-C(=O)-C1~6アルキル、-C(=O)-C2~6アルケニル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、C3~6シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである]
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、
置換基は、式(I-A)の化合物について上記で定義したとおりである];
におけるような、S立体中心を有する本明細書中上記で定義したとおりである式(I-A)の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、
A1、A2及びA3は各々独立して、CH、CRa又はNを表し、但しA1、A2及びA3のうち最大2つがCRaを表し得;
C1は、水素又はC1~4アルキルであり;
C2は、水素、C1~4アルキル、ヒドロキシル又はC1~4アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC3~6シクロアルキルを形成し;
Yは、直接的結合、-O-、C(=O)、NRy、S(=O)2又はC1~4アルキルであり;
Ryは水素又はC1~4アルキルであり;
各Raは独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ、C1~6アルコキシ、カルボキシル、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノ、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり;
Rbは、水素、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、C1~6アルコキシ、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C3~6シクロアルキルで、又はフェニルで、又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC1~6アルキルであり;
D2は、モルホリン-1-イルであり、上記モルホリン-1-イルは、任意選択により1~5個のRc置換基で置換されており;
各Rcは独立に、オキソ、ハロ、C1~6アルキル、C1~6アルキルオキシ、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロC1~6アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C1~6アルキル-、-C(=O)-O-C1~6アルキルで置換されるC1~6アルキル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC1~6アルキル、C1~6アルキル-C(=O)-、-SO2-C1~6アルキル、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、シアノ、ハロ、C1~6アルコキシ、ハロC1~6アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、オキソ、-SO2-NH2、-SO2-NH(C1~4アルキル)、-SO2-N(C1~4アルキル)2、-NH-C(=O)-C2~6アルケニル、-C(=O)-C1~6アルキル、-C(=O)-C2~6アルケニル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、C3~6シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである]
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、置換基は式(I-B)の化合物について上記で定義したとおりである];
におけるようなS立体中心を有する本明細書中上記で定義したとおりである式(I-B)の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、
A1、A2及びA3は各々独立して、CH、CRa又はNを表し、但しA1、A2及びA3のうち最大2つがCRaを表し得;
C1は、水素又はC1~4アルキルであり;
C2は、水素、C1~4アルキル、ヒドロキシル又はC1~4アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC3~6シクロアルキルを形成し;
Yは、直接的結合、-O-、C(=O)、NRy、S(=O)2又はC1~4アルキルであり;
Ryは水素又はC1~4アルキルであり;
各Raは独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ、C1~6アルコキシ、カルボキシル、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノ、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり;
Rbは、水素、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、C1~6アルコキシ、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C3~6シクロアルキルで、又はフェニルで、又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC1~6アルキルであり;
D3は、4、5、6又は7員の単環式ヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは、任意選択により1~5個のRc置換基で置換されており;
各Rcは独立に、オキソ、ハロ、C1~6アルキル、C1~6アルキルオキシ、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロC1~6アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C1~6アルキル-、-C(=O)-O-C1~6アルキルで置換されるC1~6アルキル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC1~6アルキル、C1~6アルキル-C(=O)-、-SO2-C1~6アルキル、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、シアノ、ハロ、C1~6アルコキシ、ハロC1~6アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、オキソ、-SO2-NH2、-SO2-NH(C1~4アルキル)、-SO2-N(C1~4アルキル)2、-NH-C(=O)-C2~6アルケニル、-C(=O)-C1~6アルキル、-C(=O)-C2~6アルケニル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、C3~6シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである];
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、
置換基は、式(I-C)の化合物について上記で定義したとおりである]
のような、S立体中心を有する本明細書上記で定義される式(I-C)の化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、
A1、A2及びA3は各々独立して、CH、CRa又はNを表し、但しA1、A2及びA3のうち最大2つがCRaを表し得;
C1は、水素又はC1~4アルキルであり;
C2は、水素、C1~4アルキル、ヒドロキシル又はC1~4アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC3~6シクロアルキルを形成し;
各Raは独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ、C1~6アルコキシ、カルボキシル、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノ、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり;
Rbは、水素、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、C1~6アルコキシ、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C3~6シクロアルキルで、又はフェニルで、又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC1~6アルキルであり;
Dは、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは任意選択により1~5個のRc置換基で置換されており;
各Rcは独立に、オキソ、ハロ、C1~6アルキル、C1~6アルキルオキシ、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロC1~6アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C1~6アルキル-、-C(=O)-O-C1~6アルキルで置換されるC1~6アルキル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC1~6アルキル、C1~6アルキル-C(=O)-、-SO2-C1~6アルキル、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、上記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、シアノ、ハロ、C1~6アルコキシ、ハロC1~6アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、オキソ、-SO2-NH2、-SO2-NH(C1~4アルキル)、-SO2-N(C1~4アルキル)2、-NH-C(=O)-C2~6アルケニル、-C(=O)-C1~6アルキル、-C(=O)-C2~6アルケニル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、C3~6シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである]
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物を提供する。
[式中、
置換基は、式(I-D)の化合物について上記で定義したとおりである]
のような、S立体中心を有する本明細書上記で定義される式(I-D)の化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくはその溶媒和物を提供する。
は、-CH2(C1~4アルキル)、特に-CH2CH3又は-CH2CH2CH3を表す。
は、-CH(C1~4アルキル)2、特に-CH(CH3)2を表す。
A1、A2及びA3の各々がCHを表すか;又はA1及びA3がCHを表し、A2がNを表すか;又はA1、A2及びA3のうち少なくとも1つがCRaを表すか;又はA1がCRaを表し、A2及びA3がCHを表すか;又はA2がCRaを表し、A1及びA3がCHを表し;
C1は水素又はC1~4アルキル、特に水素又はメチルであり;
C2は水素又はC1~4アルキル又はC1~4アルコキシ、特に水素、メチル又はメトキシであり;
Yは、直接的結合、-O-又はC(=O)であり;
各Raは独立にC1~6アルキル、例えばメチル、ハロC1~6アルキル、例えばトリフルオロメチル、ハロ、例えばフルオロ又はC1~6アルコキシ、例えばメトキシであり;
Rbは、C1~6アルキル、特にC1~4アルキル、例えばメチル又はエチルであり;
Dは、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する4、5若しくは6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは、1又は2個のRc置換基で任意選択により置換され;特にDは、ピペラジニル、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル又はアゼチジニルであり、上記環系は1又は2個のRc置換基で任意選択により置換され;
各Rcは独立に、オキソ;C1~6アルキル、例えばメチル;ハロ、例えばフルオロ;C1~6アルコキシ、例えばメトキシ;又はハロC1~6アルキル、例えばトリフルオロメチル又はトリフルオロエチルであり;
Bは、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の芳香族単環式ヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは、1個のR置換基で任意選択により置換され;特にBは、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、チアゾリル、オキサゾリルであり;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、例えばメチル又はイソプロピル、C1~6アルコキシ、例えばメトキシ又はC3~6シクロアルキル、例えばシクロプロピルである。
A1、A2及びA3の各々がCHを表すか;又はA1及びA3がCHを表し、A2がNを表すか;又はA1、A2及びA3のうち少なくとも1つがCRaを表すか;又はA1がCRaを表し、A2及びA3がCHを表すか;又はA2がCRaを表し、A1及びA3がCHを表し;
C1は水素又はC1~4アルキル、特に水素又はメチルであり;
C2は水素又はC1~4アルキル又はC1~4アルコキシ、例えば水素、メチル又はメトキシ;特に水素又はC1~4アルキル、例えば水素又はメチルであり;
Yは、直接的結合、-O-又はC(=O)、特に直接的結合又はC(=O)、とりわけ直接的結合であり;
各Raは独立に、C1~6アルキル、例えばメチル、ハロC1~6アルキル、例えばトリフルオロメチル、ハロ、例えばフルオロ又はC1~6アルコキシ、例えばメトキシ;特に水素、ハロ又はC1~6アルキルであり;
Rbは、C1~6アルキル、特にC1~4アルキル、例えばメチル又はエチルであり;
D又はD3は、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する4、5若しくは6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは、1又は2個のRc置換基で任意選択により置換され;特にDは、ピペラジニル、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル又はアゼチジニルであり、上記環系は、1又は2個のRc置換基で任意選択により置換され;特にDは、任意選択により置換されるピペラジニル、モルホリニル又はピロリジニルであり;
各Rcは独立に、オキソ、C1~6アルキル、例えばメチル、ハロ、例えばフルオロ、C1~6アルコキシ、例えばメトキシ又はハロC1~6アルキル、例えばトリフルオロメチル又はトリフルオロエチル;特にC1~6アルキル、例えばメチルであり;
Bは、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の芳香族単環式ヘテロシクリルであり、上記ヘテロシクリルは、1個のR置換基で任意選択により置換され;特にBは、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、チアゾリル、オキサゾリルであり;特にBは未置換ピリミジニルであり;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、例えばメチル又はイソプロピル、C1~6アルコキシ、例えばメトキシ又はC3~6シクロアルキル、例えばシクロプロピルである。
本項においては、本願の他の全項と同様に文脈に別段の記載がない限り、式(I)への言及は、本明細書において定義されている全ての他の下位群及びその例(例えば、(I-a)、(I-A)、(I-A-a)、(I-B)、(I-B-a)、(I-C)、(I-C-a)、(I-D)、又は(I-D-a))も含む。
スキーム1において、次の反応条件が適用される:
1:適切な保護試薬H-P、例えば4-メトキシ-ベンズアルデヒド、及び適切な還元剤、例えばNaBH4など、適切な酸、例えばトリフルオロ酢酸など、及び適切な溶媒、例えば酢酸エチルなどの存在下、適切な温度、例えば室温;
2:a)メチルマロン酸=クロリド、適切な還元剤、例えば水素化ナトリウムなど、及び適切な溶媒、例えばN,N-ジメチル-ホルムアミドなどの存在下、適切な温度、例えば室温;及び
b)ナトリウムメトキシドの存在下、適切な温度、例えば110℃など;
3:適切な脱離基導入剤、例えば塩化オキサリル又は塩化ホスホリルなどの存在下、適切な溶媒、例えばN,N-ジメチル-ホルムアミド及びジクロロメタンなどの存在下、適切な温度、例えば室温又は15℃など;
4:適切な還元剤、例えば水素化ジイソブチルアルミニウムなど、及び適切な溶媒、例えばテトラヒドロフラン又はジクロロメタンなどの存在下、適切な温度、例えば-78℃など;
5:フェニルメタンアミン、適切な塩基、例えばジイソプロピル-エチルアミンなど、及び適切な溶媒、例えばアセトニトリルなどの存在下、適切な温度、例えば70℃など;
6:適切な還元剤、例えばH2など、及び適切な触媒、例えばパラジウム・チャコールなどの存在下、適切な溶媒、例えばアルコール、例えばメタノール中など、適切な温度、例えば50℃など;
7:適切な酸化体、例えばFeCl3など、及び適切な溶媒、例えば1,4-ジオキサンなどの存在下、適切な温度、例えば20℃又は25℃など;
8:適切な脱保護剤、例えばトリフルオロメタンスルホン酸など、及び適切な溶媒、例えばトリフルオロ酢酸などの存在下、適切な温度、例えば20℃、60℃、80℃又は85℃など;
9:適切な塩基、例えばジイソプロピルエチルアミン、重炭酸カリウム又は重炭酸ナトリウムなど、適切な相間移動触媒、例えばテトラブチルアンモニウムヨージド又は18-クラウン-6など、適切な溶媒、例えばジクロロメタン、クロロホルム、N,N-ジメチルアセトアミド又はアルコール、例えばエタノールなどの存在下、適切な温度、例えば35℃、40℃、60℃、85℃又は110℃など。
YがNRyを表し、上記中間体が式b(IX-a)により表される式(IX)の中間体も、次の反応スキーム2に従い調製され得る。スキーム2において、W3は、適切な脱離基、例えばハロ、例えばブロモなどを表す。スキーム2における全ての他の可変要素は本発明に従い定められる。
スキーム2において、次の反応条件が適用される:
1:適切な触媒、例えばトリス(ジベンジリデンアセトン)-ジパラジウム(0)など、適切なリガンド、例えば(2-ビフェニル)ジ-tert-ブチルホスフィンなど、適切な塩基、例えばナトリウムtert-ブトキシドなどの存在下、適切な溶媒、例えばテトラヒドロフラン中など、適切な温度、例えば60℃など;
2:適切な還元剤、例えばH2など、適切な触媒、例えばラネーニッケルなどの存在下、適切な溶媒、例えばジオキサン中など、適切な温度、例えば室温など;
スキーム4の反応は、例えばパラジウム触媒(例えばPd2(dba)3)などの好適な触媒、例えばdavephos(2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’-(N,N-ジメチルアミノ)ビフェニル)などの好適なリガンド、例えばLiHMDS(リチウムビス(トリメチルシリル)アミド)などの好適な塩基、及び例えばテトラヒドロフランなどの好適な溶媒の存在下で実施される。
Yが直接結合を表す式(I)の化合物であって、式(I-D)で表される上記化合物はまた、以下の反応スキーム5に従って調製することができる。スキーム5において、W4は、好適な脱離基、例えば、ハロ(例えば、ブロモ)などを表す。スキーム5の他の可変要素は全て、本発明に従って定義される。
スキーム5の反応は、例えばパラジウム触媒(例えばPd2(dba)3)などの好適な触媒、例えばPCy3(トリシクロヘキシルホスフィン)などの好適なリガンド、例えばK3PO4(リン酸三カリウム)などの好適な塩基、並びに例えばジオキサン及び水などの好適な溶媒の存在下で実施される。
式(XVI)の中間体は、次の反応スキーム6に従い調製され得る。スキーム6において、W1は、適切な脱離基、例えばハロ、例えばクロロなどを表し、W4は、適切な脱離基、例えばハロ、例えばブロモなどを表す。スキーム6中の全ての他の可変要素は本発明に従い定められる。
スキーム6において、以下の反応条件:
1:例えばアルコール(例えばエタノール)などの好適な溶媒の存在下、例えば70℃などの好適な温度で;
2:例えばNaHCO3などの好適な塩基、例えばジメチルホルムアミドなどの好適な溶媒の存在下、例えば80℃などの好適な温度で
が適用される。
(i)式(XI)
[式中、W1は、適切な脱離基、例えばハロ、例えばクロロなどを表す]
の中間体を式(XII)
の中間体と、適切な塩基、例えばN,N-ジイソプロピルエチルアミン、重炭酸カリウム又は重炭酸ナトリウムなど、適切な相間移動触媒、例えばテトラブチルアンモニウムヨージド又は18-クラウン-6など、及び適切な溶媒、例えばジクロロメタン、クロロホルム、N,N-ジメチルアセトアミド又はアルコール、例えばエタノールなどの存在下で反応させるか;又は
(ii)式(XVI)
[式中、W4は、適切な脱離基、例えばハロ、例えばブロモなどを表す]
の中間体を式(Ry)HN-Dの中間体と、
適切な触媒、例えばパラジウム触媒、例えばPd2(dba)3など、適切なリガンド、例えばdavephos(2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2’-(N,N-ジメチルアミノ)ビフェニル)など、適切な塩基、例えばLiHMDS(リチウムビス(トリメチルシリル)アミド)など、及び適切な溶媒、例えばテトラヒドロフランなどの存在下で反応させるか;又は
(iii)式(XVI)
[式中、W4は、適切な脱離基、例えばハロ、例えばブロモなどを表す]
の中間体を式
の中間体と、適切な触媒、例えばパラジウム触媒、例えばPd2(dba)3など、適切なリガンド、例えばPCy3(トリシクロヘキシルホスフィン)など、適切な塩基、例えばK3PO4(リン酸三カリウム)など、及び適切な溶媒、例えばジオキサン及び水などの存在下で反応させ;[式中、可変要素は、本明細書中に定義されるとおりである];任意選択により、その後式(I)のある化合物から式(I)の別の化合物に変換させる。
本項では、本願の他の全項と同様に、文脈が他の意味を示す場合を除き、式(I)への言及は、本明細書に定義される他のその下位群、選択物、実施形態、及び実施例の全てへの言及を含む。
中の*で示されるキラル中心が、S配置を有する化合物は、対応するR配置よりも高い生物活性を示すことが見出された。
プロテインチロシンキナーゼ(PTK)
本明細書に記載される本発明の化合物は、特定のチロシンキナーゼの活性を阻害又は調節し、そのため、化合物は、これらのチロシンキナーゼ、特にFGFRにより媒介される病状又は病態の治療又は予防、特に治療に有用であろう。
プロテインチロシンキナーゼ(PTK)受容体の線維芽細胞増殖因子(FGF)ファミリーは、有糸***誘発、創傷治癒、細胞分化及び血管新生、並びに発生を含む多種多様な生理機能を制御する。正常と悪性の両方の細胞成長並びに増殖は、自己分泌並びに傍分泌因子として作用する細胞外シグナル伝達分子であるFGFの局所濃度の変化により影響を受ける。自己分泌FGFシグナル伝達は、ステロイドホルモン依存性癌のホルモン非依存性状態への進行において特に重要になり得る。FGF及びそれらの受容体は、いくつかの組織及び細胞株で増加したレベルで発現され、過剰発現は悪性表現型の一因であると考えられている。さらに、いくつかの発癌遺伝子は、成長因子受容体をコードする遺伝子のホモログであり、ヒト膵臓癌においてFGF依存性シグナル伝達の異常な活性化の可能性がある(Knights et al.,Pharmacology and Therapeutics 2010 125:1(105-117);Korc M.et al Current Cancer Drug Targets 2009 9:5(639-651))。
本発明の化合物及びその下位群は、線維芽細胞成長因子受容体(FGFR)活性を阻害又は調節し、本明細書に記載の病状又は病態の予防又は治療、特に治療に有用である。さらに、本発明の化合物及びその下位群は、キナーゼにより媒介される疾病又は病態の予防又は治療、特に治療に有用であろう。癌などの病状又は病態の予防(preventing)又は予防(prophylaxis)又は治療への言及は、その範囲内に、癌の発生率を緩和又は減少させることを含む。
-FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療の方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
-本明細書に記載される病状又は病態の予防又は治療の方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
-癌の予防又は治療の方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
-癌の予防又は治療のための方法であって、それを必要とする対象に、本明細書中に定義される式(I)の化合物を投与することを含み、特に癌が、ゲートキーパー変異があるFGFR1、FGFR2又はFGFR3、とりわけFGFR3 V555L、FGFR3 V555M、FGFR1 V561M又はFGFR2 V564I、特にFGFR3 V555L又はFGFR3 V555Mを有する、方法。一実施形態では、癌は、ゲートキーパー変異があるFGFR1、FGFR2又はFGFR3に加えて、1つ以上の他のFGFR異常、例えば1つ以上のFGFR突然変異又は1つ以上のFGFR転座、例えば本明細書中に定義されるものなどを持つ。
-FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の発生率を緩和又は減少させる方法であって、それを必要とする対象に、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
-FGFRキナーゼを阻害する方法であって、キナーゼを、本明細書に定義されるキナーゼを阻害する式(I)の化合物と接触させることを含む方法。
-本明細書に定義される式(I)の化合物を使用してFGFRキナーゼの活性を阻害することにより、細胞プロセス(例えば細胞***)を調節する方法。
-FGFRキナーゼの活性を阻害することによる、細胞プロセス(例えば細胞***)の調節物質として使用するための、本明細書に定義される式(I)の化合物。
-癌の予防又は治療、特に癌、特にゲートキーパー変異があるFGFR1、FGFR2又はFGFR3を持つ癌、とりわけFGFR3 V555L、FGFR3 V555M、FGFR1 V561M又はFGFR2 V564I、特にFGFR3 V555L又はFGFR3 V555Mを持つ癌の治療での使用のための本明細書中に定義される式(I)の化合物。一実施形態では、癌は、ゲートキーパー変異があるFGFR1、FGFR2又はFGFR3に加えて、1つ以上の他のFGFR異常、例えば1つ以上のFGFR突然変異又は1つ以上のFGFR転座など、例えば本明細書中に定義されるものなどを持つ。
-FGFRの調節物質(例えば、阻害剤)として使用するための、本明細書に定義される式(I)の化合物。
-FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療、特に治療のための医薬品の製造のための、本明細書に定義される式(I)を有する化合物の、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-本明細書に記載される病状又は病態の予防又は治療のための医薬品の製造のための、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-予防又は治療、特に、癌、特にゲートキーパー変異があるFGFR1、FGFR2又はFGFR3を有する癌、とりわけFGFR3 V555L、FGFR3 V555M、FGFR1 V561M又はFGFR2 V564I、特にFGFR3 V555L又はFGFR3 V555Mを有する癌の治療のための薬剤の製造のための本明細書中に定義される式(I)の化合物の使用。一実施形態では、癌は、ゲートキーパー変異があるFGFR1、FGFR2又はFGFR3に加えて、1つ以上の他のFGFR異常、例えば1つ以上のFGFR突然変異又は1つ以上のFGFR転座など、例えば本明細書中に定義されるものなどを有する。
-FGFRの活性を調節する(例えば、阻害する)ための医薬品の製造のための、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-FGFRキナーゼの活性を阻害することにより細胞プロセス(例えば細胞***)を調節するための医薬品の製造における、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-FGFRキナーゼ(例えば、FGFR1又はFGFR2又はFGFR3又はFGFR4)の上方制御を特徴とする疾病又は病態の予防又は治療のための医薬品の製造のための、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-FGFRキナーゼ(例えば、FGFR1又はFGFR2又はFGFR3又はFGFR4)の上方制御を特徴とするものである癌の予防又は治療のための医薬品の製造のための、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-FGFR3キナーゼの遺伝子異常を有する下位集団から選択された患者における癌の予防又は治療のための医薬品の製造のための、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-FGFR3キナーゼの遺伝子異常を有する下位集団の一部を形成すると診断された患者における癌の予防又は治療のための医薬品の製造のための、本明細書に定義される式(I)の化合物の使用。
-FGFRキナーゼ(例えば、FGFR1又はFGFR2又はFGFR3又はFGFR4)の上方制御を特徴とする疾病又は病態の予防又は治療の方法であって、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
-FGFRキナーゼ(例えば、FGFR1又はFGFR2又はFGFR3又はFGFR4)の上方制御を特徴とする疾病又は病態の発生率を緩和又は減少させる方法であって、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
-癌に罹患しているか、又は罹患していると疑われる患者における癌の予防又は治療の(又は癌の発生率を緩和若しくは減少させる)方法であって;(i)患者に診断テストを受けさせて、患者がFGFR3遺伝子の遺伝子異常を有するかどうかを決定すること;及び(ii)患者が上記バリアントを有する場合、その後に、患者に、FGFR3キナーゼ阻害活性を有する、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
-FGFRキナーゼ(例えば、FGFR1又はFGFR2又はFGFR3又はFGFR4)の上方制御を特徴とする病状又は病態の予防又は治療の(又は病状若しくは病態の発生率を緩和若しくは減少させる)方法であって;(i)患者に診断テストを受けさせて、FGFRキナーゼ(例えば、FGFR1又はFGFR2又はFGFR3又はFGFR4)の上方制御に特徴的なマーカーを検出すること、及び(ii)診断テストがFGFRキナーゼの上方制御を示す場合、その後に、患者に、FGFRキナーゼ阻害活性を有する、本明細書に定義される式(I)の化合物を投与することを含む方法。
本明細書上記で示されるとおり、薬剤耐性キナーゼ突然変異は、キナーゼ阻害剤により治療される患者集団に起こり得る。これらは、一部、療法に使用される特定の阻害剤に結合又は相互作用するタンパク質の領域で起こる。そのような突然変異は、阻害剤が、問題とするキナーゼに結合して阻害する能力を減少又は増加させる。これは、阻害剤と相互作用するか、又は上記阻害剤の標的への結合を支持するのに重要なアミノ酸残基のいずれでも起こり得る。変異したアミノ酸残基との相互作用を要さずに標的キナーゼに結合する阻害剤は、恐らく突然変異により影響されず、酵素の効果的な阻害剤のままであろう。
式(I)の化合物を投与する前に、患者をスクリーニングして、患者が罹患しているか、又は罹患し得る疾病又は病態が、FGFR、特に点突然変異を有するFGFR、特に例えば、FGFR3 V555L、FGFR3 V555M、FGFR1 V561M、及びFGFR2 V564I、特にFGFR3 V555L及びFGFR3 V555MなどのFGFRゲートキーパー変異に対する活性を有する化合物による治療に感受性があるだろうものであるかどうかを決定することができる。一実施形態では、癌は、FGFRゲートキーパー突然変異、特にゲートキーパー変異があるFGFR1、FGFR2又はFGFR3、例えばFGFR3 V555L、FGFR3 V555M、FGFR1 V561M及びFGFR2 V564Iなど、特にFGFR3 V555L及びFGFR3 V555Mに加えて、1つ以上の他のFGFR異常、例えば1つ以上のFGFR突然変異又は1つ以上のFGFR転座など、例えば本明細書中に定義されるものなどを有する。
有用な薬理的性質を考慮すると、主題化合物は、投与目的のために種々の医薬形態に製剤化できる。
-白金配位化合物、例えば、シスプラチン(任意選択によりアミホスチンと組み合わせる)、カルボプラチン又はオキサリプラチン;
-タキサン化合物、例えば、パクリタキセル、パクリタキセルタンパク質結合粒子(アブラキサン(商標))又はドセタキセル;
-カンプトテシン化合物などのトポイソメラーゼI阻害剤、例えば、イリノテカン、SN-38、トポテカン、トポテカンhcl;
-抗腫瘍性エピポドフィロトキシン又はポドフィロトキシン誘導体などのトポイソメラーゼII阻害剤、例えばエトポシド、リン酸エトポシド又はテニポシド;
-抗腫瘍性ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン又はビノレルビン;
-抗腫瘍性ヌクレオシド誘導体、例えば5-フルオロウラシル、ロイコボリン、ゲムシタビン、ゲムシタビンhcl、カペシタビン、クラドリビン、フルダラビン、ネララビン;
-ナイトロジェンマスタード又はニトロソウレア等のアルキル化剤、例えばメスナ、ピポブロマン、プロカルバジン、ストレプトゾシン、テロゾロミド、ウラシルと任意選択的に組み合わせたシクロホスファミド、クロランブシル、カルムスチン、チオテパ、メファラン(メルファラン)、ロムスチン、アルトレタミン、ブスルファン、ダカルバジン、エストラムスチン、イホスファミド;
-抗腫瘍性アントラサイクリン誘導体、例えばダウノルビシン、任意選択的にデクスラゾキサンと組み合わせたドキソルビシン、ドキシル、イダルビシン、ミトキサントロン、エピルビシン、エピルビシンhcl、バルルビシン;
-IGF-1受容体を標的とする分子、例えばピクロポドフィリン;
-テトラカルシン誘導体、例えばテトロカルシンA;
-糖質コルチコイド、例えばプレドニゾン;
-抗体、例えば、トラスツズマブ(HER2抗体)、リツキシマブ(CD20抗体)、ゲムツズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、セツキシマブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、アレムツズマブ、エクリズマブ、イブリツモマブチウキセタン、ノフェツモマブ、パニツムマブ、トシツモマブ、CNTO328;
-エストロゲン受容体アンタゴニスト若しくは選択的エストロゲン受容体調節剤又はエストロゲン合成の阻害剤、例えば、タモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ドロロキシフェン、フェソロデックス、ラロキシフェン又はレトロゾール;
-エキセメスタン、アナストロゾール、レトラゾール、テストラクトン及びボロゾールなどのアロマターゼ阻害剤;
-レチノイド、ビタミンD又はレチノイン酸などの分化誘導剤及びレチノイン酸代謝遮断剤(RAMBA)、例えばアキュテイン;
-DNAメチルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばアザシチジン又はデシタビン;
-抗葉酸剤、例えば、ペメトレキセド二ナトリウム;
-抗生物質、例えば、アンチノマイシンD、ブレオマイシン、マイトマイシンC、ダクチノマイシン、カルミノマイシン、ダウノマイシン、レバミゾール、プリカマイシン、ミスラマイシン;
-代謝拮抗薬、例えばクロファラビン、アミノプテリン、シトシンアラビノシド又はメトトレキサート、アザシチジン、シタラビン、フロクスウリジン、ペントスタチン、チオグアニン;
-Bcl-2阻害剤などのアポトーシス誘導剤及び抗血管新生薬、例えば、YC137、BH312、ABT737、ゴシポール、HA 14-1、TW 37又はデカン酸;
-チューブリン結合剤、例えばコンブレスタチン、コルヒチン又はノコダゾール;
-キナーゼ阻害剤(例えば、EGFR(上皮成長因子受容体)阻害剤、MTKI(マルチターゲットキナーゼ阻害剤)、mTOR阻害剤、cmet阻害剤)、例えば、フラボペリドール(flavoperidol)、イマチニブメシル酸塩、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ダサチニブ、ラパチニブ、ラパチニブトシル酸塩、ソラフェニブ、スニチニブ、スニチニブマレイン酸塩、テンシロリムス、6-{ジフルオロ[6-(1-メチル-1H-ピラゾール-4-イル)[1,2,4]トリアゾロ[4,3-b]ピリダジン-3-イル]メチル}キノリン又はその薬学的に許容できる塩、6-[ジフルオロ(6-ピリジン-4-イル[1,2,4]トリアゾロ[4,3-b]ピリダジン-3-イル)メチル]キノリン又はその薬学的に許容される塩;
-ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばチピファルニブ;
-ヒストンデアセチラーゼ(HDAC)阻害剤、例えば、酪酸ナトリウム、スベロイルアニリドヒドロキサム酸(SAHA)、デプシペプチド(FR 901228)、NVP-LAQ824、R306465、JNJ-26481585、トリコスタチンA、ボリノスタット;
-ユビキチン-プロテアソーム経路の阻害剤、例えば、PS-341、MLN.41又はボルテゾミブ;
-ヨンデリス;
-テロメラーゼ阻害剤、例えばテロメスタチン;
-マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、例えばバチマスタット、マリマスタット、プリノスタット又はメタスタット。
-組換えインターロイキン、例えば、アルデスロイキン、デニロイキンディフチトクス、インターフェロンアルファ2a、インターフェロンアルファ2b、ペグインターフェロンアルファ2b
-MAPK阻害剤
-レチノイド類、例えば、アリトレチノイン、ベキサロテン、トレチノイン
-三酸化ヒ素
-アスパラギナーゼ
-ステロイド類、例えば、プロピオン酸ドロモスタノロン、酢酸メゲストロール、ナンドロロン(ドカノエート、フェンプロピオネート)、デキサメタゾン
-ゴナドトロピン放出ホルモン作動薬又は拮抗薬、例えばアバレリックス、酢酸ゴセレリン、酢酸ヒストレリン、酢酸リュープロリド
-サリドマイド、レナリドマイド
-メルカプトプリン、ミトタン、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペグアスパラガーゼ、ラスブリカーゼ
-BH3模倣体、例えばABT-737
-MEK阻害剤、例えばPD98059、AZD6244、CI-1040
-コロニー刺激因子類似体、例えば、フィルグラスチム、ペグフィルグラスチム、サルグラモスチム;エリスロポエチン又はその類似体(例えばダルベポエチンアルファ);インターロイキン11;オプレルベキン;ゾレドロネート、ゾレドロン酸;フェンタニル;ビスホスホネート;パリフェルミン。
-ステロイド性シトクロムP450 17α-ヒドロキシラーゼ-17,20-リアーゼ阻害剤(CYP17)、例えば、アビラテロン、酢酸アビラテロン
-PD-1とPD-L1との間の相互作用をブロックする抗体。
化合物1の調製
a)中間体1の調製
4-(3,5-ジフルオロ-4-ニトロフェニル)モルホリン
中間体1をBioorganic and Medicinal Chemistry Letters,2012,vol.22,#18,5876-5884に記載のように合成した。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,クロロホルム-d)(Varian)δ=6.43-6.39(m,1H),6.39-6.34(m,1H),3.93-3.74(m,4H),3.41-3.22(m,4H)
アセトニトリル(150mL)中の中間体1(4-(3,5-ジフルオロ-4-ニトロフェニル)モルホリン)EO8147_821.5C(5.00g、20.5mmol)及びN-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(7.94g、61.4mmol)の溶液に20℃にてフェニルメタンアミン(2.19g、20.5mmol)を滴下して添加した。反応混合物を70℃に12時間加熱した。次に、混合物を減圧下で濃縮して溶媒の殆どを除去し、得られたオレンジ色の油状物質を酢酸エチル(1L)中で溶解させた。混合物を水(200mLx3)及びブライン(300mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し(1:0~1:1の石油エーテル:酢酸エチルで溶出)、中間体2(4.80g、70.8%収率)をサフラン色固体として得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)8.58-8.47(m,1H),7.44-7.32(m,4H),7.31-7.22(m,1H),6.38-6.26(m,1H),5.80(d,J=1.5Hz,1H),4.54(d,J=5.7Hz,2H),3.67-3.57(m,4H),3.30-3.22(m,4H).
3-フルオロ-5-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン
250mL丸底フラスコ中の中間体2(N-ベンジル-3-フルオロ-5-モルホリノ-2-ニトロアニリン)(2.00g、6.04mmol)及びメタノール(60mL)からなる溶液に活性炭担持湿潤パラジウム(642mg、活性炭上10%)を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、水素でパージし、次いで水素(15psi)下50℃で2時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を真空下で蒸発させて、黒色の固形物として中間体3(1.10g、75.5%純度、65.1%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=1.26min,C10H14FN3Oに対する計算質量211.11,m/z実測値212.2[M+H]+.
メチル4-アミノ-1-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート
ACS Medicinal Chemistry Letters,2013,vol.4,#10,979-984に記載のように中間体4を合成した。
メチル4-((4-メトキシベンジル)アミノ)-1-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート
酢酸エチル(150mL)中の中間体4(メチル4-アミノ-1-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート)(7.50g、48.3mmol)の溶液に、4-メトキシベンズアルデヒド(7.90g、58.0mmol)及びトリフルオロ酢酸(7.2mL、96.7mmol)を添加した。35℃を下回る温度に維持しながら、水素化ホウ素ナトリウム(1.83g、48.3mmol)を混合物に分割して添加した。添加後、混合物を25℃で30分間撹拌した。反応混合物を水(100mL)で反応停止させ、25℃で1時間撹拌した。次に、混合物を分離し、水層を酢酸エチル(50mLx3)で抽出した。合わせた有機層をブライン(100mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し(1:0~5:4の石油エーテル:酢酸エチルで溶出)、白色固体として中間体5(7.92g、73.9%純度、73.2%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.663min,C14H17N3O3に対する計算質量275.13,m/z実測値275.9[M+H]+.
メチル7-ヒドロキシ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]-ピリジン-6-カルボキシレート
N,N-ジメチルホルムアミド(300mL)中の中間体5(メチル4-((4-メトキシベンジル)アミノ)-1-メチル-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート)(13.2g、47.9mmol)の溶液に水素化ナトリウム(2.68g、67.1mmol)を分割して添加した。混合物を20℃で10分間撹拌し、0℃に冷却した。メチルマロン酸=クロリド(6.54g、47.9mmol)を混合物に滴下して添加し、混合物を20℃で15分間さらに撹拌した。ナトリウムメトキシド(5.18g、95.9mmol)を反応物に添加し、混合物を110℃で2時間加熱した。反応混合物を濃縮し、残渣を得て、これを水(200mL)中で溶解させ、ろ過した。ろ液をtert-ブチルメチルエーテル(100mL)で抽出した。水層に濃塩酸を添加して、pHを3~4に調整したところ、白色固体が析出した。回収した沈殿物をジクロロメタン(200mL)中で溶解させた。得られた有機溶液をブライン(300mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮し、中間体6(10.0g、粗製)を黄色の油状物質として得て、これを次の段階に対して直接使用した。
メチル7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]-ピリジン-6-カルボキシレート
ジクロロメタン(200mL)中の中間体6(メチル7-ヒドロキシ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルボキシレート)(10.0g、29.1mmol)の溶液に塩化オキサリル(4.9mL、58.2mmol)及びN,N-ジメチルホルムアミド(10滴)を添加した。混合物を25℃で16時間撹拌した。次に、混合物を濃縮し、残渣を得て、これをジクロロメタン(200mL)中で溶解させた。得られた溶液を水(100mLx2)、ブライン(100mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮して、残渣を得た。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー(石油エーテル:酢酸エチル1:0~5:4で溶出)によって精製して、黄色固体として中間体7(10.0g、94.9%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 8.22(s,1H),7.29(d,J=8.6Hz,2H),6.88(d,J=8.6Hz,2H),5.06(s,2H),4.07-4.02(m,3H),3.87(s,3H),3.70(s,3H).
7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルバルデヒド
テトラヒドロフラン(200mL)中の中間体7(メチル7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルボキシレート)(7.00g、19.3mmol)の溶液に、-78℃でトルエン中の水素化ジイソブチルアルミニウム(38.7mL、トルエン中1M、38.7mmol)を滴下して添加した。混合物を-78℃で1時間撹拌した。-78℃で塩化アンモニウムの飽和水溶液(50mL)で反応を停止させ、温度を25℃まで上昇させた。混合物を1時間撹拌した。混合物を200mLのCHCl3に添加し、ろ過した。ろ過ケーキを200mLのCHCl3で洗浄し、3回ろ過した。合わせた有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮して、残渣を得た。30mLのtert-ブチルメチルエーテルを添加し、25℃で30分間撹拌した。沈殿物をろ過して、黄色固体として中間体8(5.00g、73.2%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.69min,C16H14ClN3O3に対する計算質量331.07,m/z実測値331.9[M+H]+.
7-クロロ-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
1,4-ジオキサン(15mL)中の中間体8(7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルバルデヒド)(400mg、1.21mmol)、中間体3(3-フルオロ-5-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン)(255mg、1.21mmol)及び塩化鉄(III)(391mg、2.41mmol)の溶液を室温で1時間撹拌した。混合物をろ過し、ジクロロメタン(合計300mL)でろ液を3回抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム溶液(200mL)及び水(300mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で蒸発させて、褐色固体として中間体9(360mg、36.8%収率、64.5%純度)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.77min,C26H24ClFN6O3に対する計算質量522.16,m/z実測値523.1[M+H]+.
7-クロロ-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-2H-ピラゾロ-[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
トリフルオロ酢酸(6mL)中の中間体9(7-クロロ-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン)(350mg、0.432mmol)の溶液にトリフルオロメタンスルホン酸(2mL)を添加した。反応混合物を20℃で1時間撹拌した。次に、混合物に対して蒸発を行い、トリフルオロ酢酸の殆どを除去した。残渣をジクロロメタン(100mL)中で溶解させ、pH>7になるまで混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液によりアルカリ化した。混合物を分離し、有機層をブライン(50mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を真空下で蒸発させ、褐色固体として中間体10(160mg、粗製)を得て、これを次の段階に対して直接使用した。
(S)-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
エタノール(5mL)中の中間体10(7-クロロ-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン)(150mg、0.372mmol)、中間体11((S)-1-(ピリミジン-2-イル)エタンアミン塩酸塩)(71.3mg、0.447mmol)及びN-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(241mg、1.86mmol)の溶液を85℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件28%B~58%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、次いで凍結乾燥して、化合物を得て、これを超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30mm,5um)カラム;移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O MeOH、A:B=50:50、55mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)によりさらに分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して、化合物1(15.5mg、98.9%純度、8.41%収率)を褐色粉末として得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.35min,C24H24FN9O2に対する計算質量489.20,m/z実測値490.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.26(d,J=2.0Hz,0.1H),13.00(d,J=2.0Hz,0.9H),12.53(d,J=7.9Hz,0.9H),12.43(d,J=7.9Hz,0.1H),11.05(s,0.1H),10.90(s,0.9H),8.86(d,J=4.9Hz,0.1H),8.81(d,J=4.9Hz,1.9H),7.71(s,0.1H),7.67(s,0.9H),7.41(t,J=4.9Hz,1H),7.04(d,J=2.0Hz,1H),6.75(dd,J=1.9,13.8Hz,1H),6.41(quint,J=7.1Hz,1H),3.99-3.94(m,3H),3.80-3.73(m,4H),3.16-3.07(m,4H),1.75-1.67(m,3H).
SFC(方法14):RT=2.63min,ピーク領域:100%.
化合物2の調製
a)中間体12の調製
4-アミノ-2-メチル-5-ニトロ安息香酸
中間体12を国際公開第201199832A2号パンフレットに記載のように合成した。
一般的手順A:1HNMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=8.54(s,1H),7.73(br.s.,2H),6.79(s,1H),2.42(s,3H)
(4-アミノ-2-メチル-5-ニトロフェニル)(ピロリジン-1-イル)メタノン
1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(EDCI)(835mg、4.36mmol)を無水N,N-ジメチルホルムアミド(6mL)中の中間体12(4-アミノ-2-メチル-5-ニトロ安息香酸)(600mg、95%純度、2.91mmol)、ピロリジン(207mg、2.91mmol)、N-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(1.13g、8.74mmol)及び1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBT)(588mg、4.35mmol)の溶液に添加した。反応混合物を室温(rt)で8時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(50mL)及び水(40mL)に慎重に注いだ。次に有機層を分離した。水相を酢酸エチル(40mLx3)で洗浄した。合わせた有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固して、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(石油エーテル:酢酸エチル、1:0~0:1)によって精製し、黄色固体として中間体13(700mg、95%純度、91.8%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=7.77(s,1H),7.47(br.s.,2H),6.81(s,1H),3.39(t,J=6.8Hz,2H),3.13(t,J=6.5Hz,2H),2.13(s,3H),1.87-1.69(m,4H)
(4,5-ジアミノ-2-メチルフェニル)(ピロリジン-1-イル)メタノン
1,4-ジオキサン(10mL)中の中間体13((4-アミノ-2-メチル-5-ニトロフェニル)(ピロリジン-1-イル)-メタノン)(500mg、95%純度、1.91mmol)の溶液にアルゴン下でラネーニッケル(200mg)を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、アルゴンで3回パージし、次いで水素で3回パージした。混合物を水素(30psi)下で25℃にて24時間撹拌した。混合物をろ過した。次いで、ろ液をさらなる処理なく次の段階で使用した。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=0.71min,C12H17N3Oに対する計算質量219.14,m/z実測値220.2[M+H]+.
7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-6-(5-メチル-6-(ピロリジン-1-カルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
撹拌バー、中間体8(7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルバルデヒド)(650mg、93.1%純度、1.82mmol)及び無水1,4-ジオキサン(5mL)を100mL丸底フラスコに添加した。塩化鉄(III)(592mg、3.65mmol)を混合物に添加し、その後、混合物を室温で5分間撹拌した。中間体14((4,5-ジアミノ-2-メチルフェニル)(ピロリジン-1-イル)-メタノン)(ろ液)を混合物に滴下して添加した。室温で20分間撹拌した後、反応混合物を水(30mL)で希釈し、pH=9になるまで固形重炭酸ナトリウムで処理した。得られた混合物をジクロロメタン(30mL)で抽出した。有機抽出物をブライン(20mLx3)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:テトラヒドロフラン、1:0~1:1)によって精製し、褐色固体として中間体15(677mg、87.9%純度、61.4%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法8):RT=2.22min,C28H27ClN6O3に対する計算質量530.18,m/z実測値531.1[M+H]+.
7-クロロ-2-メチル-6-(5-メチル-6-(ピロリジン-1-カルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
撹拌バー、中間体15(7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-メチル-6-(5-メチル-6-(ピロリジン-1-カルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン)(677mg、87.9%純度、1.12mmol)及び2,2,2-トリフルオロ酢酸(10mL)を100mL丸底フラスコに添加した。次に、トリフルオロメタンスルホン酸(505mg、3.37mmol)を混合物に添加した。反応容器を80℃で2時間撹拌した。トリフルオロメタンスルホン酸(505mg、3.37mmol)を混合物に再度添加した。そして混合物を1時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮乾固し、その後、水(30mL)で希釈し、pH=9になるまで固形重炭酸ナトリウムで処理した。得られた混合物をジクロロメタン(30mLx3)で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固して、中間体16を得た。次に、中間体16をtert-ブチルメチルエーテル(15mL)とともに粉砕して、黄色固体として中間体16(400mg、97.9%純度、85.1%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.53min,C20H19ClN6O2に対する計算質量410.13,m/z実測値411.0[M+H]+.
(S)-2-メチル-6-(5-メチル-6-(ピロリジン-1-カルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
ジクロロメタン(10mL)中の、撹拌バー、中間体16(7-クロロ-2-メチル-6-(5-メチル-6-(ピロリジン-1-カルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン)(400mg、97.9%純度、0.953mmol)、中間体11((S)-1-(ピリミジン-2-イル)エタンアミン塩酸)(152mg、0.952mmol)及びN-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(615mg、4.76mmol)を25mL丸底フラスコに添加した。得られた混合物を40℃で12時間撹拌した。得られた混合物をジクロロメタン(20mL)に注ぎ、水(10mLx3)で洗浄した。分離した有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固して粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250 x 50 10μm、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、勾配条件22%B~52%、勾配時間:11.2min、流速:22mL/min)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、次いで凍結乾燥して、黄色粉末を得た。超臨界流体クロマトグラフィー分離(分離条件:Chiralpak AS-H(150mm x 4.6mm、5μm);移動相:A:超臨界CO2、B:エタノール(0.05%DEA);勾配:5%で0.5分間保持、次いで3.5分でB5%~40%、及びB40%で2.5分間保持、次いでB5%で1.5分間保持;流速:3mL/min;カラム温度:40℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により生成物をさらに精製した。分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、次いで凍結乾燥して、薄黄色粉末として化合物2(200mg、98.8%純度、41.6%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):C26H27N9O2に対する計算質量497.20,m/z実測値498.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=13.01(d,J=7.3Hz,1H),12.75(d,J=8.2Hz,0.5H),12.67(d,J=8.2Hz,0.5H),10.91(s,1H),8.89-8.84(m,2H),7.67(s,1H),7.53-7.38(m,3H),6.53-6.42(m,1H),3.99-3.96(m,3H),3.54-3.47(m,2H),3.14-3.02(m,2H),2.34-2.29(m,3H),1.94-1.85(m,2H),1.84-1.77(m,2H),1.75-1.70(m,3H).
SFC(方法12):RT=4.88min,ピーク領域:99.9%
化合物3の調製
a)中間体17の調製
メチル4-アミノ-1-エチル-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート
中間体17を国際公開第201218909A1号パンフレットに記載のように合成した。
メチル1-エチル-4-((4-メトキシベンジル)アミノ)-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート
マグネチック撹拌機を備えたビーカー(3L)中で、酢酸エチル(1.2L)中の中間体17(メチル4-アミノ-1-エチル-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート)(120g、709mmol)、トリフルオロ酢酸(162g、1.42mol)及び4-メトキシベンズアルデヒド(116g、852mmol)の溶液を調製した。温度を30℃未満に維持した氷水浴で水素化ホウ素ナトリウム(21.5g、568mmol)を混合物に分割して添加した。次に、水(1L)を混合物に添加して反応を停止させ、混合物を25℃で2時間撹拌した。混合物を分離し、分離した有機層を水(1Lx3)、ブライン(1L)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し(相当する勾配:石油エーテル:酢酸エチル、100:0~1:1)、淡黄色油状物質として中間体18(180g、粗製)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 7.34-7.20(m,3H),6.91-6.76(m,2H),4.16-4.03(m,2H),4.03-3.97(m,2H),3.80-3.68(m,6H),1.37-1.21(m,3H)
メチル2-エチル-7-ヒドロキシ-4-(4-メトキシベンジル)-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]-ピリジン-6-カルボキシレート
乾燥N,N-ジメチルホルムアミド(600mL)中の中間体18(メチル1-エチル-4-((4-メトキシベンジル)アミノ)-1H-ピラゾール-3-カルボキシレート)(90.0g、121mmol)の溶液を2L三つ口フラスコに添加した。氷水浴で水素化ナトリウム(16.2g、油中60%分散液、405mmol)を混合物に分割して添加した。添加後、混合物を0℃で15分間撹拌し、メチルマロン酸=クロリド(44.6g、327mmol)を混合物に0℃で滴下して添加した。混合物をさらに15分間撹拌し、次いでナトリウムメトキシド(33.6g、622mmol)を一度に混合物に添加し、混合物を110℃で3時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、残渣を得た。次に、300mLの水及び酢酸エチル(400mL)中で残渣を懸濁した。分離した水相をHCl(12M)により6~7のpHまで酸性化した。水相をジクロロメタン(400mLx4)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固して粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(相当する勾配:石油エーテル:酢酸エチル、10:0~1:9)によって精製して、中間体19(15.0g、85.9%純度、11.6%収率)を黄色の粘着性固体として得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法4):RT=1.76min,C18H19N3O5に対する計算質量357.13,m/z実測値358.1[M+H]+.
メチル7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ-[4,3-b]ピリジン-6-カルボキシレート
撹拌バー、中間体19(メチル2-エチル-7-ヒドロキシ-4-(4-メトキシベンジル)-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルボキシレート)(25.0g、70.0mmol)及びジクロロメタン(150mL)を500mL丸底フラスコに添加した。塩化オキサリル(8.9mL、104mmol)を0℃で滴下して添加した。次に、N,N-ジメチルホルムアミド(0.26g、3.56mmol)を0℃で添加し、得られた混合物を15℃で撹拌した。16時間後、反応混合物を減圧下で濃縮乾固した。残渣をジクロロメタン(300mL)中で懸濁し、pH>7になるまで飽和重炭酸ナトリウム溶液で塩基性化した。混合物を分離し、分離した有機層をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(相当する勾配:石油エーテル:酢酸エチル、1:0~1:2)によって精製して、淡黄色固体として中間体20(7.50g、25.7%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法7):RT=2.93min,C18H18ClN3O4に対する計算質量375.10,m/z実測値375.9[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)δ=8.31(s,1H),7.30(d,J=8.5Hz,2H),6.88(d,J=8.8Hz,2H),5.06(s,2H),4.32(q,J=7.3Hz,2H),3.89-3.82(m,3H),3.73-3.70(m,3H),1.44(t,J=7.3Hz,3H)
7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルバルデヒド
撹拌バー、中間体20(メチル7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルボキシレート)(7.50g、20.0mmol)及びジクロロメタン(150mL)を窒素下で500mL三つ口フラスコに添加した。次に、水素化ジイソブチルアルミニウム(29.9mL、トルエン中1M、29.9mmol)を-78℃で滴下して添加し、得られた混合物を-78℃で撹拌した。2時間後、反応混合物を-78℃の飽和塩化アンモニウム水溶液(50mL)で反応停止させた。混合物を-78℃で20分間撹拌し、その後、ジクロロメタン(100mL)を添加した。混合物を25℃に温めた後、反応混合物をろ過した。ろ過ケーキをジクロロメタン(300mLx5)で洗浄し、合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(相当する勾配:石油エーテル:酢酸エチル、1:0~1:3)によって精製し、生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex luna C18 250*50mm*10μm、移動相A:水(0.1%TFA)、移動相B:アセトニトリル、流速:120mL/min、勾配条件20%B~50%)によりさらに精製した。回収した純粋な分画をpH>7になるまで飽和重炭酸ナトリウム溶液で中和した。次に、混合物をジクロロメタン(200mLx3)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を蒸発乾固し、これを水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して、淡黄色固体として中間体21(5.50g、90.0%純度、71.7%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.80min,C17H16ClN3O3に対する計算質量345.09,m/z実測値346.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=10.28(s,1H),8.31(s,1H),7.38-7.30(m,2H),6.91-6.83(m,2H),5.09(s,2H),4.34(q,J=7.3Hz,2H),3.70(s,3H),1.44(t,J=7.3Hz,3H)
7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
撹拌バー、中間体21(7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルバルデヒド)(800mg、2.31mmol)、中間体22(4-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン)(537mg、2.78mmol)(Medicinal Chemistry,2013,vol.9,#5 p.651-659に記載のように合成)及び乾燥1,4-ジオキサン(10mL)を40mLガラス瓶に添加した。次に、塩化第二鉄(751mg、4.63mmol)を反応混合物に添加し、混合物を25℃で1時間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム溶液(20mL)によって混合物をpH=9.0前後に調整し、ろ過した。ろ液をジクロロメタン(20mLx3)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(相当する勾配:ジクロロメタン:メタノール、1:0~9:1)によって精製し、黒色粉末として中間体23(800mg、68.9%収率、45.9%収率)を得た。
7-クロロ-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]-ピリジン-5(4H)-オン
撹拌バー、中間体23(7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン)(800mg、1.06mmol)及び2,2,2-トリフルオロ酢酸(3mL)を50mL丸底フラスコに添加した。次に、トリフルオロメタンスルホン酸(0.280mL)を混合物に滴下して添加し、混合物を60℃で2時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を飽和重炭酸ナトリウム溶液によりpH=9まで塩基性化した。混合物をクロロホルム(10mLx3)で抽出した。合わせた有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して黒色粉末として中間体24(800mg、粗製)を得て、これをさらに精製せずに次の段階に対して使用した。
(S*)-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)プロピル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
撹拌バー、中間体24(7-クロロ-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン)(265mg、0.664mmol)、中間体25((S*)-1-(ピリミジン-2-イル)プロパン-1-アミン塩酸塩)(173mg、0.996mmol)、テトラブチルアンモニウムヨージド(TBAI)(24.5mg、0.066mmol)、重炭酸ナトリウム(167mg、1.99mmol)、クロロホルム(6mL)及び水(1mL)を100mL丸底フラスコに添加した。得られた混合物を60℃で12時間撹拌した。次に、混合物をジクロロメタン(20mL)で抽出した。分離した有機層を水(20mLx3)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮して残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件、23%B~53%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。混合物を凍結乾燥して乾固し、黄色固体として化合物3(118mg、97.3%純度、34.7%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.00min,C26H29N9O2に対する計算質量499.24,m/z実測値500.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 12.87(d,J=5.7Hz,1H),12.64(d,J=7.9Hz,0.4H),12.57(d,J=7.9Hz,0.6H),10.89-10.85(m,1H),8.83-8.79(m,2H),7.65(s,1H),7.53(d,J=8.6Hz,0.4H),7.43(d,J=8.8Hz,0.6H),7.40-7.35(m,1H),7.23-7.19(m,0.6H),7.06-7.03(m,0.4H),6.95-6.87(m,1H),6.34-6.26(m,1H),4.19(q,J=7.3Hz,2H),3.82-3.73(m,4H),3.14-3.05(m,4H),2.25-2.09(m,2H),1.30(t,J=7.3Hz,3H),1.09-0.97(m,3H)
SFC(方法12):RT=2.26min,ピーク領域:99.0%.
化合物4、4A及び4Bの調製
a)化合物4の調製
(Rac)-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
撹拌バー、中間体24(7-クロロ-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン)(800mg、2.01mmol)、中間体26(rac)-1-(オキサゾール-4-イル)エタンアミン塩酸塩(447mg、3.01mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.61g、20.2mmol)及びN,N-ジメチルアセトアミド(10mL)を40mLガラス瓶に添加した。混合物を110℃で1時間撹拌した。次に、混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン(30mL)で希釈し、水(8mLx5)で洗浄した。分離した有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、粗製生成物を得て、これをprep.薄層クロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール=10:1)により精製し、黄色粉末として化合物4(350mg、95%純度、35.0%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.63min,C24H26N8O3に対して計算された質量474.21,m/z実測値475.1[M+H]+.
(S*)-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び化合物4B
(R*)-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30mm、10um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=45:55、80mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)によってラセミ化合物4を分離した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。アセトニトリル(2mL)及び水(10mL)中で残渣を懸濁した。混合物を凍結乾燥して乾固し、黄色粉末として化合物4A(77.1mg、97.4%純度、21.5%収率)及び黄色粉末として化合物4B(80.1mg、99.1%純度、22.7%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.86min,C24H26N8O3に対する計算質量474.21,m/z実測値475.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 12.89(s,0.4H),12.87(s,0.6H),12.40(d,J=8.4Hz,0.4H),12.32(d,J=8.6Hz,0.6H),10.93(br.s.,1H),8.36(s,1H),8.02-7.99(m,1H),7.74(s,1H),7.52(d,J=8.6Hz,0.4H),7.38(d,J=8.6Hz,0.6H),7.20(d,J=2.2Hz,0.6H),7.03(d,J=2.0Hz,0.4H),6.93-6.86(m,1H),6.44-6.32(m,1H),4.38-4.26(m,2H),3.80-3.72(m,4H),3.12-3.03(m,4H),1.71-1.66(m,3H),1.48-1.41(m,3H)
SFC(方法13):RT=1.77min,ピーク領域:100%.
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.86min,C24H26N8O3に対する計算質量474.21,m/z実測値475.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 12.89(s,0.4H),12.87(s,0.6H),12.40(d,J=8.6Hz,0.4H),12.32(d,J=8.6Hz,0.6H),10.93(br.s.,1H),8.36(s,1H),8.02-7.99(m,1H),7.74(s,1H),7.52(d,J=8.8Hz,0.4H),7.39(d,J=8.8Hz,0.6H),7.20(d,J=2.2Hz,0.6H),7.03(d,J=2.0Hz,0.4H),6.93-6.88(m,1H),6.44-6.33(m,1H),4.33(q,J=7.4Hz,2H),3.80-3.73(m,4H),3.12-3.05(m,4H),1.72-7.65(m,3H),1.48-1.42(m,3H)
SFC(方法13):RT=2.07min,ピーク領域:100%.
化合物5の調製
a)中間体28 4-メチル-5-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミンの調製 ジオキサン(40mL)中の中間体27(4-メチル-5-モルホリノ-2-ニトロアニリン)(1.0g、4.22mmol)及びラネー-Ni(100mg)の混合物を室温で水素ガスのバルーン圧下で4時間にわたり撹拌した。ラネー-Niをろ取し、ろ液をさらに精製せずに次の段階で直接使用した。
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法2):RT=0.49min,C11H17N3Oに対する計算質量207.1,m/z実測値208.2[M+H]+.
7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
氷浴下でジオキサン(40mL)中の中間体28(4-メチル-5-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン)の混合物に4-クロロ-2-オキソ-1,2-ジヒドロキノリン-3-カルバルデヒド(1.45g、4.20mmol)を添加した。FeCl3(1.36g、8.40mmol)を添加し、得られた混合物を室温で15分間撹拌した。飽和NaHCO3で混合物のpHを8に調整した。混合物をCH2Cl2(50mL*2)で抽出した。合わせた有機相をH2O、ブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:EtOAc=6:1~2:1)により残渣を精製して、黄色固体として表題化合物(1.59g、71.0%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法4):RT=1.15min,C28H29ClN6O3に対する計算質量532.2,m/z実測値533.3[M+H]+.
7-クロロ-2-エチル-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
CF3COOH(20mL)中の中間体29(7-クロロ-2-エチル-4-(4-メトキシベンジル)-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン)(1.59g、2.99mmol)の溶液にTfOH(1.35g、9.00mmol)を添加した。混合物を85℃で3時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮した。飽和NaHCO3で残渣のpHを8に調整した。得られた混合物をCH2Cl2(50mL*2)で抽出した。合わせた有機相をH2O及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、濃縮し、黄色固体として中間体30(1.6g、粗製、収率>100%)を得て、これをさらに精製せずに次の段階で使用した。
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法4):RT=0.93min,C20H21ClN6O2に対する計算質量412.1,m/z実測値413.3[M+H]+.
(S)-2-エチル-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-エチル)アミノ)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
CH2Cl2(10mL)中の中間体30(7-クロロ-2-エチル-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]-イミダゾール-2-イル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン)(300mg、0.73mmol)の溶液に中間体11((S)-1-(ピリミジン-2-イル)エタン-1-アミン塩酸塩)(232mg、1.46mmol)及びDIPEA(471mg、3.65mmol)を添加した。混合物を35℃で16時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:MeOH=60:1~50:1)により残渣を精製し、黄色固体として化合物5(300mg、82.3%収率、純度99.4%、ee:95.84%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法4):RT=1.44min,C26H29N9O2に対する計算質量499.57,m/z実測値500.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.78-8.76(m,2H),7.50(s,1H),7.34-7.32(m,3H),6.46-6.41(m,1H),4.23-4.19(m,2H),3.86-3.84(m,4H),2.94-2.92(m,4H),2.42(s,3H),1.85(d,J=6.8Hz,3H),1.39(t,J=7.6Hz,3H).
化合物6の調製
a)中間体32の調製
2-フルオロ-4-モルホリノ-6-ニトロアニリン
THF(50mL)中の中間体31(4-ブロモ-2-フルオロ-6-ニトロアニリン)(5.0g、21.3mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(586mg、0.64mmol)、(2-ビフェニル)ジ-tert-ブチルホスフィン(JohnPhos)(379mg、1.27mmol)及びt-BuONa(2.86g、29.78mmol)の脱気懸濁液にモルホリン(5.55g、63.8mmol)を添加した。混合物を60℃で18時間撹拌した。室温に冷却した後、混合物を減圧下で濃縮して残渣を得て、これをシリカゲルクロマトグラフィー(石油エーテル:EtOAc=5:1)によって精製し、黄色固体として中間体32(780mg、15.2%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.60min,C10H12FN3O3に対する計算質量241.1,m/z実測値242.2[M+H]+.
3-フルオロ-5-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン
ジオキサン(15mL)中の中間体32(2-フルオロ-4-モルホリノ-6-ニトロアニリン)(780mg、3.23mmol)及びラネー-Ni(1g)の混合物を水素ガスのバルーン圧下にて室温で4時間撹拌した。ラネー-Niをろ取し、ろ液をさらに精製せずに次の段階で直接使用した。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.27min,C10H14FN3Oに対する計算質量211.1,m/z実測値212.2[M+H]+.
7-クロロ-2-エチル-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-4-(4-メトキシベンジル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
ジオキサン(25mL)中の中間体21(7-クロロ-4-(4-メトキシベンジル)-2-エチル-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-6-カルバルデヒド)(1.11g、3.23mmol)の混合物にFeCl3(1.04g、6.46mmol)を添加し、続いてジオキサン(15mL)中の中間体33(3-フルオロ-5-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン)の溶液を添加した。得られた混合物を室温で15分間撹拌し、次いでそれを飽和NaHCO3(50mL)に注ぎ、CH2Cl2(100mL*2)で抽出した。合わせた有機相をH2O、ブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:MeOH=100:0~60:1)によって残渣を精製して、褐色固体として中間体35(650mg、37.5%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.62min,C27H26ClFN6O3に対する計算質量536.2,m/z実測値537.3[M+H]+.
7-クロロ-2-エチル-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
CF3COOH(20mL)中の中間体34(7-クロロ-2-エチル-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]-イミダゾール-2-イル)-4-(4-メトキシベンジル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン)(650mg、1.21mmol)の溶液にTfOH(537mg、3.63mmol)を添加した。混合物を室温で1時間撹拌した。次に、それを減圧下で濃縮した。飽和NaHCO3で残渣のpHを8に調整した。得られた混合物をCH2Cl2(50mL*2)で抽出した。合わせた有機相をH2O及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、濃縮し、黄色固体として中間体35(700mg、収率>100%)を得て、これをさらに精製せずに次の段階で使用した。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.32min,C19H18ClFN6O2に対する計算質量416.1,m/z実測値417.3[M+H]+.
(S)-2-エチル-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-エチル)アミノ)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
CHCl3(20mL)中の中間体35(7-クロロ-2-エチル-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]-イミダゾール-2-イル)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン)(700mg、1.68mmol)の溶液に中間体11((S)-1-(ピリミジン-2-イル)エタン-1-アミン塩酸塩)(402mg、2.52mmol)、KHCO3(504mg、5.04mmol)及び18-クラウン-6(665mg、2.52mmol)を添加した。混合物を60℃で16時間撹拌した。室温まで冷却した後、反応混合物をCH2Cl2(50mL*2)で抽出した。合わせた有機相を飽和KHCO3(50mL*3)、H2O及びブラインで洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(CH2Cl2:MeOH=80:1)により残渣を精製し、黄色固体として化合物6(316.18mg、35.7%収率、純度97.3%、ee:96.08%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.43min,C25H26FN9O2に対する計算質量503.5,m/z実測値504.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.77(d,J=4.0Hz,2H),7.53(s,1H),7.36-7.35(m,1H),6.93-6.922(m,1H),6.74-6.68(m,1H),6.42-6.35(m,1H),4.27-4.19(m,2H),3.88-3.83(m,4H),3.17-3.13(m,4H),1.84(d,J=6.8Hz,3H),1.41(t,J=6.8Hz,3H).
実施例1に従う化合物7及び8の合成で使用される中間体39及び41の調製
a)中間体37の調製
(rac)-4-(3,4-ジニトロフェニル)-2-(トリフルオロメチル)モルホリン
エタノール(10mL)中の中間体36(4-フルオロ-1,2-ジニトロベンゼン)(800mg、4.30mmol)、(rac)-2-(トリフルオロメチル)モルホリン塩酸塩(988mg、5.16mmol)及びジイソプロピルエチルアミン(2.18g、21.5mmol)の混合物を45℃で16時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー(溶出液:石油エーテル/酢酸エチル、100/0~85/15)により精製した。所望の分画を回収し、溶媒を真空下で濃縮乾固し、黄色固体として中間体37(1.00g、95%純度、68.8%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=8.08(d,J=9.3Hz,1H),7.63(d,J=2.6Hz,1H),7.29-7.19(m,1H),4.44-4.29(m,1H),4.20-4.02(m,2H),3.99-3.88(m,1H),3.78-3.65(m,1H),3.19-3.07(m,2H).
(S*)-4-(3,4-ジニトロフェニル)-2-(トリフルオロメチル)モルホリン
及び
中間体40の調製
(R*)-4-(3,4-ジニトロフェニル)-2-(トリフルオロメチル)モルホリン
超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AS(250mm*30mm、10um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=50:50、60mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により、中間体37((rac)-4-(3,4-ジニトロフェニル)-2-(トリフルオロメチル)モルホリン)を分離した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去し、黄色固体として中間体38(480mg、99.5%純度、47.8%収率)を得た。SFC(方法21):RT=3.42min,ピーク領域:100%、及び中間体40を得て、中間体41を合成するためにこれを直接使用した。
(S*)-4-(2-(トリフルオロメチル)モルホリノ)ベンゼン-1,2-ジアミン
活性炭担持湿潤パラジウム(100mg、活性炭上10%)をメタノール(25mL)中の中間体38((S*)-4-(3,4-ジニトロフェニル)-2-(トリフルオロメチル)モルホリン)(480mg、1.49mmol)の溶液に添加した。懸濁液を真空下で脱気し、水素で数回パージし、次に、混合物を25℃にて12時間、水素下(40psi)で撹拌した。Celiteのパッドに通して懸濁液をろ過し、ろ過ケーキをメタノール(50mLx2)で洗浄した。ろ液を真空中で濃縮し、褐色固体として中間体39(450mg、粗製)を得て、これをさらに精製せずに次の段階に対して使用した。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=1.75min,C11H14F3N3Oに対する計算質量261.11,m/z実測値262.1[M+H]+.
(R*)-4-(2-(トリフルオロメチル)モルホリノ)ベンゼン-1,2-ジアミン
中間体41の合成は、中間体39に対するものと同様であり、褐色固体として中間体41(460mg、粗製)(中間体40から出発)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=1.75min,C11H14F3N3Oに対する計算質量261.11,m/z実測値262.1[M+H]+.
実施例1による化合物12の合成において使用される中間体44の調製
a)中間体43の調製
5-((2R,6R)-2,6-ジメチルモルホリノ)-2-ニトロアニリン
中間体42(5-フルオロ-2-ニトロアニリン)(0.904g、5.79mmol)、(2R,6R)-2,6-ジメチルモルホリン(1.00g、8.68mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(3mL、18.2mmol)及び1-ブタノール(10mL)の懸濁液を120℃で12時間撹拌した。室温まで冷却し、反応混合物を水(50mL)に注いだ。次に、混合物をジクロロメタン(50mLx3)で抽出し、合わせた有機層を水(50mLx3)及びブライン(50mLx3)で洗浄した。分離した有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:石油エーテル:酢酸エチル、1:0~1:1)によって精製し、黄色固体として中間体43(0.950g、99.7%純度、65.1%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.79min,C12H17N3O3に対する計算質量251.13,m/z実測値252.0[M+H]+.
4-((2R,6R)-2,6-ジメチルモルホリノ)ベンゼン-1,2-ジアミン
亜鉛(1.11g、16.9mmol)を20℃のテトラヒドロフラン(25mL)、エタノール(25mL)及び水(10mL)中の中間体43(5-((2R,6R)-2,6-ジメチルモルホリノ)-2-ニトロアニリン)(0.850g、3.38mmol)、塩化アンモニウム(2.71g、50.7mmol)からなる溶液に添加した。次に、反応混合物を90℃で1時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、Celite(登録商標)のパッドに通して懸濁液をろ過し、パッドを水(10mL)で洗浄した。ろ液を水(100mL)に注ぎ、酢酸エチル(100mLx3)で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:石油エーテル:酢酸エチル、1:0~0:1)によって精製し、薄黄色固体として中間体44(0.810g、87%純度、94%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法5):RT=0.32min,C12H19N3Oに対する計算質量221.15,m/z実測値222.0[M+H]+.
実施例1に従う化合物13の合成において使用される中間体47の調製
a)中間体の調製45
4-ブロモ-3-フルオロ-2-ニトロアニリン
国際公開第2012/83170A1号パンフレットに記載のように3-フルオロ-2-ニトロアニリンから中間体45を合成した。
4-(3,6-ジヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-3-フルオロ-2-ニトロアニリン
中間体45(4-ブロモ-3-フルオロ-2-ニトロアニリン)(2.00g、8.51mmol)、2-(3,6-ジヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン(1.97g、9.36mmol)、炭酸ナトリウム(0.902g、8.51mmol)、1,4-ジオキサン(48mL)及び水(12mL)を丸底フラスコに添加した。混合物に対して5分間にわたり窒素を通気し、次に[1,1’-ビス-(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)(1.24g、1.70mmol)で処理した。混合物に対してさらに5分間にわたり窒素を通気し、次に100℃で16時間加熱した。混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得た。残渣をジクロロメタン(100mLx3)で抽出した。合わせた有機抽出物をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:石油エーテル:酢酸エチル=3:1)によって精製し、黄色固体として中間体46(1.60g、95%純度、74.98%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 7.30(t,J=8.6Hz,1H),6.87(br.s.,2H),6.73(dd,J=0.9,9.0Hz,1H),5.95(s,1H),4.25-4.12(m,2H),3.76(t,J=5.4Hz,2H),2.34(s,2H).
3-フルオロ-4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ベンゼン-1,2-ジアミン
活性炭担持湿潤パラジウム(0.5g、活性炭上10%)を中間体46(4-(3,6-ジヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-3-フルオロ-2-ニトロアニリン)(1.00g、4.20mmol)及びメタノール(30mL)からなる溶液に添加した。混合物に対して5分間にわたり水素を通気し、次に水素下(40psi)で50℃にて12時間撹拌した。Celite(登録商標)のパッドに通して懸濁液をろ過し、パッドをメタノール(10mL)で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、褐色の油状物質として中間体47(0.85g、TLCにより90%純度、86.7%収率)を得た。
実施例1に従い化合物15及び16を調製するために使用される中間体50の調製
a)中間体49の調製
2-フルオロ-6-ニトロ-3-(ピペリジン-1-イル)アニリン
n-ブチルアルコール(30mL)中の中間体48(2,3-ジフルオロ-6-ニトロアニリン)(5.00g、28.7mmol)、ピペリジン(3.67g、43.1mmol)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(15mL、85.9mmol)の溶液を80℃で12時間撹拌した。得られた混合物を酢酸エチル(15mL)に注ぎ、水(30mLx3)で洗浄した。分離した有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、黄色固体として粗製中間体49(7.060g、粗製)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.91min,C11H14FN3O2に対する計算質量239.11,m/z実測値239.9[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,CDCl3)(Varian)7.85(dd,J=1.8,9.7Hz,1H),6.27(dd,J=8.8,9.5Hz,1H),6.10(s,2H),3.32-3.25(m,4H),1.75-1.63(m,6H)
3-フルオロ-4-(ピペリジン-1-イル)ベンゼン-1,2-ジアミン
中間体49(2-フルオロ-6-ニトロ-3-(ピペリジン-1-イル)アニリン)(1.02g、4.28mmol)、亜鉛(1.40g、21.4mmol)、塩化アンモニウム(3.40g、63.6mmol)、THF(20mL)、エタノール(20mL)及び水(5mL)からなる溶液を95℃で1時間撹拌した。反応混合物を25℃に冷却し、Celite(登録商標)のパッドに通してろ過した。ろ液を水(5mL)に注ぎ、酢酸エチル(10mLx3)で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、黄色固体として中間体50(875g、粗製)を得て、これを次の段階に対して直接使用した。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法9):RT=0.151min,C11H16FN3に対する計算質量209.13,m/z実測値209.8
一般的手順A:[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3)(Varian)6.43-6.39(m,1H),6.37-6.31(m,1H),2.91-2.90(m,4H),1.76-1.68(m,4H),1.57-1.50(m,2H)
実施例1に従う化合物17の合成において使用される中間体54の調製
a)中間体52の調製
2,3,5-トリフルオロ-6-ニトロアニリン
中間体51(2,3,4,6-テトラフルオロニトロベンゼン)(2.00g、10.3mmol)及びジオキサン(51mL)中のアンモニアからなる混合物に対して窒素を5分間通気した。次に混合反応物を室温で3時間撹拌した。得られた混合物を酢酸エチル(50mL)に注ぎ、水(30mLx3)で洗浄した。合わせた有機抽出物を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固し、粗製中間体52を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:石油エーテル:酢酸エチル=8:1~4:1)によって精製し、黄色固体として中間体52(1.12g、53.9%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,CDCl3)(Varian)6.40-6.25(m,1H),5.91(br.s.,2H).
2,5-ジフルオロ-3-モルホリノ-6-ニトロアニリン
n-ブチルアルコール(1mL)中の中間体52(2,3,5-トリフルオロ-6-ニトロアニリン)(100mg、0.495mmol)、モルホリン(47.0mg、0.539mmol)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(192mg、1.49mmol)の溶液を80℃で12時間撹拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得た。得られた混合物を酢酸エチル(20mL)に注ぎ、水(10mLx3)で洗浄した。分離した有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:石油エーテル:酢酸エチル=8:1~4:1)によって精製し、黄色固体として中間体53(45.0mg、31.6%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)6.52(dd,J=6.8,12.3Hz,1H),6.30(s,2H),3.62-3.54(m,4H),2.85-2.74(m,4H).
3,6-ジフルオロ-4-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン
活性炭担持湿潤パラジウム(50mg)を50mL丸底フラスコ中の中間体53(2,5-ジフルオロ-3-モルホリノ-6-ニトロアニリン)(45.0mg、0.156mmol)及びメタノール(10mL)からなる溶液に添加した。混合物に対して水素(15psi)を5分間通気し、次いで45℃で4時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、Celite(登録商標)のパッドに通してろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、紫色固形物として中間体54(34.4mg、53%純度、50.9%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)6.36-6.21(m,1H),4.80(s,2H),4.33(s,2H),3.71-3.66(m,4H),2.69-2.63(m,4H).
実施例1に従い化合物25を合成するために使用される中間体58の調製
a)中間体55の調製
4-ベンジル-2,2-ジフルオロモルホリン
米国特許出願公開第2016176896A1号明細書に記載のように中間体55を合成した。
2,2-ジフルオロモルホリントリフルオロアセテート
100mL丸底フラスコ中の中間体55(4-ベンジル-2,2-ジフルオロモルホリン)(930mg、4.36mmol)及びメタノール(10mL)の溶液に、活性炭担持湿潤パラジウム(90mg、活性炭上10%)を添加した。混合物に水素を5分間散布し、次いで水素下(15psi)にて45℃で16時間撹拌した。Celite(登録商標)のパッドに通して懸濁液をろ過し、パッドを酢酸エチル(10mL)で洗浄した。ろ液のpHをトリフルオロ酢酸で4~6に調整し、減圧下で濃縮乾固し、白色固体として中間体56(1.0g、粗製)を得て、これをさらに精製せずに次の段階に対して使用した。
4-(3,4-ジニトロフェニル)-2,2-ジフルオロモルホリン
n-ブタノール(20mL)中の4-フルオロ-1,2-ジニトロベンゼン(777mg、4.18mmol)、中間体56(2,2-ジフルオロモルホリントリフルオロアセテート)(900mg、粗製)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(1.47g、11.4mmol)からなる溶液を80℃で15時間撹拌し、その後室温まで冷却した。反応混合物を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:石油エーテル:酢酸エチル、10:1~0:1)によって精製し、黄色固体として中間体57(700mg、95%純度)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 8.12(d,J=9.3Hz,1H),7.60(d,J=2.9Hz,1H),7.24(dd,J=2.9,9.5Hz,1H),4.20(t,J=5.1Hz,2H),4.10(t,J=8.6Hz,2H),3.68(t,J=4.9Hz,2H)
4-(2,2-ジフルオロモルホリノ)ベンゼン-1,2-ジアミン
活性炭担持湿潤パラジウム(50mg、活性炭上10%)を100mL丸底フラスコ中の中間体57(4-(3,4-ジニトロフェニル)-2,2-ジフルオロモルホリン)(500mg、1.73mmol)及びメタノール(10mL)からなる溶液に添加した。混合物に5分間にわたり水素を散布し、次いで水素下(15psi)にて45℃で16時間撹拌し、その後、室温まで冷却した。懸濁液をCelite(登録商標)のパッドに通してろ過し、パッドを酢酸エチル(10mL)で洗浄した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、褐色固体として中間体58(390mg、95%純度、93%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 6.39(d,J=8.2Hz,1H),6.22(d,J=2.6Hz,1H),6.04(dd,J=2.6,8.4Hz,1H),4.41(s,2H),4.12-4.03(m,4H),3.18(t,J=8.0Hz,2H),2.98(t,J=4.5Hz,2H).
実施例1に従い化合物26を合成するために使用される中間体61の調製
a)中間体60の調製
2-ニトロ-5-(4-(2,2,2-トリフルオロエチル)ピペラジン-1-イル)アニリン
n-ブタノール(5mL)中の1-(2,2,2-トリフルオロエチル)ピペラジン塩酸塩(1.00g、4.15mmol)、中間体59(5-フルオロ-2-ニトロアニリン)(0.432g、2.77mmol)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(2.4mL、14mmol)の溶液を80℃で18時間撹拌した。得られた混合物を酢酸エチル(20mL)に注いだ。分離した有機層を水(10mLx3)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固し、黄色固体として中間体60(836.5mg、粗製)を得て、これを次の段階に対して直接使用した。
4-(4-(2,2,2-トリフルオロエチル)ピペラジン-1-イル)ベンゼン-1,2-ジアミン
中間体60(2-ニトロ-5-(4-(2,2,2-トリフルオロエチル)ピペラジン-1-イル)-アニリン)(1.00g、3.29mmol)、亜鉛(1.08g、16.4mmol)、塩化アンモニウム(2.64g、49.3mmol)、THF(20mL)、エタノール(20mL)及び水(10mL)からなる溶液を95℃で3時間撹拌した。反応混合物を25℃に冷却し、ろ過した。ろ液を水(50mL)に注ぎ、酢酸エチル(70mLx3)で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:酢酸エチル:石油エーテル、0:1~1:1)によって精製し、褐色固体として中間体61(390mg、86.3%純度、37.3%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=1.55min,C12H17F3N4に対する計算質量274.14,m/z実測値275.1[M+H]+.
実施例1に従い化合物27を調製するために使用される中間体67の調製
a)中間体63の調製
2-フルオロ-6-ニトロ-3-(ピペリジン-1-イル)アニリン
n-ブタノール(400mL)中の中間体62(2,3-ジフルオロ-6-ニトロアニリン)(10.0g、57.4mmol)、ピペリジン(7.34g、86.2mmol)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(7.42g、57.4mmol)の溶液を80℃で18時間撹拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これを酢酸エチル(800mL)中で溶解させた。有機層を水(400mLx3)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、黄色固体として中間体63(10.02g、96.3%純度、70.2%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)7.74(dd,J=1.3,9.7Hz,1H),7.09(br.s.,2H),6.38(t,J=9.2Hz,1H),3.26-3.24(m,4H),1.60-1.58(m,6H)
tert-ブチル(2-フルオロ-6-ニトロ-3-(ピペリジン-1-イル)フェニル)カルバメート
アセトニトリル(50mL)中の中間体63(2-フルオロ-6-ニトロ-3-(ピペリジン-1-イル)アニリン)(2.00g、8.36mmol)、ジ-tert-ブチルジカルボネート((Boc)2O)(3.65g、16.7mmol)及び4-ジメチルアミノピリジン(DMAP)(204mg、1.67mmol)の溶液を80℃で2時間撹拌した。反応物をジクロロメタン(100mL)に注いだ。有機層を水(300mL)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、ろ過した。ろ液を蒸発させ、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:酢酸エチル:石油エーテル、0:1~1:3)によって精製し、黄色固体として中間体64(2.2g、57.8%収率、96.5%純度)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)8.02-7.95(m,1H),7.16(t,J=9.2Hz,1H),3.26-3.24(m,4H),1.62-1.60(m,6H),1.33(s,18H)
tert-ブチル(2-フルオロ-6-ニトロ-3-(2-オキソピペリジン-1-イル)フェニル)カルバメート
大気下で、23℃の水(30mL)中の酸化ルテニウム(IV)(115mg、0.865mmol)の混合物に過ヨウ素酸ナトリウム(3.70g、17.3mmol)を添加した。23℃で3分間撹拌した後、酢酸エチル(30mL)及び中間体64(tert-ブチル(2-フルオロ-6-ニトロ-3-(ピペリジン-1-イル)フェニル)カルバメート)(1.90g、4.32mmol)を添加した。混合物を23℃で2時間撹拌した。Celite(登録商標)のパッドに通して反応混合物をろ過し、ろ液を酢酸エチル(100mLx3)で抽出した。合わせた有機層をブライン(200mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮し、褐色固体として中間体65(1.7g、86.7%収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)8.16-8.03(m,1H),7.80-7.65(m,1H),3.71-3.56(m,2H),2.47-2.41(m,2H),1.90-1.89(m,4H),1.47-1.26(m,18H)
1-(3-アミノ-2-フルオロ-4-ニトロフェニル)ピペリジン-2-オン
ジクロロメタン(10mL)中の中間体65(tert-ブチル(2-フルオロ-6-ニトロ-3-(2-オキソピペリジン-1-イル)フェニル)カルバメート)(1.70g、3.75mmol)の溶液に20℃でトリフルオロ酢酸(5mL)をゆっくりと添加した。反応混合物を室温で12時間撹拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮乾固して、粗製生成物を得て、これを酢酸エチル(500mL)及び水(200mL)中で懸濁し、飽和重炭酸ナトリウム溶液を添加することによってpHを8前後に調整した。分離した有機層を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固し、黄色固体として中間体66(1.05g、84.5%純度、93.5収率)を得た。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)7.92-7.81(m,1H),7.43-7.29(m,2H),6.64(dd,J=7.1,9.3Hz,1H),3.55(t,J=5.4Hz,2H),2.41(t,J=6.3Hz,2H),1.94-1.77(m,4H).
1-(3,4-ジアミノ-2-フルオロフェニル)ピペリジン-2-オン
メタノール(50mL)中の中間体66(1-(3-アミノ-2-フルオロ-4-ニトロフェニル)ピペリジン-2-オン)(1.05g、4.15mmol)及び活性炭担持湿潤パラジウム(100mg、活性炭上10%)の溶液を水素下(15psi)にて35℃で2時間撹拌した。反応混合物を25℃に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、褐色固体として中間体67(900mg、75.5%純度、73.4%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=0.69min,C11H14FN3Oに対する計算質量223.11,m/z実測値224.1[M+H]+.
実施例1に従い化合物28を合成するために使用される中間体70の調製
a)中間体68の調製
3-フルオロ-2-メチル-6-ニトロアニリン
中間体68を国際公開第2007115947A1号パンフレットに記載のように合成した。
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)7.98(dd,J=9.6Hz,1H),7.40(br.s.,2H),6.54(t,J=9.0Hz,1H),2.09-2.07(m,3H)
2-メチル-3-モルホリノ-6-ニトロアニリン
ジメチルスルホキシド(80mL)中の中間体68(3-フルオロ-2-メチル-6-ニトロアニリン)(1.50g、8.82mmol)及び炭酸カリウム(2.44g、17.6mmol)の溶液にモルホリン(1.16mL、13.2mmol)を添加し、混合物を100℃で15時間撹拌した。混合物を水(200mL)に注いだ。混合物を酢酸エチル(150mLx2)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を蒸発させ、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(溶出液:酢酸エチル:石油エーテル=0:1~1:1)によって精製して、黄色固体として中間体69(1.33g、97.7%純度、62.1%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=2.13min,C11H15N3O3に対する計算質量237.11,m/z実測値238.1[M+H]+.
3-メチル-4-モルホリノベンゼン-1,2-ジアミン
中間体69(2-メチル-3-モルホリノ-6-ニトロアニリン)(1.00g、4.22mmol)、亜鉛(1.38g、21.1mmol)、塩化アンモニウム(3.38g、63.2mmol)、THF(8mL)、エタノール(8mL)及び水(4mL)からなる溶液を95℃で2時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を水(50mL)に注ぎ、酢酸エチル(100mLx3)で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、褐色固体として中間体70(870mg、96.7%純度、96.3%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B、方法6):RT=1.34min,C11H17N3Oに対する計算質量207.14,m/z実測値208.2[M+H]+.
化合物7
2-メチル-7-(((S*)-1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-6-(6-((R*)-2-(トリフルオロメチル)-モルホリノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件42%B~72%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、黄色固体として化合物7(104mg、98.6%純度、24.6%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.72min,C25H24F3N9O2に対する計算質量539.20,m/z実測値540.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker):δ=12.95-12.90(m,1H),12.72-12.62(m,1H),10.88(br.s.,1H),8.88-8.82(m,2H),7.68-7.64(m,1H),7.56(d,J=8.5Hz,0.4H),7.49(d,J=8.5Hz,0.6H),7.44-7.39(m,1H),7.33-7.29(m,0.6H),7.20-7.16(m,0.4H),7.00-6.95(m,1H),6.53-6.42(m,1H),4.45-4.33(m,1H),4.15-4.07(m,1H),4.02-3.92(m,3H),3.90-3.78(m,1H),3.72-3.62(m,1H),3.55-3.47(m,1H),2.89-2.71(m,2H),1.79-1.69(m,3H).
SFC(方法13):RT=1.32min,ピーク領域:97.6%.
2-メチル-7-(((S*)-1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-6-(6-((S*)-2-(トリフルオロメチル)-モルホリノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件42%B~72%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、黄色固体として化合物8(32.0mg、99.1%純度、8.31%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.77min,C25H24F3N9O2に対する計算質量539.20,m/z実測値540.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)δ=12.96-12.89(m,1H),12.71-12.62(m,1H),10.87(br.s.,1H),8.89-8.81(m,2H),7.69-7.64(m,1H),7.56(d,J=8.8Hz,0.4H),7.49(d,J=8.5Hz,0.6H),7.45-7.39(m,1H),7.33-7.29(m,0.6H),7.20-7.16(m,0.4H),7.01-6.94(m,1H),6.53-6.42(m,1H),4.46-4.33(m,1H),4.16-4.07(m,1H),4.01-3.92(m,3H),3.89-3.79(m,1H),3.71-3.62(m,1H),3.55-3.46(m,1H),2.88-2.72(m,2H),1.79-1.70(m,3H).
SFC(方法10):RT=1.02min,ピーク領域:98.7%.
(S*)-6-(5-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件30%B~60%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、黄色固体として化合物9(16.9mg、94.0%純度、8.71%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=4.49min,C24H24FN9O2に対する計算質量489.20,m/z実測値490.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=12.97(br.s.,1H),12.60-12.50(m,1H),10.90-10.83(m,1H),8.89-8.78(m,2H),7.63(d,J=4.6Hz,1H),7.48-7.30(m,2.5H),7.18(d,J=7.7Hz,0.5H),6.48-6.36(m,1H),3.93(d,J=6.4Hz,3H),3.78-3.71(m,4H),3.01-2.92(m,4H),1.74-1.63(m,3H).
SFC(方法14):RT=2.73min,ピーク領域:98.2%.
(S*)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-5-(トリフルオロメチル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をprep.HPLC(カラム:P Agela Durashell C18 150*25 5u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件55%B~85%)により精製した。回収した純粋な分画を真空下で蒸発させて溶媒の殆どを除去し、次いで凍結乾燥して乾固した。残渣を超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:カラム:AD(250mm*30mm、5um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=60:40、60mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)によりさらに分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発乾固した。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、淡黄色固体として化合物10(61.8mg、100%純度、5.30%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=5.67min,C24H23F3N8O3に対する計算質量528.18,m/z実測値529.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=13.31(s,1H),12.28(d,J=8.6Hz,0.5H),12.20(d,J=8.6Hz,0.5H),11.02(s,1H),8.38(d,J=4.9Hz,1H),8.09-8.02(m,1.5H),7.91(s,0.5H),7.80(s,0.5H),7.74(d,J=1.8Hz,1H),7.72(s,0.5H),6.44(qd,J=6.7,13.8Hz,1H),4.06(s,3H),3.79-3.65(m,4H),2.97-2.79(m,4H),1.70(t,J=6.6Hz,3H).
SFC(方法18):RT=5.07min,ピーク領域:100.0%.
(R*)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-5-(トリフルオロメチル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
混合物をprep.HPLC(カラム:P Agela Durashell C18 150*25 5u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件55%B~85%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させて溶媒の殆どを除去し、次に凍結乾燥して乾固した。残渣を超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:カラム:AD(250mm*30mm、5um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=60:40、60mL/min;カラム温度:38℃ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)によりさらに分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発乾固した。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、淡黄色固体として化合物11(57.6mg、99.5%純度、4.91%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=5.66min,C24H23F3N8O3に対する計算質量528.18,m/z実測値529.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=13.31(s,1H),12.29(d,J=8.4Hz,0.5H),12.20(d,J=8.6Hz,0.5H),11.02(s,1H),8.39(d,J=4.6Hz,1H),8.08-8.03(m,1.5H),7.91(s,0.5H),7.80(s,0.5H),7.74(d,J=1.8Hz,1H),7.72(s,0.5H),6.50-6.38(m,1H),4.07(s,3H),3.77-3.66(m,4H),2.96-2.81(m,4H),1.76-1.63(m,3H).
SFC(方法18):RT=5.63min,ピーク領域:97.6%.
6-(6-((2R,6R)-2,6-ジメチルモルホリノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-(((S*)-1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、得られた混合物を減圧下で濃縮乾固し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件22%B~52%)により精製した。純粋な分画を回収し、蒸発乾固した。次に残渣を水(20mL)中で再懸濁し、凍結乾燥して乾固し、赤色固体として生成物を得た。化合物を超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30mm、10um));移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O IPA、A:B=45:55、80mL/min)によりさらに精製した。分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固し、黄色固体として化合物12(6.5mg、99.1%純度、7.08%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.17min,C26H29N9O2に対する計算質量499.24,m/z実測値500.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)δ 12.87(s,0.5H),12.85(s,0.5H),12.69(d,J=8.3Hz,0.5H),12.64(d,J=8.3Hz,0.5H),10.87(br.s.,0.5H),10.87(s,0.5H),8.89-8.80(m,2H),7.65(d,J=3.8Hz,1H),7.51(d,J=8.8Hz,0.5H),7.45(d,J=8.5Hz,0.5H),7.41(t,J=4.8Hz,1H),7.18(d,J=2.0Hz,0.5H),7.06(s,0.5H),6.89(d,J=8.8Hz,1H),6.52-6.40(m,1H),4.15-4.04(m,2H),3.98-3.90(m,3H),3.20-3.06(m,2H),2.82(dd,J=5.8,11.8Hz,2H),1.77-1.69(m,3H),1.27-1.23(m,6H).
SFC(方法10):RT=1.05min,ピーク領域:99.5%.
(S)-6-(7-フルオロ-6-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、得られた混合物を減圧下で濃縮乾固して残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Gemini 150*25 5um、移動相A:水(10mM NH4HCO3)、移動相B:アセトニトリル、流速:30mL/min、勾配条件45%B~70%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水(20mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固し、薄黄色固体として化合物13(20.5mg、98.9%純度、18.6%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=5.05min,C25H25FN8O2に対する計算質量488.21,m/z実測値489.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 13.39(s,0.1H),13.11(s,0.9H),12.68(d,J=7.9Hz,0.9H),12.43(d,J=8.8Hz,0.1H),11.07(s,0.1H),10.94(s,0.9H),8.87(d,J=4.9Hz,0.3H),8.83(d,J=4.9Hz,1.7H),7.72(s,0.1H),7.68(s,0.9H),7.49-7.40(m,2H),7.15(d,J=6.6Hz,0.1H),7.11-7.04(m,0.9H),6.51-6.37(m,1H),4.02-3.95(m,5H),3.50(t,J=10.8Hz,2H),3.21(t,J=12.0Hz,1H),1.90-1.77(m,2H),1.76-1.64(m,5H).
SFC(方法13):RT=1.19min,ピーク領域:100%.
(S*)-6-(7-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Xtimate C18 150*25mm*5um、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:25mL/min、勾配条件27%B~57%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水(20mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、薄黄色固体として化合物14(20.0mg、98.6%純度、16.1%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(ジーンラル(Geenral)手順A、方法1):RT=4.51min,C24H24FN9O2に対する計算質量489.20,m/z実測値490.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 13.32(s,0.2H),13.05(s,0.8H),12.68(d,J=7.9Hz,0.8H),12.41(d,J=8.2Hz,0.2H),11.06(br.s.,0.2H),10.92(s,0.8H),8.86(d,J=4.9Hz,0.5H),8.82(d,J=4.9Hz,1.5H),7.72(s,0.2H),7.67(s,0.8H),7.46-7.36(m,2H),7.00-6.89(m,1H),6.51-6.37(m,1H),4.01-3.93(m,3H),3.78(t,J=4.5Hz,4H),3.09-2.95(m,4H),1.75-1.68(m,3H).
SFC(方法13):RT=1.15min,ピーク領域:100%.
(S*)-6-(7-フルオロ-6-(ピペリジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び化合物16
(R*)-6-(7-フルオロ-6-(ピペリジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Xtimate C18 150 x 25mm x 5um、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件22%B~52%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、ラセミ生成物を得た。ラセミ生成物を超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:C2(250mm 30mm、10um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O MeOH、A:B=60:40、55mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により分離した。分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して、黄色固体として化合物15(10.0mg、100%純度、1.18%収率)及び黄色固体として化合物16(9.3mg、95.4%純度、1.04%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.79min,C25H26FN9Oに対する計算質量487.22,m/z実測値488.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.25(br.s.,0.2H),13.00(br.s.,0.8H),12.66(d,J=7.9Hz,0.8H),12.40(d,J=7.7Hz,0.2H),11.05(br.s.,0.2H),10.92(br.s.,0.8H),8.84(d,J=4.9Hz,0.4H),8.80(d,J=4.9Hz,1.6H),7.70(s,0.2H),7.65(s,0.8H),7.41(t,J=4.9Hz,1H),7.35(d,J=8.6Hz,1H),6.97-6.87(m,1H),6.47-6.35(m,1H),3.99-3.89(m,3H),3.02-2.87(m,4H),1.78-1.59(m,7H),1.58-1.45(m,2H).
SFC(方法21):RT=8.17min、ピーク:100%.
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.78min,C25H26FN9Oに対する計算質量487.22,m/z実測値488.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.34-13.26(br.s.,0.2H),13.01(br.s.,0.8H),12.66(d,J=7.9Hz,0.8H),12.39(d,J=8.2Hz,0.2H),10.93(br.s.,1H),8.84(d,J=4.9Hz,0.4H),8.80(d,J=4.9Hz,1.6H),7.70(s,0.2H),7.65(s,0.8H),7.41(t,J=4.9Hz,1H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),6.96-6.88(m,1H),6.45-6.36(m,1H),3.97-3.92(m,3H),3.00-2.90(m,4H),1.73-1.63(m,7H),1.56-1.47(m,2H).
SFC(方法21):RT=10.4min、ピーク:99.5%.
(S*)-6-(4,7-ジフルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]131イリジン(131yridine)-5(4H)-オン
反応が完了した後、得られた混合物を酢酸エチル(20mL)で抽出した。分離した有機層を水(10mLx3)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固した。残渣をprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件46%B~76%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、紫色の固形物として化合物17(5.0mg、98.3%純度、10.3%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=4.92min,C24H23F2N9O2に対する計算質量507.19,m/z実測値508.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.72(s,1H),11.76(s,1H),11.10(s,1H),8.86-8.71(m,2H),7.73(s,1H),7.39(s,1H),6.89-6.41(m,2H),3.97(s,3H),3.77(s,4H),3.32-2.92(m,4H),1.72(d,J=6.8Hz,3H).
SFC(方法16):RT=4.87min、ピーク:98.9%.
(S)-2-メチル-6-(6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-フェニルエチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮乾固した。残渣をジクロロメタン(30mLx3)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4(固体)上で乾燥させ、ろ過し、ろ液を減圧下で濃縮乾固し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウムv/v)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件48%B~78%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、凍結乾燥して乾固して、黄色固体として化合物18(1.8mg、98.6%純度、0.98%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.35min,C27H30N8Oに対する計算質量482.25,m/z実測値483.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=12.88(br.s.,0.4H),12.86(br.s.,0.6H),12.63(d,J=9.3Hz,0.4H),12.54(d,J=8.6Hz,0.6H),10.87(br.s.,1H),7.67-7.64(m,1H),7.51(d,J=8.8Hz,0.4H),7.48(d,J=8.8Hz,0.6H),7.47-7.45(m,1.6H),7.43(s,0.4H),7.34(dt,J=4.0,7.6Hz,2H),7.24-7.18(m,1.6H),7.10(s,0.4H),6.95-6.88(m,1H),6.45-6.34(m,1H),4.01(s,3H),3.17-3.09(m,4H),2.60-2.53(m,4H),2.31-2.24(m,3H),1.72-1.64(m,3H).
SFC(方法10):RT=2.71min,ピーク領域:100%.
(Rac)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-5-(トリフルオロメチル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件40%B~70%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水(15mL)中で懸濁し、凍結乾燥して、薄黄色固体として化合物19(10.0mg、5.90%収率、98.1%純度)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=5.66min,C25H24F3N9O2に対する計算質量539.20,m/z実測値540.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)δ 13.30(s,0.5H),13.28(s,0.5H),12.65(d,J=8.0Hz,0.5H),12.53(d,J=8.3Hz,0.5H),10.96(br.s.,0.5H),10.96(br.s.,0.5H),8.89(d,J=4.8Hz,1H),8.85(d,J=4.8Hz,1H),8.05(s,0.5H),7.92(s,0.5H),7.83(s,0.5H),7.74(s,0.5H),7.69(s,1H),7.47-7.39(m,1H),6.53-6.44(m,1H),4.00-3.94(m,3H),3.80-3.66(m,4H),2.97-2.90(m,2H),2.89-2.83(m,2H),1.74(dd,J=3.5,6.8Hz,3H).
SFC(方法16):RT=1.99min,ピーク領域:50.8%;RT=2.15min,ピーク領域:49.2%.
(S*)2-メチル-6-(6-モルホリノ-5-(トリフルオロメチル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び
化合物21
(R*)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-5-(トリフルオロメチル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30 mm、10 um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=55:45、80mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により化合物19を分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、薄黄色固体として化合物20(7.9mg、99.2%純度、4.71%収率)及び薄黄色固体として化合物21(4.5mg、99.6%純度、2.69%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=5.53min,C25H24F3N9O2に対する計算質量539.20,m/z実測値540.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 13.30(br.s.,0.5H),13.28(s,0.5H),12.65(d,J=8.2Hz,0.5H),12.53(d,J=8.4Hz,0.5H),10.97(br.s.,1H),8.89(d,J=4.9Hz,1H),8.85(d,J=4.9Hz,1H),8.05(s,0.5H),7.92(s,0.5H),7.83(s,0.5H),7.74(s,0.5H),7.69(s,1H),7.49-7.37(m,1H),6.49(quint,J=7.1Hz,1H),3.98(s,3H),3.81-3.62(m,4H),3.03-2.77(m,4H),1.80-1.68(m,3H).
SFC(方法16):RT=5.34min,ピーク領域:100%.
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=5.50min,C25H24F3N9O2に対する計算質量539.20,m/z実測値540.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 13.31(br.s.,0.5H),13.29(br.s.,0.5H),12.65(d,J=8.2Hz,0.5H),12.52(d,J=8.4Hz,0.5H),10.97(br.s.,1H),8.89(d,J=4.9Hz,1H),8.85(d,J=4.9Hz,1H),8.05(s,0.5H),7.92(s,0.5H),7.83(s,0.5H),7.74(s,0.5H),7.69(s,1H),7.48-7.39(m,1H),6.49(quint,J=7.1Hz,1H),3.98(s,3H),3.86-3.60(m,4H),3.02-2.77(m,4H),1.80-1.67(m,3H).
SFC(方法16):RT=5.82min,ピーク領域:99.8%.
(S*)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-6-(6-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini 150*25mm*10um、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウム、v/v)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件30%B~60%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させて、白色固体として化合物22(32.9mg、96.3%純度、9.57%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.22min,C25H26N8O2に対する計算質量470.22,m/z実測値471.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 12.97-12.92(m,1H),12.79-12.71(m,1H),10.89(d,J=5.50Hz,1H),8.86(t,J=5.20Hz,2H),7.67(s,1H),7.59-7.50(m,1.5H),7.45-7.40(m,1.5H),7.07(d,J=8.20Hz,1H),6.52-6.43(m,1H),4.01-3.94(m,5H),3.49-3.41(m,2H),2.93-2.81(m,1H),1.80-1.69(m,7H)
SFC(方法10):RT=1.38min,ピーク領域:95.8%.
(S*)-2-メチル-7-((2-メチル-1-(ピリミジン-2-イル)プロピル)アミノ)-6-(6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をジクロロメタン(20mL)で抽出した。分離した有機層を水(10mLx5)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して、粗製生成物を得て、これをprep.薄層クロマトグラフィー(ジクロロメタン:メタノール=10:1)により精製した。次に、prep.HPLC(カラム:Gemini 150*25 5u、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウムv/v)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件25%B~55%)により生成物をさらに精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣をアセトニトリル(2mL)及び水(10mL)中で再懸濁した。混合物を凍結乾燥して乾固して、黄色粉末として化合物23(10.1mg、97.6%純度、4.64%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=4.21min,C26H31N11Oに対する計算質量513.27,m/z実測値514.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 13.03(s,0.3H),12.98(s,0.7H),12.57(d,J=9.0Hz,0.3H),12.42(d,J=9.0Hz,0.7H),10.89(br.s.,1H),8.80(d,J=5.1Hz,2H),8.55-8.40(m,1H),7.63(s,1H),7.37(t,J=4.9Hz,1H),6.99(s,0.7H),6.78(s,0.3H),6.47-6.40(m,1H),3.92-3.89(m,3H),3.44-3.38(m,4H),2.65-2.57(m,1H),2.48-2.42(m,4H),2.23(s,3H),1.08-1.00(m,6H)
SFC(方法12):RT=2.11min,ピーク領域:100%.
6-(6-((シス)-2,6-ジメチルモルホリノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-(((S)-1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をジクロロメタン(30mLx3)で抽出した。合わせた有機層を水(30mLx3)及びブライン(30mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件20%B~50%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。次に、残渣を凍結乾燥して乾固して、黄色固体として所望の化合物を得た。超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30mm、10um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O IPA、A:B=55:45、50mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)によって生成物をさらに精製し、黄色固体として化合物24(3.20mg、98.0%純度、3.05%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.93min,C26H29N9O2に対する計算質量499.24,m/z実測値500.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 12.87(br.s.,0.4H),12.85(br.s.,0.6H),12.68(d,J=8.4Hz,0.4H),12.64(d,J=8.2Hz,0.6H),10.87(br.s.,1H),8.84(dd,J=5.0,6.3Hz,2H),7.65(d,J=4.9Hz,1H),7.51(d,J=8.6Hz,0.4H),7.45(d,J=8.8Hz,0.6H),7.43-7.38(m,1H),7.20(d,J=2.0Hz,0.6H),7.06(s,0.4H),6.92(d,J=8.8Hz,1H),6.54-6.41(m,1H),3.95(d,J=7.3Hz,3H),3.84-3.68(m,2H),3.61-3.45(m,2H),2.36-2.21(m,2H),1.79-1.66(m,3H),1.17(d,J=6.2Hz,6H)
SFC(方法10):RT=1.02min,ピーク領域:100%.
(S)-6-(6-(2,2-ジフルオロモルホリノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をジクロロメタン(10mLx3)で抽出した。合わせた有機層をブライン(10mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Kromasil 150x25mm x 10μm、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウム)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件32%B~62%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して、白色粉末として化合物25(5.00mg、95.1%純度、4.7%収率)を得た。
LCMS(ESI)(ジーンラル(Geenral)手順A、方法2):RT=4.49min,C24H23F2N9O2に対する計算質量507.19,m/z実測値508.0[M+1]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)δ 12.94-12.93(m,1H),12.70(d,J=8.4,0.5H),12.64(d,J=8.4,0.5H),10.89(s,1H),8.86(d,J=4.5Hz,2H),7.66(d,J=3.8Hz,1H),7.56(d,J=8.5Hz,0.5H),7.50(d,J=8.5Hz,0.5H),7.42(t,J=4.9Hz,1H),7.28(d,J=2.0Hz,0.5H),7.16(d,J=1.2Hz,0.5H),7.00-6.93(m,1H),6.55-6.41(m,1H),4.25-4.17(m,2H),3.96(d,J=4.0Hz,3H),3.60-3.47(m,2H),3.32-3.27(m,2H),1.73(t,J=6.8Hz,3H).
SFC(方法19):RT=5.06min,ピーク領域:99.1%.
(S*)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-6-(6-(4-(2,2,2-トリフルオロエチル)ピペラジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮して、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Xtimate C18 150*25mm*5um、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件27%B~37%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(50mL)中で懸濁し、凍結乾燥して乾固し、粗製化合物を得た。超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:OJ(250mm*30mm,10um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O MeOH、A:B=65:35、50mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により粗製化合物を分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(50mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固し、黄色固体として化合物26(1.5mg、99.85%純度、1.684%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.10min,C26H27F3N10Oに対する計算質量552.23,m/z実測値553.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)12.85(br.s,1H),12.73(d,J=7.9Hz,0.4H),12.64(d,J=8.2Hz,0.6H),10.86(br.s,1H),8.85(d,J=3.1Hz,1H),8.84(d,J=3.1Hz,1H),7.65(s,1H),7.50(d,J=8.6Hz,0.4H),7.44(d,J=9.3Hz,0.6H),7.42-7.37(m,1H),7.21-7.17(m,0.6H),7.09-7.05(m,0.4H),6.93-6.86(m,1H),6.51-6.41(m,1H),3.96(s,3H),3.26-3.21(m,2H),3.16-3.09(m,4H),2.85-2.77(m,4H),1.72(t,J=6.2Hz,3H)
SFC(方法12):RT=2.05min,ピーク領域:100%.
(S)-6-(7-フルオロ-6-(2-オキソピペリジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をEtOAc(200mL)で抽出した。分離した有機層を水(100mL)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini 150*25mm*10um、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウムv/v)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件24%B~54%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を凍結乾燥して乾固し、白色固体として化合物27(19.3mg、99.1%純度、7.91%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=4.25min,C25H24FN9O2に対する計算質量501.20,m/z実測値502.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.22(br.s.,1H),12.65-12.59(m,1H),8.84-8.78(m,2H),7.69(s,1H),7.52-7.46(m,1H),7.43(t,J=4.9Hz,1H),7.07-6.98(m,1H),6.45(quint,J=7.1Hz,1H),3.98(s,3H),3.66-3.53(m,2H),2.45-2.37(m,2H),1.96-1.83(m,4H),1.70(d,J=6.8Hz,3H)
SFC(方法13):RT=0.75min,ピーク領域:100%.
(S*)-2-メチル-6-(7-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件30%B~60%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(50mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固し、これを超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30mm、5um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=50:50、50mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(50mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、黄色固体として化合物28(26.2mg、97.7%純度、10.5%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=4.71min,C25H27N9O2に対する計算質量485.23,m/z実測値486.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.04-12.90(m,1H),12.87(br s,1H),10.92(s,1H),8.86(s,1H),8.85(s,1H),7.69(s,1H),7.48-7.44(m,1H),7.44-7.40(m,1H),7.03-6.93(m,1H),6.51(t,J=6.7Hz,1H),4.00(s,3H),3.84-3.72(m,4H),2.96-2.81(m,4H),2.71-2.58(m,3H),1.70(d,J=6.8Hz,3H)
SFC(方法13):RT=2.47min,ピーク領域:100%.
(S*)-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((2-メトキシ-1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2-メチル-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び
化合物30
(R*)-6-(4-フルオロ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((2-メトキシ-1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2-メチル-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をジクロロメタン(100mL)で抽出した。分離した有機層を水(50mLx3)で洗浄し、Na2SO4上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件30%B~60%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を凍結乾燥して乾固して、ラセミ生成物を得て、これを超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30mm、5um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O IPA、A:B=60:40、50mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(50mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、白色固体として化合物29(26.3mg、96.4%純度、12.8%収率)及び白色固体として化合物30(21.9mg、100%純度、11.1%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.07min,C25H26FN9O3に対する計算質量519.21,m/z実測値520.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.24-13.21(m,0.1H),13.01-12.95(m,0.9H),12.52-12.46(m,0.9H),12.46-12.42(m,0.1H),11.06(s,0.1H),10.91(s,0.9H),8.83(d,J=4.9Hz,0.2H),8.77(d,J=4.9Hz,1.8H),7.69(s,0.1H),7.64(s,0.9H),7.43-7.41(m,0.1H),7.40-7.36(m,0.9H),7.06-7.02(m,0.9H),6.89-6.87(m,0.1H),6.87-6.82(m,0.1H),6.78-6.71(m,0.9H),6.64-6.59(m,0.1H),6.56-6.49(m,0.9H),4.16-4.09(m,1H),4.03-3.96(m,1H),3.92(s,0.3H),3.89(s,2.7H),3.80-3.72(m,4H),3.33-3.30(m,3H),3.15-3.06(m,4H)
SFC(方法20):RT=7.83min,ピーク領域:100%.
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.07min,C25H26FN9O3に対する計算質量519.21,m/z実測値520.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)13.24-13.22(m,0.1H),13.02-12.95(m,0.9H),12.52-12.47(m,0.9H),12.46-12.43(m,0.1H),11.06(s,0.1H),10.91(s,0.9H),8.83(d,J=4.9Hz,0.2H),8.77(d,J=4.9Hz,1.8H),7.69(s,0.1H),7.64(s,0.9H),7.43-7.40(m,0.1H),7.40-7.35(m,0.9H),7.07-7.02(m,0.9H),6.89-6.88(m,0.1H),6.87-6.82(m,0.1H),6.78-6.71(m,0.9H),6.64-6.58(m,0.1H),6.55-6.49(m,0.9H),4.16-4.10(m,1H),4.03-3.96(m,1H),3.92(s,0.3H),3.89(s,2.7H),3.80-3.71(m,4H),3.33-3.31(m,3H),3.15-3.06(m,4H)
SFC(方法20):RT=11.76min,ピーク領域:100%.
(S*)-2-メチル-6-(6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(3-(トリフルオロメチル)ピリジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン0.3ホルメート
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをジクロロメタン(10mLx2)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮し、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件2.5%B~16%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(30mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、化合物31(2.2mg、97.6%純度、4.07%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(ジーンラル(Geenral)手順A、方法2):RT=4.49min,C27H28F3N9Oに対する計算質量551.24,m/z実測値552.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)12.86-12.82(m,0.4H),12.78-12.76(m,0.6H),12.76-12.73(m,1H),10.88(br.s,0.4H),10.87(br.s,0.6H),9.13-9.07(m,1H),8.37(br.s,0.3H),8.21(d,J=7.3Hz,1H),7.70(s,0.6H),7.69(s,0.4H),7.65-7.58(m,1H),7.47(d,J=8.8Hz,0.4H),7.44(d,J=8.8Hz,0.6H),7.17(d,J=2.0Hz,0.6H),7.05(d,J=1.0Hz,0.4H),6.95-6.85(m,2H),4.06-3.99(m,3H),3.15-3.07(m,4H),2.57-2.52(m,4H),2.28-2.20(m,3H),1.69-1.61(m,3H)
SFC(方法17):RT=2.92min,ピーク領域:100%.
(R*)-2-メチル-6-(6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(3-(トリフルオロメチル)ピリジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン0.2ホルメート
反応が完了した後、混合物を濃縮して溶媒の殆どを除去し、これをジクロロメタン(10mLx2)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を濃縮し、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件2.5%B~16%)により精製した。生成物を水(30mL)中で懸濁し、凍結乾燥して乾固し、化合物32(4.2mg、97.4%純度、7.82%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=4.35min,C27H28F3N9Oに対する計算質量551.24,m/z実測値552.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)12.87-12.73(m,2H),10.89(br.s,0.4H),10.88(s,0.6H),9.14-9.08(m,1H),8.22(br.d,J=8.2Hz,1H),8.14(s,0.2H),7.71(s,0.5H),7.70(s,0.5H),7.65-7.58(m,1H),7.50(d,J=8.6Hz,0.4H),7.46(d,J=8.8Hz,0.6H),7.20(d,J=1.0Hz,0.6H),7.09(d,J=1.0Hz,0.4H),6.95-6.87(m,2H),4.06-3.99(m,J=3.5Hz,3H),3.24-3.18(m,3H),2.95-2.69(m,4H),2.46-2.37(m,4H),1.70-1.62(m,3H)
SFC(方法17):RT=3.98min,ピーク領域:98.3%.
(S)-2-メチル-6-(6-(ピペリジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリジン-2-イル)エチル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをジクロロメタン:メタノール(20mL、v/v=10:1)で抽出した。有機層を分離し、真空下で回収した。粗製生成物をフラッシュカラム(ジクロロメタン:メタノール100:0~90:10)によって精製し、黄色固体として生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini 150 mm*25mm、10μm、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウム)、移動相B:アセトニトリル、流速:25mL/min、勾配条件15%B~45%)によりさらに精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、次いで凍結乾燥して、白色粉末として化合物33(3.5mg、95.1%純度、5.93%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.62min,C26H28N8Oに対する計算質量468.24,m/z実測値469.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)12.86(s,0.4H),12.82(s,0.6H),12.64(d,J=8.8Hz,0.4H),12.56(d,J=8.6Hz,0.6H),10.86(br s,1H),8.66-8.56(m,1H),8.41(br s,0.2H),7.81-7.72(m,1H),7.66(s,1H),7.48(dd,J=3.4,8.3Hz,1.4H),7.41(d,J=8.8Hz,0.6H),7.27(dd,J=4.7,7.2Hz,1H),7.19(d,J=2.0Hz,0.6H),7.06(d,J=2.2Hz,0.4H),6.95-6.84(m,1H),6.49-6.37(m,1H),4.00(d,J=2.2Hz,3H),3.08(q,J=5.1Hz,4H),1.75-1.59(m,7H),1.54(d,J=3.5Hz,2H).
SFC(方法10):RT=1.69min,ピーク領域:100%.
(S*)-2-メチル-6-(6-(ピペリジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び
化合物35
(R*)-2-メチル-6-(6-(ピペリジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物をジクロロメタン:メタノール(10:1、20mL)で抽出した。分離した有機層を蒸発乾固した。黄色固体として粗製生成物をフラッシュカラム(ジクロロメタン:メタノール、100:0~90:10)によって精製し、これを超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:OD(250mmx30mm、5um));移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=55:45、50mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)によりさらに分離した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、黄色固体として化合物34(2.6mg、97.5%純度、14.9%収率)及び黄色固体として化合物35(2.3mg、97.7%純度、13.2%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.74min,C25H27N9Oに対する計算質量469.2,m/z実測値470.1[M+H]+
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)12.83(s,0.4H),12.80(s,0.6H),12.73(br d,J=8.2Hz,0.4H),12.66(br.d.,J=8.2Hz,0.6H),10.90-10.81(m,1H),8.84(dd,J=2.4,4.9Hz,2H),7.66(s,1H),7.48(d,J=8.6Hz,0.4H),7.45-7.36(m,1.6H),7.19(d,J=1.8Hz,0.6H),7.06(s,0.4H),6.93-6.84(m,1H),6.54-6.39(m,1H),3.96(d,J=3.7Hz,3H),3.14-3.04(m,4H),1.78-1.62(m,7H),1.54(br.d.,J=5.1Hz,2H)
SFC(方法17):RT=5.19min,ピーク領域:99.2%.
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.76min,C25H27N9Oに対する計算質量469.23,m/z実測値470.1[M+H]+
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)12.83(s,0.4H),12.80(s,0.6H),12.73(br.d.,J=8.2Hz,0.4H),12.66(br.d.,J=7.9Hz,0.6H),10.91-10.82(m,1H),8.84(dd,J=2.4,4.9Hz,2H),7.66(s,1H),7.48(d,J=8.6Hz,0.4H),7.45-7.37(m,1.6H),7.19(d,J=2.0Hz,0.6H),7.06(s,0.4H),6.93-6.84(m,1H),6.52-6.39(m,1H),3.96(d,J=3.7Hz,3H),3.16-3.01(m,4H),1.75-1.63(m,7H),1.54(br.d.,J=5.3Hz,2H)
SFC(方法17):RT=6.64min,ピーク領域:96.8%.
(S*)-2-メチル-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)アミノ)-6-(6-((テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)オキシ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び
化合物37
(R*)-2-メチル-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)アミノ)-6-(6-((テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)オキシ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を得て、これをフラッシュクロマトグラフィーカラム(ジクロロメタン:メタノール、100:0~90:10)によって精製し、生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50 10u、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウムv/v)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件48%B~78%)によりさらに精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、凍結乾燥して乾固し、白色固体として化合物36(2.1mg、98.5%純度、2.32%収率)及び白色固体として化合物37(1.0mg、96.0%純度、1.08%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法8):RT=3.20min,C24H25N7O5に対する計算質量475.20,m/z実測値476.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,メタノール-d4)(Bruker)8.20(d,J=2.5Hz,1H),7.89(s,1H),7.59(s,1H),7.47(d,J=8.8Hz,0.6H),7.41(d,J=8.8Hz,0.4H),7.20(d,J=2.0Hz,0.4H),7.15(d,J=2.0Hz,0.6H),6.86(dt,J=2.3,8.0Hz,1H),6.61-6.44(m,1H),4.56(td,J=3.9,8.0Hz,1H),4.07(s,3H),4.02-3.95(m,2H),3.66-3.51(m,2H),2.12-1.99(m,2H),1.80-1.76(m,3H),1.76-1.70(m,2H).
SFC(方法13):RT=1.66min,ピーク領域:100%.
LC-MS(ESI)(一般的手順C、方法8):RT=3.17min,C24H25N7O4に対する計算質量475.20,m/z実測値476.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,メタノール-d4)(Bruker)8.20(d,J=2.5Hz,1H),7.89(s,1H),7.59(s,1H),7.47(d,J=8.8Hz,0.6H),7.41(d,J=8.8Hz,0.4H),7.20(d,J=2.0Hz,0.4H),7.15(d,J=2.0Hz,0.6H),6.86(dt,J=2.3,8.0Hz,1H),6.61-6.44(m,1H),4.56(td,J=3.9,8.0Hz,1H),4.07(s,3H),4.02-3.95(m,2H),3.66-3.51(m,2H),2.12-1.99(m,2H),1.80-1.76(m,3H),1.76-1.70(m,2H).
SFC(方法13):RT=2.55min,ピーク領域:99.4%.
(S)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン0.8ホルメート
反応が完了した後、混合物をジクロロメタン(20mLx3)で抽出した。合わせた有機層をブライン(20mLx3)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(ジクロロメタン:テトラヒドロフラン1:0~2:3)によって精製し、生成物を得て、これをtert-ブチルメチルエーテル(10mL)とともに粉砕し、粗製生成物を得た。粗製生成物をprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250x50 10um、移動相A:水(0.225%FA)、移動相B:アセトニトリル、勾配条件8%B~38%)によりさらに精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させ、次いで凍結乾燥して、黄色粉末として化合物38(213mg、97.7%純度、44.6%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=3.87min,C23H24N10O2に対する計算質量472.21,m/z実測値473.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ=13.09-12.98(m,1H),12.74(d,J=8.2Hz,0.3H),12.60(d,J=7.9Hz,0.7H),11.01-10.92(m,1H),8.92-8.83(m,2H),8.57(s,0.3H),8.54(s,0.7H),8.20(br.s.,0.8H),7.70(s,1H),7.46-7.39(m,1H),7.00(s,0.7H),6.91(s,0.3H),6.58-6.36(m,1H),4.02-3.94(m,3H),3.82-3.69(m,4H),3.45-3.30(m,4H),1.78-1.69(m,3H)
SFC(方法14):RT=3.46min,ピーク領域:97.3%
(S*)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-プロピル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び
化合物40
(R*)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-プロピル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10um、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウム)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件30%B~60%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固し、褐色固体として生成物を得た。超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mmx30mm、10μm);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O EtOH、A:B=55:45、50mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220-nm)により生成物を分離した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、次いで凍結乾燥して乾固し、褐色固体として化合物39(43.1mg、99.8%純度、17.0%収率)及び褐色固体として化合物40(17.3mg、97.3%純度、6.67%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.64min,C25H27N9O2に対する計算質量485.23,m/z実測値486.1[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)δ 12.91-12.82(m,1H),12.72-12.58(m,1H),10.87(br.s.,1H),8.88-8.79(m,2H),7.64(s,1H),7.56-7.36(m,2H),7.24-7.01(m,1H),6.95-6.86(m,1H),6.46-6.32(m,1H),3.94(s,3H),3.83-3.73(m,4H),3.16-3.05(m,4H),2.22-2.08(m,2H),1.05-0.93(m,3H)
SFC(方法13):RT=2.26min,ピーク領域:99.7%
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.65min,C25H27N9O2に対する計算質量485.23,m/z実測値486.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Bruker)δ 12.96-12.83(m,1H),12.72-12.57(m,1H),10.87(br s,1H),8.87-8.79(m,2H),7.64(s,1H),7.56-7.36(m,2H),7.24-7.02(m,1H),6.95-6.87(m,1H),6.44-6.33(m,1H),3.94(s,3H),3.83-3.73(m,4H),3.14-3.03(m,4H),2.23-2.08(m,2H),1.09-0.94(m,3H)
SFC(方法13):RT=1.64min,ピーク領域:100%
(S*)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(チアゾール-4-イル)エチル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
及び
化合物42
(R*)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(チアゾール-4-イル)エチル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10um、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウム)、移動相B:アセトニトリル、流速:22mL/min、勾配条件40%B~50%)により精製した。純粋な分画を回収し、揮発性物質を真空下で除去した。残渣を中水(10mL)で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、褐色固体としてラセミ生成物を得て、これを超臨界流体クロマトグラフィー(分離条件:AD(250mm*30mm、10um);移動相:A:超臨界CO2、B:0.1%NH3H2O IPA、A:B=50:50、50mL/min;カラム温度:38℃;ノズル圧力:100Bar;ノズル温度:60℃;エバポレーター温度:20℃;トリマー温度:25℃;波長:220nm)により分離して、黄色固体として化合物41化合物(6.5mg、99.4%純度、8.08%収率)及び黄色固体として化合物42(12.4mg、99.8%純度、15.5%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.78min,C23H24N8O2Sに対する計算質量476.17,m/z実測値477.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 12.92-12.85(m,1H),12.57(d,J=9.0Hz,0.4H),12.49(d,J=8.8Hz,0.6H),10.96-10.88(m,1H),9.11(d,J=2.0Hz,1H),7.74-7.67(m,1H),7.60-7.49(m,1.4H),7.44-7.39(m,0.6H),7.22-7.18(m,0.6H),7.07-7.02(m,0.4H),6.94-6.87(m,1H),6.69-6.57(m,1H),4.08-4.00(m,3H),3.81-3.73(m,4H),3.13-3.04(m,4H),1.79-1.70(m,3H)
SFC(方法10):RT=2.16min,ピーク領域:99.4%.
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法2):RT=3.77min,C23H24N8O2Sに対する計算質量476.2,m/z実測値477.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 12.91-12.85(m,1H),12.56(d,J=8.8Hz,0.4H),12.48(d,J=8.8Hz,0.6H),10.93-10.89(m,1H),9.11(d,J=2.0Hz,1H),7.72-7.68(m,1H),7.59-7.49(m,1.4H),7.42(d,J=8.8Hz,0.6H),7.22-7.18(m,0.6H),7.06-7.03(m,0.4H),6.94-6.88(m,1H),6.67-6.58(m,1H),4.06-4.01(m,3H),3.80-3.73(m,4H),3.12-3.05(m,4H),1.78-1.70(m,3H)
SFC(方法10):RT=2.79min,ピーク領域:98.1%.
(S)-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応が完了した後、ジクロロメタン(10mLx3)によって混合物を抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥させ、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮乾固し、粗製生成物を得て、これをprep.HPLC(カラム:Phenomenex Gemini 150*25mm*10um、移動相A:水(0.05%水酸化アンモニウムv/v)移動相B:アセトニトリル、流速:25mL/min、勾配条件26%B~56%)により精製した。純粋な分画を回収し、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を水(10mL)中で再懸濁し、得られた混合物を凍結乾燥して乾固して、白色固体として化合物43(116mg、95.8%純度、18.3%収率)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A、方法1):RT=4.04min,C24H26N10O2に対する計算質量486.22,m/z実測値487.0[M+H]+.
一般的手順A:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)(Varian)δ 13.05-12.97(m,1H),12.66(d,J=7.9Hz,0.3H),12.51(d,J=7.9Hz,0.7H),10.98-10.92(m,1H),8.88-8.80(m,2H),8.56(s,0.3H),8.52(s,0.7H),7.69(s,1H),7.44-7.36(m,1H),7.00(s,0.7H),6.89(s,0.3H),6.47-6.31(m,1H),4.39-4.10(m,2H),3.81-3.70(m,4H),3.43-3.36(m,4H),1.82-1.67(m,3H),1.39-1.26(m,3H)
SFC(方法14):RT=2.46min,ピーク領域:99.2%.
(R*)-2-メチル-7-((2-メチル-1-(ピリジン-2-イル)プロピル)アミノ)-6-(6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
HPLCのための一般的手順E、方法3を介して化合物を精製した。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=0.95min,C28H33N9Oに対する計算質量511.28,m/z実測値512.5[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.53(d,J=4.0Hz,1H),7.71(d,J=6.8Hz,1H),7.52-7.44(m,3H),7.24-7.18(m,2H),7.03-7.00(m,1H),6.42-6.41(m,1H),3.95(s,3H),3.25-3.22(m,4H),2.70-2.68(m,4H),2.58-2.56(m,1H),2.39(s,3H),1.16(t,J=6.4Hz,6H).
(S*)-2-メチル-7-((2-メチル-1-(ピリジン-2-イル)プロピル)アミノ)-6-(6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
HPLCのための一般的手順E、方法3を介して化合物を精製した。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=0.95min,C28H33N9Oに対する計算質量511.28,m/z実測値512.5[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.53(d,J=4.0Hz,1H),7.71(d,J=6.8Hz,1H),7.52-7.44(m,3H),7.24-7.18(m,2H),7.03-7.00(m,1H),6.42-6.41(m,1H),3.95(s,3H),3.25-3.22(m,4H),2.70-2.68(m,4H),2.58-2.56(m,1H),2.39(s,3H),1.16(t,J=6.4Hz,6H).
(S)-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)-アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:MeOH=150:1~50:1)によって精製して黄色固体として粗製生成物(600mg、44.8%収率)を得た。粗製化合物をprep.SFC(分離条件:機器:SFC80(Waters);カラム:OD 2.5*25cm、10um;移動相A:超臨界CO2、移動相B:IPA/ACN/DEA=60/40/0.2、A:B=50/50、80mL/min、カラム温度:25℃、背圧:100bar)によりさらに精製して、黄色固体として化合物46(262.95mg、43.8%収率、純度99.3%、ee:>99%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.20min,C25H27N9O2に対する計算質量485.54,m/z実測値486.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.86(d,J=2.4Hz,1H),12.63-12.58(m,1H),10.86(s,1H),8.82(d,J=4.8Hz,2H),7.65(d,J=1.6Hz,1H),7.54-7.36(m,2H),7.23-7.07(m,1H),6.94-6.87(m,1H),6.40-6.38(m,1H),4.24-4.19(m,2H),3.78-3.76(m,4H),3.11-3.10(m,4H),1.75(t,J=6.4Hz,3H),1.35-1.30(m,3H).
(S)-2-エチル-6-(6-モルホリノ-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-2-イル)-7-((1-(ピリジン-2-イル)エチル)-アミノ)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(CH2Cl2:MeOH=100:1)によって精製し、黄色固体として化合物47(139.8mg、収率28.8%、純度97.8%、ee:>99%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順C-2、方法2):RT=1.309min,C25H27N9O2に対する計算質量485.5,m/z実測値486.3[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.57-8.45(m,2H),7.78-7.71(m,1H),7.55-7.46(m,2H),7.26-7.25(m,1H),6.99-6.90(m,1H),6.46-6.40(m,1H),4.27-4.20(m,2H),3.89-3.82(m,4H),3.41-3.37(m,4H),1.82(d,J=6.8Hz,3H),1.39(t,J=7.2Hz,3H).
(S)-2-エチル-6-(4-フルオロ-6-(4-メチルピペラジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:MeOH=50:1~20:1)によって精製して、黄色固体として粗製化合物(149mg、50%収率)を得た。粗製化合物をprep SFC(分離条件:機器:SFC80(Waters);カラム:OD 2.5*25cm、10um;移動相A:超臨界CO2、移動相B:IPA/ACN/DEA=60/40/0.2、A:B=60/40、70mL/min、カラム温度:25℃、背圧:100bar)によりさらに精製し、黄色固体として化合物48(95.9mg、32.0%収率、純度98.4%、ee:>99%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法4):RT=0.95min,C26H29FN10Oに対する計算質量516.57,m/z実測値517.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.78-8.77(m,2H),7.53(s,1H),7.36-7.33(m,1H),6.95(s,1H),6.74-6.71(m,1H),6.40-6.38(m,1H),4.25-4.20(m,2H),3.30-3.28(m,4H),2.88(m,4H),2.54(s,3H),1.83(d,J=6.8Hz,3H),1.40(t,J=7.2Hz,3H).
(S)-2-エチル-6-(4-フルオロ-6-(3-メトキシアゼチジン-1-イル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:MeOH=100:1~50:1)によって精製し、粗製化合物(200mg、83.0%収率、純度90.6%)を得た。化合物をprep.SFC(分離条件:機器:SFC80(Waters);カラム:OD 2.5*25cm、10um;移動相A:超臨界CO2、移動相B:MeOH/DEA=100/0.2、A:B=70/30、70mL/min、カラム温度:25℃、背圧:100bar)によりさらに精製し、黄色固体として化合物49(106.7mg、44.0%収率、純度99.4%、ee:>99%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法4):RT=1.56min,C25H26FN9O2に対する計算質量503.53,m/z実測値504.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.78-8.76(m,2H),7.52(s,1H),7.36-7.33(m,1H),6.44-6.38(m,2H),6.23-6.20(m,1H),4.36-4.33(m,1H),4.26-4.20(m,2H),4.13-4.10(m,2H),3.68-3.66(m,2H),3.35(s,3H),1.84-1.82(m,3H),1.40(t,J=7.2Hz,3H).
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:MeOH=20:1~10:1)によって精製し、黄色固体として粗製生成物(120mg、50%収率)を得た。粗製化合物をprep.SFC(分離条件:機器:SFC80(Waters);カラム:AD 2.5*25cm、10um;移動相A:超臨界CO2、移動相B:MeOH/ACN/DEA=60/40/0.2、A:B=50/50、80mL/min、カラム温度:25℃、背圧:100bar)によりさらに精製し、化合物50(12.27mg、12.2%収率、純度95.2%、ee:>99%)及び化合物51(43.28mg、36.1%収率、純度97.3%、ee:>99%)を得た。
(R*)-6-(4-メトキシ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法2):RT=1.35min,C25H27N9O3に対する計算質量501.55,m/z実測値502.3[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.99(s,1H),12.83(s,1H),12.50-12.48(m,1H),11.00-10.84(m,1H),8.87-8.80(m,2H),7.68-7.64(m,1H),7.41(s,1H),6.80-6.43(m,3H),4.13-4.12(m,2H),4.07-4.03(m,4H),3.95-3.88(m,4H),3.32-3.05(m,4H),1.72-1.69(m,3H).
(S*)-6-(4-メトキシ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法2):RT=1.35min,C25H27N9O3に対する計算質量501.55,m/z実測値502.3[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 13.00(s,1H),12.84(s,1H),12.51-12.48(m,1H),11.00-10.86(m,1H),8.85-8.80(m,2H),7.68-7.65(m,1H),7.42-7.40(m,1H),6.80-6.71(m,1H),6.56-6.43(m,2H),4.06(s,2H),3.96(s,4H),3.78-3.75(m,4H),3.14-3.09(m,4H),1.74-1.69(m,3H).
(S)-6-(5-メトキシ-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-2-メチル-7-((1-(ピリミジン-2-イル)エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィー(CH2Cl2:MeOH=25:1)によって精製し、黄色固体として粗製生成物(200mg、収率70.0%)を得た。粗製生成物をprep.SFC(分離条件:機器:SFC80(Waters);カラム:OD 2.5*25cm、10um;移動相A:超臨界CO2、移動相B:IPA/ACN/DEA=60/40/0.2、A:B=60/40、80mL/min、カラム温度:25℃、背圧:100bar)によりさらに精製し、黄色固体として化合物52(88.09mg、44.0%収率、純度94.2%、ee:>99%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順B-2、方法2):RT=1.29min,C25H27N9O3に対する計算質量501.54,m/z実測値502.3[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.88-12.84(m,1H),12.61-21.58(m,1H),12.85-12.81(m,1H),8.85-8.84(m,1H),7.64(s,1H),7.42-7.10(m,3H),6.47-6.45(m,1H),3.95(s,3H),3.86(s,3H),3.76-3.74(m,4H),3.00-2.97(m,4H),1.74-1.72(m,3H).
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(CH2Cl2:MeOH=150:1~50:1)によって精製し、黄色固体として粗製生成物(509mg、54.8%収率)を得た。粗製生成物をprep.SFC(分離条件:機器:SFC80(Waters);カラム:OD2.5*25cm、10um;移動相A:超臨界CO2、移動相B:MeOH/ACN/DEA=60/40/0.2、A:B=50/50、80mL/min、カラム温度:25℃、背圧:100bar)によりさらに精製し、化合物53(153.89mg、30.2%収率、純度99.4%、ee:>99%)及び化合物54(162.32mg、31.9%収率、純度99.6%、ee:>99%)を得た。
(S*)-2-メチル-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)-プロピル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.44min,C26H29N9O2に対する計算質量499.57,m/z実測値500.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.87(d,J=5.2Hz,1H),12.65-12.63(m,1H),10.84(d,J=3.6Hz,1H),8.84-8.82(m,2H),7.63(s,1H),7.46-7.22(m,3H),6.40-6.38(m,1H),3.93(s,3H),3.77-3.76(m,4H),2.88-2.85(m,4H),2.38(s,3H),2.19-2.14(m,2H),1.02-0.97(m,3H).
(R*)-2-メチル-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(ピリミジン-2-イル)プロピル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.43min,C26H29N9O2に対する計算質量499.57,m/z実測値500.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.87(d,J=5.2Hz,1H),12.64(dd,J=8.4,4.0Hz,1H),10.84(d,J=4.4Hz,1H),8.83(dd,J=8.8,3.2Hz,2H),7.64(s,1H),7.47-7.22(m,3H),6.40-6.39(m,1H),3.93(s,3H),3.79-3.75(s,4H),2.89-2.84(m,4H),2.38(s,3H),2.17-2.14(m,2H),1.00(t,J=6.8Hz,3H).
(S)-2-メチル-6-(5-メチル-6-モルホリノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-2-イル)-7-((1-(オキサゾール-4-イル)-エチル)アミノ)-2H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5(4H)-オン
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(勾配、CH2Cl2:MeOH=150:1~50:1)によって精製し、黄色固体として化合物55(369.51mg、48.5%収率、純度99.4%、ee:>99%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.46min,C24H26N8O3に対する計算質量474.52,m/z実測値475.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.88(d,J=4.8Hz,1H),12.37-12.35(m,1H),10.90(d,J=3.6Hz,1H),8.36(s,1H),8.02(s,1H),7.70(s,1H),7.45-7.21(m,2H),6.47-6.35(m,1H),4.05(s,3H),3.77-3.75(m,4H),2.88-2.83(m,4H),2.37(s,3H),1.68(t,J=6.8Hz,3H).
(S)-2-メチル-6-(6-モルホリノ-1H-イミダゾ[4,5-c]ピリジン-2-イル)-7-((1-(オキサゾール-4-イル)エチル)-アミノ)-2,4-ジヒドロ-5H-ピラゾロ[4,3-b]ピリジン-5-オン
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(CH2Cl2:MeOH=100:1)によって精製し、黄色固体として化合物56(37.15mg、収率6.89%,純度95.4%、ee:>99%)を得た。
LC-MS(ESI)(一般的手順A-2、方法2):RT=1.14min,C22H23N9O3に対する計算質量461.5,m/z実測値462.4[M+H]+.
一般的手順A-2:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 13.13-13.10(m,1H),12.31-12-11(m,1H),11.01-10.97(m,1H),8.53-8.36(m,2H),8.05(s,1H),7.73(s,1H),7.03-6.91(m,1H),6.46-6.40(m,1H),4.06(s,3H),3.77-3.75(m,4H),3.39-3.37(m,4H),1.68(d,J=4.0Hz,3H).
LCMS
一般的手順A
脱気装置、バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムヒーター、ダイオードアレイ検出器(DAD)、及び下記の各方法で明記するカラムを備えたAgilent 1200 HPLCシステムを使用して、LC測定を実施した。DADからの流れを分割して、MSスペクトロメーター(Agilent 6110又は6140)及びELSDに送った。MS検出器はエレクトロスプレーイオン源を備えるものであった。ネブライザーガスとして窒素を使用した。乾燥ガス温度は、350℃で維持した。キャピラリー電圧は、正イオン化モードでは2.5V及び負イオン化モードでは3.0Vとした。質量スペクトルは、ステップサイズ0.1で100~1000を走査することにより取得した。サイクルタイムは、0.89秒/サイクルである。データ取得は、Chemstation B.04.03で行った。
一般的手順Aに加えて:0.8mL/分の流速で、Waters XBridge Shield RP18カラム(50×2.1mm 5μm)で、逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:0.05%NH3・H2Oを有する水;移動相B:アセトニトリル)を使用した。まず、100%Aを1分間保持した。次いで、40%A及び60%Bを4分間、次いで5%A及び95%Bを2.5分間で勾配を適用した。最後に、100%Aを2分間に戻し、0.5分間保持した。ポストタイムは0.5分である。オーブン温度は40℃であった。注入量は2uLである。(MS極性:正)
一般的手順Aに加えて:0.8mL/分の流速で、Phenomenex Luna-C18カラム(5μm、2.0×50mm)で、逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:0.1%TFAを有する水;移動相B:0.05%TFAを有するアセトニトリル)を使用した。100%Aを1分間保持し、100%Aから40%Aへの勾配を4分で適用し、2.5分で40%Aから15%Aへ低下させた。ついで、100%Aを2分間に戻し、0.5分間保持した。ポストタイムは0.5分である。オーブン温度は50℃であった。注入量は2uLである。(MS極性:正)
脱気装置付きのクォータナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン(特に指示がない限り、50℃に設定)、ダイオードアレイ検出器(DAD)及び下記の各方法で明記するカラムを備えたAgilent1200シリーズシステムを使用して、LCMS測定を実施した。カラムからの流れを分割して、MSスペクトロメーターに送った。MS検出器はエレクトロスプレーイオン源を備えるものであった。質量スペクトルは、0.52秒のサイクル時間を使用して、100~1000を走査することにより取得した。キャピラリーニードル電圧は2.5kVであり、イオン源温度を350℃に維持した。窒素をネブライザーガスとして使用した。LC/MSD ChemStationデータシステムを用いてデータ取得を行った。
一般的手順Bに加えて:1.2mL/minの流速で、Xtimate C18カラム(2.1*30mm、3um)で、逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水(4L)+TFA(1.5mL);移動相B:アセトニトリル(4L)+TFA(0.75mL))を用いて、0.9分で100%A~40%A、60%Bへの勾配条件を適用し、これらの条件で0.6分間保持し、0.01分で40%A及び60%Bにして、40%Aで0.49分間再平衡化した。0.1~20μLの注入量を使用した。コーン電圧は、正イオン化モードの場合70Vであった。
一般的手順Bに加えて:1.2mL/minの流速で、MERCK C18カラム(RP-18e 25-2mm)で逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水(4L)+TFA(1.5mL);移動相B:アセトニトリル(4L)+TFA(0.75mL))を用いて、0.7分で95%A~5%A、95%Bへの勾配条件を適用し、これらの条件で0.4分間保持し、0.01分で95%A及び5%Bにして、95%Aで0.49分間再平衡化した。0.1~20μLの注入量を使用した。コーン電圧は、正イオン化モードの場合70Vであった。
一般的手順Bに加えて:1.0mL/minの流速で、Xbridge Shield RP-18カラム(5um、2.1*50 mm)で、逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水(1L)+NH3H2O(0.5mL);移動相B:アセトニトリル)を用いて、2分で90%A~20%A、80%Bへの勾配条件を適用し、これらの条件で0.48分間保持し、0.01分で90%A及び10%Bにして、90%Aで0.11分間再平衡化した。0.1~20μLの注入量を使用した。コーン電圧は、正イオン化モードの場合70Vであった。
脱気装置付きのクォータナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン(特に指示がない限り、50℃に設定)、ダイオードアレイ検出器(DAD)及び下記の各方法で明記するカラムを備えたShimadzu LCMS-2010 EVシリーズシステムを使用して、LCMS測定を実施した。カラムからの流れを分割して、MSスペクトロメーターに送った。MS検出器はエレクトロスプレーイオン源を備えるものであった。質量スペクトルは、0.25秒のサイクル時間を使用して、100~1000を走査することにより取得した。検出器電圧は1.6kVであり、イオン源温度を250℃に維持した。窒素をネブライザーガスとして使用した。LCMSソリューションデータシステムを用いてデータ取得を行った。
一般的手順Cに加えて:1.2mL/minの流速で、Xtimate C18カラム(2.1*30mm、3 um)で逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水(4L)+TFA(1.5mL);移動相B:アセトニトリル(4L)+TFA(0.75mL))を用いて、6分で100%A~40%A、60%Bへの勾配条件を適用し、これらの条件で0.5分間保持し、0.01分で40%A及び60%Bにして、40%Aで0.49分間再平衡化した。0.1~20μLの注入量を使用した。コーン電圧は、正イオン化モードの場合70Vであった。
一般的手順Cに加えて:0.8mL/minの流速で、Xtimate C18カラム(2.1*30mm、3um)で逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水(4L)+TFA(1.5mL);移動相B:アセトニトリル(4L)+TFA(0.75mL))を用いて、6分で90%A~20%A、80%Bへの勾配条件を適用し、これらの条件で0.5分間保持し、0.01分で90%A及び10%Bにして、90%Aで0.49分間再平衡化した。0.1~20μLの注入量を使用した。コーン電圧は、正イオン化モードの場合70Vであった。
一般的手順Cに加えて:1.2mL/minの流速で、MERCK C18カラム(RP-18e 25-2mm)で逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水(4L)+TFA(1.5mL);移動相B:アセトニトリル(4L)+TFA(0.75mL))を用いて、0.7分で95%A~5%A、95%Bへの勾配条件を適用し、これらの条件で0.4分間保持し、0.01分で95%A及び5%Bにして、95%Aで0.49分間再平衡化した。0.1~20μLの注入量を使用した。コーン電圧は、正イオン化モードの場合70Vであった。
クォータナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン(特に指示がない限り、50℃に設定)、フォトダイオードアレイ(PDA)検出器及び下記の各方法で明記するカラムを備えたWaters UPLC-QDaシステムを使用してLCMS測定を実施した。カラムからの流れを分割して、MSスペクトロメーターに送った。MS検出器は、QDa検出器であり、エレクトロスプレーイオン源を備えるものであった。質量スペクトルは、100~1000を走査することにより取得した。キャピラリーニードル電圧は0.8kVであり、イオン源温度を120℃に維持した。窒素をネブライザーガスとして使用した。Waters-Micromass MassLynx-Openlynxデータシステムを用いてデータ取得を行った。
一般的手順A-2に加えて:0.6mL/minの流速で、ACQUITY UPLC BEH C18カラム(1.7μm 2.1x50mm)で逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相C:水中0.1%ギ酸;移動相D:アセトニトリル中0.1%ギ酸)を用いて、90%C及び10%Dを1.2分間保持し、次に5%C及び95%Dを0.8分間保持した。0.3~5μLの注入量は、サンプル濃度に依存した。コーン電圧は、正イオン化モードの場合15Vであった。
脱気装置(DGU-20A3)付きのポンプ(LC-20AD)、オートサンプラー(SIL-20AHT)、カラムオーブン(CTO-20A)(特に指示がない限り、40℃に設定)、フォトダイオードアレイ(PDA)(SPD-M20A)検出器、蒸発性光散乱(ELSD)(Alltech 3300ELSD)検出器、及び下記の各方法で明記するカラムを備えたShimadzu LC-MS2020システムを使用して、LCMS測定を実施した。カラムからの流れを分割して、MSスペクトロメーターに送った。MS検出器はエレクトロスプレーイオン源を備えるものであった。質量スペクトルは、80~1000を走査することにより取得した。ネブライザーガスとして窒素を使用した。データ取得は、Labsolutionデータシステムで行った。
一般的手順B-2に加えて:2.0mL/分の流速で、Shimadzu SunFire C18(5μm 50*4.6mm)で逆相UPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水中0.1%ギ酸;移動相B:アセトニトリル中0.1%ギ酸)を用いて、90%A及び10%Bを1.6分間保持し、次いで5%A及び95%Bを1.0分間保持した。0.3~5μLの注入量は、サンプル濃度に依存した。コーン電圧は、正イオン化モード及び負イオン化モードで20Vとした。質量スペクトルは、0.1秒の走査間遅延を使用して、100~1000の走査を0.2秒で行うことにより取得した。
一般的手順B-2に加えて:2.0mL/分の流速で、Shimadzu SunFire C18(5μm 50*4.6mm)で、逆相UPLCを実施した。2つの移動相(移動相A:水中0.1%ギ酸;移動相B:アセトニトリル中0.1%ギ酸)を用いて、70%A及び30%Bを1.6分間保持し、次いで5%A及び95%Bを1.0分間保持した。0.3~5μLの注入量は、サンプル濃度に依存した。コーン電圧は、正イオン化モード及び負イオン化モードで20Vとした。質量スペクトルは、0.1秒の走査間遅延を使用して、100~1000の走査を0.2秒で行うことにより取得した。
クォータナリポンプ(G1311A)、オートサンプラー(CTC Analytic HTS)、カラムオーブン(G1316A TCC、特に指示がない限り、40℃に設定)、DAD(G1315B)検出器及び下記の各方法で明記するカラムを備えたABシステムを使用して、LCMS測定を実施した。カラムからの流れを分割して、MSスペクトロメーターに送った。MS(API3000)は、エレクトロスプレーイオン化ソースを備えるものであった。質量スペクトルは、80~1000を走査することにより取得した。窒素をネブライザーガスとして使用した。
一般的手順C-2に加えて:1.0mL/minの流速で、SunFire C18(5μm 50*4.6mm)で、逆相UPLCを実施した。2つの移動相(移動相C:水中0.1%NH3 H2O;移動相D:アセトニトリル中0.1%NH3 H2O)を使用して、95%C及び5%Dを3分間保持し、次いで5%C及び95%Dを1分間保持した。注入量はサンプル濃度に依存した。
一般的手順A
以下のNMR実験は、周囲温度で、内部重水素ロックを使用し、Bruker Avance III 400については、BBO 400 MHzプローブヘッドを装備して、Varian 400については、Varian 400 ASW PFG 4nuc(1H、13C、19F、31P)プローブヘッドを装備した、Bruker Avance III 400及びVarian 400分光計を使用して実施した。化学シフト(δ)は、百万分率(ppm)で報告される。
以下のNMR実験は、周囲温度で、内部重水素ロックを使用し、5mm PABBO(1H、13C、31P、19F)プローブヘッドを装備した、Bruker Avance III 400分光計を使用して実施した。化学シフト(δ)は、百万分率(ppm)で報告する。
一般的手順D
バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムヒーター、ダイオードアレイ検出器(DAD)、6-位置カラム切替バルブ、溶媒切替バルブ及び背圧制御装置(BPR)を備えたBerger SFCシステムを使用してSFC-MS試験を実施した。一般的には、各々40C及び100barでカラム温度及びBPRを設定した。DADからの流れを分割してMS分光計(Agilent 6110)に送った。MS検出器は、大気圧化学イオン源を備えるものであった。窒素をネブライザーガスとして使用した。乾燥ガス温度を250℃に維持した。キャピラリー電圧は、正イオン化モードの場合は3000Vであり、負イオン化モードの場合は3000Vであった。質量スペクトルは、段階サイズ0.1で100~1000の走査を行うことによって取得した。サイクル時間は1.06sec/サイクルである。Chemstation B.04.03でデータ取得を行った。
4mL/minの流速で、Chiralpak AD-3 50*4.6mm I.D.、3umカラムでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:イソプロパノール(0.05%DEA))。勾配は、40%を保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
4mL/minの流速で、Chiralcel OD-3 50*4.6mm I.D.、5umカラムでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:エタノール(0.05%DEA))。勾配は、5分間で5%~40%Bであり、40%を2.5分間保持し、次いで5%Bを2.5分間保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
4mL/minの流速で、Chiralpak AD-3 50*4.6mm I.D.、3umカラムでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:エタノール(0.05%DEA))。勾配は40%を保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
4mL/minの流速で、Chiralpak AD-3 50*4.6mm I.D.、3umカラムでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:メタノール(0.05%DEA))。勾配は40%を保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
脱気装置、バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムヒーター、ダイオードアレイ検出器(DAD)、6位置カラム切替バルブ、溶媒切替バルブ及び背圧制御装置(BPR)を備えたAgilent1260SFCシステムを使用して、SFC試験を実施した。一般的にはカラム温度及びBPRを各々40℃及び100barに設定した。
2.8mL/minの流速で、Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D.、3umカラムでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:エタノール(0.05%DEA))。勾配は4.5分で5%~40%Bであり、40%を2.5分間保持し、次いで5%Bを1分間保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
2.8mL/minの流速で、Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D.、3umでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:エタノール(0.05%DEA))。勾配はCO2中40%エタノール(0.05%DEA)を保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
2.8mL/minの流速で、Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D.、3umでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:イソプロパノール(0.05%DEA))。勾配は4.5分で5%~40%Bであり、40%を2.5分間保持し、次いで5%Bを1分間保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
2.5mL/minの流速で、Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D.、3μmカラムでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:エタノール(0.05%DEA))。勾配は4.5分で5%~40%Bであり、40%を2.5分間保持し、次いで5%Bを1分間保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
脱気装置、バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムヒーター、ダイオードアレイ検出器(DAD)、6位置カラム切替バルブ、溶媒切替バルブ及び背圧制御装置(BPR)を備えたWaters UPC^2システムを使用して、SFC試験を実施した。一般的にはカラム温度及びBPRを各々35C及び1500psiに設定した。
2.5mL/minの流速でChiralpak AS-3 150x4.6mm I.D.、3umカラムでSFCを実施した。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:イソプロパノール(0.05%DEA))。勾配は40%を保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムヒーター、ダイオードアレイ検出器(PDA)、10-位置カラム切替バルブ、溶媒切替バルブ及び背圧制御装置(BPR)を備えたThar SFCシステムを使用してSFC試験を行った。一般的には、カラム温度及びBPRを各々35℃及び100barに設定した。
2.0mL/minの流速でPheno Lux Cellulose-2、150x4.6mm I.D.、5μmカラムでSFCを行った。2つの移動相(移動相:A:CO2 B:エタノール(0.05%DEA))。勾配は、CO2中50%エタノール(0.05%DEA)を保持した。カラム温度は40℃であった。(MS極性:正)
HPLCに対する一般的手順E
DGU-20A脱気装置付きのLC-20AD Quant Pump、SIL-20AC オートサンプラー、CTO-20ACカラムオーブン(特に指示がない限り、25℃に設定)、ダイオードアレイ検出器(SPD-M20A)及び下記の各方法で明記するカラムを備えたLC-20A SHIMADZUシステムを使用してHPLC測定を実施した。
一般的手順Eに加えて:1.0mL/minの流速で、Waters Sunfire C18-5μm-4.6-150mmカラム(1.7μm 2.1x50mm)で逆相HPLCを実施した。2つの移動相(移動相C:水中0.03%TFA;移動相D:アセトニトリル中0.03%TFA)を使用して、95%C及び5%Dを13分間保持し、次いで5%C及び95%を3分間保持した。注入量はサンプル濃度に依存した。
生物学的アッセイ
FGFR3野生型移動度シフトアッセイ(酵素アッセイ)
25μLの最終反応体積で、0.04ng/μLのヒトFGFR3野生型酵素(カルナバイオサイエンス(Carna Biosciences)からの細胞質ドメイン)を、75μM ATP、1μM FL-ペプチド30基質、及び250nLの試験用化合物(1%DMSO最終)とともにアッセイバッファー(100mM HEPES pH7.4、10mM MgCl2、0.003%Brij35、1mMDTT)中でインキュベートした。30℃で50分間のインキュベーションの後に、10μLの0.5M EDTA pH8.0で反応を停止し、次いで25μLの反応混合物を、リーディングプレートに移し、キャリパーEZ reader IIで測定した。基質-生成物変換率は、正規化の生データとして使用され、濃度反応曲線(10μMから始まる4倍連続希釈での10用量点)を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。
25μLの最終反応体積で、0.04ng/μLのヒトFGFR3 V555M酵素(カルナバイオサイエンス(Carna Biosciences)からの、V555M変異を保有する細胞質ドメイン)を、30μM ATP、1μM FL-ペプチド30基質、及び250nLの試験用化合物(1%DMSO最終)とともにアッセイバッファー(100mM HEPES pH7.4、10mM MgCl2、0.003%Brij35、1mMDTT)中でインキュベートした。30℃で45分間のインキュベーションの後に、10μLの0.5M EDTA pH8.0で反応を停止し、次いで25μLの反応混合物を、リーディングプレートに移し、キャリパーEZ reader IIで測定した。基質-生成物変換率は、正規化の生データとして使用され、濃度反応曲線(10μMから始まる4倍連続希釈での10用量点)を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。
25μLの最終反応体積で、0.04ng/μLのヒトFGFR3 V555L酵素(カルナバイオサイエンス(Carna Biosciences)からの、V555L変異を保有する細胞質ドメイン)を、40μM ATP、1μM FL-ペプチド30基質、及び250nLの試験用化合物(1%DMSO最終)とともにアッセイバッファー(100mM HEPES pH7.4、10mM MgCl2、0.003%Brij35、1mMDTT)中でインキュベートした。30℃で50分間のインキュベーションの後に、10μLの0.5M EDTA pH8.0で反応を停止し、次いで25μLの反応混合物を、リーディングプレートに移し、キャリパーEZ reader IIで測定した。基質-生成物変換率は、正規化の生データとして使用され、濃度反応曲線(10μMから始まる4倍連続希釈での10用量点)を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。
1日目に、90μLの細胞懸濁液(NIH/3T3細胞過剰発現FGFR3 WT-TACC3融合タンパク質)(増殖培地(1%Glutamax、10%FBS、及び1%Pen/Strepを含有するDMEM)中の1ウェル当たり合計30,000細胞)を、96ウェルプレートに播き、次いで37℃及び5%CO2で一晩インキュベートした。2日目に、試験用化合物の10倍原液を含有する10μLの増殖培地を、細胞培養(10μMから始まる4倍連続希釈での9用量点、0.1%DMSO最終)中に添加した。37℃及び5%CO2で72時間インキュベーションした後、5日目に、体積50μLのCellTiter Glo(CTG)試薬を、細胞を入れた96-ウェルプレート中に添加し、プレートを室温で10分間インキュベートした後、発光検出モジュールを有するマイクロプレートリーダーで、RLU(相対発光量)を測定した。RLU値を生存%まで正規化し、濃度反応曲線を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。
1日目に、90μLの細胞懸濁液(NIH/3T3細胞過剰発現FGFR3 V555M-TACC3融合タンパク質)(増殖培地(1%Glutamax、10%FBS、及び1%Pen/Strepを含有するDMEM)中の1ウェル当たり合計30,000細胞)を、96ウェルプレートに播き、次いで37℃及び5%CO2で一晩インキュベートした。2日目に、試験用化合物の10倍原液を含有する10μLの増殖培地を、細胞培養(10μMから始まる4倍連続希釈での9用量点、0.1%DMSO最終)中に添加した。37℃及び5%CO2で72時間インキュベーションした後、5日目に、体積50μLのCellTiter Glo(CTG)試薬を、細胞を入れた96-ウェルプレート中に添加し、プレートを室温で10分間インキュベートした後、発光検出モジュールを有するマイクロプレートリーダーで、RLU(相対発光量)を測定した。RLU値を生存%まで正規化し、濃度反応曲線を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。
1日目に、90μLの細胞懸濁液(上記の2つの増殖アッセイと同じコントロールベクターをトランスフェクトしたNIH/3T3細胞)(増殖培地(1%Glutamax、10%FBS、及び1%Pen/Strepを含有するDMEM)中の1ウェル当たり合計30,000細胞)を、96ウェルプレートに播き、次いで37℃及び5%CO2で一晩インキュベートした。2日目に、試験用化合物の10倍原液を含有する10μLの増殖培地を、細胞培養(30μMから始まる3倍連続希釈での9用量点、0.3%DMSO最終)中に添加した。37℃及び5%CO2で72時間インキュベーションした後、5日目に、体積50μLのCellTiter Glo(CTG)試薬を、細胞を入れた96-ウェルプレート中に添加し、プレートを室温で10分間インキュベートした後、発光検出モジュールを有するマイクロプレートリーダーで、RLU(相対発光量)を測定した。RLU値を生存%まで正規化し、濃度反応曲線を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。このアッセイは、NIH/3T3 FGFR WT/VM-TACC3細胞増殖アッセイに関するカウンターアッセイとして機能し、オフターゲット効果によって引き起こされる試験用化合物の一般的な毒性を示す。
50μLの細胞懸濁液(NIH/3T3細胞過剰発現FGFR3 WT-TACC3融合タンパク質)(増殖培地(1%Glutamax、10%FBS、及び1%Pen/Strepを含有するDMEM)中の1ウェル当たり合計10,000細胞)を、384ウェルプレートに播いた。37℃及び5%CO2で一晩インキュベーションした後、10倍の試験用化合物を含有する5.5μLの増殖培地を、細胞培養(10μMから始まる4倍連続希釈での10用量点、0.1%DMSO最終)中に添加した。37℃及び5%CO2で1時間インキュベーションした後、培地は使い果たされ、AlphaLISA SureFire Ultra p-ERK1/2(Thr202/Tyr204)アッセイキット(PerkinElmerから)を、キット説明書に従って、phospho-ERKレベル検出について適用した。RFU(相対蛍光単位)をEnVisionマイクロプレートリーダー(ex.680nm,em.615nm)で測定し、濃度反応曲線を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。
50μLの細胞懸濁液(NIH/3T3細胞過剰発現FGFR3 V555M-TACC3融合タンパク質)(増殖培地(1%Glutamax、10%FBS、及び1%Pen/Strepを含有するDMEM)中の1ウェル当たり合計10,000細胞)を、384ウェルプレートに播いた。37℃及び5%CO2で一晩インキュベーションした後、10倍の試験用化合物を含有する5.5μLの増殖培地を、細胞培養(10μMから始まる4倍連続希釈での10用量点、0.1%DMSO最終)中に添加した。37℃及び5%CO2で1時間インキュベーションした後、培地は使い果たされ、AlphaLISA SureFire Ultra p-ERK1/2(Thr202/Tyr204)アッセイキット(PerkinElmerから)を、キット説明書に従って、phospho-ERKレベル検出について適用した。RFU(相対蛍光単位)をEnVisionマイクロプレートリーダー(ex.680nm,em.615nm)で測定し、濃度反応曲線を、Prismを使用してプロットし、IC50(M)、pIC50(-logIC50)、及びHillSlope値を計算した。
本発明は、以下の態様を提供しうる。
[1]
任意の互変異性体形態及び立体異性体形態を含む式(I):
[式中、
A 1 、A 2 及びA 3 は各々独立して、CH、CR a 又はNを表し、但しA 1 、A 2 及びA 3 のうち最大2つがCR a を表し得;
C1は、水素又はC 1~4 アルキルであり;
C2は、水素、C 1~4 アルキル、ヒドロキシル又はC 1~4 アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC 3~6 シクロアルキルを形成し;
Yは、直接的結合、-O-、C(=O)、NR y 、S(=O) 2 又はC 1~4 アルキルであり;
R y は水素又はC 1~4 アルキルであり;
各R a は独立に、C 1~6 アルキル、ハロC 1~6 アルキル、ハロ、C 1~6 アルコキシ、カルボキシル、C 1~6 アルキル-オキシカルボニル、C 2~6 アルケニル、C 2~6 アルキニル、シアノ、シアノC 1~6 アルキル、ヒドロキシC 1~6 アルキル、-C(=O)-NH 2 、-C(=O)-NH(C 1~4 アルキル)、-C(=O)-N(C 1~4 アルキル) 2 又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり;
R b は、水素、C 1~6 アルキル、ハロC 1~6 アルキル、C 1~6 アルコキシ、C 1~6 アルキルオキシカルボニル、C 2~6 アルケニル、C 2~6 アルキニル、シアノC 1~6 アルキル、ヒドロキシC 1~6 アルキル、-C(=O)-NH 2 、-C(=O)-NH(C 1~4 アルキル)、-C(=O)-N(C 1~4 アルキル) 2 、C 3~6 シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C 3~6 シクロアルキルで、又はフェニルで、又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC 1~6 アルキルであり;
Dは、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルは任意選択により1~5個のR c 置換基で置換されており;
各R c は独立に、オキソ、ハロ、C 1~6 アルキル、C 1~6 アルキルオキシ、ヒドロキシC 1~6 アルキル、ハロC 1~6 アルキル、ハロC 1~6 アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C 1~6 アルキル-、-C(=O)-O-C 1~6 アルキルで置換されるC 1~6 アルキル、C 1~6 アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC 1~6 アルキル、C 1~6 アルキル-C(=O)-、-SO 2 -C 1~6 アルキル、C 3~6 シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、前記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C 1~6 アルキル、シアノ、ハロ、C 1~6 アルコキシ、ハロC 1~6 アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC 1~6 アルキル、ハロC 1~6 アルキル、オキソ、-SO 2 -NH 2 、-SO 2 -NH(C 1~4 アルキル)、-SO 2 -N(C 1~4 アルキル) 2 、-NH-C(=O)-C 2~6 アルケニル、-C(=O)-C 1~6 アルキル、-C(=O)-C 2~6 アルケニル、C 1~6 アルキル-O-C(=O)-、C 3~6 シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである]
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物。
[2]
以下の式(I-a)
[3]
Dが、ピペラジン-1-イルであって、前記ピペラジン-1-イルが、任意選択的に、1~5つのR c 置換基で置換されている、上記[1]又は[2]に記載の化合物。
[4]
Dが、モルホリン-1-イルであって、前記モルホリン-1-イルが、任意選択的に、1~5つのR c 置換基で置換されている、上記[1]又は[2]に記載の化合物。
[5]
Dが、4、5、6、又は7員の単環式ヘテロシクリルであって、前記ヘテロシクリルが、任意選択的に、1~5つのR c 置換基で置換されている、上記[1]又は[2]に記載の化合物。
[6]
A 1 、A 2 、及びA 3 が、各々、CHを表す、上記[1]~[5]のいずれかに記載の化合物。
[7]
A 1 、A 2 及びA 3 のうち1つがNを表し、残りのA置換基がCH又はCR a を表す、上記[1]~[5]のいずれかに記載の化合物。
[8]
A 1 、A 2 及びA 3 がN又はCHを表す、上記[1]~[5]のいずれかに記載の化合物。
[9]
Yが直接的結合である、上記[1]~[8]のいずれかに記載の化合物。
[10]
Yが、-O-又はC(=O)である、上記[1]~[8]のいずれかに記載の化合物。
[11]
C 1 が、水素であり、C 2 が、C 1~4 アルキルである、上記[1]~[10]のいずれかに記載の化合物。
[12]
C 1 及びC 2 が水素である、上記[1]~[10]のいずれかに記載の化合物。
[13]
R b がC 1~6 アルキルである、上記[1]~[12]のいずれかに記載の化合物。
[14]
Dが、1又は2個のR c 置換基で任意選択により置換され、各R c が、オキソ;C 1~6 アルキル、例えばメチル;ハロ、例えばフルオロ;C 1~6 アルコキシ、例えばメトキシ;及びハロC 1~6 アルキル、例えばトリフルオロメチル又はトリフルオロエチルから独立に選択される、上記[1]~[13]のいずれかに記載の化合物。
[15]
Dが未置換である、上記[1]~[14]のいずれかに記載の化合物。
[16]
Bが、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員ヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルが任意選択により1~5個のR置換基で置換される、上記[1]~[15]のいずれかに記載の化合物。
[17]
Bが芳香族ヘテロシクリルである、上記[16]に記載の化合物。
[18]
A 1 、A 2 及びA 3 の各々がCHを表すか;又はA 1 及びA 3 がCHを表し、A 2 がNを表すか;又はA 1 、A 2 及びA 3 のうち少なくとも1つがCR a を表すか;又はA 1 がCR a を表し、A 2 及びA 3 がCHを表すか;又はA 2 がCR a を表し、A 1 及びA 3 がCHを表し;
C1が、水素又はC 1~4 アルキル、特に水素又はメチルであり;
C2が、水素又はC 1~4 アルキル又はC 1~4 アルコキシ、例えば水素、メチル又はメトキシ;特に水素又はC 1~4 アルキル、例えば水素又はメチルであり;
Yが、直接的結合、-O-又はC(=O)、特に直接的結合又はC(=O)、とりわけ直接的結合であり;
各R a が独立に、C 1~6 アルキル、例えばメチル、ハロC 1~6 アルキル、例えばトリフルオロメチル、ハロ、例えばフルオロ又はC 1~6 アルコキシ、例えばメトキシ;特に水素、ハロ又はC 1~6 アルキルであり;
R b がC 1~6 アルキル、特にC 1~4 アルキル、例えばメチル又はエチルであり;
Dが、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する4、5若しくは6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルが任意選択により1又は2個のR c 置換基で置換されており;特にDが、ピペラジニル、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル又はアゼチジニルであり、前記環系が任意選択により1又は2個のR c 置換基で置換されており;特にDが任意選択により置換されるピペラジニル、モルホリニル又はピロリジニルであり;
各R c が独立に、オキソ、C 1~6 アルキル、例えばメチル、ハロ、例えばフルオロ、C 1~6 アルコキシ、例えばメトキシ又はハロC 1~6 アルキル、例えばトリフルオロメチル又はトリフルオロエチル;特にC 1~6 アルキル例えばメチルであり;
Bが、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の芳香族単環式ヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルが任意選択により1個のR置換基で置換されており;特にBがピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、チアゾリル、オキサゾリルであり;特にBが未置換ピリミジニルであり;
各Rが独立に、C 1~6 アルキル、例えばメチル又はイソプロピル、C 1~6 アルコキシ、例えばメトキシ又はC 3~6 シクロアルキル、例えばシクロプロピルである、上記[1]又は[2]に記載の化合物。
[19]
[20]
[21]
[22]
又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物である、上記[19]に記載の化合物。
[23]
[24]
上記[1]~[23]のいずれかに記載の化合物と、薬学的に許容される担体と、を含む医薬組成物。
[25]
療法に使用するための、上記[1]~[23]のいずれかに記載の化合物。
[26]
FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療に使用するための、上記[1]~[19]のいずれかに記載の化合物。
[27]
癌の予防又は治療に使用するための、上記[1]~[23]のいずれかに記載の化合物。
[28]
癌の治療に使用するための上記[27]に記載の使用のための化合物。
[29]
前記癌がFGFR3 V555Mを持つ癌である、上記[28]に記載の使用のための化合物。
[30]
FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療のための医薬品の製造のための、上記[1]~[23]のいずれかに定義の化合物の使用。
[31]
癌の予防又は治療のための医薬品の製造のための、上記[1]~[23]のいずれかに定義の化合物の使用。
[32]
癌の治療のための、上記[31]に記載の化合物の使用。
[33]
前記癌がFGFR3 V555Mを持つ癌である、上記[32]に記載の化合物の使用。
[34]
FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療の方法であって、それを必要とする対象に、上記[1]~[23]のいずれかに定義の化合物を投与することを含む方法。
Claims (37)
- 任意の互変異性体形態及び立体異性体形態を含む式(I):
[式中、
A1、A2及びA3は各々独立して、CH、CRa又はNを表し、但しA1、A2及びA3のうち最大2つがCRaを表し得;
C1は、水素又はC1~4アルキルであり;
C2は、水素、C1~4アルキル、ヒドロキシル又はC1~4アルコキシであるか;
又はC1及びC2は一緒になって、それらが結合している炭素原子と共にC3~6シクロアルキルを形成し;
Yは、直接的結合、-O-、又はC(=O)であり;
各Raは独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ、又はC1~6アルコキシであり;
Rbは、水素、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、C1~6アルコキシ、C1~6アルキルオキシカルボニル、C2~6アルケニル、C2~6アルキニル、シアノC1~6アルキル、ヒドロキシC1~6アルキル、-C(=O)-NH2、-C(=O)-NH(C1~4アルキル)、-C(=O)-N(C1~4アルキル)2、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリル又は、C3~6シクロアルキルで、若しくはフェニルで、若しくはN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルで置換されるC1~6アルキルであり;
Dは、N又はOから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する4、5又は6員の単環式ヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルは任意選択により1~5個のRc置換基で置換されており;
各Rcは独立に、オキソ、ハロ、C1~6アルキル、C1~6アルキルオキシ、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロC1~6アルキルオキシ、カルボキシル、HOOC-C1~6アルキル-、-C(=O)-O-C1~6アルキルで置換されるC1~6アルキル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、シアノ、シアノC1~6アルキル、C1~6アルキル-C(=O)-、-SO2-C1~6アルキル、C3~6シクロアルキル、フェニル、N、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式飽和ヘテロシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5若しくは6員の単環式芳香族ヘテロシクリルであり;
Bは、3~12員のカルボシクリル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~12員のヘテロシクリルであり、前記カルボシクリル及びヘテロシクリルは、各々任意選択により1~5個のR置換基で置換されており;
各Rは、独立して、C1~6アルキル、シアノ、ハロ、C1~6アルコキシ、ハロC1~6アルコキシ、ヒドロキシル、ヒドロキシC1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、オキソ、-SO2-NH2、-SO2-NH(C1~4アルキル)、-SO2-N(C1~4アルキル)2、-NH-C(=O)-C2~6アルケニル、-C(=O)-C1~6アルキル、-C(=O)-C2~6アルケニル、C1~6アルキル-O-C(=O)-、C3~6シクロアルキル、フェニル又はN、O若しくはSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する3~6員の単環式ヘテロシクリルである]
の化合物、又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物。 - 以下の式(I-a)
を有する請求項1に記載の化合物。 - Dが、ピペラジン-1-イルであって、前記ピペラジン-1-イルが、任意選択的に、1~5つのRc置換基で置換されている、請求項1又は2に記載の化合物。
- Dが、モルホリン-1-イルであって、前記モルホリン-1-イルが、任意選択的に、1~5つのRc置換基で置換されている、請求項1又は2に記載の化合物。
- A1、A2、及びA3が、各々、CHを表す、請求項1~4のいずれか一項に記載の化合物。
- A1、A2及びA3のうち1つがNを表し、残りのA置換基がCH又はCRaを表す、請求項1~4のいずれか一項に記載の化合物。
- A1、A2及びA3がN又はCHを表す、請求項1~4のいずれか一項に記載の化合物。
- Yが直接的結合である、請求項1~7のいずれか一項に記載の化合物。
- Yが、-O-又はC(=O)である、請求項1~7のいずれか一項に記載の化合物。
- C1が、水素であり、C2が、C1~4アルキルである、請求項1~9のいずれか一項に記載の化合物。
- C1及びC2が水素である、請求項1~9のいずれか一項に記載の化合物。
- RbがC1~6アルキルである、請求項1~11のいずれか一項に記載の化合物。
- Dが、1又は2個のRc置換基で任意選択により置換され、各Rcが、オキソ;C1~6アルキル;ハロ;C1~6アルコキシ;及びハロC1~6アルキルから独立に選択される、請求項1~12のいずれか一項に記載の化合物。
- 前記C 1~6 アルキルがメチルである、前記ハロがフルオロである、前記C 1~6 アルコキシがメトキシである、又は、前記ハロC 1~6 アルキルがトリフルオロメチル若しくはトリフルオロエチルである、請求項13に記載の化合物。
- Dが未置換である、請求項1~14のいずれか一項に記載の化合物。
- Bが、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5又は6員ヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルが任意選択により1~5個のR置換基で置換される、請求項1~15のいずれか一項に記載の化合物。
- Bが芳香族ヘテロシクリルである、請求項16に記載の化合物。
- A1、A2及びA3の各々がCHを表すか;又はA1及びA3がCHを表し、A2がNを表すか;又はA1、A2及びA3のうち少なくとも1つがCRaを表すか;又はA1がCRaを表し、A2及びA3がCHを表すか;又はA2がCRaを表し、A1及びA3がCHを表し;
C1が、水素又はC1~4アルキルであり;
C2が、水素又はC1~4アルキル又はC1~4アルコキシであり;
Yが、直接的結合、-O-又はC(=O)であり;
各Raが独立に、C1~6アルキル、ハロC1~6アルキル、ハロ又はC1~6アルコキシであり;
RbがC1~6アルキルであり;
Dが、N又はOから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する4、5又は6員の単環式飽和ヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルが任意選択により1又は2個のRc置換基で置換されており、
各Rcが独立に、オキソ、C1~6アルキル、ハロ、C1~6アルコキシ、又はハロC1~6アルキルであり;
Bが、N、O又はSから選択される少なくとも1個のヘテロ原子を含有する5又は6員の芳香族単環式ヘテロシクリルであり、前記ヘテロシクリルが任意選択により1個のR置換基で置換されており;
各Rが独立に、C1~6アルキル、C1~6アルコキシ、又はC3~6シクロアルキルである、請求項1又は2に記載の化合物。 - C1における前記C 1~4 アルキルがメチルである、
C2における前記C 1~4 アルキルがメチルである、
C2における前記C 1~4 アルコキシがメトキシである、
R a における前記C 1~6 アルキルがメチルである、
R a における前記ハロC 1~6 アルキルがトリフルオロメチルである、
R a における前記ハロがフルオロである、
R a における前記C 1~6 アルコキシがメトキシである、
R b における前記C 1~6 アルキルがC 1~4 アルキルである、
前記Dが、ピペラジニル、モルホリニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル若しくはアゼチジニルであり、前記環系が任意選択により1若しくは2個のR c 置換基で置換されている、
R c における前記C 1~6 アルキルがメチルである、
R c における前記ハロがフルオロである、
R c における前記C 1~6 アルコキシがメトキシである、
R c における前記ハロC 1~6 アルキルがトリフルオロメチル若しくはトリフルオロエチルである、
前記Bが、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、チアゾリル、若しくはオキサゾリルである、
Rにおける前記C 1~6 アルキルがメチル若しくはイソプロピルである、
Rにおける前記C 1~6 アルコキシがメトキシである、又は
Rにおける前記C 3~6 シクロアルキルがシクロプロピルである、
請求項18に記載の化合物。 - R b における前記C 1~4 アルキルがメチル若しくはエチルである、
前記Dが、任意選択により置換されたピペラジニル、モルホリニル若しくはピロリジニルである、又は
前記Bが、未置換ピリミジニルである、
請求項19に記載の化合物。 - 以下の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物から選択される、請求項1に記載の化合物。
-
又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物から選択される、請求項1に記載の化合物。 -
又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物である、請求項22に記載の化合物。 -
又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物である、請求項22に記載の化合物。 -
又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物である、請求項22に記載の化合物。 -
又は薬学的に許容されるその塩若しくはその溶媒和物である、請求項22に記載の化合物。 - 請求項1~26のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体と、を含む医薬組成物。
- 療法に使用するための、請求項1~26のいずれか一項に記載の化合物。
- FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療に使用するための、請求項1~26のいずれか一項に記載の化合物。
- 癌の予防又は治療に使用するための、請求項1~26のいずれか一項に記載の化合物。
- 癌の治療に使用するための請求項30に記載の使用のための化合物。
- 前記癌がFGFR3 V555Mを持つ癌である、請求項31に記載の使用のための化合物。
- FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療のための医薬品の製造のための、請求項1~26のいずれか一項に定義の化合物の使用。
- 癌の予防又は治療のための医薬品の製造のための、請求項1~26のいずれか一項に定義の化合物の使用。
- 癌を治療する方法に使用するための、請求項1~26のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
- 前記癌がFGFR3 V555Mを持つ癌である、請求項35に記載の医薬組成物。
- FGFRキナーゼにより媒介される病状又は病態の予防又は治療に使用するための医薬組成物であって、請求項1~26のいずれか一項に記載の化合物を含み、
前記方法は、それを必要とする対象に、前記化合物を投与することを含む、
医薬組成物。
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