JP7177696B2 - 生理活性ペプチド又は生理活性タンパク質の活性低下抑制剤 - Google Patents
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Description
また本発明は、生理活性ペプチド又は生理活性タンパク質に硫酸基含有多糖類を添加することを含む、生理活性ペプチド又は生理活性タンパク質の活性低下抑制方法を提供する。
また本発明は、小麦由来α-アミラーゼインヒビターと硫酸基含有多糖類を含有する血糖上昇抑制剤を提供する。
また本発明は、小麦由来α-アミラーゼインヒビターと硫酸基含有多糖類を含有する耐糖能改善剤を提供する。
また本発明は、小麦由来α-アミラーゼインヒビターと硫酸基含有多糖類を含有する糖尿病の予防もしくは改善剤を提供する。
(a)小麦種子の水抽出物の上清(例えば、小麦粉と水を混練物から分離した上清、小麦種子からグルテン及び澱粉を採取した後の廃液、など)を70~95℃、好ましくは85~90℃に加熱し、不要蛋白質を変性させる。必要に応じて、加熱した上清を熱いうちにフィルター(好ましくは3μm及び1μmの径を有するフィルター)で濾過し、清澄なろ液を得る。該上清の加熱処理後、耐熱性タンパク質である目的のα-アミラーゼインヒビターは液中に保持される一方、夾雑する酵素やタンパク質の多くは熱変性をうけて沈殿となるので、静置又は遠心分離(例えば、3000G、30分)等の手段によって容易に除去される。上記加熱及び分離工程により、夾雑する蛋白質含量を1/2~1/5程度に減少させることができる。
(b)好ましくは、上記で得られた目的のα-アミラーゼインヒビターを含む溶液を、精密濾過膜を通過せしめて除菌する。
(c)得られたα-アミラーゼインヒビター含有液を、限外濾過膜(好ましくは、分子量10万カットの膜)を用いて濃縮する。これにより、無機塩類、糖類、アミノ酸類、及び不要な低分子物質は除去され、目的のα-アミラーゼインヒビターを含む濃縮液を得ることができる。さらに必要に応じて、得られた濃縮液を、噴霧乾燥、凍結乾燥、減圧乾燥等の処理に付してもよい。
1.ペプチド含有組成物の調製
小麦由来のα-アミラーゼインヒビターと各種多糖類とを含有する組成物を調製した。小麦由来のα-アミラーゼインヒビターには、NA-1(日清ファルマ株式会社製;小麦胚乳部由来のα-アミラーゼインヒビター、α-amylase inhibitor 0.19を20~40%含有)粉末を用いた。
NA-1粉末及びκ-カラギーナン(三菱商事フードテック株式会社)粉末を質量比50:50で混合し、均一になるよう攪拌混合して粉末組成物を得た。
NA-1粉末及びアルギン酸ナトリウム(株式会社キミカ)粉末を質量比50:50で混合し、均一になるよう攪拌混合して粉末組成物を得た。
NA-1粉末及びペクチン(三晶株式会社)粉末を質量比50:50で混合し、均一になるよう攪拌混合して粉末組成物を得た。
NA-1粉末及びキサンタンガム(三菱商事フードテック株式会社)粉末を質量比50:50で混合し、均一になるよう攪拌混合して粉末組成物を得た。
NA-1粉末及びグァーガム(三菱商事フードテック株式会社)粉末を質量比50:50で混合し、均一になるよう攪拌混合して粉末組成物を得た。
実施例1及び比較例1~4の粉末組成物の、胃液中におけるα-アミラーゼインヒビターの活性低下抑制作用を調べた。実施例1及び比較例1~4の粉末組成物を人工胃液中に浸漬し、その後α-アミラーゼ阻害活性を測定した。
HEPES緩衝液は以下のように調製した。50mM HEPES(pH7.0)の調製:HEPES 2.38g、CaCl2 22.3mg、NaCl 350mgを約180mLの水に溶解し、0.5M NaOH(2g/100mL)を適量加えてpH7.0に調整し、さらに水を加えて200mLとした。
サンプルのα-アミラーゼ阻害活性={(B-A)/B}×100
A:サンプルのα-アミラーゼ活性
B:コントロールのα-アミラーゼ活性
残存α-アミラーゼ阻害活性(%)=(消化サンプルのα-アミラーゼ阻害活性)/(未消化サンプルのα-アミラーゼ阻害活性)×100
1.ペプチド含有組成物の調製
小麦由来のα-アミラーゼインヒビターと各種カラギーナンとを含有する組成物を調製した。小麦由来のα-アミラーゼインヒビターには、NA-1(日清ファルマ株式会社製)粉末を用いた。
NA-1粉末及びκ-カラギーナン(三菱商事フードテック株式会社)粉末を質量比10:10、10:1、及び10:0.1の割合で混合し、均一になるよう攪拌混合して実施例2-1~2-3の粉末組成物を得た。
カラギーナンとしてι-カラギーナン(三菱商事フードテック株式会社)を用いた以外は、実施例2と同様の方法で実施例3-1~3-3の粉末組成物を得た。
カラギーナンとしてλ-カラギーナン(三菱商事フードテック株式会社)を用いた以外は、実施例2と同様の方法で実施例4-1~4-3の粉末組成物を得た。
実施例2-1~実施例4-3の粉末組成物について、試験例1と同様の手順で残存α-アミラーゼ阻害活性を測定した。粉末組成物の組成、及びそれらの消化サンプルの残存α-アミラーゼ阻害活性を表2に示す。いずれの実施例においても残存α-アミラーゼ阻害活性が検出されたが、NA-1と-カラギーナンの比が10:0.1のときには活性が半分以下に低下した。これらの結果から、3種のカラギーナンがいずれも、α-アミラーゼインヒビターの活性低下を抑制したことが示された。
(実施例5)
小麦由来のα-アミラーゼインヒビターとカラギーナンとを含有する組成物を調製した。小麦由来のα-アミラーゼインヒビターには、NA-1(日清ファルマ株式会社製)粉末を用いた。カラギーナンにはκ-カラギーナン(三菱商事フードテック株式会社)粉末を用いた。NA-1粉末及びκ-カラギーナン粉末を質量比10:10の割合で混合し、均一になるよう攪拌混合して粉末組成物を得た。
κ-カラギーナン粉末のみを使用した。
Claims (12)
- カラギーナンを有効成分とする、小麦由来α-アミラーゼインヒビターの活性低下抑制剤。
- 前記カラギーナンが、κ-カラギーナン、ι-カラギーナン及びλ-カラギーナンからなる群より選択される少なくとも1種である、請求項1記載の活性低下抑制剤。
- 前記小麦由来α-アミラーゼインヒビターを含む、請求項1又は2記載の活性低下抑制剤。
- 前記小麦由来α-アミラーゼインヒビターに対する前記カラギーナンの質量比が1:0.01~10となる量で用いられる、請求項1~3のいずれか1項記載の活性低下抑制剤。
- 小麦由来α-アミラーゼインヒビターにカラギーナンを添加することを含む、小麦由来α-アミラーゼインヒビターの活性低下抑制方法。
- 前記カラギーナンが、κ-カラギーナン、ι-カラギーナン及びλ-カラギーナンからなる群より選択される少なくとも1種である、請求項5記載の方法。
- 前記小麦由来α-アミラーゼインヒビターと前記カラギーナンとの質量比が1:0.01~10である、請求項5又は6記載の方法。
- 小麦由来α-アミラーゼインヒビターとカラギーナンを含有する血糖上昇抑制剤。
- 小麦由来α-アミラーゼインヒビターとカラギーナンを含有する耐糖能改善剤。
- 小麦由来α-アミラーゼインヒビターとカラギーナンを含有する糖尿病の予防もしくは改善剤。
- 前記カラギーナンが、κ-カラギーナン、ι-カラギーナン及びλ-カラギーナンからなる群より選択される少なくとも1種である、請求項8~10のいずれか1項記載の剤。
- 小麦由来α-アミラーゼインヒビターとカラギーナンとの質量比が1:0.01~10である、請求項8~11のいずれか1項記載の剤。
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Gastroenterology (1954) vol.27, no.5, p.625-628 |
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