JP7092785B2 - 飼料添加物製剤ならびにその製造方法および使用方法 - Google Patents
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Description
本出願は2017年3月7日に出願された米国仮特許出願第62/467,848号の優先権を主張し、その全内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
本開示の主題は、概して、飼料添加物製剤、ならびに本開示の製剤を製造および使用する方法に関する。
in vitroにおけるバチルス・リケニフォルミス株PWD-1のプロバイオティクス特性の評価
バチルス・リケニフォルミス株PWD-1を、一連の寒天ウェル拡散アッセイを介して、病原体サロゲート(pathogen surrogate)である大腸菌(E. coli)、サルモネラ・エンテリカ(Salmonella enterica)、リステリア・イノキュア(Listeria innocua)、およびカンピロバクター・ハイオインテスティナリス(Campylobacter hyointestinalis)に対して試験した。各アッセイにおいて、病原体サロゲートの1つを3つの寒天プレート上に広げ、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1を各プレートのウェル内に入れた。次いで、これらのプレートを37℃で一晩インキュベートした。そして写真撮影を行い、病原体とバチルス・リケニフォルミスとの相互作用を示した。
in vitroにおけるバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1のプロバイオティクス特性の評価
バチルス・リケニフォルミス株PWD-1の代わりにバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1を用いて、実施例1の実験を繰り返した。
バチルス・リケニフォルミス株PWD-1およびバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1の耐酸性試験
酸性環境に対するプロバイオティクス微生物の耐性は、腸内を通過する前に動物の腸内に存在する過酷な酸性条件にプロバイオティックが暴露されるため、重要な特徴である。バチルス・リケニフォルミス株PWD-1を、0、1、2、および3時間の時点で、pH3.0でLB培地に供した。次いで、培地をpH7.0に中和し、そして増殖を600nmでの吸光度において観察した。バチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1について実験を繰り返した。
バチルス・リケニフォルミス株PWD-1およびバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1の胆汁耐性試験
胃環境におけるプロバイオティクス微生物の生存には、低pH環境だけでなく、胃腸管に分泌される酵素も含まれる。伝統的に、雄牛の胆汁(アルコールと混合された雌牛の胆汁)は、胃環境の代表として使用されてきた。バチルス・リケニフォルミス株PWD-1を、LB培地中0.3%雄牛の胆汁に0、1、2、または3時間暴露し、図4aに示すように、600nmでの吸光度において8時間増殖を観察した。図4bに示すように、バチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1について実験を繰り返した。
バチルス・リケニフォルミス株PWD-1およびバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1の腸粘膜への接着
腸粘液へのプロバイオティック株の付着は、粘液内層への病原体の接近を制限するので望ましい。バチルス・リケニフォルミス株PWD-1およびバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1を試験し、豚粘液への付着能を評価した。対照としてATCCからのバチルス・サブチルス株168-aおよびバチルス・サブチルス株C102(Calsporin)も試験した。タンパク質コーティング(緩衝液のみ)およびBSA(ウシ血清アルブミン)は、対照として使用しなかった。図5に示すように、各株の増殖を観察したところ、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1は、バチルス・サブチルス株C102に匹敵する水準で豚粘液に付着していることが示された。
市販ブロイラーへのキシラナーゼおよびバチルス・リケニフォルミス株PWD-1の添加の効果の研究
対象:日齢、混合性別、Ross708ブロイラー。
キシラナーゼ、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1、およびバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1の市販ブロイラーへの添加の効果の研究
対象:日齢、混合性別、Ross708ブロイラー。
重度のコクシジウム症接種条件下での市販ブロイラーの食餌へのキシラナーゼ、バチルス・リケニフォルミスPWD-1、およびアミロリケファシエンス株Ba-BPD1の添加の効果
本研究の目的は、消化管病変の重症度を最小限に抑え、標準的なトウモロコシ/大豆食餌を与えられかつ重度のコクシジウム症接種条件下で飼育したブロイラーの全生存率を増進するために、キシラナーゼ(10U/g(飼料))、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1(1×105CFU/g(飼料))、およびバチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1(5×105CFU/g(飼料))の組合せの100g/メートルトン含有の有効性を評価することであった。
Claims (6)
- クロストリジウム・パーフリンジェンス、アイメリア・アセルブリナおよびアイメリア・マキシマを摂取したブロイラーにおける腸病変スコアを減らす方法であって、キシラナーゼ酵素と、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1(アクセッション番号53757)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物とを含む飼料組成物の有効量を、前記ブロイラーに投与することを含む、方法。
- クロストリジウム・パーフリンジェンス、アイメリア・アセルブリナおよびアイメリア・マキシマを摂取したブロイラーにおける、体重およびFCRの1つ以上を向上させる方法であって、キシラナーゼ酵素と、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1(アクセッション番号53757)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物とを含む飼料組成物の有効量を、前記ブロイラーに投与することを含む、方法。
- ブロイラーにおける体重およびFCRの1つ以上を向上させる方法であって、キシラナーゼ酵素と、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1(アクセッション番号53757)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物と、バチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1(アクセッション番号DSM21836)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物とを含む飼料組成物の有効量を、前記ブロイラーに投与することを含む、方法。
- ブロイラーにおける死亡率を減らす方法であって、キシラナーゼ酵素と、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1(アクセッション番号53757)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物と、バチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1(アクセッション番号DSM21836)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物とを含む飼料組成物の有効量を、前記ブロイラーに投与することを含む、方法。
- ブロイラーにおけるアイメリア属感染に対する中管腸病変スコアを減らす方法であって、キシラナーゼ酵素と、バチルス・リケニフォルミス株PWD-1(アクセッション番号53757)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物と、バチルス・アミロリケファシエンス株Ba-BPD1(アクセッション番号DSM21836)またはその同定特性をすべて有するその変異体の生物学的に純粋な培養物とを含む飼料組成物の有効量を、前記ブロイラーに投与することを含む、方法。
- 前記キシラナーゼがエンド-1,4-β-キシラナーゼである、請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。
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