JP7011643B2 - グルカゴン様ペプチド1類似体の精製 - Google Patents
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Description
ACN アセトニトリル
AcOH 酢酸
Boc tertブチルオキシカルボニル
DTE 1,4-ジチオエリトリオール
DTT 1,4-ジチオトレイトール
EDT 1,2-エタンジチオール
Fmoc 9-フルオレニルメチルオキシカルボニル
GLP-1 グルカゴン様ペプチド1
GLP グルカゴン様ペプチド
HPLC 高速液体クロマトグラフィー
本明細書で使用する用語HPLCは、UHPLCを含む。
LC-MS 液体クロマトグラフィー-質量分析
LPPS 液相ペプチド合成
NH4OAc 酢酸アンモニウム
RP-HPLC 逆相高速液体クロマトグラフィー
SEC サイズ排除クロマトグラフィー
SPPS 固相ペプチド合成
tBu tertブチル
TEAP トリエチルアンモニウムホスフェート
TFA トリフルオロ酢酸
TIPS トリイソプロピルシラン
UHPLC 超高速液体クロマトグラフィー
a)リラグルチドと少なくとも1種の不要な構成成分を含む液体組成物Cを準備する工程と;
b)組成物Cを、7.0から7.8の間のpHで、第1の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、リン酸緩衝水溶液AB1およびアセトニトリルを含む移動相を使用し、溶出を、リラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を徐々に上昇させることによって実行する工程と;
c)工程b)で得られたプールされたリラグルチドを含有する画分を、3.0未満のpHで、第2の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、トリフルオロ酢酸およびアセトニトリルを含む移動相を使用し、溶出を、精製したリラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を徐々に上昇させることによって実行する工程
とを含む方法に関する。
d)工程c)で得られたリラグルチドを、7.0から7.8の間のpHで、第3の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、緩衝水溶液AB2のアセトニトリルとの混合物を移動相として使用し、溶出を、精製したリラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を徐々に上昇させることによって実行する工程
を含む。
(i)式I:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-B1-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly
(式中、B1はLys(パルミトイル-Glu-OH)またはLys(H-Glu-OH)である)
のペプチドを含む溶液Sを準備する工程と;
(ii)溶液Sをジイソプロピルエーテルとアセトニトリルを含む逆溶媒と混合することによって、工程(i)のペプチドを沈殿させる工程であり、体積比(ジイソプロピルエーテル:アセトニトリル)が(3:1)から(10:1)の範囲内にある、工程と;
(iii)工程(ii)から得られた沈殿物を、好ましくは濾過および/または遠心分離によって、単離する工程
とを含む方法によって製造されたリラグルチドまたはその塩を含む。
(i)式I:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-B1-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly
(式中、B1はLys(パルミトイル-Glu-OH)またはLys(H-Glu-OH)である)
のペプチドを含む溶液Sを準備する工程であり、
前記溶液Sの準備は、
(i-a)固相:
His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-B2-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-[樹脂]
(式中、B2はLys(パルミトイル-Glu-OtBu)またはLys(Boc-Glu-OtBu)であり、R1はカルボン酸保護基であり、少なくともGlu、AspおよびLysの側鎖が保護基を保有する)
にコンジュゲートされた前駆体ペプチドを準備する工程と;
(i-b)前駆体ペプチドを、トリフルオロ酢酸(TFA)を含む切断組成物を用いて、樹脂から切断する工程を含み、
工程(i)から得られた前記溶液Sは、トリフルオロ酢酸(TFA)、水ならびにチオール捕捉剤および/またはシラン捕捉剤から選択される1種またはそれ以上の捕捉剤を含む、工程と;
(ii)溶液Sをジイソプロピルエーテルとアセトニトリルからなる逆溶媒と混合することによって、工程(i)のペプチドを沈殿させる工程であり、体積比(ジイソプロピルエーテル:アセトニトリル)が(3:1)から(5:1)の範囲内にある、工程と;
(iii)工程(ii)から得られた沈殿物を、好ましくは濾過および/または遠心分離によって、単離する工程
とを含む方法によって製造された粗製のリラグルチドまたはその塩を含む。
HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVRGRG (配列番号4)(式中、アミノ酸配列の20位のリシル部分(Lys20、K20)が修飾されている)で書かれた、簡単なリラグルチドのポリペプチド鎖の誘導体を指すことに直ぐに気付く。より詳細には、Lys20のイプシロンアミノ基が、アミド結合を介して、グルタミル部分のガンマカルボキシル基(γ-Glu、γ-E)のガンマカルボキシル基にコンジュゲートしている。グルタミル部分は、そのアミノ基を介して、パルミチン酸=ヘキサデカン酸部分にコンジュゲートしているか、または遊離NH2(アルファアミノ基、Nα)を保有する。
a)場合により7.0から7.5の範囲から選択されるpHのリン酸緩衝水溶液に溶解された、リラグルチドおよび少なくとも1種の不要な構成成分を含む液体組成物Cを準備する工程と;
b)組成物Cを、7.0から7.8の間のpHで、第1の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、アセトニトリルおよび5から50mMの濃度のリン酸アンモニウム緩衝水溶液を含む混合物を移動相として使用し、溶出を、リラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を、アセトニトリル19から67%(v/v)に徐々に上昇させることによって実行する工程と;
c)工程b)で得られたプールされたリラグルチドを含有する画分を、3.0未満のpHで、第2の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、0.05~0.5%(v/v)のトリフルオロ酢酸溶液およびアセトニトリルを含む混合物を移動相として使用し、溶出を、精製したリラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を、31から100%(v/v)に徐々に上昇させることによって実行する工程と;
d)場合により、工程c)で得られたリラグルチドを、7.0から7.8の間のpHで、第3の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、緩衝水溶液AB2のアセトニトリルとの混合物を移動相として使用し、溶出を、精製したリラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を、19から67%(v/v)に徐々に上昇させることによって実行する工程と;
e)場合により、工程c)またはd)のいずれかにおいて得られたリラグルチドをサイズ排除クロマトグラフィーに供する工程と;
f)場合により、工程c)、d)またはe)のいずれかにおいて得られたリラグルチドをペプチドの脱塩に供する工程であり、脱塩が、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィーまたは限外濾過によって実施される工程
とを含み、
工程b)および工程c)ならびに存在する場合は工程d)、e)および/またはf)は、4~25℃の範囲から選択される温度で行われ、
好ましくは、工程b)およびc)ならびに存在する場合は工程d)で使用される固定相は、C8に結合したシリカまたはC18に結合したシリカである。
適切な精製条件を特定するために、小規模の実験を行った。表2の2列目に示した7種の移動相の緩衝剤を、表2の1行目の3~6列に示した4種の異なる固定相について、それぞれ試験した。各移動相の緩衝剤を使用して、前記緩衝剤の水溶液中3%(v/v)のアセトニトリルからなる緩衝液A、および前記緩衝剤の水溶液中67または80%(v/v)のアセトニトリルからなる緩衝液Bを調製した。水溶液中の緩衝剤の濃度は、移動相の緩衝剤の性質に応じて、20から400mMの間であった。
1.種々のC8およびC18固定相は同様の結果を示す。固定相のそれぞれについて、以下の観察結果があてはまった:
2.中性からやや塩基性(7.0≦pH<8.0)の条件下で、リン酸アンモニウム緩衝液は、試験した他の緩衝液より驚くほど優れている(1~4行の3~6列を参照のこと)。
3.酸性条件下(pH<3)で、TFA緩衝液は、試験した他の緩衝液より驚くほど優れている(5~7行の3~6列を参照のこと)。
精製は、第1の次元のpH7.5でのクロマトグラフィー精製と、その後の、第2の次元の酸性条件下でのクロマトグラフィー精製を含んだ。
精製は、第1の次元のpH7.7でのクロマトグラフィー精製と、その後の、第2の次元の酸性条件下でのクロマトグラフィー精製を含んだ。
C8-結合したシリカを充填した5cmのMODcolカラム(Grace)(樹脂層高およそ32cm)を、220nmで検出する(Knauer smartline UV detector 2500)分取HPLCシステム(Knauer HPLC pump 1800)および自動画分コレクター(Buchi C-660)に使用した。上記に示す2つの次元の手法によって精製したリラグルチドを出発材料として使用した(純度:99.2%)。カラムを緩衝液A中で平衡化し、試料を43ml/分の流量でカラムにローディングした。詳細な溶出プロトコルを以下の表7に示す。
C8-結合したシリカを充填した5cmのMODcolカラム(Grace)(樹脂層高およそ32cm)を、220nmで検出する(Knauer smartline UV detector 2500)分取HPLCシステム(Knauer HPLC pump 1800)および自動画分コレクター(Buchi C-660)に使用した。上記に示す2つの次元の手法によって精製したリラグルチドを出発材料として使用した。カラムを緩衝液A中で平衡化し、試料を43ml/分の流量でカラムにローディングした。詳細な溶出プロトコルを以下の表8に示す。
UHPLCで精製したリラグルチド(1.7l、およそ35g/lに濃縮)を、1kDaの分画分子量を有するポリエーテルスルホン(PES)膜を備えた標準機器を使用するタンジェンシャルフロー濾過に供した。2.2バールの膜間圧および1l/分の流量を適用し、33ml/分の透過液量を実測した。被保持物中の体積損失は、超純水を一定量添加することによって補った。
Fmoc-SPPSから得たリラグルチドを本発明の3つの次元の精製に供した。C8-結合したシリカを固定相として用い、移動相の水性構成成分は、第1の次元でリン酸緩衝液、第2の次元でTFAおよび第3の次元で酢酸緩衝液を含有した。各工程の後に得られたプールした分画をLC-MSで分析して、精製プロトコルの効率を評価した。特定の優勢な不要な構成成分に関する結果を以下の表9にまとめる。濃度は、リラグルチドの主なピークの面積パーセントで示す。
の不純物は検出できなかった。
Claims (14)
- リラグルチドを精製するための方法であって、
a)リラグルチドと少なくとも1種の不要な構成成分を含む液体組成物Cを準備する工程と;
b)組成物Cを、7.0から7.8の間のpHで、第1の逆相高速液体クロマトグラフ(RP-HPLC)精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、リン酸緩衝水溶液AB1およびアセトニトリルを含む移動相を使用し、溶出を、リラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を徐々に上昇させることによって実行する工程と;
c)工程b)で得られたプールされたリラグルチドを含有する画分を、3.0未満のpHで、第2の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、トリフルオロ酢酸およびアセトニトリルを含む移動相を使用し、溶出を、精製したリラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を徐々に上昇させることによって実行する工程
とを含む前記方法。 - 工程b)のリン酸緩衝水溶液AB1は、リン酸アンモニウム緩衝液である、請求項1に記載の方法。
- 工程b)の勾配はアセトニトリル19から67%(v/v)であり、および/または工程c)の勾配はアセトニトリル31から100%(v/v)である、請求項1または2に記載の方法。
- 工程c)で使用される移動相内のトリフルオロ酢酸濃度は、0.05~0.5%(v/v)の範囲から選択される、請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。
- d)工程c)で得られたリラグルチドを、7.0から7.8の間のpHで、第3の逆相HPLC精製に供する工程であり、炭化水素に結合したシリカを固定相として使用し、緩衝水溶液AB2のアセトニトリルとの混合物を移動相として使用し、溶出を、精製したリラグルチドを含有する画分を回収しながら移動相内のアセトニトリル濃度を徐々に上昇さ
せることによって実行する工程
をさらに含む、請求項1~4のいずれか1項に記載の方法。 - 前記緩衝水溶液AB2は、
- リン酸二水素ナトリウムとリン酸水素二ナトリウムの混合物、
- リン酸二水素カリウムとリン酸水素二カリウムの混合物、
- 酢酸カリウム、および
- 酢酸ナトリウム
からなる群から選択される、請求項5に記載の方法。 - 工程b)および/もしくは工程c)ならびに/または存在する場合は工程d)の、すべてまたは一部は、4~25℃の範囲から選択される温度で行われる、請求項1~6のいずれか1項に記載の方法。
- 工程b)およびc)ならびに存在する場合は工程d)で使用される固定相は、C8に結合したシリカまたはC18に結合したシリカである、請求項1~7のいずれか1項に記載の方法。
- サイズ排除クロマトグラフィーの工程e)をさらに含む、請求項1~8のいずれか1項に記載の方法。
- ペプチドを脱塩する工程f)をさらに含む、請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。
- それぞれの工程のすべてまたは一部は、4~20℃の範囲から選択される温度で行われる、請求項9または10に記載の方法。
- 工程a)は、7.0から7.5の範囲から選択されるpHで、乾燥された粗製のリラグルチドペプチドをリン酸緩衝水溶液AB0に溶解することを含む、請求項1~11のいずれか1項に記載の方法。
- 前記粗製のリラグルチドペプチドは、固相ペプチド合成と、それに続く、トリフルオロ酢酸に媒介される切断および切断組成物からのペプチドの沈殿によって得られる、請求項1~12のいずれか1項に記載の方法。
- 精製されたリラグルチドは、凍結乾燥される、請求項1~13のいずれか1項に記載の方法。
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CN113049690B (zh) * | 2019-12-27 | 2022-07-22 | 翰宇药业(武汉)有限公司 | 一种多肽脱盐的方法 |
CN113121675B (zh) * | 2019-12-31 | 2023-03-31 | 翰宇药业(武汉)有限公司 | 一种glp-1类似物的转盐方法 |
CN111650313A (zh) * | 2020-06-03 | 2020-09-11 | 重庆医科大学 | 定量测定生物样品中利拉鲁肽生物类似物含量的方法 |
CN113984911A (zh) * | 2020-07-27 | 2022-01-28 | 宁波鲲鹏生物科技有限公司 | 一种同时分析利拉鲁肽及其Boc-利拉鲁肽主链的色谱方法 |
CN112578044B (zh) * | 2020-12-02 | 2022-09-02 | 成都普康生物科技有限公司 | 一种高效液相检测Fmoc-AEEA含量的方法 |
CN114605523A (zh) * | 2020-12-03 | 2022-06-10 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种反相色谱纯化制备利拉鲁肽的方法 |
CN112526051B (zh) * | 2020-12-18 | 2022-08-09 | 上海吉奉生物科技有限公司 | 一种Fmoc-赖氨酸高效液相色谱测定方法 |
CN113624898B (zh) * | 2021-08-23 | 2023-08-25 | 成都诺和晟泰生物科技有限公司 | 一种手性镇痛类多肽药物的纯化方法 |
CN114280179B (zh) * | 2021-12-22 | 2024-03-15 | 北京美福润医药科技股份有限公司 | 艾塞那肽的前处理及其得到的His氨基酸洗脱液中异构体的检测方法 |
CN115343393B (zh) * | 2022-08-23 | 2023-09-26 | 福建省纤维检验中心 | 一种织物中1-乙烯基咪唑的检测方法 |
EP4345104A1 (en) | 2022-09-30 | 2024-04-03 | Bachem Holding AG | Method for preparing liraglutide |
CN116183752B (zh) * | 2022-12-29 | 2023-09-19 | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 | 一种多肽杂质的液相色谱检测方法 |
CN117736273B (zh) * | 2023-12-08 | 2024-05-07 | 广东省卓肽医药有限公司 | 一种替尔泊肽的纯化方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005019262A1 (en) | 2003-08-21 | 2005-03-03 | Novo Nordisk A/S | Purification of glucagon-like peptides |
WO2016005960A1 (en) | 2014-07-11 | 2016-01-14 | Dr. Reddy's Laboratories Limited | Process for preparation of liraglutide |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5512549A (en) | 1994-10-18 | 1996-04-30 | Eli Lilly And Company | Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use |
PT944648E (pt) | 1996-08-30 | 2007-06-26 | Novo Nordisk As | Derivados do glp-1. |
US6451987B1 (en) | 1999-03-15 | 2002-09-17 | Novo Nordisk A/S | Ion exchange chromatography of proteins and peptides |
WO2000055203A1 (en) | 1999-03-15 | 2000-09-21 | Novo Nordisk A/S | Ion exchange chromatographic separation of glp-1 and related peptides |
CN100535007C (zh) * | 2003-08-21 | 2009-09-02 | 诺沃挪第克公司 | 胰高血糖素样肽的纯化 |
WO2005019261A1 (en) | 2003-08-21 | 2005-03-03 | Novo Nordisk A/S | Separation of polypeptides comprising a racemized amino acid |
US9441028B2 (en) | 2008-12-08 | 2016-09-13 | Novo Nordisk A/S | Counter current purification of polypeptides |
US9422330B2 (en) | 2010-03-01 | 2016-08-23 | Novo Nordisk A/S | Preparative RP-HPLC method for purifying peptides |
US20110313131A1 (en) | 2010-06-21 | 2011-12-22 | Christelle Carl | Reversed phase hplc purification of a glp-1 analogue |
CN102584982B (zh) | 2012-02-10 | 2014-02-05 | 深圳翰宇药业股份有限公司 | 一种纯化固相合成利拉鲁肽粗肽的方法 |
CN104936610A (zh) * | 2012-11-13 | 2015-09-23 | 益普生制药股份有限公司 | Glp-1类似物的纯化方法 |
CN103275208B (zh) | 2013-05-27 | 2015-04-01 | 成都圣诺生物制药有限公司 | 利拉鲁肽的制备方法 |
WO2014199397A2 (en) | 2013-06-11 | 2014-12-18 | Mylan Laboratories Ltd | Process for the preparation of liraglutide |
-
2017
- 2017-03-21 CA CA3018627A patent/CA3018627A1/en active Pending
- 2017-03-21 CN CN201780017323.3A patent/CN109311960A/zh active Pending
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-
2018
- 2018-09-17 IL IL261846A patent/IL261846B/en unknown
-
2020
- 2020-06-05 US US16/893,906 patent/US20200371069A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005019262A1 (en) | 2003-08-21 | 2005-03-03 | Novo Nordisk A/S | Purification of glucagon-like peptides |
WO2016005960A1 (en) | 2014-07-11 | 2016-01-14 | Dr. Reddy's Laboratories Limited | Process for preparation of liraglutide |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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