JP6975239B2 - プシコースエピマー化酵素生産微生物を用いたプシコース生産方法 - Google Patents
プシコースエピマー化酵素生産微生物を用いたプシコース生産方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6975239B2 JP6975239B2 JP2019533352A JP2019533352A JP6975239B2 JP 6975239 B2 JP6975239 B2 JP 6975239B2 JP 2019533352 A JP2019533352 A JP 2019533352A JP 2019533352 A JP2019533352 A JP 2019533352A JP 6975239 B2 JP6975239 B2 JP 6975239B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- psicose
- strain
- microorganism
- carbon source
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/02—Monosaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/90—Isomerases (5.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y501/00—Racemaces and epimerases (5.1)
- C12Y501/03—Racemaces and epimerases (5.1) acting on carbohydrates and derivatives (5.1.3)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
f=(追加培地供給直後の培養液内炭素源濃度)−(追加培地供給直前の培養液内炭素源濃度)
前記f値が0.5より小さい場合、炭素源が蓄積されている時間を減らして間欠的供給(feeding)方式にならないようにすることができ、DPEase活性を高く維持することができる。また、f値が0.25以上に維持して高濃度培養に進入することによって上昇するpH速度が炭素源が投入されて減少するpH速度より遅くてpH−stat区間を逸脱しないようにすることができる。
1.1 使用微生物
遺伝子が人為的に操作されていない、プシコース生産能を向上させた変異菌株培養において、培地炭素源はプシコースエピマー化酵素であるDPEaseの活性に影響を与えることができる。本実施例で使用した微生物は、自然進化を加速化させて改良させた変異菌株であってマイクロバクテリウムホリオルム(Microbacterium foliorum、M.foliorum)およびエンシファーアドヘレンス(Ensifer adhaerens、E.adhaerens)の二種類の変異菌株を使用した。
実施例1.1の菌株の培地炭素源として単糖類であるプシコース、果糖、ブドウ糖、ガラクトースおよびマンノースを用いて下記表1の種培養培地組成によって培地を混合し、全ての菌株の死滅のために121℃の温度で15分以上高温高圧蒸気滅菌処理してそれぞれの種菌培地を準備した。培養は、30℃の温度および240rpmでフラスコ(flask)培養を実施した。
実施例1.2の培養が完了した菌株のプシコースエピマー化酵素活性を測定するために0.1ml〜1mlの培養液を取った後、遠心分離を通じて菌体と培養液を分離させて培養上澄液を除去し菌体を回収した。各サンプルの菌体光学密度(OD、600nm)に基づいて乾燥菌体量を計算し、乾燥菌体量に対する基質溶液の体積比2.5mg/ml基準に合わせて乾燥菌体量に対する添加する高濃度果糖基質溶液の体積を計算して添加した。ここで、高濃度果糖基質溶液は、50mM PIPES緩衝溶液(pH7.0)を溶媒にして400g/L果糖と1mMマンガン金属イオンを添加した溶液をいう。
M.ホリオルム(M.foliorum)の培養において果糖或いはプシコースを炭素源として使用する場合、他の炭素源に比べて実施例1の結果と同様に高い菌体濃度或いは高いDPEase活性を誘導することができる。両方向性反応酵素であるDPEaseは果糖とプシコースを基質として直接使用可能であるので、培地炭素源として果糖或いはプシコースを使用する場合、高活性DPEase発現に効果的であり得る。したがって、DPEaseの基質である果糖およびプシコースを培地炭素源として使用する場合、高活性DPEase発現と菌体成長を比較した。
*vvm(volume of air per volume of liquid per minute):L/min
*培養温度:30℃
前記実施例1.3の方法で果糖およびプシコース含量分析を通じて各サンプルの酵素活性程度を比較して結果を図3a〜図3cに示した。
最適プシコース初期培養培地内炭素源濃度を確認するために、10g/L、15g/Lおよび20g/Lに初期プシコース濃度を選定して実施例2のように発酵を行った。また、実施例1.3で実施した活性測定法と同様に果糖の生物転換反応を行い、HPLCでプシコース生産量を測定し活性を比較して得られた結果を図4aおよび図4bに示した。
4−1.間欠的糖供給方式による活性分析
間欠的糖供給方式の効率性を確認するために、1.5−2.5g/L/hの速度で定められた時間ごとに糖が供給されるようにする条件で実施例2のように発酵を行った。また実施例1.3で実施した活性測定法と同様に果糖の生物転換反応を行い、HPLCでプシコース生産量を測定し活性を比較して得られた結果を図5a〜図5cに示した。
pH−stat糖供給方式の効率性を確認するために、実施例2のように発酵を行った。追加培地形態で炭素源が1回投入される時に培養液(発酵槽)内の炭素源濃度(g/L)の増加分をf値と定義して、f値が0.25になるように炭素源の投入時間を調節した。追加培地、即ち、Feeding溶液(供給溶液)の組成はプシコース400g/L、酵母抽出物(Yeast extract)40g/L、MnCl21mMを使用した。pH−stat基本原理によってpHが6.95を超過する時に糖が供給されてpHが減少するようにし、pH範囲6.8−6.95の区間で9%アンモニア水と糖溶液を通じてpHを調節した。また実施例1.3で実施した活性測定法と同様に活性を測定し、活性を比較して得られた結果を図6a、図6bおよび表4に示した。前記表4で菌体量(DCW)は、菌体濃度をOD600値で表示する場合、OD600値1は0.35DCW/Lに該当するので、(g−DCW/L)=0.35×OD600)、OD600値は数式2に適用して得ることができる。
実施例4で詳述したように追加培地(feeding solution)の組成を調節して高活性DPEaseを発現する高濃度菌株培養条件を確立した。高濃度菌体培養で適した追加培地(feeding solution)の組成を確立して高い菌体濃度で最大活性が維持される条件を以下の通り確立した。
糖供給溶液に酵母抽出物(Yeast extract)を複合有機窒素源として添加する場合、菌体成長速度向上および酵素活性増加に寄与することができる。したがって、糖供給溶液内酵母抽出物濃度を20、40、および80g/Lに調節して実施例2のように発酵を行い、pH−stat条件は実施例4の場合と同様にして行った。但し、追加培地(feeding solution)の組成は酵母抽出物(Yeast extract)を変数にして、プシコース400g/L、MnCl20.5mMを使用した。また実施例2で実施した活性測定法を用いて、酵素活性(Unit/g−DCW)を比較し、得られた結果を図7aおよび図7b、表5に示した。
実施例5.1で低濃度の酵母抽出物(Yeast extract)を使用する場合より低い活性を示したため、高活性、高濃度培養のために果糖とDPEaseの結合力を増加させて酵素の活性を増加させる助酵素として作用できる金属イオン、即ち、マンガンイオンの使用による活性を分析した。
Claims (32)
- 有機窒素源に対する炭素源の比率(C/N比)が10/2〜1/1である初期培養培地を準備する段階;
前記初期培養培地でプシコースエピメラーゼ酵素を生産できる微生物を培養する段階;および
前記培養された微生物、前記微生物の培養液、または前記微生物または微生物の培養液から得られるプシコースエピメラーゼ酵素を果糖基質と反応することを含む、果糖基質からプシコースを転換する段階を含み、
前記培養段階は、前記プシコースエピメラーゼ酵素を生産できる微生物の酵素活性または発現増加のための誘導剤として、プシコースを濃度0.001g/L〜5g/Lで含む培地で培養され、
前記培養段階は、培地の炭素源濃度(g/L)が0g/L〜5g/Lに維持されるように、C/N比率が20/1〜1/1である追加培地を間欠的または連続的に供給し、前記追加培地形態で炭素源が1回投入されるとき培養液内の炭素源濃度(g/L)の増加分と定義されるf値が0.2〜0.5であり、
前記培養段階は培地のpH変異値が0.05〜0.5である条件で行われ、
前記プシコースエピメラーゼ酵素がD−プシコース−3−エピメラーゼである、
プシコース生産方法。 - 前記初期培養培地の炭素源は、プシコースおよび果糖からなる群より選択された1以上を使用する、請求項1に記載のプシコース生産方法。
- 前記培養段階は、培地の炭素源の濃度(g/L)が0g/L〜1g/Lに維持されるように、炭素源を含む追加培地を供給する、請求項1に記載のプシコース生産方法。
- 0.1mM〜5mMの濃度の金属イオンを初期培養培地、追加培地およびこれらの混合培地に含めて供給する、請求項1に記載のプシコース生産方法。
- マンガン、コバルト、カルシウム、マグネシウム、ニッケル、鉄およびアルミニウムからなる群より選択された1以上の金属イオンを含む追加培地を供給する段階を追加的に含む、請求項4に記載のプシコース生産方法。
- 前記有機窒素源は、酵母抽出物(Yeast extract)、とうもろこし浸漬物、ソイトン(soytone)、ペプトン(peptone)、大豆(soybean)、大豆粕(soybean meal)、綿実粕(cottonseed meal)、糖蜜(molasses)、カゼイン(casein)、牛肉抽出物(Beef extract)、麦芽抽出物(Malt extract)およびトリプトン(Tryptone)などからなる群より選択された1種以上である、請求項1に記載のプシコース生産方法。
- 前記追加培地の供給は、pH維持糖供給(pH stat feeding)方式で行われる、請求項1に記載のプシコース生産方法。
- 前記pH維持糖供給方式は、培養液内pH変異値が0.05〜0.5になるように、炭素源を含む追加培地を供給する、請求項7に記載のプシコース生産方法。
- 前記pH維持糖供給方式は、炭素源を含む追加培地を供給し、前記追加培地形態で炭素源が1回投入される時、培養液内炭素源濃度(g/L)の変異値と定義されるf値が0.2〜0.5である、請求項7に記載のプシコース生産方法。
- 前記pH維持糖供給方式は、培養液の炭素源濃度(g/L)が0g/L〜5g/Lに維持されるように炭素源を含む追加培地を供給する、請求項7に記載のプシコース生産方法。
- 前記微生物は、プシコースエピメラーゼ酵素を暗号化する内在的遺伝子を含む非遺伝子組換え(non−genetically modified)微生物である、請求項1に記載のプシコース生産方法。
- 前記微生物は、マイクロバクテリウム属菌株、エンシファー属菌株、アグロバクテリウム(Agrobacterium)属菌株、シュードモナス(Pseudomonas)属菌株、ロドバクター(Rhodobacter)属菌株、コリネバクテリウム(Corynebacterium)属菌株からなる群より選択された1以上である、請求項11に記載のプシコース生産方法。
- プシコースエピメラーゼ酵素を生産できる微生物;および
前記微生物の酵素活性または発現増加のための誘導剤として、プシコースを濃度0.001g/L〜5g/Lで含む、プシコース生産用微生物の培養用組成物であって、
前記培養用組成物は、窒素源に対する炭素源の比率(C/N比率)が10/2〜1/1を有する微生物培養用初期培養培地、およびC/N比率が20/1〜1/1である追加培地を含み、
前記追加培地は、前記組成物の炭素源濃度(g/L)が0g/L〜5g/Lに維持されるように前記初期培養培地に間欠的または連続的に供給され、前記追加培地形態が供給されるとき培養用組成物内の炭素源濃度(g/L)の増加分と定義されるf値が0.2〜0.5であり、
前記プシコースエピメラーゼ酵素がD−プシコース−3−エピメラーゼである、
前記組成物はpH変異値(ΔpH)が0.05〜0.5となる条件で調節される、組成物。 - 前記炭素源は、3g/L〜30g/Lの濃度である、請求項13に記載の組成物。
- 前記培養用組成物は、酵母抽出物(Yeast extract)、とうもろこし浸漬物、ソイトン(soytone)、ペプトン(peptone)、大豆(soybean)、大豆粕(soybean meal)、綿実粕(cottonseed meal)、糖蜜(molasses)、カゼイン(casein)、牛肉抽出物(Beef extract)、麦芽抽出物(Malt extract)およびトリプトン(Tryptone)などからなる群より選択された1種以上の有機窒素源を含む、請求項13に記載の組成物。
- 前記培養用組成物は、pH6.0〜7.5の範囲を有する、請求項13に記載の組成物。
- 前記培養用組成物は、マンガン、コバルト、カルシウム、マグネシウム、ニッケル、鉄およびアルミニウムからなる群より選択された1以上の金属イオンを含む、請求項13に記載の組成物。
- 前記微生物は、プシコースエピメラーゼ酵素を暗号化する内在的遺伝子を含む非遺伝子組換え(non−genetically modified)微生物である、請求項13に記載の組成物。
- 前記微生物は、マイクロバクテリウム属菌株、エンシファー属菌株、アグロバクテリウム(Agrobacterium)属菌株、シュードモナス(Pseudomonas)属菌株、ロドバクター(Rhodobacter)属菌株、コリネバクテリウム(Corynebacterium)属菌株からなる群より選択された1以上である、請求項18に記載の組成物。
- 微生物の酵素活性または発現を増加させる誘導剤として、プシコースを濃度0.001g/L〜5g/Lで含む培地で、プシコースエピメラーゼ酵素を生産できる微生物を培養する段階を含み、
有機窒素源に対する炭素源の比率(C/N比)が10/2〜1/1である初期培養培地で微生物を接種して培養し、
培地の炭素源濃度(g/L)が0g/L〜5g/Lに維持されるように、有機窒素源に対する炭素源の比率(C/N比)が20/1〜1/1である追加培地を間欠的または連続的に添加して微生物を培養し、
前記追加培地形態で炭素源が1回投入されるとき培養液内の炭素源濃度(g/L)の増加分と定義されるf値が0.2〜0.5であり、
前記培養段階は培地のpH変異値が0.05〜0.5である条件で行われ、
前記プシコースエピメラーゼ酵素がD−プシコース−3−エピメラーゼである、
前記微生物のプシコースエピメラーゼ酵素活性を誘導または安定化させる方法。 - 前記誘導剤以外の炭素源を追加的に含む培地で培養する、請求項20に記載の方法。
- pH変異値が0.05〜0.5になる条件で微生物を培養する、請求項20に記載の方法。
- 前記誘導剤を含む追加培地を間欠的または連続的に添加して微生物を培養する、請求項20に記載の方法。
- 前記追加培地形態で炭素源が1回投入される時、培養液内炭素源濃度(g/L)の増加分と定義されるf値が0.2〜0.5である、請求項23に記載の方法。
- 前記微生物は、プシコースエピメラーゼ酵素を暗号化する内在的遺伝子を含む非遺伝子組換え(non−genetically modified)微生物である、請求項20に記載の方法。
- 前記微生物は、マイクロバクテリウム属菌株、エンシファー属菌株、アグロバクテリウム(Agrobacterium)属菌株、シュードモナス(Pseudomonas)属菌株、ロドバクター(Rhodobacter)属菌株、コリネバクテリウム(Corynebacterium)属菌株からなる群より選択された1以上である、請求項25に記載の方法。
- 前記微生物を培養する段階は、マンガン、コバルト、カルシウム、マグネシウム、ニッケル、鉄およびアルミニウムからなる群より選択された1以上の金属イオンを追加的に含む培地で行われる、請求項20に記載の方法。
- 前記培地は、酵母抽出物(Yeast extract)、とうもろこし浸漬物、ソイトン(soytone)、ペプトン(peptone)、大豆(soybean)、大豆粕(soybean meal)、綿実粕(cottonseed meal)、糖蜜(molasses)、カゼイン(casein)、牛肉抽出物(Beef extract)、麦芽抽出物(Malt extract)およびトリプトン(Tryptone)などからなる群より選択された1種以上の有機窒素源を含む、請求項20に記載の方法。
- 前記微生物が、マイクロバクテリウム属菌株、エンシファー属菌株、アグロバクテリウム(Agrobacterium)属菌株、シュードモナス(Pseudomonas)属菌株、ロドバクター(Rhodobacter)属菌株、コリネバクテリウム(Corynebacterium)属菌株である、請求項1−12および20−28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記微生物が、マイクロバクテリウム属菌株、エンシファー属菌株である、請求項1−12および20−28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記微生物が、マイクロバクテリウム属菌株、エンシファー属菌株、アグロバクテリウム(Agrobacterium)属菌株、シュードモナス(Pseudomonas)属菌株、ロドバクター(Rhodobacter)属菌株、コリネバクテリウム(Corynebacterium)属菌株である、請求項13−19のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記微生物が、マイクロバクテリウム属菌株、エンシファー属菌株である、請求項13−19のいずれか一項に記載の組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR10-2016-0184093 | 2016-12-30 | ||
KR20160184093 | 2016-12-30 | ||
PCT/KR2017/015780 WO2018124833A1 (ko) | 2016-12-30 | 2017-12-29 | 사이코스 에피머화 효소 생산 미생물을 이용한 사이코스 생산방법 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020503019A JP2020503019A (ja) | 2020-01-30 |
JP6975239B2 true JP6975239B2 (ja) | 2021-12-01 |
Family
ID=62710007
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019533352A Active JP6975239B2 (ja) | 2016-12-30 | 2017-12-29 | プシコースエピマー化酵素生産微生物を用いたプシコース生産方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20200080072A1 (ja) |
EP (1) | EP3564383B1 (ja) |
JP (1) | JP6975239B2 (ja) |
KR (1) | KR102198203B1 (ja) |
CN (1) | CN110392737B (ja) |
WO (1) | WO2018124833A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101944103B1 (ko) * | 2015-12-07 | 2019-01-30 | 주식회사 삼양사 | 마이크로박테리움 속 균주 및 이를 이용한 사이코스 생산방법 |
KR101944104B1 (ko) * | 2017-06-02 | 2019-01-30 | 주식회사 삼양사 | 마이크로박테리움 속 균주 및 이를 이용한 사이코스 생산방법 |
CN113957064B (zh) * | 2020-07-21 | 2023-05-26 | 山东福洋生物科技股份有限公司 | 一种重组枯草芽孢杆菌高密度发酵生产dpe的方法 |
CN112080453B (zh) * | 2020-08-28 | 2022-12-23 | 天津科技大学 | 一种合成d-阿洛酮糖的基因工程菌及其构建方法与应用 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20040046678A (ko) * | 2002-11-28 | 2004-06-05 | (주) 켐포트 | 폴리-베타-하이드록시 부틸산을 생산하는 신규의 미생물 및 그를 이용한 고농도 발효 제조방법 |
CN100577793C (zh) * | 2007-12-12 | 2010-01-06 | 江南大学 | 微生物转化d-果糖制备d-阿洛酮糖的菌种和方法 |
JP5997693B2 (ja) * | 2011-07-06 | 2016-09-28 | 松谷化学工業株式会社 | アルスロバクターグロビホルミスの生産する酵素 |
KR101647129B1 (ko) | 2013-04-09 | 2016-08-09 | 주식회사 삼양사 | 엔시퍼 속 균주 및 이를 이용한 사이코스 생산방법 |
KR101539097B1 (ko) * | 2013-12-26 | 2015-07-23 | 주식회사 삼양제넥스 | 사이코스 에피머화 효소를 암호화 하는 폴리뉴클레오타이드, 및 이를 이용하는 사이코스 생산방법 |
KR101577147B1 (ko) * | 2014-10-01 | 2015-12-11 | 경상대학교산학협력단 | 사이코스의 생산 방법 |
US10266862B2 (en) * | 2014-11-06 | 2019-04-23 | Industry-Academic Cooperation Foundation Gyeongsang National University | Method for preparing psicose |
KR102044957B1 (ko) * | 2014-12-31 | 2019-11-14 | 주식회사 삼양사 | 사이코스의 제조방법 |
WO2016201110A1 (en) * | 2015-06-09 | 2016-12-15 | Kembiotix Llc | Method for producing carbohydrates from dihydroxyacetone |
-
2017
- 2017-12-29 WO PCT/KR2017/015780 patent/WO2018124833A1/ko unknown
- 2017-12-29 US US16/469,788 patent/US20200080072A1/en active Pending
- 2017-12-29 EP EP17886404.7A patent/EP3564383B1/en active Active
- 2017-12-29 CN CN201780081682.5A patent/CN110392737B/zh active Active
- 2017-12-29 KR KR1020170184758A patent/KR102198203B1/ko active IP Right Grant
- 2017-12-29 JP JP2019533352A patent/JP6975239B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR102198203B1 (ko) | 2021-01-04 |
KR20180079217A (ko) | 2018-07-10 |
CN110392737A (zh) | 2019-10-29 |
EP3564383B1 (en) | 2022-08-03 |
US20200080072A1 (en) | 2020-03-12 |
CN110392737B (zh) | 2023-05-05 |
JP2020503019A (ja) | 2020-01-30 |
EP3564383A1 (en) | 2019-11-06 |
EP3564383A4 (en) | 2020-08-26 |
WO2018124833A1 (ko) | 2018-07-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11149048B2 (en) | High-purity D-psicose preparation method | |
JP6975239B2 (ja) | プシコースエピマー化酵素生産微生物を用いたプシコース生産方法 | |
JP6446141B2 (ja) | 一種の微生物の発酵によるグルコサミンを生産する菌株及びその方法 | |
EP2470668B1 (en) | Immobilization of psicose-epimerase and a method of producing d-psicose using the same | |
CN104928333B (zh) | 一种敲除glcK促进枯草芽孢杆菌合成乙酰氨基葡萄糖的方法 | |
US11066640B2 (en) | Microbacterium sp. strain and method for producing psicose by using same | |
TWI724324B (zh) | 生產丁酸及/或其鹽類之方法 | |
US20180077958A1 (en) | Method for manufacturing allulose-containing sweetener composition | |
KR102044957B1 (ko) | 사이코스의 제조방법 | |
CN108949713B (zh) | 一种米曲霉菌体发酵液的制备方法及其在低聚果糖生产中的应用 | |
EP3633023A1 (en) | Strain in microbacterium and method for producing psicose using same | |
WO2006054480A1 (ja) | γ-アミノ酪酸含有食品の製造方法、及びγ-アミノ酪酸高生成能を有する酵母 | |
CN103388009A (zh) | 利用克雷伯氏肺炎杆菌生产r-乙偶姻的方法 | |
Abi et al. | Improved laminaribiose phosphorylase production by Euglena gracilis in a bioreactor: a comparative study of different cultivation methods | |
BR102018076755A2 (pt) | Sistema de plataforma de fundição em nuvem aprimorado | |
KR20110034718A (ko) | 글루탐산 생산능을 갖는 신규의 균주 및 이를 이용한 글루탐산의 제조방법 | |
Katapodis et al. | Induction and partial characterization of intracellular β from Thermoascus aurantiacus and its application in the synthesis of 6-kestose | |
Ghezelbash et al. | Study of polyols production by Yarrowia lipolytica in batch culture and optimization of growth condition for maximum production | |
JPWO2012067106A1 (ja) | 酵母エキスの製造方法 | |
CN114058610B (zh) | 一种高活性的蔗糖异构酶及其应用 | |
Kim et al. | Two-step fed-batch culture of recombinant Escherichia coli for production of Bacillus licheniformis maltogenic amylase | |
CN109136308B (zh) | 一种提高发酵产聚唾液酸的方法及发酵液 | |
US10774350B2 (en) | Method for fermentative production of oxidized coenzyme Q10 | |
JPS62208293A (ja) | ビフイドバクテリウム菌増殖促進因子の製造法 | |
Lee et al. | Effect of the Supplement of Metabolites on Cell Growth and Poly-$\beta $-hydroxybutyrate Biosynthesis of Alcaligenes latus |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190620 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200609 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200904 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20210224 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210519 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20211012 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20211105 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6975239 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |