JP6849390B2 - 関節のこわばり改善剤 - Google Patents

Description

本発明は、関節のこわばり改善剤に関する。

関節のこわばりは、関節の動かし初めに関節が固くて動かしにくい症状を指す。関節のこわばりは主に関節や関節周囲の腱の炎症によって生じ、全身の関節に現れるが、特に朝の起床時等、長い時間関節を動かさなかった後に手や足に感じることが多い。
こわばりを感じても関節の全可動域を動かせることがあり、また、関節のこわばりは徐々にその感覚が薄れていくため、通常、適度に関節を動かす、温める等の方法によりその症状の軽減が図られている。また、関節リウマチや全身性エリテマトーデス等の自己免疫疾患を原因とする関節のこわばりは、薬物療法等によりその疾患を治療することでこわばりの改善が図られている。

一方、乳脂肪球皮膜（Ｍｉｌｋ−ｆａｔ Ｇｌｏｂｕｌｅ Ｍｅｍｂｒａｎｅ：ＭＦＧＭ）は、乳腺より分泌される乳脂肪球を被覆している膜成分で、バターミルクやバターセーラム等の乳複合脂質高含有画分に多く含まれることが知られている（非特許文献１）。乳脂肪球皮膜は、脂肪を乳汁中に分散させる機能を有するのみならず、マウスにおける運動機能向上作用や筋力向上作用等の生理機能を有することが報告されている（特許文献１）。また、乳脂肪球皮膜は、肩こりや歩行中のつまずきに対する改善効果を有することが報告されている（特許文献２及び３）。
しかしながら、乳脂肪球皮膜が関節のこわばりへ与える影響に関しては報告がない。

特開２０１０−５９１５５号公報 特開２０１６−１３８０５８号公報 特開２０１６−１３８０５９号公報

三浦晋、ＦＯＯＤ ＳＴＹＬＥ２１、２００９年

本発明は、関節のこわばりの改善に有用な医薬品、医薬部外品又は食品、或いはこれらに配合可能な素材又は製剤を提供することに関する。

本発明者は、上記課題に鑑み鋭意検討したところ、乳脂肪球皮膜の摂取によって関節のこわばりが軽減し、乳脂肪球皮膜が関節のこわばりの改善に有用であることを見出した。

すなわち、本発明は、乳脂肪球皮膜を有効成分とする関節のこわばり改善剤を提供するものである。
また、本発明は、乳脂肪球皮膜を有効成分とする関節のこわばり改善用食品を提供するものである。

本発明によれば、膝関節等の関節のこわばりを改善することができる。

膝関節のこわばりの改善効果を示すグラフ。

本発明で用いられる乳脂肪球皮膜は、乳脂肪球を被覆している膜、及び膜を構成する成分の混合物と定義される。乳脂肪球皮膜は、食経験が豊富で安全性が高い。
乳脂肪球皮膜は、一般的に、乾燥重量の約半分が脂質で構成され、当該脂質としては、トリグリセライドやリン脂質、スフィンゴ糖脂質が含まれることが知られている（三浦晋、ＦＯＯＤ ＳＴＹＬＥ２１、２００９及びＫｅｅｎａｎ ＴＷ、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９８３、ｐｐ８９−ｐｐ１３０）。リン脂質としては、スフィンゴミエリン（ＳＭ）等のスフィンゴリン脂質、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）やホスファチジルセリン（ＰＳ）等のグリセロリン脂質が含まれることが知られている。
また、脂質以外の成分としては、ミルクムチンと呼ばれる糖タンパク質が含まれることが知られている（Ｍａｔｈｅｒ、Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ、１９７８）。

本発明で用いられる乳脂肪球皮膜は、生理効果の点から、乳脂肪球皮膜中の脂質の含有量が、１０質量％以上、更に２０質量％以上、更に３０質量％以上であるのが好ましく、また、風味・ハンドリングの点から、１００質量％以下、更に９０質量％以下、更に６０質量％以下であるのが好ましい。

乳脂肪球皮膜は、生理効果の点から、乳脂肪球皮膜中のリン脂質の含有量が５質量％以上、更に８質量％以上、更に１０質量％以上、更に１５質量％以上であるのが好ましく、また、風味・ハンドリングの点から、１００質量％以下、更に８５質量％以下、更に７０質量％以下、更に６０質量％以下であるのが好ましい。

乳脂肪球皮膜は、生理効果の点から、乳脂肪球皮膜中のスフィンゴミエリン（ＳＭ）の含有量が、１質量％以上、更に２質量％以上、更に３質量％以上であるのが好ましく、また、風味・ハンドリングの点から、５０質量％以下、更に３０質量％以下、更に２５質量％以下、更に２０質量％以下であるのが好ましい。
同様の点から、乳脂肪球皮膜の全リン脂質中のスフィンゴミエリン含有量は、３質量％以上、更に５質量％以上、更に１０質量％以上、更に１５質量％以上であるのが好ましく、また、５０質量％以下、更に４０質量％以下、更に３５質量％以下、更に３０質量％以下であるのが好ましい。
尚、本明細書において、乳脂肪球皮膜中の脂質、リン脂質の含有量、並びに乳脂肪球皮膜の全リン脂質中のスフィンゴミエリンの含有量は、乳脂肪球皮膜の乾燥物に対する質量割合とする。

乳脂肪球皮膜は、原料乳から遠心分離法や有機溶剤抽出法等の公知の方法により得ることができる。例えば、特開平３−４７１９２号公報に記載の乳脂肪球皮膜の調製方法を用いることができる。また、特許第３１０３２１８号公報、特開２００７−８９５３５号公報に記載の方法等を用いることができる。
さらに、透析、硫安分画、ゲルろ過、等電点沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、溶媒分画等の手法により精製することにより純度を高めたものを用いてもよい。
乳脂肪球皮膜の形態は、特に限定されず、室温（１５〜２５℃）で液状、半固体状（ペースト等）、固体状（粉末、固形、顆粒等）等のいずれでもよく、これらを単独で又は２種以上組み合わせて用いてもよいが、好ましくは固体状（粉末）である。

乳脂肪球皮膜の原料乳としては、牛乳やヤギ乳等が挙げられる。なかでも、食経験が豊富であり、安価な点から、牛乳が好ましい。また、原料乳には、生乳、全粉乳や加工乳等の乳の他、乳製品も含まれ、乳製品としては、バターミルク、バターオイル、バターセーラム、ホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）等が挙げられる。
バターミルクは、牛乳等を遠心分離して得られるクリームからバター粒を製造する際に得られ、当該バターミルク中に乳脂肪球皮膜が多く含まれているので、乳脂肪球皮膜としてバターミルクをそのまま使用してもよい。同様に、バターオイルを製造する際に生じるバターセーラム中にも乳脂肪球皮膜が多く含まれているので、乳脂肪球皮膜としてバターセーラムをそのまま使用してもよい。

乳脂肪球皮膜は、市販品を用いることもできる。斯かる市販品としては、メグレジャパン（株）「ＢＳＣＰ」、雪印乳業（株）「ミルクセラミドＭＣ−５」、（株）ニュージーランドミルクプロダクツ「Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ シリーズ（５００，７００）」等が挙げられる。

後記実施例に示すように、乳脂肪球皮膜の摂取によって、起床時に生じる膝関節のこわばりが改善したことから、乳脂肪球皮膜は関節のこわばりを有意に改善する作用を有する。
従って、乳脂肪球皮膜は、関節のこわばりの改善に有用な関節のこわばり改善剤となり得、また、関節のこわばり改善剤を製造するために使用することができる。すなわち、乳脂肪球皮膜は、関節のこわばりが気になるヒトに適用して、関節のこわばりを改善するために使用することができる。
本明細書において、「関節」は、骨相互間の全ての結合であるが、そのうち可動結合をなすものをいう。本発明において、関節は、好ましくは蝶番関節、螺旋関節、鞍関節、楕円関節、顆状関節、球関節、平面関節、半関節、臼状関節であり、より好ましくは膝関節、指節間関節、腰椎椎間関節、肩関節、肘関節、股関節であり、更に好ましくは膝関節である。
「関節のこわばり」は、関節の動かし初めに関節が固くて動かしにくい症状である。このこわばりは、睡眠や同じ姿勢の維持等で長い時間関節を動かさないでいると現れることが多く、生じてからしばらくしてその感覚は薄れ、消失する。また、こわばりは、関節の痛みや腫れが生じる前の症状として現れることも多い。
「改善」とは、症状又は状態の好転、症状又は状態の悪化の防止、抑制又は遅延、あるいは症状又は状態の進行の逆転、防止、抑制又は遅延をいう。
「使用」は、ヒトへの投与又は摂取であり得、また治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。「非治療的」とは、医療行為を含まない概念、すなわち人間を手術、治療又は診断する方法を含まない概念、より具体的には医師又は医師の指示を受けた者が人間に対して手術、治療又は診断を実施する方法を含まない概念である。

本発明の関節のこわばり改善剤は、ヒトを含む動物に摂取又は投与した場合に関節のこわばり改善効果を発揮する医薬品、医薬部外品又は食品となり、また当該関節のこわばり改善剤は、当該医薬品、医薬部外品又は食品に配合して使用される素材又は製剤となり得る。

当該食品には、関節のこわばりの改善をコンセプトとし、必要に応じてその旨の表示が許可された食品（特定保健用食品、機能性表示食品）が含まれる。これらの食品は機能表示が許可された食品であるため、一般の食品と区別することができる。

上記医薬品（医薬部外品も含む、以下同じ）の投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、トローチ剤、シロップ剤等による経口投与が挙げられる。
このような種々の剤型の製剤は、本発明の乳脂肪球皮膜、又は他の薬学的に許容される担体、例えば、賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等や、乳脂肪球皮膜以外の薬効成分を適宜組み合わせて調製することができる。
なかでも、好ましい剤型は経口投与用の固形製剤であり、錠剤が好ましい。

医薬品中の乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、一般的に０．０１質量％以上、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．２質量％以上であり、更に好ましくは１質量％以上であり、また、好ましくは９０質量％以下、より好ましくは８０質量％以下、更に好ましくは７０質量％以下、更に好ましくは６０質量％以下である。

上記食品の形態としては、固形、半固形又は液状であり得、例えば、清涼飲料水、茶系飲料、コーヒー飲料、果汁飲料、炭酸飲料、ゼリー、ウエハース、ビスケット、パン、麺、ソーセージ等の飲食品や栄養食等の各種食品組成物の他、さらには、上述した経口投与製剤と同様の形態（錠剤、カプセル剤、トローチ剤等の固形製剤）の栄養補給用組成物が挙げられる。なかでも、固形製剤が好ましく、錠剤がより好ましい。

種々の形態の食品は、乳脂肪球皮膜、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、酸味料、甘味料、苦味料、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤、乳脂肪球皮膜以外の有効成分等を適宜組み合わせて調製することができる。

食品中の乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、その使用形態により異なるが、飲料の形態では、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．０１質量％以上、更に好ましくは０．１質量％以上であり、また、好ましくは３質量％以下、より好ましくは２質量％以下、更に好ましくは１質量％以下である。

錠剤や加工食品等の固形食品の形態では、乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、好ましくは０．０５質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、更に好ましくは０．２質量％以上であり、また、好ましくは９０質量％以下、より好ましくは８０質量％以下、更に好ましくは７０質量％以下、更に好ましくは６０質量％以下である。

本発明の関節のこわばり改善剤の投与量又は摂取量は、投与又は摂取対象者の体重、性別、年齢、状態又はその他の要因に従って変動し得る。投与の用量、経路、間隔、及び摂取の量や間隔は、当業者によって適宜決定され得るが、通常、成人１人（６０ｋｇ）に対して１日あたり、乳脂肪球皮膜（乾燥物換算）として、好ましくは０．１ｇ以上、より好ましくは０．３ｇ以上、更に好ましくは１ｇ以上であり、また、好ましくは３０ｇ以下、より好ましくは２０ｇ以下、更に好ましくは１０ｇ以下である。
また、通常、成人１人（６０ｋｇ）に対して１日あたり、スフィンゴミエリンとして、好ましくは１０ｍｇ以上、より好ましくは２０ｍｇ以上、更に好ましくは４０ｍｇ以上であり、また、好ましくは１５００ｍｇ以下、より好ましくは１０００ｍｇ以下、更に好ましくは５００ｍｇ以下、更に好ましくは２５０ｍｇ以下である。
本発明では斯かる量を１日に１回〜複数回で投与又は摂取するのが好ましい。

上記製剤は、任意の計画に従って投与又は摂取され得る。
投与又は摂取期間は特に限定されないが、反復・連続して投与又は摂取することが好ましく、５日間以上連続して投与又は摂取することがより好ましく、１５日間以上連続して投与又は摂取することが更に好ましい。

投与又は摂取対象者としては、関節のこわばりを軽減し、こわばりを改善することを必要とする若しくは希望するヒトであれば特に限定されないが、関節がこわばる自覚があるヒトにおける投与又は摂取が有効である。

〔錠剤の調製〕
日本薬局方（製剤総則「錠剤」）に準じて、下記表１に示す組成の錠剤（実施例１：３５３ｍｇ／錠、比較例１：４５０ｍｇ／錠）を調製した。

乳脂肪球皮膜（ＭＦＧＭ）は牛乳から調製したものを使用した。
ＭＦＧＭの含水量は３．６質量％であった。ＭＦＧＭの組成は、乾燥物換算で、炭水化物：１１．３質量％、脂質：２５．１質量％、タンパク質：５３．６質量％であった。また、ＭＦＧＭ中、リン脂質の含有量は乾燥物換算で１６．６質量％であり、スフィンゴミエリンの含有量は３．６質量％であった。

上記ＭＦＧＭの分析は次のとおり行った。
（１）タンパク質の分析
タンパク質量はケルダール法を用いて、窒素・タンパク質換算係数６．３８として求めた。

（２）脂質の分析
脂質量は酸分解法で求めた。試料を１ｇ量りとり、塩酸を加え分解した後、ジエチルエーテル及び石油エーテルを加え、攪拌混和した。エーテル混合液層を取り出し、水洗した。溶媒を留去させ、乾燥させた後、重量を秤量することで脂質量を求めた、

（３）炭水化物の分析
炭水化物量は試料の質量から試料中のタンパク質量、脂質質量、灰分量、及び水分量を除くことにより求めた。なお、灰分量は直接灰化法(５５０℃で試料を灰化させ重量測定)、水分量は常圧加熱乾燥法(１０５℃４時間乾燥させ重量測定)により求めた。

（４）リン脂質の分析
試料１ｇを量りとり、クロロホルム及びメタノールの２：１（Ｖ／Ｖ）混液１５０ｍＬ、１００ｍＬ、及び２０ｍＬ中でホモジナイズ後、０．８８質量％（Ｗ／Ｖ）塩化カリウム水溶液９３ｍＬを添加し、一晩室温で放置した。脱水ろ過、溶媒留去後、クロロホルムを添加し総量を５０ｍＬとした。そのうち２ｍＬを分取し、溶媒留去後、５５０℃１６時間加熱処理により灰化した。灰分を６Ｍ塩酸水溶液５ｍＬに溶解後、蒸留水を添加し、総量を５０ｍＬとした。３ｍＬを分取し、モリブデンブルー発色試薬５ｍＬ、５質量％（Ｗ／Ｖ）アスコルビン酸水溶液１ｍＬ及び蒸留水を添加し総量を５０ｍＬとし、７１０ｎｍの吸光度を測定した。リン酸２水素カリウムを用いた検量線からリン量を求め、リン量に２５．４をかけた値をリン脂質量とした。

（５）スフィンゴミエリンの分析
試料１ｇを量りとり、クロロホルム及びメタノールの２：１（Ｖ／Ｖ）混液１５０ｍＬ、１００ｍＬ、及び２０ｍＬ中でホモジナイズ後、０．８８質量％（Ｗ／Ｖ）塩化カリウム水溶液９３ｍＬを添加し、一晩室温で放置した。脱水ろ過、溶媒留去後、クロロホルムを添加し総量を５０ｍＬとした。そのうち１０ｍＬを分取し、シリカカートリッジカラムに添加した。カラムをクロロホルム２０ｍＬで洗浄後、メタノール３０ｍＬでリン脂質を溶出し、溶媒留去後クロロホルム１．８８ｍＬに溶解した。シリカゲル薄層プレートに２０μＬを負荷し、１次元展開溶媒としてテトラヒドロフラン：アセトン：メタノール：水＝５０：２０：４０：８（Ｖ／Ｖ）、２次元展開溶媒としてクロロホルム:アセトン：メタノール：酢酸：水＝５０：２０：１０：１５：５（Ｖ／Ｖ）を用いて２次元展開を行った。展開後の薄層プレートにディトマー試薬を噴霧し、スフィンゴミエリンのスポットをかきとり、３質量％（Ｖ／Ｖ）硝酸含有過塩素酸溶液２ｍＬ添加後、１７０℃３時間の加熱処理を行った。蒸留水５ｍＬ添加後モリブデンブルー発色試薬５ｍＬ、５質量％（Ｗ／Ｖ）アスコルビン酸水溶液１ｍＬ及び蒸留水を添加し総量を５０ｍＬとし、７１０ｎｍの吸光度を測定した。リン酸２水素カリウムを用いた検量線からリン量を求め、リン量に２５．４をかけた値をスフィンゴミエリン量とした。

〔二重盲検無作為割付パラレルデザインによる比較検証試験〕
１．対象者及び試験方法
朝の起床時に膝関節のこわばり感がある６０歳代の健常男女１６名を、ＭＦＧＭ群（７名）、プラセボ群（９名）の２つに群分けし、ＭＦＧＭ群にはＭＦＧＭを含む実施例１の錠剤（計１０粒）を、プラセボ群にはＭＦＧＭを含まない比較例１の錠剤（計７粒）を、６週間、毎日好きなタイミングで摂取させた。

２．膝関節のこわばり改善効果の評価
膝関節のこわばり改善効果の評価は、試験開始前（０週目）と試験開始から６週間後に、朝の起床後、動きはじめるときの膝関節の「こわばり」の状態について問診を行って評価した。評価基準は、「１：こわばりはない」、「２：少しこわばる」、「３：中程度こわばる」、「４：かなりこわばる」、「５：ひどくこわばる」の５段階とし、それぞれ数日間の状態としてもっとも当てはまると思えるスコア値を決定させた。

３．結果
対象者全員を最終解析対象者とし、６週間後のスコア値について、各群、初期値との差（Δ値）を算出し図１に示した。
得られた数値は平均値±標準偏差で示した。
その結果、試験開始前に対する試験終了後の膝関節のこわばりは、ＭＦＧＭ群でプラセボ群に比して軽減し、乳脂肪球皮膜の摂取によって、関節のこわばりが改善することが確認された。

Claims (11)

1. 乳脂肪球皮膜を有効成分とする関節のこわばり改善剤（但し、リウマチ性関節炎による関節のこわばりの改善剤としての使用を除く）。
2. 乳脂肪球皮膜が、リン脂質を５〜１００質量％含有する請求項１記載の関節のこわばり改善剤。
3. 乳脂肪球皮膜が、スフィンゴミエリンを１〜５０質量％含有する請求項１記載の関節のこわばり改善剤。
4. 成人１人あたり１日にスフィンゴミエリンを１０〜１５００ｍｇ投与又は摂取するものである請求項１〜３のいずれか１項記載の関節のこわばり改善剤。
5. 関節が膝関節である請求項１〜４のいずれか１項記載の関節のこわばり改善剤。
6. 剤型が経口投与用の固形製剤である請求項１〜５のいずれか１項記載の関節のこわばり改善剤。
7. 乳脂肪球皮膜を有効成分とする関節のこわばり改善用食品（但し、リウマチ性関節炎による関節のこわばりの改善用食品としての使用を除く）。
8. 乳脂肪球皮膜が、リン脂質を５〜１００質量％含有する請求項７記載の関節のこわばり改善用食品。
9. 乳脂肪球皮膜が、スフィンゴミエリンを１〜５０質量％含有する請求項７記載の関節のこわばり改善用食品。
10. 関節が膝関節である請求項７〜９のいずれか１項記載の関節のこわばり改善用食品。
11. 剤型が経口投与用の固形製剤である請求項７〜１０のいずれか１項記載の関節のこわばり改善用食品。
    

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