JP6774435B2 - 抗ウイルス活性を有する鼻づまり解除組成物 - Google Patents
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Description
Hela細胞を96穴プレートへ、ウェルあたり5×103個の細胞密度で播種し、4.5g/lグルコースを含有する標準的なDMEM組織培地中で24時間培養した。0〜150μg/mlの変動する濃度でカラゲナンポリマーを、連続希釈した(各表に対する個々の説明文において示されるような)NaClおよびソルビトールとの組み合わせで含有するウイルス懸濁液を30分間インキュベートした。細胞に、検査物質および7×103(HRV1a)または5×104(HRV8)感染単位をウェルあたりに含有するこれらのウイルス懸濁液を感染させた。感染30分後、ウイルス接種材料を取り出し、カラゲナンポリマー、NaCl塩およびソルビトールを検査されることになっている濃度で含有するウイルス非含有感染培地によって置換した。細胞を2,3日間、33度でインキュベートした。検査試料の抗ウイルス効能は、カラゲナンポオリマーの非存在下で対照感染の90%超の細胞が死滅した時の細胞生存率を決定することによって評価した。細胞を、同じ連続希釈の検査物質(すなわち、カラゲナン成分および浸透圧調整剤)とともに、ウイルス感染の非存在下でインキュベートして、当該処置の潜在的な毒性についてモニターした。IC50値の算出は、標準的な適合ソフトウェアExcelFitを用いて実施した。非感染細胞に及ぼすポリマーおよび異なる検査塩またはソルビトールの濃度の有意な陰性効果は検出されなかった。
96穴プレート上に、hCoV OC43の2血球凝集単位/ウェルを、1/2対数連続希釈の検査試料または対照試料とともに室温で10分間インキュベートした。最終的なアッセイ濃度は、7%ソルビトールの存在下または非存在下で0.5、0.9、2.0、2.3または2.6%NaCl水溶液中の0.002〜3μg/mlイオタ−カラゲナンとした。次に、ニワトリRBC(PBS中の1%(v/v))の懸濁液を各ウェルに添加し、ウイルスによる赤血球(RBC)の4℃で1.5時間の血球凝集を可能にした。アッセイ評価の時点で、カラゲナン非存在下の対照RBCを完全に凝集させたのに対し、血球凝集は、最高試料特異的濃度である最低阻害濃度のカラゲナン存在下で阻害された。
表6に要約されるように、カラゲナンを含有する高浸透圧性溶液の濾過滅菌は、高濃度の塩化ナトリウムの場合に損なわれる。代替的な浸透圧付与剤としての7%または10%ソルビトールの添加は、一部の調製物において類似の効果を有し、すなわち、これらの溶液はいずれも、0.22μmフィルターシステムを通じて濾過滅菌することはできない。対照的に、追加の緩衝液およびEDTAを含有する高浸透圧性カラゲナン製剤はすべて、0.22μmフィルターを通じて濾過滅菌することができる。それゆえ、ソルビトールのような非イオン性浸透圧調整剤を、塩化ナトリウムのようなイオン性浸透圧調整剤の部分的なまたは完全な置き換えにおいて、適切な緩衝液およびEDTAとともに含有するカラゲナン製剤は、鼻づまりを解除する上で有効でありかつ少なくともヒトライノウイルスに対する抗ウイルス活性を留めている滅菌済み溶液として製造することができる。
イオタ−カラゲナン:1.2mg/ml
カッパ−カラゲナン:0.4mg/ml
ソルビトール:70mg/ml
NaCl:5mg/ml
0.5倍のMc−Ilvaine緩衝液
1mg/mlのEDTA
浸透圧:787mOsm/L
水を添加して100%にする。
イオタ−カラゲナン:1.2mg/ml
カッパ−カラゲナン:0.4mg/ml
ソルビトール:70mg/ml
NaCl:9mg/ml
0.5倍のMc−Ilvaine緩衝液
1mg/mlのEDTA
浸透圧:904mOsm/L
水を添加して100%にする。
イオタ−カラゲナン:1.2mg/ml
カッパ−カラゲナン:0.4mg/ml
ソルビトール:100mg/ml
NaCl:5mg/ml
0.25倍のMc−Ilvaine緩衝液
1mg/mlのEDTA
浸透圧:954mOsm/L
水を添加して100%にする。
イオタ−カラゲナン:1.2mg/ml
カッパ−カラゲナン:0.4mg/ml
ソルビトール:100mg/ml
NaCl:9mg/ml
0.5倍のMc−Ilvaine緩衝液
1mg/mlのEDTA
浸透圧:1090mOsm/L
水を添加して100%にする。
上気道の流行性感冒様感染による12時間を超える鼻づまりを報告する10名の患者を、実施例4により製造した調製物(表6における調製物8番)を用いて処置した。140μlの調製物を各鼻孔へ標準的な点鼻ポンプ装置を用いて適用した。適用後2分以内で、当該ボランティアは、鼻づまりの症状の改善を報告し、5分後にボランティア全員は、鼻を通じて自由に呼吸することができた。鼻閉解除効果を、当該ボランティアによって1時間を超えて持続可能に感じた。ボランティアの半分はさらに、投与4時間後まで症状の持続的な緩和を報告した。
Claims (14)
- イオン性浸透圧調整剤と組み合わせた非イオン性浸透圧調整剤、およびカラギーナン成分を抗ウイルス有効成分として含む、鼻づまり解除活性を有し、気道のウイルス感染に対して活性である高浸透圧性の水溶液であって、
前記水溶液は、鼻適合性緩衝剤を含み、そして4.0〜8.0の範囲内のpH値に調整されており、
前記水溶液は、1〜2mg/mlの濃度のEDTAを含み、
前記イオン性浸透圧調整剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、および塩化ナトリウムと塩化カリウムの混合物からなる群から選択され、
前記非イオン性浸透圧調整剤は、単糖類、二糖類、オリゴ糖類、および低分子量ポリオールからなる群から選択され、
前記低分子量ポリオールは、グリセロール、エリスリトール、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、キシリトール、トレイトール、およびマルチトールからなる群から選択され、
前記水溶液は、500mOsm/kgから1000mOsm/kgの高浸透圧値に調整され、
前記カラギーナン成分は唯一の抗ウイルス活性成分であり、そしてイオタ−カラゲナン、カッパ−カラゲナン、およびイオタ−カラゲナンとカッパ−カラゲナンの混合物から選択され、
前記カラギーナン成分の濃度は、即時使用可能製剤の0.05〜1%(w/v)(g/L)の範囲であり、
但し、即時使用可能製剤における前記水溶液は、1.5%(w/v)以下の前記イオン性浸透圧調整剤を含有することを条件とする、
ことを特徴とする水溶液。 - 前記単糖類および二糖類は、グルコース、フルクトース、スクロース、およびマンノースからなる群から選択される、請求項1に記載の水溶液。
- 保存料、抗酸化物質、保水剤、皮膚軟化薬、保湿剤、および香料からなる群から選択される少なくとも1つの生理学的に許容され得る添加物を含む、請求項1または2に記載の水溶液。
- 前記非イオン性浸透圧調整剤を前記水溶液全体の1〜15%(w/v)の濃度で含む、請求項1〜3のいずれか一項に記載の水溶液。
- 前記イオン性浸透圧調整剤を前記水溶液全体の0.1〜1.3%(w/v)の濃度で含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の水溶液。
- 局所投与用に調製された、請求項1〜5のいずれか一項に記載の水溶液。
- 鼻づまりの即時遮断解除および上気道のウイルス感染の同時治療に適した医薬の調製における請求項1〜5のいずれか一項に記載の水溶液の使用。
- 前記ウイルス感染は、ヒトライノウイルス、ヒトコロナウイルス、パラインフルエンザウイルス、メタニューモウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、A型インフルエンザウイルス、B型インフルエンザウイルス、およびB亜型アデノウイルスの少なくとも1つによって引き起こされる、請求項7に記載の水溶液の使用。
- 前記医薬が、点鼻薬として調製された、請求項7または8に記載の水溶液の使用。
- 前記高浸透圧値が650mOsm/kgから900mOsm/kgである、請求項1に記載の水溶液。
- 前記カラギーナン成分の濃度が0.1〜0.5%(w/v)(g/L)である、請求項1に記載の水溶液。
- 前記非イオン性浸透圧調整剤を、前記全水溶液の5〜10%(w/v)の濃度で含む、請求項4に記載の水溶液。
- 前記イオン性浸透圧調整剤を前記水溶液全体の0.5〜1.2%(w/v)の濃度で含む、請求項5に記載の水溶液。
- 点鼻薬として調製される、請求項6に記載の水溶液。
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