JP6762260B2 - 経皮用コラーゲン産生促進剤、およびi型プロコラーゲンの産生促進方法 - Google Patents
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Description
(1)平均分子量3,500以下の加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩を有効成分とする、
経皮用コラーゲン産生促進剤、
(2)(1)の経皮用コラーゲン産生促進剤において、
加水分解ヒアルロン酸の塩はナトリウム塩であり、
加水分解ヒアルロン酸および/またはナトリウム塩中の、強熱残分が15%以上25%以下であり、
経皮用コラーゲン産生促進剤が経皮用I型プロコラーゲン産生促進剤である、
経皮用コラーゲン産生促進剤、
(3)(1)又は(2)の加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩を皮膚に塗布することを特徴とする、
I型プロコラーゲンの産生促進方法
である。
ここで、強熱残分は、加水分解ヒアルロン酸および/またはナトリウム塩中の無機物の含量をいう。
本発明において、強熱残分は、食品衛生検査指針理化学編に示された硫酸添加灰化法によって測定する。
あらかじめ恒量にした灰化容器(W0)に、試料を精密に量る(W1)。試料に濃硫酸を加え、加温して全体を炭化膨潤させたのち、ゆっくりと加熱して過剰の硫酸を追い出す。灰化容器を電子炉に入れて550℃でほとんど炭素分のなくなるまで灰化する。冷却後、再び数滴の濃硫酸で湿らせ、800℃で灰化する。灰化後、灰化容器を取り出し、アルミトレイなどの上で温度が200℃近くになるまで放冷してデシケーターに移し、室温に戻ったのち秤量する。同じ操作を恒量(W2)になるまで繰り返す。灰分含有率を硫酸灰分として算出する。
式(1) 硫酸灰分(g/100g)=(W2−W0)/(W1−W0)×100
本発明に用いる加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩は、加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩を皮膚に塗布した際、表皮まで浸透してコラーゲンの産生促進効果を得られやすいことから、5質量%水溶液の動粘度が2.0mm2/s以下であるとよい。
本発明において、ヒアルロン酸および/またはその塩の5質量%水溶液の動粘度は、ウベローデ粘度計(柴田科学器械工業株式会社製)を用いて測定することができる。この際、流下秒数が200〜1000秒になるような係数のウベローデ粘度計を選択する。また、測定は30℃の恒温水槽中で行ない、温度変化のないようにする。ウベローデ粘度計により測定された前記水溶液の流下秒数と、ウベローデ粘度計の係数との積により、動粘度(単位:mm2/s)を求めることができる。
本発明に用いる加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩は、かさ密度が0.10g/cm3よりも大きいとよく、さらに0.15g/cm3よりも大きいとよい。
本発明において、「かさ密度」は、「第十六改正日本薬局方、3.粉体物性測定法、3.01 かさ密度およびタップ密度測定法」に記載の方法に準じて測定された値をいう。
本発明に用いる加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩は、塩素含量が1.0質量%以下であるとよい。
本発明において、塩素含量は、モール法で測定した値から算出することによって測定することができる。
本発明に用いる加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩は、平均粒子径が10μm以上35μm以下であるとよく、さらに15μm以上30μm以下であるとよい。
本発明において、加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩の平均粒子径は、レーザー回折式測定法で測定された。具体的には、分散媒としてエタノールを用い、SALD−2000J(島津製作所社製)を用いて測定された。
本発明に用いる加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩は、抗原性をより低減できる点で、ヒアルロン酸分解酵素を含有しないとよい。
「ヒアルロン酸分解酵素を含有しない」とは、前記加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩におけるヒアルロン酸分解酵素の含有量が1質量%以下であることをいう。
実施例3の経皮用コラーゲン産生促進剤 0.71mg/mL PBS溶液:調製例1の加水分解ヒアルロン酸ナトリウム8μg/mLをPBS溶液30μL中に2mL添加した。
比較例3:PBS溶液を使用した。
実施例3の経皮用コラーゲン産生促進剤、および比較例3のPBS溶液をそれぞれ30μL/well添加して、37℃、5% CO2下で48時間インキュベートした。
真皮部分の培地(真皮細胞の上清)を回収して、ELISA(Procollagen Type1 C−peptide (PIP) EIA kit、TaKaRa社製)を用いて、I型プロコラーゲン量を測定した。
Claims (2)
- 平均分子量3,500以下の加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩(ただし不飽和型加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩を除く)を有効成分とする、
経皮用コラーゲン産生促進剤において、
加水分解ヒアルロン酸の塩はナトリウム塩であり、
加水分解ヒアルロン酸および/またはナトリウム塩中の、強熱残分が15%以上25%以下であり、
経皮用コラーゲン産生促進剤が経皮用I型プロコラーゲン産生促進剤である、
経皮用コラーゲン産生促進剤(ただし経口投与剤を除く)。 - 請求項1に記載の加水分解ヒアルロン酸および/またはその塩を皮膚に塗布することを特徴とする、
I型プロコラーゲンの産生促進方法。
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