JP6692294B2 - 腫瘍関連糖鎖抗原を標的として癌を治療及び予防するための組成物及び方法 - Google Patents

腫瘍関連糖鎖抗原を標的として癌を治療及び予防するための組成物及び方法 Download PDF

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Description

政府の権利についての宣言
本発明は、ＵＳ Ａｒｍｙ ＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒ Ｐｒｏｇｒａｍ（Ｗ８１ＸＷＨ−０６−１−０５４２）によるＣｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｗａｒｄを含めて、米国連邦政府による支援のもとに成された。米国政府は、本発明において一定の権利を有し得る。
発明の分野
本発明は、乳癌を治療及び予防するためのワクチン、単離抗体、単離免疫細胞、ならびにそれらを製造及び使用する方法に関する。
発明の背景
本出願は、参照により本明細書に組み込まれる２０１３年７月３１日出願の米国特許仮出願第６１／８６０，８２７号の優先権を主張する。
抗腫瘍免疫応答は、組織特異的自己免疫現象の一局面である。したがって、組織拒絶抗原に対する免疫応答の発生は、癌免疫療法における重要な概念的手法である。腫瘍関連糖鎖抗原（ＴＡＣＡ）は、組織特異的変化を示す有望な組織拒絶抗原標的であり、Ｔ細胞及び抗体の両方が、ＴＡＣＡの単糖及び二糖構成成分を認識する。
糖鎖形成は、ＰＩ３Ｋ経路を経てＮＫ細胞媒介性エフェクター機能を調節する。Ｎ−糖鎖形成の干渉は、ＭＨＣクラスＩの膜発現を減少させ、かつＮＫ細胞殺傷に対する腫瘍細胞のｉｎ ｖｉｔｒｏ感受性を増大させることが示されている。早い時期に、糖鎖形成経路を阻害する化合物は、担腫瘍動物において、腫瘍細胞の成長に影響を及ぼし得ることが認識された。カスタノスペルミン、スワインソニン、及びツニカマイシンは、糖タンパク質プロセシングの経路において異なるステップを遮断するが、それぞれ、腫瘍細胞の転移及び腫瘍のコロニー形成の強力な阻害薬である。このことは、少なくとも２ステップの一方での遮断が、腫瘍細胞の成長に対して有益な効果を有し得ることを示唆した。ツニカマイシンの抗転移効果は、腫瘍細胞−細胞外マトリックス相互作用における干渉に関連し得るのに対して、カスタノスペルミンまたはスワインソニンでの治療は、初期腫瘍細胞停止より遠位の段階で遮断すると考えられる。Ｎ−連結複合オリゴ糖の形成を阻害し、この阻害は、ＮＫ細胞の機能を用いた増強と相関するので、特にスワインソニンは興味深い。したがって、阻害薬が、腫瘍組織を特異的に標的とし得ると考えると、Ｎ−連結、さらにはＯ−連結糖鎖形成の阻害薬は、負のシグナルの撹乱によってＮＫ機能活性を有効にリセットすることによって、癌を治療するために有用であるはずである。さらに最近では、プロテアソーム阻害薬としてのボルテゾミブ（ベルケイド）は、ＭＨＣクラスＩの発現を下方調節することによって、ＮＫ活性に対する腫瘍細胞の感受性を増大させると主張されている。Ｎ−連結糖鎖形成は、プロテアソームの分解を損なうことはないが、クラスＩ ＭＨＣ提示に影響を及ぼす。プロテアソーム分解生成物におけるグリコシル化Ａｓｎ（Ｎ）からＡｓｐ（Ｄ）への変換は、ＰＮＧアーゼによって媒介される。ＰＮＧアーゼは、プロテアソーム分解の後に作用し得る。結果として、クラスＩのＭＨＣ抗原提示は著しく低減される。
アノイキスに対する感受性を再構成するための、膵臓癌細胞における腫瘍抑制因子ｐ１６INK4aによるグリカンリモデリング及びガレクチン−１の上方制御の協調は、このレクチンの潜在的かつ密な制御を強調している。抗グリカン抗体は、レクチンと同様に機能して、細胞死シグナル及び細胞成長シグナルを媒介し得る。他のガレクチンは、独特の表現型を拡張することによって、ＮＫ細胞媒介性抗腫瘍活性を促進し得る。ナイーブＮＫ細胞を、Ｇａｌ−９−処置マウス由来のマクロファージと共に同時培養すると、ＮＫ活性の増強が生じたが、Ｇａｌ−９自体が、ＮＫ活性を増強することはなかった。抗体は、同じことができる。ガングリオシドＧＤ２に対するＩｇＭ抗体についてトランスジェニックなマウスにおけるナチュラルキラー細胞の拡張は、同遺伝子型腫瘍細胞での攻撃後の生存を長くすることが実証された。抗アシアロＧＭ１ウサギ血清でのＮＫ細胞の除去は、観察される抗腫瘍効果を低減または排除し、これは、ＮＫ細胞が、腫瘍根絶または抑制において主要な役割を果たしていることを示唆している。これらの結果は、ワクチン接種後に、腫瘍についてＮＫ活性を局所拡張するＮＫ表現型をもたらすように、ＣＭＰ特異的Ｂ細胞から、ＮＫ細胞応答が特異的に増強され得ることを示唆している。
特許文献１及び２はそれぞれ、糖鎖抗原のペプチドミモトープ及び癌の治療においてそのようなペプチドを使用する方法を開示している。糖鎖模倣ペプチド（ＣＭＰ）は、癌のマウスモデルにおいて、腫瘍成長の阻害を有効に促進する、ＴＡＣＡを標的とする免疫応答を刺激する。ＣＭＰは、広域スペクトル免疫原であり、複数のＴＡＣＡに対する応答を誘発し、したがって、多価糖鎖ベースワクチンの必要性を不要にする。ＣＭＰには、抗糖鎖抗体へのＣＭＰの結合をモジュレートする重要な化学力として芳香族−芳香族及び疎水性相互作用を使用するものがある。Ｔｙｒ−Ａｒｇ−ＴｙｒまたはＴｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒの中心モチーフを有するＣＭＰでの免疫化で、腫瘍成長の阻害が観察されている。
乳癌及び黒色腫のための糖鎖模倣ペプチドワクチンの前臨床研究は、非特許文献１において開示されている。免疫原は、Ｐ１０ｓ多重抗原ペプチド（ＭＡＰ）形態、さらには、それぞれ、同じく、ＭＡＰ形態として提供される３種の他のペプチド、すなわち、Ｐ１０、ＣＭＰ１０６、及びＣＭＰ１０７を含む。ペプチドのＭＡＰ形態は、ペプチドの複数の繰り返し配列を有するポリペプチドである。ペプチドのＭＡＰ形態は、典型的には、そのペプチドの２〜１０コピーを有する。
非特許文献２は、糖鎖模倣ペプチドが、免疫病態が存在しない状態で、糖鎖反応性免疫応答を増強することを開示している。ペプチドＰ１０、ＣＭＰ１０６、及びＣＭＰ１０７が言及されており、データによって、ＣＭＰに対する免疫応答は、糖鎖を含有する正常細胞に対して有害な作用を有さないことが示されている。
米国特許出願公開第２００３００１７４９７号 米国特許出願公開第２００５０１８１９８７号
Ｍｏｎｚａｖｉ−Ｋａｒｂａｓｓｉ, Ｂ．ら（２００７）、Ｖａｃｃｉｎｅ ２７：３０２２〜３０３１ Ｈｅｎｎｉｎｇｓ, Ｌ．ら（２０１１）、Ｃａｎｃｅｒｓ ３：４１５１〜４１６９
ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ（配列番号１）またはその変異体を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、上記組成物は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを含み、この際、「Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ」は、Ｈ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ２を指し、ここで、Ａｌａ１３及びＡｌａ２５はそれぞれ、ｄＡｌａと示されるＤ型アミノ酸であり、１５位にあるＡｌａは、ＣＨＡｌａと示される改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニンである。いくつかの実施形態では、上記組成物は、ＰＡＤＲＥペプチドに連結したＰ１０ｓを含み、ＰＡＤＲＥペプチドに連結した上記Ｐ１０ｓは、アミノ酸配列Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａを含み、ここで、Ａｌａ１３及びＡｌａ２５はそれぞれ、ｄＡｌａとして示されるＤ型アミノ酸であり、１５位にあるＡｌａは、ＣＨＡｌａとして示される改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニンである。いくつかの実施形態では、上記組成物は、ＰＡＤＲＥペプチド（例えば、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ、配列番号３、配列番号４もしくは配列番号５または別のＰＡＤＲＥペプチド）に連結したＰ１０ｓまたはその変異体を含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、ＰＡＤＲＥ以外のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓまたはその変異体を含む。いくつかの実施形態では、上記ペプチドのＣ末端は、アミド化されている。いくつかの実施形態では、上記組成物は、配列ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａを有するＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓを含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、配列ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａを有し、かつアミド化「Ｃ末端」を有するＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓを含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、配列番号３、配列番号４、配列番号５を有する包括的ＰＡＤＲＥまたは別のＰＡＤＲＥペプチドに連結したＰ１０ｓを含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、ＰＡＤＲＥ以外のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、アジュバントをさらに含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント及びＱＳ２１アジュバントからなる群から選択されるアジュバントをさらに含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント及びＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択されるアジュバントをさらに含む。
いくつかの実施形態では、上記組成物は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ及びＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント及びＱＳ２１アジュバントを含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、ならびにＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント及びＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択されるアジュバントを含む。そのような組成物は、少なくとも３００μｇのＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを、いくつかの実施形態では、少なくとも５００μｇのＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを、及びいくつかの実施形態では、少なくとも１０００μｇのＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを含むことができる。
複数の単離ヒト抗体を含む組成物を提供し、その際、上記単離ヒト抗体は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いつかの選ばれた抗癌剤に対して新規の耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、ヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１及びＨＣＣ１９５４細胞によって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である上記複数の単離ヒト抗体は、Ｐ１０ｓもしくはその変異体、または例えば、ＰＡＤＲＥなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓもしくはその変異体をワクチン接種された個体から単離することができる。
複数の単離モノクローナル抗体を含む組成物を提供し、その際、上記単離ヒト抗体は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、幾つかの選ばれた抗癌剤に対して新規の耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、ヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１及びＨＣＣ１９５４細胞によって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である上記複数の単離モノクローナル抗体は、Ｐ１０ｓもしくはその変異体、または例えば、ＰＡＤＲＥなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓもしくはその変異体をワクチン接種された個体から単離された１つまたは複数のＢ細胞に由来し得る。
複数の単離ヒト化抗体を含む組成物を提供し、その際、上記単離ヒト抗体は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、ヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１及びＨＣＣ１９５４細胞によって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である上記複数の単離ヒト化抗体は、Ｐ１０ｓもしくはその変異体、または例えば、ＰＡＤＲＥなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓもしくはその変異体をワクチン接種された個体から単離された１つまたは複数のＢ細胞に由来し得る。
本明細書に記載の組成物を含み、抗癌化学療法薬または抗癌放射性薬をさらに含む組成物を提供する。
本明細書に記載の組成物を含む第１の容器、及び抗癌化学療法薬または抗癌放射性薬を含む第２の容器を含むキットを提供する。
Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かつ培養癌細胞に対して細胞毒性であるヒト抗体を産生する複数の単離細胞を提供する。培養癌細胞は、いわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表され得る。上記複数の単離細胞は、Ｐ１０ｓもしくはその変異体、または例えば、ＰＡＤＲＥなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓもしくはその変異体をワクチン接種された個体に、またはそのような個体に由来する遺伝物質に由来し得る。
Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かつ培養癌細胞に対して細胞毒性であるモノクローナル抗体を産生する複数の単離細胞を提供する。培養癌細胞は、いわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表され得る。上記複数の単離細胞は、Ｐ１０ｓもしくはその変異体、または例えば、ＰＡＤＲＥなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓもしくはその変異体をワクチン接種された個体に、またはそのような個体に由来する遺伝物質に由来し得る。
Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かつ培養癌細胞に対して細胞毒性であるヒト化抗体を産生する複数の単離細胞を提供する。培養癌細胞は、いわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表され得る。上記複数の単離細胞は、Ｐ１０ｓもしくはその変異体、または例えば、ＰＡＤＲＥなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓもしくはその変異体をワクチン接種された個体に由来し得る。
単離Ｂ細胞またはその後代を提供する。Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性であるヒト抗体を産生する単離Ｂ細胞を提供する。上記単離Ｂ細胞は、Ｐ１０ｓ、その変異体、または本明細書に記載の組成物で免疫化されたヒトから得ることができる。Ｂ細胞を免疫化されたヒトから単離し、Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かつＭＤＡ−２３１及びＨＣＣ１９５４細胞によって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性であるヒト抗体を産生する単離Ｂ細胞を特定する。上記Ｂ細胞を培養して、後代を生産し、かつ／またはその遺伝物質を処理して、上記抗体をコードする核酸配列を単離することができる。次いで、上記抗体をコードする核酸配列を発現ベクターに挿入し、その抗体を産生し得る細胞に導入することができる。Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かつＭＤＡ−２３１細胞及びＨＣＣ１９５４細胞に対して細胞毒性であるヒト抗体を産生する単離Ｂ細胞は、ｉ）ナイーブなヒトからＢ細胞を単離し、ｉｉ）その単離Ｂ細胞をＰ１０ｓもしくはその変異体及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥまたは本明細書に記載の別の免疫化組成物に曝露し、ｉｉｉ）Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かつＭＤＡ−２３１細胞及びＨＣＣ１９５４細胞であるヒト抗体を産生する単離Ｂ細胞を特定し、かつｉｖ）抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体を産生する単離Ｂ細胞の集団を拡張することによって得ることができる。上記Ｂ細胞を培養して、後代を生産し、かつ／またはその遺伝物質を処理して、上記抗体をコードする核酸配列を単離することができる。次いで、上記抗体をコードする核酸配列を発現ベクターに挿入し、その抗体を産生し得る細胞に導入することができる。抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体を産生するＢ細胞を、癌を有すると診断されているか、癌の高いリスクを有すると特定されている患者に投与することができる。
Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である複数のヒト抗体は、動物をＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに曝露し、その動物の細胞からハイブリドーマを調製し、Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１と、Ｈｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞とによって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である抗体を産生するハイブリドーマを特定することによって生産することができる。上記ハイブリドーマを培養して、抗体を産生する後代を生産し、かつ／またはその遺伝物質を処理して、上記抗体をコードする核酸配列を単離することができる。次いで、上記抗体をコードする核酸配列を発現ベクターに挿入し、その抗体を産生し得る細胞に導入することができる。上記抗体をコードする核酸配列を使用して、ヒト化抗体をコードするヌクレオチド配列を生産することができ、次いで、そのようなヌクレオチド配列を、発現ベクターに挿入し、ヒト化抗体を産生し得る細胞に導入する。
単離ヒトＮＫ細胞を提供する。いくつかの実施形態では、上記単離ヒトＮＫ細胞は、本明細書に記載の組成物で免疫化されたヒトから得られた単離ヒトＮＫ細胞、及び本明細書に記載の組成物で免疫化されたヒトから得られた単離ヒトＮＫ細胞の後代からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ナイーブなヒトから得られ、本明細書に記載の組成物でｅｘ ｖｉｖｏで活性化された単離ヒトＮＫ細胞、及びナイーブなヒトから得られ、本明細書に記載の組成物でｅｘ ｖｉｖｏで活性化された単離ヒトＮＫ細胞の後代。
単離ヒト樹状細胞を提供する。いくつかの実施形態では、上記単離ヒト樹状細胞は、本明細書に記載の組成物で免疫化されたヒトから得られた単離ヒト樹状細胞、及び本明細書に記載の組成物で免疫化されたヒトから得られた単離ヒト樹状細胞の後代からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ナイーブなヒトから得られ、本明細書に記載の組成物でｅｘ ｖｉｖｏで活性化された単離ヒト樹状細胞、ナイーブなヒトから得られ、本明細書に記載の組成物でｅｘ ｖｉｖｏで活性化された単離ヒト樹状細胞の後代。
癌を有すると診断されているヒトを治療する方法を提供する。上記方法は、上記ヒトに、本明細書に記載の組成物を投与することを含む。
癌を有すると診断されているヒトを治療する方法を提供する。上記方法は、上記ヒトに、本明細書に記載の組成物を投与して、腫瘍細胞を化学療法増感させることと、上記ヒトに、化学療法薬を投与することとを含む。
癌を有すると診断されているヒトを治療する方法を提供する。上記方法は、上記ヒトに、本明細書に記載の組成物を投与して、腫瘍細胞を放射線増感させることと、上記ヒトを治療用放射線に曝露することとを含む。
癌を有すると診断されているヒトを治療する方法であって、本明細書に記載のヒト単離ＮＫ細胞を、本明細書に記載の組成物で治療されたヒトに投与する方法を提供する。
癌を有すると診断されているヒトを治療する方法であって、本明細書に記載のヒト単離樹状細胞を、そのヒトに投与する方法を提供する。
癌の高いリスクを有するヒトにおいて癌を予防する方法を提供する。上記方法は、上記ヒトに、本明細書に記載の組成物を投与することを含む。
癌の高いリスクを有するヒトにおいて癌を予防する方法を提供する。上記方法は、上記ヒトに、本明細書に記載の組成物を投与して、腫瘍細胞を化学療法増感させることと、上記ヒトに、化学療法薬を投与することとを含む。
癌の高いリスクを有するヒトにおいて癌を予防する方法を提供する。上記方法は、上記ヒトに、本明細書に記載の組成物を投与して、腫瘍細胞を放射線増感させることと、上記ヒトを、治療用放射線に曝露することとを含む。
癌の高いリスクを有するヒトにおいて癌を予防する方法であって、本明細書に記載のヒト単離ＮＫ細胞を、本明細書に記載の組成物で治療されたヒトに投与する方法を提供する。
癌の高いリスクを有するヒトにおいて癌を予防する方法であって、本明細書に記載のヒト単離樹状細胞をそのヒトに投与する方法を提供する。
Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かつ培養癌細胞に対して細胞毒性であるヒト抗体を作製する方法を提供する。
本明細書に記載の組成物で免疫化された個体において腫瘍細胞を死滅させることができる単離抗腫瘍ヒトＮＫ細胞の集団を作製する方法を提供する。
単離抗腫瘍ヒト樹状細胞の集団を作製する方法を提供する。
実施例１に記載のとおり、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥでアフィニティー精製された静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）からのＩｇＧ画分の多反応性のグリカンアレイ分析のデータを示している。 実施例１において記載されているとおり、ＩＶＩｇにおけるデンプン分解活性が、＠Ｐ１０ｓ画分において富化していることを示している。 ＣＤ１９発現（ＦＬ４）でゲートされたＣＤ２３+（ＦＬ２）及びＣＤ２３-ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞をＰ１０ｓ−量子ドットクラスター（５２５ｎｍ − ＦＬ１）で染色した実施例１において記載の実験の結果を示している。 ＣＤ１９発現（ＦＬ４）でゲートされたＣＤ２３+（ＦＬ２）及びＣＤ２３-ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞をＰ１０ｓ−量子ドットクラスター（５２５ｎｍ − ＦＬ１）で染色した実施例１において記載の実験の結果を示している。 Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験においてＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥで免疫化されたステージＩＶの乳癌患者においてＩｇＭ抗体応答を測定する実験からの結果を示している。図４は、８つの時点を含み、各時点が、異なる希釈に対応する８本の棒を示す棒グラフである。ｘ軸において示されているとおり、データは、８時点、すなわち、免疫化前、１週目、２週目、３週目、４週目、５週目、６週目、及び７週目で提示されている。各時点について、データは、８つの希釈について示されている。各時点での左端の棒は、１：１００に対応する。１：１００の棒のすぐ右は、１：２００の棒である。１：２００の棒のすぐ右は、１：４００の棒である。１：４００の棒のすぐ右は、１：８００の棒である。１：８００の棒のすぐ右は、１：１６００の棒である。１：１６００の棒のすぐ右は、１：３２００の棒である。１：３２００の棒のすぐ右は、１：６４００の棒である。１：６４００の棒のすぐ右は、１：１２８００の棒である。図４は、６４のデータポイントを示している。 Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験においてＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥで免疫化されたステージＩＶの乳癌患者においてＩｇＧ抗体応答を測定する実験からの結果を示している。図４は、８つの時点を含み、各時点が、異なる希釈に対応する８本の棒を示す棒グラフである。ｘ軸において示されているとおり、データは、８時点、すなわち、免疫化前、１週目、２週目、３週目、４週目、５週目、６週目、及び７週目で提示されている。各時点について、データは、８つの希釈について示されている。各時点での左端の棒は、１：１００に対応する。１：１００の棒のすぐ右は、１：２００の棒である。１：２００の棒のすぐ右は、１：４００の棒である。１：４００の棒のすぐ右は、１：８００の棒である。１：８００の棒のすぐ右は、１：１６００の棒である。１：１６００の棒のすぐ右は、１：３２００の棒である。１：３２００の棒のすぐ右は、１：６４００の棒である。１：６４００の棒のすぐ右は、１：１２８００の棒である。図４は、６４のデータポイントを示している。 Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験においてＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥで免疫化されたステージＩＶの乳癌患者において誘発された抗体は、細胞毒性活性を伴って、ＨＣＣ１９５４細胞に対して交差反応性であったことを示すデータを含む。 Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験におけるＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥでの免疫化が、ヒトＨＣＣ１９５４癌細胞に結合し、それにおいて細胞毒性を誘発するＰ１０ｓペプチドのＭＡＰ形態と反応性の抗体をもたらすことを示すデータを含む。図７Ａ及び７Ｂはそれぞれ、８時点での４人の患者の測定からのデータを含む棒グラフである。各図においてグラフのｘ軸において示されているとおり、データは、４人の患者、すなわち、対象１、対象２、対象３、及び対象４について提示されている。各患者について、データを、８時点、すなわち、免疫化前、２週目、３週目、４週目、７週目、９週目、１９週目、２１週目で測定した。各患者について、データは、８時点について示されている。ｘ軸上で、患者の左端の棒は、免疫化前に対応する。免疫化前の棒のすぐ右は、２週目の棒である。２週目の棒のすぐ右は、３週目の棒である。３週目の棒のすぐ右は、４週目の棒である。４週目の棒のすぐ右は、７週目の棒である。７週目の棒のすぐ右は、９週目の棒である。９週目の棒のすぐ右は、１９週目の棒である。１９週目の棒のすぐ右は、２１週目の棒である。図７Ａ及び７Ｂはそれぞれ、３２のデータポイントを示している。 図７Ａの続き。 ＨＣＣ１９５４細胞及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対する、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験において４人の患者（対象１〜４）から収集した免疫化前及び免疫化後血漿の細胞障害性効果を示すデータを含む。図８Ａは、ＨＣＣ１９５４及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対する、４人の患者からの免疫化前及び免疫化後血漿試料の効果を示している。そのデータは、その免疫化後血漿が、ＨＣＣ１９５４細胞及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の両方に対して細胞障害性効果を有することを示している。図８Ｂは、４人の患者からの免疫化前血漿のものと比較した、４人の患者からの免疫化後血漿の細胞毒性の定量化細胞毒性データの棒グラフを示している。各細胞系における細胞毒性は、３連のウェルにおいて生細胞を計数することによって定量化した。そのデータを、棒グラフで表示している。細胞を播種し、２４時間後に、培地を、１０％の免疫化前または免疫化後のいずれかの血漿試料を含有する培地で新しくした。１０％血清を含有する培地を、対照として使用した。処理から２４時間後に、その上清を除去し、ウェルを洗浄し、生細胞を固定し、染色した。各ウェルについて、３つの顕微鏡視野を計数し、平均した。これらの視野での変化を使用して、エラーバーを計算した。毒性パーセントを、対照ウェルにおける細胞数に対して計算した。 図８Ａの続き。 ドセタキセル毒性に対する腫瘍細胞感受性に対する、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験中に１人の患者から収集された免疫化前血清及び免疫化後血清とのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の予備インキュベーションの効果を比較するデータを含有する。そのデータは、患者の免疫化後血清とのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の予備インキュベーションが、ドセタキセル毒性に対して腫瘍細胞を増感させたことを示している。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ培地中で終夜培養した。次いで、培地を、免疫化前血清または免疫化後血清のいずれかを含有する培地と交換した。ＦＢＳを、対照として使用した。５時間のインキュベーションの後に、ドセタキセルを、ウェルに系列希釈法で添加した。２４時間後に、ウェルを洗浄し、生細胞を固定し、染色し、計数した。生存パーセンテージを、「０」薬物用量での細胞数に対する所与の薬物用量での細胞数の比として計算した。Ｐｒｉｓｍ ５ソフトウェアを使用し、生存データを使用して、用量反応曲線を当てはめた。各曲線のＩＣ50を計算した。免疫化後血清のＩＣ50は、ＦＢＳのＩＣ50及び免疫化前血清のＩＣ50とは有意に異なり、Ｐ値は、それぞれ６．２１Ｅ−０８及び０．００２であった。 Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験においてＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンによってヒト患者において誘発されたＰ１０ｓに対する抗体の反応性を調査する実験からのデータを含む。ＥＬＩＳＡプレートを、Ｐ１０ｓのＭＡＰバージョンでコーティングし、試験対象からの免疫化前血清及び免疫化後血清の２倍希釈系列の反応性を、ＨＲＰ−コンジュゲートされた抗ヒトＩｇＧによって検出した。ワクチン接種された対象での正規化血清終点力価を、各血液採取週について示している。免疫化は、正規化終点力価の有意な上昇をもたらし、より高いペプチド用量で免疫化された対象ほど、より高い力価を示した。正規化終点力価は、下記のとおりに推定した。 Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンによってＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験において誘発された抗体の細胞毒性を示すデータを含む。図１１Ａは、１人の患者（対象６）から収集された免疫化前血漿及び免疫化後血漿の、ＨＣＣ１９５４細胞及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対する細胞毒性効果を示しており、これは、図８Ａに示したデータの延長である。それぞれの場合に、血漿を、免疫化前及び免疫化後の試験対象から収集した。図８Ａ、８Ｂ、１１Ａ、及び１１Ｂのデータは、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンのワクチン接種によって試験対象において誘発された抗体は、細胞毒性抗体であったことを示している。図１１Ａは、単一患者（対象６）でのＨＣＣ１９５４及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対する免疫化前及び免疫化後血漿試料の効果を示している。図１１Ａでは、生細胞を固定し、染色し、その後、写真を撮った。図８Ａにおいてと同様に、データは、免疫化後血漿が、ＨＣＣ１９５４細胞及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞の両方に対して細胞毒性効果を有することを示している。図１１Ｂは、６人の患者（対象１〜６）からのデータを使用して、免疫化前血漿の細胞毒性と比較した免疫化後血漿の細胞毒性を示すデータを含む。細胞毒性を、３連のウェルに残った生細胞を計数することによって定量化した。ラインプロットは、６人の対象での免疫化前及び免疫化後血漿の細胞毒性を示している。各対象での免疫化前と免疫化後との間の対応のある差異を計算し、その平均±標準偏差を示している。１標本ｔ検定を各細胞系での２点差異で実行し、Ｐ値を示している。 図１１Ａの続き。 Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験において対象から収集された免疫化前及び免疫化後血漿をＭＣＦ−１０Ａ細胞と接触させた場合に、細胞毒性効果は観察されなかったことを示すデータを含む。示されている対象の血漿１０％と共に２４時間インキュベーションした後に、写真を撮った。別の実験において７２時間までインキュベーション時間を延長したが、細胞の生存率に影響は及ばなかった。 実施例５において検討するとおり、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンでの患者のワクチン接種において誘発されたＩｇＭ及びＩｇＧ抗体の反応性を示すＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験からのデータを含む。免疫化患者からの血清抗体のＩｇＭ及びＩｇＧ画分は、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、Ｐ１０ｓのＭＡＰ形態に結合する。ＥＬＩＳＡプレートに、炭酸塩−炭酸水素塩緩衝液中のＰ１０ｓ ＭＡＰペプチド１μｇ／ウェルを終夜コーティングした。３７℃で１時間にわたって０．５％ＦＢＳ及び０．２％Ｔｗｅｅｎ ２０を含有するＰＢＳ中でウェルをブロックした後に、系列希釈物を添加した。血清希釈物を３７℃で２時間にわたってインキュベートした。洗浄した後に、ウェルを、３７℃で１時間にわたって、ＨＲＰ−コンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＭ及びＩｇＧと共にインキュベートし、次いで、基質を添加し、２０分後に、その反応を停止させた。プレートを、４５０ｎＭで、ＥＬＩＳＡリーダーによって読み取った。線形回帰によって、吸光度対希釈曲線から力価を推定した。各対象の免疫化前血清での回帰線の遮断を、その対象での終点力価を決定するための吸光度カットオフと定義し、各試料の回帰線が対象の吸光度カットオフと交差する希釈度を、試料の終点力価であると定義した。最小の実際の希釈度を下回るか、または最大の実際の希釈度を上回る希釈度を超えての外挿は、許容されなかった。この手順で、各対象の免疫化前力価を１：１００と正規化し、１：１００力価を上回る終点力価において１０倍以上の増大を有する対象を、応答者と判断した。 実施例５において検討するとおり、患者におけるＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相臨床試験において、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンによって誘発された抗体の細胞毒性を試験する実験からのデータを含む。そのデータは、実施例５において検討されている患者からのＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ誘発性ＩｇＧ血清抗体が、ＨＣＣ１９５４細胞に結合し、細胞死を刺激することを示している。ＨＣＣ１９５４細胞を、酵素非含有緩衝液で採取し、洗浄し、免疫化前血清または７週目の患者から収集された免疫化後血清と共にインキュベートした。ＨＣＣ１９５４細胞への、血清中のＩｇＧ抗体の結合を、ＦＩＴＣ−コンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧで可視化した。図１４Ａでは、中実のヒストグラムは、ＦＩＴＣ−コンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＧ抗体のみへの細胞の曝露を示している。破線ヒストグラムは、ＨＣＣ１９５４細胞への、免疫化前血清からのＩｇＧの結合を示している。実線ヒストグラムは、ＨＣＣ１９５４細胞への、７週目に収集された免疫化後血清からのＩｇＧの結合を示している。血清の１：１００希釈物を、反応性について使用した。図１４Ｂは、免疫化後７週目に収集された患者からの血清がｉｎ ｖｉｔｒｏでＨＣＣ１９５４乳癌細胞を死滅させることを示す棒グラフである。１×１０4細胞を、ＦＢＳ１０％を含有する培地中で９６ウェルプレートのウェル内に播種した。２４時間後に、その培地を、免疫化前または免疫化後血清１０％を含有する培地で新しくした。対照ウェル中の培地は、ＦＢＳ１０％を含有した。培地を、２４時間後に新しくした。血清の添加から４８時間後に、上清を除去し、細胞を固定し、Ｃｒｙｓｔａｌヴァイオレットで染色した。細胞毒性のパーセンテージを、対照ウェル中の細胞数に対して計算した。エラーバーは、３回の反復に基づく標準偏差を表している。その実験を３回繰り返した。両側ステューデントｔ検定を、平均値を比較するために使用した。 実施例５において検討されたとおり、第Ｉ相臨床試験において、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ免疫化の前に患者から収集された血清と、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンでの１０ｓ−ＰＡＤＲＥ免疫化から７週後に収集された患者から収集された血清とによるＨＣＣ１９５４細胞の遊走の阻害を比較する実験からのデータを含む。細胞を終夜欠乏させ、次いで、採取し、免疫化前血清または免疫化後血清のいずれかと混合した。細胞血清混合物を、２０時間にわたってトランスウェル内でインキュベートした。次いで、その細胞を染色し、表面上にあるものを拭き取った。次いで、遊走細胞を、光学顕微鏡下で可視化し、計数した。３回の反復での平均を、標準偏差と共に示している。 ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞における免疫化前血清誘発性アポトーシス及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞における免疫化後血清誘発性アポトーシスを研究する実施例５において検討している実験からのデータを含む。細胞を、終夜、ＦＢＳ１０％（対照）、または免疫化前もしくは免疫化後血清のいずれかと共にインキュベートし、次いで、採取し、アネキシンＶ−ＦＩＴＣ（ＦＬ１）及びヨウ化プロピジウム（ＦＬ３）で染色した。４分の１区であるＪ４、Ｐ４、及びＱ４が、それぞれ、対照、免疫化前血清処置細胞、及び免疫化後血清処置細胞におけるアポトーシス細胞を示している。
実施形態の詳細な説明
本明細書では、新たなワクチン及び免疫調節手順を提供する。汎用エピトープ配列ＰＡＤＲＥ（ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ）の１つのバージョンに連結した糖鎖模倣ペプチド（ＣＭＰ、ミモトープとも呼ばれる）Ｐ１０ｓ（配列番号１）からの配列を含むペプチドを含むワクチン組成物を生産する。これらの配列を有し、「Ｃ末端」でアミド化されているペプチドは、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥと称され、式Ｈ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ２を有する（ここで、Ａｌａ１３及びＡｌａ２５は、それぞれ、ｄＡＬａと示されるＤ型アミノ酸であり、１５位にあるＡｌａは、ＣＨＡｌａと示される改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニンである）。上記ペプチドを、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントと組み合わせて、ＴＡＣＡを標的とする免疫応答を誘発するワクチン組成物を生産する。上記ワクチン組成物は、ヒトに投与すると、糖鎖反応性抗体を含む幅広い抗腫瘍免疫応答及び他の免疫応答を誘発することができる。
上記免疫応答は、例えば、腫瘍細胞に対する細胞毒性効果、またはＮＫ細胞の抗腫瘍細胞活性を媒介する効果、または腫瘍細胞上でグリカン表面のリモデリングを生じさせる効果などの種々の機能性を有し得る。上記ワクチン組成物を使用する新たな免疫調節手順を使用して、癌と診断された患者において癌を治療するか、または高リスク個体群において癌の発生／再発を予防することができる。上記ワクチン組成物を使用する新たな免疫調節手順は、癌の治療、または癌の発生／再発の予防において、他の治療法と組み合わせて使用することができる。ワクチン組成物は、腫瘍の化学療法感受性及び／または放射線感受性を増大させ得る。この点において、腫瘍をより化学療法感受性または放射線感受性にすることによって、または化学療法薬または放射線の治療量をより少ない副作用で、より安全なレベルに低下させることによって、または化学療法耐性な腫瘍を化学療法感受性に、もしくは放射線耐性腫瘍を放射線感受性にすることによって、以前は効果がないか、または最適以下であったかもしれない化学療法薬または放射線治療による治療が、より実行可能になり得る。ワクチン組成物は、高リスク個体における癌の発生率または再発を低下させ得る。
上記ワクチン組成物及びそれを使用する方法は、ヒトにおいて、その抗体が腫瘍細胞に対して細胞毒性である免疫応答を誘発することができる。上記ワクチン組成物は、癌患者において、抗腫瘍応答を含む体液免疫応答を誘発する。上記誘発抗体は、細胞毒性である。上記誘発抗体のこれらの直接的な細胞毒性効果は、上記ワクチン組成物及びそれを使用する方法を、癌の治療及び予防における特に有効な前進としている。免疫化されたヒトからの抗体は、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、及びＮＫ機構が存在しない状態で、細胞毒性であることが観察された。
上記ワクチン組成物及びそれを使用する方法は、ｐ４６発現ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を活性化させ得る。上記ＮＫ細胞の表現型は、癌患者において、そのＮＫ細胞が機能性となり、腫瘍に対してｉｎ ｖｉｖｏでそれが活性になるようにリセットされる。ワクチン、具体的にはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを投与されたヒト患者の免疫応答の分析は、ＮＫ細胞が活性化されたことを示した。これらのデータは、マウスにおけるデータがＮＫ活性化を示さなかったので、予測されていなかった。
より持続性で、より高いＩｇＭ応答をもたらす他のワクチン形態と比較して、かなり高く、持続性のＩｇＧ応答を提供するにも関わらず、上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンは、細胞毒性免疫応答を誘発する。
上記ワクチン組成物を使用する方法によって産生されるヒト抗体は、上記糖鎖模倣ペプチドと反応性であり、腫瘍細胞の遊走を遮断し得る。上記糖鎖模倣ペプチドと反応性であるヒト抗体は、アミラーゼ様活性と共に、ある程度の触媒活性を示す。
上記ワクチン組成物を使用する方法によって産生されたヒト抗体は、標的細胞上で糖鎖抗原パターンをリモデリングする。潜在的なＡｂｚｙｍｅ媒介性グリカンリモデリング機構は、広域反応性糖鎖模倣ペプチドにおける免疫治療抗腫瘍活性の基礎であり得る。同様の機構は、感染症の免疫療法において、新たな治療法を加え得る。Ｐ１０ｓ標的を使用しての、様々なグリコシダーゼ様触媒抗体の急速な富化、及びそのような抗体を産生するＢ細胞クローンの単離は、この分野の開発を加速し、生物工学的工業及び医薬品工業、さらには基礎研究における他の実用的な用途のための可能性を広げるであろう。
Ｐ１０ｓ
上記糖鎖模倣ペプチド（ＣＭＰ）Ｐ１０ｓ（配列番号１）は、ＣＭＰ Ｐ１０（配列番号２）の短縮化バージョンである。Ｐ１０は、抗ガングリオシド抗体ＭＥ３６１に結合するペプチドとして同定された。Ｐ１０ｓは、Ｐ１０の短縮バージョンであり、これは、Ｐ１０の最初の３つのＮ末端残基が欠失して、Ｐ１０ｓを形成していることにおいて、Ｐ１０の配列とは異なる。
ＤＡｌａ１、ＣＨＡｌａ３、及びＤＡｌａ１３を有するＰＡＤＲＥ
ＤＡｌａ１、ＣＨＡｌａ３、及びＤＡｌａ１３を有するＰＡＤＲＥ（「ＰＡＤＲＥDAla1,CHAla3,DAla13」とも称される）は、Ｐａｎ Ｔ細胞ペプチドＰＡＤＲＥペプチドの好ましい形態である。ＰＡＤＲＥDAla13,CHAla,DAla25は、１個の改変Ｌ型アミノ酸を含む１１個のＬ型アミノ酸及び２個のＤ型アミノ酸を含む１３アミノ酸ペプチドである。ＰＡＤ
ＲＥDAla13,CHAla,DAla25の配列は、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａであり、ここで、Ａｌａ１及びＡｌａ１３は、それぞれ、ｄＡＬａとして示されるＤ型アミノ酸であり、３位にあるＡｌａは、ＣＨＡｌａとして示される改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニンである。
アジュバント
注射用製剤中にアジュバントを含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント（Ｓｅｐｐｉｃ ＳＡ、Ｐａｒｉｓ、Ｆｒａｎｃｅ）である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、シャボンノキ（Ｑｕｉｌｌａｊａ ｓａｐｏｎａｒｉａ）から精製されたサポニン植物抽出物アジュバントであるＱＳ２１アジュバント（Ａｇｅｎｕｓ、Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ ＭＡ）である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントを、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡアジュバント（Ｓｅｐｐｉｃ ＳＡ、Ｐａｒｉｓ、Ｆｒａｎｃｅ）の群の別のアジュバントと共に配合する。Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡアジュバントは、代謝不可能な鉱油、代謝可能な油、またはそれら２種の混合物のいずれかと種々の界面活性剤が組み合わされている油／界面活性剤ベースのアジュバントの一群である。これらは、水性抗原溶液と共に乳剤として使用するために調製される。ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント（ＩＳＡ＝Ｉｎｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｓｅｐｐｉｃ Ａｄｊｕｖａｎｔ）のための界面活性剤は、フロイントアジュバントにおける界面活性剤の主な構成要素であるオレイン酸マンニド（ｍａｎｎｉｄｅ ｏｌｅａｔｅ)である。アジュバントの様々なＭｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ群が、油中水型乳剤、水中油型乳剤、または水中油中水型乳剤として使用される。本明細書において言及するＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントは、具体的な製品である。他のＭｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡアジュバントには、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ ７３０ ＶＧアジュバント（商標）が含まれる。Ｓｅｐｐｉｃ ＳＡもまた、獣医学用ワクチンアジュバントの広範なラインを提供している。本明細書で使用する場合、「ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧ（商標）アジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント」に対する言及、及び他のアジュバントに対する言及は、限定ではないが、他のＭｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡアジュバントを含む他のＭｏｎｔａｎｉｄｅアジュバントに言及することを意図している。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、代謝不可能な油（鉱油）、界面活性剤（Ａｒｌａｃｅｌ Ａ）、及びマイコバクテリア（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓまたはＭ．ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ）の混合物であるフロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、ＦＣＡと同じ油／界面活性剤混合物を有するが、いずれのマイコバクテリアも含有しないフロイント不完全アジュバント（ＦＩＡ）である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、代謝可能な油（スクアレン）及び改変された解毒細菌産物を含む油、界面活性剤、及び免疫促進剤（複数可）の混合物であるＲｉｂｉアジュバント（Ｒｉｂｉ ＩｍｍｕｎｏＣｈｅｍ Ｒｅｓｅａｒｃｈ, Ｉｎｃ．、Ｈａｍｉｌｔｏｎ、ＭＴ）である。トレハロースジミコレート（ＴＤＭ）は、界面活性剤、免疫促進剤、及び油滴にタンパク質抗原を結合する際の接着因子として役立つマイコバクテリア構成要素である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、代謝可能な油（スクアレン）及び非イオン性界面活性剤を使用する油／界面活性剤ベースのアジュバントであるＨｕｎｔｅｒ’ｓ ＴｉｔｅｒＭａｘ（ＣｙｔＲｘ Ｃｏｒｐ．、Ｎｏｒｃｒｏｓｓ、ＧＡ）である。上記界面活性剤は、ポリオキシエチレン及びポリオキシプロピレンの合成非イオン性ブロックコポリマーを使用した。いくつかの実施形態では、アルミニウム塩アジュバントを、ミョウバン沈殿ワクチン及びミョウバン吸着ワクチンにおいて使用する。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、ニトロセルロース吸着タンパク質である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、例えば、非分解性エチレン−酢酸ビニルコポリマー封入抗原及び分解性ポリマー封入抗原などのリポソーム捕捉抗原である。生分解性、生体適合性の、例えばポリ（ＤＬ−ラクチド−コ−グリコリド）ポリマーが、カプセル封入のために使用される。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、亜鉛プロリンと組み合わせて免疫促進剤を利用するＧｅｒｂｕ Ａｄｊｕｖａｎｔ（Ｇｅｒｂｕ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｋ ＧｍｂＨ、Ｇａｉｂｅｒｇ、ドイツ／Ｃ−Ｃ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｐｏｗａｙ、ＣＡ）である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）によって販売されているアジュバントの群からの１種である。これらのアジュバントには、ＡｄｄａＶａｘ（商標）アジュバント、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ２％、ＩＦＡ、ｃ−ｄｉ−ＡＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ｃ−ｄｉ−ＧＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｆｌａｇｅｌｌｉｎ ＦｌｉＣ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｇａｒｄｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ−ＳＭ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｎ−Ｇｌｙｃｏｌｙｌ−ＭＤＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１５８５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１８２６ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２００６Ｖａｃｃｉｇｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２３９５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｐａｍ３ＣＳＫ４ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｃ）（ＨＭＷ）ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｒ８４８ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、及びＴＤＢ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバントが含まれる。
いくつかの実施形態では、天然デポ効果を有するアジュバントを選択及び使用することができる。いくつかの実施形態では、天然デポ効果を有さないアジュバントを選択及び使用することができる。いくつかの実施形態では、デポ効果を生成または増大させるように、アジュバントを配合することができる。
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ
「Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ」は、Ｐ１０ｓペプチドが、ＤＡｌａ１、ＣＨＡｌａ３、及びＤＡｌａ１３を有するＰＡＤＲＥに共有結合により連結して、１個の改変Ｌ型アミノ酸を含む２３個のＬ型アミノ酸及び２個のＤ型アミノ酸を含有する２５アミノ酸ペプチドを形成しているペプチドである。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ（これは「ＰＡＤＲＥDAla13,CHAla15,DAla25」とも称され得る）の配列は、Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａであり、ここで、Ａｌａ１３及びＡｌａ２５は、それぞれ、ｄＡＬａとして示されるＤ型アミノ酸であり、１５位にあるＡｌａは、ＣＨＡｌａとして示される改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニンである。上記ペプチドは、Ｎ末端に水素を、かつＣ末端にＮＨ2を有する。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの構造を表す式は、Ｈ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ2であり、ここで、Ａｌａ１３及びＡｌａ２５は、それぞれ、ｄＡＬａとして示されるＤ型アミノ酸であり、１５位にあるＡｌａは、ＣＨＡｌａとして示される改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニンである。
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋アジュバント
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを注射用製剤においてアジュバントと組み合わせた組成物を提供する。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントである。ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントは、ヒトにおいて使用した場合に、デポ効果を示す。いくつかの実施形態では、デポ効果を提供する他のアジュバントを使用する。いくつかの実施形態では、デポ効果を提供しない他のアジュバントを使用する。いくつかの実施形態では、上記アジュバントは、ＱＳ２１アジュバント（Ａｇｅｎｕｓ、Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ ＭＡ）である。いくつかの実施形態では、上記アジュバントを、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡアジュバント（Ｓｅｐｐｉｃ ＳＡ、Ｐａｒｉｓ、Ｆｒａｎｃｅ）の群から選択する。いくつかの実施形態では、上記アジュバントを、フロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）、フロイント不完全アジュバント（ＦＩＡ）、Ｒｉｂｉアジュバントの１種または複数種、Ｈｕｎｔｅｒ’ｓ ＴｉｔｅｒＭａｘ、アルミニウム塩アジュバント、ニトロセルロース吸着タンパク質、非分解性エチレン−酢酸ビニルコポリマー封入抗原、及び生分解性、生体適合性で、例えば、ポリ（ＤＬ−ラクチド−コ−グリコリド）ポリマーを使用するものを含む分解性ポリマー封入抗原などのリポソーム封入抗原、ならびにＧｅｒｂｕアジュバントからなる群から選択する。いくつかの実施形態では、上記アジュバントを、ＡｄｄａＶａｘ（商標）アジュバント、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ２％、ＩＦＡ、ｃ−ｄｉ−ＡＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ｃ−ｄｉ−ＧＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｆｌａｇｅｌｌｉｎ ＦｌｉＣ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｇａｒｄｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ−ＳＭ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｎ−Ｇｌｙｃｏｌｙｌ−ＭＤＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１５８５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１８２６ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２００６Ｖａｃｃｉｇｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２３９５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｐａｍ３ＣＳＫ４ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ポリ（Ｉ：Ｃ）（ＨＭＷ）ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｒ８４８ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、及びＴＤＢ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバントからなる群から選択する。
いくつかの実施形態では、天然デポ効果を有するアジュバントを選択及び使用することができる。いくつかの実施形態では、天然デポ効果を有さないアジュバントを選択及び使用することができる。いくつかの実施形態では、デポ効果を生成または増大させるように、アジュバントを配合することができる。
Ｐ１０ｓ変異体
Ｐ１０ｓの多重抗原ペプチド（ＭＡＰ）形態は、繰り返しＰ１０ｓ単位、例えば、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上のＰ１０ｓペプチド繰り返しを有し得る。ＣＭＰのそのようなＭＡＰ形態は、ＩｇＭ免疫応答を誘発するために特に有用である。
Ｐ１０ｓは、変異体として提供し得る。Ｐ１０ｓの１２アミノ酸配列を、Ｐ１０ｓの断片を形成するように最後の４個の残基の１〜４個を欠失させることによって改変することができる（Ｐ１０ｓ1〜11、Ｐ１０ｓ1〜10、Ｐ１０ｓ1〜9、Ｐ１０ｓ1〜8）。Ｐ１０ｓの上記１２アミノ酸配列を、Ｎ末端側に延長したＰ１０ｓ変異体を形成するように１〜３個のＮ末端残基を付加することによって改変することができる：Ｐ１０ｓ1+1〜12、Ｐ１０ｓ2+1〜12、及びＰ１０ｓ3+1〜12。Ｎ末端側に延長されたＰ１０ｓ変異体（Ｐ１０ｓ1+1〜12、Ｐ１０ｓ2+1〜12、及びＰ１０ｓ3+1〜12）を短縮化することができ、例えば、Ｐ１０ｓ1+1〜12を、Ｐ１０ｓ1+1〜11、Ｐ１０ｓ1+1〜10、Ｐ１０ｓ1+1〜9、Ｐ１０ｓ1+1〜8が生じるように短縮化することができ；Ｐ１０ｓ2+1〜12を、Ｐ１０ｓ2+1〜11、Ｐ１０ｓ2+1〜10、Ｐ１０ｓ2+1〜9、Ｐ１０ｓ2+1〜8が生じるように短縮化することができ；Ｐ１０ｓ3+1〜12を、Ｐ１０ｓ3+1〜11、Ｐ１０ｓ3+1〜10、Ｐ１０ｓ3+1〜9、及びＰ１０ｓ3+1〜8が生じるように短縮化することができる。Ｎ末端に単一の付加残基を有するＮ末端側に延長されたＰ１０ｓ変異体は好ましくは、それらのＮ末端にバリン残基を有する。Ｎ末端に２個の付加残基を有するＮ末端側に延長されたＰ１０ｓ変異体は好ましくは、それらのＮ末端にバリン−バリン残基を有する。Ｎ末端に３個の付加残基を有するＮ末端側に延長されたＰ１０ｓ変異体は好ましくは、それらのＮ末端にグリシン−バリン−バリン残基を有する。Ｐ１０ｓ及びこれらの変異体のそれぞれは、Ｐ１０ｓ1〜3で改変することができる。Ｐ１０ｓは、１〜３位、すなわち、Ｐ１０ｓ1〜3に、ＷＲＹモチーフを有する。一部の変異体では、Ｐ１０ｓ（Ｐ１０ｓ1〜12）のＰ１０ｓ1〜3は、ＹＲＹ、ＹＰＹ、またはＷＰＹモチーフで置換されて、Ｐ１０ｓ1〜12Y1、Ｐ１０ｓ1〜12Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜12P2を形成していてよい。他の変異体は、Ｐ１０ｓ1〜3に同様の改変を有してよい。例えば、Ｐ１０ｓ1〜12断片（Ｐ１０ｓ1〜11、Ｐ１０ｓ1〜10、Ｐ１０ｓ1〜9、Ｐ１０ｓ1〜8）のように、断片は、１〜３位にＹＲＹ、ＹＰＹ、またはＷＰＹモチーフを含んでよい。Ｐ１０s 1〜12Y1、Ｐ１０ｓ1〜12Y1P2、Ｐ１０s1〜12P2は、短縮化形態として、すなわち、Ｐ１０ｓ1〜11Y1、Ｐ１０ｓ1〜11Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜11P2、Ｐ１０ｓ1〜10Y1、Ｐ１０ｓ1〜10Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜10P2、Ｐ１０ｓ1〜9Y1、Ｐ１０ｓ1〜9Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜9P2、Ｐ１０ｓ1〜8Y1、Ｐ１０ｓ1〜8Y1P2、及びＰ１０ｓ1〜8P2として提供し得る。Ｐ１０ｓ1〜12Y1、Ｐ１０ｓ1〜12Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜12P2、Ｐ１０ｓ1〜11Y1、Ｐ１０ｓ1〜11Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜11P2、Ｐ１０ｓ1〜10Y1、Ｐ１０ｓ1〜10Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜10P2、Ｐ１０ｓ1〜9Y1、Ｐ１０ｓ1〜9Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜9P2、Ｐ１０ｓ1〜8Y1、Ｐ１０ｓ1〜8Y1P2、及びＰ１０ｓ1〜8P2は、そのＮ末端で、１、２または３個の付加Ｎ末端残基で改変されていてもよい。Ｐ１０ｓ1〜12、Ｐ１０ｓ1〜11、Ｐ１０ｓ1〜10、Ｐ１０ｓ1〜9、Ｐ１０s1〜8、Ｐ１０ｓ1〜12Y1、Ｐ１０ｓ1〜12Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜12P2、Ｐ１０ｓ1〜11Y1、Ｐ１０ｓ1〜11Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜11P2、Ｐ１０ｓ1〜10Y1、Ｐ１０ｓ1〜10Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜10P2、Ｐ１０ｓ1〜9Y1、Ｐ１０ｓ1〜9Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜9P2、Ｐ１０ｓ1〜8Y1、Ｐ１０ｓ1〜8Y1P2、及びＰ１０ｓ1〜8P2。Ｐ１０ｓ1〜12Y1、Ｐ１０ｓ1〜12Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜12P2、Ｐ１０ｓ1〜11Y1、Ｐ１０ｓ1〜11Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜11P2、Ｐ１０ｓ1〜10Y1、Ｐ１０ｓ1〜10Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜10P2、Ｐ１０ｓ1〜9Y1、Ｐ１０ｓ1〜9Y1P2、Ｐ１０ｓ1〜9P2、Ｐ１０ｓ1〜8Y1、Ｐ１０ｓ1〜8Y1P2、及びＰ１０ｓ1〜8P2は、そのＮ末端に１個のアミノ酸残基を付加することによって、Ｐ１０ｓ1+1〜12、Ｐ１０ｓ1+1〜11、Ｐ１０ｓ1+1〜10、Ｐ１０ｓ1+1〜9、Ｐ１０ｓ1+1〜8、Ｐ１０ｓ1+1〜12Y1、Ｐ１０ｓ1+1〜12Y1P2、Ｐ１０ｓ1+1〜12P2、Ｐ１０ｓ1+1〜11Y1、Ｐ１０ｓ1+1〜11Y1P2、Ｐ１０ｓ1+1〜11P2、Ｐ１０ｓ1+1〜10Y1、Ｐ１０ｓ1+1〜10Y1P2、Ｐ１０ｓ1+1〜10P2、Ｐ１０ｓ1+1〜9Y1、Ｐ１０ｓ1+1〜9Y1P2、Ｐ１０ｓ1+1〜9P2、Ｐ１０ｓ1+1〜8Y1、Ｐ１０ｓ1+1〜8Y1P2、及びＰ１０ｓ1+1〜8P2が生じるように改変することができる。いくつかの実施形態では、上記１個の残基は、バリンである。Ｎ末端に２個のアミノ酸残基を付加すると、Ｐ１０2+1〜12、Ｐ１０ｓ2+1〜11、Ｐ１０ｓ2+1〜10、Ｐ１０ｓ2+1〜9、Ｐ１０ｓ2+1〜8、Ｐ１０ｓ2+1〜12Y1、Ｐ１０ｓ2+1〜12Y1P2、Ｐ１０ｓ2+1〜12P2、Ｐ１０ｓ2+1〜11Y1、Ｐ１０ｓ2+1〜11Y1P2、Ｐ１０ｓ2+1〜11P2、Ｐ１０ｓ2+1〜10Y1、Ｐ１０ｓ2+1〜10Y1P2、Ｐ１０ｓ2+1〜10P2、Ｐ１０ｓ2+1〜9Y1、Ｐ１０ｓ2+1〜9Y1P2、Ｐ１０ｓ2+1〜9P2、Ｐ１０ｓ2+1〜8Y1、Ｐ１０ｓ2+1〜8Y1P2、及びＰ１０ｓ2+1〜8P2が生じる。いくつかの実施形態では、上記２個の残基は、バリン−バリンである。Ｎ末端に３個のアミノ酸残基を付加すると、Ｐ１０ｓ3+1〜12、Ｐ１０ｓ3+1〜11、Ｐ１０ｓ3+1〜10、Ｐ１０ｓ3+1〜9、Ｐ１０ｓ3+1〜8、Ｐ１０ｓ3+1〜12Y1、Ｐ１０ｓ3+1〜12Y1P2、Ｐ１０ｓ3+1〜12P2、Ｐ１０ｓ3+1〜11Y1、Ｐ１０ｓ3+1〜11Y1P2、Ｐ１０ｓ3+1〜11P2、Ｐ１０ｓ3+1〜10Y1、Ｐ１０ｓ3+1〜10Y1P2、Ｐ１０ｓ3+1〜10P2、Ｐ１０ｓ3+1〜9Y1、Ｐ１０ｓ3+1〜9Y1P2、Ｐ１０ｓ3+1〜9P2、Ｐ１０ｓ3+1〜8Y1、Ｐ１０ｓ3+1〜8Y1P2、及びＰ１０ｓ3+1〜8P2が生じる。いくつかの実施形態では、上記３個の残基は、グリシン−バリン−バリンである。Ｐ１０ｓのＮ末端に連結したグリシン−バリン−バリンは、Ｐ１０をもたらす（配列番号２）。加えて、各Ｐ１０ｓ変異体を、追加のＰ１０ｓ変異体を生じさせるためにさらに改変することができる。Ｐ１０ｓ変異体は、残基４〜１２に１〜４個の欠失を有する上述の残基４〜１２を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１１に１〜４個の欠失を有する上述の残基４〜１１を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１０に１〜４個の欠失を有する上述の残基４〜１０を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜９に１〜４個の欠失を有する上述の残基４〜９を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜８に１〜４個の欠失を有する上述の残基４〜８を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１２に１〜４個の挿入を有する上述の残基４〜１２を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１１に１〜４個の挿入を有する上述の残基４〜１１を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１０に１〜４個の挿入を有する上述の残基４〜１０を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜９に１〜４個の挿入を有する上述の残基４〜９を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜８に１〜４個の挿入を有する上述の残基４〜８を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１２に１〜４個の置換を有する上述の残基４〜１２を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１１に１〜４個の置換を有する上述の残基４〜１１を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１０に１〜４個の置換を有する上述の残基４〜１０を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜９に１〜４個の置換を有する上述の残基４〜９を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜８に１〜４個の置換を有する上述の残基４〜８を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１２に１〜４個の欠失、挿入、及び置換の組合せを有する上述の残基４〜１２を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１１に１〜４個の欠失、挿入、及び置換の組合せを有する上述の残基４〜１１を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜１０に１〜４個の欠失、挿入、及び置換の組合せを有する上述の残基４〜１０
を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜９に１〜４個の欠失、挿入、及び置換の組合せを有する上述の残基４〜９を有する変異体のいずれも含み得る。さらなる改変は、残基４〜８に１〜４個の欠失、挿入、及び置換の組合せを有する上述の残基４〜８を有する変異体のいずれも含み得る。これらの構造的特徴に加えて、変異体は、Ｐ１０ｓに結合する抗体を誘発する。Ｐ１０ｓ変異体の多重抗原ペプチド（ＭＡＰ）形態は、繰り返しＰ１０ｓ変異体単位、例えば、４、５、６、７、８、９、１０以上のＰ１０ｓ変異体ペプチドの繰り返しを有し得る。ＣＭＰのそのようなＭＡＰ形態は、ＩｇＭ免疫応答を誘発するために特に有用である。
ＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結したＰ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体
ペプチドは、ＭＨＣと複合体を形成し、この複合体は、特定のＴ細胞受容体によって認識され得る。ＭＨＣ／ペプチドと上記Ｔ細胞受容体との間の相互作用は、ＭＨＣを発現する細胞とＴ細胞受容体を発現するＴ細胞との間でシグナルをもたらす。ＭＨＣクラスＩＩの場合には、ペプチド及びＭＨＣクラスＩＩ複合体によって形成される複合体は、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞のＴ細胞受容体と相互作用する。したがって、ＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞のＴ細胞受容体によって複合体と認識され得るＭＨＣクラスＩＩ分子と共に複合体を形成し得るペプチドは、ＣＤ４＋ヘルパーエピトープである。
Ｐ１０ｓ及びＰ１０ｓ変異体がＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結している組成物を提供する。
いくつかの実施形態では、上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、上記汎用ＨＬＡ−ＤＲエピトープＰＡＤＲＥに由来する。ＰＡＤＲＥペプチドは、１６種の最も一般的なタイプのＨＬＡ−ＤＲのうちの少なくとも１５種と複合体を形成する。上で論述したＰＡＤＲＥペプチド：ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａは、汎用ＣＤ４＋ヘルパーエピトープの一例である。ヒトは、少なくとも１種のＤＲを有し、ＰＡＤＲＥは、そのタイプの多くと結合するので、ＰＡＤＲＥは、多くのヒトにおいて有効である可能性が高い。ＰＡＤＲＥペプチドの別の例は、ＫＸＶＡＡＷＴＬＫＡであり、ここで、Ｘはシクロヘキシルアラニンである（配列番号３）。ＰＡＤＲＥペプチドの別の例は、ＡＫＸＶＡＡＷＴＬＫＡＡであり、ここで、Ｘはシクロヘキシルアラニンである（配列番号４）。ＰＡＤＲＥペプチドの別の例は、ＡＫＸＶＡＡＷＴＬＫＡＡＡであり、ここで、Ｘはシクロヘキシルアラニンである（配列番号５）。
ＰＡＤＲＥペプチド及び他の汎用ＣＤ４＋ヘルパーエピトープは、当業者によって広く言及されている（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ， Ｊ、ｄｅｌＧｕｅｒｃｉｏ， Ｍ Ｆ、Ｍａｅｗａｌ， Ａ、Ｑｉａｏ Ｌ、Ｆｉｋｅｓ Ｃｈｅｓｔｎｕｔ Ｒ Ｗ、Ｐａｕｌｓｏｎ Ｊ、Ｂｕｎｄｌｅ Ｄ Ｒ、ＤｅＦｒｅｅｓ Ｓ、及びＳｅｔｔｅ Ａ、Ｌｉｎｅａｒ ＰＡＤＲＥ Ｔ Ｈｅｌｐｅｒ Ｅｐｉｔｏｐｅ ａｎｄ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｂ Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ Ｉｎｄｕｃｅ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｈｉｇｈ Ｔｉｔｅｒ ＩｇＧ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０００年２月１日、１６４（３）：１６２５〜３３；Ｗｅｉ Ｊ、Ｇａｏ Ｗ、Ｗｕ Ｊ、Ｍｅｎｇ Ｋ、Ｚｈａｎｇ Ｊ、Ｃｈｅｎ Ｊ、Ｍｉａｏ Ｙ．、Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ Ｃｅｌｌｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ＰＡＤＲＥ／ＭＵＣ４−Ｄｅｒｉｖｅｄ Ｐｏｌｙｅｐｉｔｏｐｅ ＤＮＡ Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｎｄｕｃｅ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．、Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ ２００８、２３：１２１〜８；Ｂａｒｇｉｅｒｉ Ｄ Ｙ、Ｒｏｓａ Ｄ Ｓ、Ｌａｓａｒｏ Ｍ Ａ、Ｆｅｒｒｅｉｒａ Ｌ Ｃ、Ｓｏａｒｅｓ Ｉ Ｓ、Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ Ｍ Ｍ．、Ａｄｊｕｖａｎｔ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｖｉｖａｘ ｍｅｒｏｚｏｉｔｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｐｒｏｔｅｉｎ−１ ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ ｖｉａ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｎａｓａｌ ｒｏｕｔｅ．、Ｍｅｍ Ｉｎｓｔ Ｏｓｗａｌｄｏ Ｃｒｕｚ ２００７、１０２：３１３〜７；Ｒｏｓａ Ｄ Ｓ、Ｉｗａｉ Ｌ Ｋ、Ｔｚｅｌｅｐｉｓ Ｆ、Ｂａｒｇｉｅｒｉ Ｄ Ｙ、Ｍｅｄｅｉｒｏｓ Ｍ Ａ、Ｓｏａｒｅｓ Ｉ Ｓ、Ｓｉｄｎｅｙ Ｊ、Ｓｅｔｔｅ Ａ、Ｋａｌｉｌ Ｊ、Ｍｅｌｌｏ Ｌ Ｅ、Ｃｕｎｈａ−Ｎｅｔｏ Ｅ、Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓ Ｍ Ｍ．、Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ ｖｉｖａｘ ｖａｃｃｉｎｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ＭＳＰ１（１９） ａｎｄ ｔｗｏ ｈｕｍａｎ ＣＤ４+ Ｔ−ｃｅｌｌ ｅｐｉｔｏｐｅｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ ｔｏ ｎｏｎ−ｈｕｍａｎ ｐｒｉｍａｔｅｓ （Ｃａｌｌｉｔｈｒｉｘ ｊａｃｃｈｕｓ ｊａｃｃｈｕｓ）、Ｍｉｃｒｏｂｅｓ Ｉｎｆｅｃｔ ２００６、８：２１３０〜７；Ｚｈａｎｇ Ｘ、Ｉｓｓａｇｈｏｌｉａｎ Ａ、Ｂｅｒｇ Ｅ Ａ、Ｆｉｓｈｍａｎ Ｊ Ｂ、Ｎｅｓｂｕｒｎ Ａ Ｂ、ＢｅｎＭｏｈａｍｅｄ Ｌ．、Ｔｈ−ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ−ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｅｘｔｅｎｄｅｄ ｂｙ Ｎｅｐｓｉｌｏｎ−ｐａｌｍｉｔｏｙｌ ｌｙｓｉｎｅｓ ｉｎｄｕｃｅ ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ＣＤ８＋ Ｔｅｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｃｔ ａｇａｉｎｓｔ ｏｃｕｌａｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．、Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２００５；７９：１５２８９〜３０１、及びＡｇａｄｊａｎｙａｎ Ｍ Ｇ、Ｇｈｏｃｈｉｋｙａｎ Ａ、Ｐｅｔｒｕｓｈｉｎａ Ｉ、Ｖａｓｉｌｅｖｋｏ Ｖ、Ｍｏｖｓｅｓｙａｎ Ｎ、Ｍｋｒｔｉｃｈｙａｎ Ｍ、Ｓａｉｎｇ Ｔ、Ｃｒｉｂｂｓ Ｄ Ｈ．、Ｐｒｏｔｏｔｙｐｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｄｏｍｉｎａｎｔ Ｂ ｃｅｌｌ ｅｐｉｔｏｐｅ ｆｒｏｍ ｂｅｔａ−ａｍｙｌｏｉｄ ａｎｄ ｐｒｏｍｉｓｃｕｏｕｓ Ｔ ｃｅｌｌ ｅｐｉｔｏｐｅ ｐａｎ ＨＬＡ ＤＲ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅ．、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００５；１７４：１５８０〜６）。ＰＡＤＲＥなどの汎用ＣＤ４＋ヘルパーエピトープは、Ｓｅｔｔｅらに１９９８年４月７日に付与された米国特許第５，７３６，１４２号；Ｓｅｔｔｅらに２００２年７月２日に付与された米国特許第６，４１３，９３５号；及びＳｅｔｔｅらに２００７年４月１０日に付与された米国特許第７，２０２，３５１号において開示されている。複数のＤＲタイプに結合すると報告されている他のペプチドには、Ｂｕｓｃｈら、Ｉｎｔ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２、４４３〜４５１（１９９０）；Ｐａｎｉｎａ−Ｂｏｒｄｉｇｎｏｎら、Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９、２２３７〜２２４２（１９８９）；Ｓｉｎｉｇａｇｌｉａら、Ｎａｔｕｒｅ ３３６、７７８〜７８０（１９８８）；Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４７、２６６３〜２６６９（１９９１）、Ｒｏａｃｈｅら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４４、１８４９〜１８５６（１９９１）；及びＨｉｌｌら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １４７、１８９〜１９７（１９９１）において記載されているものが含まれる。加えて、Ｓｅｔｔｅらに２００２年７月２日に付与された米国特許第６，４１３，５１７号は、広域反応性ＤＲ制限エピトープの同定に関する。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープキーホールリンペットヘモシアニン（ｈｅｍｏｃｙａｎａｎｉｎ）に連結させる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、破傷風毒素に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープに連結させる（Ｒｅｎａｒｄ Ｖ、Ｓｏｎｄｅｒｂｙｅ Ｌ、Ｅｂｂｅｈｏｊ Ｋ、Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ Ｐ Ｂ、Ｇｒｅｇｏｒｉｕｓ Ｋ、Ｇｏｔｔｓｃｈａｌｋ Ｔ、Ｍｏｕｒｉｔｓｅｎ Ｓ、Ｇａｕｔａｍ Ａ、Ｌｅａｃｈ ＤＲ．、ＨＥＲ−２ ＤＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｖａｃｃｉｎｅｓ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔ Ｔｈ ｃｅｌｌ ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｉｎｄｕｃｅ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ＨＥＲ−２ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ．、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００３；１７１：１５８８〜９５；Ｍｏｒｏ Ｍ、Ｃｅｃｃｏｎｉ Ｖ、Ｍａｒｔｉｎｏｌｉ Ｃ、Ｄａｌｌｅｇｎｏ Ｅ、Ｇｉａｂｂａｉ Ｂ、Ｄｅｇａｎｏ Ｍ、Ｇｌａｉｃｈｅｎｈａｕｓ Ｎ、Ｐｒｏｔｔｉ Ｍ Ｐ、Ｄｅｌｌａｂｏｎａ Ｐ、Ｃａｓｏｒａｔｉ Ｇ．、Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ＨＬＡ−ＤＲ*１１０１ ｔｅｔｒａｍｅｒｓ ｒｅｃｅｐｔｉｖｅ ｆｏｒ ｌｏａｄｉｎｇ ｗｉｔｈ ｐａｔｈｏｇｅｎ− ｏｒ ｔｕｍｏｕｒ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ．、ＢＭＣ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００５；６：２４；ＢｅｎＭｏｈａｍｅｄ Ｌ、Ｋｒｉｓｈｎａｎ Ｒ、Ｌｏｎｇｍａｔｅ Ｊ、Ａｕｇｅ Ｃ、Ｌｏｗ Ｌ、Ｐｒｉｍｕｓ Ｊ、Ｄｉａｍｏｎｄ Ｄ Ｊ．、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＴＬ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｂｙ ａ ｍｉｎｉｍａｌ ｅｐｉｔｏｐｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ＨＬＡ Ａ*０２０１／ＤＲ１ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ： ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ ｏｎ ＨＬＡ ｃｌａｓｓ ＩＩ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ Ｔ（Ｈ） ｒｅｓｐｏｎｓｅ．、Ｈｕｍ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；６１：７６４〜７９；及びＪａｍｅｓ ＥＡ、Ｂｕｉ Ｊ、Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ、Ｈｕｓｔｏｎ Ｌ、Ｒｏｔｉ Ｍ、Ｋｗｏｋ ＷＷ．、Ｔｅｔｒａｍｅｒ−ｇｕｉｄｅｄ ｅｐｉｔｏｐｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｂｒｏａｄ， ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｓ ｏｆ ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ＨＬＡ−ｂａｓｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；１９：１２９１〜−３０１）。ＨＬＡ−ＤＲＢ１*０４０１−−１５種の異なる破傷風トキソイドペプチド（Ｊａｍｅｓ Ｅ Ａ、Ｂｕｉ Ｊ、Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ、Ｈｕｓｔｏｎ Ｌ、Ｒｏｔｉ Ｍ、Ｋｗｏｋ Ｗ Ｗ．、Ｔｅｔｒａｍｅｒ−ｇｕｉｄｅｄ ｅｐｉｔｏｐｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｂｒｏａｄ， ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｓ ｏｆ ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ＨＬＡ−ｂａｓｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；１９：１２９１〜３０１）。ＨＬＡ−ＤＲＢ１*０７０１−−９種の異なる破傷風トキソイドペプチド（Ｊａｍｅｓ Ｅ Ａ、Ｂｕｉ Ｊ、Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ、Ｈｕｓｔｏｎ Ｌ、Ｒｏｔｉ Ｍ、Ｋｗｏｋ Ｗ Ｗ．、Ｔｅｔｒａｍｅｒ−ｇｕｉｄｅｄ ｅｐｉｔｏｐｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｂｒｏａｄ， ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｓ ｏｆ ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ＨＬＡ−ｂａｓｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；１９：１２９１〜３０１）。ＨＬＡ−ＤＲＢ１*１５０１−−７種の異なる破傷風トキソイドペプチド（Ｊａｍｅｓ Ｅ Ａ、Ｂｕｉ Ｊ、Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ、Ｈｕｓｔｏｎ Ｌ、Ｒｏｔｉ Ｍ、Ｋｗｏｋ Ｗ Ｗ．、Ｔｅｔｒａｍｅｒ−ｇｕｉｄｅｄ ｅｐｉｔｏｐｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｂｒｏａｄ， ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｓ ｏｆ ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ＨＬＡ−ｂａｓｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；１９：１２９１〜３０１）。ＨＬＡ−ＤＲＢ５*０１０１−−８種の異なる破傷風トキソイドペプチド（Ｊａｍｅｓ Ｅ Ａ、Ｂｕｉ Ｊ、Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ、Ｈｕｓｔｏｎ Ｌ、Ｒｏｔｉ Ｍ、Ｋｗｏｋ Ｗ Ｗ．、Ｔｅｔｒａｍｅｒ−ｇｕｉｄｅｄ ｅｐｉｔｏｐｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｂｒｏａｄ， ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｓ ｏｆ ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ＨＬＡ−ｂａｓｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；１９：１２９１〜３０１）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、インフルエンザ赤血球凝集素に由来してよい（Ｍｏｍ Ｍ、Ｃｅｃｃｏｎｉ Ｖ、Ｍａｒｔｉｎｏｌｉ Ｃ、Ｄａｌｌｅｇｎｏ Ｅ、Ｇｉａｂｂａｉ Ｂ、Ｄｅｇａｎｏ Ｍ、Ｇｌａｉｃｈｅｎｈａｕｓ Ｎ、Ｐｒｏｔｔｉ Ｍ Ｐ、Ｄｅｌｌａｂｏｎａ Ｐ、Ｃａｓｏｒａｔｉ Ｇ．、Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ＨＬＡ−ＤＲ*１１０１ ｔｅｔｒａｍｅｒｓ ｒｅｃｅｐｔｉｖｅ ｆｏｒ ｌｏａｄｉｎｇ ｗｉｔｈ ｐａｔｈｏｇｅｎ− ｏｒ ｔｕｍｏｕｒ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ．、ＢＭＣ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００５；６：２４）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）に由来してよい（Ｌｉｔｊｅｎｓ Ｎ Ｈ、Ｈｕｉｓｍａｎ Ｍ、Ｂａａｎ Ｃ Ｃ、ｖａｎ Ｄｒｕｎｉｎｇｅｎ Ｃ Ｊ、Ｂｅｔｊｅｓ Ｍ Ｇ．、Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖａｃｃｉｎｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４（＋） Ｔ ｃｅｌｌｓ ｃａｎ ｂｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ａｔ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｃｅｌｌ ｌｅｖｅｌ： ｌｉｍｉｔｅｄ ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｓ ｓｉｇｎａｌ ｅｎｈａｎｃｅｒｓ．、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２００８；３３０：１〜１１）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、細菌性病原体（Ａｎａｐｌａｓｍａ ｍａｒｇｉｎａｌｓなど）の外膜タンパク質（ＯＭＰ）に由来してよい（Ｍａｃｍｉｌｌａｎ Ｈ、Ｎｏｒｉｍｉｎｅ Ｊ、Ｂｒａｙｔｏｎ Ｋ Ａ、Ｐａｌｍｅｒ Ｇ Ｈ、Ｂｒｏｗｎ Ｗ Ｃ．、Ｐｈｙｓｉｃａｌ ｌｉｎｋａｇｅ ｏｆ ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｃｏｍｐｌｅｘｅｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｏｕｔｅｒ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．、Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ２００８；７６：１２２３〜９）。いくつかの実施形態では、配列番号２を、細菌性病原体の外膜タンパク質（ＯＭＰ）に由来するエピトープに連結させる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、エンテロウイルス７１（ＥＶ７１）株４１からのＶＰ１カプシドタンパク質に由来してよい（Ｗｅｉ Ｆｏｏ Ｄ Ｇ、Ｍａｃａｒｙ Ｐ Ａ、Ａｌｏｎｓｏ Ｓ、Ｐｏｈ Ｃ Ｌ．、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ ＣＤ４（＋） Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ＶＰＩ Ｃａｐｓｉｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ ７１．、Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００８）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、ＥＢＶ ＢＭＬＦ１に由来してよい（Ｓｃｈｌｉｅｎｇｅｒ Ｋ、Ｃｒａｉｇｈｅａｄ Ｎ、Ｌｅｅ Ｋ Ｐ、Ｌｅｖｉｎｅ Ｂ Ｌ、Ｊｕｎｅ Ｃ Ｈ．、Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｐｒｉｍｉｎｇ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｔｉｇｅｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｈｕｍａｎ ＣＤ４（＋） Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｍｏｎｏｃｙｔｅ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ．、Ｂｌｏｏｄ ２０００；９６：３４９０〜８；Ｎｅｉｄｈａｒｔ Ｊ、Ａｌｌｅｎ Ｋ Ｏ、Ｂａｒｌｏｗ Ｄ Ｌ、Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ Ｍ、Ｓｈａｗ Ｄ Ｒ、Ｔｒｉｏｚｚｉ ＰＬ、Ｃｏｎｒｙ Ｒ Ｍ．、Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ−ｄｅｒｉｖｅｄ ＫＳＡ （Ｅｐ−ＣＡＭ） ｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ ｌｉｐｉｄ Ａ ｉｎ ｌｉｐｏｓｏｍａｌ ｅｍｕｌｓｉｏｎ， ｗｉｔｈ ａｎｄ ｗｉｔｈｏｕｔ ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ−ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｌｏｎｙ−ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ．、Ｖａｃｃｉｎｅ ２００４；２２：７７３〜８０；Ｐｉｒｉｏｕ Ｅ Ｒ、ｖａｎ Ｄｏｒｔ Ｋ、Ｎａｎｌｏｈｙ Ｎ Ｍ、ｖａｎ Ｏｅｒｓ Ｍ Ｈ、Ｍｉｅｄｅｍａ Ｆ、ｖａｎ Ｂａａｒｌｅ Ｄ．、Ｎｏｖｅｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒｕｓ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ａ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ＥＢＶ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｕｎｔｒｅａｔｅｄ ＨＩＶ−ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｓｕｂｊｅｃｔｓ．、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００５；３５：７９６〜８０５；Ｈｅｌｌｅｒ Ｋ Ｎ、Ｕｐｓｈａｗ Ｊ、Ｓｅｙｏｕｍ Ｂ、Ｚｅｂｒｏｓｋｉ Ｈ、Ｍｕｎｚ Ｃ．、Ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｍｅｍｏｒｙ ＣＤ４＋ Ｔ−ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ ｍｅｄｉａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ １ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ｖｉｒｕｓ ｃａｒｒｉｅｒｓ．、Ｂｌｏｏｄ ２００７；１０９：１１３８〜４６）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、ＥＢＶ ＬＭＰＩに由来してよい（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｈ、Ｎａｇａｔｏ Ｔ、Ｔａｋａｈａｒａ Ｍ、Ｓａｔｏ Ｋ、Ｋｉｍｕｒａ Ｓ、Ａｏｋｉ Ｎ、Ａｚｕｍｉ Ｍ、Ｔａｔｅｎｏ Ｍ、Ｈａｒａｂｕｃｈｉ Ｙ、Ｃｅｌｉｓ Ｅ．、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＥＢＶ−ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ １−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ Ｔ−ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｃｅｌｌｓ．、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；６８：９０１〜８）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、ＨＩＶ ｐ２４３７に由来してよい（Ｐａｊｏｔ Ａ、Ｓｃｈｎｕｒｉｇｅｒ Ａ、Ｍｏｒｉｓ Ａ、Ｒｏｄａｌｌｅｃ Ａ、Ｏｊｃｉｕｓ ＤＭ、Ａｕｔｒａｎ Ｂ、Ｌｅｍｏｎｎｉｅｒ Ｆ Ａ、Ｌｏｎｅ ＹＣ．、Ｔｈｅ Ｔｈ１ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｇａｉｎｓｔ ＨＩＶ−１ Ｇａｇ ｐ２４−ｄｅｒｉｖｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＨＬＡ−Ａ０２．０１ ａｎｄ ＨＬＡ−ＤＲＩ．、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；３７：２６３５〜４４）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体に連結した上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、アデノウイルスヘキソンタンパク質に由来してよい（Ｌｅｅｎ Ａ Ｍ、Ｃｈｒｉｓｔｉｎ Ａ、Ｋｈａｌｉｌ Ｍ、Ｗｅｉｓｓ Ｈ、Ｇｅｅ Ａ Ｐ、Ｂｒｅｎｎｅｒ Ｍ Ｋ、Ｈｅｓｌｏｐ Ｈ Ｅ、Ｒｏｏｎｅｙ Ｃ Ｍ、Ｂｏｌｌａｒｄ Ｃ Ｍ．、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｘｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４ ａｎｄ ＣＤ８ Ｔ−ｃｅｌｌ ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｆｏｒ ｖａｃｃｉｎｅ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．、Ｊ Ｖｉｒａｌ ２００８；８２：５４６〜５４）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、ワクシニアタンパク質に由来するエピトープに連結させる。多重ＭＨＣ−ＩＩハプロタイプ、ワクシニアウイルスタンパク質には、３０種超の同定済みのＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープがあり（Ｃａｌｖｏ−Ｃａｌｌｅ Ｊ Ｍ、Ｓｔｒｕｇ Ｉ、Ｎａｓｔｋｅ Ｍ Ｄ、Ｂａｋｅｒ Ｓ Ｐ、Ｓｔｅｒｎ Ｌ Ｊ．、Ｈｕｍａｎ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌ ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｆｒｏｍ ｖａｃｃｉｎｉａ ｖｉｒｕｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ ｏｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．、ＰＬｏＳ Ｐａｔｈｏｇ ２００７；３：１５１１〜２９）、かつ２４種の異なるワクシニアタンパク質由来の多重ＭＨＣ−ＩＩハプロタイプには、２５種超の同定済みのＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープがある。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、熱ショックタンパク質に由来するエピトープに連結させる。熱ショックタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ（Ｌｉｕ Ｄ Ｗ、Ｔｓａｏ Ｙ Ｐ、Ｋｕｎｇ Ｊ Ｔ、Ｄｉｎｇ Ｙ Ａ、Ｓｙｔｗｕ Ｈ Ｋ、Ｘｉａｏ Ｘ、Ｃｈｅｎ Ｓ Ｌ．、Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ａｄｅｎｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒｕｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １６ Ｅ７ ｐｅｐｔｉｄｅ ＤＮＡ ｆｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ ＤＮＡ ａｓ ａ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｖａｃｃｉｎｅ ｆｏｒ ｃｅｒｖｉｃａｌ ｃａｎｃｅｒ．、Ｊ Ｖｉｒｏｌ ２０００；７４：２８８８〜９４）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、ＩｇＧのＦｃ部分に由来するエピトープに連結させる。いくつかの実施形態では、上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、ＩｇＧのＦｃ部分に由来する（Ｙｏｕ Ｚ、Ｈｕａｎｇ Ｘ Ｆ、Ｈｅｓｔｅｒ Ｊ、Ｒｏｌｌｉｎｓ Ｌ、Ｒｏｏｎｅｙ Ｃ、Ｃｈｅｎ Ｓ Ｙ．、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｇｏｒｏｕｓ ｈｅｌｐｅｒ ａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｃｅｌｌ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ Ｂ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｂｙ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｎｔｉｇｅｎ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ ｐａｔｈｗａｙ．、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；１６５：４５８１〜９１）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、リソソーム関連膜タンパク質に由来するエピトープに連結させる。いくつかの実施形態では、上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープは、リソソーム関連膜タンパク質に由来する（Ｓｕ Ｚ、Ｖｉｅｗｅｇ Ｊ、Ｗｅｉｚｅｒ Ａ Ｚ、Ｄａｈｍ Ｐ、Ｙａｎｃｅｙ Ｄ、Ｔｕｒａｇａ Ｖ、Ｈｉｇｇｉｎｓ Ｊ、Ｂｏｃｚｋｏｗｓｋｉ Ｄ、Ｇｉｌｂｏａ Ｅ、Ｄａｎｎｕｌｌ Ｊ．、Ｅｎｈａｎｃｅｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４（＋） Ｔ ｃｅｌｌｓ ｕｓｉｎｇ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ＲＮＡ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ａ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｇｅｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔ．、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００２；６２：５０４１〜８）。
ＨＬＡハプロタイプの試料、さらには、示されているＨＬＡ分子に代表的なＣＤ４＋Ｔ細胞には、これらだけに限定されないが、以下が含まれる：
ＨＬＡ−ＤＲ*１１０１−−破傷風トキソイドペプチド残基８２９〜８４４、血球凝集素ペプチド残基３０６〜３１８（Ｍｏｒｏ Ｍ、Ｃｅｃｃｏｎｉ Ｖ、Ｍａｒｔｉｎｏｌｉ Ｃ、Ｄａｌｌｅｇｎｏ Ｅ、Ｇｉａｂｂａｉ Ｂ、Ｄｅｇａｎｏ Ｍ、Ｇｌａｉｃｈｅｎｈａｕｓ Ｎ、Ｐｒｏｔｔｉ Ｍ Ｐ、Ｄｅｌｌａｂｏｎａ Ｐ、Ｃａｓｏｒａｔｉ Ｇ．、Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ＨＬＡ−ＤＲ*１１０１ ｔｅｔｒａｍｅｒｓ ｒｅｃｅｐｔｉｖｅ ｆｏｒ ｌｏａｄｉｎｇ ｗｉｔｈ ｐａｔｈｏｇｅｎ− ｏｒ ｔｕｍｏｕｒ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ．、ＢＭＣ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００５；６：２４）。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、破傷風毒素ペプチド残基８２９〜８４４または血球凝集素ペプチド残基３０６〜３１８に連結させる。
ＨＬＡ−ＤＲＢ１*０１０１（ＤＲ１）−−破傷風トキソイドペプチド残基６３９〜６５２、８３０〜８４３、または９４７〜９６７、及び１４種の他の破傷風トキソイドペプチド（ＢｅｎＭｏｈａｍｅｄ Ｌ、Ｋｒｉｓｈｎａｎ Ｒ、Ｌｏｎｇｍａｔｅ Ｊ、Ａｕｇｅ Ｃ、Ｌｏｗ Ｌ、Ｐｒｉｍｕｓ Ｊ、Ｄｉａｍｏｎｄ Ｄ Ｊ．、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＴＬ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｂｙ ａ ｍｉｎｉｍａｌ ｅｐｉｔｏｐｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ＨＬＡ Ａ*０２０１／ＤＲ１ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｍｉｃｅ： ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ ｏｎ ＨＬＡ ｃｌａｓｓ ＩＩ ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ Ｔ（Ｈ） ｒｅｓｐｏｎｓｅ．、Ｈｕｍ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０００；６１：７６４〜７９；及びＪａｍｅｓ Ｅ Ａ、Ｂｕｉ Ｊ、Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ、Ｈｕｓｔｏｎ Ｌ、Ｒｏｔｉ Ｍ、Ｋｗｏｋ Ｗ Ｗ．、Ｔｅｔｒａｍｅｒ−ｇｕｉｄｅｄ ｅｐｉｔｏｐｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｂｒｏａｄ， ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｓ ｏｆ ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ＨＬＡ−ｂａｓｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；１９：１２９１〜３０１）。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、破傷風毒素ペプチド残基６３９〜６５２、８３０〜８４３、または９４７〜９６７に連結させる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、ＥＶ７１ ＶＰ１残基１４５〜１５９または２４７〜２６１に連結させる。ＨＬＡ−ＤＲＢ１*０３０１−−ＥＶ７１ ＶＰ１残基１４５〜１５９または２４７〜２６１、及び５種の異なる破傷風トキソイドペプチド（Ｗｅｉ Ｆｏｏ Ｄ Ｇ、Ｍａｃａｒｙ Ｐ Ａ、Ａｌｏｎｓｏ Ｓ、Ｐｏｈ Ｃ Ｌ．、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ ＣＤ４（＋） Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ＶＰ１ Ｃａｐｓｉｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ ７１．、Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００８；及びＪａｍｅｓ Ｅ Ａ、Ｂｕｉ Ｊ、Ｂｅｒｇｅｒ Ｄ、Ｈｕｓｔｏｎ Ｌ、Ｒｏｔｉ Ｍ、Ｋｗｏｋ Ｗ Ｗ．、Ｔｅｔｒａｍｅｒ−ｇｕｉｄｅｄ ｅｐｉｔｏｐｅ ｍａｐｐｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ ｂｒｏａｄ， ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ ｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｓ ｏｆ ｔｅｔａｎｕｓ ｔｏｘｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ＨＬＡ−ｂａｓｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｐｉｔｏｐｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００７；１９：１２９１〜３０１）。ＨＬＡ−ＤＲＢ１*０４０５−−ＥＶ７１ ＶＰ１残基１４５〜１５９または２４７〜２６１（Ｗｅｉ Ｆｏｏ Ｄ Ｇ、Ｍａｃａｒｙ Ｐ Ａ、Ａｌｏｎｓｏ Ｓ、Ｐｏｈ Ｃ Ｌ．、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ ＣＤ４（＋） Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ＶＰ１ Ｃａｐｓｉｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ ７１．、Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００８）。ＨＬＡ−ＤＲＢ１*１３０１−−ＥＶ７１ ＶＰＩ残基１４５〜１５９または２４７〜２６１（Ｗｅｉ Ｆｏｏ Ｄ Ｇ、Ｍａｃａｒｙ Ｐ Ａ、Ａｌｏｎｓｏ Ｓ、Ｐｏｈ Ｃ Ｌ．、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ ＣＤ４（＋） Ｔ−Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ＶＰ １ Ｃａｐｓｉｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ ７１．、Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２００８）。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、エプスタイン−バールウイルス（ＥＢＶ）潜伏膜タンパク質１（ＬＭＰ１）残基１５９〜１７５に連結させる。ＨＬＡ−ＤＲ９−−エプスタイン−バールウイルス（ＥＢＶ）潜伏膜タンパク質１（ＬＭＰ１）残基１５９〜１７５（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｈ、Ｎａｇａｔｏ Ｔ、Ｔａｋａｈａｒａ Ｍ、Ｓａｔｏ Ｋ、Ｋｉｍｕｒａ Ｓ、Ａｏｋｉ Ｎ、Ａｚｕｍｉ Ｍ、Ｔａｔｅｎｏ Ｍ、Ｈａｒａｂｕｃｈｉ Ｙ、Ｃｅｌｉｓ Ｅ．、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＥＢＶ−ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ １−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ ＩＩ−ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ Ｔ−ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｃｅｌｌｓ．、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；６８：９０１〜８）。ＨＬＡ−ＤＲ５３ ＥＢＶ ＬＭＰ１残基１５９〜１７５（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｈ、Ｎａｇａｔｏ Ｔ、Ｔａｋａｈａｒａ Ｍ、Ｓａｔｏ Ｋ、Ｋｉｍｕｒａ Ｓ、Ａｏｋｉ Ｎ、Ａｚｕｍｉ Ｍ、Ｔａｔｅｎｏ Ｍ、Ｈａｒａｂｕｃｈｉ Ｙ、Ｃｅｌｉｓ Ｅ．、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＥＢＶ−ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ １−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ ＩＩ−ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ Ｔ−ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｃｅｌｌｓ．、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；６８：９０１〜８）。ＨＬＡ−ＤＲ１５ ＥＢＶ ＬＭＰ１残基１５９〜１７５（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｈ、Ｎａｇａｔｏ Ｔ、Ｔａｋａｈａｒａ Ｍ、Ｓａｔｏ Ｋ、Ｋｉｍｕｒａ Ｓ、Ａｏｋｉ Ｎ、Ａｚｕｍｉ Ｍ、Ｔａｔｅｎｏ Ｍ、Ｈａｒａｂｕｃｈｉ Ｙ、Ｃｅｌｉｓ Ｅ．、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＥＢＶ−ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ １−ｓｐｅｃｉｆｉｃ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ ＩＩ−ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ Ｔ−ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｃｅｌｌｓ．、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００８；６８：９０１〜８）。
上記Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体は、ペプチド結合によって、上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープに連結させることができる。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓまたはＰ１０ｓ変異体を、非ペプチド結合によって、上記ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープに共有結合により連結させる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓが、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ2；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は改変されておらず、そのＣ末端は改変されている）；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は、改変されておらず、そのＣ末端は改変されてない）、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は改変されておらず、そのＣ末端は改変されてない）、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は、アセチル化されていて、そのＣ末端はアミド化されている）；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は、アセチル化されてなく、そのＣ末端はアミド化されている）；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端はアセチル化されてなく、そのＣ末端はアミド化されてない）；及びｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は、アセチル化されていて、そのＣ末端は、アミド化されている）；配列番号３；配列番号４；配列番号５の群から選択されるＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結されている組成物を提供する。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓが、キーホールリンペットヘモシアニン；破傷風毒素に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；インフルエンザ赤血球凝集素に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；肝炎Ｂ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；細菌性病原体（Ａｎａｐｌａｓｍａ ｍａｒｇｉｎａｌｓなど）の外膜タンパク質（ＯＭＰ）に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；エンテロウイルス７１（ＥＶ７１）株４１からのＶＰ１カプシドタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＥＢＶ ＢＭＬＦ１に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＥＢＶ ＬＭＰＩに由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＨＩＶ ｐ２４３７に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；アデノウイルスヘキソンタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ワクシニアタンパク質に由来するＣＤ４+Ｔ細胞エピトープ；熱ショックタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＩｇＧのＦｃ部分に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；リソソーム関連膜タンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；リソソーム関連膜タンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープの群から選択されるＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結されている組成物を提供する。いくつかの実施形態では、上記ＣＤ４＋ヘルパーエピトープは、破傷風毒素ペプチド残基８２９〜８４４；血球凝集素ペプチド残基３０６〜３１８；破傷風毒素ペプチド残基６３９〜６５２または８３０〜８４３または９４７〜９６７；ＥＶ７１ ＶＰ１残基１４５〜１５９または２４７〜２６１；及びエプスタイン−バールウイルス（ＥＢＶ）潜伏膜タンパク質１（ＬＭＰ１）残基１５９〜１７５の群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓがそのようなＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結されているそのような組成物、結合したＰ１０ｓ及びＣＤ４＋ヘルパーエピトープ化合物を、注射用製剤においてアジュバントと組み合わせ、その際、そのアジュバントは、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＱＳ２１アジュバント、別のＭｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡアジュバント；フロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）、フロイント不完全アジュバント（ＦＩＡ）、１種または複数種のＲｉｂｉアジュバント、Ｈｕｎｔｅｒ’ｓ ＴｉｔｅｒＭａｘ、アルミニウム塩アジュバント、ニトロセルロース吸着タンパク質、非分解性エチレン−酢酸ビニルコポリマー封入抗原などのリポソーム封入抗原、及び生分解性、生体適合性のポリ（ＤＬ−ラクチド−コ−グリコリド）ポリマーなどを使用するものを含む分解性ポリマー封入抗原；Ｇｅｒｂｕアジュバント；ＡｄｄａＶａｘ（商標）アジュバント、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ２％、ＩＦＡ、ｃ−ｄｉ−ＡＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ｃ−ｄｉ−ＧＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｆｌａｇｅｌｌｉｎ ＦｌｉＣ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｇａｒｄｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ−ＳＭ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｎ−Ｇｌｙｃｏｌｙｌ−ＭＤＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１５８５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１８２６ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２００６Ｖａｃｃｉｇｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２３９５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｐａｍ３ＣＳＫ４ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｃ）（ＨＭＷ）ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｒ８４８ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、及びＴＤＢ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバントから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ変異体が、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ2；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は改変されておらず、そのＣ末端は改変されている）；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は改変されておらず、そのＣ末端は改変されていない）、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端は改変されておらず、そのＣ末端は改変されていない）、ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端はアセチル化されていて、そのＣ末端はアミド化されている）；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端はアセチル化されてなく、そのＣ末端はアミド化されている）；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端はアセチル化されてなく、そのＣ末端はアミド化されていない）；ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣｈＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ（ここで、そのＮ末端はアセチル化されていて、そのＣ末端はアミド化されていない）；配列番号３；配列番号４；及び配列番号５の群から選択されるＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結されている組成物を提供する。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓが、キーホールリンペットヘモシアニン；破傷風毒素に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；インフルエンザ赤血球凝集素に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；肝炎Ｂ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；細菌性病原体（Ａｎａｐｌａｓｍａ ｍａｒｇｉｎａｌｓなど）の外膜タンパク質（ＯＭＰ）に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；エンテロウイルス７１（ＥＶ７１）株４１からのＶＰ１カプシドタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＥＢＶ ＢＭＬＦ１に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＥＢＶ ＬＭＰＩに由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＨＩＶ ｐ２４３７に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；アデノウイルスヘキソンタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ワクシニアタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；熱ショックタンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；ＩｇＧのＦｃ部分に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；リソソーム関連膜タンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープ；リソソーム関連膜タンパク質に由来するＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープの群から選択されるＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結されている組成物を提供する。いくつかの実施形態では、上記ＣＤ４＋ヘルパーエピトープは、破傷風毒素ペプチド残基８２９〜８４４；血球凝集素ペプチド残基３０６〜３１８；破傷風毒素ペプチド残基６３９〜６５２または８３０〜８４３または９４７〜９６７；ＥＶ７１ ＶＰ１残基１４５〜１５９または２４７〜２６１；及びエプスタイン−バールウイルス（ＥＢＶ）潜伏膜タンパク質１（ＬＭＰ１）残基１５９〜１７５の群から選択される。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ変異体がそのようなＣＤ４＋ヘルパーエピトープに連結されているそのような組成物、結合したＰ１０ｓ及びＣＤ４＋ヘルパーエピトープ化合物を、注射用製剤においてアジュバントと組み合わせ、その際、そのアジュバントは、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＱＳ２１アジュバント、別のＭｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡアジュバント；フロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）、フロイント不完全アジュバント（ＦＩＡ）、１種または複数種のＲｉｂｉアジュバント、Ｈｕｎｔｅｒ’ｓ ＴｉｔｅｒＭａｘ、アルミニウム塩アジュバント、ニトロセルロース吸着タンパク質、非分解性エチレン−酢酸ビニルコポリマー封入抗原などのリポソーム封入抗原、及び生分解性、生体適合性のポリ（ＤＬ−ラクチド−コ−グリコリド）ポリマーなどを使用するものを含む分解性ポリマー封入抗原；Ｇｅｒｂｕアジュバント；ＡｄｄａＶａｘ（商標）アジュバント、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ２％、ＩＦＡ、ｃ−ｄｉ−ＡＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ｃ−ｄｉ−ＧＭＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｆｌａｇｅｌｌｉｎ ＦｌｉＣ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｇａｒｄｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ−ＳＭ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＭＰＬＡ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｎ−Ｇｌｙｃｏｌｙｌ−ＭＤＰ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１５８５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ１８２６ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２００６Ｖａｃｃｉｇｒａｄｅ（商標）アジュバント、ＯＤＮ２３９５ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｐａｍ３ＣＳＫ４ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｃ）（ＨＭＷ）ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、Ｒ８４８ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバント、及びＴＤＢ ＶａｃｃｉＧｒａｄｅ（商標）アジュバントから選択される。
抗体
本発明のいくつかの実施形態は、Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合する単離抗体に関する。そのような抗体は、ヒト抗体であり得る。そのような抗体は、いわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１、及びＨｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞によって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性であり得る。
単離抗体は、ｉ）アジュバントをさらに含む組成物中のＰ１０ｓ、Ｐ１０ｓ変異体、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ＋他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープ、Ｐ１０ｓ＋他のＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞エピトープ、それらの組合せ、またはそのような免疫化ペプチドで、ヒトを免疫化し、ｉｉ）その免疫化個体から、ヒトＢ細胞を単離し、ｉｉｉ）腫瘍細胞に対して細胞毒性効果を有する抗体を産生するＢ細胞を特定し、ｉｖ）そのＢ細胞から、その抗体をコードする遺伝子を単離／クローニングし、ｖ）その遺伝子を、腫瘍細胞に対して細胞毒性効果を有する抗体を産生する細胞に導入することによって、生産することができる。上記抗体産生細胞を、細胞培養から単離され得る抗体を産生する条件下で培養することができる。別法では、ステップｉｉ）で単離され、ステップｉｉｉ）においてのとおり、腫瘍細胞に対して細胞毒性効果を有する抗体を産生するヒトＢ細胞として特定された免疫化個体からのｉｉ）ヒトＢ細胞を培養して、腫瘍細胞に対して細胞毒性効果を有する抗体を産生する培養Ｂ細胞を産生するＢ細胞の集団を拡張することができるか、またはそのようなＢ細胞を改変して、培養することができ、腫瘍細胞に対して細胞毒性効果を有する抗体を産生するであろう安定な細胞を形成することができる。上記抗体産生細胞を、細胞培養物から単離することができる抗体を産生する条件下で培養することができる。
Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１、及びＨｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞によって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である複数のヒト抗体は、ｉ）アジュバントをさらに含む組成物中のＰ１０ｓ、Ｐ１０ｓ変異体、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ＋他のＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞エピトープ、Ｐ１０ｓ＋他のＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞エピトープ、その組合せ、またはそのような免疫化に、動物を曝露し、ｉｉ）その動物の細胞からハイブリドーマを調製し、ｉｉｉ）Ｐ１０ｓ及び／またはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに結合し、かついわゆるｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅまたは三重陰性腫瘍細胞系であるヒト***細胞系ＭＤＡ−２３１、及びＨｅｒ２＋細胞であり、いくつかの選ばれた抗癌剤に対して耐性があると考えられるＨＣＣ１９５４細胞によって代表される培養癌細胞に対して細胞毒性である抗体を産生するハイブリドーマを特定することによって、生産することができる。選択されたハイブリドーマを培養して、抗体及び／またはその抗体をコードする核酸配列を単離するようにプロセシングされた遺伝物質を産生する後代を生産することができる。次いで、上記抗体をコードする核酸配列を、発現ベクターに挿入し、その抗体を産生し得る細胞に導入することができる。上記抗体をコードする核酸配列を使用して、ヒト化抗体をコードするヌクレオチド配列を生産することができ、次いで、そのようなヌクレオチド配列を発現ベクターに挿入し、そのヒト化抗体を産生し得る細胞に導入することができる。
抗体は、Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥに特異的に結合する、これだけに限定されないが、例えば、単鎖抗体、ＦＡｂ断片、及びＦＡｂ2断片を含む抗体の断片を指す。抗体には、ポリクローナル及びモノクローナル抗体、さらには、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ）2断片、ならびに抗体工学の他の改変及び生成物が含まれる。免疫原性を低くするためのヒト化、霊長類化、及び改変型の抗体は、本発明による抗体であり、本発明の方法で使用することができる。当業者であれば、標準的な技術及び容易に利用可能な出発物質を使用して、Ｐ１０ｓに特異的に結合するモノクローナル抗体を生産することができる。そのような抗体をスクリーニングして、それらが、本明細書において提供する抗体の特に有用な機能性を持つかどうかを決定することができる。モノクローナル抗体を生産するための技術は、参照により本明細書に組み込まれるＨａｒｌｏｗ， Ｅ．及びＤ． Ｌａｎｅ、（１９８８）、ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｎ．Ｙ．に概説されていて、これは、標的タンパク質に特異的に結合するハイブリドーマ及びモノクローナル抗体の生産についての詳細な指針を提供している。簡略には、上記免疫原をマウスに注射する。上記マウスの脾臓を取り出し、脾臓細胞を単離し、不死化マウス細胞と融合させる。上記ハイブリッド細胞またはハイブリドーマを培養し、抗体を分泌する細胞を選択する。上記抗体を分析し、当該のタンパク質に特異的に結合することが見出されたら、それを産生するハイブリドーマを培養して、抗原特異的抗体を連続して供給する。抗体を操作する技術は、それぞれ参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，５３０，１０１号、米国特許第５，５８５，０８９号、米国特許第５，２２５，５３９号、Ｗｉｎｔｅｒ及びＭｉｌｌｓｔｅｉｎ （１９９１）、Ｎａｔｕｒｅ ３４９：２９３、ならびにＬａｒｒｉｃｈ及びＦｒｙ（１９９１）、Ｈｕｍ． Ａｎｔｉｂｏｄ． ａｎｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ２：１７に記載されている。
抗体を、コンジュゲートされていない抗体として製剤化することもできるし、薬物、毒素、または放射性化合物にコンジュゲートすることもできる。抗体にコンジュゲートすることができる化学療法薬には、細胞毒性薬及び細胞増殖抑制薬が含まれる。化学療法薬の例には、例えば：メトトレキサート（アメトプテリン）、ドキソルビシン（アドリマイシン（ａｄｒｉｍｙｃｉｎ））、ダウノルビシン、シトシンアラビノシド、エトポシド、５−４フルオロウラシル、メルファラン、クロラムブシル、及び他のナイトロジェンマスタード（例えば、シクロフォスファミド）、シスプラチナム、ビンデシン（及び他のビンカアルカロイド）、マイトマイシン、及びブレオマイシンなどの一般的な細胞毒性薬または細胞増殖抑制薬が含まれる。他の化学療法薬には、プロチオニン（大麦粉オリゴペプチド）、マクロモマイシン、１，４−ベンゾキノン誘導体、及びトレニモン、さらにはニトロイミダゾール、メトロニダゾール、及びミソニダゾールが含まれる。毒素の例には、これらだけに限定されないが：リシン、リシンＡ鎖（リシン毒素）、シュードモナス外毒素（ＰＥ）、ジフテリア毒素（ＤＴ）、クロストリジウム・パーフリンゲンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）、ウシ膵臓リボヌクレアーゼ（ＢＰＲ）、ヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質（ＰＡＰ）、アブリン、アブリンＡ鎖（アブリン毒素）、コブラ毒因子（ＣＶＦ）、ゲロニン（ＧＥＬ）、サポリン（ＳＡＰ）、モデシン、ビスキュミン、及びボルケンシンが含まれる。放射線療法において毒素として有用な放射性核種の例には、47Ｓｃ、67Ｃｕ、90Ｙ、109Ｐｄ、123Ｉ、125Ｉ、131
Ｉ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、90Ｙ、199Ａｕ、211Ａｔ、212Ｐｂ、及び212Ｂｉが含まれる。当業者によって使用されている他の放射性核種には、32Ｐ、33Ｐ、71Ｇｅ、109Ｐｄ、77Ａｓ、103Ｐｂ 105Ｒｈ、111Ａｇ、119Ｓｂ、121Ｓｎ、131Ｃｓ、143Ｐｒ、161Ｔｂ、177Ｌｕ、191ＯＳ、193ＭＰｔ、197Ｈｇ、すべてのベータ陰性及び／またはオージェ放射体が含まれる。一部の好ましい放射性核種には、90Ｙ、131Ｉ、211Ａｔ、及び212Ｐｂ／212Ｂが含まれる。
当業者であれば、周知の技術を使用して、抗体を化学療法薬、毒素、または放射性核種にコンジュゲートさせることができる。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＭａｇｅｒｓｔａｄｔ， Ｍ．、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｎｄ Ｍａｌｉｇｎａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅ．、（１９９１）、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、ＵＳＡ、１１０〜１５２頁）は、様々な細胞増殖抑制薬を抗体のアミノ酸にコンジュゲートすることを教示している。癌を治療する際に現在使用されている化学療法薬の多くは、タンパク質と直接的に化学的に架橋し得る官能基を持つ。例えば、メトトレキサート、ドキソルビシン、ダウノルビシン、シトシンアラビノシド、シスプラチン、ビンデシン、マイトマイシン、及びブレオマイシンでは、遊離アミノ基を利用することができ、メトトレキサート、メルファラン、及びクロラムブシルでは、遊離カルボン酸基を利用することができる。遊離アミノ及びカルボン酸であるこれらの官能基は、これらの薬物を抗体の単一の遊離アミノに直接、架橋させることができる様々なホモ二官能性及びヘテロ二官能性化学的架橋剤のための標的である。ジスクシンイミジルスベラート（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｏ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌ．）などの、好ましくは炭素鎖スペーサーを含むホモ二官能性スクシンイミジルエステルを使用することができる。切断可能なコンジュゲート化合物が必要な場合には、３，３’−ジチオビス（スルホスクシンイミジルプロピオナート；Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｏ．）を利用する同じプロトコルが使用されるであろう。
組合せ製品及びキット
ｉ）Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ、Ｐ１０ｓ変異体、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、コンジュゲートされていない細胞毒性抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体、化学療法薬にコンジュゲートされた抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体、及び放射性化合物にコンジュゲートされた抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体からなる群から選択される構成要素を含む組成物は、ｉｉ）化学療法薬または放射線治療薬をさらに含んでよい。ｉ）Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ、Ｐ１０ｓ変異体、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体、ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、コンジュゲートされていない細胞毒性抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体、化学療法薬にコンジュゲートされた抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体、及び放射性化合物にコンジュゲートされた抗Ｐ１０ｓ／Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ抗体からなる群から選択される構成要素を含む組成物を含む第１の容器、ならびに化学療法薬または放射性治療薬を含む第２の容器を含むキットを提供することができる。
単離ＮＫ細胞
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物によって活性化された単離ＮＫ細胞を、免疫化個体を治療するために使用することができる。
単離ＮＫ細胞は、ｉ）Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物で免疫化されているヒトからＮＫ細胞を単離し；ｉｉ）Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物によって活性化されたＮＫ細胞を特定し；ｉｉｉ）特定されたＮＫ細胞の集団を拡張することによって、調製することができる。
上記単離ＮＫ細胞は、ｉ）上記ＮＫ細胞を、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物に曝露し；ｉｉ）Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物によって活性化されたＮＫ細胞を特定し；ｉｉｉ）特定されたＮＫ細胞の集団を拡張することによって、ナイーブか、または免疫化されたヒトからＮＫ細胞を単離することによって調製することができる。
拡張したＮＫ細胞の集団を、癌を治療するか、または高いリスクを有すると同定されている個体において発生、再発を予防するために患者に投与することができる。
単離樹状細胞
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物によって活性化された単離樹状細胞を提供するが、これは、癌を治療及び予防するために有用であり得る。
上記単離樹状細胞は、ｉ）Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物で免疫化されているヒトから樹状細胞を単離し；ｉｉ）Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント，Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物によって活性化された樹状細胞を特定し；ｉｉｉ）特定された樹状細胞の集団を拡張することによって調製することができる。
上記単離樹状細胞は、ｉ）ナイーブなヒトから樹状細胞を単離し、ｉｉ）その樹状細胞を、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物に曝露し；ｉｉ）Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される組成物によって活性化された樹状細胞特定し；ｉｉｉ）特定された樹状細胞の集団を拡張することによって調製することができる。
拡張した樹状細胞の集団を、癌を治療するか、または高いリスクを有すると同定されている個体において発生／再発を予防するために患者に投与することができる。
癌
癌のアルファベット順のリストには、成人急性リンパ芽球性白血病；小児急性リンパ芽球性白血病；成人急性骨髄性白血病；副腎皮質癌；小児副腎皮質癌；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；ＡＩＤＳ関連悪性病変；肛門癌；小児小脳神経膠星状細胞腫；小児大脳神経膠星状細胞腫；肝外胆管癌；膀胱癌；小児膀胱癌；骨癌、骨肉腫／悪性線維性組織球腫；小児脳幹膠腫；成人脳腫瘍；小児脳腫瘍、脳幹膠腫；小児脳腫瘍、小脳神経膠星状細胞腫；小児脳腫瘍、大脳神経膠星状細胞腫／悪性膠腫；小児脳腫瘍、脳室上衣細胞腫；小児脳腫瘍、髄芽細胞腫；小児脳腫瘍、テント上原始神経外胚葉腫瘍；小児脳腫瘍、視路及び視床下部膠腫；小児（他の）脳腫瘍；乳癌；乳癌及び妊娠；小児乳癌；男性乳癌；小児気管支腺腫／類癌腫；小児類癌腫；胃腸類癌腫；副腎皮質癌腫；膵島細胞癌腫；原発不明の癌腫；原発性中枢神経系リンパ腫；小児小脳神経膠星状細胞腫；小児大脳神経膠星状細胞腫／悪性膠腫；子宮頸癌；小児癌；慢性リンパ球性白血病；慢性骨髄性白血病；慢性骨髄増殖性障害；腱鞘の明細胞肉腫；結腸癌；小児結腸直腸癌；皮膚Ｔ細胞リンパ腫；子宮内膜癌；小児脳室上衣細胞腫；上皮癌、卵巣；食道癌；小児食道癌；ユーイングファミリー腫瘍；小児頭蓋外胚細胞腫瘍；性腺外胚細胞腫瘍；肝臓外胆管癌；眼癌、眼内黒色腫；眼癌、網膜芽細胞腫；胆嚢癌；胃癌；小児胃癌；胃腸類癌腫；小児頭蓋外脳外生殖細胞腫瘍；生殖腺外生殖細胞腫瘍；卵巣生殖細胞腫瘍；妊娠性絨毛腫瘍；小児脳幹膠腫；小児視路及び視床下部膠腫；ヘアリーセル白血病；頭頚部癌；成人（原発性）肝細胞（肝臓）癌；小児（原発性）肝細胞（肝臓）癌；成人ホジキンリンパ腫；小児ホジキンリンパ腫；妊娠時ホジキンリンパ腫；下咽頭癌；小児視床下部及び視路膠腫；眼内黒色腫；膵島細胞癌腫（内分泌膵臓）；カポジ肉腫；腎臓癌；喉頭癌；小児喉頭癌；成人急性リンパ芽球性白血病；小児急性リンパ芽球性白血病；成人急性骨髄性白血病；小児急性骨髄性白血病；慢性リンパ球性白血病；慢性骨髄性白血病；ヘアリーセル白血病；***及び口腔癌；成人（原発性）肝臓癌；小児（原発性）肝臓癌；非小細胞肺癌；小細胞肺癌；成人急性リンパ芽球性白血病；小児急性リンパ芽球性白血病；慢性リンパ球性白血病；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；中枢神経系リンパ腫（原発性）；皮膚Ｔ細胞リンパ腫；成人ホジキンリンパ腫；小児ホジキンリンパ腫；妊娠時ホジキンリンパ腫；成人非ホジキンリンパ腫；小児非ホジキンリンパ腫；妊娠時非ホジキンリンパ腫；原発性中枢神経系リンパ腫；ワルデンストロームマクログロブリン血症；男性乳癌；成人悪性中皮腫；小児悪性中皮腫；悪性胸腺腫；小児髄芽細胞腫；黒色腫；眼内黒色腫；メルケル細胞癌腫；悪性中皮腫；潜在性原発の転移性扁平上皮性頸部癌；小児多発性内分泌腺腫症；多発性骨髄腫／血漿細胞新生物；菌状息肉症；骨髄異形成症候群；慢性骨髄性白血病；小児急性骨髄性白血病；多発性骨髄腫；慢性骨髄増殖性障害；鼻腔及び副鼻腔癌；鼻咽頭癌；小児鼻咽頭癌；神経芽細胞腫；成人非ホジキンリンパ腫；小児非ホジキンリンパ腫；妊娠時非ホジキンリンパ腫；非小細胞肺癌；小児口腔癌；口腔及び***癌；口咽頭癌；骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫；小児卵巣癌；卵巣上皮癌；卵巣生殖細胞腫瘍；卵巣低悪性度腫瘍；膵臓癌；小児膵臓癌；膵島細胞膵臓癌；副鼻腔及び鼻腔癌；副甲状腺癌；陰茎癌；褐色細胞種；小児松果体及びテント上原始神経外胚葉腫瘍；下垂体腫瘍；血漿細胞新生物／多発性骨髄腫；胸膜肺芽細胞腫；妊娠及び乳癌；妊娠及びホジキンリンパ腫；妊娠及び非ホジキンリンパ腫；原発性中枢神経系リンパ腫；成人原発性肝臓癌；小児原発性肝臓癌；前立腺癌；直腸癌；腎臓細胞（腎臓）癌；小児腎臓細胞癌；腎盂及び尿管、転移性細胞癌；網膜芽細胞腫；小児横紋筋肉腫；唾液腺癌；小児唾液腺癌；ユーイング肉腫ファミリー腫瘍；カポジ肉腫；骨の肉腫（骨肉腫）／悪性線維性組織球腫；小児横紋筋肉腫；成人軟部組織肉腫；小児軟部組織肉腫；セザリー症候群；皮膚癌；小児皮膚癌；皮膚癌（黒色腫）；メルケル細胞皮膚癌腫、；小細胞肺癌；小腸癌；成人軟部組織肉腫；小児軟部組織肉腫；転移性潜在性原発を有する扁平上皮頸部癌；胃（胃）癌；小児胃（胃）癌；小児テント上原始神経外胚葉腫瘍；皮膚Ｔ細胞リンパ腫；睾丸癌；小児胸腺腫；悪性胸腺腫；甲状腺癌；小児甲状腺癌；腎盂及び尿管の転移性細胞癌；妊娠期栄養膜腫瘍；原発部位不明の小児癌；小児の稀な癌；尿管及び腎盂の転移性細胞癌；尿道癌；子宮肉腫；膣癌；小児視路及び視床下部膠腫；外陰部癌；ワルデンストロームマクログロブリン血症；ならびにウィルムス腫瘍が含まれる。本明細書に記載の組成物及び方法は、癌と診断された個体において癌のそのような種類を治療するために、または癌の高いリスクを有すると同定された個体において癌の発生／再発を予防するために有用であり得る。
治療及び予防プロトコルにおいて本発明を使用することができる癌の、本明細書において列挙した癌のうち、乳癌、黒色腫、卵巣癌、前立腺癌、膵臓癌、肺癌、結腸癌、口腔及び食道を含む頭頚部癌、肝臓癌、脳癌、ならびに骨癌は、米国における癌による死の大部分の原因である充実性腫瘍を有する癌の例である。乳癌を分析して、Ｈｅｒ+、ＥＧＦＲ
ｖＩＩＩ+、またはＨｅｒ+及びＥＧＦＲｖＩＩＩ+であるか決定することができる。いくつかの実施形態では、乳癌を、治療の前にＨｅｒ+、ＥＧＦＲｖＩＩＩ+、またはＨｅｒ+及びＥＧＦＲｖＩＩＩ+と同定する。
転移性疾患、特に、疼痛及び／または生活の質の低下の原因となっているものの姑息的治療は、本明細書に記載の方法が特に有用な状態に含まれている。
患者
癌と診断されているヒトを、本明細書に記載の方法及び組成物を使用して治療することができる。癌の高いリスクを有すると特定されているヒトを、本明細書に記載の方法及び組成物を使用して処置して、癌の発生または再発を予防することができる。
標準的な技術及び方法によって、個体を、癌を有すると診断することができる。そのような個体は、本明細書に記載の方法及び組成物を使用して治療することができる。癌を有すると診断された個体には、癌と初めて診断された個体と、外科手術及び／または化学療法で治療されていて、難治性疾患、治療に対して不完全な応答を有するか、または癌を有さないと考えられているか、及び癌の再発を有すると診断されている個体とが含まれる。
癌についての高リスク群である個体には、癌と診断されていて、その癌が外科手術によって除去されていて、現在は寛解している個体、及び／またはその疾患に遺伝的に関連している個体、すなわち、遺伝子スクリーニング及び／または家族歴などによって、遺伝的に罹患しやすいと特定されている個体が含まれる。遺伝学の理解及び技術開発、さらには、疫学の進歩により、個体が胃癌または食道癌を発生する確率を決定し、リスクを評価することが可能である。家族の健康歴及び／または遺伝子スクリーニングを使用して、特定の個体が特定の種類の癌を発生する確立を推定することが可能である。特定の形態の癌を発生する素因を有すると特定されている個体を免疫化することができる。
ステージＩ、ＩＩ、またはＩＩＩの癌を有する個体を治療することができる。ステージ０の個体、すなわち、検出可能なリンパ節転移を有さない個体も、再発を予防するために処置することができる。いくつかの実施形態では、ステージＩＶの癌を有する個体を治療することができる。
免疫化によって癌を治療する方法
いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されている個体を、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、及びＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥからなる群から選択される構成要素を含む組成物で免疫化する。典型的には、１年以内に複数回の用量、例えば、初回の用量及び１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回のブーストを投与する。いくつかの実施形態では、初回用量の後に、２、３、及び７週目、２、３、７、及び１９週目、または２及び３週目に、次いで、１か月、２カ月、４か月、５か月、または６ヶ月にわたって月１回、ブーストを投与する。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、及びＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥからなる群から選択される構成要素を含む組成物を使用する代わりに、癌を有すると診断されている個体を、Ｐ１０ｓ、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される構成要素を含む組成物で免疫化する。
いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されていて、本明細書に記載のとおり免疫化されている個体に、化学療法及び／または放射線療法を、本明細書に記載の免疫化と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、本明細書に記載の免疫化と同時に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、本明細書に記載のとおりの初回の免疫化の後に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、本明細書に記載のとおりの初回の免疫化の１週間以下、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、またはそれ以上の後に投与する。免疫化は、有効な治療に必要な化学療法及び／または放射線の用量を低下させ、それによって、化学療法及び／または放射線に起因する有害な副作用を低減することによって、上記化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。免疫化は、癌細胞を化学療法感受性及び／または放射線感受性にし、それによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にすることによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。
いくつかの実施形態では、放射線耐性腫瘍を有する個体を、その癌を放射線感受性にする免疫化によって治療することができる。これは、癌幹細胞及び他の放射線耐性癌細胞を除去する際に特に有用である。いくつかの実施形態では、放射線耐性腫瘍は、罹患している個体の疼痛の原因であり得、放射線療法と組み合わせての免疫化は、腫瘍を最も縮小及び低減して、そのような腫瘍に起因する疼痛を低減もしくは除去するか、または生活の質にマイナスの影響を与えるそのような腫瘍に起因する他の状況を低減または除去する有効な手段を提供し得る。そのような治療は姑息的であり得るが、生活の質に対する効果は多大であり得る。放射線療法と組み合わせた免疫化プロトコルは、外科手術が適応とされない場合の腫瘍に罹患している個体を治療するために有用であり得る。放射線療法と組み合わせた免疫化プロトコルの後に、腫瘍サイズ及び数は低減して、外科手術が実行可能な治療選択肢となり得る。
いくつかの実施形態では、化学療法耐性の腫瘍を有する個体を、その癌を化学療法感受性にする免疫化によって治療することができる。これは、癌幹細胞及び他の化学療法耐性癌細胞を除去する際に特に有用である。いくつかの実施形態では、化学療法耐性腫瘍は、罹患している個体の疼痛の原因であり得、化学療法と組み合わせての免疫化は、腫瘍を最も縮小及び低減して、そのような腫瘍に起因する疼痛を低減もしくは除去するか、または生活の質にマイナスの影響を与えるそのような腫瘍に起因する他の状況を低減または除去する有効な手段を提供し得る。そのような治療は姑息的であり得るが、生活の質に対する効果は多大であり得る。化学療法と組み合わせた免疫化プロトコルは、外科手術が適応とされない場合の腫瘍に罹患している個体を治療するために有用であり得る。化学療法と組み合わせた免疫化プロトコルの後に、腫瘍サイズ及び数は低減して、外科手術が実行可能な治療選択肢となり得る。
いくつかの実施形態では、外科手術、緩解、または遺伝的素因による高リスク個体群への個体の特定の後に免疫化の治療を受けた個体を、癌の再発／発生の際により有効に処置することができる。上記免疫化は、その後の癌がより化学療法感受性または放射線感受性であるようにするか、または別段に、免疫化されていない個体の結果と比較すると、改善された結果をもたらし得る。
抗体で癌を治療する方法
いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されている個体に、本明細書に記載の単離ヒト抗体を投与する。典型的には、１年以内に複数回の用量、例えば、初回の用量及び１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回のフォローアップ用量を投与する。いくつかの実施形態では、初回用量の後に、抗体を、１か月、２カ月、３カ月、４か月、５か月、または６ヶ月かけて投与する。
いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されている個体に、本明細書に記載の単離ヒト抗体を化学療法及び／または放射線療法と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、単離ヒト抗体の投与と同時に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、単離ヒト抗体の初回の投与の後に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、単離ヒト抗体の初回投与の１週間以下、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、またはそれ以上の後に投与する。単離ヒト抗体の投与は、有効な治療に必要な化学療法及び／または放射線の用量を低下させ、それによって、化学療法及び／または放射線に起因する有害な副作用を低減することによって、上記化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。単離ヒト抗体の投与は、癌細胞を化学療法感受性及び／または放射線感受性にし、それによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にすることによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。
いくつかの実施形態では、放射線耐性腫瘍を有する個体を、癌を放射線感受性にする単離抗体の投与によって治療することができる。これは、癌幹細胞及び他の放射線耐性癌細胞を除去する際に特に有用である。いくつかの実施形態では、放射線耐性腫瘍は、罹患している個体の疼痛の原因であり得、放射線療法と組み合わせての単離ヒト抗体の投与は、腫瘍を最も縮小及び低減して、そのような腫瘍に起因する疼痛を除去する有効な手段を提供し得る。そのような治療は姑息的であり得るが、生活の質に対する効果は多大であり得る。放射線療法と組み合わせた単離ヒト抗体の投与は、外科手術が適応とされない場合の腫瘍に罹患している個体を治療するために有用であり得る。放射線療法と組み合わせた単離ヒト抗体の投与の後に、腫瘍サイズ及び数は低減して、外科手術が実行可能な治療選択肢となり得る。
いくつかの実施形態では、化学療法耐性の腫瘍を有する個体を、その癌を化学療法感受性にする単離ヒト抗体の投与によって治療することができる。これは、癌幹細胞及び他の化学療法耐性癌細胞を除去する際に特に有用である。いくつかの実施形態では、化学療法耐性腫瘍は、罹患している個体の疼痛の原因であり得、化学療法と組み合わせての免疫化は、腫瘍を最も縮小及び低減して、そのような腫瘍に起因する疼痛を低減または除去する有効な手段を提供し得る。そのような治療は姑息的であり得るが、生活の質に対する効果は多大であり得る。化学療法と組み合わせた単離ヒト抗体の投与のプロトコルは、外科手術が適応とされない場合の腫瘍に罹患している個体を治療するために有用であり得る。化学療法と組み合わせた単離ヒト抗体の投与の後に、腫瘍サイズ及び数は低減して、外科手術が実行可能な治療選択肢となり得る。
いくつかの実施形態では、外科手術、緩解、または遺伝的素因による高リスク個体群への個体の同定の後に、単離ヒト抗体の投与による治療を受けた個体を、癌の再発／発生の際により有効に治療することができる。上記単離ヒト抗体の投与は、その後の癌がより化学療法感受性または放射線感受性であるようにするか、または別段に、免疫化されていない個体の結果と比較すると、改善された結果をもたらし得る。
単離ＮＫ細胞で癌を治療する方法
いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されている個体に、本明細書に記載の単離ＮＫ細胞を投与する。そのような個体を免疫化しておくと、そのワクチンによって活性化されたＮＫ細胞の拡張集団の投与は、腫瘍を除去するために有用であり得る。
いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されている個体に、本明細書に記載の単離ＮＫ細胞を化学療法及び／または放射線療法と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、ＮＫ細胞の投与と同時に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、単離ＮＫ細胞の初回の投与の後に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、単離ＮＫ細胞の初回投与の１週間以下、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、またはそれ以上の後に投与する。単離ＮＫ細胞の投与は、有効な治療に必要な化学療法及び／または放射線の用量を低下させ、それによって、化学療法及び／または放射線に起因する有害な副作用を低減することによって、上記化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。単離ＮＫ細胞の投与は、癌細胞を化学療法感受性及び／または放射線感受性にし、それによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にすることによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。
単離ＮＫ細胞は、ＮＫ細胞に対して他では耐性の腫瘍細胞を、ＮＫ細胞に対して感受性があるようにする体液免疫応答を最大化する免疫化ブーストと協調して投与することができる。
単離ＮＫ細胞は、ＮＫ細胞に対して他では耐性の腫瘍細胞を、ＮＫ細胞に対して感受性があるようにし得る抗体などの本明細書に記載の抗体の投与と協調して投与することができる。
単離樹状細胞で癌を治療する方法
いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されている個体に、本明細書に記載のとおりの単離樹状細胞を投与する。いくつかの実施形態では、癌を有すると診断されている個体に、本明細書に記載の単離樹状細胞を化学療法及び／または放射線療法と組み合わせて投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、樹状細胞の投与と同時に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、単離樹状細胞の初回の投与の後に投与する。いくつかの実施形態では、上記化学療法及び／または放射線療法を、単離樹状細胞の初回投与の１週間以下、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、またはそれ以上の後に投与する。単離樹状細胞の投与は、有効な治療に必要な化学療法及び／または放射線の用量を低下させ、それによって、化学療法及び／または放射線に起因する有害な副作用を低減することによって、上記化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。単離樹状細胞の投与は、癌細胞を化学療法感受性及び／または放射線感受性にし、それによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にすることによって、化学療法及び／または放射線療法をより有効にするために有用であり得る。
癌を予防する方法
いくつかの実施形態では、癌の高いリスクを有すると特定されている個体を、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、及びＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される構成要素を含む組成物で免疫化する。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＱＳ２１アジュバント、及び Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される構成要素を含む組成物を使用する代わりに、癌を有すると診断されている個体を、Ｐ１０ｓ、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、Ｐ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＱＳ２１アジュバント、「他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、Ｐ１０ｓ変異体、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＱＳ２１アジュバント、ＰＡＤＲＥに連結したＰ１０ｓ変異体＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＱＳ２１アジュバント、「ＰＡＤＲＥ以外の他のＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドに連結したＰ１０ｓ変異体」＋ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバント以外のアジュバントからなる群から選択される構成要素を含む組成物で免疫化する。
いくつかの実施形態では、癌の高いリスクを有すると特定されている個体を、外科手術及び／または化学療法及び／または放射線療法によって治療され、その後、その患者が、検出可能な癌を有さないと考えられた後に免疫化する。典型的には、１年以内に複数回の用量、例えば、初回の用量及び１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回のブーストを投与する。いくつかの実施形態では、初回用量の後に、２、３、及び７週目、２、３、７、及び１９週目、または２及び３週目に、次いで、１か月、２カ月、４か月、５か月、または６ヶ月にわたって月１回、ブーストを投与する。本明細書に記載の免疫化組成物及び方法を、初めに、１年以内の初回用量＋１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回のフォローアップ用量として使用する。いくつかの実施形態では、年１回のブーストを投与する。
いくつかの実施形態では、患者は、１つまたは複数のリンパ節に検出可能な癌細胞を有すると考えられ得る。統計的に、どの患者が再発するかの特定は未知であるか、予期するのが困難であるが、そのような患者のうちの少数は、実際に再発し得る。免疫化は、再発すると予測される少数者での再発を低減または除去するための有効な手段として使用することができる。
いくつかの実施形態では、癌の高いリスクを有すると特定されている個体に、本明細書に記載の単離ヒト抗体を投与することができる。典型的には、１年以内に複数回の用量、例えば、初回の用量及び１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０回のフォローアップ用量を投与する。いくつかの実施形態では、初回用量の後に、抗体を、１か月、２カ月、３カ月、４か月、５か月、または６ヶ月かけて投与する。いくつかの実施形態では、年１回の投与をその後に提供する。
免疫化されていて、癌の高いリスクを有すると特定されている個体で、単離ＮＫ細胞を本明細書に記載のとおり調製することができ、それを、免疫化個体での発生または再発をさらに予防するために投与することができる。
いくつかの実施形態では、癌の高いリスクを有する特定されている個体を、本明細書に記載のとおりに調製された単離樹状細胞で処置することができる。
組合せ療法
癌と診断された個体を治療する方法において使用するための、及び癌の高いリスクを有すると同定されている個体において癌を予防するための、論述したとおりに本明細書に記載の免疫応答または抗体を誘発する組成物を使用する組合せ療法。いくつかの実施形態では、組合せ療法は、好ましくは、アジュバントと共に製剤化されている、ＣＤ４＋Ｔ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓまたはその変異体を含む上記で論述した化合物を含むワクチンを投与することを含む。いくつかの実施形態では、上記組成物は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントを含む。いくつかの実施形態では、上記方法は、他の治療薬の投与及び／または放射線療法を含む治療レジメンの一部と組み合わせて、本明細書に記載のＴＡＣＡに対する免疫応答または抗ＴＡＣＡ抗体を誘発するために使用することができる本明細書において上記した別の組成物を投与することを含む。
化学療法と組み合わせたワクチン接種は、患者を治療するために複数種の化学療法薬を使用するレジメンを含み得る。治療を受ける患者は、癌と診断されていて、腫瘍を除去するための外科手術を受けていてよい。いくつかの実施形態では、上記患者は、検出可能な癌を有さず；いくつかの実施形態では、上記患者は、転移性疾患を含む検出可能な疾患を有する。そのような疾患に限定されないが、いくつかの実施形態では、治療を受ける癌には、***、肺、黒色腫、膵臓、結腸直腸、神経芽細胞腫及び神経膠芽細胞腫などの脳の癌を含む頭頸部の癌、口腔癌、食道癌及び咽頭癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、甲状腺癌、肝臓癌、リンパ腫、骨髄腫、ならびに他の血液由来癌が含まれる。生じる免疫応答が、治療に対して耐性で、治療が困難な急速進行性の癌であると判断される細胞において細胞毒性であることをデータが示しているので、化学療法及び／または放射線療法と組み合わせたワクチン接種は、特に有用であり得る。例えば、ｂａｓｅｌ−ｌｉｋｅ癌腫は、アフリカ系米国人及びヒスパニック系アメリカ人などの特定の個体群において蔓延している。これらの侵攻性の癌には、不十分な結果が付き物である。化学療法及び／または放射線療法と組み合わせてのワクチン接種によって、これらの難しい癌を治療する機会が得られる。
患者が腫瘍を切除されていて、検出可能な癌を有さない場合に、化学療法及び／または放射線療法と組み合わせたワクチン接種を使用することができる。そのような術後治療は、再発の可能性を低減するであろう。患者が検出可能な癌を有する場合に、化学療法及び／または放射線療法と組み合わせたワクチン接種を使用することができる。ステージＯ、Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、またはＩＶのいずれかであると診断され得る癌を有する患者を、化学療法及び／または放射線療法と組み合わせたワクチン接種で治療することができる。
そのような薬物及び薬物の組み合わせに限定されないが、いくつかの実施形態では、ドキソルビシン、シクロフォスファミド、ドセタキセル、シスプラチン、ビノレルビン、さらには、ボルテゾミブ、アドリアマイシン、トラスツズマブ、パクリタキセル、タモキシフェン、及びペルツズマブから選択される１種または複数種の化合物の組合せ。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを、１種または複数種のそのような薬物の使用を含む組合せ治療において投与する。本明細書において提供するワクチン、特に、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥとの組合せに含まれ得る他の化学療法薬の例には、アシビシン、アミノプテリン、アフィディコリン、５−アザシチジン、ｌ−アラノシン、クラドリビン、シクロシチジン、シタラビン、３−デアザウリジン、２−アザシチジン、ジグリコアルデヒド、フルダラビン、５−フルオロウラシル、フトラフル、ヒドロキシ尿素、６−メルカプトプリン、メトトレキサート、ＰＡＬＡ、ペントスタチン、６−チオグアニン、チミジンなどの代謝拮抗薬；ブスルファン、カルボプラチン、クロラムブシル、シクロフォスファミド、イホスファミド、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、メクロレタミン（ナイトロジェンマスタード）、メルファラン．４−ＨＣ、Ｊ１、マイトマイシンＣ、Ｐ２、及びサルコリシンなどのアルキル化薬；カンプトテシン、ＳＮ−３８、及びトポテカンなどのトポイソメラーゼＩ−阻害薬；アムサクリン、ビサントレン、ダウノルビシン、エピルビシン、エトポシド、イダルビシン、ミトキサントロン、及びテニポシドなどのトポイソメラーゼＩＩ−阻害薬；ラクタシスチン、ＭＧ−１３２、及びＭＧ−２６２などのプロテアソーム阻害薬；ならびにコルヒチン、メイタンシン、ポドフィロトキシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、及びエストラムスチンなどのチューブリン活性薬が含まれる。本明細書において提供するワクチン、特に、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥと組み合わせると特に有効であり得ることをデータが示している化学療法薬の他の例には、アクラルビシン、アングイジン、シクロヘキシミド、フラボンアセタート（Ｆｌａｖｏｎｅａｃｅｔａｔｅ）、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２、ＭＢＧＢ、ＭＩＢＧ、スピロゲルマニウム、及びハーセプチンが含まれる。他の化学療法薬の例には、シトシンアラビノシド、ブレオマイシン、プロチオニン（大麦粉オリゴペプチド）、マクロモマイシン、１，４−ベンゾキノン誘導体、トレニモン、カルムスチン（ＢＣＮＵ）ロムスチン（ＣＣＮＵ）、ダクチノマイシン、プレドニゾン、デキサメタゾン、タモキシフェン、フルベストラント、アナストロゾール、レトロゾール、酢酸メゲストロール、ビカルタミド、フルタミド、ロイプロリド、ゴセレリン、アバスチン、Ｌ−アスパラギナーゼ、及びトレチノインが含まれる。いくつかの実施形態では、１種または複数種の抗癌化合物は、代謝拮抗薬、アルキル化薬；トポイソメラーゼＩ−阻害薬、トポイソメラーゼＩＩ−阻害薬、プロテオソーム阻害薬、抗体治療薬、及びチューブリン活性薬からなる群から選択される化合物の群からの化合物である。いくつかの実施形態では、１種または複数種の抗癌化合物は、ニトロソウレア；抗腫瘍抗生物質；コルチコステロイドホルモン；抗エストロゲン；アロマターゼ阻害薬；プロゲスチン；抗アンドロゲン；ＬＨＲＨアゴニスト；及び他の抗癌治療薬からなる群から選択される化合物の群からの化合物である。
化学療法は、ワクチン接種に先行させ、かつ／または免疫治療の間に投与し、かつ／または免疫化の後に中断することができる。治療薬の同時投与は、順番または同時のいずれかで、連続し得る。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントもしくはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントを含む組成物、またはＴＡＣＡに対する免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書において記載した別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物を、１種より多い追加の治療薬と共に同時投与する。
いくつかの実施形態では、化学療法薬の投与は、上記ワクチンに対する免疫応答の増強をもたらす。いくつかの実施形態では、化学療法薬は、Ｂ細胞の抗原提示能を増強する。いくつかの実施形態では、化学療法薬は、「抑制因子」Ｔ細胞を除去することによって、適応Ｔ細胞免疫を促進する。いくつかの実施形態では、化学療法薬は、腫瘍浸潤マクロファージのサイトカイン産生をＩＬ−１０からＩＦＮ−γへとスイッチさせ、Ｔｈ１／Ｔｈ２応答を極性化する。いくつかの実施形態では、化学療法薬は、エフェクターＴ細胞と調節性Ｔ細胞（Ｔregs）との間の比を増大させ、患者において後者の免疫抑制活性を低減させる。そのような研究は、癌腫患者において最も有益な臨床結果を達成するために、具体的な標準治療と組み合わせて活性免疫療法レジメンを選択的使用することについての理論的根拠を与えている。
いくつかの実施形態では、ワクチンによって誘発された免疫応答は、化学療法薬によるより効率的な死滅のために、腫瘍細胞を増感させる。いくつかの実施形態では、免疫化と、その後の化学療法とは、腫瘍成長の阻害を促進する。いくつかの実施形態では、免疫化によって誘発された免疫応答は、化学療法薬のＬＣ５０値を低下させて、化学療法をより有効にする。そのような免疫化は、化学療法を増強する。
いくつかの実施形態では、ワクチンによって誘発された免疫応答は、化学療法耐性の腫瘍細胞に対して細胞毒性である。本明細書に記載のとおり、免疫化個体からの血清は、化学療法耐性細胞を化学療法感受性にした。したがって、いくつかの実施形態では、その免疫化が、制癌薬が投与される時点で癌細胞を化学療法感受性にするために十分な時間にわたって生じている免疫応答を誘発するように、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントもしくはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物を、抗癌薬の投与を投与する前に投与する。いくつかの実施形態では、予め免疫化された個体を、化学療法を投与する７２時間前またはそれ以前にブーストすることができる。
同様に、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントもしくはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントを含む組成物、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物を、放射線療法と組み合わせて投与することができる。治療レジメンは、順番または同時のいずれかでの組成物の連続投与及び放射線療法の開始を含み得る。当業者であれば、適切な放射線治療レジメンを容易に処方することができる。参照により本明細書に組み込まれるＣａｒｌｏｓ Ａ Ｐｅｒｅｚ ＆ Ｌｕｔｈｅｒ Ｗ Ｂｒａｄｙ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ， ２ｎｄ Ｅｄ．、ＪＢ Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏ、Ｐｈｉｌａ．、１９９２は、本発明において使用することができる放射線療法プロトコル及びパラメーターを記載している。
ＧＢＭ（神経膠芽細胞腫、最も悪性の神経膠脳腫瘍）について、参照により本明細書に組み込まれるＳｉｍｐｓｏｎ Ｗ． Ｊ．ら：Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｌｏｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｘｔｅｎｔ ｏｆ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ ｏｎ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｓ： Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｒｅｅ ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ （ＲＴＯＧ） ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ．、Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ２６：２３９〜２４４、１９９３は、本発明の方法において有用な臨床プロトコルを記載している。同様に、参照により本明細書に組み込まれるＢｏｒｇｅｌｔら、Ｔｈｅ ｐａｌｌｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ： Ｆｉｎａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ ｔｗｏ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ．、Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｏｎｃｏｌ Ｂｉｏｌ Ｐｈｙｓ ６：１〜９、１９８０は、本発明の方法において有用な臨床プロトコルを記載している。一部の好ましい実施形態では、ガンマ放射線を使用する放射線療法を提供する。
いくつかの実施形態では、その免疫化が、放射線を投与する時点で癌細胞に影響を及ぼすために十分な時間にわたって生じる免疫応答を誘発するように、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対する免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物を放射線療法の前に投与する。いくつかの実施形態では、予め免疫化された個体を、放射線療法の７２時間前またはそれ以前にブーストすることができる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、ドキソルビシン及び／またはシクロフォスファミド及び／またはドセタキセルの投与が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、同時に投与されるドキソルビシン及びシクロフォスファミドの投与、続く、ドセタキセル治療が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、３週毎に４サイクルにわたって同時に投与されるドキソルビシン及びシクロフォスファミドの投与、続く、３週毎に４サイクルにわたるドセタキセル治療が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、３週毎に４サイクルにわたって同時に投与されるドキソルビシン及びシクロフォスファミドの投与、続く、３週毎に４週間にわたるドセタキセル治療が含まれ、その際、患者は、１週目に初回のワクチン注射と共に第１サイクルの化学療法、１週空けて（２及び３週目に）ワクチンの２回の後続の２回の注射、４週目に第２のサイクルの化学療法、及び２１日毎に（７、１０、１３、１６、１９、２２週目に）化学療法の後続のサイクルを受ける。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、３週毎に４サイクルにわたって同時に投与されるドキソルビシン及びシクロフォスファミドの投与、続く、３週毎に４週間にわたるドセタキセル治療が含まれ、その際、患者は、１週目に化学療法の第１のサイクル、２週目に初回のワクチン注射、１週空けて（３及び４週目に）ワクチンの後続の２回の注射、４週目に化学療法の第２のサイクル（２回目のワクチン注射と共に）、及び２１日毎に（７、１０、１３、１６、１９、２２週目に）化学療法の後続のサイクルを受ける。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、３週毎に４サイクルにわたって同時に投与されるドキソルビシン及びシクロフォスファミドの投与、続く、３週毎に４サイクルにわたるドセタキセル治療が含まれ、その際、患者は、週に１回で３回のワクチン注射（１、２、３週目）、次いで、第１のサイクルの化学療法（４週目）、及び２１日毎の（７、１０、１３、１６、１９、２２、２５週目に）化学療法の後続のサイクルを受ける。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、３週毎に４サイクルにわたって同時に投与されるドキソルビシン及びシクロフォスファミドの投与、続く、３週毎に４週間にわたるドセタキセル治療が含まれ、その際、患者は、１週目に初回のワクチン注射、１週空けて（２及び３週目に）ワクチンの後続の２回の注射、２週目に第１のサイクルの化学療法（２回目のワクチン注射と共に）、及び２１日毎の（５、８、１１、１４、１７、２０、２３週目に）化学療法の後続のサイクルを受ける。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、３週毎に４サイクルにわたって同時に投与されるドキソルビシン及びシクロフォスファミドの投与、続く、３週毎に４サイクルにわたるドセタキセル治療が含まれ、その際、患者は、１週目に初回のワクチン注射、１週空けて（２及び３週目に）ワクチンの後続の２回の注射、３週目に第１のサイクルの化学療法（３回目のワクチン注射と共に）、及び２１日毎の（６、９、１２、１５、１８、２１、２４週目に）化学療法の後続のサイクルを受ける。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、免疫化前のドセタキセルの投与が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、免疫化の完了と同時及び／またはその後のドセタキセルの投与が含まれる。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、免疫化の完了と同時及び／またはその後のドセタキセル、ペルツズマブ、及びトラスツズマブの投与が含まれる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバントなどの本明細書において提供する組成物での免疫化と併せて使用される化学療法には、免疫化の完了の前、及びそれと同時、及び／またはその後のアドリアマイシン、シクロフォスファミド、パクリタキセル、トラスツズマブ、及びビノレルビンの投与が含まれる。
充実性腫瘍に限定されず、充実性腫瘍、さらにはリンパ腫、骨髄腫、及び他の血液由来癌であると特徴づけられるものを含む癌を、ＨＬＡクラスＩの細胞表面発現を下方制御し、ナチュラルキラー細胞媒介性溶解を増強するベルケイド（ボルテゾミブ）または同様に作用する化合物と組み合わせたＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物で治療することができる。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物での治療は、ベルケイドをより有効にし、かつベルケイドは、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物での治療をより有効にする。いくつかの実施形態では、その免疫化が、ベルケイドが投与される時点で癌細胞に影響を及ぼすために十分な時間にわたって生じている免疫応答を誘発するように、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物をベルケイドの前に投与する。いくつかの実施形態では、予め免疫化された個体を、ベルケイド療法の７２時間前またはそれ以前にブーストすることができる。ベルケイドと、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物との組み合わせを使用して、充実性腫瘍または血液細胞の癌の形態を含む癌と診断された個体を治療することができる。ベルケイドと、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ＋例えば、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントまたはＱＳ２１アジュバントなどのアジュバント、またはＴＡＣＡに対して免疫応答を誘発するために使用することができる本明細書に記載の別の組成物、または本明細書に記載の抗ＴＡＣＡ抗体を含む組成物との組み合わせを使用して、癌の高いリスクを有すると特定されている個体における癌の発生／再発を予防することができる。
一部の組合せ療法は、免疫化患者における免疫応答を増強するために、ＤＮＡワクチンなどの核酸ビヒクルによってタンパク質として送達されるか、コードされるとおりのＩＬ−１２の使用を含む。ＩＬ−１２の送達は、免疫化方法におけるワクチンの投与の前、それと同時、またはその後に時間設定することができる。
組成物の調製、製剤化、及び投与
上記組成物は、生理学的に許容される担体または希釈剤をさらに含んでよい。
ペプチドは、当業者であれば、周知の技術及び容易に入手可能な出発物質を使用して合成することができる。ペプチドは、限定されないが、化学合成、さらには、真核または原核発現系におけるｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的合成を含む当技術分野で公知の任意の方法を使用して生産することができる。例えば、本発明のペプチドは、それぞれ参照により本明細書に組み込まれるＭｅｒｒｙｆｉｅｌｄ、（１９６３）、Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．、１５：２１４９〜２１５４、ならびにＪ． Ｓｔｕａｒｔ及びＪ． Ｄ． Ｙｏｕｎｇ、Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｌｉａ、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌ．（１９８４）によって教示されているとおりの固相合成技術によって生産することができる。
本発明のペプチド及び組換え抗体は、医薬投与の経口、腹腔内、筋肉内、及び他の従来の経路によって投与することができる。本発明の医薬組成物は、個別の治療／予防用薬剤として、または他の薬剤と組み合わせて投与することができる。これらは、単独で投与することができるが、一般には、選択された投与経路及び標準的な薬務に基づき選択された薬学的担体と共に投与される。
投与される投薬量は、もちろん、特定の薬剤の薬力学的特徴、ならびにその投与様式及び経路；受容者の年齢、健康、及び体重；症状の性質及び規模、同時治療の種類、治療頻度、ならびに所望の効果などの既知の因子に応じて様々である。通常、活性成分の１日投薬量は、体重１キログラム当たり約０．０００１〜１グラム、いくつかの実施形態では、体重１キログラム当たり約０．１〜１００ミリグラムであり得る。普通、投薬量は、１日当たり体重１キログラム当たり０．５〜５０ミリグラムの範囲、好ましくは、１キログラム当たり１〜１０ミリグラムの範囲である。いくつかの実施形態では、上記医薬組成物を、所望の結果を得るために有効である１日１〜６回に分割した用量で、または持続放出形態で投与する。内部投与に適した剤形（組成物）は一般に、１単位当たり活性成分約１ミリグラム〜約５００ミリグラムを含有する。これらの医薬組成物では、上記活性成分は、通常、組成物の全重量に対して約０．５〜９５重量の量で存在する。いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも３００μｇ、いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも５００μｇ、及びＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも１０００μｇ以上を含む注射用製剤において、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントと組み合わせる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも３００μｇ、いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも５００μｇ、及びＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも１０００μｇ以上を含む注射用製剤において、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを、ＱＳ２１アジュバントと組み合わせる。
いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも３００μｇ、いくつかの実施形態では、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも５００μｇ、及びＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ少なくとも１０００μｇ以上を含む注射用製剤において、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを、例えば、上記の１種などのアジュバントと組み合わせる。
いくつかの実施形態では、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓペプチド少なくとも３００μｇ、いくつかの実施形態では、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ少なくとも５００μｇ、及びＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ少なくとも１０００μｇ以上を含む注射用製剤において、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓペプチド、すなわち、例えば、上記のものなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓを含む、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓを、例えば、上記の１種などのアジュバントと組み合わせる。
いくつかの実施形態では、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ変異体少なくとも３００μｇ、いくつかの実施形態では、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ変異体少なくとも５００μｇ、及びＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ変異体少なくとも１０００μｇ以上を含む注射用製剤において、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ変異体、すなわち、例えば、上記のものなどのＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結した上記のとおりのＰ１０ｓの変異体を、例えば、上記の１種などのアジュバントと組み合わせる。
非経口投与では、上記化合物を、薬学的に許容される非経口ビヒクルと共同して、液剤、懸濁剤、乳剤、または凍結乾燥散剤として製剤化することができる。そのようなビヒクルの例は、水、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース液、及び５％ヒト血清アルブミンである。上記ビヒクルまたは凍結乾燥散剤は、等張性（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール）及び化学的安定性（例えば、緩衝剤及び防腐剤）を維持する添加剤を含有してよい。上記製剤を、一般に使用される技術によって滅菌する。適切な医薬担体は、この分野の標準的な参照文献であるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ａ． Ｒ． Ｇｅｎｎａｒｏら編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．、１９９０の最新版に記載されている。
一般に、等張性のための添加剤には、塩化ナトリウム、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、及びラクトースが含まれ得る。場合によっては、リン酸緩衝生理食塩水などの等張液を使用する。安定剤には、ゼラチン及びアルブミンが含まれる。いくつかの実施形態では、血管狭窄薬を、上記製剤に添加する。本発明による医薬製剤を好ましくは、滅菌で、かつ発熱物質非含有で提供する。
例えば、薬剤学または医薬科学において高度な学位を有する医薬製剤の当業者は、常套以下の実験で、本発明の組成物のための様々な適切な剤形及び製剤を調製することができる。本分野のいくつかの文献、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｔｈｅ Ｕ．Ｓ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ／Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙの最新版が、これに関して、重要な指針を提供している。
薬学的に許容される製剤は、活性成分（複数可）を、製剤環境及び薬物送達システムにおいて、その剤形の性質及び組成、ならびに薬物成分（複数可）の特性に対して適切であるような賦形剤、希釈剤、安定剤、防腐剤、及び他の成分と一緒に適正な物理的形態で提供する。
初回投与の後に、個体を、再投与によってブーストすることができる。一部の好ましい実施形態では、多数回の投与を行う。いくつかの実施形態では、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回、またはそれ以上のブーストを、治療の最初の１年以内に投与する。いくつかの実施形態では、治療の最初の１年の後に、ブーストを、毎年、より頻繁に、または毎年よりも少ない頻度で投与することができる。
ＤＮＡワクチン
ＭＡＰコンストラクトとしてか、またはＣＭＰ＋ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープペプチドとして、上記Ｐ１０ｓ及び変異体をベースとするＤＮＡワクチンを調製することができる。ワクチン開発における最近の進歩によって、操作されたＤＮＡベクターの投与を介して、様々な病原体に対する防御免疫を誘発する実行可能性が実証されている。糖鎖ペプチド模倣物質の内因性発現をもたらすＤＮＡワクチンの投与は、カプセル化された生体、他の病原体に対する、及び腫瘍細胞に対する防御免疫を誘発する。ＤＮＡをベースとするワクチンに関連する利点には、コンストラクション及び標準化の容易さ、安定性及び耐熱性、１つのベクターに複数の血清群の提示を導入することができること、ＣｐＧなどの強力な免疫原性モチーフを挿入することができること、Ｔヘルパー細胞１型（Ｔｈ１）応答の誘導、ならびに極めて低い製造コストが含まれる。鼻腔内免疫化は、投与の容易さ、低いコストを促進することによって、かつ有効な粘膜免疫応答を刺激することによって、このワクチン製剤の利点を増強する可能性がある。全身免疫とは対照的に、生涯の最初の数か月以内に、粘膜免疫が成人レベルまで成熟するので、これは、乳児において特に有効な戦略であり得る。
ＤＮＡワクチンによって、天然の多糖、さらにはコンジュゲート多糖ワクチンの両方に関する問題が場合によっては克服され得る。
ＤＮＡワクチンは、米国特許第４，９４５，０５０号、同第５，０３６，００６号、同第５，５９３，９７２号、同第５，７３９，１１８号、同第５，８１７，６３７号、同第５，８３０，８７６号、同第５，９６２，４２８号、同第５，９８１，５０５号、同第５，５８０，８５９号、同第５，７０３，０５５号、及び同第５，６７６，５９４号に記載されている。米国特許第５，２７３，５２５号、同第５，４３９，４４０号、同第５，７０２，３５９号、同第５，８１０，７６２号、同第５，９９３，４３４号、同第６，０１４，５８４号、同第６，０５５，４５３号、同第６，０６８，６５０号、同第６，１１０，１６１号、同第６，１２０，４９３号、同第６，１３５，９９０号、同第６，１８１，９６４号、同第６，２１６，０３４号、同第６，２３３，４８２号、同第６，２４１，７０１号、同第６，３４７，２４７号、同第６，４１８，３４１号、同第６，４５１，００２号、同第６，５１６，２２３号、同第６，５６７，６９４号、同第６，５６９，１４９号、同第６，６１０，０４４号、同第６，６５４，６３６号、同第６，６７８，５５６号、同第６，６９７，６６９号、同第６，７６３，２６４号、同第６，７７８，８５３号、同第６，８６５，４１６号、同第６，９３９，８６２号、同第６，９５８，０６０号、及び同第７，２４５，９６３号において記載されているとおりの遺伝子コンストラクトを送達するための電気穿孔法の使用。
本明細書において言及したすべての参照文献及び特許及び公開されている特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。
実施例１
Ｐ１０ｓ−ペプチドでアフィニティー精製した静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）からのＩｇＧ画分の多反応性のグリカンアレイ分析を行った。その結果を図１に示している。そのペプチドは、ガングリオシドＧＤ２／ＧＤ３の模倣物質であるが、それを認識する既存のヒトＩｇＧは、広範な他の糖に結合する。最も著しく富化される反応性には、デンプン、グリコーゲン、及びセルロース、さらには複数の乳糖の分解産物を表すオリゴ糖分子に対する反応性がある。両方の画分を、０．１ｍｇ／ｍｌで試験した。それぞれの軸において、個々のＩｇＧ画分の反応性を、任意の蛍光単位で対数目盛において表している。図１は、最高の結合はセルロースとの結合であることを示している。１回交差線のある網掛けの四角は、マルトースを表す。一様に濃色の四角は、グルコースであり、一様に影のない四角は、イソマルトトリオースグルコースを表し、薄く影があって点々が付されている単一の四角は、ラクトースである。
図２において示されているとおり、ＩＶＩｇにおけるデンプン分解活性は、＠Ｐ１０ｓ画分において富化している。４０ｍｇ／ｍｌでの透析ＩＶＩｇ溶液を、４時間にわたって、セファロースにカップリングさせたＰ１０ｓと共にインキュベートした。その通過画分及び酸／塩基溶離画分を十分に透析し、室温で２時間にわたって可溶性デンプン溶液０．０５ｍｇ／ｍｌと共にインキュベートすることによって、デンプン分解活性について試験した。そのインキュベーションの終了時に、ヨウ素チンキ剤０．０８％を添加し、色強度を５９５ｎｍで測定した。グラフの上の曲線は、ｐ１０ｓである；下の曲線は、ＩＶＩｇ ＦＴである。その値は、免疫グロブリンを含まないウェルの平均強度からの差の平均値及び標準偏差を表している。
図３Ａは、ＣＤ１９発現（ＦＬ４）でゲートされたＣＤ２３+（ＦＬ２）及びＣＤ２３-小ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞の、Ｐ１０ｓ−量子ドットクラスター（５２５ｎｍ − ＦＬ１）での染色を示している。図３Ｂは、ＣＤ１９発現（ＦＬ４）でゲートされたＣＤ２３+（ＦＬ２）及びＣＤ２３-大ＢＡＬＢ／ｃマウス脾細胞の、Ｐ１０ｓ−量子ドットクラスター（５２５ｎｍ − ＦＬ１）での染色を示している。その染色は、Ｐ１０ｓ+Ｂ細胞集団サイズが表現型分集団と抗原特異的細胞との間の広い範囲にあるので、多特異性反応性と一致する。多特異性及び糖鎖反応性細胞について予測されたとおり、ｐ１０ｓ+Ｂ細胞は、主に、ＣＤ２３-、おそらく周辺帯域または脾臓Ｂ１細胞である。図３Ａのデータは、次のとおりである。Ｄ１と指定された四分の一区分は、７９．８％を示している。Ｄ２と指定された四分の一区分は、０．６％を示している。Ｄ３と指定された四分の一区分は、１９．３％を示している。Ｄ４と指定された四分の一区分は、０．４％を示している。図３Ｂのデータは、次のとおりである。Ｄ１と指定された四分の一区分は、３４．６％を示している。Ｄ２と指定された四分の一区分は、０．８％を示している。Ｄ３と指定された四分の一区分は、６２．６％を示している。Ｄ４と指定された四分の一区分は、２．０％を示している。
実施例２
配列：Ｈ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ２を有するＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを合成した。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥは、Ｌ配置の２３個のアミノ酸及びＤ配置の２個のアミノ酸を含む２５アミノ酸ペプチドである（Ａｌａ１３及びＡｌａ２５は、それぞれ、ｄＡＬａとして示されるＤ型アミノ酸である）。１５位にあるＡｌａは、改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニン（ＣＨＡｌａ、ＣＨＡｌａ１５、Ｃｈａ、またはＣｈａ１５）である。アミノ酸の一文字略語を使用すると、上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ配列は、［水素］−Ｗ−Ｒ−Ｙ−Ｔ−Ａ−Ｐ−Ｖ−Ｈ−Ｌ−Ｇ−Ｄ−Ｇ−ｄＡ−Ｋ−Ｃｈａ−Ｖ−Ａ−Ａ−Ｗ−Ｔ−Ｌ−Ｋ−Ａ−Ａ−ｄＡ−ＮＨ２である。上記Ｐ１０ｓ ＰＡＤＲＥの分子式は、Ｃ128Ｈ197Ｎ35Ｏ30である。アセタートペプチドと対イオンとの比：８６．６％対４．５％である。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥは、酸性ｐＨにおいて良好な水溶解性を有する陽イオン性、塩基性（計算等電点＝９．７）ペプチドである。上記配列中に、アミド化アミノ酸またはシステインは存在しない。分子量：２７０６．９Ｄａ。糖鎖模倣ペプチド（ＣＭＰ、ミモトープ；Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥとも呼ばれ、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥDAla13,CHAla,DAla25とも言及される）での免疫化を使用して、糖鎖反応性抗体を誘発する新たな免疫調節手順を記載する。
実施例３
腫瘍細胞の適応及び生存に打ち勝つことは、治療の失敗を防止する際に重要であり、新たな免疫治療ストラテジーの基礎として役立つ可能性がある。腫瘍成長を阻害する広域スペクトルの体液及び細胞応答を誘発する糖鎖模倣ペプチド（ＣＭＰ）が開発されている。Ｐ１０ｓ（配列番号１）と呼ばれるこれらのＣＭＰの１種は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ（Ｈ−Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ２（ここで、Ａｌａ１３及びＡｌａ２５は、それぞれ、ｄＡＬａとして示されるＤ型アミノ酸であり、１５位にあるＡｌａは、改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニン（ＣＨＡｌａとして示される）である）を生じるように、汎用ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープＰＡＤＲＥ（ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ）を含むように改変されている。
ステージＩＶの乳癌患者におけるＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの第Ｉ相ヒト初回用量漸増予備試験を開始した。免疫化対象は、抗Ｐ１０ｓ応答を展開し、免疫化後の対象の血清及び血漿抗体は、トラスツズマブに対する新規耐性を有する細胞系を含むヒト乳癌細胞系に対する細胞毒性を媒介した。Ｐ１０ｓを、ネオラクトシリーズ抗原Ｌｅｗｉｓ Ｙ（ＬｅＹ）及びガングリオシドＧＤ２を含む複数のＴＡＣＡに対する応答を誘発するように設計した。これらの抗原は、細胞死に関係する細胞シグナル伝達機構に密接に関係している。
ワクチンを製造し、ステージＩＶの転移性乳癌患者をワクチン接種するために使用して、その安全性及び耐容性を評価した。上記ワクチンは、抗ＧＤ２及び抗ＬｅＹ抗体の結晶構造に基づくＰ１０ｓ配列（配列番号１を含む。Ｐ１０ｓを、その親ペプチド（Ｐ１０またはＰ１０オリジナルと呼ばれ、配列番号２）よりも正確なＴＡＣＡの模倣物質として開発した。
Ｐ１０ｓを、ＧＬＰ検証を使用して、改変された形態でＰａｎ Ｔ細胞ペプチドＰＡＤＲＥと共に合成した。上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンを、疾患再発の高いリスクを有する乳癌患者を治療するために開発した。第Ｉ相臨床試験研究の参加者を、組織学的または細胞学的に確認されたステージＩＶの乳癌（新たに診断されたか、転移性か、または当初もしくは補助療法の後で再発し、２カ月にわたって、治療の変更が必要とされていない）を有するすべての人種の女性に限定した。３〜６人のステージＩＶの乳癌患者からなる２つのコホートを登録することとした。
初めに、単一のコホートに、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント（商標）と共に製剤化したＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ（３００μｇ／ｍＬ）を投与した。ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバント（商標）アジュバントと混合したＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの用量を、腹部で注射部位を交替させて、対象に皮下投与した。現在、４人の対象が、２３週間かけての５回の免疫化（１〜３週目での高度免疫、７週目及び１９週目のブースト）からなるその免疫化コースを完了している。
すべての対象が、上記ワクチンに対するＩｇＧ及びＩｇＭ応答を示した。図４は、免疫化個体におけるＩｇＭ抗体応答を示している。図５は、免疫化個体におけるＩｇＧ抗体応答を示している。図６は、免疫化個体から誘発された抗体が、細胞毒性活性を伴って、ＨＣＣ１９５４細胞に対して交差反応性であったことを示している。
最初の４人の対象において、用量限定性毒性（ＤＬＴ）は観察されなかったし、５人目の対象において、ＤＬＴは、今までのところ観察されていない。この情報は、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ５００μｇの初回用量レベルでのワクチン接種は、安全かつ許容されるはずであることを示している。
図７Ａ及び７Ｂにおいて示されているとおり、Ｐ１０ｓでの免疫化は、ヒトＨＣＣ１９５４癌細胞に結合し、細胞毒性を誘発するペプチドと反応性の抗体をもたらす。ＥＬＩＳＡプレートをＰ１０ｓのＭＡＰバージョンでコーティングし、免疫化前及び免疫化後血清の２倍希釈系列の反応性を、ＨＲＰ−コンジュゲートした抗ヒトＩｇＧ（図７Ａ）及びＩｇＭ（図７Ｂ）によって検出した。図７Ａ及び図７Ｂにおいて示されている終点力価は、線形回帰によって吸光度−対−希釈曲線から推定した。各対象の免疫化前血清での回帰線の遮断は、その対象での終点力価を決定するための吸光度カットオフとして使用する値であり、各試料の回帰線が対象の吸光度カットオフと交差する希釈度を、試料の終点力価であると定義した。最小の実際の希釈度を下回るか、または最大の実際の希釈度を上回る希釈度を超えての外挿は、許容されなかった。この手順で、各対象の免疫化前力価を１：１００と正規化した。
図８Ａ及び８Ｂは、ＨＣＣ１９５４及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞に対する、４患者から収集された免疫化前及び免疫化後血漿の細胞毒性効果を示している。図８Ａは、その免疫化対象が、Ｐ１０ｓに対して免疫応答を生じること、及びその誘発された血清及び血漿抗体は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及び新規トラスツズマブ耐性ＨＣＣ１９５４細胞系に結合し、それらに対して細胞毒性であることを示している。各細胞系における細胞毒性をまた、３連ウェルにおいて残った細胞を計数することによって定量化し、図８Ｂにおいて棒グラフで示した。
図９においてデータによって示したとおり、予備研究は、誘発された抗体が、腫瘍細胞をドセタキセル治療に対して増感させ得ることを示唆している。図９は、対象の血清とのプレインキュベートが、腫瘍細胞をドセタキセル毒性に対して増感させることを示している。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、終夜、１０％ＦＢＳを含有するＲＰＭＩ培地中で培養した。次いで、培地を、免疫化前または免疫化後血清を含有する培地に交換した。ＦＢＳを、対照として使用した。５時間のインキュベーションの後に、ドセタキセルをウェルに、系列希釈法で添加した。２４時間後に、ウェルを洗浄し、生細胞を固定し、染色し、計数した。生存パーセンテージを、「０」薬物用量での細胞数に対する所与の薬物用量での細胞数の比として計算した。Ｐｒｉｓｍ ５ソフトウェアを使用し、生存データを使用して、用量反応曲線をフィットさせた。各曲線のＩＣ50を計算した。免疫化後のＩＣ50は、ＦＢＳのＩＣ50及び免疫化前血清のＩＣ50とは有意に異なり、Ｐ値は、それぞれ６．２１Ｅ−０８及び０．００２であった。
５人目の対象は、５００μｇ用量でのその女性の免疫化スキームをほぼ完了しており、６人目の対象は、５００μｇで２回の免疫化を受けていて、５００μｇコホートを完了する過程にある。
実施例４
ステージＩＶの乳癌患者においてＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを試験する第I相ヒト初回用量漸増試験は、成功裏に完了した。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧと共に製剤化した。試験したＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの用量は、３００μｇ／注射及び５００μｇ／注射であった。
方法
研究の設計及び統計学的検討
第Ｉ相用量漸増試験を、ステージＩＶの乳癌の対象においてワクチン、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの安全性及び耐容性を評価するために行った。従来の３＋３コホート設計（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇｅｒ， Ｗ．Ｆ．及びＨａｉｎｅｓ， Ｌ．Ｍ．、Ｃｏｍｐｅｔｉｎｇ ｄｅｓｉｇｎｓ ｆｏｒ ｐｈａｓｅ Ｉ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ： ａ ｒｅｖｉｅｗ． Ｓｔａｔ Ｍｅｄ． ２１、２７５７〜２７７０（２００２））を利用したこの試験は、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｂｏａｒｄ （ＩＲＢ） ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｒｋａｎｓａｓ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （ＵＡＭＳ）によって許可され、ＵＳ ＦＤＡ ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ ［ｄｏｔ］ ｇｏｖウェブサイトにおいてＮＩＨ臨床試験登録で登録された。
試験を、「標準」または「従来の」方法と呼ばれているものを使用して、用量漸増研究として設計した（前出のＲｏｓｅｎｂｅｒｇｅｒ， Ｗ．Ｆ．及びＨａｉｎｅｓ， Ｌ．Ｍ． （２００２））。対象を、３つの群で処置し、第１の群は、注射１回当たりＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ３００μｇの投与用量であった。この第１の群において用量限定毒性（ＤＬＴ）が存在しなかったならば、最終用量を、注射１回当たりＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ５００μｇまで上昇させ、次の群を、この最終用量で処置することとした。第１の群において、２つまたは３つのＤＬＴが存在したならば、用量を１回の注射当たり１００μｇの安全用量まで低下させ、３人の患者をこの安全用量で処置することとした。第１の群においてちょうど１つのＤＬＴが存在したならば、さらに３人の患者を当初の用量でワクチン接種し、追加のＤＬＴが観察されなかった場合にのみ、最終用量を上昇させることとした。この手法での安全性の評価が、一次的な結果であった。他の終点はすべて、二次的であり、それらの分析は、調査のためのものであり、仮説を生じさせるものと考えた。すべての患者が、安全性及び有効性分析に含まれた。
Ｂｒｕｎｎｅｒらのノンパラメトリック繰り返し測定法（Ｎｏｎｐａｒａｍｅｔｒｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ Ｄａｔａ ｉｎ Ｆａｃｔｏｒｉａｌ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ．；２００２））を使用して、特に、この方法から推奨されるＡＮＯＶＡ型統計を使用して、抗Ｐ１０ｓ抗体の終点力価を、時間、用量コホート、及びそれらの相互作用に関する変化について分析した。細胞系への血漿細胞毒性に対するワクチン接種の効果を、対応のある差異について１標本ｔ検定によって評価した。すべての統計検定は、両側であり、Ｐ＜０．０５有意水準を使用した。ＳＡＳバージョン９．３（ｔｈｅ ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｃａｒｙ、ＮＣ）を、ノンパラメトリック繰り返し測定分析のために使用し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ５（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｌａ Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）を、１試料ｔ検定及びすべてのグラフのために使用した。
参加者
上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンを、特に、疾患再発の高いリスクを有する乳癌患者を治療するために開発した。第Ｉ相臨床試験において、研究参加者は、組織学的または細胞学的に確認されたステージＩＶの乳癌を有する女性に限定した。組織学的または細胞学的に確認されたステージＩＶの乳癌を有するすべての人種の１８歳以上の女性が適格であり、対象は、文書によるインフォームドコンセントの提供の後に登録された。Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｉｎｔ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ Ｃａｎｃｅｒ（ＡＪＣＣ）第６版によって、疾患病期分類を行った。次の適格性基準を使用した：その癌は、新たに診断されたか、再発か、または当初もしくは補助療法の後で再発していてよく、２カ月にわたって、治療の変更が必要とされていてはならない。抗エストロゲン療法または化学療法での治療は許容された。上記化学療法レジメンは、支持療法前またはその後の薬物療法において、ステロイドを含有することはできなかった。追加の適格性基準には、０〜１のＥａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐパフォーマンスステータス及び適切な臓器機能（登録前の２週間以内に白血球数≧３，０００／ｍｍ３、ヘモグロビン≧８．０ｇ／ｄＬ、血小板≧１００，０００／ｍｍ3、総ビリルビン≦３．０ｍｇ／ｄＬ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ≦２００ＩＵ／Ｌ、アラニンアミノトランスフェラーゼ≦２００ＩＵ／Ｌ、及び血清クレアチニン≦１．５−／ｄＬ）が含まれる。対象は、皮膚試験によって、２種のリコール抗原に対する応答性によって測定した場合に、免疫適格性であるべきであった。次の除外基準を適用した：既知の脳転移；妊娠または授乳；既知のＨＩＶ感染履歴；臨床上重大な感染；重症の心不全；他の活発な悪性疾患；臓器同種移植の履歴；免疫不全または脾臓摘出の履歴；ステロイドまたは免疫抑制薬との同時治療；及び臨床的判断に基づく治験での不適切性。
手順
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンを、次のとおりに生産した。ペプチドＰ１０ｓ（ＷＲＹＴＡＰＶＨＬＧＤＧ、配列番号１）を、Ｐａｎ Ｔ細胞ペプチドＰＡＤＲＥの１バージョン（ｄＡＫｃｈＡＶＡＡＷＴＬＫＡＡｄＡ：ＡｍｂｉｏＰｈａｒｍ, Ｉｎｃ．、Ｎｏｒｔｈ Ａｕｇｕｓｔａ、ＳＣ、ＵＳＡ）に共有結合により結合させた。上記ペプチドは、Ｇｏｏｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ Ｐｒａｃｔｉｃｅガイドラインに従って合成した。上記ペプチドワクチンを、アジュバントＭｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ−５１ＶＧ（ＳＥＰＰＩＣ, Ｉｎｃ．、Ｆａｉｒｆｉｅｌｄ、ＮＪ、ＵＳＡ）と共に乳化した。
ワクチンを、１、２、３、７、及び１９週の間に５回の別々の機会で、皮下（ＳＣ）注射によって、液体の形態で投与した。３人の患者への各用量の投与を計画した。初めは、単一のコホートに、ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧと共に製剤化されたＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ（３００μｇ／ｍＬ）を投与した。ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧと混合したＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥの用量を、腹部で注射部位を交替させて、対象に皮下投与した。
一次終点は、ペプチドワクチン接種の安全性であった。二次終点は、抗Ｐ１０ｓ抗体力価、***癌細胞への抗体結合、及び***癌細胞に対する試料細胞毒性であった。
ワクチン接種の前後での患者の血清中の抗Ｐ１０ｓ抗体の存在を、ＥＬＩＳＡで評価した。ＥＬＩＳＡプレートを、終夜、炭酸塩−炭酸水素塩緩衝液（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）中のＰ１０ｓの多重抗原ペプチド（ＭＡＰ）バージョン１μｇ／ウェルでコーティングした。３７℃で１時間にわたって０．５％ＦＢＳ及び０．２％Ｔｗｅｅｎ ２０を含有するＰＢＳ（ブロック緩衝液）でウェルをブロックした後に、１：１００（希釈ステップ０）から１：１２８００（希釈ステップ７）の最終希釈までの血漿及び血清試料の連続２倍希釈液を添加した。ブロック緩衝液中の血清希釈液を３７℃で２時間にわたってインキュベートした。洗浄した後に、ウェルを、３７℃で１時間にわたって、ＨＲＰ−コンジュゲートされたマウス抗ヒトＩｇＭ及びＩｇＧ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）と共にインキュベートした。次いで、テトラメチルベンジジン基質（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加し、その反応を２０分後に停止した。プレートを、４５０ｎＭでＥＬＩＳＡリーダーを使用して読み取った。
得られた吸光度−対−希釈曲線を使用して、次のとおりに正規化終点力価を推定した。（１）吸光度対希釈ステップの線形回帰を、各対象からの各試料の系列希釈で行ったが、その際、希釈ステップを、上記のとおりにナンバリングした。（２）各対象の免疫化前試料での回帰線の切片は、その対象から収集されたすべての試料の終点力価を決定するための吸光度カットオフとして使用する値である。（３）各試料の回帰線が対象の吸光度カットオフと交差する希釈ステップを、決定し、Ｘ（ｃ）と呼び、正規化終点力価を、力価＝１：（１００*２X(c)）としてＸ（ｃ）から推定した。この手順によって、１：１００であるように各対象の免疫化前力価を正規化した。外挿が希釈ステップの範囲外へと離れすぎることを防ぐために、−１未満または＋８超のＸ（ｃ）の値は、それぞれ−１及び＋８に等しいと設定したが、これは、正規化終点力価が最低１：５０及び最大１：２５６００を有する原因となった。
ワクチン接種前後でのヒト乳癌細胞系に対する対象の抗体の機能性を評価した。ヒト乳癌細胞系は、ＡＴＣＣ（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から購入した。細胞を、１０％熱不活化ウシ胎児血清（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、５０単位／ｍＬペニシリン、及び５０μｇ／ｍＬストレプトマイシンを補充された基本培地中で培養した。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＨＣＣ１９５４のための基本培地は、それぞれ、ＤＭＥＭ及びＲＰＭＩ（両方とも、Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ）であった。上記細胞系に対する対象の試料の細胞毒性を評価するために、個々の細胞５×１０4（２４ウェルプレート）を、１０％ＦＢＳを含有する培地に播種した。２４時間後に、上記培地を、１０％の免疫化前または免疫化後の血漿を含有する培地で新しくした。対照ウェル中の培地は、１０％ＦＢＳを含有した。血漿の添加から２４時間後に、上清を除去し、生細胞を固定し、Ｃｒｙｓｔａｌヴァイオレットで染色した。細胞毒性のパーセンテージを、１００％から、対照ウェルでの細胞数に対する生存細胞のパーセントを引いて計算した。すべての試料を、３連でアッセイし、その３連の平均を、試料の測定細胞毒性として採用した。
結果
患者の特徴
研究は、従来の３＋３設計によって必要とされるならば、１８人の対象からなる登録目標を許容するように、２４人のヒト対象についてスクリーニングを調整した。この設計では、毒性が生じなければ、最低６人の対象が必要とされたであろう。表１は、研究に同意した１６人の対象が、年齢及び人種によって作表されて列挙されている。６人の対象（３７．５％）は、リコール抗原トリコフィトン及びカンジダ抗原に対する遅延型過敏性（ＤＴＨ）応答の欠如により、スクリーニングで落ちた。１人の対象（３９６１０）のみが、上記研究の継続を辞退し、適格性を決定するための予備研究／スクリーニングを完了することはなかった。３〜６人のステージＩＶの乳癌患者からなる２つのコホートが成功裏に登録され、２３週間にわたる５回の免疫化（１、２、３週目での高度免疫、７週目での別の免疫化、及び１９週目でのブースト免疫化）からなるその免疫化コースを完了した。上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン接種に対する対象の状態及び臨床応答の概要を表２に列挙する。
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥでの免疫化は、抗Ｐ１０ｓ応答を誘発する
上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンは、安全かつ許容されることが判明し、その免疫化スケジュールは実現可能であった。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン免疫化対象は、Ｐ１０ｓのＭＡＰ形態に対して免疫応答を生じ、上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン製剤を投与された６人の対象はすべて、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定したところ、免疫化の後に、Ｐ１０ｓＭＡＰペプチド形態に対して持続性ＩｇＧ応答を示した（図１０）。上記ＭＡＰペプチドに対する同様の結合パターンが、血漿試料を使用して観察された。４週目にすでに上昇していた対象＃６を除いて、多くの対象において、抗ペプチド血清反応性が、研究の４週目から７週目に劇的に上昇した。免疫化前と比較した７週目での上昇は、３１倍（対象＃２において）から２５６倍（対象＃５及び＃６において）の範囲であり、後続の週における力価は、その７週目の値からほとんど変化を示さなかった。より多い用量のワクチンで免疫化されたコホートは、より高い正規化終点力価を示した（図１０）。非パラメトリック繰り返し測定分析において、用量及び週の主な効果は、統計的に有意であったが（両方ともＰ値＜０．０００１）、その用量×週交互作用は、有意ではなかった（Ｐ＝０．４０）（表３）。３人の対象における免疫応答のさらなる評価は、上記抗Ｐ１０ｓ力価は、一部の対象について、最終回の免疫化から１年後に低下し始めたことを示唆している。
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ免疫化は、ヒト乳癌細胞系に対して細胞毒性効果を有する
ワクチン誘発抗体は、細胞毒性において有意な平均上昇を示した。Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥでの免疫化は、全身療法に対して耐性の２種のヒト乳癌細胞系に対する細胞毒性活性をもたらした。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞は、ｂａｓａｌ−ｌｉｋｅ型癌腫の代表であるのに対して、ＨＣＣ１９５４細胞はＨＥＲ２を発現するが、それにもかかわらず、トラスツズマブに対する新規の耐性を有する（図８Ａ及び１１Ａ）。両方の細胞系に対する細胞毒性が、それらの免疫化前血漿と比較して、６人の対象のうちの５人の対象からの免疫化後血漿において高かった。６人の対象での細胞毒性の免疫化後上昇は、ＨＣＣ１９５４に対しては２６％（２４％）、及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１に対しては３０％（２８％）の平均（標準偏差）を有し、両方の上昇が、１標本ｔ検定によると統計的に有意であった（それぞれＰ＝０．０４７及びＰ＝０．０４４）（図１１Ｂ）。非腫瘍発生性ヒト***上皮細胞系であるＭＣＦ−１０Ａでは、毒性は観察されなかった（図１２）。他の実験では、ＭＣＦ−７細胞に対しては、毒性は観察されなかったが、ＭＣＦ−７と同様の低成長ＥＲ＋細胞系であるが、しかしながら、ＭＣＦ−７と異なりインタクトなカスパーゼ−３官能性を有すると考えられているＺＲ−７５−１の細胞に対しては、毒性が観察された。
考察
この研究において、用量限定性の毒性は観察されなかった。アジュバントの性質による肉芽腫の形成の可能性によって、ペプチドの最大許容用量の決定は妨害された。
上記ワクチンを、皮膚試験による２種のリコール抗原に対する応答を展開する可能性を含むすべての適格性基準を満たす患者に投与した。この後者の基準についての理論的根拠は、抗原攻撃に応答し得る活発な免疫系を有する患者を選択することであった。スクリーニングした１６人のうち６人の患者が、すべての基準を満たしたが（３７．５％）、残りの患者は、多くは陰性のリコール抗原皮膚試験によって、スクリーニングに落ちたと判断された。研究に登録されたすべての患者が、乳癌の種類に関わらず、上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンに対する反応性の証拠を示し、このことは、このワクチンの将来の開発が、すべての種類の乳癌において追及され得ることを示唆している。
この研究の一次終点は、ワクチン接種の実行可能性及び安全性の評価であったが、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥでの免疫化によって生じる免疫応答を、免疫療法に関連する特徴について分析した。上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンは、すべての対象において、Ｐ１０ｓ−反応性抗体を誘発した。観察によって、スケジュール上の５回の免疫化をすべて受けた対象の割合によって定義した場合、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥでの免疫化は、１００％実行可能であることが確認された。Ｐ１０ｓに対する抗体応答の評価は、５００μｇ用量が、３００μｇ用量よりも高い抗Ｐ１０ｓ ＩｇＧ力価をもたらし得るが、小さいコホートサイズ及びランダム化の欠如が、用量効果についてのより確固とした結論を不可能にしていることを示唆している。力価分析はさらに、７週目から持続するＩｇＧ力価で、有効な免疫応答をもたらすために、わずか３回の免疫化で十分であることを示唆している。さらに、５００μｇ用量では対象において毒性は見られなかったが、より高い用量では、過剰なアジュバントに関連する皮膚反応について懸念が存在するので、将来の研究では、１回の注射当たり、５００μｇを推奨することが賢明と考えられる。
上記６人の対象のうちの５人からのＰ１０ｓ−生成抗体は、標準的な全身療法に対する重大な耐性を代表すると考えられる２種のヒト乳癌細胞系に対して細胞毒性であることが判明した。正常な上皮細胞系ＭＣＦ１０Ａでは、細胞毒性は観察されず、これは、生成抗体の、癌細胞に対する特異性を示している。β１，６−分岐の増大、及び細胞表面上でのそれらのクラスター化を含むＴＡＣＡ発現の増大が、腫瘍細胞を正常細胞から区別している。正常な組織とは異なり、通常観察される癌腫細胞のＮ−連結及びＯ−連結グリカンの発現プロファイルは、不十分な予後と関連している。マウス研究における免疫病理の欠如及びＭＣ−Ｆ１０Ａ細胞に対する非細胞毒性効果から証拠づけられるとおり、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥをワクチン接種されたヒトからの誘発抗体は、この示差発現を識別する（Ｍｏｎｚａｖｉ−Ｋａｒｂａｓｓｉ， Ｂ．ら（２００７）前出；Ｈｅｎｎｉｎｇｓ， Ｌ．ら（２０１１）前出）。
腫瘍細胞死をもたらす免疫応答の誘発は、癌−細胞伝播を標的とする免疫療法において有用である。加えて、ＴＡＣＡ発現プロファイルに関連したシグナル伝達機構を妨害する免疫応答の誘発は、腫瘍の成長を停止させ、転移の発生を予防し得る。さらに、抗糖鎖抗体は、細胞増殖抑制性または細胞毒性である免疫−サーベイランス機構の一部であることが仮定される（Ｖｏｌｌｍｅｒｓ， ＨＰ及びＳ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ、Ｎａｔｕｒａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ ｃａｎｃｅｒ．、Ｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ２５、２９４〜２９８．、Ｅｐｕｂ ２００９ Ａｐｒ ２０１１． （２００９））。したがって、免疫応答の誘発は、悪性疾患の経過及び長期の患者の生存に対して有益効果を有し得る。
血清及び血漿中のＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ誘発抗体は、治療耐性の極値を表すヒト乳癌細胞系と反応し、それに対して細胞毒性である。ＺＲ−７５−１細胞も、毒性に対して感受性であったが、ＭＣＦ−７細胞は、カスパーゼ−３経路を含み得る機構を示していなかった。血清中の抗ＴＡＣＡ抗体は、ポリクローナルであり、ｉｎ ｖｉｔｒｏで細胞毒性効果を発揮することが示された。抗ＴＡＣＡ抗体は、腫瘍細胞に対する免疫系の効果を増強し得る。さらに、抗ＴＡＣＡ抗体は、組合せ細胞毒性薬物または放射線療法のより有効な活性のために、例えば、病巣接着−キナーゼ経路などのシグナル伝達経路を中断することによって、腫瘍細胞を増感させ得る。
実施例５
ミモトープをベースとする免疫療法後の乳癌患者の臨床応答
次の開示は、第Ｉ相臨床試験に参加し、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン製剤をワクチン接種された転移性ＨＥＲ２＋乳癌の患者による治療に対する稀な疾患経過及び応答に関する。
方法及び結果
上記患者は、常套的なマンモグラムが左***上に石灰化の疑いを示し、コア生検によって侵襲性腺管癌と確認された４５歳で、乳癌と初めに診断された。
０時点で、上記患者は、前哨リンパ節生検（ＳＬＮＢ）を伴う両側皮膚温存***切除術を、続いて、両側生理食塩水移植再建を施された。最終病態は、右***には癌を示さず、左***にはグレードＩＩＩで、リンパ管浸潤のある４ｃｍの侵襲性腺管癌を示した。断端は陰性であった。エストロゲン受容体（ＥＲ）は弱陽性であり、プロゲステロン受容体（ＰＲ）は陰性であった。ＨＥＲ２を、ＦＩＳＨによって増幅した。左ＳＬＮＢは陰性であった。ＰＥＴスキャンは、全身転位については陰性であったが、傍気管、傍食道、及び肺門リンパ節は顕著であった。これらは、転移性疾患に関連しないが、その領域に石灰化リンパ節が存在するためであると考えられた。
２カ月目の時点で（０時点から２カ月後）、上記患者は、２週毎で４サイクルにわたる投与集中アドリアマイシン／シクロフォスファミド（６０／６００ｍｇ／ｍ2、続く、２週毎で４サイクルにわたるパクリタキセル（１７５ｍｇ／ｍ2）でのアジュバント化学療法を開始した。週１回のトラスツズマブ治療が、パクリタキセルと同時に開始され、これは合計１年間にわたって継続した。上記患者はまた、上記化学療法の完了後に、トラスツズマブを受けながら、タモキシフェンで治療された。肥大リンパ節をチェックするために、年１回のＰＥＴスキャンが行われ、完全な退縮が示された。
３４か月時点で、上記患者は、インプラントに近い左胸壁上に１ｃｍの腫瘤を伴う局所再発を有した。これは、陰性断端まで切除された。その腫瘤は、ＥＲ陽性、ＰＲ陰性、及びＨＥＲ２陽性で、ＣＥＰ１７／ＨＥＲ２比は１５であった。上記患者は、その領域への放射線療法で治療された。病期分類スキャンによって、転移性疾患の証拠は示されなかった。
５２か月時点で、ＰＥＴスキャンによって、両方の野に散乱する新たな小さい肺小結節及び生検陽性左胸筋下リンパ節が示された。上記患者は、ビノレルビン及びトラスツズマブ（ＶＴ）で治療され、その後のＰＥＴスキャンによって、肺における部分的な応答、胸筋下リンパ節の完全な消失が示された。その時点で、その疾患が安定していると判断されたので、上記患者に、上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン試験への参加が提案された。上記患者は評価を受け、上記ワクチン研究への参加に適格であると考えられた。
５８カ月時点で、上記患者は、ＶＴの標準的な治療を継続しながら、その初回のワクチン３００ｍｃｇの皮下注射、続いて、プロトコルに従って８、１５、４３、及び１２６日目に同様の用量を投与された。
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンに対する免疫応答
上記患者は、Ｐ１０ｓ多重抗原ペプチド（ＭＡＰ）に対して免疫応答を生じた。免疫化後に、ＭＡＰペプチドに結合するＩｇＭ及びＩｇＧの両方の増大が、ＥＬＩＳＡアッセイによって観察された（図１３）。抗ペプチドＩｇＭ及びＩｇＧは両方とも、研究の７週目にピークとなった。ＩｇＭは、短命で、１９週目までに基線に戻ったが、上記ＩｇＧ部分の活性は高いままであった。
ＨＣＣ１９５４細胞系に結合したＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン誘発血清（図１４Ａ）及び７週目に収集された免疫化後血清とのＨＣＣ１９５４細胞のインキュベーションは、細胞死の有意な刺激をもたらした（図１４Ｂ）。免疫化前血清とのＨＣＣ１９５４細胞のインキュベーションは、免疫化前血清が、対応する細胞毒性効果を有しないことを示した。
Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン誘発血清はまた、ＨＣＣ１９５４細胞の遊走を阻害した（図１５）。後で、血漿を結合において試験すると、非常に似た反応性パターンが観察された。免疫化後血漿は、ＨＣＣ１９５４及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞系の両方に対して細胞毒性であった（図８Ａ及び８Ｂの対象３についてのデータを参照されたい）。別の実験では、血清との終夜インキュベーションの後に、生細胞を採取し、アネキシン発現を検出することによって、アポトーシスの誘導を検査した。結果は、上記抗Ｐ１０ｓ血清が、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞においてアポトーシスを誘発したことを示している（図１６）。攻撃性三種陰性ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及び新規のトラスツズマブ耐性ＨＣＣ１９５４細胞系に対する血清及び血漿の結合及び細胞毒性効果は、このワクチンについて、明らかに臨床上有望である。特に、ＨＣＣ１９５４に対して観察された細胞毒性は、試験された患者でプラスの結果の可能性を示唆している。さらに、研究は、誘発された抗体が、腫瘍細胞をドセタキセル治療に対して増感させ得たことを示唆した（図９）。
患者の臨床状態
肺転移の退縮。注射部位での硬変を伴う局所反応以外に、上記ワクチンは、何ら副作用を示さなかった。ワクチン接種の開始後に、連続ＰＥＴスキャンは、初めは、それらのサイズまたは数の増大を伴うことなく、既に既知の肺転移におけるフルオロデオキシグルコース（ＦＤＧ）活性の上昇を示し、次いで、その全身治療が同じままである間に、ＦＤＧ活性の低下を示した。
脳病変。６６カ月時点で、その女性は、左腕の衰弱及び運動失調を訴えた。脳のＭＲＩによって、脳実質中に３個の十分に画定される複雑な嚢胞性腫瘤が示され、その際、その周囲に、血管原性浮腫はなかった。６８カ月時点で、その女性は、左小脳半球病変を切除するための左後頭下開頭術、及び左下側頭骨病変を切除するための左前頭側頭骨開頭術、続いて、嚢胞性病変への分割定位的放射線療法、続いて、全脳放射線療法を施された。
上記脳病変の切除部からの標本は、主に表在する皮質断片を示し、散乱した白質断片を伴った。両方の標本部分で行ったサイトケラチン（ＡＥ１／ＡＥ３）及びＣＡＭ５．２免疫組織化学は、上皮細胞について陰性である。両方の標本部分で得られた多数の追加の切片（レベル×３）は、他の所見を示さなかった。散乱したＣＤ３＋Ｔ−細胞は主に、実質中に存在する血管腔及び出血領域と関連しているが、その重要性は明瞭ではなかったものの、重大な炎症性／感染性プロセスを示していなかった可能性がある。血管中に時々あるものを除いて、ＣＤ２０＋細胞は観察されなかった。カッパ及びラムダ軽鎖は、高い背景を有するが、おそらく通常予測されるように、血漿と関連しているらしく、血管においてより強い染色が存在したようである。ＣＤ２０＋細胞が実質的に存在しないことと合わせて、細胞の染色は、実質中で識別されなかった。任意のおそらくはナチュラルキラー細胞集団を識別するために、ＣＤ５６を試験したところ、神経組織において拡散して陽性であり、解釈が非常に困難となったが、この抗体に陽性である重要な細胞は同定されなかった。加えて、この新たな情報をかんがみて、スライドを再調査した後に、炎症性、感染性、または反応性変化は識別されなかった。具体的には、ウイルスの封入、小グリア細胞の増殖、または小結節、マクロファージ、反応性星状細胞、または壊死細胞は同定されなかった。したがって、所見は、Ｘ線診断によって表されたこれらの嚢胞性病変の性質を説明しなかった。
その女性の神経学的欠損は、大部分について回復したが、その女性にはまだ、左腕の協調運動の多少の不足、及び喚語困難があった。その他では、その女性は、フルタイムで職場に戻ることができ、その女性の最新のＭＲＩは、その女性の病変サイズの継続した減少を示した。その女性は、肺における疾患の進行により、７０か月時点で、ドセタキセル、ペルツズマブ、及びトラスツズマブに切り替えられた。７６か月時点でのその女性のＰＥＴスキャンは、肺及びリンパ節における完全な応答を示した。
考察
誘発された免疫応答は、他の療法による腫瘍細胞死に対しては耐性である腫瘍細胞での腫瘍細胞死を含む腫瘍細胞死をもたらし得る。腫瘍細胞死に対する耐性は、治療が失敗する重大な原因であり、再発及び転移性疾患の源となり得る。
上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンを、ＴＡＣＡに対する応答を誘発する広域スペクトル免疫原として開発した。上記ワクチンは、そのワクチンで免疫化された対象においてＰ１０ｓに対する抗体を誘発することが示されており、誘発された抗体は、不同性の代表的なヒト乳癌細胞系に結合して、遊走を阻害し、細胞毒性を媒介する。
上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチン研究の参加者には、稀な疾患経過を示した参加者がいた。その女性が上記ワクチンを投与されてから１４週間後に、そのＰＥＴスキャンは、そのサイズを増大させることなく肺病変での取り込みの増大を示した。この後、６ヶ月後に、その女性が複数の脳病変を有すると診断された時には、その肺病変は改善した。肺病変をターゲティングし、かつ抗Ｐ１０力価の上昇と同時に起こる炎症応答が、その領域におけるＰＥＴスキャンでの取り込みの上昇の原因となり得ている。
抗Ｐ１０ＩｇＭ及びＩｇＧ抗体力価は、ワクチン接種後７週目にピークとなり、ＩｇＧについては高いままであったが、ＩｇＭ力価は、１９週目にはその基線に低下した。脳病変を有すると診断された時、その女性の肺転移は、その基線に戻っていた。脳病変の２つの切除物は、癌の証拠を示さなかった。第３の病変は小さく、より充実性であり、ガンマナイフによって治療された。その時のその女性の肺病変の変化は、そのサイズが変化していなかったので、進行と一致しないと解釈された。上記脳病変は、悪性疾患の何らかの証拠も示さず、炎症の証拠も示さなかった。上記研究における他の対象をすべて、脳のＭＲＩで評価したが、いずれも、同様の病変を示さなかった。
上記ＩｇＧ抗体などの、上記Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンによって誘発された免疫応答は、ドセタキセル及び／またはペルツズマブ及び／またはトラスツズマブに対する感受性を増大させることによって、ドセタキセル、ペルツズマブ、及びトラスツズマブ（ＤＰＴ）療法のより有効な活性のために腫瘍細胞を増感させ得る。ＤＰＴ活性は、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）経路のリン酸化状態に感受性であることが公知である。Ｐ１０ｓ反応性抗体は、タキサン感受性及びタキサン耐性細胞系の両方においてドセタキセルのｉｎ ｖｉｔｒｏ有効性を促進することが公知のＦＡＫサイレンシングに寄与し得、かつ新規の治療手法として役立ち得る。同じことが、ペルツズマブ及びトラスツズマブについて観察されている。有効な治療には、Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥワクチンまたはＰ１０ｓ−ＰＡＤＲＥによって誘発された抗体と、ドセタキセル及び／またはペルツズマブ及び／またはトラスツズマブ及び／または接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）経路のリン酸化状態に感受性であるものなどの他の薬物との組合せが含まれ得る。

Claims (9)

  1. 乳癌を有すると診断されているヒトの前記乳癌の治療のための、ＣＤ４+ヘルパーＴ細胞エピトープに連結したＰ１０ｓ（配列番号１）またはその変異体である化合物Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥ、およびＭＯＮＴＡＮＩＤＥ（商標）ＩＳＡ５１ＶＧアジュバントを含む、医薬組成物であって、ここで、前記乳癌は、三重陰性乳癌またはＨＥＲ２陽性乳癌であり、前記化合物は、構造：Ｔｒｐ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−ｄＡｌａ−Ｌｙｓ−ＣＨＡｌａ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ａｌａ−ｄＡｌａ−ＮＨ2（ここで、Ａｌａ１３及びＡｌａ２５は、それぞれ、ｄＡｌａとして示されるＤ型アミノ酸であり、１５位にあるＡｌａは、ＣＨＡｌａとして示される改変Ｌ配置アラニン、シクロヘキシルアラニンである）を有する、前記医薬組成物。
  2. Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを少なくとも３００μｇ含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  3. Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを少なくとも５００μｇ含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  4. Ｐ１０ｓ−ＰＡＤＲＥを少なくとも１０００μｇ含む、請求項１に記載の医薬組成物。
  5. 治療は医薬組成物をヒトに投与すること、そしてさらに１種または複数種の抗癌化学療法薬、抗癌放射性薬、及び／または抗癌放射線療法で前記ヒトを治療することを含む、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
  6. 治療は医薬組成物をヒトに投与すること、そしてさらにドキソルビシン、シクロフォスファミド、ドセタキセル、シスプラチン、ビノレルビン、ボルテゾミブ、アドリアマイシン、トラスツズマブ、パクリタキセル、タモキシフェン、及びペルツズマブからなる群から選択される１種または複数種の抗癌化学療法薬で前記ヒトを治療することを含む、請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
  7. 以下の：
    請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物で免疫化されたヒトから得られた単離ヒト
    ＮＫ細胞、及びその後代からなる群から選択される単離ヒトＮＫ細胞；
    ナイーブなヒトから得られ、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物でｅｘ ｖｉｖｏで活性化された単離ヒトＮＫ細胞、及びその後代からなる群から選択される単離ヒトＮＫ細胞；
    請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物で免疫化されたヒトから得られた単離ヒト樹状細胞、及びその後代からなる群から選択される単離ヒト樹状細胞；または
    ナイーブなヒトから得られ、請求項１〜６のいずれかに記載の医薬組成物でｅｘ ｖｉｖｏで活性化された単離ヒト樹状細胞、及びその後代からなる群から選択される単離ヒト樹状細胞；
    を含む細胞組成物の、乳癌を有すると診断されているヒトの前記乳癌の治療用の医薬の製造のための使用であって、ここで、前記乳癌は、三重陰性乳癌またはＨＥＲ２陽性乳癌である、前記使用。
  8. 前記治療がさらに、１種または複数種の抗癌化学療法薬、抗癌放射性薬、及び／または抗癌放射線療法で前記ヒトを処置することを含む、請求項７に記載の使用。
  9. 前記治療がさらに、ドキソルビシン、シクロフォスファミド、ドセタキセル、シスプラチン、ビノレルビン、ボルテゾミブ、アドリアマイシン、トラスツズマブ、パクリタキセル、タモキシフェン、及びペルツズマブからなる群から選択される１種または複数種の抗癌化学療法薬で前記ヒトを処置することを含む、請求項７または８に記載の使用。
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