JP6563175B2 - Vegf産生促進剤、育毛及び/又は発毛促進剤 - Google Patents
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Description
本発明のVEGF産生促進剤及び育毛及び/又は発毛促進剤に用いるアロエエキスを調製するためのアロエは、優れたVEGF産生促進作用、育毛促進作用及び/又は発毛促進作用を有することに加え、効果安全性、栽培の容易さ、又は日本薬局方でアロエとして使用が認められているという理由から、アロエ・エルー(学名:Aloe eru)、アロエ・カメロニー(又はアロエ・カメロン)(学名:Aloe cameronii)、アロエ・ケドンゲンシス(学名:Aloe kedongensis)、アロエ・フェロックス(学名:Aloe ferox)、アロエ・アフリカーナ(学名:Aloe africana)、アロエ・アンドンゲンシス(学名:Aloe andongensis)及びアロエ・トーメントーサ(学名:Aloe tomentosa)、並びにキダチアロエ(学名:Aloe arborescens)とアロエベラ(学名:Aloe vera)との交配種からなる群より選択される少なくとも1種である。
本発明の有効成分であるアロエエキスの原料には、アロエ植物の全体をそのまま使用しても良い。またアロエの葉の外皮を使用しても良く、葉内部のゼリー質を使用しても良い。調製が容易という理由から、アロエ植物の全体を使用して、アロエエキスを調製することが好ましい。
本発明のVEGF(血管内皮増殖因子、vascular endothelial growth factor)産生促進剤は、前記アロエエキスを有効成分として含有するものである。
アロエエキスのVEGF産生促進作用は、ヒト頭髪毛乳頭細胞(HFDPC)等の哺乳類の毛乳頭細胞を使用して、評価することができる。
以下の手順で、毛乳頭細胞によって培養液中に分泌されたVEGFをELISAにより測定する。
前記アロエエキスによれば、VEGF産生量が高められる結果、血管新生が促され、毛細血管の生成も高められるので、育毛効果及び発毛効果を発揮することが出来る。
アロエエキスの育毛及び発毛促進作用は、直接的には、マウス等の哺乳類を用いた発毛試験により、評価することができる。また、間接的には、線虫寿命延長作用に基づいて評価することも出来る。その測定方法については、実施例に記載する。
以下の手順で、マウスの皮膚に対する育毛及び発毛促進効果を評価する。
前記アロエエキスによれば、後述の線虫寿命延長試験により、細胞の寿命に対する延長作用を示すことが明らかとなった。
(1)アロエエキスの調製
各種アロエ(生の植物体として1kg)を細かく刻んだ後に乾燥し、その乾燥物全量(30〜70g)に、8倍量のエタノール水溶液(90重量%エタノール)を加えて50℃で5時間攪拌し、ろ過、濃縮、凍結乾燥の工程を経てエキス(抽出物)を得た(表1)。
1.毛乳頭細胞が産生したVEGF量の測定
上記調製した各サンプルのVEGF産生量を、ヒト頭髪毛乳頭細胞(HFDPC)(東洋紡績株式会社製)を使用して、評価した。
以下の手順で、毛乳頭細胞からtotal RNAを抽出し、FGF-7の遺伝子発現解析を行った。
更に、以下の手順で、5-α-リダクターゼの活性測定を行った。
毛乳頭細胞が産生したVEGF量及びFGF-7の遺伝子発現量について、下記の基準に従って評価した。
○:陰性対照に対して20%以上向上
△:陰性対照に対して10%以上向上
×:陰性対照に対して数値の向上が10%未満
また、5-α-リダクターゼ活性阻害効果について、下記の基準に従って評価した。
○:20%以上阻害
△:10%以上阻害
×:阻害効果が10%未満
被検サンプルの試験結果を下記表4に示した。
(1)アロエエキスの調製
アロエ植物体として、アロエ・エルー、アロエ・ケドンゲンシス、アロエ・トーメントーサ、及びキダチアロエとアロエベラとの交配種を用いて、上記実験例1と同様にして、アロエエキス(抽出溶媒:90重量%エタノール水溶液)を調製した。
以下の手順で、マウスの皮膚に対する育毛及び発毛促進効果を評価した。
陰性対照、アロエ・エルー、アロエ・ケドンゲンシス及びアロエ・トーメントーサ、並びにキダチアロエとアロエベラとの交配種の11日目の毛再生スコアの平均値に基づき、各アロエエキスの育毛及び発毛促進効果を、陰性対照を100%とした育毛・発毛率で表8に示した。
また、アロエ・トーメントーサは、試験期間中のいずれにおいても、キダチアロエを上回る良好な育毛・発毛率を示した。更に、陰性対照、キダチアロエ及びアロエ・トーメントーサの19日目における育毛及び発毛促進効果を図1に示す。図1からも分かるように、アロエ・トーメントーサは、キダチアロエに比べて非常に優れた育毛及び発毛促進効果を示した。
線虫寿命延長試験は、細胞の寿命に対する延長作用を評価するために利用されている。ここでは、線虫寿命延長試験を用いて、アロエエキスの細胞(毛乳頭細胞)の寿命に対する延長作用を評価した。
以下の手順で、線虫(Caenorhabditis elegans)を用いて、毛乳頭細胞の寿命の延長効果を評価した。
1.同一生育ステージの線虫を得るため、産卵期にある成虫から卵を回収した。具体的には、卵を抱えた線虫をS-bufferで回収し、漂白剤及びNaOH溶液を用いて成虫を溶解することにより卵のみを得た。
2.卵はS-bufferに入れ、20℃で一晩かけて孵化させた。
3.生育ステージを合わせたL1期幼虫を、大腸菌を加えたS-mediumに移した。線虫2,000匹を液体培地10mLに加え、50mLの三角フラスコで3日間培養し、成虫とした。
4. アンピシリン20μl(Final 200μg/ml)と陰性対照(0.25%重量エタノール,被験物質の溶媒)若しくは被験物質(アロエエキス)を入れ培養した。
5.線虫寿命の測定は2〜3日に一度、一定量をサンプリングしてその中の線虫の生死数をカウントした。線虫の生死数カウントは4回行い、統計処理に用いた。線虫の生存率については、以下の式(1)にしたがって算出した。
キダチアロエ(従来種、比較例)及びアロエ・トーメントーサの線虫寿命延長試験を実施した。
以下の手順で、アロエエキスの安定性を評価した。
キダチアロエ(従来種、比較例)及びアロエ・ケドンゲンシスの90%EtOH水溶液中の安定性の試験の結果を示した。
以下、本発明に係る育毛及び/又は発毛剤原料を配合した、育毛及び/又は発毛剤組成物の処方例を表12〜16に示す。いずれの組成物においても、優れた育毛及び発毛促進効果が示された。
Claims (5)
- アロエ・エルー、アロエ・カメロニー、アロエ・ケドンゲンシス、アロエ・アンドンゲンシス及びアロエ・トーメントーサ、並びにキダチアロエとアロエベラとの交配種からなる群より選択される少なくとも1種のアロエ植物体から抽出されたアロエエキスを有効成分とする、毛乳頭細胞のVEGF産生促進剤。
- 前記アロエエキスが、前記アロエ植物体の水、エタノール及び1,3−ブチレングリコールよりなる群から選ばれる少なくとも1種の抽出溶媒で抽出されたものである、請求項1に記載のVEGF産生促進剤。
- アロエ・エルー、アロエ・カメロニー、アロエ・ケドンゲンシス、アロエ・アンドンゲンシス及びアロエ・トーメントーサ、並びにキダチアロエとアロエベラとの交配種からなる群より選択される少なくとも1種のアロエ植物体から抽出されたアロエエキスを有効成分とする育毛及び/又は発毛促進剤。
- アロエエキスが、アロエ・エルー、アロエ・ケドンゲンシス及びアロエ・トーメントーサ、並びにキダチアロエとアロエベラとの交配種からなる群より選択される少なくとも1種のアロエ植物体から抽出されたアロエエキスである、請求項3に記載の育毛及び/又は発毛促進剤。
- 前記アロエエキスが、前記アロエ植物体の水、エタノール及び1,3-ブチレングリコールよりなる群から選ばれる少なくとも1種の抽出溶媒で抽出されたものである、請求項3又は4に記載の育毛及び/又は発毛促進剤。
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