JP6440966B2 - グルコース製造方法 - Google Patents
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Description
実施例1においては、生物の唾液としてウシの唾液を用いてグルコースの生成を行った。
実施例2においては、生物唾液由来の活性助剤としてウシ唾液から有機化合物を抽出した活性助剤溶液を用いてグルコースの生成を行った。
実施例3においては、生物の唾液としてロバの唾液を用いてグルコースの生成を行った。なお、比較として、同じ条件にてウシの唾液を用いたグルコースの生成も行った。
実施例4においては、ウシ唾液の濃度とグルコースの収集量の関係を検討するべく、ウシ唾液の原液を100%とした0〜10%の濃度のウシ唾液についてグルコースの生成を行った。
実施例5においては、インキュベーション時間とグルコースの収集量との関係を検討するべく、インキュベーション時間を0〜72時間の間で変化させてグルコースの生成を行った。
実施例6においては、水溶性のセルロース原料に対して、本発明のグルコース製造方法を適用した場合のグルコースの生成量を検討するべく、セルロース原料としてカルボキシメチルセルロース(CMC、ナカライテクス社製)を用いてグルコースの生成を行った。
実施例7においては、ウシ唾液の具体的な作用効果について説明する。なお、本発明者等は予備的な実験として、ウシ唾液のセルロース原料の結晶形への影響を検討したところ、ウシ唾液はセルロース原料の結晶形には影響を与えないことが明らかとなった。さらに、ウシ唾液の静的表面張力を測定して、ウシ唾液が界面活性作用を有していることが明らかとなった。
実施例8においては、生物唾液由来の活性助剤の特性をより詳細に検討するべく、ウシ唾液の変性および分子量分画を行ったものを活性助剤溶液として用いグルコースの生成を行った。
実施例9においては、生物唾液由来の活性助剤の成分を特定するべく、ウシ唾液に対してゲル濾過クロマトグラフィーによる分子サイズ分画を行ったものを活性助剤溶液として用いグルコースの生成を行った。
試料:ウシ唾液
試料注入量:4mL
カラム:HiLoad 16/600 Superdex 200 prep grade(GE Healthcare社製)
溶離液:150mM塩化ナトリウム水溶液
流速:1mL/min
溶出液分取:5mL×24本(Fraction No.1〜24)
なお、以降、分取した24本の溶出液は、それぞれFraction No.1〜24と称する。
基質:2wt%基質/100mM酢酸ナトリウム緩衝液(pH=4.0)
セルロース分解酵素:100μg/mLのCellulase from Trichderma Viride(SigmaAldrih社製)
唾液溶液:40μg/mL
溶出希釈液:タンパク質濃度40μg/mLのサンプルA〜EおよびサンプルMix
S2 酵素分解工程
S3 グルコース精製工程
C セルロース原料
Claims (3)
- セルロースを、セルロース分解酵素と、反芻を行う動物またはロバの唾液または3kD以上のタンパク質含有画分からなる生物唾液由来の活性助剤との混合物を用いて分解することを特徴とするグルコース製造方法。
- 前記生物唾液由来の活性助剤が、反芻を行う動物の唾液から抽出されてなることを特徴とする請求項1に記載のグルコース製造方法。
- 前記反芻を行う動物の唾液が、ウシ、ラクダ、ヒツジ、ヤギの唾液であることを特徴とする請求項1または請求項2に記載のグルコース製造方法。
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