JP6437291B2 - メイラード反応阻害剤 - Google Patents

Description

本発明は、メイラード反応を阻害し、皮膚のハリ及びツヤを維持し、さらには糖尿病、アルツハイマー病、動脈硬化症等に有効な製剤に関する。

皮膚の老化は、様々な要因が複雑に作用して起こるが、近年、皮膚の老化の中でも、とりわけ、自然老化に対し、メイラード（Ｍａｉｌｌａｒｄ）反応が深く関与していることが報告されている。
メイラード反応とは、アミノ酸、ペプチド、タンパク質などが有するアミノ基と、ケトン、アルデヒド又は還元糖が複雑な反応を経て、ＡＧＥｓ（終末糖化産物：Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｇｌｙｃａｔｉｏｎ Ｅｎｄ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）とよばれる物質が体内でも生成されることが確認されている。（非特許文献１及び２参照）。
皮膚の主要構成成分であるタンパク質及び皮膚コラーゲンに対して、メイラード反応が引き起こされると、皮膚の弾力性の低下やくすみの原因となることが知られている。また、加齢に伴うコラーゲンの変性は、皮膚のハリ及びツヤが消失する一因であることが報告されている。したがって、皮膚においてメイラード反応を阻害することにより、皮膚のタンパク質やコラーゲンを保護し、皮膚のハリ及びツヤが維持されることが期待できる。

また、生体内タンパク質中のＡＧＥｓの増加は健常者の老化によっても見られる現象であるが、糖尿病、アルツハイマー病、動脈硬化症患者等においては、その増加の度合いが高いことが知られている。ＡＧＥｓはタンパク質分子内および分子間に無秩序な架橋を作って物理的、生理的変化（変性）を起こすことから、ＡＧＥｓがこれらの疾患や、それに伴う合併症の直接的な原因となることが明らかにされつつある。
ＡＧＥｓの生成を阻害するメイラード反応阻害剤は、これらの疾患や症状の治療薬や予防薬となる可能性が高いため、既に、メイラード反応阻害剤であるアミノグアニジンが糖尿病合併症予防薬として（非特許文献３）、ＡＬＴ−７１１が老化疾患治療薬として（非特許文献４）臨床試験に供されている。
また、メイラード反応阻害作用を有する植物の抽出物として、例えば、カルカデ、ハイビスカス、シャゼンシ、トウニン、マロニエ、ケイシ、ゴミシ、シコン、センナ、トシシ、及びビャッキュウから選択される抽出物（特許文献１参照）、イチイヨウの抽出物、キンオウシの抽出物、又はモクテンリョウの抽出物（特許文献２参照）、鳳凰木の抽出物（特許文献３参照）、パパイヤの抽出物（特許文献４参照）、シモニロの抽出物（特許文献５参照）、などが提案されている。

しかしながら、現在までのところ、優れたメイラード反応阻害作用を有し、入手が容易で安価であり、安全性の高い天然物系のものであって、広く使用可能なメイラード反応阻害剤及び老化改善剤は未だ十分には提供されておらず、その速やかな提供が強く求められているのが現状である。

特開平１１−１０６３３６号公報 特許第３６９５４７２号公報 特開２００９−６７７４７号公報 特開２００６−２９８８１２号公報 特開２００６−２１９４４７号公報

Ｚ．Ｅｒｎａｅｈｒｕｎｇｓｗｉｓｓ、Ｖｏｌ．３０、ｐ２９−４５ Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｖｏｌ．２１１、Ｎｏ．４４８１、ｐ４９１−４９３、１９８１ Ａｍ Ｊ Ｎｅｐｈｒｏｌ．２００４、２４、３２−４０ Ｊ Ｃａｒｄ Ｆａｉｌ．２００５、１１（３）、１９１−１９５

本発明の目的はメイラード反応を阻害し、皮膚のハリ及びツヤを維持し、さらには糖尿病、アルツハイマー病、動脈硬化症等に有効な製剤を得ることにある。

本発明者らが鋭意検討した結果、グリチルリチン酸及びその塩および/またはインドセンダンの葉の抽出物が上記目的を達することがわかった。

インドセンダン（Melia azadirachta 異名Azadirachta indica）はセンダン科の植物で、インド、スリランカ、ミャンマーの温帯各地に分布する。この樹皮は熱、嘔吐、渇きなどに用いられる。。英名の「ニーム」で知られ、インドのアーユルベーダー（インドの伝承医学）には欠かせない 神秘の薬として古くから珍重されている。
抽出は効率を考え、細切、乾燥、粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。
乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。
前記抽出に用いる溶媒としては、水若しくは親水性有機溶媒又はこれらの混合液を用いる。
前記抽出溶媒として使用し得る水としては、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
前記親水性有機溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコールなどが挙げられ、これら親水性有機溶媒と水との混合溶媒などを用いることができる。

なお、前記水と親水性有機溶媒との混合溶媒を使用する場合には、低級アルコールの場合は水１０質量部に対して１〜２０質量部、低級脂肪族ケトンの場合は水１０質量部に対して１〜１５質量部添加することが好ましい。多価アルコールの場合は水１０質量部に対して１〜２０質量部添加することが好ましい。
抽出に使用する有機溶媒の量は、原料となる植物（海藻）に対して望ましくは５〜１００倍量程度、さらに望ましくは１０〜５０倍量程度が良い。さらに抽出効率を上げるため、抽出溶媒中で撹拌やホモジナイズしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。
尚、抽出操作は１回のみの操作に限定されるものではない。抽出後の残渣に再度新鮮な溶媒を添加し、抽出操作を施すこともできるし、抽出溶媒を複数回抽出原料に接触させることも可能である。
必要ならば、その効果に影響のない範囲で更に脱臭、脱色等の精製処理を加えても良く、エバポレーターのような減圧濃縮装置や加熱による溶媒除去などにより、濃縮することができる。
また、この抽出物を合成吸着剤（ダイアイオンＨＰ２０やセファビースＳＰ８２５、アンバーライトＸＡＤ４、ＭＣＩｇｅｌＣＨＰ２０Ｐ等）やデキストラン樹脂（セファデックスＬＨ−２０など）、限外濾過等を用いてさらに精製することも可能である。

グリチルリチン酸は甘草の根に含まれる成分で、砂糖の３０〜５０倍の甘みがあるトリテルペン配糖体である。一般的によく利用されているのはジカリウム塩である。

本発明の製剤は、経口、注射、外用のいずれでも薬効を発現するが、皮膚外用剤として用いるのが好ましい。皮膚外用剤には、皮膚化粧料、外用医薬部外品、医療用皮膚外用剤が含まれる。
また、本発明の製剤には、上記成分の他に医薬品や化粧品の各種製剤において使用されている界面活性剤、油性成分、保湿剤、高分子化合物、紫外線吸収剤、抗炎症剤、殺菌剤、酸化防止剤、金属イオン封鎖剤、防腐剤、ビタミン類、色素、香料、水等を配合することができる。

上記界面活性剤としては、アニオン性、カチオン性、非イオン性、天然、合成のいずれの界面活性剤も使用できるが、皮膚に対する刺激性を考慮すると非イオン性のものを使用することが好ましい。非イオン性界面活性剤としては、例えばグリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、アルキルグリコシド等が挙げられる。

油性成分としては、油脂類、ロウ類、炭化水素類、高級脂肪酸類、高級アルコール類、エステル類、精油類、シリコーン油類などを挙げることができる。油脂類としては、例えば大豆油、ヌカ油、ホホバ油、アボガド油、アーモンド油、オリーブ油、カカオ油、ゴマ油、パーシック油、ヒマシ油、ヤシ油、ミンク油、牛脂、豚脂等の天然油脂、これらの天然油脂を水素添加して得られる硬化油及びミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド等の合成トリグリセリド等が；ロウ類としては、例えばカルナバロウ、鯨ロウ、ミツロウ、ラノリン等が；炭化水素類としては、例えば流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、ブリスタン等が；高級脂肪酸類としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ラノリン酸、イソステアリン酸等が；高級アルコール類としては、例えばラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、２−ヘキシルデカノール等が；エステル類としては、例えばオクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、アジピン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル等が；精油類としては、例えばハッカ油、ジャスミン油、ショウ脳油、ヒノキ油、トウヒ油、リュウ油、テレピン油、ケイ皮油、ベルガモット油、ミカン油、ショウブ油、パイン油、ラベンダー油、ベイ油、クローブ油、ヒバ油、バラ油、ユーカリ油、レモン油、タイム油、ペパーミント油、ローズ油、セージ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ボルネオール、リナロール、ゲラニオール、カンファー、チモール、スピラントール、ピネン、リモネン、テルペン系化合物等が；シリコーン油類としては、例えばジメチルポリシロキサン等が挙げられる。これら上述の油性成分は一種又は二種以上を組み合わせて使用することができる。本発明においては、このうち特にミリスチン酸グリセリド、２−エチルヘキサン酸トリグリセリド、ラノリン、流動パラフィン、ワセリン、パラフィンマイクロクリスタリンワックス、スクワラン、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、リノール酸、リノレン酸、イソステアリン酸、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、コレステロール、オクタン酸セチル、オクタン酸トリグリセライド、ミリスチレン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸コレステロール、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ハッカ油、トウヒ油、ケイ皮油、ローズ油、メントール、シネオール、オイゲノール、シトラール、シトロネラール、ゲラニオール、ピネン、リモネン、ジメチルポリシロキサンを使用することが好ましい。

本発明の製剤には、さらに下記のような成分を配合することができるが、その成分もこれらに限定されるものではない。
色素類；黄色４号、青色１号、黄色２０２号等の厚生省令に定められたタール色素別表Ｉ及びIIの色素、クロロフィル、リボフラビン、クロシン、紅花、アントラキノン等の食品添加物として認められている天然色素等。
ビタミン類；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ等。
その他；殺菌剤、防腐剤、その他製剤上必要な成分等。

本発明の製剤は、前記必須成分に必要に応じて前記任意成分を加え、常法に従って製造することができ、クリーム、乳液、化粧水等の形態とすることができる。
配合量はグリチルリチン酸ジカリウムは０．０００１〜５重量％、好ましくは０．００１〜２．０重量％、インドセンダンの葉の抽出物は固形物として、０．００００１〜１．０重量％、好ましくは０．０００１〜０．５重量％である。

メイラード反応抑制試験
試験品溶液５０μｌ、精製水１００μｌ、０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）５００μｌ、４mgｍｌ ＢＳＡを２００μｌ、２Ｍグルコース溶液１００μｌを６０℃で３０時間インキュベートした。(対象として同様の操作を行った反応液を４℃でそれぞれ３０時間インキュベートしたものを用いた。)
蛍光測定用の９６ウェルプレートへ反応液を２００μｌ入れ、蛍光プレートリーダーにて最終生成糖化産物（ＡＧＥｓ）の蛍光値を測定した（Ｅｘ／Ｅｍ＝３４０／４２０nm）。
得られた測定値は以下の式に従い、阻害率を算出した。


阻害率＝((Ａ−Ｃ)−(Ｂ−Ｄ))×１００／(Ａ−Ｃ)

Ａ：６０℃反応、試験品無
Ｂ：６０℃反応、試験品有
Ｃ：４℃反応、試験品無
Ｄ：４℃反応、試験品有
結果を表１に示す。

グリチルリチン酸ジカリウム、インドセンダンの葉の抽出物を皮膚外用剤として使用してみたところ、皮膚のハリ及びツヤを改善することがわかった。

Claims (1)

1. インドセンダンの葉の抽出物を有効成分とするメイラード反応抑制剤。