JP6394162B2 - 天然物由来成分を基材とするナノ粒子の製造方法 - Google Patents
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Description
以上のことから、ガレート型カテキンであるECgが非常に有用な化合物であることが明らかである。
〔1〕平均粒子径が43.1〜200nmである、天然物由来成分を基材とするナノ粒子の製造方法であって、
ガレート型カテキンまたはガレート型カテキンを含む組成物を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、ガレート型カテキン含有溶液または分散液を作製する工程、
ホエイタンパク質、卵白タンパク質およびこれらの分解物から選ばれる少なくとも1種の動物性タンパク質を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、動物性タンパク質含有溶液または分散液を作製する工程、ならびに
前記ガレート型カテキン含有溶液又は分散液と、前記動物性タンパク質含有液または分散液とを
(a)ガレート型カテキンの固形分
(b)動物性タンパク質の固形分
の重量が、0.2≦(b)/(a)≦5.0となるように混合し、pH1.2〜7.9に調整した混合液中でナノ粒子を形成させてナノ粒子含有液を作製する工程
を有し、
前記ホエイタンパク質がラクトアルブミンおよび/またはカゼインであり、
前記卵白タンパク質がオボアルブミンであることを特徴とする、ガレート型カテキンと動物性タンパク質からなるナノ粒子の製造方法、
〔2〕前記混合液が、ガレート型カテキンまたはガレート型カテキンを含む組成物由来の固形分を0.1重量%以上、且つ、ホエイタンパク質、卵白タンパク質およびこれらの分解物から選ばれる少なくとも1種の動物性タンパク質由来の固形分を0.1重量%以上含有する前記〔1〕に記載のナノ粒子の製造方法、
〔3〕固形分値0.2〜1.0重量%に調整したナノ粒子含有液を、ゼータ電位・ナノ粒子径測定システム(ベックマン・コールター株式会社製、「DelsaMax PRO」)を用い、分析設定を水として得られるゼータ電位の絶対値が10mV以上である前記〔1〕または〔2〕のいずれかに記載のナノ粒子の製造方法
に関する。
ガレート型カテキンまたはガレート型カテキンを含む組成物を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、ガレート型カテキン含有溶液または分散液を作製する工程、
ホエイタンパク質、卵白タンパク質およびこれらの分解物から選ばれる少なくとも1種の動物性タンパク質を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、動物性タンパク質含有溶液または分散液を作製する工程、ならびに
前記ガレート型カテキン含有溶液又は分散液と、前記動物性タンパク質含有液または分散液とを
(a)ガレート型カテキンの固形分
(b)動物性タンパク質の固形分
の重量が、0.17≦(b)/(a)≦5となるように混合し、pH1.0〜8.0に調整した混合液中でナノ粒子を形成させてナノ粒子含有液を作製する工程
を有することを特徴とする
前記ナノ粒子の平均粒子径は、後述の実施例に記載のように、ゼータ電位・ナノ粒子径測定システム(ベックマン・コールター株式会社製、「DelsaMax PRO」)にて測定することができる。
本発明のナノ粒子の製造方法では、前記ガレート型カテキンまたはガレート型カテキンを含む組成物を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、ガレート型カテキン含有溶液または分散液を作製する。
また、本発明のナノ粒子の製造方法では、前記動物性タンパク質を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、動物性タンパク質含有溶液または分散液を作製する。
また、前記溶解または分散させる際には、効率的に溶解または分散させる観点から、前記溶媒の温度を30〜90℃、好ましくは50〜70℃に調整しておくことが好ましい。
本発明のナノ粒子の製造方法では、前記ガレート型カテキン含有溶液又は分散液と、前記動物性タンパク質含有液または分散液とを
(a)ガレート型カテキンの固形分
(b)動物性タンパク質の固形分
の重量が、0.17≦(b)/(a)≦5となるように混合し、pH1.0〜8.0に調整した混合液中でナノ粒子を形成させてナノ粒子含有液を作製する。
(a)ガレート型カテキンの固形分
(b)動物性タンパク質の固形分
の重量が、0.17≦(b)/(a)≦5となるように調整する。
前記重量比が前記範囲を超える場合、200nm以下の粒子が一部形成されるものの、その平均粒子径が200nmを超える大きさになるため好ましくない。
なお、前記ガレート型カテキン含有溶液又は分散液と、前記動物性タンパク質含有液または分散液との混合時に所望の濃度となるよう調整してもよく、ナノ粒子を作製した後に濃縮してもよい。
なお、測定時におけるナノ粒子含有液の溶媒は、水、含水溶媒、有機溶媒のいずれでもよいが、測定誤差などが生じにくい観点から、水または含水溶媒であることが好ましい。
ホエイタンパク質(ラクトアルブミン(Sigma社製)、カゼイン(Sigma社製))、卵白タンパク質(オボアルブミン(和光純薬社製))などの動物性タンパク質0.1gを、それぞれ50℃の水に溶解もしくは分散させた4種類の動物性タンパク質含有水溶液90gを作製した。
一方、緑茶抽出物(ガレート型カテキン(以下Gカテキンと記載)含量67重量%)0.18gを50℃の水に溶かしたガレート型カテキン含有水溶液10gを4つ作製した。
次いで、4種類の動物性タンパク質含有水溶液90gにガレート型カテキン含有水溶性10gを加え、混合したところ、いずれも凝集・沈殿のないコロイド状薄白色液体100g(pH6.4)となった。得られた液体の粒子の平均粒子径とゼータ電位を、ゼータ電位・ナノ粒子径測定システム(ベックマン・コールター株式会社製、「DelsaMax PRO」)にて測定した。
また、Gカテキンを含まない緑茶抽出物サンフェノンXLB−100(太陽化学社製)を用いた比較品も作製した。結果を表1に示す。
なお、ゼータ電位および平均粒子径は、分析設定を水として測定した。
ナノ粒子作製においての動物性タンパク質とGカテキン比率検討のために、混合する動物性タンパク質とGカテキンの比率のみを変更して実施例1に準じた方法で平均粒子径を測定した。動物性タンパク質としてはラクトアルブミンを用いた。結果は表2に示す。なお、表中の「ラクトアルブミン」、「Gカテキン」の数値の単位はいずれも重量%である。
ナノ粒子作製においてのpH検討のために、実施例1に準じた方法にてナノ粒子を作製し、その後、クエン酸、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウムで混合液のpHを調整して平均粒子径を測定した。動物性タンパク質としてはラクトアルブミンを用い、動物性タンパク質とGカテキンの比率は0.56とした。結果を表3に示す。
ナノ粒子の吸収性評価のためにラットを用いた吸収性評価試験を行った。
7週齢のラットに実施例1で得られたラクトアルブミンを用いたナノ粒子またはガレート型カテキン単独を投与し、1、2、3、5、7時間に尾部より採血を行って血漿を作製した。得られた血漿をGrucuronodase(Sigma社製)およびSulfatase(Sigma社製)で脱抱合を行い、LC−MSにてカテキン濃度を測定した。測定するカテキンはEGCgとECgとした。その結果、実施例1で得られたナノ粒子はガレート型カテキンに比べて体内への吸収性の向上が認められた。
Claims (3)
- 平均粒子径が43.1〜200nmである、天然物由来成分を基材とするナノ粒子の製造方法であって、
ガレート型カテキンまたはガレート型カテキンを含む組成物を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、ガレート型カテキン含有溶液または分散液を作製する工程、
ホエイタンパク質、卵白タンパク質およびこれらの分解物から選ばれる少なくとも1種の動物性タンパク質を、水または含水溶媒または有機溶媒に溶解または分散させて、動物性タンパク質含有溶液または分散液を作製する工程、ならびに
前記ガレート型カテキン含有溶液又は分散液と、前記動物性タンパク質含有液または分散液とを
(a)ガレート型カテキンの固形分
(b)動物性タンパク質の固形分
の重量が、0.2≦(b)/(a)≦5.0となるように混合し、pH1.2〜7.9に調整した混合液中でナノ粒子を形成させてナノ粒子含有液を作製する工程
を有し、
前記ホエイタンパク質がラクトアルブミンおよび/またはカゼインであり、
前記卵白タンパク質がオボアルブミンであることを特徴とする、ガレート型カテキンと動物性タンパク質からなるナノ粒子の製造方法。 - 前記混合液が、ガレート型カテキンまたはガレート型カテキンを含む組成物由来の固形分を0.1重量%以上、且つ、ホエイタンパク質、卵白タンパク質およびこれらの分解物から選ばれる少なくとも1種の動物性タンパク質由来の固形分を0.1重量%以上含有する請求項1に記載のナノ粒子の製造方法。
- 固形分値0.2〜1.0重量%に調整したナノ粒子含有液を、ゼータ電位・ナノ粒子径測定システム(ベックマン・コールター株式会社製、「DelsaMax PRO」)を用い、分析設定を水として得られるゼータ電位の絶対値が10mV以上である請求項1または2に記載のナノ粒子の製造方法。
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