JP6339789B2 - Alt活性測定試薬およびその試薬を用いたアラニンアミノトランスフェラーゼ活性の測定方法。 - Google Patents
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
日本臨床化学会の公表した上記の勧告法は、測定値の互換性を得るために、臨床検査室等の環境レベルで共有することのできる共通の酵素活性測定を最適な条件で測定する方法であるため、一般には日常の検査法として使用することのできるものではないが、臨床検査薬メーカーは、日本臨床化学会の勧告法と測定値との互換性が取れるような試薬を提供している。
一方既述した特許文献1において用いられるオキサミン酸又はその塩は安価であるため、HGD活性を抑えた安価な試薬の供給が可能となるが、オキサミン酸又はその塩のみではブランク値上昇に対する抑制効果が不十分であり、試薬の測定値安定性において問題がある。
さらに本発明のALT活性測定試薬は、公知のALT活性測定試薬と同様に、適当な緩衝剤を更に含むことができ、この場合の緩衝剤としては、ALT活性測定への悪影響がない限り、従来公知の緩衝液を適宜選択して使用することができる。具体的には、例えば、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン、リン酸、2−[4−(2−ヒドロキシエチル)−1−ピペラジル]エタンスルホン酸、ビス(2−ヒドロキシエチル)イミノトリス(ヒドロキシメチル)メタン、2−ヒドロキシ−N−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−3−アミノプロパンスルホン酸、N−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−2−アミノエタンスルホン酸、又はn−エチルモルフォリン等を使用することができる。
前記被検試料は、ALT活性を含有する可能性のある被検試料である限り、特に限定されるものではなく、例えば、臨床診断に一般的に用いられる生体由来液、例えば、血液、血清、血漿、若しくは尿、又は細胞組織、あるいは実験サンプルなどを挙げることができる。
上記により調整した試薬Aと試薬Bとを、それぞれ容器の蓋を開けた状態で自動分析装置(H7180;株式会社日立製作所製)にセットして21日間放置し、3日目、7日目、14日目、21日目に、それぞれのブランク値を測定した。
つまり、前記した実施例2で調整した試薬Cおよび試薬Dを上記した実施例1および2で用いたのと同じ自動分析装置にセットし、実施例1と同じ方法により測定をした。この場合検体には生理食塩水を用いて5段階希釈されたハイレベルチェック・E(シスメックス株式会社製)を用いた。検体のALT活性測定には検体の代わりに酵素キャリブレーター(株式会社カイノス製)を用い、得られた測定結果に基づいて算出した。
すなわち、前記実施例1および実施例3で調整した試薬C、試薬Eおよび試薬Fを容器の蓋を開けた状態で自動分析装置(H7180;株式会社日立製作所製)にセットして35日間放置するとともに、その間7日目、14日目、21日目、28日目、35日目に、それぞれ前記実施例1と同様の方法により測定を実施した。なお、この場合に検体には生理食塩水、プール血清を用いて測定した。
Claims (6)
- L−アラニン、2−オキソグルタル酸、乳酸脱水素酵素、及び還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドを含むアラニンアミノトランスフェラーゼ活性測定試薬において、D−LDと、敢えてこれと同基質のL−LDとを組み合わせることを特徴とする、前記アラニンアミノトランスフェラーゼ活性測定試薬。
- L−LDを10〜3,000U/L、D−LDを1,000〜30,000U/L処方することを特徴とする請求項1のアラニンアミノトランスフェラーゼ活性の測定試薬。
- 炭酸塩及び炭酸水素塩を1〜150mmol/L処方することを特徴とする請求項1に記載のアラニンアミノトランスフェラーゼ活性の測定試薬。
- アラニンアミノトランスフェラーゼを含有する可能性のある被検試料と、L−アラニン、2−オキソグルタル酸、D−LDおよび該D−LDと同基質のL−LD、還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドとを処方することを特徴とする、アラニンアミノトランスフェラーゼ活性の測定方法。
- L−LDを10〜3,000U/Lおよび該D−LDと同基質のD−LDを1,000〜30,000U/L処方することを特徴とする請求項4に記載のアラニンアミノトランスフェラーゼ活性の測定方法。
- 炭酸塩及び炭酸水素塩を1〜150mmol/L処方することを特徴とする請求項4に記載のアラニンアミノトランスフェラーゼ活性の測定方法。
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