JP6236382B2

JP6236382B2 - チアゾール系化合物、その調製方法及び用途

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Publication number: JP6236382B2
Application number: JP2014509592A
Authority: JP
Inventors: ▲発▼俊南; ▲飛▼ ▲陳▼; 仰明 ▲張▼; 佳李; 宇波周; 明波 ▲蘇▼; 健丁; 凌▲華▼ 蒙; 欣 ▲謝▼; ▲識▼▲賢▼ 王
Original assignee: Shanghai Theorion Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Shanghai Theorion Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-05-10
Filing date: 2012-05-07
Publication date: 2017-11-22
Anticipated expiration: 2032-05-07
Also published as: BR112013028894A2; NZ617505A; JP2014517831A; AU2012253019B2; AU2012253019A1; WO2012152208A1; CA2835705C; KR101577520B1; US20140148600A1; EP2708534A4; US9216962B2; BR112013028894B1; CN102775368A; CA2835705A1; MX343540B; CN102775368B; EP2708534B1; EP2708534A1; MX2013013048A; KR20140028046A

Description

本発明はチアゾール系化合物及びその調製方法並びに用途に関し、より具体的に言うと、本発明は新規の天然物ｌａｒｇａｚｏｌｅの誘導体、その調製方法及びヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害薬として、抗腫瘍及び多発性硬化症の治療方面における用途に関する。

腫瘍は全世界の範囲の中で心血管疾患に次ぐ２番目の「キラー」であり、近年の発症率が上昇の一途を辿り、ガンに対する治療はずっと人間を困っている難題である。従来の化学治療薬はターゲット選択性が乏しく、しばしば深刻な副作用を発生するため、高効率・低毒性の特異性分子ターゲットの抗腫瘍薬の開発が要求される。いくつかの腫瘍細胞の分化増殖及び移転と相関する細胞シグナル伝達通路のキー酵素を薬物のスクリーニングターゲットとし、特定ターゲットに選択性に作用する高効率、低毒性、特異性の強い新型抗ガン薬を発見することはすでに当世抗腫瘍薬の研究開発の重要な方向になる。ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）はちょうどこんな一種類の蛋白である。

多発性硬化症（ＭｕｌｔｉｐｌｅＳｃｌｅｒｏｓｉｓ，ＭＳ）は１種類の典型的な自己免疫性疾患である。ＭＳ疾病の病理表現は中枢神経係統の急性炎症を起こして且つ脱髄鞘現象に至り、若い人に無創性神経麻痺や障害に至る最も重要な誘因の一つである。ＭＳ臨床表現が多いと非均質型で、８０％以上の患者の表現が繰り返しの緩和に再発表現型である。疾患の発生メカニズムが不明で、且つ現在敏感な診断マークがまだ欠乏しているため、ＭＳに対する診断が疾病の時間と空間上の多発性にしか頼られない。これに加えて他の多くの疾患例えば視神経脊髄炎とＭＳが似ているから、現在ＭＳに対する治療、ひいては診断に対しても依然として非常に困難である。

現在の研究結果によると、ＣＤ４^＋Ｔ細胞はＭＳの発症、少なくとも早期疾病の起動に対して重要な役割をしている。以前の研究はＴ_Ｈ１細胞（ＩＦＮ−−γを生成することを特徴とする）が疾病の発生に対して重要な役割を持っていることを認識していたが、Ｔ_Ｈ１７の発見に伴って、ますます多くの証拠は、後者のＭＳの発症に対する役割がＴ_Ｈ１より劣らないことを表明し、例えば、Ｔ_Ｈ１７細胞の数が少ないマウスがＥＡＥ（実験性自己免疫性脳脊髄炎）を患うことが難しく、ＭＳ病人の脳組織の病巣の中でＴ_Ｈ１７細胞が鑑定されたなど。

染色質のヒストンアセチル化及び脱アセチル化が遺伝子発現を調節する肝心な一環の一つで、異常な遺伝子発現が腫瘍といくつかの遺伝と代謝疾患の発生の分子生物学の基礎である。ヒストンのアセチル化程度は、ヒストンアセチル化酵素（ＨＡＴ）とヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）とによって協調に制御されている。ＨＤＡＣが過度に発現し且つ転写因子によって募集される時に、特定の遺伝子の不正常な阻害を至り、それによって、腫瘍や他の疾患の発生に至る。

ＨＤＡＣｓが十八種亜型を有し、四大類に分けられ、それぞれＩ型（ＨＤＡＣ１、２、３、８）、ＩＩ型（ＨＤＡＣ４、５、６、７、９）、ＩＩＩ型（ＳＩＲ１〜７）とＩＶ型（ＨＤＡＣ１１）である。（Johnstone、R . W . 2002 Nature Rev . Drug Disc . 1:287）。報道によると、ＨＤＡＣの活性が癌の発生に関っている（Archer、S . Y .等。1998 Proc . Nat . Acad . Sci . USA、95:6791-6796）。ＨＤＡＣが過度に発現する時に、生体内の天然の腫瘍抑制因子例えばｐ５３の遺伝子発現が阻害される（Ｇｕ、Ｗ．等。1997 Cell、90:595-606）。そしてＨＤＡＣ阻害剤（ＨＤＡＣｉ）が染色質のヒストンアセチル化レベルの向上に至ることができるため、特定遺伝子による発現の活性化されることに至り、相応に、細胞の末端分化やガン細胞のアポトーシスに至る。臨床研究によると、ＨＤＡＣの活性を阻害することによってヒストンの高アセチル化レベルを得ることができる。

現在すでに発見されたＨＤＡＣｉは構造に基づいて、短鎖脂肪酸類、ヒドロキサム酸類、求電子エポキシケトン基、ｏ−フェニレンジアミン類及び大環ペプチド類に分けられることができる（Miller、T . A .等。2003 J . Med . Chem . 46:5097;Rosato,R.R.等. 2004 Expert.Opin. Invest.Drugs 13:21; Monneret,C.,2005 Eur.J.Med.40:1; Yoo,C.B.等. 2006Nat.Rev.DrugDiscovery5:37）。ＨＤＡＣｉ構造効果関係は、多くのＨＤＡＣｉは表面識別ドメイン、亜鉛イオンキレート部位（ＺＢＧ）及び２部分を連接する疎水脂肪鎖に分けることができることを表明した（Marks、P . 2007 Oncogene 26:1351）。

ヒストンアセチル化酵素（ＨＤＡＣ）は重要なエピジェネティック制御蛋白であり、クロマチン再構成、遺伝子発現及び転写因子、ヒストン、細胞骨格蛋白質等を含む多種の蛋白質の機能を制御する。ＨＤＡＣｉはＨＤＡＣ活性を遮断できる１種の小分子化合物で、それらは細胞周期の遮断、細胞分化及び細胞のアポトーシスに至ることができ、現在すでに腫瘍治療に応用される。最近の実験の結果、ＨＤＡＣｉは抗炎症及び免疫調節の機能を持っていることを表明した。Ｃａｍｅｌｏ等は、ＨＤＡＣｉＴＳＡがＭＳのマウス動物モデル（Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ、ＥＡＥ）においてＴ細胞のマウス中枢神経係に対する侵襲を有効に防止でき、それによって、その臨床症状を軽減することを発見した。Ｃｈｕｎｇ等は、ＨＤＡＣｉフェニル酪酸とＴＳＡが動物関節炎モデルにおいてＴＮＦ−ａｌｐｈａの発現を阻害し、単核の浸潤を軽減することによって、病気の症状を軽減できることを発見した。Ｂｏｓｉｓｉｏ等の研究は、ＨＤＡＣｉが抗原の提示する樹状細胞分泌を阻害でき、Ｔ_Ｈ１とＴ_Ｈ１７により誘導されたＩＬ−１２、ＩＬ−２３などを含む細胞因子に有利であることを証明した。Ｔａｏ等の研究は、ＨＤＡＣｉが阻害性Ｔｒｅｇ細胞の分化を強化し、それのＴ_Ｈ１とＴ_Ｈ１７細胞に対する阻害機能を増強できることを表明した。上記研究は、ＨＤＡＣの阻害が自己免疫疾患の発生進行と密接に関係することを表明した。毒性のより低い、選択性のより良いＨＤＡＣｉを見つけることはＭＳ疾患の治療を含む自己免疫性疾患の治療に寄与し得る。

Ｌａｒｇａｚｏｌｅはフロリダの海洋シアノバクテリアSymploa sp.から分離し得た高度官能基化の１６員環状ペプチド（Taori、K .等。2008 J . Am . Chem . Soc . 130:1806-1807;Ying、Y .等。2008 J . Am . Chem . Soc . 130:8455-8459）で、その構造は以下の通りである。この天然産物の骨組構造は斬新で、その構造が、４−メチル置換のジヒドロチアゾール環とチアゾール環とのカップリング部分、Ｌ−バリン及び（３Ｓ、４Ｅ）−３−ヒドロキシ−７−メルカプト−４−ヘプテン酸を含む。薬理実験では、ｌａｒｇａｚｏｌｅが乳腺癌細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）及び繊維芽細胞骨肉腫細胞（Ｕ２ＯＳ）の生長を選択的に抑制できるが、正常な乳腺上皮細胞（ＮｍｕＭＧ）や正常な繊維細胞（ＮＩＨ３Ｔ３）に対する影響が少ないことを表明した。その後の研究はｌａｒｇａｚｏｌｅがＩ型ＨＤＡＣを選択性に抑制できることを表明した。この基礎上で、発明者はその構造を最適化及び改造並びに評価を行い、それによって、一連のさらなる開発に潜在力を持つ化合物を得た。

本発明の目的はヒストン脱アセチル化酵素阻害薬とすることができる新型のチアゾール系化合物を設計及び合成することにあり、それによって、抗腫瘍及び多発性硬化症の薬物を見つけ出すための新しい道が切り開かれる。

本発明の他の１つの目的は前記チアゾール系化合物の調製方法を提供することにある。

本発明のもう１つの目的は前記チアゾール系化合物の用途を提供することにある。

本発明のチアゾール系化合物は以下の一般式Ｉの構造を有し、

式中、
Ｒ_１がＲ_１ａ、Ｒ_１ｂまたはＲ_１ｃである。

Ｒ_４ａ及びＲ_５ａがそれぞれ独立にＡ、またはＢｏｃ保護のアミノＣ１〜Ｃ_６アルキルである。

Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがそれぞれ独立にＡから選ばれ、または、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがこれらと結合するＣと共に、３〜１０員環、またはＮ、Ｏ及びＳから選ばれた１〜３つのヘテロ原子を含有する３〜１０員複素環を形成する。

Ｒ_４ｃ、Ｒ_５ｃ及びＲ_６がそれぞれ独立にＡから選ばれる。

前記Ａが、Ｈ、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、ニトロ基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルコキシ基、アミノ基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルアミノ基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキルアミノ基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、フルオロＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、フルオロＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルキニル基、フルオロＣ_２〜Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルキニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基、５〜７員ヘテロアリール基のうちの１種であり、前記５〜７員ヘテロアリール基はＮ、Ｏ及びＳから選ばれた１〜３つのヘテロ原子を含有する。

Ｒ_２が、Ｈ、ハロゲノ基、ヒドロキシル基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_１〜Ｃ_８アルコキシ基、アミノ基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキルアミノ基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキルアミノ基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基により置換されたＣ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、ヒドロキシル基とＣ_１〜Ｃ_４アルコキシ基とハロゲン原子とベンジルオキシ基とＣ_６〜Ｃ_１０アリール基とからなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_２〜Ｃ_８アルケニル基、ヒドロキシル基とＣ_１〜Ｃ_４アルコキシ基とハロゲン原子とＣ_６〜Ｃ_１０アリール基とからなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル基、ヒドロキシル基とＣ_１〜Ｃ_４アルコキシ基とハロゲン原子とＣ_６〜Ｃ_１０アリール基とからなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_２〜Ｃ_８アルキニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基、ハロゲン原子とニトロ基とからなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_６〜Ｃ_１０アリール基、または、５〜７員ヘテロアリール基であり、前記５〜７員ヘテロアリール基はＮ、Ｏ及びＳから選ばれた１〜３つのヘテロ原子を含有する。好ましくは、Ｒ_２が、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、ヒドロキシル基とベンジルオキシ基とＣ_６〜Ｃ_１０アリール基からなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_２〜Ｃ_８アルケニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基、ハロゲン原子及びニトロ基からなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_６〜Ｃ_１０アリール基のうちの１種である。

ｎが０、１または２、好ましくは０である。

Ｘは−Ｎ（Ｒ_７）−または

であり、
そのうち、Ｒ_７がＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキル基から選ばれ、Ｘは好ましくは−ＮＨ−である。

Ｙが存在せず、または、Ｙが−（Ｃ_１〜Ｃ_１０アルキル基）−、−（Ｃ_２〜Ｃ_９アルケニル基）−、−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基）−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−、−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−（Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル基）−、−（Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基）−もしくは−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル基）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（Ｃ_２〜Ｃ_９アルケニル基）−であり。好ましくは、Ｙが−（Ｃ_１〜Ｃ_１０アルキル基）−、−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基）−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−、−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−（Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル基）−である。

Ｒ_３がＲ_３ａ、Ｒ_３ｂ、Ｒ_３ｃ、Ｒ_３ｄまたはＲ_３ｅである。

そのうち、Ｒ_８がＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルカルボニル基で、好ましくは、Ｒ_８がＨである。
Ｒ_９がＨまたはＣ_１〜Ｃ_１０アルキルカルボニル基である。

本発明の更なる実施形態において、一般式Ｉにおいて、
Ｒ_１がＲ_１ａであり、
ｎ＝０、
Ｒ_２、Ｘ、Ｙ及びＲ_３の定義が前記の通りであり、具体的には以下の構造ＩＩ_ａを有し、

そのうち、
Ｒ_４ａ及びＲ_５ａの定義が前記の通りであり、好ましくは、Ｒ_４ａ及びＲ_５ａがそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基またはＢｏｃ保護のアミノＣ１〜Ｃ_６アルキルである。

本発明の更なる実施形態において、一般式Ｉにおいて、
Ｒ_１がＲ_１ｂであり、
ｎ＝０、
Ｒ_２、Ｘ、Ｙ及びＲ_３の定義が前記の通りであり、具体的には以下の構造ＩＩ_ｂを有し、

そのうち、
Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂの定義が前記の通りであり、好ましくは、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基もしくはＣ_６〜Ｃ_１０アリール基であり、または、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがこれらと結合するＣと共に３〜１０員環を形成する。

本発明の更なる実施形態において、一般式Ｉにおいて、
Ｒ_１がＲ_１ｃであり、
ｎ＝０、
Ｒ_２、Ｘ、Ｙ及びＲ_３の定義が前記の通りであり、具体的には以下の構造ＩＩ_ｃを有し、

そのうち、
Ｒ_４ｃ、Ｒ_５ｃ及びＲ_６の定義が前記の通りであり、好ましくは、Ｒ_４ｃ、Ｒ_５ｃ及びＲ_６がそれぞれ独立して、ＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキル基である。

本発明のより好適な実施形態において、前記Ｘが−ＮＨ−で、且つｎ＝０、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４ｂ、Ｒ_５ｂ及びＹの定義が前記の通りであり、以下の構造ＩＩＩを有する。

本発明の特別な好適な実施形態において、前記Ｘが−ＮＨ−で、且つｎ＝０、Ｒ_３が具体的にＲ_３ａであり、以下の構造ＩＶを有し、

そのうち、Ｒ_２、Ｒ_４ｂ、Ｒ_５ｂ及びＹの定義が前記の通りである。

好ましくは、Ｒ_２がＨ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基により置換されたＣ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_２〜Ｃ_８アルケニル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_２〜Ｃ_８アルケニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基もしくはベンジルオキシ基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_２〜Ｃ_８アルケニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_２〜Ｃ_８アルコキシ基、ハロゲノ基により置換されたＣ_６〜Ｃ_１０アリール基、またはニトロ基により置換されたＣ_６〜Ｃ_１０アリール基である。

好ましくは、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがそれぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、フルオロＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、フルオロＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、もしくはＣ_６〜Ｃ_１０アリール基であり、または、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがこれらと結合するＣと共に形成する３〜１０員環、もしくはＮ、Ｏ及びＳから選ばれた１〜３つのヘテロ原子を含有する３〜１０員複素環を形成する。より好ましくは、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがそれぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、ヒドロキシル基により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、フルオロＣ_１〜Ｃ_６アルキル基またはＣ_６〜Ｃ_１０アリール基である。最も好ましくは、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基（Ｃ_１〜Ｃ_６直鎖または側鎖アルキル基を含み）、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基もしくはＣ_６〜Ｃ_１０アリール基であり、または、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂが、これらと結合するＣと共に３〜１０員環を形成する。

好ましくは、Ｙが−（Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル基）−、−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基）−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−、または−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基）−（Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル基）−である。

本発明の一般式Ｉで示される構造を有するチアゾール系化合物は、具体的には以下の通りである。

本発明は一般式Ｉの構造を有するチアゾール系化合物の調製方法を提供する。当該調製方法は下記のルート１〜ルート５のいずれか１種によって実施することができる。

そのうち、Ｒ_１、Ｒ_２、ｎ、Ｘ及びＹの定義が前記の通りである。

具体的には、化合物１と活性化した亜鉛粉末とがＴＨＦにおいて化合物２を形成し、化合物２が２−ブロモチアゾール化合物３と、酢酸パラジウム及びトリフェニルホスフィンの触媒作用下でトルエンにおいてＮｅｇｉｓｈｉカップリング反応を行うことによって化合物４を得、化合物４が水酸化ナトリウム／メタノール−水系において加水分解し、対応する酸５を得、化合物５が種々の求核試薬ＨＸ−Ｙ−ＣＯＯＭｅと、縮合剤ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔの作用下でＤＭＦにおいて縮合反応を行い化合物６を得、化合物６が新たに調製されたヒドロキシルアミンのメタノール溶液と反応して本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ａを得る。

そのうち、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_８、ｎ、Ｘ及びＹの定義が前記の通りである。

具体的には、化合物６がメタノールまたはＴＨＦ／水系においてアルカリ（例えばＮａＯＨまたはＬｉＯＨ）加水分解することによって化合物Ｉ_ｅを得、Ｉ_ｅがモノＢｏｃ保護のｏ−フェニレンジアミンと、縮合剤１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ジイソプロピルエチルアミン（ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ）の作用下でＤＭＦにおいて縮合反応して化合物７を得、化合物７が塩酸酢酸エステル溶液の作用下でＢｏｃ保護基を除去して本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｂを得、または化合物７が種々の求核試薬Ｒ_８Ｈと反応して本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｂを得る。

具体的には、化合物５が種々の求核試薬ＨＸ−Ｙ−ＮＨＣＯＣＨ_２ＳＴｒｔと、縮合剤ＥＤＣＩ、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）をアルカリとして存在する条件下で、ジクロロメタンにおいて縮合反応して化合物８を得、化合物８がトリフルオロ酢酸の条件下で保護基を除去して本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｃを得る。

そのうち、Ｒ_１、Ｒ_２、ｎ、Ｒ_９、Ｘ及びＹの定義が前記の通りである。

具体的には、化合物５が種々の求核試薬ＨＸ−Ｙ−ＳＲ_９と、縮合剤ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔの作用下で、ＤＭＦにおいて縮合反応して本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｄを得る。

そのうち、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４ｃ、Ｒ_５ｃ、Ｒ_６、ｎ、Ｘ及びＹの定義が前記の通りである。

具体的には、化合物９がＬａｗｅｓｓｏｎ’ｓ試薬の作用下で化合物１０に生成され、化合物１０が種々のＲ_２により置換されたブロモプロピオン酸エチルと、Ｈａｎｔｚｓｃｈ反応によってチアゾール環を構築して化合物１１を得、化合物１１がメタノール／水系においてアルカリ性条件下で加水分解して化合物１２を得、化合物１２が種々の求核試薬ＨＸ−Ｙ−Ｒ_３と、縮合剤ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔの作用下で、ＤＭＦにおいて縮合反応して本発明に係るチアゾール系化合物ＩＩ_ｃを得る。

本発明の一般式Ｉで示される構造のチアゾール系化合物はヒストン脱アセチル化酵素阻害薬の薬物を調製することに用いられることができるため、抗腫瘍及び多発性硬化症の薬物の調製に応用されることができ、前記腫瘍細胞株が結腸ガン細胞ＨＣＴ−１１６、膵臓ガン細胞Ｂｘ−ＰＣ３、白血病細胞ＨＬ６０、ヒト肺腺癌細胞Ａ５４９、乳腺ガン細胞ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、乳腺上皮細胞ＨＭＥＣを含む。それによって、結腸ガン、膵臓ガン、白血病、肺ガンまたは乳腺ガンの治療に用いられることができる。

ＥＡＥを有効に緩和するＨＤＡＣｉＣＦＨ３６７−Ｃの臨床評価点数である。

以下、具体的な実施例に合わせて本発明に対してさらに説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されない。
［化合物調製の実施例］

以下の調製実施例において、ＮＭＲがＶａｒｉａｎ製のＭｅｒｃｕｒｙ−Ｖｘ３００Ｍ機器で測定され、ＮＭＲ校正は、δ Ｈ７．２６ｐｐｍ（ＣＤＣｌ_３）、２．５０ｐｐｍ（ＤＭＳＯ−ｄ_６）、３．１５ｐｐｍ（ＣＤ_３ＯＤ）である。試薬は主に上海化学試薬公司により提供され、ＴＬＣ薄層クロマトシリカゲルプレートは三東煙台会友シリカゲル開発有限公司により生産され、型番がＨＳＧＦ２５４である。化合物純度に使用される順相カラムクロマトグラフィーシリカゲルは山東青島海洋化工工場の支工場により生産されたもので、型番がｚｃｘ−１１、２００〜３００メッシュである。
調製実施例１（化合物番号ＣＦＨ３６７−Ｃ）

活性化したＺｎ粉末（２９８ｍｇ，４．５８ｍｍｏｌ）を再蒸留の無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶かし、Ｎ_２で置換を行い、化合物１３（８７５ｍｇ，５．３４ｍｍｏｌ）を滴下し、滴下の速度を制御して、突沸を防止する。滴下完了した後、１．５ｈ還流し、静置し冷却して化合物１４を得た。

化合物１５（１ｇ，３．８２ｍｍｏｌ）を無水トルエン（２０ｍＬ）に溶かし、Ｎ_２で置換を行い、前記Ｚｎ試薬１４を反応液に移した。触媒酢酸パラジウム（４３ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１００ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）を加え、８０−９０℃に加熱し、原料１５が消えるまで反応させた。ろ過して不溶物を除去し、有機相を濃縮し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）で希釈し、１ＮＨＣｌ（３０ｍＬ）を加えて１０ｍｉｎ撹拌して有機相を分離し、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２（３０ｍＬ×２回）で抽出した。さらに、有機相を混合して濃縮し、カラムを通過させて（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝４：１）化合物１６（７５０ｇ，７３．５％，黄色油状物）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.85 (d, J=3.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J=3.0 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.10-3.14 (m, 1H), 1.31-1.38 (m, 2H), 0.84-0.89 (m, 2H)。

化合物１６（７００ｍｇ，２．６３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ（３０／６ｍＬ）に溶かし、ＮａＯＨ（２１０ｍｇ，５．２６ｍｍｏｌ）固体を加え、１ｈ加熱還流した。反応完了した後、ＭｅＯＨを回転蒸発させ、Ｈ_２Ｏで希釈し、水相を１Ｎ塩酸でｐＨ＝２まで酸化し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３回）で抽出し、飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮して固体１７（６６０ｍｇ，９９．５％，薄黄色固体）を得た。得られた固体１７は、次の反応に直接使用された。

化合物１７（１００ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）を乾燥のＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かし、氷浴で０℃まで冷却し、ＥＤＣＩ（７６ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（５４ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）を加え、０℃に保持して１０ｍｉｎ撹拌し、化合物１８（７３ｍｇ，０．４４ｍｍｏｌ）及びｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ（１２０ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）を加え、室温条件下で１２ｈ撹拌した後、２０ｍＬの水を加えて希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出し（１５ｍＬ×３回）、有機相を混合した。有機相をそれぞれ１Ｎ塩酸（１５ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１５ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄を行い、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶剤を回転蒸発した後シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１）精製し、製品１９（１０４ｍｇ，７１．７％，薄黄色油状物）を得る。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ7.74 (d, J=3.0 Hz 1H), 7.42 (t, J=5.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J=3.0 Hz 1H), 3.58 (s, 3H), 3.37 (q, J=6.3 Hz, 2H), 2.30 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.58-1.69 (m, 4H), 1.19-1.25 (m, 2H), 0.68-0.74 (m, 2H)。

ヒドロキシルアミン塩酸塩（１９７ｍｇ，２．８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）に懸濁し、ＫＯＨ（２３５ｍｇ，４．２０ｍｍｏｌ）を加え、５ｍｉｎ撹拌した後、ろ過して不溶物を除去し、ろ液を収集して用意しておいた。化合物１９（１０４ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶かし、前記新たに調製されたヒドロキシルアミンのＭｅＯＨ溶液を加え、室温下で１ｈ撹拌した。反応が完全に終了したことをＴＬＣで確認し、ＥｔＯＡｃで希釈を行い、１Ｎ塩酸でｐＨ＝５〜６まで中和し、ＭｅＯＨを減圧濃縮して回転蒸発した。ＥｔＯＡｃで抽出を行い（１５ｍＬ×３回）、飽和食塩水で洗浄し（１０ｍＬ）、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、さらに、濃縮して粗生成物を得た。さらに、カラムクロマトグラフィーで精製して（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ＝２０：１−１０：１）製品ＣＦＨ３６７−Ｃ（７１ｍｇ，６８．３％，薄黄色固体）を得た。¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 8.36 (t, J=5.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J=3.0 Hz 1H), 7.74 (d, J=3.0 Hz 1H), 3.41 (q, J=6.6 Hz, 2H), 3.31-3.36 (m, 1H), 2.16 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.64-1.69 (m, 4H), 1.29-1.34 (m, 2H), 0.82-0.86 (m, 2H)。
同様な方法で以下の化合物を合成した。

調製実施例２（化合物番号ＣＦＨ４９４）

化合物２０（９０ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ（５ｍＬ，４：１）に溶かし、ＮａＯＨ（１２ｍｇ，０．２９ｍｍｏｌ）を加え、２ｈ室温で撹拌し、反応液を１Ｎ塩酸でｐＨ＝２〜３になるまで酸化し、ＥｔＯＡｃで抽出を行い（１０ｍＬ×３回）、飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥を行い、濃縮して化合物２１（８５ｍｇ，９８％，白色固体）を得た。¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 7.86 (d, J=3.3 Hz, 1H), 7.70 (d, J=3.3 Hz, 1H), 3.38 (t, J=6.3 Hz, 2H), 3.20 (d, J=7.2 Hz, 2H), 2.36 (t, J=6.9 Hz, 2H), 1.89-2.00 (m, 1H), 1.66-1.68 (m, 4H), 0.96 (d, J=6.6 Hz, 6H)。

化合物２１（９３ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）を乾燥のＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）に溶かし、化合物２２（７４ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（４１ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、Ｅｔ_３Ｎ（３６ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）をそれぞれ加え、０℃下で１０ｍｉｎ撹拌し、ＥＤＣＩ（８２ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩反応させた。反応液をそれぞれ１Ｎ塩酸（１０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍＬ）、飽和食塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥を行い、濃縮してカラムを通過させ（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１−１：１）、化合物２３を得た（７４ｍｇ，５２．５％，無色透明油状物）。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.86 (d, J=3.3 Hz, 1H), 7.66 (t, J=5.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.45 (d, J=3.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.06-7.14 (m, 2H), 3.40 (q, J=6.3 Hz, 2H), 3.26 (d, J=6.9 Hz, 2H), 2.38 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.98-2.01 (m, 1H), 1.66-1.76 (m, 4H), 1.48 (s, 9H), 0.98 (d, J=6.6 Hz, 6H)。

化合物２３（７３ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）に溶かし、１Ｎ塩酸のＥｔＯＡｃ溶液（２ｍＬ）を加え、室温下で１０ｍｉｎ撹拌した後、濃縮して生成物ＣＦＨ４９４（６０ｍｇ，９３．８％，白色固体）を得た。¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 7.93 (d, J=3.3 Hz, 1H), 7.80 (d, J=3.3 Hz 1H), 7.47-7.52 (m, 2H), 7.35-7.42 (m, 3H), 3.45 (q, J=6.6 Hz, 2H), 3.31 (d, J=7.2 Hz, 2H), 2.59 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.81-2.00 (m, 1H), 1.74-1.79 (m, 4H), 0.98 (d, J=6.6 Hz, 6H)。
同様な方法で以下の化合物を合成した。

調製実施例３（化合物番号ＣＦＨ４１２）

化合物２４（５００ｍｇ，１．８７ｍｍｏｌ）を乾燥のＣＨ_２Ｃｌ_２（１５ｍＬ）に溶かし、化合物２５（７５４ｍｇ，１．８７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（４８８ｍｇ，２．８０ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２３ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）をそれぞれ加え、室温で一晩反応させた。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１０ｍＬ）、飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、水相をＣＨＣｌ_３（１０ｍＬ×２回）で抽出し、有機相を混合した。無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥を行い、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１−１：１）で分離して生成物２６（６４０ｍｇ，５２．５％，黄色油状物）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.78 (d, J=3.0 Hz, 1H), 7.51 (t, J=6.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J=8.1 Hz, 6H), 7.29 (d, J=3.0 Hz, 1H), 7.11-7.23 (m, 9H), 6.15 (t, J=6.0 Hz, 1H), 3.32 (q, J=6.0 Hz, 2H), 3.22 (d, J=7.2 Hz, 2H), 3.05 (s, 2H), 2.96 (q, J=6.0 Hz, 2H), 1.94-1.96 (m, 1H), 1.44-1.46 (m, 2H), 1.35-1.40 (m, 2H), 0.94 (d, J=6.6 Hz, 6H)。

化合物２６（３２０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）に溶かし、Ｅｔ_３ＳｉＨ（１８８ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）及びトリフルオロ酢酸（５．６ｇ，０．０５ｍｏｌ）を加え、室温下で２ｈ撹拌し、濃縮してカラムを通過させて（ＰＥ／ＥＡ＝１：１−１：５）生成物ＣＦＨ４１２（１５０ｍｇ，７４．４％，薄黄色油状物）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.78 (d, J=3.0 Hz, 1H), 7.59 (t, J=5.7 Hz, 1H), 7.38 (d, J=3.0 Hz 1H), 7.31 (t, J=5.7 Hz, 1H), 3.36 (q, J=6.3 Hz, 2H), 3.26 (q, J=5.7 Hz, 2H), 3.19 (s, 2H), 3.17 (d, J=7.2 Hz, 2H), 1.86-1.97 (m, 1H), 1.47-1.58 (m, 4H), 0.89 (d, J=6.6 Hz, 6H)。
同様な方法で以下の化合物を合成した。

調製実施例４（化合物番号ＣＦＨ５３８）

化合物２７（１００ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）を乾燥のＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かし、氷浴で０℃まで冷却し、ＥＤＣＩ（１０８ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（７６ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）を加え、０℃に保持して１０ｍｉｎ撹拌し、化合物２８（８１ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）及びｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ（９１ｍｇ，０．７１ｍｍｏｌ）を加え、室温下で維持して１２ｈ撹拌した後、２０ｍＬ水を加えて希釈を行い、ＥｔＯＡｃで抽出し（１５ｍＬ×３回）、有機相を混合した。有機相を飽和食塩水で（２０ｍＬ）洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥を行い、溶剤を減圧回転で除去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝３：１）、製品２９（１２９ｍｇ，７７．９％，無色油状物）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.83 (s, 1H), 8.10 (s,1H), 8.05 (s,1H), 7.81 (d,J=9.0 Hz, 1H ), 5.87 (dddd, J=17.1, 10.5, 5.7, 5.1 Hz, 1H), 5.31 (d, J=17.1 Hz, 1H), 5.23 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.73 (dd, J=9.3, 5.1 Hz, 1H), 4.65 (dd, J=17.1, 5.7 Hz, 2H), 2.23-2.33 (m, 1H), 0.96 (t, J=6.9 Hz, 6H)。

化合物２９（５５ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を、再蒸留したトルエン（５ｍＬ）に溶かし、Ｎ_２ガスで置換を行い、Ｇｒｕｂｂｓ第２世代触媒（６６ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）のトルエン（１ｍＬ）溶液、化合物３０（１００ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）のトルエン（１ｍＬ）溶液をそれぞれ加え、１１０℃に加熱して１２ｈ還流した。濃縮を行い、カラムを通過させて（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１）生成物ＣＦＨ５３８（２３ｍｇ，５０％，薄黄色油状物）を得たとともに、原料２９（２５ｍｇ）を回収した。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.86 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.83 (d, J=9.0 Hz, 1H), 5.74 (dt, J=15.3, 6.6 Hz, 1H), 5.63 (dt, J=13.2, 6.0 Hz, 1H), 4.74(dd, J=9.0, 5.4 Hz, 1H), 4.66 (dd, J=15.3, 5.4 Hz, 2H), 2.91 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.52 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.35-2.43 (m, 2H), 2.22-2.32 (m, 1H), 1.60-1.67 (m, 2H), 1.19-1.26 (m, 8H), 1.04 (t, J=6.3 Hz, 6H), 0.86 (t, J=6.9 Hz, 3H)。
同様な方法で以下の化合物を合成した。

調製実施例５（化合物番号ＣＦＨ３２５−Ｂ）

化合物３１（１ｇ，７．８６ｍｍｏｌ）を乾燥のＤＭＥ（３０ｍＬ）に溶かし、Ｎ_２ガスの保護下でＬａｗｅｓｓｏｎ’ｓ試薬（１．６ｇ，３．９ｍｍｏｌ）を加え、室温下で１２ｈ反応し、ろ過を行い、溶剤を除去し、カラムを通過させて（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０：１−２：１）化合物３２（１．０ｇ，８８．８％，白色固体）を得た。得られた化合物３２は、次のステップの反応に直接使用された。

化合物３２（５００ｍｇ，３．４９ｍｍｏｌ）を乾燥のＤＭＥ（３０ｍＬ）に溶かし、ＫＨＣＯ_３（２．１ｇ，２１ｍｍｏｌ）を加え、室温下で１０ｍｉｎ撹拌し、化合物３３（１．５ｇ，７．６８ｍｍｏｌ）を滴下し、１ｈ反応した後、氷浴で冷却し、トリフルオロ酢酸無水物（２．２ｇ，１０．４８ｍｍｏｌ）及び２，６−ジメチルピリジン（１．８７ｇ，１７．４６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（１０ｍＬ）溶液を滴下し、０℃に保持して１ｈ反応し、室温まで温度を上げて一晩反応させた。ＴＬＣで化合物３２が完全に反応したことを確認し、溶剤を回転蒸発し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈を行い、有機相を１Ｎ塩酸（２０ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）でそれぞれ洗浄を行い、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮してカラムを通過させて（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝４：１−２：１）化合物３４（６４７ｍｇ，７７．４％，薄黄色固体）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8.00 (s, 1H), 7.50 (d, J=3.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.00 (dd, J=4.8, 3.9 Hz, 1H), 4.34 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.33 (t, J=7.2 Hz, 3H)。

化合物３４（４４７ｍｇ，１．８７ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ（２０／５ｍＬ）に溶かし、０℃下でＮａＯＨ（１４９ｍｇ，３．７４ｍｏｌ）固体を加え、室温で一晩反応させた。反応完了した後、ＥｔＯＨを回転蒸発し、Ｈ_２Ｏを加えて希釈し、ｐＨ＝２になるまで１Ｎ塩酸で酸化し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ×３回）で抽出を行い、飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮して化合物３５（３１４ｇ，７９．５％，白色固体）を得た。得られた化合物３５は、次のステップの反応に直接使用された。

化合物３５（１１０ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）を乾燥のＤＭＦ（５ｍＬ）に溶かし、氷浴で０℃まで冷却し、ＥＤＣＩ（１５０ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１０６ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）を加え、０℃に保持して１０ｍｉｎ撹拌し、化合物１８（９６ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）及びｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔ（１３４ｍｇ，１．０４ｍｍｏｌ）を加え、室温で維持して１２ｈ撹拌した後、水２０ｍＬを加えて希釈し、ＥｔＯＡｃで（１５ｍＬ×３回）抽出を行い、有機相を混合した。有機相を１Ｎ塩酸（１５ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１５ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）でそれぞれ洗浄を行い、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶剤を減圧回転して除去した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝２：１）で精製して、製品３６（１４６ｍｇ，８６．４％，薄黄色油状物）を得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.95 (s, 1H), 7.47 (d, J=3.9 Hz, 1H), 7.39 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.03 (dd, J=5.1, 3.9 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.42 (q, J=6.3 Hz, 2H), 2.31 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.65-1.71 (m, 4H)。

ヒドロキシルアミン塩酸塩（２１５ｍｇ，３．１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１５ｍＬ）に懸濁し、ＫＯＨ（２６０ｍｇ，４．６５ｍｍｏｌ）を加え、５ｍｉｎ撹拌した後、ろ過して不溶物を除去し、ろ液を収集して用意しておいた。化合物３６（１００ｍｇ，０．３１ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）に溶かし、前記新たに調製されたヒドロキシルアミンのＭｅＯＨ溶液を加え、室温下で１ｈ撹拌した。ＴＬＣで反応が完全に終了したことを確認し、ＥｔＯＡｃで希釈を行い、１Ｎ塩酸でｐＨ＝５〜６になるまで中和し、ＭｅＯＨを減圧濃縮して回転蒸発し、ＥｔＯＡｃで抽出を行い（１５ｍＬ×３回）、飽和食塩水で洗浄し（１０ｍＬ）、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮して粗生成物を得た。さらに、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製して（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ＝２０：１−１０：１）製品ＣＦＨ３２５−Ｂ（８６ｍｇ，８６％，白色固体）を得た。¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 8.09 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.66 (d, J=3.9 Hz, 1H), 7.60 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.14 (dd, J=3.9, 5.1 Hz, 1H), 3.42 (q, J=6.3 Hz, 2H), 2.16 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.68-1.71 (m, 4H)。

生物実験の実施例
実例１：ヒストン脱アセチル化酵素１，３，６（ＨＤＡＣ１，３，６）の阻害活性テスト実験

１．実験目的
本発明の化合物のヒトヒストン脱アセチル化酵素１，３，６の阻害活性テストを行う。

２．材料由来
ヒトＨＤＡＣ１、ＨＤＡＣ３及びＨＤＡＣ６、バキュロウイルス発現システムを使用することによって得られた。

３．テスト原理
Ａｃ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ（Ａｃ）−ＡＭＣ（ＨＤＡＣ１，３）及びＢｏｃ−ｌｙｓ（Ａｃ）−ＡＭＣ（ＨＤＡＣ６）を基質とし、蛍光検出法を使用し、９６ウェルまたは３８４ウェル平底マイクロプレートにおいて酵素活性を測定した。基質がＨＤＡＣによって脱アセチル化された後、トリプシンによって加水分解して得た生成物ＡＭＣについて、蛍光検出装置の波長３５５ｎｍで励起を行い、４６０ｎｍ蛍光波長における蛍光信号を検出することができる。時間の経過に伴う蛍光信号の変化を検出することによって、反応の初期速度を算出する。

４．実験過程
サンプル処理：サンプルをＤＭＳＯで溶かし、低温で保管し、最終システムにおけるＤＭＳＯの濃度が活性の検出に影響しない範囲内に制御される。

データ処理及び結果についての説明：初期スクリーニングは、単一の濃度条件、例えば、２０ μｇ／ｍｌを選用してサンプルの活性に対して測定を行う。一定の条件下で活性を示し、例えば阻害率が５０％以上のサンプルに対して、活性の用量依存関係即ちＩＣ_５０／ＥＣ_５０値を測定する。当該ＩＣ_５０／ＥＣ_５０値は、サンプルの濃度に対するサンプルの活性の非線形フィッティングによって算出される。計算に使用されるソフトウェアがＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍ４で、フィッティングに使用されるモデルがｓｉｇｍｏｉｄａｌｄｏｓｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ（ｖａｒｉｂｌｅｓｌｏｐｅ）で、多くの阻害剤スクリーニングモデルに対して、フィット曲線の底部及び頂部を０及び１００に設定する。普通の状況下で、各サンプルのテストにおいて、複数のウェル（ｎ≧２）が設置され、結果においては標準偏差（ＳｔａｎｄａｒｄＤｅｖｉａｔｉｏｎ，ＳＤ）または標準誤差（ＳｔａｎｄａｒｄＥｒｒｏｒ，ＳＥ）で表示する。テストのいずれにおいても、既に開示された化合物ＳＡＨＡ（Ｖｏｒｉｎｏｓｔａｔ）を対照とした。

５．実験結果

上記表の実験結果から次のことが教示された。すなわち、Ｒ_２部の変更について、生物結果から見ると、アルキル基、オレフィン基及びアリール基置換は共に良好なＨＤＡＣ阻害活性を表し、置換基の多様化が化合物の生物活性に有利である。イソブチレン基置換の化合物ＣＦＨ３９５は、ＨＤＡＣ１に対する阻害活性に最も優れている。化合物ＣＦＨ３５５、ＣＦＨ４３７、ＣＦＨ４１７がＨＤＡＣ１（ＨＤＡＣ１／ＨＤＡＣ６＝〜３０倍）を選択的に阻害する。また、ＨＤＡＣ１及びＨＤＡＣ３に対する化合物ＣＦＨ３５５の選択性は８倍である。

また、生物活性が、Ｒ_２部の置換基が同一で、Ｙが−（Ｃ_１〜Ｃ_１０アルキル基）−である時に、鎖の長さが活性に対して大きな影響を示した。また、側鎖の長さが同じで、Ｒ_２置換基が異なる場合の化合物の活性も非常に異なる。例えば、イソブチル基により置換された化合物類において、鎖長が７つのメチレン基である時にＨＤＡＣ１阻害活性が最もよいが、シクロプロピル基により置換された場合に、鎖長が６つのメチレンである時にＨＤＡＣ１阻害活性が最もよい。

Ｒ_２基がイソブチル基により置換された場合について、発明者らは側鎖セクションＹ及び種々の異なるＺｎイオンキレート基（ＺＢＧ）を考察した。ＨＤＡＣ１に対する阻害作用、ＺＢＧがヒドロキサム酸である時に活性が最もよく、ＺＢＧがα−メルカプトケトンである時に、ＨＤＡＣ６を選択的に阻害し、特に化合物ＣＦＨ３９８−Ｓの場合である。

Ｒ_２基がシクロプロピル基により置換された場合について、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂの置換を考察した。ＨＤＡＣに対する阻害活性について、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがこれらと結合するＣと６員環を形成する時、即ち化合物ＣＦＨ４２１−ＣはＨＤＡＣ１に対して最も強い阻害活性を示し、且つＨＤＡＣ１（ＨＤＡＣ１／ＨＤＡＣ６＝〜７５倍）を選択的に阻害することが分かった。
実例２：細胞レベルの抗腫瘍活性テスト実験

１．実験目的
本発明の化合物の抗腫瘍活性テストを行い、ヒト結腸ガンＨＣＴ−１１６細胞株に対する化合物の生長阻害活性を測定することによって化合物の体外抗腫瘍活性を評価する。

２．テスト原理
メチルチアゾリルテトラゾリウム（ＭＴＴ）比色法を使用し、該分析方法は３−（４，５−ジメチル−２−チアゾリル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を代謝還元することをベースとする。生細胞のミトコンドリアにはＮＡＤＰと関る脱水素酵素が存在しており、黄色のＭＴＴを不溶性の青紫色のホルマザン（Ｆｏｒｍａｚａｎ）に還元でき、死細胞には該酵素が消えたため、ＭＴＴが還元されない。ＤＭＳＯでＦｏｒｍａｚａｎを溶解した後マイクロプレートリーダーによって５５０／６９０ｎｍ波長の処で光密度を測定できる。

３．実験過程
サンプル処理：サンプルをＤＭＳＯで溶解し、低温で保管し、活性の検出に影響を与えない範囲内に、最終体系におけるＤＭＳＯの濃度を制御する。

ＭＴＴ法を使用して細胞の生存率を測定し、即ち対数成長期に生長している細胞を、０．０５％のトリプシンによって消化し、計数を行い、２．０×１０^３／ウェルの細胞密度で９６ウェルプレート内に１００ｍＬ接種し、５％ＣＯ_２インキュベータ内に３７°Ｃ一晩培養する。各化合物が６つの濃度勾配を設け、各濃度について３つのウェルを設け、各濃度のものを対応するウェル内に入れ、５％ＣＯ_２の３７°Ｃインキュベータ内に７２ｈ培養し、２０ｍＬの５ｍｇ／ｍＬＭＴＴを加える。３７℃で３ｈ経過した後、上澄み液を吸引して廃棄し、１００ｍＬのＤＭＳＯを加えて溶解し、ＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ３４０を使用して５５０ｎｍ（Ｌ１）の光吸収値を測定し、参照波長が６９０ｎｍ（Ｌ２）で、を阻害剤の異なる濃度における（Ｌ１−Ｌ２）値で図を作成し、数式でフィッティングすることによってＩＣ_５０を得る。

データ処理及び結果についての説明：初期スクリーニングが単一の濃度条件下で、例えば、２０μｇ／ｍｌの濃度でサンプルの活性に対して測定を行う。一定の条件下で活性を表すサンプル、例えば阻害率が５０％以上のサンプルに対して、活性用量の依存関係即ちＩＣ_５０／ＥＣ_５０値を測定する。当該ＩＣ_５０／ＥＣ_５０値は、サンプルの濃度に対するサンプルの活性の非線形フィッティングによって算出される。計算に使用されるソフトウェアがＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍ４で、フィッティングに使用されるモデルがｓｉｇｍｏｉｄａｌｄｏｓｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ（ｖａｒｉｂｌｅｓｌｏｐｅ）で、多くの阻害剤スクリーニングモデルに対して、フィット曲線底部及び頂部を０及び１００に設定する。普通の状況下で、各サンプルはテスト中に複数のウェル（ｎ≧２）が設置され、結果において標準偏差（ＳｔａｎｄａｒｄＤｅｖｉａｔｉｏｎ，ＳＤ）または標準誤差（ＳｔａｎｄａｒｄＥｒｒｏｒ，ＳＥ）で表示する、毎回の測定は共にドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）を参照とする。

４．実験結果
４．１：ＨＣＴ−１１６ヒト結腸ガン細胞株における化合物の活性結果

４．２：ＢｘＰＣ−３ヒト膵臓癌細胞株における化合物の活性結果。

４．３：その他の腫瘍細胞株における化合物の阻害活性結果。

５．結論：ＨＤＡＣＩに対する阻害活性を有する化合物のいずれも、良好な腫瘍細胞増殖を阻害する活性を有し、特に、結腸ガン、膵臓ガン、肺腺ガン、乳腺ガン等に対して優れた効果を有する。腫瘍細胞株の生長に対する阻害活性から見て、化合物の細胞における活性がほぼ酵素における活性と一致する。

実例３：多発性硬化症（ＭＳ）を治療する薬物としてのＨＤＡＣ阻害剤
１．実験方法及び結果

ＨＤＡＣｉＣＦＨ３６７−ＣのＥＡＥを有効に緩和できる臨床点数。本発明者は８周齢のメスＣ５７マウスに対して１００μＬフロイント完全アジュバントにより乳化されたＭＯＧ_{３５−５５}（１５０μｇ／匹）及び熱不活性化ＭＴ毒素（５ｍｇ／ｍＬ）を皮下注射し、且つ当日及び三日目において二回でＰＴＸ（２００ｎｇ／匹／回，ＰＢＳ溶解）を腹腔内注射する。免疫した後三日目から一日二回で、胃管を用いて注入投与し、毎回の用量が１０ｍｇ／ｋｇ体重である。毎日にてマウスの表現を観察し、且つ以下の基準に基づいて点数をつけ：０点：いかなる発病の症状がない；尾部無力（０．５点）または麻痺（１点）。以上の点数を足して最終の点数を得る。結果は、ＣＦＨ３６７−ＣがＥＡＥの臨床症状に対して良好な治療作用を有し、治療群マウスの疾患の重症度が溶剤対照群より顕著に低い（Ｐ＜０．０１）ことを示した（図１）。

ＨＤＡＣｉＣＦＨ３６７−ＣがＥＡＥ動物脊髄の脱髄現象を顕著に軽減する。正常対照群、ＥＡＥ（実験的自己免疫性脳脊髄炎）及びＥＡＥ治療群マウスの脊髄サンプルを取り、固定した後、パラフィン包埋し、５μｍ切片し、脱蝋・水和して９５％アルコールへ、ルクソール・ファースト青染色して５６℃で一晩経過し、９５％アルコール洗浄、水洗浄し、その後０．０５％炭酸リチウム溶液で色だしを行い、さらに７０％アルコールで２回洗浄し、蒸留水で洗浄し、その後、２分間エオジン染色し、勾配エタノール脱水を行い、キシレンで透明化させ、中性ゴムで封入する。ルクソール・ファースト青染色の主な部位が脊髄の白質であり、主に神経線維及び髄鞘によって構成される。実験結果は、正常のマウスの白質は青色に染められ、構造が比較的緻密であるが、ＥＡＥマウスの脊髄の白質エリアには大量の空胞が認められ、且つ着色の程度が顕著に低下し、深刻な脱髄現象が現れることを表明した。一方、ＣＦＨ３６７−Ｃ投与されたマウスの脊髄の白質は構造が緻密で、着色が均一で、正常対照群のマウスのレベルと接近するため、その顕著な治療作用が現れた。

ＨＤＡＣｉＣＦＨ３６７−ＣがＥＡＥ動物脊髄における末梢性免疫細胞の浸潤現象を顕著に軽減する。正常対照群、ＥＡＥマウス及びＥＡＥ治療群マウスの脊髄サンプルを取り、固定した後、パラフィン包埋し、５μｍ切片し、切片をキシレンで脱蝋し、各クラスのアルコールで再水和した後、５分間ヘマトキシリン染色し、その後水道水で洗浄し、塩酸で色だしを行い、水道水で洗浄し、さらに２分間エオジン染色し、勾配エタノール脱水を行い、キシレンで透明化させ、中性ゴムで封入シする。実験結果は、正常のマウスの脊髄には浸潤の末梢性免疫細胞がほぼないが、ＥＡＥマウスの脊髄白質エリアには大量の末梢性免疫細胞の浸潤が認められ、且つ付属組織の損傷に至り、空胞が現れたことを表明した。一方、ＣＦＨ３６７−Ｃ投与されたマウスの脊髄の白質は構造が緻密で、明らかな末梢性免疫細胞の浸潤が認められないため、その顕著な治療作用を示した。

ＨＤＡＣｉＣＦＨ３６７−ＣがＥＡＥ動物脊髄におけるＣＤ４５陽性白血球の浸潤現象を顕著に軽減する。マウス脊髄を取り、固定した後、ＯＣＴパラフィン包埋し、１０μｍ冷凍切片を作る。切片をＰＢＳで３回、毎回５分間洗浄し、その後抗ＣＤ４５の抗体（一次抗体）を使用して４℃で一晩培養し、ＰＢＳで３回洗浄した後、蛍光マークを有する二次抗体を使用して３７℃で１ｈ染色し、ＰＢＳで３回洗浄した後、グリセリンで封入する。ＣＤ４５が白血球共通抗原であり、実験結果は、細胞核染色はＥＡＥ実験マウスの脊髄には大量の細胞凝集を有し、その大部分がＣＤ４５陽性の白血球であることを表明した。この現象は正常のマウスには存在しないが、ＣＦＨ３６７Ｃ投与されたマウスにおいてもＣＤ４５陽性白血球の凝集が確認されないため、ＣＦＨ３６７−Ｃが白血球のＥＡＥマウス脊髄に対する浸潤現象を抑制できることを表した。

ＨＤＡＣｉＣＦＨ３６７−ＣがＥＡＥ動物脊髄におけるＣＤ４陽性Ｔ細胞の浸潤現象を顕著に軽減する。前期研究はＣＤ４陽性Ｔ細胞がＥＡＥの発病に対して重要な作用を有することを表明した上で、本発明者が薬物のＣＤ４陽性Ｔ細胞に対する浸潤作用についても観察した。マウス脊髄を取り、固定した後、ＯＣＴパラフィン包埋し、１０μｍ冷凍切片を作る。切片をＰＢＳで３回、毎回５分間洗浄し、その後抗ＣＤ４の抗体（一次抗体）を使用して４℃で一晩培養し、ＰＢＳで３回洗浄した後、蛍光マークを有する二次抗体を使用して３７℃で１ｈ染色し、ＰＢＳで３回洗浄した後、グリセリンで封入する。実験結果は、細胞核染色はＥＡＥ実験マウスの脊髄には大量の細胞凝集を有し、多くの部分がＣＤ４陽性のＴ細胞であることを表明した。この現象は正常のマウスには存在しないが、ＣＦＨ３６７Ｃ投与がＥＡＥマウス脊髄におけるＣＤ４陽性Ｔ細胞の浸潤及び凝集を顕著に減少できる。

２．結論
ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬ＣＦＨ３６７−ＣがＭＳの実験マウス動物モデルＥＡＥの臨床症状を有効に緩和できる。ＥＡＥマウスの脊髄に対して染色を行う実験によって、ＣＦＨ３６７−Ｃが末梢性免疫細胞の、特にＣＤ４陽性Ｔ細胞のマウス中枢神経系に対する浸潤を抑制し、ＥＡＥ動物ニューロンの脱髄現象を軽減し、それによって、ＥＡＥの臨床表現を緩和することができることを発見した。本研究の結果は、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬ＣＦＨ３６７−ＣがＭＳ疾患の治療に用いられることができ、且つさらに関節リウマチ、乾癬、全身性エリテマトーデス等を含むその他の自己免疫疾患の治療に応用されることが可能であることを表した。

Claims

一般式ＩＩＩに示されたチアゾール系化合物であって、

式中、
Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがそれぞれ独立してＨ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基もしくはＣ_６〜Ｃ_１０アリール基であり、または、Ｒ_４ｂ及びＲ_５ｂがこれらと結合するＣと共に３〜１０員環を形成し、
Ｒ_２が、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_６アルコキシ基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_１〜Ｃ_８アルコキシ基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル基により置換されたＣ_３〜Ｃ_６シクロアルキル基、ヒドロキシル基とハロゲン原子とベンジルオキシ基とＣ_６〜Ｃ_１０アリール基とからなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_１〜Ｃ_６アルキル基、Ｃ_２〜Ｃ_８アルケニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基により置換されたＣ_２〜Ｃ_６アルケニル基、Ｃ_６〜Ｃ_１０アリール基、または、ハロゲン原子とニトロ基とからなる群より任意に選択された少なくとも１種により置換されたＣ_６〜Ｃ_１０アリール基であり、
Ｙが−（Ｃ_１〜Ｃ_１０アルキレン基）−、−（Ｃ_２〜Ｃ_９アルケニレン基）−、−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリーレン基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキレン基）−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリーレン基）−、−（Ｃ_６〜Ｃ_１０アリーレン基）−（Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニレン基）−、−（Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキレン基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン基）−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン基）−、−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン基）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（Ｃ_１〜
Ｃ_５アルキレン基）−もしくは−（Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン基）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（Ｃ_２〜Ｃ_９アルケニレン基）−であり、
Ｒ_３がＲ_３ａ、Ｒ_３ｂ、Ｒ_３ｃ、Ｒ_３ｄまたはＲ_３ｅで、

そのうち、Ｒ_８がＨまたはＣ_１〜Ｃ_６アルキルカルボニル基で、
Ｒ_９がＨまたはＣ_１〜Ｃ_１０アルキルカルボニル基である、チアゾール系化合物。
前記化合物は、具体的に、

からなる群から選択される、請求項１に記載のチアゾール系化合物。
前記化合物は、具体的に、

からなる群から選択される、請求項１に記載のチアゾール系化合物。
請求項１に記載のチアゾール系化合物の調製方法であって、前記調製方法は、下記のルート１〜ルート４のいずれか１種によって実施され、

そのうち、
Ｒ_１は、

で、ｎ＝０、ＸはＮＨであり、Ｒ_２、Ｒ_４ｂ、Ｒ_５ｂ及びＹの定義が請求項１と同様であり、
ＴＨＦ中で化合物１と活性化した亜鉛粉末とを用いて化合物２を形成し、酢酸パラジウム及びトリフェニルホスフィンの触媒作用下でトルエン中で化合物２と２−ブロモチアゾール化合物３とをＮｅｇｉｓｈｉカップリング反応させることによって化合物４を得、化合物４を水酸化ナトリウム／メタノール−水系中で加水分解し、対応する酸である化合物５を得、化合物５を求核試薬ＨＸ−Ｙ−ＣＯＯＭｅと、縮合剤ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔの作用下でＤＭＦ中で縮合反応させて化合物６を得、化合物６を新たに調製されたヒドロキシルアミンのメタノール溶液と反応させることで本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ａを得、

そのうち、Ｒ_１、Ｒ_２、ｎ、Ｘ及びＹの定義が前記と同様であり、Ｒ_８の定義が請求項１と同様であり、
化合物６をメタノールまたはＴＨＦ／水系中でアルカリ加水分解することによって化合物Ｉ_ｅを得、化合物Ｉ_ｅをモノＢｏｃ保護のｏ−フェニレンジアミンと、縮合剤ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔの作用下でＤＭＦ中で縮合反応させて化合物７を得、塩酸酢酸エチル溶液の作用下で化合物７のＢｏｃ保護基を除去して本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｂを得、または化合物７を求核試薬Ｒ_８Ｈと反応させて本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｂを得、

そのうち、Ｒ_１、Ｒ_２、ｎ、Ｘ及びＹの定義が前記と同様であり、
化合物５と求核試薬ＨＸ−Ｙ−ＮＨＣＯＣＨ_２ＳＴｒｔとを、縮合剤ＥＤＣＩ及びアルカリとしてのＤＭＡＰが存在する条件下でジクロロメタン中で縮合反応させて化合物８を得、トリフルオロ酢酸の条件下で化合物８の保護基を除去して本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｃを得、

そのうち、Ｒ_１、Ｒ_２、ｎ、Ｘ及びＹの定義が前記と同様であり、Ｒ_９の定義が請求項１と同様であり、
化合物５を求核試薬ＨＸ−Ｙ−ＳＲ_９と、縮合剤ＥＤＣＩ、ＨＯＢｔ、ｉ−Ｐｒ_２ＮＥｔの作用下で、ＤＭＦ中で縮合反応させて本発明に係るチアゾール系化合物Ｉ_ｄを得る、チアゾール系化合物の調製方法。
請求項３に記載のチアゾール系化合物の、ヒストン脱アセチル化酵素阻害薬の薬物を調製することにおける使用方法。
請求項３に記載のチアゾール系化合物の、抗腫瘍の薬物を調製することにおける使用方法。
前記腫瘍が結腸ガン、膵臓ガン、白血病、肺ガンまたは乳腺ガンである、請求項６に記載の使用方法。
請求項３に記載のチアゾール系化合物の、多発性硬化症の治療薬を調製することにおける使用方法。