JP6048650B2 - 糖鎖認識分子を検出するための膜担体 - Google Patents
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Description
<1> 糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出するためのデバイスに用いられる膜担体であって、
当該糖鎖が結合したタンパク質が検出ラインに固定化され、
前記糖鎖が結合したタンパク質が、還元的アミノ化反応により、前記糖鎖の還元末端と前記タンパク質のアミノ基とが結合してなり、かつ、
前記タンパク質がアルブミンである、膜担体。
<2> 糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出する方法であって、
被験試料を、糖鎖を認識する分子を認識しかつ標識されている分子に接触させた後、<1>に記載の膜担体において、当該被験試料を前記検出ラインに向けて展開させ、当該検出ラインにおいて前記標識物質を検出する方法。
<3> 糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出するためのデバイスであって、<1>に記載の膜担体と、下記(a)〜(c)からなる群から選択される少なくとも1の構成要素とを備えるデバイス
(a) サンプルパッド
(b) コンジュゲートパッド
(c) 吸収パッド。
本発明は、糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出するためのデバイスに用いられる膜担体であって、当該糖鎖が結合したタンパク質が検出ラインに固定化された膜担体を提供するものである。
本発明は、糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出する方法であって、被験試料を、糖鎖を認識する分子を認識しかつ標識されている分子に接触させた後、本発明の膜担体において、当該被験試料を前記検出ラインに向けて展開させ、当該検出ラインにおいて前記標識物質を検出する方法を提供するものである。
本発明は、糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出するためのデバイスであって、前述の本発明の膜担体と、下記(a)〜(c)からなる群から選択される少なくとも1の構成要素とを備えるデバイス
(a) サンプルパッド
(b) コンジュゲートパッド
(c) 吸収パッド
を提供するものである。このような本発明のデバイスの好適な一例を図1及び2に示す。図1は、かかるデバイスの概略平面図であり、図2は、図1に示すデバイスを図1のI−II線に沿って切断した場合の切断面を示す概略側断面図である。以下、これら図面を参照しながら本発明のデバイスについて説明する。
先ず、糖脂質(ガングリオシドGM1)の糖鎖(GM1)の還元末端と、ヒト由来アルブミンのアミノ基とを結合させるべく、還元アミノ化反応を行った。この還元アミノ化反応においては、66μgのアルブミンに対し、反応させる糖鎖量は1000μg、500μg、250μg、125μg又は62.5μgとした。
前記の通り調製したGM1結合アルブミン(アルブミン1分子に結合している糖鎖の平均本数:20)又はアルブミンを1μgずつ、三種類のイムノクロマトメンブレンにスポットした。用いたメンブレンは、ニトロセルロースからなるミリポア社製のメンブレン HiFlow Plus HFB180UBCAST、HiFlow Plus HFB07502及びHiFlow Plus HFB12002である。そして、GM1結合アルブミン又はアルブミンをスポットしたメンブレンを風乾させた後、HRP−CTB(HRP−CTBの濃度:0.2μg/mL)及び4−クロロ−1−ナフトールを用いて、発色させた。得られた結果を図5に示す。
糖脂質認識分子を検出する方法として、ELISA法がある。ELISA法において、糖脂質認識分子を検出する場合には、通常1ウェルあたり100ngのGM1ガングリオシドが固定化されたマイクロプレートが用いられる(特許文献1 参照)。そこで、糖脂質認識分子を検出する点において、かかるELISA法と、本発明の膜担体を用いたイムノクロマトグラフィーとを比較した。
Claims (3)
- 糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出するためのデバイスに用いられる膜担体であって、
当該糖鎖が結合したタンパク質が検出ラインに固定化され、
前記糖鎖が結合したタンパク質が、還元的アミノ化反応により、前記糖鎖の還元末端と前記タンパク質のアミノ基とが結合してなり、かつ、
前記タンパク質がアルブミンである、膜担体。 - 糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出する方法であって、
被験試料を、糖鎖を認識する分子を認識しかつ標識されている分子に接触させた後、請求項1に記載の膜担体において、当該被験試料を前記検出ラインに向けて展開させ、当該検出ラインにおいて前記標識物質を検出する方法。 - 糖鎖を認識する分子をイムノクロマトグラフィーにより検出するためのデバイスであって、請求項1に記載の膜担体と、下記(a)〜(c)からなる群から選択される少なくとも1の構成要素とを備えるデバイス
(a) サンプルパッド
(b) コンジュゲートパッド
(c) 吸収パッド。
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