JP6031334B2 - メラノサイト分化誘導抑制剤及びその使用方法 - Google Patents
メラノサイト分化誘導抑制剤及びその使用方法 Download PDFInfo
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Description
(1)ジヒドロケルセチン若しくはジヒドロケルセチン誘導体又はそれらの塩を有効成分として含有するメラノサイト分化誘導抑制剤。
(2)(1)記載のメラノサイト分化誘導抑制剤を含有する色素異常症改善又は治療用組成物。
(3)(1)記載のメラノサイト分化誘導抑制剤を含有するシミ改善用組成物。
上述のように、従来のメラノーマ細胞や最終分化後のメラノサイト及びマッシュルーム由来チロシナーゼ等を用いて行う従来のスクリーニング系ではなく、未分化な幹細胞からメラノサイトへの分化誘導系をスクリーニング系として用いていることにより、メラノサイトの分化自体を抑制する素材の探索を行ったところ、ジヒドロケルセチンが、幹細胞からメラノサイトへの分化誘導抑制活性を有することを見出した。
〔実施例1〕幹細胞からメラノサイトへのジヒドロケルセチンの分化誘導抑制効果の評価
以下に、ジヒドロケルセチンを用いて、幹細胞からメラノサイトへの分化誘導抑制効果を評価し、ジヒドロケルセチンのメラノサイトへの分化誘導抑制剤としての効果について確認した。
本実験例では、過去に山根らが開発したマウスES細胞からのメラノサイト分化誘導系(Yamane T., Hayashi S., Mizoguchi M., Yamazaki H., Kunisada T., Developmental Dynamics, 1999年, Vol. 216, Issue 4-5, pp. 450-458)を用いて、ジヒドロケルセチンの効果を検討した。本誘導系を用いることで、メラノサイトの発生から成熟までの全ての段階において素材の評価を行うことが可能となる。以下に詳細を説明する。
これらの試験結果を以下の表1に示す。
試験例1と同様に、マウスES細胞からメラノサイトへの分化誘導を実施し、メラノサイトへの分化効率についてメラノサイトの特異的マーカー遺伝子(Mitf-M及びTyrp1)の発現を指標に評価した。
Mitf-M用のプライマーセット:
5'-TGCCTTGTTTATGGTGCCTTCT-3'(配列番号1)、及び
5'-TCCCTCTACTTTCTGTAATTCCAATTC-3'(配列番号2)
Tyrp1用のプライマーセット:
5'-CAACGCTATGCTGAGGACTATGA-3'(配列番号3)、及び
5'-GCGGCTATCAGACCATGGA-3'(配列番号4)
Gapdh用のプライマーセット:
5'-TGCACCACCAACTGCTTAGC-3'(配列番号5)、及び
5'-TCTTCTGGGTGGCAGTGATG-3'(配列番号6)
その結果を下記の表2に示す。
ジヒドロケルセチンについて、処方例として下記の製剤化を行った。
成分1〜6及び12と、成分7〜11をそれぞれ均一に溶解した後、双方を混合し、濾過することで製品とした。
処方例1において、ジヒドロケルセチンを精製水に置き換えたものを従来のローションとした。
成分2〜9を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とした。また、成分1及び成分11〜14を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とした。次いで、油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、45℃で成分10を加え、さらに30℃まで冷却することで製品とした。
処方例2において、ジヒドロケルセチンを精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。
成分1〜5を混合し、次いで10%の水を結合剤として加えて、押出し造粒に供した後、乾燥させた。成形した顆粒に成分6を加えて混合し、打錠した。1錠を0.52gとした。
処方例3において、ジヒドロケルセチンを精製水に置き換えたものを従来の錠剤とした。
成分1〜4を成分5の一部の水に撹拌溶解した。次いで、成分5の残りの水を加えて混合した。
処方例4において、ジヒドロケルセチンを水に置き換えたものを従来の飲料とした。
実施例2で製造した処方例1のローション及び処方例2のクリーム並びに比較処方例1のローション及び比較処方例2のクリームを用いて、シミ及びくすみに悩む女性30人(18才〜50才)を対象に2ヶ月間の使用試験を行った。
使用後、シミ及びくすみの改善作用をアンケートにより判定した。
結果を表7に示す。
Claims (3)
- ジヒドロケルセチン若しくはジヒドロケルセチン誘導体又はそれらの塩を有効成分として含有する、幹細胞からメラノサイトへの分化誘導抑制剤。
- 請求項1記載の幹細胞からメラノサイトへの分化誘導抑制剤を含有する、メラノサイトの分化異常に伴う色素異常症改善又は治療用組成物。
- 請求項1記載の幹細胞からメラノサイトへの分化誘導抑制剤を含有する、メラノサイトの分化異常に伴うシミ改善用組成物。
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