JP5953643B2 - ガラス化保存胚入り移植用ストロー及びその製造方法 - Google Patents
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Description
牛の低品質胚を用いて上述したガラス化保存胚入り移植用ストロー10を作製し、移植を行った。その際、移植液には0.4%のウシ血清アルブミンを含むm−199液用い、希釈液には0.2Mの蔗糖と0.4%のウシ血清アルブミンとを含むPBSを用い、ガラス化液には15%のエチレングリコールと15%のジメチルスルホキシドと0.5Mの蔗糖と0.4%のウシ血清アルブミンとを含むm−199液を用いた。移植は14頭について行った。その結果、受胎頭数は8頭であり、受胎率は57.1%であった。表1に受胎の結果を示す。
牛の遺伝子診断胚を用いて実施例1と同様にしてガラス化保存胚入り移植用ストロー10を作製し、移植を行った。移植は22頭について行った。その結果、受胎頭数は11頭であり、受胎率は50.0%であった。表2に受胎の結果を示す。このように、本実施例によれば、遺伝子診断胚を用いても、50%程度の高い受胎率を得られることが分かった。すなわち、すなわち、本発明のガラス化保存胚入り移植用ストロー10を用いれば、遺伝子診断胚であっても、高い受胎率を得られることが分かった。
Claims (6)
- 移植用ストローの中に、移植液層と、第1の希釈液層と、哺乳動物の胚(ヒト胚を除く)およびガラス化液を含む胚含有部と、第2の希釈液層とをこの順に備え、
前記移植液層、前記第1の希釈液層、および、前記第2の希釈液層は、それぞれ凍結され、前記胚含有部は、ガラス化保存されたものであり、
前記移植液層は空気層を介して分割されており、
前記移植液層と前記第1の希釈液層との間には空気層が設けられた
ことを特徴とするガラス化保存胚入り移植用ストロー。 - 前記胚含有部は、哺乳動物の胚(ヒト胚を除く)およびガラス化液を含む液滴を冷却した冷却体に滴下することによりガラス化させたものであることを特徴とする請求項1記載のガラス化保存胚入り移植用ストロー。
- 前記第2の希釈液層は、前記移植用ストローよりも内径が小さい細管に希釈液を吸引して凍結させたものであることを特徴とする請求項1又は請求項2記載のガラス化保存胚入り移植用ストロー。
- 前記移植用ストローにおいて前記第2の希釈液層の側の端部は、一部に開口を設けて閉鎖されていることを特徴とする請求項1から請求項3のいずれか1に記載のガラス化保存胚入り移植用ストロー。
- 移植用ストローの中に、空気層を介して分割して凍結した移植液層と、この移植層との間に空気層を設けて凍結した第1の希釈液層とを、この順に配置して形成する工程と、哺乳動物の胚(ヒト胚を除く)およびガラス化液を含む液滴を冷却した冷却体に滴下し、ガラス化させることにより形成した胚含有部を、移植液層および第1の希釈液層を形成した移植用ストローの中に挿入し、移植液層、第1の希釈液層、胚含有部の順となるように配置する工程と、胚含有部を挿入した移植用ストローの中に凍結した第2の希釈液層を形成し、移植液層、第1の希釈液層、胚含有部、第2の希釈液層の順となるように配置する工程と
を含むことを特徴とするガラス化保存胚入り移植用ストローの製造方法。 - 前記第2の希釈液層は、移植用ストローよりも内径が小さい細管に希釈液を吸引して凍結させて形成したのち、細管から取り出し、移植用ストローの中に挿入することを特徴とする請求項5記載のガラス化保存胚入り移植用ストローの製造方法。
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