JP5811786B2 - Method for producing cell culture vessel - Google Patents

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Description

本発明は細胞培養容器の製造方法に関する。   The present invention relates to a method for producing a cell culture container.

微生物や細胞の適するプラスチック製のシャーレの製造方法として、特許文献１によるものが提案されている。特許文献１ではフィルムの表面に親水性膜として酸化ケイ素を蒸着したプラスチックフィルム層にシャーレの底部内面をインサート射出成型法により貼設する技術が開示されている。   As a method for producing a plastic petri dish suitable for microorganisms and cells, a method according to Patent Document 1 has been proposed. Patent Document 1 discloses a technique in which the bottom inner surface of a petri dish is attached to a plastic film layer in which silicon oxide is deposited as a hydrophilic film on the surface of the film by an insert injection molding method.

実開平５−８８２９９号公報Japanese Utility Model Publication No. 5-88299 特開平２−２１１８６５号公報JP-A-2-21865

近年、ポリイソプロプルアクリルアミドなどの温度応答性高分子を用いてシート状に形成した細胞シートを非侵襲的に回収する技術が、例えば、特許文献２に報告されている。射出成型のような熱及び圧力を伴うプロセスにより、温度応答性高分子を含む親水性高分子膜を備えたフィルムを容器となる支持部材に接合する場合、親水性高分子膜の機能が劣化することが確認された。   In recent years, for example, Patent Document 2 reports a technique for noninvasively collecting a cell sheet formed into a sheet shape using a temperature-responsive polymer such as polyisopropyl acrylamide. When a film having a hydrophilic polymer film containing a temperature-responsive polymer is bonded to a support member serving as a container by a process involving heat and pressure such as injection molding, the function of the hydrophilic polymer film is deteriorated. It was confirmed.

本発明は、上記実情に鑑みてなされたものである。本発明は、機能性有機化合物層を有する機能性基体と、容器本体部材との、超音波溶着や射出成形などの熱及び圧力を伴う接合方法において、機能性有機化合物層の機能を維持しながら接合する技術を提供することを目的とする。   The present invention has been made in view of the above circumstances. The present invention is a method for joining a functional substrate having a functional organic compound layer and a container body member with heat and pressure such as ultrasonic welding and injection molding, while maintaining the function of the functional organic compound layer. It aims at providing the technique to join.

本発明は以下の発明を包含する。
（１）細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位において、樹脂を溶融一体化することにより接合する接合工程
を含む、前記方法。 The present invention includes the following inventions.
(1) A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The container body member or a member that is a part of the container body and the functional substrate are melted and integrated at a portion where the surface of the member is in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region of the functional substrate. The said method including the joining process joined by doing.

（２）前記接合工程が、予め用意された樹脂製の容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接し、かつ、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性基体の機能性有機化合物層が向くように組み合わせて配置し、その状態で、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位に超音波振動を与えることにより、該部位において樹脂を溶融一体化し、容器本体部材と機能性基体とを接合する超音波溶着工程を含む、（１）の方法。
（３）超音波溶着工程が、
前記部材と機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面とが接するように配置して組み合わせ、
機能性基体の第２領域と当接可能な突出部を備え、該突出部に包囲された部分が窪んでいる形状の超音波ホーンを、前記部材と機能性基体との組み合わせに対して、前記部材の側から、前記部材の表面上の、機能性基体の第２領域の裏側に位置する部分に前記突出部が接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーンから超音波振動を与えるか、或いは、前記機能性基体の側から、機能性基体の第２領域の表面上に前記突出部が接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーンから超音波振動を与える工程を含む、（２）の方法。 (2) In the joining step, a resin-made container main body member or a member that is a part thereof, and a functional base, a surface of the member, a surface of a fourth region of the functional base, The surface of the member is in contact with the surface of the two regions and arranged so that the functional organic compound layer of the functional substrate faces the space for containing cells and culture medium. Ultrasonic welding that applies ultrasonic vibration to a portion where the surface of the fourth region or the surface of the second region is in contact with the surface of the functional substrate to melt and integrate the resin at the portion, thereby joining the container body member and the functional substrate. The method of (1) including a process.
(3) The ultrasonic welding process
The member and the functional substrate are arranged and combined so that the surface of the member and the surface of the fourth region of the functional substrate are in contact with each other,
An ultrasonic horn comprising a protruding portion capable of contacting the second region of the functional substrate and having a recessed portion surrounded by the protruding portion, for the combination of the member and the functional substrate, From the side of the member, the protrusion is brought into contact with a portion located on the back side of the second region of the functional base on the surface of the member, and in this state, ultrasonic vibration is applied from the ultrasonic horn. Alternatively, the method includes a step of pressing from the side of the functional substrate so that the protruding portion is in contact with the surface of the second region of the functional substrate, and in that state, applying ultrasonic vibration from the ultrasonic horn. The method of (2).

（４）超音波溶着工程が、
溶着用治具上に、上方から、機能性有機化合物層が下面となるように機能性基体を載置し、該機能性基体の上方から更に前記部材を載置し、超音波ホーンを、前記部材の側から、前記部材の表面上の、機能性基体の第２領域の裏側に位置する部分に前記超音波ホーンが接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーンから超音波振動を与える工程
を含む、（２）又は（３）の方法。
（５）前記溶着用治具の、機能性基体が載置される部位が、機能性基体の第２領域と当接可能な突出部を備え、該突出部に包囲された部分が窪んでいる形状を有する、（４）の方法。
（６）超音波溶着工程が、機能性基体の機能性有機化合物層の表面に、取り外し可能な第１の保護部材を載せた状態で実施される、（２）〜（５）のいずれかの方法。
（７）容器本体部材が、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面と接合される樹脂製の第１部材であって、該表面に接合される部分が包囲する領域が開口されている形状の第１部材を少なくとも一部分に含み、
前記接合工程が、
前記第１部材を成形するための射出成形型であって、射出成形型内の所定位置に機能性基体を配置し、型締めした場合に、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面が、型内の、前記第１部材に対応する鋳型空間に露出するとともに、機能性基体の第１領域の表面及び第３領域の表面への溶融樹脂の流入が型の内壁により阻止されるように形成された前記射出成形型、の内部の前記所定位置に、機能性基体を配置し、型締めし、前記鋳型空間内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された前記第１部材を成形する工程
を含む、（１）の方法。 (4) The ultrasonic welding process
On the welding jig, from above, the functional substrate is placed so that the functional organic compound layer becomes the lower surface, and further the member is placed from above the functional substrate. From the side of the member, the ultrasonic horn is brought into pressure contact with the portion located on the back side of the second region of the functional base on the surface of the member, and in this state, ultrasonic vibration is applied from the ultrasonic horn. The method of (2) or (3) including the process of giving.
(5) A portion of the welding jig on which the functional base is placed includes a protrusion that can contact the second region of the functional base, and a portion surrounded by the protrusion is recessed. The method of (4), having a shape.
(6) The ultrasonic welding step is performed in a state where the removable first protective member is placed on the surface of the functional organic compound layer of the functional substrate, any one of (2) to (5) Method.
(7) The container body member is a resin first member to be bonded to the surface of the fourth region or the second region of the functional substrate, and the region surrounded by the portion to be bonded to the surface is opened. Including at least a portion of a first member having a configured shape,
The joining step includes
An injection mold for molding the first member, the surface of the fourth region of the functional substrate or the second region when the functional substrate is disposed at a predetermined position in the injection mold and clamped The surface of the mold is exposed to the mold space corresponding to the first member in the mold, and the inflow of the molten resin to the surface of the first region and the surface of the third region of the functional base is blocked by the inner wall of the mold. The functional base is placed at the predetermined position inside the injection mold formed in such a manner, the mold is clamped, the molten resin is filled in the mold space, and solidified. (1) The method of (1) including the process of shape | molding the said 1st member with which the base | substrate was integrated.

（８）細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、機能性有機化合物層が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、基材層側の表面の少なくとも一部が前記部材の鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された前記部材を成形する工程を含み、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
機能性基体の機能性有機化合物層により覆われる射出成形型の内壁面の領域が、機能性基体の第２領域と当接する当接領域と、該当接領域に包囲された窪み領域とを備え、機能性基体を前記内壁面の領域を覆うように配置した状態で射出成形型内に溶融樹脂を充填したときに、機能性基体の第２領域と内壁面の当接領域とが密接して、該第２領域及び該第２領域により包囲された第１領域への溶融樹脂の流入が阻止され、且つ、機能性基体の第１領域と、内壁面の窪み領域との間には空隙が形成される、前記方法。 (8) A cell culture container provided with a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
Inside the injection mold for molding the container main body member or a part thereof, the functional substrate, the functional organic compound layer covers a part of the inner wall surface of the injection mold, and the base material layer The functional substrate is integrated by arranging the mold so that at least a part of the surface on the side is exposed to the mold space of the member, clamping the mold, filling the molten resin in the injection mold, and solidifying it. Forming the formed member,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The region of the inner wall surface of the injection mold covered with the functional organic compound layer of the functional substrate includes a contact region that contacts the second region of the functional substrate, and a recessed region surrounded by the corresponding contact region, When the molten resin is filled in the injection mold in a state where the functional base is arranged so as to cover the area of the inner wall surface, the second area of the functional base and the contact area of the inner wall surface are in close contact with each other, The molten resin is prevented from flowing into the second region and the first region surrounded by the second region, and a gap is formed between the first region of the functional base and the recessed region of the inner wall surface. Said method.

（９）細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、該機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、第１領域を含む部分に、取り外し可能な第２の保護部材を載せた状態で、該第２の保護部材の側が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、且つ、基材層側の表面の少なくとも一部が前記部材の鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された容器本体部材又はその一部である部材を成形する工程を含む、前記方法。 (9) A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
Inside the injection mold for molding the container body member or a member that is a part of the container body, the functional substrate is a portion including the first region on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer. In a state where the removable second protective member is placed, the second protective member side covers a partial region of the inner wall surface of the injection mold, and at least a part of the surface on the base material layer side is the above-mentioned A container body member integrated with a functional substrate or a part thereof by placing the mold so as to be exposed in the mold space of the member, clamping the mold, filling the molten resin in the injection mold, and solidifying it. The said method including the process of shape | molding the member which is.

（１０）細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、該機能性基体の基材層側の表面の、第３領域を含む部分に、第３の保護部材を載せた状態で、機能性有機化合物層が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、且つ、前記第３の保護部材の表面の少なくとも一部が鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された容器本体部材又はその一部である部材を成形する工程を含む、前記方法。 (10) A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
Inside the injection mold for molding the container main body member or a member that is a part thereof, the functional substrate is placed on the surface of the functional substrate on the base material layer side including the third region. With the protective member placed, the functional organic compound layer covers a partial region of the inner wall surface of the injection mold, and at least a part of the surface of the third protective member is exposed to the mold space. A mold body, or a member that is a part of the container main body integrated with the functional substrate, is filled with a molten resin in the injection mold and solidified. Including said method.

本発明によれば、機能性有機化合物層を有する機能性基体と、容器本体部材との、超音波溶着や射出成形などの熱及び圧力を伴う接合方法において、機能性有機化合物層の機能を維持しながら接合することが可能である。   According to the present invention, the function of the functional organic compound layer is maintained in a bonding method involving heat and pressure, such as ultrasonic welding and injection molding, between the functional substrate having the functional organic compound layer and the container body member. It is possible to join them.

図１Aは、本発明において製造される細胞培養容器の一例を示す。図１BはI-I’断面図である。図１CはII-II'断面図である。FIG. 1A shows an example of a cell culture container produced in the present invention. FIG. 1B is a cross-sectional view taken along the line I-I ′. FIG. 1C is a cross-sectional view taken along the line II-II ′. 図２Aは、本発明において製造される細胞培養容器の一例を示す。図２BはIII-III’断面図である。FIG. 2A shows an example of a cell culture container produced in the present invention. FIG. 2B is a sectional view taken along line III-III '. 図３は、容器部分部材に機能性基体を固定した後に他の部材を組み合わせて容器部を完成させる実施形態の一例を示す。FIG. 3 shows an example of an embodiment in which after the functional substrate is fixed to the container partial member, the container portion is completed by combining other members. 図４は、容器部分部材に機能性基体を固定した後に他の部材を組み合わせて容器部を完成させる実施形態の一例を示す。FIG. 4 shows an example of an embodiment in which after the functional substrate is fixed to the container partial member, the container portion is completed by combining other members. 図５は、機能性基体の断面図を示す。FIG. 5 shows a cross-sectional view of the functional substrate. 図６Aは、機能性基体１４０の、機能性有機化合物層５０１の側の面６０１の面を示す。図６Bは、機能性基体１４０の、基材層５０２の側の面６０２の面を示す。FIG. 6A shows the surface 601 of the functional substrate 140 on the functional organic compound layer 501 side. FIG. 6B shows the surface 602 of the functional substrate 140 on the substrate layer 502 side. 図７Aは、超音波溶着のための容器部分部材の一例を示す。図７BはIV-IV’断面図である。FIG. 7A shows an example of a container partial member for ultrasonic welding. FIG. 7B is a cross-sectional view taken along the line IV-IV ′. 図８は、超音波溶着による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 8 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by ultrasonic welding. 図９は、超音波溶着による接合工程の一例における、各要素の上下の位置関係を説明するための斜視図である。FIG. 9 is a perspective view for explaining the upper and lower positional relationship of each element in an example of a joining process by ultrasonic welding. 図１０は、超音波溶着による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 10 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by ultrasonic welding. 図１１は、超音波溶着による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 11 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by ultrasonic welding. 図１２は、超音波溶着による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 12 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by ultrasonic welding. 図１３は、インモールド成形による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 13 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by in-mold molding. 図１４Aは、機能性基体が接合された、容器部の第一部材の一例を示す。図１４Bは、そのV-V’断面図である。FIG. 14A shows an example of the first member of the container part to which the functional substrate is bonded. FIG. 14B is a cross-sectional view taken along the line V-V ′. 図１５は、インモールド成形による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 15 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by in-mold molding. 図１６は、インモールド成形による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 16 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by in-mold molding. 図１７は、インモールド成形による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 17 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by in-mold molding. 図１８は、インモールド成形による接合工程の一例を説明するための断面模式図である。FIG. 18 is a schematic cross-sectional view for explaining an example of a joining process by in-mold molding.

以下の説明では必要に応じて図面を参照し本発明の特徴を説明するが、各図は模式的に示した図であり、各部の大きさ、形状は理解を容易にするために適宜誇張して示している。   In the following description, the features of the present invention will be described with reference to the drawings as needed. However, each drawing is a schematic view, and the size and shape of each portion are appropriately exaggerated for easy understanding. It shows.

＜細胞培養容器の形状＞
本発明において製造される細胞培養容器の全体の形状について説明する。
本発明により製造される細胞培養容器は、細胞及び培地を収容するための容器部を少なくとも備え、更に適宜蓋等を備える。 <Shape of cell culture vessel>
The overall shape of the cell culture container produced in the present invention will be described.
The cell culture container produced by the present invention includes at least a container part for containing cells and a medium, and further includes a lid or the like as appropriate.

容器部は図１に示すように、細胞及び培地を収容するための空間が壁面により閉塞された形状であってもよいし、図２に示すように該空間の一端が開放された形状であってもよい。   As shown in FIG. 1, the container portion may have a shape in which a space for containing cells and culture medium is closed by a wall surface, or a shape in which one end of the space is opened as shown in FIG. May be.

容器部の好ましい実施形態の一例を図１に示す。図１Ａに示す容器部１００は、底部１０１と、底部１０１の周縁に立設された側壁部１０２と、側壁部１０２の上端部に接合された、底部１０１に対向配置される天面部１０３とを少なくとも備える。側壁部１０２の一部に通孔１０４が穿設されており、通孔１０４の周縁から容器部外側に延びる首部１０５を備える、「フラスコ型」と呼ばれる形状の容器部である。容器部１００の首部１０５には蓋１１０を係止するための係止部１０６が形成されており、該係止部を介して蓋１１０が着脱可能に装着される。容器部１００と蓋１１０とを組み合わせることによりフラスコ型の細胞培養容器１２０が形成される。   An example of a preferred embodiment of the container portion is shown in FIG. 1A includes a bottom portion 101, a side wall portion 102 standing on the periphery of the bottom portion 101, and a top surface portion 103 that is joined to the upper end portion of the side wall portion 102 and is disposed to face the bottom portion 101. At least. A through-hole 104 is formed in a part of the side wall portion 102, and a container portion having a shape called a “flask type” including a neck portion 105 extending from the periphery of the through-hole 104 to the outside of the container portion. A locking portion 106 for locking the lid 110 is formed on the neck portion 105 of the container portion 100, and the lid 110 is detachably mounted through the locking portion. A flask type cell culture container 120 is formed by combining the container part 100 and the lid 110.

図１Ｂは容器部１００のＩ−Ｉ’断面図を示し、図１ＣはＩＩ−ＩＩ’断面図を示す。容器部１００の、底部１０１、側壁部１０２及び天面部１０３に包囲される部分には、細胞及び培地を収容するための空間１３０が形成されている。空間１３０に面する内壁面の一部分（図１に示す実施形態では底部１０１）には、機能性基体１４０が固定されている。   FIG. 1B shows a cross-sectional view taken along the line I-I ′ of the container 100, and FIG. 1C shows a cross-sectional view taken along the line II-II ′. A space 130 for accommodating cells and a culture medium is formed in a portion of the container 100 surrounded by the bottom 101, the side wall 102, and the top surface 103. A functional substrate 140 is fixed to a part of the inner wall surface facing the space 130 (the bottom 101 in the embodiment shown in FIG. 1).

容器部の他の実施形態としては、図２に示すように、底部２０１と、底部２０１の周縁に立設した側壁部２０２とを備える皿状の容器部２００が挙げられる。底部２０１の、細胞及び培地を収容するための空間２２０の側の面（内底面）には機能性基体２１０が固定されている。   As other embodiment of a container part, as shown in FIG. 2, the dish-shaped container part 200 provided with the bottom part 201 and the side wall part 202 standingly arranged in the periphery of the bottom part 201 is mentioned. A functional substrate 210 is fixed to the surface (inner bottom surface) of the bottom portion 201 on the side of the space 220 for accommodating cells and culture medium.

本発明では、容器部のうち、機能性基体を除いた部分を「容器本体部材」と称する。例えば図１の容器部１００では、容器本体部材とは、底部１０１、側壁部１０２、天面部１０３及び首部１０５から構成される部分であり、図２の容器部２００では、容器本体部材とは、底部２０１及び側壁部２０２から構成される部分である。   In the present invention, a portion of the container portion excluding the functional substrate is referred to as a “container body member”. For example, in the container part 100 of FIG. 1, the container body member is a part composed of the bottom part 101, the side wall part 102, the top surface part 103 and the neck part 105. In the container part 200 of FIG. 2, the container body member is It is a part composed of a bottom part 201 and a side wall part 202.

本発明における接合工程は、容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを接合する工程である。接合工程において、容器本体部材の一部である部材（以下「容器部分部材」と呼ぶことがある）が用いられた場合、機能性基体の接合後に、容器部分部材と他の部材とを接合して容器部を完成させる。このように分割して容器部を形成する点について図３及び４に沿ってより説明する。   The joining step in the present invention is a step of joining the container body member or a member that is a part thereof and the functional substrate. When a member that is a part of the container body member (hereinafter sometimes referred to as “container part member”) is used in the joining step, the container part member and the other member are joined after the functional substrate is joined. To complete the container. The point of dividing the container portion in this way will be described in more detail with reference to FIGS.

図３に示すように、接合工程後に容器部１００を形成するための一実施形態では、接合工程において、底部１０１と側壁部１０２とからなる容器部分部材３０１の内底面に、機能性基体１４０を接合する。次いで、天面部１０３に対応する天面部材３０２接合することにより容器部１００を形成させる。容器部分部材３０１と天面部材３０２との接合は、細胞培養の目的に応じて、必要な場合は培養液が漏出しないように液密に接合される。   As shown in FIG. 3, in one embodiment for forming the container portion 100 after the joining step, the functional base 140 is provided on the inner bottom surface of the container partial member 301 including the bottom portion 101 and the side wall portion 102 in the joining step. Join. Next, the container portion 100 is formed by joining the top surface member 302 corresponding to the top surface portion 103. The container part member 301 and the top surface member 302 are joined in a liquid-tight manner so that the culture solution does not leak out according to the purpose of cell culture.

図４に示す、接合工程後に容器部１００を形成するための他の実施形態では、接合工程において、底部１０１に対応する容器部分部材４０１の、完成後に空間１３０に臨む側の面に、機能性基体１４０を接合する。首部１０５を備えた側壁部１０２に対応する側壁部材４０２と、天面部１０３に対応する天面部材３０２とを接合することにより容器部１００を形成する。
複数の部材の組み合わせは図３及び４に示した形態には限定されない。 In another embodiment for forming the container part 100 after the joining process shown in FIG. 4, the functionality of the container part member 401 corresponding to the bottom part 101 on the surface facing the space 130 after completion in the joining process is shown. The substrate 140 is bonded. The container part 100 is formed by joining the side wall member 402 corresponding to the side wall part 102 provided with the neck part 105 and the top surface member 302 corresponding to the top surface part 103.
The combination of a plurality of members is not limited to the form shown in FIGS.

＜細胞培養容器の材料＞
容器部及び蓋などの他の細胞培養容器の部材を形成する材料は特に限定されず、細胞培養において一般的に用いられる材料を用いることができる。 <Material of cell culture container>
The material which forms the member of other cell culture containers, such as a container part and a lid | cover, is not specifically limited, The material generally used in cell culture can be used.

本発明の方法では、少なくとも容器部は超音波溶着による接合又は射出成形が可能な樹脂材料である。   In the method of the present invention, at least the container portion is a resin material that can be joined or injection-molded by ultrasonic welding.

容器部を構成する樹脂としては、例えば、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリエチレンテレフタレート樹脂、ポリプロピレン樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂等の樹脂材料、表面親水化処理を施した上記の少なくとも１種を含む樹脂材料が挙げられる。樹脂材料としては、ポリスチレン樹脂又はポリエチレンテレフタレート樹脂であることが特に好ましい。   Examples of the resin constituting the container part include polystyrene resin, polyester resin, polyethylene resin, polyethylene terephthalate resin, polypropylene resin, ABS resin, nylon, acrylic resin, fluorine resin, polycarbonate resin, polyurethane resin, methylpentene resin, and phenol resin. , A resin material such as a melamine resin, an epoxy resin, or a vinyl chloride resin, or a resin material containing at least one of the above-described materials subjected to surface hydrophilization treatment. The resin material is particularly preferably a polystyrene resin or a polyethylene terephthalate resin.

＜機能性基体＞
本発明における機能性基体１４０の厚さ方向に沿った断面は、図５に示すように、樹脂製の基材層５０２及び該基材層５０２上に配置された機能性有機化合物層５０１を少なくとも備える。ここで「基体」とは、所定の構造を有している限り、フィルムであってもよいし、板状体であってもよい。 <Functional substrate>
As shown in FIG. 5, the cross section along the thickness direction of the functional substrate 140 in the present invention includes at least a resin base layer 502 and a functional organic compound layer 501 disposed on the base layer 502. Prepare. Here, the “base” may be a film or a plate-like body as long as it has a predetermined structure.

フィルム状の機能性基体（以下「機能性フィルム」と呼ぶことがある）は、好ましくはロール状に巻き取り可能な可撓性を有するものである。可撓性の機能性フィルムは、ロール・ツー・ロール法による大量生産が容易であるため好ましい。   The film-like functional substrate (hereinafter sometimes referred to as “functional film”) is preferably flexible so that it can be wound into a roll. A flexible functional film is preferable because mass production by a roll-to-roll method is easy.

機能性基体は、樹脂製の基材層に機能性有機化合物層を適当な方法により形成することにより製造することができる。樹脂製の基材層と機能性有機化合物層との間には必要に応じて１つ以上の他の層（例えば後述するプライマー層）が存在していてもよい。   The functional substrate can be produced by forming a functional organic compound layer on a resin base layer by an appropriate method. One or more other layers (for example, a primer layer described later) may be present between the resin base material layer and the functional organic compound layer as necessary.

機能性基体の形状は、固定される部材の領域の形状に応じた任意の形状であることができる。例えば、三角形、四角形（長方形、正方形、平行四辺形、菱形等）、五角形、六角形、七角形、八角形等の多角形や、円形、楕円形等の形状であることができる。   The shape of the functional substrate can be any shape depending on the shape of the region of the member to be fixed. For example, it may be a polygon such as a triangle, a rectangle (rectangle, square, parallelogram, rhombus, etc.), a pentagon, a hexagon, a heptagon, an octagon, a circle, an ellipse, or the like.

＜基材層＞
基材層は、最終的な機能性基体に応じて適宜選択される。機能性基体が板状であれば板状の樹脂製基材層が用いられ、機能性基体がフィルム状であればフィルム状の樹脂製基材層（以下「フィルム基材層」という）が用いられる。 <Base material layer>
The substrate layer is appropriately selected according to the final functional substrate. If the functional substrate is plate-like, a plate-like resinous substrate layer is used, and if the functional substrate is a film-like, a film-like resinous substrate layer (hereinafter referred to as “film substrate layer”) is used. It is done.

基材層と容器本体部材とは、本発明の超音波溶着又はインモールド成形により相互に溶融一体化が可能な材料から適宜選択されることができる。   The base material layer and the container main body member can be appropriately selected from materials that can be fused and integrated with each other by ultrasonic welding or in-mold molding of the present invention.

基材層は、一方の表面に上述の機能性有機化合物層を形成することが可能な樹脂材料を含むものであればよく、材料の種類は特に限定されない。典型的には、基材層の材料として、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ＴＡＣ（トリアセチルセルロース）、ポリイミド（ＰＩ）、ナイロン（Ｎｙ）、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、中密度ポリエチレン（ＭＤＰＥ）、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、アクリル等が挙げられる。   The base material layer should just contain the resin material which can form the above-mentioned functional organic compound layer in one surface, and the kind of material is not specifically limited. Typically, as a material for the base layer, polyethylene terephthalate (PET), polystyrene (PS), polycarbonate (PC), TAC (triacetylcellulose), polyimide (PI), nylon (Ny), low density polyethylene (LDPE) ), Medium density polyethylene (MDPE), vinyl chloride, vinylidene chloride, polyphenylene sulfide, polyether sulfone, polyethylene naphthalate, polypropylene, acrylic and the like.

基材層の、容器本体部材と接合される部分の表面は、ヒートシール性樹脂材料を含んでいてもよい。ヒートシール性樹脂材料は、高温の溶融樹脂との接触により溶融し、樹脂の固化とともに固化するため基材層と容器本体部材との接合をより強固にすることができる。   The surface of the part of the base material layer to be joined to the container body member may contain a heat-sealable resin material. Since the heat-sealable resin material is melted by contact with a high-temperature molten resin and is solidified with the solidification of the resin, the bonding between the base material layer and the container main body member can be further strengthened.

基材層の、機能性有機化合物層が形成される側の表面は、易接着処理された表面であることができる。「易接着処理」とは、例えば、ポリエステル、アクリル酸エステル、ポリウレタン、ポリエチレンイミン、シランカップリング剤、ペルフルオロオクタンスルホン酸（ＰＦＯＳ）等の易接着剤による処理を指す。   The surface of the base material layer on the side on which the functional organic compound layer is formed can be a surface subjected to easy adhesion treatment. “Easy adhesion treatment” refers to treatment with an easy adhesive such as polyester, acrylic ester, polyurethane, polyethyleneimine, silane coupling agent, perfluorooctane sulfonic acid (PFOS), and the like.

基材層の厚さは適宜選択することができる。基材層がフィルム基材層である場合、その厚さ（フィルム基材層が基材の層に加えて易接着層を備える場合は、易接着層を含むフィルム基材層の全体の厚さを指す）は、特に制限は無いが可撓性を付与する厚さであることが好ましく、例えば５〜５００μｍ、より好ましくは２０〜５００μｍ、特に好ましくは５０〜２５０μｍである。   The thickness of the base material layer can be appropriately selected. When the base material layer is a film base material layer, its thickness (when the film base material layer includes an easy adhesion layer in addition to the base material layer, the total thickness of the film base material layer including the easy adhesion layer) Is not particularly limited, but is preferably a thickness that imparts flexibility, for example, 5 to 500 μm, more preferably 20 to 500 μm, and particularly preferably 50 to 250 μm.

＜機能性有機化合物層＞
機能性有機化合物層を構成する有機化合物としては、所望の機能を有する層であれば特に限定されないが、より好ましくは、所定の刺激によって細胞接着性から細胞非接着性へと変化することが可能な表面を有する刺激応答性ポリマーや、1つ以上のエチレングリコール単位（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）からなるエチレングリコール鎖等の親水性化合物が挙げられる。 <Functional organic compound layer>
The organic compound constituting the functional organic compound layer is not particularly limited as long as it has a desired function, but more preferably it can be changed from cell adhesiveness to cell nonadhesiveness by a predetermined stimulus. And a hydrophilic compound such as an ethylene glycol chain composed of one or more ethylene glycol units (CH 2 —CH 2 —O).

機能性有機化合物層の膜厚は、例えば、０．５ｎｍ〜３００ｎｍの範囲内とするよく、なかでも１ｎｍ〜１００ｎｍの範囲内であることが好ましい。   The film thickness of the functional organic compound layer may be, for example, in the range of 0.5 nm to 300 nm, and preferably in the range of 1 nm to 100 nm.

以下「刺激応答性ポリマー層」及び「親水性化合物層」の好適な実施形態について説明する。   Hereinafter, preferred embodiments of the “stimulus responsive polymer layer” and the “hydrophilic compound layer” will be described.

＜刺激応答性ポリマー層＞
機能性有機化合物層は、刺激応答性ポリマー層であることが特に好ましい。刺激応答性ポリマー層とは、所定の刺激によって表面の細胞の接着度合いが変化するポリマーを含む層である。刺激応答性ポリマーとしては、温度応答性ポリマー、ｐＨ応答性ポリマー、イオン応答性ポリマー、光応答性ポリマーなどを挙げることができる。なかでも温度応答性ポリマーが、刺激の付与が容易であることから好ましい。 <Stimulus responsive polymer layer>
The functional organic compound layer is particularly preferably a stimulus-responsive polymer layer. The stimulus-responsive polymer layer is a layer containing a polymer in which the degree of cell adhesion on the surface is changed by a predetermined stimulus. Examples of the stimulus responsive polymer include a temperature responsive polymer, a pH responsive polymer, an ion responsive polymer, and a photoresponsive polymer. Among these, a temperature-responsive polymer is preferable because it is easy to give a stimulus.

温度応答性ポリマーとして、例えば、細胞を培養する温度では細胞接着性を示し、作製した細胞シートの剥離する時の温度では細胞非接着性を示すものを用いるとよい。例えば、温度応答性ポリマーは、臨界溶解温度未満の温度では周囲の水に対する親和性が向上し、ポリマーが水を取り込んで膨潤して表面に細胞を接着しにくくする性質（細胞非接着性）を示し、同温度以上の温度ではポリマーから水が脱離することでポリマーが収縮して表面に細胞を接着しやすくする性質（細胞接着性）を示すものを用いるとよい。このような臨界溶解温度は、下限臨界溶解温度と呼ばれる。下限臨界溶解温度Ｔが０℃〜８０℃、さらに好ましくは０℃〜５０℃である温度応答性ポリマーを用いるとよい。Ｔが０℃〜８０℃であると、細胞を安定的に培養できるからである。   As the temperature-responsive polymer, for example, a polymer that exhibits cell adhesion at a temperature at which cells are cultured and exhibits cell non-adhesion at a temperature at which the produced cell sheet is peeled may be used. For example, a temperature-responsive polymer has improved affinity to surrounding water at temperatures below the critical dissolution temperature, and the polymer takes up water and swells to make it difficult for cells to adhere to the surface (cell non-adhesiveness). It is preferable to use a material exhibiting a property (cell adhesiveness) that makes the polymer shrink and easily adheres cells to the surface when water is desorbed from the polymer at a temperature equal to or higher than the same temperature. Such a critical solution temperature is called a lower critical solution temperature. A temperature-responsive polymer having a lower critical solution temperature T of 0 ° C. to 80 ° C., more preferably 0 ° C. to 50 ° C. may be used. This is because the cells can be stably cultured when T is 0 ° C to 80 ° C.

好適な温度応答性ポリマーとしてはアクリル系ポリマー又はメタクリル系ポリマーが挙げられる。具体的に好適な温度応答性ポリマーとしては、例えばポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド(Ｔ＝３２℃)、ポリ−Ｎ−ｎ−プロピルアクリルアミド(Ｔ＝２１℃)、ポリ−Ｎ−ｎ−プロピルメタクリルアミド(Ｔ＝３２℃)、ポリ−Ｎ−エトキシエチルアクリルアミド(Ｔ＝約３５℃)、ポリ−Ｎ−テトラヒドロフルフリルアクリルアミド(Ｔ＝約２８℃)、ポリ−Ｎ−テトラヒドロフルフリルメタクリルアミド（Ｔ＝約３５℃）、及びポリ−Ｎ,Ｎ−ジエチルアクリルアミド(Ｔ＝３２℃)等が挙げられる。   Suitable temperature-responsive polymers include acrylic polymers or methacrylic polymers. Specific examples of suitable temperature-responsive polymers include poly-N-isopropylacrylamide (T = 32 ° C.), poly-Nn-propyl acrylamide (T = 21 ° C.), and poly-Nn-propyl methacrylamide. (T = 32 ° C.), poly-N-ethoxyethyl acrylamide (T = about 35 ° C.), poly-N-tetrahydrofurfuryl acrylamide (T = about 28 ° C.), poly-N-tetrahydrofurfuryl methacrylamide (T = About 35 ° C.), and poly-N, N-diethylacrylamide (T = 32 ° C.).

これらのポリマーを形成するためのモノマーとしては、放射線照射によって重合し得るモノマーを用いることができる。モノマーとしては例えば、（メタ）アクリルアミド化合物、Ｎ−（若しくはＮ，Ｎ−ジ）アルキル置換（メタ）アクリルアミド誘導体、環状基を有する（メタ）アクリルアミド誘導体、及びビニルエーテル誘導体等が挙げられ、これらの１種以上を使用してよい。モノマーが一種類単独で使用された場合、基材上に形成されるポリマーはホモポリマーとなり、モノマーが複数種一緒に使用された場合、基材上に形成されるポリマーはヘテロポリマーとなるが、どちらの形態も本発明に包含される。   As a monomer for forming these polymers, a monomer that can be polymerized by irradiation with radiation can be used. Examples of the monomer include (meth) acrylamide compounds, N- (or N, N-di) alkyl-substituted (meth) acrylamide derivatives, (meth) acrylamide derivatives having a cyclic group, and vinyl ether derivatives. More than seeds may be used. When a single monomer is used alone, the polymer formed on the substrate is a homopolymer, and when multiple monomers are used together, the polymer formed on the substrate is a heteropolymer. Both forms are encompassed by the present invention.

また、増殖細胞の種類によってＴを調節する必要がある場合や、被覆物質と細胞培養支持体との相互作用を高める必要が生じた場合や、細胞支持体の親水・疎水性のバランスを調整する必要がある場合などには、上記以外の他のモノマー類を更に加えて共重合してよい。更に本発明に使用する上記ポリマーとその他のポリマーとのグラフト又はブロック共重合体、あるいは本発明のポリマーと他のポリマーとの混合物を用いてもよい。また、ポリマー本来の性質が損なわれない範囲で架橋することも可能である。   In addition, when it is necessary to adjust T depending on the type of proliferating cell, when it is necessary to enhance the interaction between the coating substance and the cell culture support, and the balance between the hydrophilicity and hydrophobicity of the cell support is adjusted. If necessary, other monomers other than those described above may be further added for copolymerization. Further, a graft or block copolymer of the above-mentioned polymer used in the present invention and another polymer, or a mixture of the polymer of the present invention and another polymer may be used. Moreover, it is also possible to crosslink within a range where the original properties of the polymer are not impaired.

ｐＨ応答性ポリマー及びイオン応答性ポリマーは作製しようとする細胞シートに適したものを適宜選択することができる。   As the pH responsive polymer and the ion responsive polymer, those suitable for the cell sheet to be prepared can be appropriately selected.

刺激応答性ポリマー層は、重合して目的の刺激応答性ポリマーを形成するモノマーと、該モノマーを溶解しうる有機溶媒と含む塗布用組成物を調製し、これを慣用の塗布方法に従って、基材層の表面に塗布して塗膜を形成し、次に、該塗膜に放射線照射等の適当な手段により塗膜中のモノマーを重合してポリマーを形成するとともに、基材層の表面とポリマーとの間にグラフト化反応を生じさせることにより形成することができる。   The stimulus-responsive polymer layer is prepared by preparing a coating composition containing a monomer that is polymerized to form a target stimulus-responsive polymer and an organic solvent that can dissolve the monomer. A coating film is formed by coating on the surface of the layer, and then the monomer in the coating film is polymerized by an appropriate means such as radiation irradiation to form a polymer. And a grafting reaction between them.

＜親水性化合物層＞
機能性有機化合物層の他の実施形態として、1つ以上のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖（複数のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖は、「ポリエチレングリコール鎖」ということができる）等の親水性化合物の層が挙げられる。 <Hydrophilic compound layer>
As another embodiment of the functional organic compound layer, hydrophilicity such as an ethylene glycol chain composed of one or more ethylene glycol units (an ethylene glycol chain composed of a plurality of ethylene glycol units can be referred to as a “polyethylene glycol chain”). A layer of a functional compound.

エチレングリコール鎖の末端は水酸基により封鎖された形態であってもよいし、エチレングリコール鎖の末端に生体関連物質等の他の物質が共有結合により連結された形態であってもよい。   The terminal of the ethylene glycol chain may be in a form blocked with a hydroxyl group, or the terminal of the ethylene glycol chain may be in a form in which another substance such as a biological substance is linked by a covalent bond.

末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層は、細胞が接着し難い親水性の表面を提供することができる。   A layer containing an ethylene glycol chain whose end is blocked with a hydroxyl group can provide a hydrophilic surface to which cells are difficult to adhere.

エチレングリコール鎖の末端に共有結合されうる生体関連物質としては、抗原、抗体、DNA、RNA、ペプチド、ホルモン、酵素、サイトカイン、糖鎖、脂質、補酵素、酵素阻害剤、細胞、その他の機能を有するタンパク質が含まれる。更に、このような生体関連物質と親和性を有する低分子化合物、及び高分子化合物も生体関連物質の範囲に含まれる。   Bio-related substances that can be covalently bonded to the end of ethylene glycol chain include antigens, antibodies, DNA, RNA, peptides, hormones, enzymes, cytokines, sugar chains, lipids, coenzymes, enzyme inhibitors, cells, and other functions. The protein which has is included. Furthermore, the low molecular weight compound which has affinity with such a biological substance, and a high molecular compound are also contained in the range of a biological substance.

エチレングリコール鎖等の親水性化合物の層を、樹脂製の基材層の表面に固定化するためには、予め、基材層の表面に、該表面に物理的に吸着可能であって、エチレングリコール鎖の末端の水酸基と反応して共有結合を形成可能な官能基を側鎖に含むポリシロキサンを含むプライマー層を設ける。ポリシロキサンの側鎖上の官能基としては、グリシジル基又はエポキシ基が好ましい。プライマー層は、基材層の表面に、所望の側鎖を有するシラノール化合物を適用し、該表面上で縮合重合してポリシロキサンに変換することにより形成することができる。   In order to immobilize a hydrophilic compound layer such as an ethylene glycol chain on the surface of a resin base material layer, the surface can be physically adsorbed on the surface of the base material layer in advance. A primer layer containing polysiloxane containing a functional group capable of forming a covalent bond by reacting with the terminal hydroxyl group of the glycol chain is provided. The functional group on the side chain of the polysiloxane is preferably a glycidyl group or an epoxy group. The primer layer can be formed by applying a silanol compound having a desired side chain to the surface of the base material layer, and performing condensation polymerization on the surface to convert it into polysiloxane.

次いで、プライマー層の官能基と、エチレングリコール又はエチレングリコール単位が２以上繰り返されたポリエチレングリコールの水酸基とを反応させて共有結合を形成し、エチレングリコール鎖を固定化する。このとき、触媒量の濃硫酸を含むエチレングリコール又はポリエチレングリコールをプライマー層に接触させる。   Next, a functional group of the primer layer is reacted with a hydroxyl group of polyethylene glycol in which two or more ethylene glycol or ethylene glycol units are repeated to form a covalent bond, thereby immobilizing the ethylene glycol chain. At this time, ethylene glycol or polyethylene glycol containing a catalytic amount of concentrated sulfuric acid is brought into contact with the primer layer.

末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層はこのようにして形成される。   A layer containing ethylene glycol chains whose ends are blocked with hydroxyl groups is formed in this way.

更に、必要に応じて、エチレングリコール鎖の一端に、他の物質との共有結合を形成することが可能な、少なくとも１つの官能基を直接的又は間接的に連結させる。官能基の導入方法は特に限定されない。   Furthermore, if necessary, at least one functional group capable of forming a covalent bond with another substance is directly or indirectly linked to one end of the ethylene glycol chain. The method for introducing the functional group is not particularly limited.

＜細胞培養容器の製造方法＞
以下、本発明に係る細胞培養容器の製造方法について具体的に説明する。接合工程は、図３に示す容器部分部材３０１に機能性基体１４０を接合する実施形態を中心に説明するが、該工程は当該実施形態に限定されるものではない。 <Method for producing cell culture container>
Hereinafter, the manufacturing method of the cell culture container concerning this invention is demonstrated concretely. The bonding step will be described mainly with respect to an embodiment in which the functional base 140 is bonded to the container partial member 301 shown in FIG. 3, but the step is not limited to the embodiment.

＜第一の実施形態＞
本発明の方法の第一の実施形態は、
細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位において、樹脂を溶融一体化することにより接合する接合工程
を含むことを特徴とする。 <First embodiment>
The first embodiment of the method of the present invention is:
A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The container body member or a member that is a part of the container body and the functional substrate are melted and integrated at a portion where the surface of the member is in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region of the functional substrate. And a joining step for joining.

図６Ａに示すとおり、機能性基体１４０の、機能性有機化合物層５０１の表面６０１の、細胞及び培地を収容するための空間内で機能するための領域を第１領域６１０と称し、その周縁を包囲する領域を第２領域６２０と称する。「細胞及び培地を収容するための空間内で機能するための第１領域」とは、培養時に細胞及び／又は培地が存在する環境中で所望の機能を発揮する領域であり、前記空間内に露出した領域である。第２領域６２０は、前記空間内に露出して第１領域と同様に所望の機能を発揮するものであることが好ましいが、これには限定されず、前記空間内に露出していなくてもよい。そして、図６Ｂに示すように、機能性基体１４０の、基材層５０２側の表面６０２の、第１領域の裏側に相当する領域を第３領域６３０と称し、第１領域の裏側に相当する領域を第４領域６４０と称する。   As shown in FIG. 6A, a region of the surface 601 of the functional organic compound layer 501 of the functional substrate 140 that functions in a space for containing cells and a medium is referred to as a first region 610, and its periphery is defined as the first region 610. The surrounding area is referred to as a second area 620. The “first region for functioning in a space for containing cells and a medium” is a region that exhibits a desired function in an environment where cells and / or a medium are present during culture, It is an exposed area. The second region 620 is preferably exposed in the space and exhibits a desired function in the same manner as the first region, but is not limited thereto, and may be not exposed in the space. Good. Then, as shown in FIG. 6B, a region corresponding to the back side of the first region on the surface 602 on the base material layer 502 side of the functional base 140 is referred to as a third region 630 and corresponds to the back side of the first region. The area is referred to as a fourth area 640.

本発明の第一の実施形態では、接合工程において、機能性基体１４０の第４領域６４０の表面又は第２領域６２０の表面（好ましくは、第４領域６４０の表面）と、樹脂製の容器本体部材又は容器部分部材の一部の表面とが接する部位において、樹脂を溶融一体化（すなわち溶接）する。細胞培養時に機能を発揮すべき機能性基体１４０の第１領域６１０及びその裏側の第３領域６３０において樹脂部材同士を溶接する必要がないため、溶接に伴う熱及び力の影響が第１領域に及ぶことを回避することができ、第１領域６１０の機能を維持しながら細胞培養容器を製造することが可能である。   In the first embodiment of the present invention, in the joining step, the surface of the fourth region 640 or the surface of the second region 620 (preferably, the surface of the fourth region 640) of the functional substrate 140, and the resin container body The resin is melted and integrated (ie, welded) at a portion where the surface of the member or the container partial member comes into contact. Since there is no need to weld the resin members in the first region 610 of the functional substrate 140 and the third region 630 on the back side of the functional substrate 140 that should function in cell culture, the influence of heat and force accompanying welding in the first region The cell culture container can be manufactured while maintaining the function of the first region 610.

機能性基体と樹脂製の容器本体部材又は容器部分部材とを接合する方法としては、典型的には、超音波溶着による接合方法と、インモールド成形による接合方法が挙げられる。インモールド成形とは、本発明では、容器本体部材又は容器部分部材を製造するための鋳型空間が形成された射出成形型内の所定位置に機能性基体を配置し、型締めし、前記鋳型空間内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された容器本体部材又は容器部分部材を得る方法を指す。以下、超音波溶着による接合方法及びインモールド成形による接合方法についてそれぞれ具体的に説明する。   As a method for joining the functional substrate and the resin container main body member or the container partial member, typically, a joining method by ultrasonic welding and a joining method by in-mold molding may be mentioned. In-mold molding means that in the present invention, a functional base is disposed at a predetermined position in an injection mold in which a mold space for manufacturing a container body member or a container partial member is formed, and the mold space is clamped. A method of obtaining a container main body member or a container partial member in which a functional substrate is integrated by filling a resin in a molten state and solidifying the inside. Hereinafter, the joining method by ultrasonic welding and the joining method by in-mold molding will be specifically described.

＜第一の実施形態／超音波溶着による接合方法＞
樹脂製の容器部分部材３０１’に、機能性基体１４０を超音波溶着により接合する例について図７等に基づいて説明する。 <First Embodiment / Joint Method by Ultrasonic Welding>
An example in which the functional substrate 140 is joined to the resin container partial member 301 ′ by ultrasonic welding will be described with reference to FIG.

超音波溶着では、通常は、エネルギーダイレクターとして機能する薄い樹脂突起物が設けられた樹脂部材と、他の樹脂部材とを、エネルギーダイレクターの頂点を他の樹脂部材に押し付けながら接触させ、接触状態を維持しながら、超音波ホーンから超音波を発振して接触面を振動させることによりエネルギーダイレクターを溶融させ、両部材を一体化して接合する。図７に示すように、樹脂製の容器部分部材３０１’の、機能性基体１４０の第４領域との接合部位には、超音波溶着するときにエネルギーダイレクターとしての機能を果たす、幅の狭い突起７０１が一体成形されている。突起７０１の横幅は限定されないが１００〜１０００μｍ程度であり、高さは５０〜１０００μｍ程度である。突起７０１は先端が先鋭であることが望ましい。   In ultrasonic welding, a resin member provided with a thin resin projection that functions as an energy director and another resin member are usually brought into contact with each other while pressing the apex of the energy director against the other resin member. While maintaining the state, the energy director is melted by oscillating ultrasonic waves from an ultrasonic horn to vibrate the contact surface, and both members are integrated and joined. As shown in FIG. 7, the bonding portion of the resin container partial member 301 ′ with the fourth region of the functional substrate 140 has a narrow width that functions as an energy director when ultrasonic welding is performed. The protrusion 701 is integrally formed. The lateral width of the protrusion 701 is not limited, but is about 100 to 1000 μm, and the height is about 50 to 1000 μm. It is desirable that the protrusion 701 has a sharp tip.

図８Ａに示すとおり、溶着用治具８０１に固定された容器部分部材３０１’に、機能性基体１４０を、細胞及び培地を収容するための空間１３０（図１B、C）の側に機能性有機化合物層５０１側の表面６０１が向くように配置させて組み合わせ、機能性基体１４０の側から、機能性基体の第２領域の表面上に超音波ホーン８１０の突出部８１１が接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーン８１０から超音波振動を与える。これにより、機能性基体１４０の第４領域と容器部分部材３０１’との接触面に、突起７０１が溶融して固化し、機能性基体１４０と容器部分部材３０１’とが一体化する（図８Ｂ、Ｃ）。最後に天面部１０３に対応する天面部材３０２を接合して、容器部１００を完成させる。   As shown in FIG. 8A, the functional substrate 140 is placed in the container partial member 301 ′ fixed to the welding jig 801, and the functional organic is placed on the side of the space 130 (FIGS. 1B and 1C) for containing cells and culture medium. Arranged so that the surface 601 on the compound layer 501 side faces, and is pressed from the functional substrate 140 side so that the protruding portion 811 of the ultrasonic horn 810 contacts the surface of the second region of the functional substrate, In this state, ultrasonic vibration is applied from the ultrasonic horn 810. Accordingly, the protrusion 701 is melted and solidified on the contact surface between the fourth region of the functional base 140 and the container part member 301 ′, and the functional base 140 and the container part member 301 ′ are integrated (FIG. 8B). , C). Finally, the top surface member 302 corresponding to the top surface portion 103 is joined to complete the container portion 100.

図８では、容器部分部材３０１’と機能性基体１４０とを組み合わせて配置した状態に、超音波ホーン８１０を機能性基体１４０の側から近づけ超音波振動を与える形態を示すが、これには限定されず、図９等に示すとおり、容器部分部材３０１’の側から超音波ホーン８１０を近づけ超音波振動を与えてもよい。   FIG. 8 shows a mode in which the ultrasonic horn 810 is brought close to the functional base 140 side and ultrasonic vibration is applied in a state where the container partial member 301 ′ and the functional base 140 are combined and arranged. Instead, as shown in FIG. 9 and the like, the ultrasonic horn 810 may be approached from the container partial member 301 ′ side to apply ultrasonic vibration.

超音波ホーン８１０は図示するように、機能性基体１４０の第２領域６２０と当接可能な形状を有する突出部８１１を備え、該突出部に包囲された部分が窪んでいる形状のものを用いることが好ましい（図９の斜視図も参照）。このような形状の超音波ホーンは機能性基体１４０の第２領域６２０（又は容器部分部材３０１’の、第２領域６２０の裏側に位置する部分）のみに選択的に接触することができるため、超音波ホーンの接触によるずり応力、超音波ホーンを圧接する圧力、及び超音波振動による、機能性基体１４０の第１領域６１０の機能への悪影響を低下させることができる。   As shown in the figure, the ultrasonic horn 810 includes a protruding portion 811 having a shape capable of coming into contact with the second region 620 of the functional base 140, and a portion in which the portion surrounded by the protruding portion is recessed is used. It is preferable (see also the perspective view of FIG. 9). Since the ultrasonic horn having such a shape can selectively contact only the second region 620 of the functional base 140 (or the portion located on the back side of the second region 620 of the container partial member 301 ′), The adverse effect on the function of the first region 610 of the functional substrate 140 due to the shear stress due to the contact of the ultrasonic horn, the pressure for pressing the ultrasonic horn, and the ultrasonic vibration can be reduced.

超音波溶着工程のより好ましい実施形態では、図９に示すように、溶着用治具９０１上に、上方から、機能性有機化合物層５０１側の表面６０１が下面となるように機能性基体１４０を載置し、その上方から更に容器部分部材３０１’を載置する。溶着用治具９０１の外郭形状は、容器部分部材３０１’の内側面と一致しているため、機能性基体１４０が介在した状態で容器部分部材３０１’を溶着用治具９０１に嵌合することができ、安定に保持することができる。更に、超音波ホーン８１０を、容器部分部材３０１’の側から、前記部材の表面上の、機能性基体１４０の第２領域６２０の裏側に位置する部分に前記超音波ホーンが接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーンから超音波振動を与える。このときの断面の模式図を図１０に示す。溶着用治具９０１上に、機能性基体１４０が介在した状態で容器部分部材３０１’を配置し（図１０Ａ）、超音波ホーン８１０の突出部８１１を、容器部分部材３０１’側から圧接し、その状態で超音波振動を与えて、溶融一体化する（図１０Ｂ）。この載置順序によれば、機能性基体１４０と容器部分部材３０１’との間の気泡の残留を回避することが可能である。この効果は機能性基体として機能性フィルムを用いた場合に特に顕著である。溶着用治具９０１の天面と容器部分部材３０１’の底板との間に挟まれた状態で超音波ホーン８１０により押し付けられることにより機能性基材（フィルム）１４０が平坦になり、気泡が抜け易くなると考えられる。   In a more preferred embodiment of the ultrasonic welding process, as shown in FIG. 9, the functional substrate 140 is placed on the welding jig 901 from above so that the surface 601 on the functional organic compound layer 501 side becomes the lower surface. The container partial member 301 ′ is further placed from above. Since the outer shape of the welding jig 901 matches the inner surface of the container part member 301 ′, the container part member 301 ′ is fitted to the welding jig 901 with the functional base 140 interposed. Can be held stably. Further, the ultrasonic horn 810 is pressed from the container partial member 301 ′ side so that the ultrasonic horn comes into contact with a portion located on the back side of the second region 620 of the functional base 140 on the surface of the member. In this state, ultrasonic vibration is applied from the ultrasonic horn. A schematic diagram of the cross section at this time is shown in FIG. The container part member 301 ′ is disposed on the welding jig 901 with the functional base 140 interposed (FIG. 10A), and the protruding portion 811 of the ultrasonic horn 810 is pressed from the container part member 301 ′ side. In this state, ultrasonic vibration is applied to melt and integrate (FIG. 10B). According to this mounting order, it is possible to avoid remaining bubbles between the functional base 140 and the container partial member 301 ′. This effect is particularly remarkable when a functional film is used as the functional substrate. The functional substrate (film) 140 is flattened by being pressed by the ultrasonic horn 810 while being sandwiched between the top surface of the welding jig 901 and the bottom plate of the container part member 301 ′, and bubbles are removed. It will be easier.

超音波溶着工程の他の好ましい実施形態では、平坦な機能性基体１４０と接触する天面を有する溶着用治具９０１に代えて、図１１に示すように、機能性基体１４０が載置される部位が、機能性基体１４０の第２領域６２０と当接可能な突出部１１０１を備え、該突出部に包囲された部分が窪んでいる形状を有する溶着用治具１１００を用いる。この溶着用治具１１００を用いた場合には、溶着用治具と、機能性基体１４０の機能性有機化合物層５０１側の表面６０１との接触面が、第２領域６２０のみであり、第１領域６１０と溶着用治具１１００とが接触しないため、超音波振動時に第１領域６１０の表面にずり応力が発生せず（図１１Ｂ）、第１領域６１０の機能の損傷を防ぐことができる。   In another preferred embodiment of the ultrasonic welding process, the functional substrate 140 is placed as shown in FIG. 11 in place of the welding jig 901 having a top surface that contacts the flat functional substrate 140. A welding jig 1100 having a shape in which a portion includes a protrusion 1101 that can come into contact with the second region 620 of the functional base 140 and a portion surrounded by the protrusion is recessed is used. When this welding jig 1100 is used, the contact surface between the welding jig and the surface 601 on the functional organic compound layer 501 side of the functional base 140 is only the second region 620, and the first Since the region 610 and the welding jig 1100 are not in contact with each other, shear stress is not generated on the surface of the first region 610 during ultrasonic vibration (FIG. 11B), and damage to the function of the first region 610 can be prevented.

超音波溶着工程の他の好ましい実施形態では、上述の超音波溶着工程を、機能性基体１４０の機能性有機化合物層５０１側の表面６０１に、取り外し可能な第１の保護部材１２０１を載せた状態で実施する。図１２に示す実施形態では、第１の保護部材１２０１は機能性基体１４０の機能性有機化合物層５０１側の表面６０１と、溶着用治具９０１の天面との間に介在させ、超音波振動を与えて、機能性基体１４０と容器部分部材３０１’とを接合する（図１２Ｂ）。接合後に、第１の保護部材１２０１は取り外し、以降の工程に進む（図１２Ｃ、１２Ｄ）。なお、図示していないが、図８に示すように、機能性基体１４０の側に超音波ホーンが圧接される実施形態においても、同様に第１の保護部材を載せた状態で超音波溶着工程を実施することができる。第１の保護部材の存在により溶着用治具又は超音波ホーンと機能性基体１４０の機能性有機化合物５０１層の表面６０１との直接的な接触を回避することができるため、機能性有機化合物層５０１の機能の損傷につながる可能性のあるずり応力を低減することができる。   In another preferred embodiment of the ultrasonic welding process, the above-described ultrasonic welding process is performed by placing the removable first protective member 1201 on the surface 601 of the functional substrate 140 on the functional organic compound layer 501 side. To implement. In the embodiment shown in FIG. 12, the first protective member 1201 is interposed between the surface 601 on the functional organic compound layer 501 side of the functional base 140 and the top surface of the welding jig 901, and ultrasonic vibration And the functional base 140 and the container partial member 301 ′ are joined (FIG. 12B). After joining, the first protective member 1201 is removed and the process proceeds to the subsequent steps (FIGS. 12C and 12D). Although not shown, in the embodiment in which the ultrasonic horn is pressed against the functional base 140 as shown in FIG. 8, the ultrasonic welding process is performed with the first protective member similarly placed. Can be implemented. The presence of the first protective member can avoid direct contact between the welding jig or ultrasonic horn and the surface 601 of the functional organic compound 501 layer of the functional substrate 140, so that the functional organic compound layer The shear stress that can lead to damage of the function of 501 can be reduced.

第１の保護部材としては特に限定されないが、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ＴＡＣ(トリアセチルセルロース)、ポリイミド（ＰＩ）、ナイロン（Ｎｙ）、低密度ポリエチレン、中密度ポリエチレン、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、ウレタン、アクリル、シリコン樹脂系、テフロン、フッ素樹脂系の保護部材、またはこれら保護部材にアルミニウムなどの無機金属やシリコンが蒸着されたものを使用することができる。第１の保護部材としては、フィルム状又は板状のものを使用することができる。アルミニウムなどの無機金属やシリコンが蒸着された前記保護部材は、蒸着された層の表面が機能性有機化合物層と接するように配置されることが好ましい。   Although it does not specifically limit as a 1st protective member, Polyethylene terephthalate (PET), polystyrene (PS), polycarbonate (PC), TAC (triacetyl cellulose), polyimide (PI), nylon (Ny), low density polyethylene, Medium density polyethylene, vinyl chloride, vinylidene chloride, polyphenylene sulfide, polyether sulfone, polyethylene naphthalate, polypropylene, urethane, acrylic, silicone resin-based, Teflon, fluororesin-based protective members, or inorganic materials such as aluminum in these protective members A metal or silicon-deposited material can be used. As the first protective member, a film-like or plate-like one can be used. The protective member on which an inorganic metal such as aluminum or silicon is deposited is preferably disposed so that the surface of the deposited layer is in contact with the functional organic compound layer.

＜第一の実施形態／インモールド成形による接合方法＞
インモールド成形により樹脂製の容器本体部材又は容器部分部材と機能性基体とを接合する方法の概要を、図１３に沿って説明する。型締め時に容器部分部材３０１に対応する鋳型空間１３０４を形成する凸型１３０１と凹型１３０２とを組み合わせる射出成形型において、機能性基体１４０を、機能性有機化合物層５０１側の面６０１が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、基材層５０２側の表面６０２の少なくとも一部（図１３では全部）が鋳型空間１３０４に露出するように配置し（図１３Ａ）、型締めする。次いで、ゲート１３０３を通じて、樹脂を、射出圧を加えて型内に充填する（図１３Ｂ）。充填後、樹脂を固化させてから型を開き、機能性基体１４０が固定された容器部分部材３０１を取得する（図１８Ｃ）。最後に天面部材３０２を容器部分部材３０１の開放端に接合し、容器部１００を完成させる。 <First embodiment / joining method by in-mold molding>
An outline of a method of joining a resin container body member or container part member and a functional substrate by in-mold molding will be described with reference to FIG. In an injection mold that combines a convex mold 1301 and a concave mold 1302 that form a mold space 1304 corresponding to the container part member 301 at the time of mold clamping, the functional base 140 has a surface 601 on the functional organic compound layer 501 side as an injection mold. A part of the inner wall surface is covered, and at least a part (the whole in FIG. 13) of the surface 602 on the base material layer 502 side is disposed so as to be exposed to the mold space 1304 (FIG. 13A), and the mold is clamped. Next, the resin is filled into the mold through the gate 1303 by applying injection pressure (FIG. 13B). After filling, the mold is opened after the resin is solidified, and the container partial member 301 to which the functional substrate 140 is fixed is obtained (FIG. 18C). Finally, the top member 302 is joined to the open end of the container partial member 301 to complete the container unit 100.

ただし、図１３に示す方法では、高温の溶融樹脂が機能性基体１４０の第１領域６１０の裏側に位置する第３領域に接触するため、溶融樹脂の熱により第１領域の機能が低下する可能性がある。この可能性は、機能性基体１４０が薄い機能性フィルムである場合には回避する必要性がより高い。   However, in the method shown in FIG. 13, since the high-temperature molten resin comes into contact with the third region located behind the first region 610 of the functional base 140, the function of the first region can be degraded by the heat of the molten resin. There is sex. This possibility is more likely to be avoided when the functional substrate 140 is a thin functional film.

そこで本発明の第一の実施形態では、図１４及び１５に示すような態様により、インモールド成形を実施する。   Therefore, in the first embodiment of the present invention, in-mold molding is performed in the manner shown in FIGS.

この例では、図１４に示すように、開口１４０２が形成された樹脂製の第１部材１４０１を示す。機能性基体１４０が、開口１４０２の周縁部分に、その第４領域６４０を介して接合している。機能性基体１４０の第３領域６３０は、開口１４０２から露出している。図示していないが、機能性基体１４０は、第１部材１４０１に、第２領域６２０を介して接合されていてもよく、この場合、第１領域は開口１４０２から、細胞及び培地が収容される空間１３０に露出する。   In this example, as shown in FIG. 14, a resin-made first member 1401 in which an opening 1402 is formed is shown. The functional substrate 140 is bonded to the peripheral portion of the opening 1402 via the fourth region 640. The third region 630 of the functional substrate 140 is exposed from the opening 1402. Although not shown, the functional substrate 140 may be joined to the first member 1401 via the second region 620. In this case, the first region accommodates cells and a medium from the opening 1402. It is exposed to the space 130.

次に、樹脂製の第１部材１４０１に機能性基体１４０を固定化する手順を、図１５を参照して説明する。   Next, a procedure for fixing the functional base 140 to the resin first member 1401 will be described with reference to FIG.

第１部材１４０１を成形するための射出成形型は、凸型１５０１と凹型１５０２との一対から構成される。型内の所定位置に、機能性有機化合物５０１層の表面６０１が型の内壁面に接するように機能性基体１４０を配置し、型締めした場合に、機能性基体１４０の第４領域６４０の表面が、型内の、第１部材１４０１に対応する鋳型空間１５０６に露出するように形成されている。一方、型の内壁面には、型締め時に機能性基体１４０の第３領域６３０に、該領域を覆うように当接する***部１５０４が形成されている。型締めしてゲート１５０３を介して溶融樹脂を充填する。このとき、***部１５０４により第３領域の表面への溶融樹脂の流入が阻止される。一方、第１領域及び第２領域を含む機能性有機化合物層５０１の表面６０１への溶融樹脂の流入は凸型１５０１により阻止される。樹脂充填後、樹脂を固化させ、型から取り出し、機能性基体１４０が第４領域を介して第１部材１４０１と接合した部材が得られる。この実施形態によれば、機能性基体１４０の第１領域及び第３領域に高温の溶融樹脂が接触しないため、第１領域の表面の機能の熱による低下の可能性を低減できる。   An injection mold for molding the first member 1401 is composed of a pair of a convex mold 1501 and a concave mold 1502. When the functional substrate 140 is arranged at a predetermined position in the mold so that the surface 601 of the functional organic compound 501 layer is in contact with the inner wall surface of the mold and the mold is clamped, the surface of the fourth region 640 of the functional substrate 140 Is exposed to the mold space 1506 corresponding to the first member 1401 in the mold. On the other hand, a raised portion 1504 is formed on the inner wall surface of the mold so as to contact the third region 630 of the functional base 140 so as to cover the region when the mold is clamped. The mold is clamped and the molten resin is filled through the gate 1503. At this time, the raised portion 1504 prevents the molten resin from flowing into the surface of the third region. On the other hand, the inflow of the molten resin to the surface 601 of the functional organic compound layer 501 including the first region and the second region is blocked by the convex mold 1501. After filling the resin, the resin is solidified, taken out from the mold, and a member in which the functional base 140 is joined to the first member 1401 through the fourth region is obtained. According to this embodiment, since the high-temperature molten resin does not come into contact with the first region and the third region of the functional base 140, the possibility that the function of the surface of the first region is lowered due to heat can be reduced.

図示していないが、型締め時に、一方の射出成形型の内壁面の一部が、機能性基体１４０の第３領域及び第４領域を含む側の表面の全体に当接してそれを被覆し、他方の射出成形型の内壁面の一部に形成された***部の天面が、機能性基体１４０の第１領域に当接してそれを被覆し、機能性基体１４０の第２領域が鋳型空間に露出するように構成されていてもよい。また、型締め時に、一方の射出成形型の内壁面の一部に形成された***部の天面が、機能性基体１４０の第１領域に当接してそれを被覆し、一方の射出成形型の内壁面の一部に形成された***部の天面が、機能性基体１４０の第３領域に当接してそれを被覆し、第２領域及び第４領域が鋳型空間に露出するように構成されていてもよい。   Although not shown, at the time of mold clamping, a part of the inner wall surface of one injection mold abuts on and covers the entire surface of the functional base 140 including the third region and the fourth region. The top surface of the raised portion formed on a part of the inner wall surface of the other injection mold is in contact with and covers the first region of the functional base 140, and the second region of the functional base 140 is the mold. You may be comprised so that it may be exposed to space. Further, when the mold is clamped, the top surface of the raised portion formed on a part of the inner wall surface of one injection mold is in contact with and covers the first region of the functional base 140, and one injection mold The top surface of the raised portion formed on a part of the inner wall surface of the substrate is in contact with and covers the third region of the functional base 140, and the second region and the fourth region are exposed to the mold space. May be.

＜第二の実施形態／インモールド成形による接合方法＞
図１３に示す方法では機能性基体１４０の第１領域６１０と型の内壁面とが接触するため、射出成形時のずり応力により、第１領域の機能が低下する可能性がある。この可能性を低減するために、以下に示す、インモールド成形による接合工程の第二の実施形態を提供する。 <Second embodiment / joining method by in-mold molding>
In the method shown in FIG. 13, since the first region 610 of the functional base 140 and the inner wall surface of the mold are in contact with each other, there is a possibility that the function of the first region is deteriorated due to shear stress at the time of injection molding. In order to reduce this possibility, the following second embodiment of the joining process by in-mold forming is provided.

インモールド成形による接合工程の第二の実施形態は、容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、機能性有機化合物層が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、基材層側の表面の少なくとも一部が前記部材の鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された前記部材を成形する工程を含み、機能性基体の機能性有機化合物層により覆われる射出成形型の内壁面の領域が、機能性基体の第２領域と当接する当接領域と、該当接領域に包囲された窪み領域とを備え、機能性基体を前記内壁面の領域を覆うように配置した状態で射出成形型内に溶融樹脂を充填したときに、機能性基体の第２領域と内壁面の当接領域とが密接して、該第２領域及び該第２領域により包囲された第１領域への溶融樹脂の流入が阻止され、且つ、機能性基体の第１領域と、内壁面の窪み領域との間には空隙が形成される、ことを特徴とする。   In the second embodiment of the joining process by in-mold molding, a functional base is placed inside an injection mold for molding a container body member or a member that is a part thereof, and a functional organic compound layer is an injection mold. Covering a partial region of the inner wall surface of the substrate, and arranging so that at least a part of the surface on the base material layer side is exposed to the mold space of the member, clamping the mold, and injecting the molten resin into the injection mold A step of forming the member integrated with the functional base by filling and solidifying, and the region of the inner wall surface of the injection mold covered with the functional organic compound layer of the functional base is a functional base The molten resin is placed in the injection mold in a state in which the functional base is disposed so as to cover the area of the inner wall surface. When filled, the second region and inner wall of the functional substrate In contact with the second region and the inflow of the molten resin into the second region and the first region surrounded by the second region, and the first region of the functional substrate and the inner wall surface An air gap is formed between the hollow region.

この実施形態の具体例を図１６に示す。この実施形態では、射出成形型として、型締め時に容器部分部材３０１に対応する鋳型空間１６０４を形成する凸型１６０１と凹型１６０２の一対を用いる。凸型１６０１には、機能性基体１４０の機能性有機化合物層５０１の側の表面６０１で覆ったときに、第２領域６２０に接触し当接する当接領域１６１０が、第２領域６２０と接する位置に設けられている。更に、凸型１６０１の当接領域１６１０に囲われる部分には窪み領域１６１１が形成されている。樹脂の充填の際は、当接領域１６１０と機能性基体１４０の第２領域６２０とが密接し、該第２領域及び該第２領域により包囲された第１領域への溶融樹脂の流入が阻止される。窪み領域１６１１の存在によって機能性基体１４０の第１領域６１０は凸型１６０１と接触しない。このため、機能性基体の第１領域の機能がずり応力により低下することを回避することができる。   A specific example of this embodiment is shown in FIG. In this embodiment, a pair of a convex mold 1601 and a concave mold 1602 that form a mold space 1604 corresponding to the container partial member 301 at the time of mold clamping is used as the injection mold. In the convex mold 1601, a contact region 1610 that contacts and contacts the second region 620 when covered with the surface 601 of the functional base 140 on the side of the functional organic compound layer 501 is in contact with the second region 620. Is provided. Further, a recessed region 1611 is formed in a portion surrounded by the contact region 1610 of the convex mold 1601. When the resin is filled, the contact area 1610 and the second area 620 of the functional base 140 are in close contact with each other, and the inflow of the molten resin to the first area surrounded by the second area and the second area is prevented. Is done. Due to the presence of the depression region 1611, the first region 610 of the functional base 140 does not contact the convex mold 1601. For this reason, it can avoid that the function of the 1st field of a functional base falls by shear stress.

＜第三の実施形態／インモールド成形による接合方法＞
図１３に示す方法では機能性基体１４０の第１領域６１０と型の内壁面とが接触するため、射出成形時のずり応力により、第１領域の機能が低下する可能性がある。この可能性を低減するための他の手段として、以下に示す、インモールド成形による接合工程の第三の実施形態を提供する。 <Third embodiment / Join method by in-mold molding>
In the method shown in FIG. 13, since the first region 610 of the functional base 140 and the inner wall surface of the mold are in contact with each other, there is a possibility that the function of the first region is deteriorated due to shear stress at the time of injection molding. As another means for reducing this possibility, the following third embodiment of the joining process by in-mold molding is provided.

インモールド成形による接合工程の第三の実施形態は、容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、該機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、第１領域を含む部分に、取り外し可能な第２の保護部材を載せた状態で、該第２の保護部材の側が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、且つ、基材層側の表面の少なくとも一部が前記部材の鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された容器本体部材又はその一部である部材を成形する工程を含むこと、
を特徴とする。 In the third embodiment of the bonding process by in-mold molding, a functional substrate is placed inside an injection mold for molding a container body member or a member that is a part thereof, and the functional organic compound of the functional substrate. In a state where the removable second protective member is placed on the layer-side surface including the first region, the second protective member side covers a partial region of the inner wall surface of the injection mold, And, it is arranged so that at least a part of the surface on the base material layer side is exposed in the mold space of the member, clamped, filled with molten resin in the injection mold, and solidified. Including a step of forming a container body member integrated with a conductive substrate or a member that is a part thereof,
It is characterized by.

この実施形態の具体例を図１７に示す。この実施形態では、射出成形型として、型締め時に容器部分部材３０１に対応する鋳型空間１７０４を形成する凸型１７０１と凹型１７０２の一対を用いる。この実施形態では、機能性基体１４０の機能性有機化合物層５０１側の表面６０１に、取り外し可能な第２の保護部材１７１０を載せた状態で、該機能性基体を、凸型１７０１に接触させ、型締めして溶融樹脂を充填し（図１７Ｂ）、射出成形を行う。成形物を型から取り出した後、第２の保護部材１７１０を取り除いて、機能性基体１４０が固定された容器部分部材３０１を得る（図１７Ｃ）。第２の保護部材の存在により射出成形型の内壁面と機能性基体１４０の機能性有機化合物層５０１の表面６０１との直接的な接触を回避することができるため、機能の損傷につながる可能性のあるずり応力を低減することができる。   A specific example of this embodiment is shown in FIG. In this embodiment, as the injection mold, a pair of a convex mold 1701 and a concave mold 1702 that form a mold space 1704 corresponding to the container partial member 301 at the time of clamping is used. In this embodiment, with the removable second protective member 1710 placed on the surface 601 of the functional substrate 140 on the functional organic compound layer 501 side, the functional substrate is brought into contact with the convex 1701. The mold is clamped and filled with molten resin (FIG. 17B), and injection molding is performed. After the molded product is removed from the mold, the second protective member 1710 is removed to obtain the container partial member 301 to which the functional base 140 is fixed (FIG. 17C). The presence of the second protective member can avoid direct contact between the inner wall surface of the injection mold and the surface 601 of the functional organic compound layer 501 of the functional base 140, which may lead to functional damage. It is possible to reduce shear stress.

第２の保護部材としては特に限定されないが、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ＴＡＣ(トリアセチルセルロース)、ポリイミド（ＰＩ）、ナイロン（Ｎｙ）、低密度ポリエチレン、中密度ポリエチレン、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、ウレタン、アクリル、シリコン樹脂系、テフロンなどのフッ素樹脂系の保護部材、またはこれら保護部材にアルミニウムなどの無機金属やシリコンが蒸着されたものを使用することができる。第２の保護部材としては、フィルム状又は板状のものを使用することができる。アルミニウムなどの無機金属やシリコンが蒸着された前記保護部材は、蒸着された層の表面が機能性有機化合物層と接するように配置されることが好ましい。   Although it does not specifically limit as a 2nd protection member, Polyethylene terephthalate (PET), polystyrene (PS), polycarbonate (PC), TAC (triacetyl cellulose), polyimide (PI), nylon (Ny), low density polyethylene, Medium density polyethylene, vinyl chloride, vinylidene chloride, polyphenylene sulfide, polyether sulfone, polyethylene naphthalate, polypropylene, urethane, acrylic, silicone resin-based protective members such as Teflon, or these protective members such as aluminum A material on which an inorganic metal or silicon is deposited can be used. As the second protective member, a film-like or plate-like one can be used. The protective member on which an inorganic metal such as aluminum or silicon is deposited is preferably disposed so that the surface of the deposited layer is in contact with the functional organic compound layer.

＜第四の実施形態／インモールド成形による接合方法＞
図１３に示す方法では機能性基体１４０の基材層側の表面に高温の溶融樹脂が直接接触するため、温度によって機能性有機化合物層の機能が低下する可能性がある。この可能性を低減するための他の手段として、以下に示す、インモールド成形による接合工程の第四の実施形態を提供する。 <Fourth embodiment / Join method by in-mold molding>
In the method shown in FIG. 13, since the high-temperature molten resin is in direct contact with the surface of the functional substrate 140 on the base material layer side, the function of the functional organic compound layer may be lowered depending on the temperature. As another means for reducing this possibility, the following fourth embodiment of the joining process by in-mold molding is provided.

インモールド成形による接合工程の第四の実施形態は、容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、該機能性基体の基材層側の表面の、第３領域を含む部分に、第３の保護部材を載せた状態で、機能性有機化合物層が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、且つ、前記第３の保護部材の表面の少なくとも一部が鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された容器本体部材又はその一部である部材を成形する工程を含むことを特徴とする。   In the fourth embodiment of the joining process by in-mold molding, the functional substrate is placed inside the injection mold for molding the container body member or a member that is a part of the container body member, and the base layer side of the functional substrate. The functional organic compound layer covers a partial region of the inner wall surface of the injection mold with the third protective member placed on the portion of the surface including the third region, and the third protection A container in which a functional substrate is integrated by arranging and clamping so that at least a part of the surface of the member is exposed to the mold space, filling the molten resin in the injection mold, and solidifying it. The method includes a step of forming a main body member or a member that is a part thereof.

この実施形態の具体例を図１８に示す。この実施形態では、射出成形型として、型締め時に容器部分部材３０１に対応する鋳型空間１８０４を形成する凸型１８０１と凹型１８０２の一対を用いる。この実施形態では、機能性基体１４０の基材層５０２側の表面６０２に、第３の保護部材１８１０を配置する。このとき、第３の保護部材１８１０は少なくとも機能性基体１４０の第３領域６３０を被覆するように配置する。機能性基体１４０を、第３の保護部材１８１０と重ねた状態で、機能性有機化合物層５０１側の表面６０１を凸型１８０１と接触させ、第３の保護部材１８１０の表面の少なくとも一部（図１８では全体）が鋳型空間１８０４に露出するように配置する。型締めして溶融樹脂を充填し（図１８Ｂ）、射出成形を行う。成形品において、第３の保護部材１８１０は機能性基体１４０と容器部分部材３０１との間に挟まれた状態で一体化されている（図１８C）。この実施形態では、第３の保護部材の存在により溶融樹脂が機能性基体１４０に直接的に接触することが回避されるため、機能の損傷につながる可能性がある熱の影響を低減することができる。この効果は、機能性基体１４０がフィルム状の機能性フィルムである場合に特に有利である。   A specific example of this embodiment is shown in FIG. In this embodiment, a pair of a convex mold 1801 and a concave mold 1802 that form a mold space 1804 corresponding to the container partial member 301 at the time of clamping is used as the injection mold. In this embodiment, the third protective member 1810 is disposed on the surface 602 of the functional substrate 140 on the base material layer 502 side. At this time, the third protective member 1810 is disposed so as to cover at least the third region 630 of the functional substrate 140. In a state in which the functional base 140 is overlapped with the third protective member 1810, the surface 601 on the functional organic compound layer 501 side is brought into contact with the convex 1801, and at least a part of the surface of the third protective member 1810 (see FIG. 18 is arranged so that the whole is exposed to the mold space 1804. The mold is clamped and filled with molten resin (FIG. 18B), and injection molding is performed. In the molded product, the third protective member 1810 is integrated in a state of being sandwiched between the functional base 140 and the container portion member 301 (FIG. 18C). In this embodiment, the presence of the third protective member prevents the molten resin from coming into direct contact with the functional base 140, thereby reducing the influence of heat that can lead to functional damage. it can. This effect is particularly advantageous when the functional substrate 140 is a film-like functional film.

第３の保護部材としては、機能性基体１４０及び容器部分部材３０１と一体化されうるものであれば特に限定されないが、好ましくはポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ＴＡＣ（トリアセチルセルロース）、ポリイミド（ＰＩ）、ナイロン（Ｎｙ）、低密度ポリエチレン、中密度ポリエチレン、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、ウレタン、アクリル製の部材にコロナ処理やプラズマ処理などの表面処理された部材、ヒートシール剤が塗布されたものを挙げることができる。また、断熱効果の高いセルロースメッシュシートなどの木質繊維シートなどを使用してもよい。第３の保護部材としては、フィルム状又は板状のものを使用することができる。   The third protective member is not particularly limited as long as it can be integrated with the functional substrate 140 and the container part member 301, but preferably polyethylene terephthalate (PET), polystyrene (PS), polycarbonate (PC), TAC (triacetyl cellulose), polyimide (PI), nylon (Ny), low density polyethylene, medium density polyethylene, vinyl chloride, vinylidene chloride, polyphenylene sulfide, polyethersulfone, polyethylene naphthalate, polypropylene, urethane, acrylic Examples thereof include a member subjected to surface treatment such as corona treatment or plasma treatment, or a member applied with a heat sealant. Further, a wood fiber sheet such as a cellulose mesh sheet having a high heat insulating effect may be used. As the third protective member, a film-like or plate-like one can be used.

以上により、細胞及び培地を収容するための内室が内部に形成されている樹脂製の容器部と、この容器部の、内室に面する内壁面の少なくとも一領域に、樹脂製の基材層と、基材層上に配置された、刺激応答性ポリマーを含む機能性有機化合物層とを少なくとも備える機能性基体と、を備え、機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記容器部内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、容器部と、機能性基体とを、容器部の内壁面の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位において、樹脂が溶融されて接合された、細胞培養容器が提供される。   As described above, the resin base material is formed in at least one region of the inner wall surface of the container portion facing the inner chamber of the resin portion in which the inner chamber for containing the cells and the medium is formed. A functional substrate comprising at least a functional organic compound layer containing a stimulus-responsive polymer disposed on the base material layer, and the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer, A region for functioning in the container portion is a first region, a region surrounding the first region is a second region, a surface on the base layer side on the back side of the first region of the functional base is a third region, When the surface on the base material layer side on the back side of the second region of the functional substrate is the fourth region, the container portion, the functional substrate, the surface of the inner wall surface of the container portion, and the fourth region of the functional substrate. In the part where the surface of the surface or the surface of the second region is in contact, the resin was melted and joined, Cells culture vessel is provided.

（実施例１）インモールド成形法
試料１
Ｎ−イソプロアクリルアミドを最終濃度２０重量％になるようにイソプロプルアルコールに溶解させて塗工液を作製した。厚さ５０μｍのポリスチレンフィルム（旭化成ケミカルズより入手）にコロナ処理を施して親水化した面に、ワイヤーバーを用いて上記塗工液をフィルム上に塗布した（１．４ｇ／ｍ２）。その後４０℃の熱風で乾燥させた後、電子線を照射してＮ−イソプロアクリルアミドをグラフト重合させ、フィルム表面にポリ−Ｎ−イソプロアクリルアミドを固定化した。 (Example 1) In-mold molding method
Sample 1
N-Isoproacrylamide was dissolved in isopropyl alcohol to a final concentration of 20% by weight to prepare a coating solution. The coating liquid was applied onto the film using a wire bar on the surface of the polystyrene film (obtained from Asahi Kasei Chemicals Co., Ltd.) having a thickness of 50 μm, which was hydrophilized by corona treatment (1.4 g / m 2 ). Then, after drying with hot air at 40 ° C., electron beam irradiation was performed to graft polymerize N-isoproacrylamide, and poly-N-isoproacrylamide was immobilized on the film surface.

試料２
厚さ５０μｍポリスチレンフィルム（旭化成ケミカルズより入手）にコロナ処理を施して親水化した面に、グラビアダイレクト法により上記塗工液をフィルム上に塗布した（１．１ｇ／ｃｍ２、搬送速度：５ｍ／ｍｉｎ）。その後１２０℃の乾燥フードを２ｍ通過させて乾燥させた後、電子線を照射してＮ−イソプロアクリルアミドをグラフト重合させ、フィルム表面にポリ−Ｎ−イソプロアクリルアミドを固定化した。 Sample 2
The coating liquid was applied onto the film by a gravure direct method (1.1 g / cm 2 , conveyance speed: 5 m / cm) on a 50 μm-thick polystyrene film (obtained from Asahi Kasei Chemicals Corporation) by corona treatment. min). Then, after passing through a drying hood at 120 ° C. for 2 m and drying, electron beam irradiation was performed to graft polymerize N-isoproacrylamide, and poly-N-isoproacrylamide was immobilized on the film surface.

作製した試料１及び試料２を適切な大きさのシート状に裁断した後、水中に４時間浸漬させ、乾燥させた。そして、ハンドプレス機を用いて図６のような台形形状に切り抜いた。こうして台形形状の機能性基体を得た。   The produced Sample 1 and Sample 2 were cut into a sheet having an appropriate size, and then immersed in water for 4 hours and dried. And it cut out in the trapezoid shape like FIG. 6 using the hand press machine. Thus, a trapezoidal functional substrate was obtained.

射出成形機（α‐１００Ｃ、ファナック）のコア金型（凸型）に機能性基体を配置する。機能性基体の機能面に対して溶融樹脂が接触しないように、ガイドが付いたキャビティ金型（凹型）を配置する。ポリスチレンペレット（ＰＳジャパン ＳＧＰ１０）を用いてインモールド成型を行った（樹脂温度：２２０℃、金型温度：２０℃）。これにより、機能性基体と、底板とが接合された部材を作製した。その後、射出成型により作製したポリスチレン樹脂製の周側壁部材及び天板部材を順に、先に作製した部材と超音波溶着で接合し、フラスコ形状の部材を得た。最後にキャッピングを行い、底面が温度応答性機能を有するフラスコ型の細胞培養容器（以下、フラスコ）を作製した。   A functional substrate is placed on a core mold (convex mold) of an injection molding machine (α-100C, FANUC). A cavity mold (concave mold) with a guide is arranged so that the molten resin does not contact the functional surface of the functional substrate. In-mold molding was performed using polystyrene pellets (PS Japan SGP10) (resin temperature: 220 ° C., mold temperature: 20 ° C.). As a result, a member in which the functional substrate and the bottom plate were joined was produced. Thereafter, the peripheral wall member and the top plate member made of polystyrene resin produced by injection molding were sequentially joined to the previously produced member by ultrasonic welding to obtain a flask-shaped member. Finally, capping was performed to produce a flask-type cell culture container (hereinafter referred to as “flask”) having a temperature-responsive bottom surface.

上記フラスコをクリーンベンチ内で所定時間紫外線滅菌を実施し、ウシ大動脈血管内皮細胞を表面細胞密度が１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｃｍ２になるように調整し、作製したフラスコ内に播種した。使用培地は１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ（シグマ製）であり、培養はＣＯ２インキュベーターで３７℃、５％ＣＯ２の条件にて４８時間行った。その後、フラスコを２０℃、５％ＣＯ２条件下のインキュベーターに入庫した。２０分後、２０℃のインキュベーターから出庫した。温度応答性フィルムの培養面に形成された細胞シートを剥離した。 The flask was subjected to ultraviolet sterilization for a predetermined time in a clean bench, and bovine aortic vascular endothelial cells were adjusted to have a surface cell density of 1 × 10 5 cells / cm 2 and seeded in the prepared flask. The medium used was DMEM containing 10% FBS (manufactured by Sigma), and the culture was performed in a CO 2 incubator at 37 ° C. and 5% CO 2 for 48 hours. Thereafter, the flask was placed in an incubator under 20 ° C. and 5% CO 2 conditions. After 20 minutes, the product was removed from the incubator at 20 ° C. The cell sheet formed on the culture surface of the temperature-responsive film was peeled off.

（実施例２）超音波融着１
超音波プラスチック溶着機（９００シリーズ、ブランソン社）を用い、金属製の溶着用治具上に、実施例１で作成したのと同様の機能性基体を、機能性ポリマー層が溶着用治具表面に接するように配置する。 (Example 2) Ultrasonic fusion 1
Using an ultrasonic plastic welding machine (900 series, Branson), a functional substrate similar to that prepared in Example 1 is formed on a metal welding jig, and the functional polymer layer is the surface of the welding jig. Place it so that it touches.

フラスコ型容器を構成するための、ポリスチレン樹脂製の、底板部材、周側壁部材、及び天板部材を用いて、以下の手順でフラスコ型細胞培養容器を作製した。具体的には、機能性基体が載置された溶着用治具の周囲に嵌め合わせることが可能な、ポリスチレン樹脂製の周側壁部材と、該周側壁部材と当接する位置、並びに、機能性基体が固定される位置の周縁にエネルギーダイレクターが形成された、ポリスチレン樹脂製の底板部材とを用意した。機能性基体が載置された溶着用治具に、周側壁部材を嵌め合わせて固定し、上方から底板部材を、エネルギーダイレクターが機能性基体の基材層及び周側壁部材の端部に接するように載置した。底板部材の側から超音波ホーンを圧接し、２０ｋＨｚ、２秒間の条件で超音波振動を与えることにより、エネルギーダイレクターを溶融させ、各部材を溶着させた。その後、射出成型により作製したポリスチレン樹脂製の天板部材を超音波溶着で接合し、フラスコ形状の部材を得た。最後にキャッピングを行い、底面が温度応答性機能を有するフラスコを作製した。
機能性基体と底板部材との間に気泡は見られなかった。 Using a bottom plate member, a peripheral side wall member, and a top plate member made of polystyrene resin for constituting the flask type vessel, a flask type cell culture vessel was prepared according to the following procedure. Specifically, a peripheral side wall member made of polystyrene resin that can be fitted around the welding jig on which the functional base is placed, a position in contact with the peripheral side wall member, and the functional base A bottom plate member made of polystyrene resin in which an energy director is formed at the periphery of the position where is fixed. The peripheral side wall member is fitted and fixed to the welding jig on which the functional base is placed, and the bottom plate member is contacted from above, and the energy director contacts the base layer of the functional base and the end of the peripheral side wall member. Was placed as follows. An ultrasonic horn was pressed from the side of the bottom plate member, and ultrasonic vibration was applied at 20 kHz for 2 seconds to melt the energy director and weld each member. Thereafter, a polystyrene resin top plate member produced by injection molding was joined by ultrasonic welding to obtain a flask-shaped member. Finally, capping was performed to produce a flask having a temperature responsive function on the bottom surface.
No bubbles were found between the functional substrate and the bottom plate member.

（実施例３）超音波融着２
実施例２と同様の機能性基体と、フラスコ型容器を構成するための、ポリスチレン樹脂製の、底板部材、周側壁部材、及び天板部材を用意した。 (Example 3) Ultrasonic fusion 2
A functional base substrate similar to that of Example 2 and a bottom plate member, a peripheral side wall member, and a top plate member made of polystyrene resin for constituting a flask-type container were prepared.

超音波プラスチック溶着機（９００シリーズ、ブランソン社）を用い、金属製の溶着用治具上に底板部材を固定し、機能性基体を、基材層が底板部材の側になり、底板部材のエネルギーダイレクターが基材層の表面の周縁部に位置するように配置した。   Using an ultrasonic plastic welding machine (900 series, Branson), the bottom plate member is fixed on a metal welding jig, the functional substrate is placed on the side of the bottom plate member, and the energy of the bottom plate member It arrange | positioned so that a director may be located in the peripheral part of the surface of a base material layer.

機能性基体の側から、超音波ホーンを圧接し、２０ｋＨｚ、２秒間の条件で超音波振動を与えることにより、エネルギーダイレクターを溶融させ、底板部材と機能性基体とを溶着させた。これにより、機能性基体と、底板とが接合された部材を作製した。その後、射出成型により作製したポリスチレン樹脂製の周側壁部材及び天板部材を順に、先に作製した部材と超音波溶着で接合し、フラスコ型の細胞培養容器を作製した。最後にキャッピングを行い、底面が温度応答性機能を有するフラスコを作製した。   An ultrasonic horn was pressed from the functional substrate side, and ultrasonic vibration was applied at 20 kHz for 2 seconds to melt the energy director and weld the bottom plate member and the functional substrate. As a result, a member in which the functional substrate and the bottom plate were joined was produced. Thereafter, the peripheral wall member and the top plate member made of polystyrene resin produced by injection molding were sequentially joined to the previously produced member by ultrasonic welding to produce a flask type cell culture vessel. Finally, capping was performed to produce a flask having a temperature responsive function on the bottom surface.

この場合、機能性基体と底板部分との間に、実施例２と比較して若干多くの気泡が見られたが、実用上問題はなかった。   In this case, a slightly larger number of bubbles were observed between the functional substrate and the bottom plate portion as compared with Example 2, but there was no practical problem.

１００，２２０・・・容器部
１２０・・・細胞培養容器
１０１〜１０６，２０１〜２０２・・・容器本体部材
１４０，２１０・・・機能性基体
６１０・・・第１領域
６２０・・・第２領域
６３０・・・第３領域
６４０・・・第４領域 DESCRIPTION OF SYMBOLS 100,220 ... Container part 120 ... Cell culture container 101-106, 201-202 ... Container main body member 140,210 ... Functional base | substrate 610 ... 1st area | region 620 ... 2nd Region 630 ... Third region 640 ... Fourth region

Claims (8)

細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位において、樹脂を溶融一体化することにより接合する接合工程
を含み、
前記接合工程が、予め用意された樹脂製の容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接し、かつ、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性基体の機能性有機化合物層が向くように組み合わせて配置し、その状態で、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位に超音波振動を与えることにより、該部位において樹脂を溶融一体化し、容器本体部材と機能性基体とを接合する超音波溶着工程を含み、
前記超音波溶着工程が、
前記部材と機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面とが接するように配置して組み合わせ、
機能性基体の第２領域と当接可能な突出部を備え、該突出部に包囲された部分が窪んでいる形状の超音波ホーンを、前記部材と機能性基体との組み合わせに対して、前記部材の側から、前記部材の表面上の、機能性基体の第２領域の裏側に位置する部分に前記突出部が接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーンから超音波振動を与えるか、或いは、前記機能性基体の側から、機能性基体の第２領域の表面上に前記突出部が接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーンから超音波振動を与える工程を含む、前記方法。 A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The container body member or a member that is a part of the container body and the functional substrate are melted and integrated at a portion where the surface of the member is in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region of the functional substrate. a bonding step of bonding by looking contains,
The joining step includes a resin-made container body member prepared in advance or a member that is a part thereof, and a functional substrate, a surface of the member, a surface of a fourth region of the functional substrate, or a second region. The surface of the member is in contact with the surface, and the functional organic compound layer of the functional substrate is arranged on the space side for containing the cells and the medium so that the functional organic compound layer faces. Including an ultrasonic welding process in which the resin is melted and integrated at the part by applying ultrasonic vibration to the part in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region, and the container body member and the functional substrate are joined. ,
The ultrasonic welding process includes
The member and the functional substrate are arranged and combined so that the surface of the member and the surface of the fourth region of the functional substrate are in contact with each other,
An ultrasonic horn comprising a protruding portion capable of contacting the second region of the functional substrate and having a recessed portion surrounded by the protruding portion, for the combination of the member and the functional substrate, From the side of the member, the protrusion is brought into contact with a portion located on the back side of the second region of the functional base on the surface of the member, and in this state, ultrasonic vibration is applied from the ultrasonic horn. Alternatively, the method includes a step of pressing from the side of the functional substrate so that the protruding portion is in contact with the surface of the second region of the functional substrate, and in that state, applying ultrasonic vibration from the ultrasonic horn. , Said method. 細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位において、樹脂を溶融一体化することにより接合する接合工程
を含み、
前記接合工程が、予め用意された樹脂製の容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接し、かつ、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性基体の機能性有機化合物層が向くように組み合わせて配置し、その状態で、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位に超音波振動を与えることにより、該部位において樹脂を溶融一体化し、容器本体部材と機能性基体とを接合する超音波溶着工程を含み、
前記超音波溶着工程が、
溶着用治具上に、上方から、機能性有機化合物層が下面となるように機能性基体を載置し、該機能性基体の上方から更に前記部材を載置し、超音波ホーンを、前記部材の側から、前記部材の表面上の、機能性基体の第２領域の裏側に位置する部分に前記超音波ホーンが接するように圧接させ、その状態で、前記超音波ホーンから超音波振動を与える工程
を含む、前記方法。 A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate comprising at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
With
The functional substrate is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space side for containing cells and culture medium.
A method for producing a cell culture vessel, comprising:
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The container body member or a member that is a part of the container body and the functional substrate are melted and integrated at a portion where the surface of the member is in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region of the functional substrate. Joining process to join
Including
The joining step includes a resin-made container body member prepared in advance or a member that is a part thereof, and a functional substrate, a surface of the member, a surface of a fourth region of the functional substrate, or a second region. The surface of the member is in contact with the surface, and the functional organic compound layer of the functional substrate is arranged on the space side for containing the cells and the medium so that the functional organic compound layer faces. Including an ultrasonic welding process in which the resin is melted and integrated at the part by applying ultrasonic vibration to the part in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region, and the container body member and the functional substrate are joined. ,
The ultrasonic welding process includes
On the welding jig, from above, the functional substrate is placed so that the functional organic compound layer becomes the lower surface, and further the member is placed from above the functional substrate. From the side of the member, the ultrasonic horn is brought into pressure contact with the portion located on the back side of the second region of the functional base on the surface of the member, and in this state, ultrasonic vibration is applied from the ultrasonic horn. Said method comprising the step of providing. 前記溶着用治具の、機能性基体が載置される部位が、機能性基体の第２領域と当接可能な突出部を備え、該突出部に包囲された部分が窪んでいる形状を有する、請求項２の方法。 The site | part in which the functional base | substrate is mounted of the said welding jig is provided with the protrusion part which can contact | abut with the 2nd area | region of a functional base | substrate, and has the shape where the part enclosed by this protrusion part is depressed. The method of claim 2 . 細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位において、樹脂を溶融一体化することにより接合する接合工程
を含み、
前記接合工程が、予め用意された樹脂製の容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接し、かつ、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性基体の機能性有機化合物層が向くように組み合わせて配置し、その状態で、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位に超音波振動を与えることにより、該部位において樹脂を溶融一体化し、容器本体部材と機能性基体とを接合する超音波溶着工程を含み、
前記超音波溶着工程が、機能性基体の機能性有機化合物層の表面に、取り外し可能な第１の保護部材を載せた状態で実施される、前記方法。 A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate comprising at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
With
The functional substrate is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space side for containing cells and culture medium.
A method for producing a cell culture vessel, comprising:
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The container body member or a member that is a part of the container body and the functional substrate are melted and integrated at a portion where the surface of the member is in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region of the functional substrate. Joining process to join
Including
The joining step includes a resin-made container body member prepared in advance or a member that is a part thereof, and a functional substrate, a surface of the member, a surface of a fourth region of the functional substrate, or a second region. The surface of the member is in contact with the surface, and the functional organic compound layer of the functional substrate is arranged on the space side for containing the cells and the medium so that the functional organic compound layer faces. Including an ultrasonic welding process in which the resin is melted and integrated at the part by applying ultrasonic vibration to the part in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region, and the container body member and the functional substrate are joined. ,
The ultrasonic welding process, the surface of the functional organic compound layer of the functional substrate is carried out in a state carrying the first protective member removably, said method. 細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材と、機能性基体とを、前記部材の表面と、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面とが接する部位において、樹脂を溶融一体化することにより接合する接合工程
を含み、
容器本体部材が、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面と接合される樹脂製の第１部材であって、該表面に接合される部分が包囲する領域が開口されている形状の第１部材を少なくとも一部分に含み、
前記接合工程が、
前記第１部材を成形するための射出成形型であって、射出成形型内の所定位置に機能性基体を配置し、型締めした場合に、機能性基体の第４領域の表面又は第２領域の表面が、型内の、前記第１部材に対応する鋳型空間に露出するとともに、機能性基体の第１領域の表面及び第３領域の表面への溶融樹脂の流入が型の内壁により阻止されるように形成された前記射出成形型、の内部の前記所定位置に、機能性基体を配置し、型締めし、前記鋳型空間内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された前記第１部材を成形する工程
を含む、前記方法。 A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate comprising at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
With
The functional substrate is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space side for containing cells and culture medium.
A method for producing a cell culture vessel, comprising:
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The container body member or a member that is a part of the container body and the functional substrate are melted and integrated at a portion where the surface of the member is in contact with the surface of the fourth region or the surface of the second region of the functional substrate. Joining process to join
Including
The container body member is a resin-made first member that is bonded to the surface of the fourth region or the second region of the functional substrate, and an area surrounding the portion to be bonded to the surface is opened. Including at least a portion of a shaped first member;
The joining step includes
An injection mold for molding the first member, the surface of the fourth region of the functional substrate or the second region when the functional substrate is disposed at a predetermined position in the injection mold and clamped The surface of the mold is exposed to the mold space corresponding to the first member in the mold, and the inflow of the molten resin to the surface of the first region and the surface of the third region of the functional base is blocked by the inner wall of the mold. The functional base is placed at the predetermined position inside the injection mold formed in such a manner, the mold is clamped, the molten resin is filled in the mold space, and solidified. The said method including the process of shape | molding the said 1st member with which the base | substrate was integrated. 細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、機能性有機化合物層が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、基材層側の表面の少なくとも一部が前記部材の鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された前記部材を成形する工程を含み、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
機能性基体の機能性有機化合物層により覆われる射出成形型の内壁面の領域が、機能性基体の第２領域と当接する当接領域と、該当接領域に包囲された窪み領域とを備え、機能性基体を前記内壁面の領域を覆うように配置した状態で射出成形型内に溶融樹脂を充填したときに、機能性基体の第２領域と内壁面の当接領域とが密接して、該第２領域及び該第２領域により包囲された第１領域への溶融樹脂の流入が阻止され、且つ、機能性基体の第１領域と、内壁面の窪み領域との間には空隙が形成される、前記方法。 A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
Inside the injection mold for molding the container main body member or a part thereof, the functional substrate, the functional organic compound layer covers a part of the inner wall surface of the injection mold, and the base material layer The functional substrate is integrated by arranging the mold so that at least a part of the surface on the side is exposed to the mold space of the member, clamping the mold, filling the molten resin in the injection mold, and solidifying it. Forming the formed member,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
The region of the inner wall surface of the injection mold covered with the functional organic compound layer of the functional substrate includes a contact region that contacts the second region of the functional substrate, and a recessed region surrounded by the corresponding contact region, When the molten resin is filled in the injection mold in a state where the functional base is arranged so as to cover the area of the inner wall surface, the second area of the functional base and the contact area of the inner wall surface are in close contact with each other, The molten resin is prevented from flowing into the second region and the first region surrounded by the second region, and a gap is formed between the first region of the functional base and the recessed region of the inner wall surface. Said method. 細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、該機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、第１領域を含む部分に、取り外し可能な第２の保護部材を載せた状態で、該第２の保護部材の側が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、且つ、基材層側の表面の少なくとも一部が前記部材の鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された容器本体部材又はその一部である部材を成形する工程を含む、前記方法。 A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
Inside the injection mold for molding the container body member or a member that is a part of the container body, the functional substrate is a portion including the first region on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer. In a state where the removable second protective member is placed, the second protective member side covers a partial region of the inner wall surface of the injection mold, and at least a part of the surface on the base material layer side is the above-mentioned A container body member integrated with a functional substrate or a part thereof by placing the mold so as to be exposed in the mold space of the member, clamping the mold, filling the molten resin in the injection mold, and solidifying it. The said method including the process of shape | molding the member which is. 細胞及び培地を収容するための容器部を備える細胞培養容器であって、
容器部は、
樹脂製の容器本体部材と、
樹脂製の基材層及び該基材層上に配置された機能性有機化合物層を少なくとも備える機能性基体と
を備え、
機能性基体は、容器本体部材の表面に、細胞及び培地を収容するための空間側に機能性有機化合物層が向くように固定されている
細胞培養容器を製造する方法であって、
機能性基体の機能性有機化合物層側の表面の、前記空間内において機能するための領域を第１領域とし、該第１領域を包囲する領域を第２領域とし、機能性基体の第１領域の裏側の基材層側の表面を第３領域とし、機能性基体の第２領域の裏側の基材層側の表面を第４領域としたとき、
容器本体部材又はその一部である部材を成形するための射出成形型の内部に、機能性基体を、該機能性基体の基材層側の表面の、第３領域を含む部分に、第３の保護部材を載せた状態で、機能性有機化合物層が射出成形型の内壁面の一部の領域を覆い、且つ、前記第３の保護部材の表面の少なくとも一部が鋳型空間に露出するように配置し、型締めし、該射出成形型内に溶融状態の樹脂を充填し、固化させることにより、機能性基体が一体化された容器本体部材又はその一部である部材を成形する工程を含む、前記方法。 A cell culture container comprising a container part for containing cells and a medium,
The container part
A resin container body member;
A functional substrate including at least a resin base layer and a functional organic compound layer disposed on the base layer;
The functional substrate is a method for producing a cell culture container in which the functional organic compound layer is fixed on the surface of the container body member so that the functional organic compound layer faces the space for containing cells and a medium,
A region for functioning in the space on the surface of the functional substrate on the side of the functional organic compound layer is defined as a first region, a region surrounding the first region is defined as a second region, and the first region of the functional substrate. When the surface on the back side of the base material layer side is the third region, and the surface of the functional base on the back side of the base material layer side is the fourth region,
Inside the injection mold for molding the container main body member or a member that is a part thereof, the functional substrate is placed on the surface of the functional substrate on the base material layer side including the third region. With the protective member placed, the functional organic compound layer covers a partial region of the inner wall surface of the injection mold, and at least a part of the surface of the third protective member is exposed to the mold space. A mold body, or a member that is a part of the container main body integrated with the functional substrate, is filled with a molten resin in the injection mold and solidified. Including said method.
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