JP5810850B2 - Resin cell culture vessel and method for producing the same - Google Patents

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Description

本発明は、容器底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器と、その製造方法に関する。   The present invention relates to a resin-made cell culture container having a functional organic compound layer on the bottom of the container, and a method for producing the same.

細胞培養される表面に温度応答性ポリマー等の機能性有機化合物層を被覆した、細胞培養支持体(シャーレなどの細胞培養容器)が特許文献1に記載されている。さらに、フィルム基材層と機能性有機化合物層とを有する機能性フィルムを樹脂製の細胞培養容器の底面に固定した樹脂製細胞培養容器も知られている。また、細胞培養に用いる樹脂製容器の製造において、周側壁の開放端面に底板を超音波溶着により液密に接合する技術も特許文献2に記載されている。   Patent Document 1 discloses a cell culture support (a cell culture container such as a petri dish) in which a functional organic compound layer such as a temperature-responsive polymer is coated on the surface to be cultured. Further, a resin cell culture vessel in which a functional film having a film base layer and a functional organic compound layer is fixed to the bottom surface of a resin cell culture vessel is also known. Further, Patent Document 2 describes a technique in which a bottom plate is liquid-tightly joined to an open end surface of a peripheral side wall by ultrasonic welding in manufacturing a resin container used for cell culture.

超音波溶着は、超音波ホーンを用いて超音波を加圧状態で発振し、両部材の接触面を溶融接合する技術である。好ましい超音波溶着技術として、エネルギーダイレクターとして機能する薄い突起物が設けられた樹脂部材と、他の樹脂部材とを、エネルギーダイレクターの頂点を他の樹脂部材に押し付けながら接触させ、接触状態を維持しながら、超音波ホーンから超音波を加圧状態で発振してエネルギーダイレクターを溶融させ、両部材を接合する技術も知られている。   Ultrasonic welding is a technique that uses an ultrasonic horn to oscillate ultrasonic waves in a pressurized state and melt-bond the contact surfaces of both members. As a preferable ultrasonic welding technique, a resin member provided with a thin projection functioning as an energy director and another resin member are brought into contact with each other while pressing the apex of the energy director against the other resin member, and the contact state is changed. There is also known a technique in which both members are joined by oscillating an ultrasonic wave from an ultrasonic horn in a pressurized state while maintaining it to melt an energy director.

特開平2−211865号公報JP-A-2-21865 特開昭61−225028号公報JP-A-61-225028

超音波ホーンを用いた超音波溶着は、樹脂製部材同士の溶着一体化に極めて有効な手段である。しかし、超音波溶着では、溶着される樹脂部材同士の接触面での振動によって、樹脂の微細な粉塵が発生し飛散するのを避けられない。底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器を超音波溶着の手法を用いて製造する場合に、内側面に予め機能性有機化合物層を形成した底板、または内側面に機能性有機化合物層を備えた機能性フィルムを積層した底板のいずれを用いる場合であっても、周側壁の実質的に平坦面である開放端面と底板との接触面で発生する振動によって、振動面から樹脂の微細な粉塵が発生して、飛散した粉塵が機能性有機化合物層に残留するのを避けられない。機能性有機化合物層に対して強力な洗浄を実施すると当該層が破壊されるおそれがあるため、飛散した粉塵を除去することができず、結果として粉塵は層に残留したままとなる。   Ultrasonic welding using an ultrasonic horn is a very effective means for welding integration of resin members. However, in ultrasonic welding, it is inevitable that fine dust of resin is generated and scattered due to vibration at the contact surface between the resin members to be welded. When manufacturing a plastic cell culture vessel having a functional organic compound layer on the bottom surface using an ultrasonic welding technique, a functional organic compound is formed on the bottom plate or the inner side surface on which the functional organic compound layer has been formed in advance. Even when using any of the bottom plates laminated with a functional film having a layer, the vibration of the resin from the vibration surface is caused by the vibration generated on the contact surface between the open end surface, which is a substantially flat surface of the peripheral side wall, and the bottom plate. It is inevitable that fine dust is generated and scattered dust remains in the functional organic compound layer. When strong washing is performed on the functional organic compound layer, the layer may be destroyed, so that the scattered dust cannot be removed, and as a result, the dust remains in the layer.

残留した樹脂粉塵は、細胞の顕微鏡による観察時に視野に入って邪魔になる問題があり、また、機能性有機化合物層の所望の機能が樹脂粉塵により妨げられるリスクもある。この不都合は、一方または双方の樹脂部材にエネルギーダイレクターとして機能する薄い突起物を形成して超音波溶着を行う場合、特に顕著となる。   Residual resin dust has a problem that it enters the field of view when observing cells with a microscope, and there is also a risk that the desired function of the functional organic compound layer is hindered by resin dust. This inconvenience becomes particularly noticeable when ultrasonic welding is performed by forming a thin protrusion functioning as an energy director on one or both resin members.

本発明は、上記の事情に鑑みてなされたものであり、超音波溶着の技術を用いて底板を周側壁に溶融一体化して、底面に機能性有機化合物層を備えた樹脂製細胞培養容器を製造する場合であっても、樹脂粉塵が機能性有機化合物層の上に残留するのをほぼ完全に回避することのできる樹脂製細胞培養容器の製造方法、およびその製造方法で作られた樹脂製細胞培養容器を提供することを課題とする。   The present invention has been made in view of the above circumstances, and a resin cell culture container having a functional organic compound layer on the bottom surface is prepared by melting and integrating a bottom plate to a peripheral side wall using a technique of ultrasonic welding. Even in the case of manufacturing, a resin cell culture container manufacturing method capable of almost completely avoiding resin dust remaining on the functional organic compound layer, and a resin made by the manufacturing method It is an object to provide a cell culture container.

本発明による樹脂製細胞培養容器の製造方法の第1の発明は、容器底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器の製造方法であって、開放端面の全周に内嵌合用の段差部を有する周側壁と、前記内嵌合用の段差部に嵌合する膨出部とフランジ部を有する底板と、機能性有機化合物層を備えた機能性フィルムであって周縁部が前記周側壁に形成した段差部に乗ることのできる大きさと形状とされた機能性フィルムとを用意し、前記機能性フィルムを機能性有機化合物層が内側となり周縁部が前記周側壁に形成した前記段差部に乗るようにして配置し、その上から前記底板をその膨出部が前記段差部に内嵌合するようにして前記周側壁の上に配置し、その状態で、前記底板のフランジ部およびその近傍に超音波振動を与えることで前記周側壁の開放端面に前記底板を前記機能性フィルムとともに溶融一体化することを特徴とする。   1st invention of the manufacturing method of the resin-made cell culture containers by this invention is a manufacturing method of the resin-made cell culture containers provided with a functional organic compound layer in the container bottom surface, Comprising: It is for internal fitting to the perimeter of an open end surface. A peripheral film having a stepped portion, a bottom plate having a bulging portion and a flange portion fitted to the stepped portion for internal fitting, and a functional film having a functional organic compound layer, the peripheral portion being the peripheral side wall A functional film having a size and shape that can be placed on the stepped portion formed in the step is prepared, and the functional film is formed on the stepped portion formed on the peripheral side wall with the functional organic compound layer inside. The bottom plate is placed on the peripheral side wall so that the bulging portion fits inside the stepped portion, and in that state, the flange portion of the bottom plate and the vicinity thereof By applying ultrasonic vibration to Wherein the melting integrating the bottom plate to the open end surface of the side wall with the functional film.

本発明による樹脂製細胞培養容器の製造方法の第2の発明は、容器底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器の製造方法であって、開放端面の全周に内嵌合用の段差部を有する周側壁と、前記内嵌合用の段差部に嵌合する膨出部とフランジ部を備え前記膨出部の表面には機能性有機化合物層が形成されている底板とを用意し、前記底板をその膨出部が前記段差部に内嵌合するようにして前記周側壁の上に配置し、その状態で、前記底板のフランジ部およびその近傍に超音波振動を与えることで前記周側壁の開放端面に前記底板を溶融一体化することを特徴とする。   A second invention of the method for producing a resinous cell culture container according to the present invention is a method for producing a resinous cell culture container having a functional organic compound layer on the bottom surface of the container. A peripheral side wall having a stepped portion, and a bottom plate having a bulging portion and a flange portion fitted to the inner fitting stepped portion and having a functional organic compound layer formed on the surface of the bulging portion are prepared. The bottom plate is disposed on the peripheral side wall so that the bulging portion fits into the stepped portion, and in that state, the bottom plate is subjected to ultrasonic vibrations on the flange portion and the vicinity thereof. The bottom plate is melted and integrated with the open end surface of the peripheral side wall.

上記第1の発明と第2の発明とは、別途調整した機能性有機化合物層を備えた機能性フィルムを底板の前記膨出部の表面に積層一体化するか(第1の発明)、底板の膨出部の表面に機能性有機化合物層を直接に形成するか(第2の発明)で相違しており、それ以外の処理は同じである。   In the first invention and the second invention, a functional film having a separately prepared functional organic compound layer is laminated and integrated on the surface of the bulging portion of the bottom plate (first invention), or the bottom plate Whether the functional organic compound layer is directly formed on the surface of the bulged portion (second invention) is different, and the other processes are the same.

いずれの発明による製造方法においても、機能性有機化合物層はその周縁部が周側壁の開放端面の全周にわたって形成された内嵌合用の段差部内に入り込んでおり、周壁部の開放端面と底板との接触面は、該内嵌合用の段差部内に入り込んでいる機能性有機化合物層よりも上位の位置にのみ存在する。そのために、超音波溶着時の振動によって樹脂同士の接触面から樹脂粉塵が発生しても、その粉塵は、内嵌合部の領域がバリア(堰)として機能することで、その領域を通過することができない。そのために、発生した樹脂粉塵が機能性有機化合物層の表面、すなわち樹脂製細胞培養容器での細胞培養面側に飛散することはなく、樹脂粉塵が細胞の顕微鏡による観察時に視野に入って邪魔になることも、機能性有機化合物層の所望の機能が樹脂粉塵により妨げられることも、回避できる。   In any of the manufacturing methods according to the present invention, the functional organic compound layer has a peripheral portion that enters a stepped portion for internal fitting formed over the entire periphery of the open end surface of the peripheral side wall, and the open end surface of the peripheral wall portion and the bottom plate This contact surface exists only at a position higher than the functional organic compound layer entering the stepped portion for internal fitting. Therefore, even if resin dust is generated from the contact surface between the resins due to vibration during ultrasonic welding, the dust passes through the region because the region of the inner fitting portion functions as a barrier (weir). I can't. Therefore, the generated resin dust does not scatter to the surface of the functional organic compound layer, that is, the cell culture surface side in the resin cell culture vessel, and the resin dust enters the field of view when observing the cells with a microscope and is in the way. It can also be avoided that the desired function of the functional organic compound layer is hindered by the resin dust.

上記のように、本発明による樹脂製細胞培養容器の製造方法では、超音波溶着を行っても機能性有機化合物層の表面に樹脂粉塵が飛散するのを回避することができるので、前記周側壁として、周側壁の開放端面と底板とが対向する部位にエネルギーダイレクターとして機能する突起を備えた周側壁を用いても、また、前記底板として、周側壁の開放端面と底板とが対向する部位にエネルギーダイレクターとして機能する突起を備えた底板を用いても、飛散する粉塵に起因して細胞培養に不都合が生じることはなく、より効率的な超音波溶着を実行することができるようになる。   As described above, in the method for producing a resin-made cell culture container according to the present invention, it is possible to avoid scattering of resin dust on the surface of the functional organic compound layer even if ultrasonic welding is performed. As a part where the open end face of the peripheral side wall and the bottom plate are opposed to each other, even if a peripheral side wall provided with a projection functioning as an energy director is used at the part where the open end face of the peripheral side wall and the bottom plate face each other Even if a bottom plate with a projection that functions as an energy director is used, there is no inconvenience in cell culture due to scattered dust, and more efficient ultrasonic welding can be performed. .

本発明による樹脂製細胞培養容器の製造方法の他の態様では、第1および第2の発明において、さらに、前記底板を溶着一体化した後に、前記周側壁の他方の開放端面を樹脂製天板で閉鎖する工程をさらに行うことを特徴とする。この態様では、天板を備えた樹脂製細胞培養容器を得ることができる。樹脂製天板を周側壁の他方の開放端面に一体化する手段は任意であってよく、熱融着や接着剤による接着なども用いることができる。   In another aspect of the method for producing a resin-made cell culture container according to the present invention, in the first and second inventions, after the bottom plate is welded and integrated, the other open end surface of the peripheral side wall is attached to the resin top plate. And the step of closing at. In this aspect, a resin-made cell culture vessel provided with a top plate can be obtained. The means for integrating the resin top plate with the other open end surface of the peripheral side wall may be arbitrary, and heat fusion, adhesion with an adhesive, or the like can be used.

本発明はさらに、容器底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器であって、少なくとも一方の端面の全周に内嵌合用の段差部を有する周側壁と、前記内嵌合用の段差部に嵌合する膨出部とフランジ部とを有する底板とを備え、前記機能性有機化合物層はその周縁部が前記周側壁に形成した前記段差部に乗った姿勢で、前記周側壁の前記端面に前記底板が溶融一体化されていることを特徴とする樹脂製細胞培養容器をも開示する。   The present invention is further a resin-made cell culture container having a functional organic compound layer on the bottom of the container, the peripheral side wall having a step part for internal fitting on the entire circumference of at least one end surface, and the step for internal fitting A bottom plate having a bulging portion and a flange portion that are fitted to the portion, and the functional organic compound layer has a posture in which the peripheral portion rides on the stepped portion formed on the peripheral side wall, and Also disclosed is a resinous cell culture vessel characterized in that the bottom plate is fused and integrated on the end face.

この樹脂製細胞培養容器は、細胞培養面である機能性有機化合物層の表面に樹脂粉塵のような異物が存在しないので、機能性有機化合物層の所望の機能が所期どおりに発揮される利点がある。   This resin cell culture vessel has the advantage that the desired function of the functional organic compound layer is exhibited as expected because there is no foreign matter such as resin dust on the surface of the functional organic compound layer that is the cell culture surface. There is.

本発明によれば、所期どおりの機能を発揮することのできる機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器を超音波溶着の手段を用いて容易に製造することが可能となる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, it becomes possible to manufacture easily the resin-made cell culture containers provided with the functional organic compound layer which can exhibit a function as expected using the means of ultrasonic welding.

第1の発明により樹脂製細胞培養容器の製造方法を実施するのに必要な構成部材の全体を説明するための斜視図。The perspective view for demonstrating the whole structural member required in order to implement the manufacturing method of the resin-made cell culture containers by 1st invention. 各構成部材の詳細を説明するための中央断面図。The center sectional view for explaining the details of each component. 第1の発明により超音波溶着を行うときの各構成部材の配置を説明するための断面図。Sectional drawing for demonstrating arrangement | positioning of each structural member when performing ultrasonic welding by 1st invention. 超音波溶着後の状態を示す断面図。Sectional drawing which shows the state after ultrasonic welding. 第2の発明により樹脂製細胞培養容器の製造方法を実施するときの底板を説明する断面図。Sectional drawing explaining the baseplate when enforcing the manufacturing method of the resin-made cell culture containers by 2nd invention. 第2の発明により超音波溶着を行うときの各構成部材の配置を説明するための断面図。Sectional drawing for demonstrating arrangement | positioning of each structural member when performing ultrasonic welding by 2nd invention. エネルギーダイレクターとして機能する薄い突起物の形成位置の他の例を説明するための図。The figure for demonstrating the other example of the formation position of the thin protrusion which functions as an energy director. 樹脂製細胞培養容器の他の形態を示す図。The figure which shows the other form of a resin-made cell culture container.

以下、本発明を実施の形態に基づき説明する。
[第1の発明の実施の形態]
発明を実施するに当たっては、図1の斜視図および図2の中央断面に示すように、製造しようとする樹脂製細胞培養容器Aの周囲の側壁を構成することとなる周側壁10と、機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20と、製造しようとする樹脂製細胞培養容器Aの底面を構成することとなる底板30とを予め用意する。以下の説明では、製造しようとする樹脂製細胞培養容器Aは上面側を開放した平面視で矩形状の箱型容器である場合を例として説明するが、容器の形状は任意であり、円筒形の容器や、横幅が次第に狭くなる部分を有する箱型容器などであってもよい。
Hereinafter, the present invention will be described based on embodiments.
[First Embodiment]
In carrying out the invention, as shown in the perspective view of FIG. 1 and the central section of FIG. 2, the peripheral side wall 10 that constitutes the side wall around the resin cell culture vessel A to be manufactured, and the functionality A functional film 20 having an organic compound layer 21 and a bottom plate 30 that will form the bottom surface of the resinous cell culture vessel A to be manufactured are prepared in advance. In the following description, the resin cell culture container A to be manufactured will be described as an example of a rectangular box-shaped container in plan view with the upper surface open, but the shape of the container is arbitrary and cylindrical Or a box-shaped container having a portion whose width is gradually narrowed.

<周側壁10>
この例において、周側壁10は閉じた矩形状であり、限定されないが、周側壁の肉厚は1〜1.5mm程度、高さは20〜40mm程度である。周側壁10の一方の端面11は平坦面であり、該端面11には、内面側を切り欠いた内嵌合用の段差部12が全周にわたって形成されている。段差部12は垂直面13と水平面14とで形成され、限定されないが、この例において、垂直面13の高さは500μm〜1mm程度であり、水平面14の幅は400〜600μm程度である。周側壁10の他方の端面15は端面11と平行な平坦面である。周側壁10は、後に説明する底板30および天板50も含めて、細胞培養において一般的に用いられる材料を用いて作ることができる。例えば、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリエチレンテレフタレート樹脂、ポリプロピレン樹脂、ABS樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂等の樹脂材料、表面親水化処理を施した上記の少なくとも1種を含む樹脂材料、およびガラスや石英等の無機材料であることができるが、好ましくは樹脂材料である。樹脂材料としては、ポリスチレン樹脂またはポリエチレンテレフタレート樹脂であることが好ましい。また、透明な樹脂材料であることが好ましい。
<Surrounding wall 10>
In this example, the peripheral side wall 10 has a closed rectangular shape, and is not limited, but the thickness of the peripheral side wall is about 1 to 1.5 mm and the height is about 20 to 40 mm. One end surface 11 of the peripheral side wall 10 is a flat surface, and the end surface 11 is formed with an inner fitting stepped portion 12 that is cut out on the inner surface side over the entire circumference. The step portion 12 is formed by the vertical surface 13 and the horizontal surface 14 and is not limited. In this example, the height of the vertical surface 13 is about 500 μm to 1 mm, and the width of the horizontal surface 14 is about 400 to 600 μm. The other end surface 15 of the peripheral side wall 10 is a flat surface parallel to the end surface 11. The peripheral side wall 10 can be made using materials generally used in cell culture, including a bottom plate 30 and a top plate 50 described later. For example, polystyrene resin, polyester resin, polyethylene resin, polyethylene terephthalate resin, polypropylene resin, ABS resin, nylon, acrylic resin, fluorine resin, polycarbonate resin, polyurethane resin, methylpentene resin, phenol resin, melamine resin, epoxy resin, vinyl chloride A resin material such as a resin, a resin material containing at least one of the above-described surface hydrophilized treatment, and an inorganic material such as glass or quartz are preferable, but a resin material is preferable. The resin material is preferably a polystyrene resin or a polyethylene terephthalate resin. Moreover, it is preferable that it is a transparent resin material.

<機能性フィルム20>
機能性有機化合物層を備えた機能性フィルム20は、図2に断面を示すように、機能性有機化合物層21と、該機能性有機化合物層21を支持するためのフィルム基材層22とで構成されている。機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20の平面視での形状は、前記した周側壁10の平面視形状と同じであり、大きさは、前記段差部12の水平面14を機能性フィルム20の周縁部が段差部12の垂直面13に沿って覆うことのできる大きさとされている。より好ましくは機能性フィルム20の大きさは、前記段差部12の水平面14の全面を覆うような大きさとするとよい。また、機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20は全体がほぼ等しい厚みとされている。なお、本発明において機能性フィルム20は、表面に所望の機能が付与されたフィルムであれば特に限定されない。
<Functional film 20>
The functional film 20 provided with the functional organic compound layer includes a functional organic compound layer 21 and a film base layer 22 for supporting the functional organic compound layer 21 as shown in a cross section in FIG. It is configured. The shape of the functional film 20 provided with the functional organic compound layer 21 in plan view is the same as the shape of the peripheral side wall 10 in plan view, and the size of the functional film 20 is the same as that of the step surface 12 on the horizontal plane 14. The peripheral edge portion of 20 has a size that can be covered along the vertical surface 13 of the stepped portion 12. More preferably, the size of the functional film 20 is set so as to cover the entire surface of the horizontal surface 14 of the stepped portion 12. Moreover, the functional film 20 provided with the functional organic compound layer 21 is made into the substantially equal thickness as a whole. In the present invention, the functional film 20 is not particularly limited as long as it has a desired function on the surface.

<フィルム基材層22>
本発明において前記フィルム基材層22は、一方の表面に上述の機能性化合物層21を形成することが可能な材料を含むものであればよく、材料の種類は特に限定されない。典型的には、フィルム基材層の材料として、ポリエチレンテレフタレート(PET)、ポリスチレン(PS)、ポリカーボネート(PC)、TAC(トリアセチルセルロース)、ポリイミド(PI)、ナイロン(Ny)、低密度ポリエチレン(LDPE)、中密度ポリエチレン(MDPE)、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ポリフェニレンサルファイド、ポリエーテルサルフォン、ポリエチレンナフタレート、ポリプロピレン、アクリル等が挙げられる。
<Film base material layer 22>
In the present invention, the film base layer 22 only needs to contain a material capable of forming the above-described functional compound layer 21 on one surface, and the type of the material is not particularly limited. Typically, as a material for the film base layer, polyethylene terephthalate (PET), polystyrene (PS), polycarbonate (PC), TAC (triacetyl cellulose), polyimide (PI), nylon (Ny), low density polyethylene ( LDPE), medium density polyethylene (MDPE), vinyl chloride, vinylidene chloride, polyphenylene sulfide, polyether sulfone, polyethylene naphthalate, polypropylene, acrylic and the like.

フィルム基材層22の、機能性化合物層21が形成される側の表面は、易接着処理された表面であることができる。「易接着処理」とは、例えば、ポリエステル、アクリル酸エステル、ポリウレタン、ポリエチレンイミン、シランカップリング剤、ペルフルオロオクタンスルホン酸(PFOS)等の易接着剤による処理を指す。   The surface of the film base layer 22 on the side where the functional compound layer 21 is formed can be a surface subjected to an easy adhesion treatment. “Easy adhesion treatment” refers to treatment with an easy adhesive such as polyester, acrylic ester, polyurethane, polyethyleneimine, silane coupling agent, perfluorooctane sulfonic acid (PFOS), and the like.

フィルム基材層22の厚さ(フィルム基材層が基材の層に加えて易接着層を備える場合は、易接着層を含むフィルム基材層の全体の厚さを指す)は、特に制限は無いが可撓性を付与する厚さであることが好ましく、例えば5〜400μm、好ましくは、50〜250μmである。   The thickness of the film base material layer 22 (in the case where the film base material layer includes an easy adhesion layer in addition to the base material layer, indicates the total thickness of the film base material layer including the easy adhesion layer) is particularly limited. However, it is preferably a thickness that imparts flexibility, for example, 5 to 400 μm, and preferably 50 to 250 μm.

<機能性化合物層21>
機能性化合物層21を構成する機能性化合物としては、有機化合物または無機化合物が挙げられ、より好ましくは、所定の刺激によって細胞接着性から細胞非接着性へと変化することが可能な表面を有する刺激応答性ポリマーや、1つ以上のエチレングリコール単位(CH−CH−O)からなるエチレングリコール鎖等の親水性化合物が挙げられる。
機能性化合物層の膜厚は、例えば、0.5nm〜300nmの範囲内とするのがよく、なかでも1nm〜100nmの範囲内であることが好ましい。
以下「刺激応答性ポリマー層」および「親水性化合物層」の好適な実施形態について説明する。
<Functional compound layer 21>
Examples of the functional compound constituting the functional compound layer 21 include an organic compound or an inorganic compound. More preferably, the functional compound layer 21 has a surface that can be changed from cell adhesiveness to cell nonadhesiveness by a predetermined stimulus. Examples thereof include hydrophilic compounds such as a stimulus-responsive polymer and an ethylene glycol chain composed of one or more ethylene glycol units (CH 2 —CH 2 —O).
The film thickness of the functional compound layer is, for example, preferably in the range of 0.5 nm to 300 nm, and more preferably in the range of 1 nm to 100 nm.
Hereinafter, preferred embodiments of the “stimulus responsive polymer layer” and the “hydrophilic compound layer” will be described.

<刺激応答性ポリマー層>
機能性有機化合物層は、刺激応答性ポリマー層であることが特に好ましい。刺激応答性ポリマー層とは、所定の刺激によって表面の細胞の接着度合いが変化するポリマーを含む層である。刺激応答性ポリマーとしては、温度応答性ポリマー、pH応答性ポリマー、イオン応答性ポリマー、光応答性ポリマーなどを挙げることができる。なかでも温度応答性ポリマーが、刺激の付与が容易であることから好ましい。
<Stimulus responsive polymer layer>
The functional organic compound layer is particularly preferably a stimulus-responsive polymer layer. The stimulus-responsive polymer layer is a layer containing a polymer in which the degree of cell adhesion on the surface is changed by a predetermined stimulus. Examples of the stimulus responsive polymer include a temperature responsive polymer, a pH responsive polymer, an ion responsive polymer, and a photoresponsive polymer. Among these, a temperature-responsive polymer is preferable because it is easy to give a stimulus.

温度応答性ポリマーとして、例えば、細胞を培養する温度では細胞接着性を示し、作製した細胞シートの剥離する時の温度では細胞非接着性を示すものを用いるとよい。例えば、温度応答性ポリマーは、臨界溶解温度未満の温度では周囲の水に対する親和性が向上し、ポリマーが水を取り込んで膨潤して表面に細胞を接着しにくくする性質(細胞非接着性)を示し、同温度以上の温度ではポリマーから水が脱離することでポリマーが収縮して表面に細胞を接着しやすくする性質(細胞接着性)を示すものを用いるとよい。このような臨界溶解温度は、下限臨界溶解温度と呼ばれる。下限臨界溶解温度Tが0℃〜80℃、さらに好ましくは0℃〜50℃である温度応答性ポリマーを用いるとよい。Tが0℃〜80℃であると、細胞を安定的に培養できるからである。   As the temperature-responsive polymer, for example, a polymer that exhibits cell adhesion at a temperature at which cells are cultured and exhibits cell non-adhesion at a temperature at which the produced cell sheet is peeled may be used. For example, a temperature-responsive polymer has improved affinity to surrounding water at temperatures below the critical dissolution temperature, and the polymer takes up water and swells to make it difficult for cells to adhere to the surface (cell non-adhesiveness). It is preferable to use a material exhibiting a property (cell adhesiveness) that makes the polymer shrink and easily adheres cells to the surface when water is desorbed from the polymer at a temperature equal to or higher than the same temperature. Such a critical solution temperature is called a lower critical solution temperature. A temperature-responsive polymer having a lower critical solution temperature T of 0 ° C. to 80 ° C., more preferably 0 ° C. to 50 ° C. may be used. This is because the cells can be stably cultured when T is 0 ° C to 80 ° C.

好適な温度応答性ポリマーとしてはアクリル系ポリマーまたはメタクリル系ポリマーが挙げられる。具体的に好適な温度応答性ポリマーとしては、例えばポリ−N−イソプロピルアクリルアミド(T=32℃)、ポリ−N−n−プロピルアクリルアミド(T=21℃)、ポリ−N−n−プロピルメタクリルアミド(T=32℃)、ポリ−N−エトキシエチルアクリルアミド(T=約35℃)、ポリ−N−テトラヒドロフルフリルアクリルアミド(T=約28℃)、ポリ−N−テトラヒドロフルフリルメタクリルアミド(T=約35℃)、およびポリ−N,N−ジエチルアクリルアミド(T=32℃)等が挙げられる。   Suitable temperature-responsive polymers include acrylic polymers or methacrylic polymers. Specific examples of suitable temperature-responsive polymers include poly-N-isopropylacrylamide (T = 32 ° C.), poly-Nn-propyl acrylamide (T = 21 ° C.), and poly-Nn-propyl methacrylamide. (T = 32 ° C.), poly-N-ethoxyethyl acrylamide (T = about 35 ° C.), poly-N-tetrahydrofurfuryl acrylamide (T = about 28 ° C.), poly-N-tetrahydrofurfuryl methacrylamide (T = About 35 ° C.), and poly-N, N-diethylacrylamide (T = 32 ° C.).

pH応答性ポリマーおよびイオン応答性ポリマーは作製しようとする細胞シートに適したものを適宜選択することができる。
刺激応答性ポリマー層は、重合して目的の刺激応答性ポリマーを形成するモノマーと、該モノマーを溶解しうる有機溶媒と含む塗布用組成物を調製し、これを慣用の塗布方法に従って、フィルム基材の表面に塗布して塗膜を形成し、次に、該塗膜に放射線照射等の適当な手段により塗膜中のモノマーを重合してポリマーを形成するとともに、フィルム基材の表面とポリマーとの間にグラフト化反応を生じさせることにより形成することができる。
As the pH responsive polymer and the ion responsive polymer, those suitable for the cell sheet to be prepared can be appropriately selected.
The stimulus-responsive polymer layer is prepared by preparing a coating composition containing a monomer that is polymerized to form a target stimulus-responsive polymer and an organic solvent that can dissolve the monomer. The film is coated on the surface of the material to form a coating film, and then the monomer in the coating film is polymerized by an appropriate means such as radiation irradiation to form a polymer. And a grafting reaction between them.

<親水性化合物層>
機能性有機化合物層の他の実施形態として、1つ以上のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖(複数のエチレングリコール単位からなるエチレングリコール鎖は、「ポリエチレングリコール鎖」ということができる)等の親水性化合物の層が挙げられる。
<Hydrophilic compound layer>
As another embodiment of the functional organic compound layer, hydrophilicity such as an ethylene glycol chain composed of one or more ethylene glycol units (an ethylene glycol chain composed of a plurality of ethylene glycol units can be referred to as a “polyethylene glycol chain”). A layer of a functional compound.

エチレングリコール鎖の末端は水酸基により封鎖された形態であってもよいし、エチレングリコール鎖の末端に生体関連物質等の他の物質が共有結合により連結された形態であってもよい。   The terminal of the ethylene glycol chain may be in a form blocked with a hydroxyl group, or the terminal of the ethylene glycol chain may be in a form in which another substance such as a biological substance is linked by a covalent bond.

末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層は、細胞が接着し難い親水性の表面を提供することができる。   A layer containing an ethylene glycol chain whose end is blocked with a hydroxyl group can provide a hydrophilic surface to which cells are difficult to adhere.

エチレングリコール鎖の末端に共有結合されうる生体関連物質としては、抗原、抗体、DNA、RNA、ペプチド、ホルモン、酵素、サイトカイン、糖鎖、脂質、補酵素、酵素阻害剤、細胞、その他の機能を有するタンパク質が含まれる。更に、このような生体関連物質と親和性を有する低分子化合物、および高分子化合物も生体関連物質の範囲に含まれる。   Bio-related substances that can be covalently bonded to the end of ethylene glycol chain include antigens, antibodies, DNA, RNA, peptides, hormones, enzymes, cytokines, sugar chains, lipids, coenzymes, enzyme inhibitors, cells, and other functions. The protein which has is included. Furthermore, the low molecular weight compound which has affinity with such a biological substance, and a high molecular compound are also contained in the range of a biological substance.

エチレングリコール鎖等の親水性化合物の層を、樹脂製のフィルム基材層の表面に固定化するためには、予め、フィルム基材層の表面に、物理的に吸着可能であって、エチレングリコール鎖の末端の水酸基と反応して共有結合を形成可能な官能基を側鎖に含むポリシロキサンを含むプライマー層を設ける。ポリシロキサンの側鎖上の官能基としては、グリシジル基またはエポキシ基が好ましい。プライマー層は、フィルム基材層の表面に、所望の側鎖を有するシラノール化合物を適用し、該表面上で縮合重合してポリシロキサンに変換することにより形成することができる。   In order to immobilize a hydrophilic compound layer such as an ethylene glycol chain on the surface of a resin film base layer, it can be physically adsorbed on the surface of the film base layer in advance. A primer layer containing a polysiloxane containing a functional group in a side chain that can form a covalent bond by reacting with a hydroxyl group at the end of the chain is provided. The functional group on the side chain of the polysiloxane is preferably a glycidyl group or an epoxy group. The primer layer can be formed by applying a silanol compound having a desired side chain to the surface of the film substrate layer, and performing condensation polymerization on the surface to convert it into polysiloxane.

次いで、プライマー層の官能基と、エチレングリコールまたはエチレングリコール単位が2以上繰り返されたポリエチレングリコールの水酸基とを反応させて共有結合を形成し、エチレングリコール鎖を固定化する。このとき、触媒量の濃硫酸を含むエチレングリコールまたはポリエチレングリコールをプライマー層に接触させる。
末端が水酸基により封鎖されたエチレングリコール鎖を含む層はこのようにして形成される。
Next, the functional group of the primer layer and the hydroxyl group of polyethylene glycol in which two or more ethylene glycol or ethylene glycol units are repeated are reacted to form a covalent bond, thereby immobilizing the ethylene glycol chain. At this time, ethylene glycol or polyethylene glycol containing a catalytic amount of concentrated sulfuric acid is brought into contact with the primer layer.
A layer containing ethylene glycol chains whose ends are blocked with hydroxyl groups is formed in this way.

更に、必要に応じて、エチレングリコール鎖の一端に、他の物質との共有結合を形成することが可能な、少なくとも1つの官能基を直接的または間接的に連結させる。官能基の導入方法は特に限定されない。   Furthermore, if necessary, at least one functional group capable of forming a covalent bond with another substance is directly or indirectly linked to one end of the ethylene glycol chain. The method for introducing the functional group is not particularly limited.

<底板30>
底板30は、周側壁10と同じ材料で作られており、厚みは0.5〜1.5mm程度である。底板30の平面視での外郭形状は、好ましくは前記周側壁10の平面視形状と同じとされ、大きさは、好ましくは周側壁10の外郭形状と同じとされる。図2に示すように底板30の一方の面31は好ましくは平坦面であり、他方の面には膨出部32が形成されている。該膨出部32の表面は平坦面である。膨出部32の外周面33は垂直面であり、外周面33がなす輪郭形状は、前記周側壁10における段差部12の垂直面13がなす輪郭形状と同じとされている。前記外周面33の上端から外側は水平面34とされており、該水平面34の領域はフランジ部として作用する。膨出部32の前記外周面33の高さは、前記周側壁10における段差部12の垂直面13の距離から前記機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20の厚みを引いた値にほぼ等しくされており、したがって、底板30の膨出部32を周側壁10の前記段差部12に嵌入させた状態で、前記フランジ部の前記水平面34は、周側壁10の開放した端面11と面接触した状態となることができる。
<Bottom plate 30>
The bottom plate 30 is made of the same material as the peripheral side wall 10 and has a thickness of about 0.5 to 1.5 mm. The outer shape of the bottom plate 30 in plan view is preferably the same as the shape of the peripheral side wall 10 in plan view, and the size is preferably the same as the outer shape of the peripheral side wall 10. As shown in FIG. 2, one surface 31 of the bottom plate 30 is preferably a flat surface, and a bulging portion 32 is formed on the other surface. The surface of the bulging portion 32 is a flat surface. The outer peripheral surface 33 of the bulging portion 32 is a vertical surface, and the contour shape formed by the outer peripheral surface 33 is the same as the contour shape formed by the vertical surface 13 of the step portion 12 in the peripheral side wall 10. An outer side from the upper end of the outer peripheral surface 33 is a horizontal plane 34, and a region of the horizontal plane 34 functions as a flange portion. The height of the outer peripheral surface 33 of the bulging portion 32 is a value obtained by subtracting the thickness of the functional film 20 including the functional organic compound layer 21 from the distance of the vertical surface 13 of the stepped portion 12 in the peripheral side wall 10. Therefore, in a state where the bulging portion 32 of the bottom plate 30 is fitted into the stepped portion 12 of the peripheral side wall 10, the horizontal surface 34 of the flange portion faces the end surface 11 and the open end surface 11 of the peripheral side wall 10. It can be in contact.

さらに、底板30のフランジ部の前記水平面34と前記膨出部32の表面であって外周面33に近接した部位には、超音波溶着するときにエネルギーダイレクターとしての機能を果たす、幅の狭い突起35、36が一体成形されている。突起35、36の横幅は、限定されないが100〜1000μm程度であり、高さは50〜1000μm程度である。突起35、36は先端が先鋭であることが望ましい。また突起35、36は全周方向に連続したまたは非連続的な薄膜状体であってもよく、棒状体であってもよい。   Further, the surface of the flange portion of the bottom plate 30 and the surface of the bulging portion 32 that is close to the outer peripheral surface 33 has a narrow width that functions as an energy director when ultrasonic welding is performed. The protrusions 35 and 36 are integrally formed. The width of the projections 35 and 36 is not limited, but is about 100 to 1000 μm, and the height is about 50 to 1000 μm. It is desirable that the protrusions 35 and 36 have sharp tips. Further, the protrusions 35 and 36 may be a thin film-like body that is continuous or discontinuous in the entire circumferential direction, or may be a rod-like body.

<溶着手順>
次に、溶着手順を説明する。溶着に際しては、溶着用冶具40を用意する。溶着用冶具40は前記した周側壁10を安定的に支持するためのものであり、図1に示すように、周側壁10の受け入れ部分41と、該受け入れ部分41の下端部の支持段部42とを備える。受け入れ部分41の外郭形状は周側壁10の内周面の形状と一致しており、また、受け入れ部分41の上端面43の垂直断面での形状は、前記周側壁10の一方の端面11の側面視での形状と一致している。この例で、周側壁10の一方の端面11は水平な平坦面であり、したがって受け入れ部分41の上端面43も水平な平坦面である。支持段部42は、受け入れ部分41に周側壁10を差し込んだときに、周側壁10の前記段差部12の水平面14と前記受け入れ部分41の上端面43とが同一面となることのできる位置に形成されている。支持段部42は、前記周側壁10の他方の端面15の側面視と一致するようにされており、この例で、周側壁10の他方の端面15は平坦面であり、したがって支持段部42の形状も平坦面である。
<Welding procedure>
Next, the welding procedure will be described. At the time of welding, a welding jig 40 is prepared. The welding jig 40 is for stably supporting the peripheral side wall 10 described above. As shown in FIG. 1, the receiving portion 41 of the peripheral side wall 10 and the support step 42 at the lower end of the receiving portion 41. With. The outer shape of the receiving portion 41 matches the shape of the inner peripheral surface of the peripheral side wall 10, and the shape of the upper end surface 43 of the receiving portion 41 in the vertical cross section is the side surface of one end surface 11 of the peripheral side wall 10. It matches the visual shape. In this example, one end surface 11 of the peripheral side wall 10 is a horizontal flat surface, and therefore the upper end surface 43 of the receiving portion 41 is also a horizontal flat surface. The support step portion 42 is located at a position where the horizontal surface 14 of the stepped portion 12 of the peripheral side wall 10 and the upper end surface 43 of the reception portion 41 can be flush with each other when the peripheral side wall 10 is inserted into the receiving portion 41. Is formed. The support step 42 is configured to coincide with the side view of the other end surface 15 of the peripheral side wall 10. In this example, the other end surface 15 of the peripheral side wall 10 is a flat surface, and therefore the support step 42. The shape is also a flat surface.

最初に、上記した溶着用冶具40の受け入れ部分41に、周側壁10をその段差部12が上位位置となるようにして取り付ける。次に、前記した機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20を、機能性有機化合物層21の面が溶着用冶具40の側となるようにして、既に取り付けられている周側壁10の前記段差部12内に、形状を合わせるようにして挿入する。それにより、図3に示すように、機能性フィルム20は、周側壁10の段差部12の前記水平面14にその周縁部を乗せかつ周囲を段差部12の前記垂直面13に接した姿勢で、そして中央部分は溶着用冶具40の上端面43に支持された状態で、安定的に配置される。   First, the peripheral side wall 10 is attached to the receiving portion 41 of the welding jig 40 described above so that the stepped portion 12 is at the upper position. Next, the functional film 20 including the functional organic compound layer 21 described above is formed on the peripheral side wall 10 that is already attached so that the surface of the functional organic compound layer 21 is on the welding jig 40 side. It inserts in the said step part 12 so that a shape may be united. Thereby, as shown in FIG. 3, the functional film 20 is placed in a posture in which the peripheral portion is placed on the horizontal surface 14 of the step portion 12 of the peripheral side wall 10 and the periphery is in contact with the vertical surface 13 of the step portion 12. And the center part is stably arrange | positioned in the state supported by the upper end surface 43 of the welding jig 40. FIG.

次に、底板30を、その膨出部32が既に取り付けてある周側壁10の前記段差部12内に入り込むようにして、周側壁10の上に配置する。その状態では、図3に示すように、底板30のフランジ部に設けた突起35の先端が周側壁10の開放した端面11の頂面に当接し、また、膨出部32の表面に設けた突起36の先端は、機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20の周縁部であって周側壁10の前記段差部12の水平面14の上に位置している部分に当接した姿勢となる。   Next, the bottom plate 30 is disposed on the peripheral side wall 10 so as to enter the stepped portion 12 of the peripheral side wall 10 to which the bulging portion 32 is already attached. In this state, as shown in FIG. 3, the tip of the projection 35 provided on the flange portion of the bottom plate 30 abuts on the top surface of the open end surface 11 of the peripheral side wall 10 and is provided on the surface of the bulging portion 32. The tip of the protrusion 36 is in the peripheral portion of the functional film 20 having the functional organic compound layer 21 and is in contact with the portion located on the horizontal surface 14 of the stepped portion 12 of the peripheral side wall 10. Become.

そのように各構成部材10、20、30を配置した後、図4に示すように、従来公知の超音波ホーン60を、底板30の前記フランジ部およびその近傍に圧接した状態として、超音波ホーン60を作動させる。それにより、周側壁10と底板30との接触面(図示の例では、エネルギーダイレクターとして機能する突起35、36との接触面)で振動が発生し、摩擦熱によって両者は溶着する。所要時間にわたって超音波ホーン60を作動させた後、作動を停止し冷却することで、溶着は終了する。その後、溶着用冶具40から取り外すことで、本発明による樹脂製細胞培養容器Aが得られる。   After each component member 10, 20, 30 is arranged in this manner, as shown in FIG. 4, the ultrasonic horn 60 is placed in a state where the conventionally known ultrasonic horn 60 is pressed against the flange portion of the bottom plate 30 and the vicinity thereof. 60 is activated. As a result, vibration is generated on the contact surface between the peripheral side wall 10 and the bottom plate 30 (in the illustrated example, the contact surfaces with the protrusions 35 and 36 functioning as energy directors), and both are welded by frictional heat. After the ultrasonic horn 60 is operated for a required time, the operation is stopped and cooled, whereby the welding is completed. Then, the resin-made cell culture container A by this invention is obtained by removing from the welding jig 40. FIG.

上記の溶着の過程で、樹脂と樹脂との摩擦により樹脂粉塵が発生する。しかし、発生した樹脂粉塵は、周側壁10の段差部12と底板30の膨出部32との内嵌合部領域において、段差部12の垂直面13の下端部および水平面14と、前記機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20とが密着していることから、内嵌合部および前記密着部がバリア、すなわち堰として効果的に作用し、樹脂粉塵が機能性有機化合物層21の有効面(前記した溶着用冶具40の受け入れ部分41の上端面43に接している部分)にまで飛散することはない。それにより、上記の製造方法を採用することにより、超音波溶着時に生じる樹脂粉塵によって機能性有機化合物層21の機能が妨げられることのない樹脂製細胞培養容器Aを得ることができる。   In the welding process, resin dust is generated due to friction between the resins. However, the generated resin dust is generated in the inner fitting portion region between the step portion 12 of the peripheral side wall 10 and the bulging portion 32 of the bottom plate 30, the lower end portion of the vertical surface 13 of the step portion 12, the horizontal plane 14, and the functionality. Since the functional film 20 provided with the organic compound layer 21 is in close contact with each other, the inner fitting portion and the close contact portion effectively function as a barrier, that is, a weir, and the resin dust is the functional organic compound layer 21. It does not scatter to the effective surface (the portion in contact with the upper end surface 43 of the receiving portion 41 of the welding jig 40 described above). Thereby, by adopting the above production method, it is possible to obtain a resin-made cell culture vessel A in which the function of the functional organic compound layer 21 is not hindered by the resin dust generated during ultrasonic welding.

[第2の発明の実施の形態]
第2の発明では、上記した機能性有機化合物層21を備えた機能性フィルム20を用いることなく、第1の発明と同じ技術課題を達成する。そのために、第2の発明では、図5に示すように、膨出部32の表面全面に機能性有機化合物層21を形成した底板30を用いる。その点を除き、周側壁10の形状および底板30の形状は、第1の発明の場合と同様である。ただし、底板30の膨出部32の表面全面には機能性有機化合物層21が形成されているので、膨出部32の表面にはエネルギーダイレクターとして機能する突起36は設けられない。なお、底板30に機能性有機化合物層21を形成するには、前記フィルム基材層22に機能性有機化合物層21を形成するのと同じ手法で行うことができ、また、底板30上に直接形成される機能性化合物層21の構造およびその具体例も、機能性フィルム20について説明した機能性化合物層21と同様であることができる。
[Second Embodiment]
In the second invention, the same technical problem as in the first invention is achieved without using the functional film 20 provided with the functional organic compound layer 21 described above. Therefore, in the second invention, as shown in FIG. 5, a bottom plate 30 in which a functional organic compound layer 21 is formed on the entire surface of the bulging portion 32 is used. Except for this point, the shape of the peripheral side wall 10 and the shape of the bottom plate 30 are the same as in the case of the first invention. However, since the functional organic compound layer 21 is formed on the entire surface of the bulging portion 32 of the bottom plate 30, the protrusion 36 that functions as an energy director is not provided on the surface of the bulging portion 32. In addition, in order to form the functional organic compound layer 21 on the bottom plate 30, it can be performed by the same technique as that for forming the functional organic compound layer 21 on the film base material layer 22, and directly on the bottom plate 30. The structure of the functional compound layer 21 to be formed and specific examples thereof can be the same as those of the functional compound layer 21 described for the functional film 20.

溶着に際しては、図6に示すように、第1の発明の場合と同様にして、溶着用冶具40に周側壁10を取り付けた後、図5に示す、膨出部32の表面全面に機能性有機化合物層21を形成した底板30を、直接周側壁10の上に配置し、以下、第1の発明の場合と同様に超音波ホーンを用いて溶着を行う。この場合も、機能性有機化合物層21の有効面には樹脂粉末が飛散してこないことは、第1の発明の場合と同様である。   In the welding, as shown in FIG. 6, after attaching the peripheral side wall 10 to the welding jig 40 as in the case of the first invention, the entire surface of the bulging portion 32 shown in FIG. The bottom plate 30 on which the organic compound layer 21 is formed is disposed directly on the peripheral side wall 10 and is then welded using an ultrasonic horn as in the case of the first invention. Also in this case, the resin powder is not scattered on the effective surface of the functional organic compound layer 21 as in the case of the first invention.

[他の実施の形態]
上記した実施の形態では、底板30のフランジ部および膨出部32にエネルギーダイレクターとして機能する突起35、36を設けたもの、および前記フランジ部にのみ設けたものを説明したが、超音波ホーンの出力や使用する樹脂材料の種類などによって、面と面との超音波振動によって発生する摩擦熱によって所望する溶着がなされる場合には、このような突起35、36を設けるのを省略することかできる。
[Other embodiments]
In the embodiment described above, the flange portion and the bulging portion 32 of the bottom plate 30 are provided with the projections 35 and 36 functioning as energy directors, and the one provided only on the flange portion has been described. If desired welding is performed by frictional heat generated by ultrasonic vibration between surfaces depending on the output of the resin and the type of resin material used, the provision of such projections 35 and 36 should be omitted. I can do it.

また、突起を設ける場合にも、第1の発明において、図7(a)に示すように、周側壁10の開放端面11の頂面部に一方の突起35を形成してもよく、図7(b)に示すように、他方の突起35を省略してもよく、図7(c)に示すように、周側壁10の開放端面11の頂面部にのみ一方の突起35を形成し、他方の突部36を省略してもよい。   Also, in the case of providing the projection, in the first invention, as shown in FIG. 7A, one projection 35 may be formed on the top surface portion of the open end surface 11 of the peripheral side wall 10, and FIG. As shown in FIG. 7B, the other projection 35 may be omitted. As shown in FIG. 7C, one projection 35 is formed only on the top surface portion of the open end surface 11 of the peripheral side wall 10, and the other projection 35 is formed. The protrusion 36 may be omitted.

[樹脂製細胞培養容器の形態]
なお、容器底面に、機能性化合物層21を備えたフィルム基材層22または機能性有機化合物層21を備える樹脂製細胞培養容器Aは、前記したように任意の形状であってよい。図1〜図7に示したような、上方が開放した皿状または碗状の形状の容器であってもよく、図8に示すようなフラスコ型の容器A1も例としてあげることができる。
[Configuration of resin cell culture vessel]
In addition, the resin-made cell culture container A provided with the film base material layer 22 provided with the functional compound layer 21 or the functional organic compound layer 21 on the container bottom may be in an arbitrary shape as described above. 1 to 7 may be a dish-shaped or bowl-shaped container with an open top, and a flask-shaped container A1 as illustrated in FIG. 8 can be given as an example.

フラスコ型細胞培養容器A1は、図8(a)に記すように、容器部100と蓋110を備える。容器部100は、底板30aと、底板30aの周縁に立設された周壁部10aと、周壁部10aの上端部に接合された、底板30a同様な形状である天板50とを少なくとも備える。フラスコ型細胞培養容器A1において、底板30aは矩形状である平板の一方端側が狭くなった形状であり、周側壁10aは該底板30aの外郭形状と同じ平面視形状を備えている。前記周壁部10aの前記狭くされた先端に対応する部分には通孔104が穿設されていて、その周縁から容器部外側に延びる首部105には、前記蓋110が着脱可能に装着される。容器部100と蓋110とを組み合わせることによりフラスコ型の細胞培養容器A1が形成される。   As shown in FIG. 8A, the flask-type cell culture container A1 includes a container part 100 and a lid 110. The container unit 100 includes at least a bottom plate 30a, a peripheral wall portion 10a erected on the periphery of the bottom plate 30a, and a top plate 50 having a shape similar to the bottom plate 30a joined to the upper end portion of the peripheral wall portion 10a. In the flask-type cell culture vessel A1, the bottom plate 30a has a shape in which one end of a rectangular flat plate is narrowed, and the peripheral side wall 10a has the same plan view shape as the outer shape of the bottom plate 30a. A through hole 104 is formed in a portion corresponding to the narrowed tip of the peripheral wall portion 10a, and the lid 110 is detachably attached to a neck portion 105 extending from the periphery to the outside of the container portion. A flask type cell culture container A1 is formed by combining the container part 100 and the lid 110.

図8(b)は、図8(a)のb−b線に沿う断面を示し、図8(c)はc−c線に沿う断面を示めしており、図示されるように、容器部100の、底板30a、周壁部10aおよび天板50に包囲される内部空間には、細胞および培地を収容するための内室130が形成されている。内室130に面する底板30aの一部分には、前記した機能性フィルム20が固定されている。   FIG. 8B shows a cross section taken along the line bb in FIG. 8A, and FIG. 8C shows a cross section taken along the line cc. As shown in FIG. In an internal space surrounded by the bottom plate 30a, the peripheral wall portion 10a and the top plate 50, an inner chamber 130 for accommodating cells and a culture medium is formed. The functional film 20 described above is fixed to a part of the bottom plate 30 a facing the inner chamber 130.

図8に示すフラスコ型細胞培養容器A1を製造するには、最初に、底板30aと機能性フィルム20(または機能性化合物層21)と周側壁10aとを、図1〜図7に示したと同様な手順で、超音波振動を用いて溶着一体化する。その後で、半製品としての容器A1を溶着用冶具から取り外し、周側壁10aの開放した端面側に、熱融着あるいは接着剤による接合などの任意の手段により、天板50を周側壁10に一体化する。   To manufacture the flask-type cell culture container A1 shown in FIG. 8, first, the bottom plate 30a, the functional film 20 (or the functional compound layer 21), and the peripheral side wall 10a are the same as those shown in FIGS. In a simple procedure, welding is integrated using ultrasonic vibration. Thereafter, the container A1 as a semi-finished product is removed from the welding jig, and the top plate 50 is integrated with the peripheral side wall 10 by any means such as thermal fusion or bonding to the open end surface side of the peripheral side wall 10a. Turn into.

A…樹脂製細胞培養容器、
10…周側壁、
11…周側壁の一方の端面、
12…内嵌合用の段差部、
13…段差部の垂直面、
14…段差部の水平面、
20…機能性有機化合物層を備えた機能性フィルム、
21…機能性有機化合物層、
22…フィルム基材層、
30…底板、
32…底板の膨出部、
33…膨出部の外周面、
34…膨出部のフランジ部として作用する水平面、
35、36…エネルギーダイレクターとしての機能を果たす突起、
40…溶着用冶具、
41…周側壁の受け入れ部分、
42…支持段部、
43…受け入れ部分の上端面、
50…天板、
60…超音波ホーン。
A: Resin cell culture container,
10 ... peripheral wall,
11: One end face of the peripheral side wall,
12: Stepped portion for internal fitting,
13 ... vertical surface of the step,
14 ... the horizontal surface of the step,
20 ... Functional film provided with a functional organic compound layer,
21 ... functional organic compound layer,
22 ... film base material layer,
30 ... bottom plate,
32 ... the bulging part of the bottom plate,
33 ... the outer peripheral surface of the bulging part,
34 ... a horizontal surface acting as a flange portion of the bulging portion,
35, 36 ... projections that function as energy directors,
40 ... Welding jig,
41 ... Accepting portion of peripheral side wall,
42 ... support step,
43 ... the upper end surface of the receiving part,
50 ... top plate,
60: Ultrasonic horn.

Claims (6)

容器底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器の製造方法であって、
両端が開放しており一方の開放端面の全周に内嵌合用の段差部を有する周側壁と、前記内嵌合用の段差部に嵌合する膨出部とフランジ部を有する底板と、機能性有機化合物層を備えた機能性フィルムであって周縁部が前記周側壁に形成した段差部に乗ることのできる大きさと形状とされた機能性フィルムと、溶着用冶具を用意し、
前記溶着用冶具に前記周側壁を前記段差部が上位位置になるように取り付け、次に、前記機能性フィルムを機能性有機化合物層が内側となり周縁部が前記周側壁に形成した前記段差部に乗るようにして配置し、その上から前記底板をその膨出部が前記段差部に内嵌合するようにして前記周側壁の上に配置し、その状態で、前記底板のフランジ部に超音波振動を与えることで前記周側壁の開放端面に前記底板を前記機能性フィルムとともに溶融一体化し、溶融一体化後に溶着用冶具から取り外すことを特徴とする樹脂製細胞培養容器の製造方法。
A method for producing a resinous cell culture vessel comprising a functional organic compound layer on the bottom of the vessel,
A peripheral side wall having both ends open and having a stepped portion for inner fitting on the entire circumference of one open end surface, a bottom plate having a bulging portion and a flange portion fitted to the stepped portion for inner fitting, and functionality A functional film having an organic compound layer and a peripheral film having a size and shape that can be placed on the stepped portion formed on the peripheral side wall, and a welding jig are prepared,
Attach the peripheral side wall to the welding jig so that the stepped portion is in the upper position, and then attach the functional film to the stepped portion where the functional organic compound layer is inside and the peripheral portion is formed on the peripheral side wall. The bottom plate is placed on the peripheral side wall so that the bulging portion fits into the stepped portion, and in this state, the ultrasonic wave is applied to the flange portion of the bottom plate. A method for producing a resin-made cell culture vessel, wherein the bottom plate is melted and integrated with the functional film on the open end surface of the peripheral side wall by applying vibration, and is removed from the welding jig after the fusion integration .
容器底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器の製造方法であって、
両端が開放しており一方の開放端面の全周に内嵌合用の段差部を有する周側壁と、前記内嵌合用の段差部に嵌合する膨出部とフランジ部を備え前記膨出部の表面には機能性有機化合物層が形成されている底板と、溶着用冶具を用意し、
前記溶着用冶具に前記周側壁を前記段差部が上位位置になるように取り付け、次に、前記底板をその膨出部が前記段差部に内嵌合するようにして前記周側壁の上に配置し、その状態で、前記底板のフランジ部に超音波振動を与えることで前記周側壁の開放端面に前記底板を溶融一体化し、溶融一体化後に溶着用冶具から取り外すことを特徴とする樹脂製細胞培養容器の製造方法。
A method for producing a resinous cell culture vessel comprising a functional organic compound layer on the bottom of the vessel,
A peripheral side wall having both ends open and having a stepped portion for inner fitting on the entire circumference of one open end surface, and a bulging portion and a flange portion fitted to the stepped portion for inner fitting are provided. Prepare a bottom plate with a functional organic compound layer on the surface and a welding jig ,
Attach the peripheral side wall to the welding jig so that the stepped portion is in the upper position, and then place the bottom plate on the peripheral side wall so that the bulging portion fits inside the stepped portion In this state, the bottom plate is melted and integrated with the open end surface of the peripheral side wall by applying ultrasonic vibration to the flange portion of the bottom plate, and is removed from the welding jig after the fusion integration . A method for producing a cell culture container.
前記周側壁として、周側壁の開放端面と底板とが対向する部位にエネルギーダイレクターとして機能する突起を備えた周側壁を用いることを特徴とする請求項1または2に記載の樹脂製細胞培養容器の製造方法。   The resin cell culture container according to claim 1 or 2, wherein a peripheral side wall provided with a protrusion functioning as an energy director at a portion where the open end surface of the peripheral side wall and the bottom plate face each other is used as the peripheral side wall. Manufacturing method. 前記底板として、周側壁の開放端面と底板とが対向する部位にエネルギーダイレクターとして機能する突起を備えた底板を用いることを特徴とする請求項1または2に記載の樹脂製細胞培養容器の製造方法。   The production of a resin-made cell culture container according to claim 1 or 2, wherein the bottom plate is a bottom plate provided with a projection that functions as an energy director at a portion where the open end surface of the peripheral side wall and the bottom plate face each other. Method. 前記底板を溶着一体化した後に、前記周側壁の他方の開放端面を樹脂製天板で閉鎖する工程をさらに行うことを特徴とする請求項1〜4のいずれか一項に記載の樹脂製細胞培養容器の製造方法。   The resinous cell according to any one of claims 1 to 4, further comprising a step of closing the other open end surface of the peripheral side wall with a resin top plate after the bottom plate is welded and integrated. A method for producing a culture vessel. 容器底面に機能性有機化合物層を備える樹脂製細胞培養容器であって、少なくとも一方の端面の全周に内嵌合用の段差部を有する周側壁と、前記内嵌合用の段差部に嵌合する膨出部とフランジ部とを有する底板とを備え、前記機能性有機化合物層はその周縁部が前記周側壁に形成した前記段差部に乗った姿勢で、前記周側壁の前記端面に前記底板が溶融一体化されていることを特徴とする樹脂製細胞培養容器。   A resin-made cell culture container having a functional organic compound layer on the bottom surface of the container, the peripheral wall having a step portion for internal fitting on the entire circumference of at least one end surface, and the step portion for internal fitting. A bottom plate having a bulging portion and a flange portion, wherein the functional organic compound layer has a peripheral edge on the stepped portion formed on the peripheral side wall, and the bottom plate is disposed on the end surface of the peripheral side wall. A resin cell culture vessel characterized by being fused and integrated.
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