JP5733697B2 - 新規エタノール生産酵母 - Google Patents
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Description
(1)エタノール生産酵母、サッカロマイセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)MY17株(NITE P−893)。
(2)(1)に記載のエタノール生産酵母において、1又は数個の遺伝子を遺伝子工学的手法、薬剤処理や紫外線処理などの突然変異誘発法等により改変、導入若しくは欠失して得られ、耐熱性、耐塩性、全糖濃度(糖度)を15重量%に調整した際の総灰分が3.5重量%以上(例えば4.0重量%以上)の廃糖蜜からのエタノール生産性、高凝集性のいずれの形質も有する形質転換体。
(3)(1)又は(2)に記載の酵母を発酵菌として使用して、全糖濃度を15重量%に調整した際の総灰分が3.5重量%以上の廃糖蜜を原料として用い(酵素等による液化・糖化を行うことなく)、35℃以上、好ましくは38〜40℃の温度で発酵させることを特徴とする、エタノールの生産方法。
(4)全糖濃度を15重量%に調整した際の総灰分が4.5重量%以上の廃糖蜜(例えば宮古島産廃糖蜜)を用いることを特徴とする、(3)に記載のエタノールの生産方法。
(5)(3)又は(4)に記載の方法において得られる、発酵後に上清(エタノール含有液)を除去した発酵残渣を配合することを特徴とする、酵母含有飼料の製造方法。
(a)YM液体培地で生育させたときの菌の形態
(1)栄養細胞の大きさ:5〜10μm程度
(2)栄養細胞の形状:楕円形
(3)増殖の形式:出芽
(b)胞子形成の有無
胞子形成する。
宮古島のサトウキビ、バガス、土壌、草花や廃糖蜜等を中心に計155点の試料を採取し、これらから合計1,122株の酵母を分離した。酵母の分離は次のように行った。採取試料を、3倍希釈した廃糖蜜を用いて、33℃での気泡発生を観察し、廃糖蜜液中のエタノール濃度測定を行った。試料5点について、特にエタノール生成能が高かったことから、3倍希釈廃糖蜜寒天培地(塩化カリウムにより塩濃度を高めたものも併用)に塗布し、35℃、48時間後にできたコロニーのうち、塩濃度の高い廃糖蜜培地で増殖がよく、大きなコロニーとなった株を、試料ごとに4個ずつ選択した。
YPD培地50ml、30℃、48時間の条件で前培養したMY17株を、糖度15%に調整した宮古島産廃糖蜜450mlに添加し、撹拌子(500rpm)により撹拌し、12時間後、18時間後、24時間後のエタノール生成能を測定した。温度は、30℃、33℃、35℃、38℃、40℃とした。
糖度15%に調整した糖蜜を用いて、21時間の撹拌と3時間の静置凝集による酵母回収、新規糖蜜添加を繰り返す、38℃での連続した回分発酵試験を行った。
MY17株は、YPD培地6ml、30℃、24時間、振とう培養したのち、糖度10%に調整した廃糖蜜54mlに添加、30℃、24時間、振とう培養したものを用いた。発酵試験は、前述の前培養液約60mlを、糖度15%に調整した廃糖蜜450mlに添加し、撹拌子(500rpm)により撹拌した。
実施例2において38℃でエタノール発酵生産したMY17株について、発酵終了後の凝集性を比較確認した。
MY17株は、単にYPD培地で培養を行った場合、培養後に凝集性は示さなかった。しかし、38℃での廃糖蜜発酵終了後には、極めて短時間で凝集沈殿すること(つまり十分な凝集性を示すこと)が明らかとなった。
比較例として、清酒酵母(K7株、K9株)及び焼酎酵母(AW101株、SH4株、SH5株、KF−1株、KF−3株、CAN1株、MKO21株、I33株、C14株、C4株、H5株、K2株)を用いて、YM培地の糖をスクロース15%に変えたYM改変15%スクロース培地と、総灰分19%の宮古島産廃糖蜜を2.5倍希釈して全糖濃度を15%とした培地でエタノール生産試験を行った。いずれの培地も、OD660を0.5とした菌含有液を加え、37℃で48時間静置培養を行った。
(1)サッカロマイセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)MY17株(NITE P−893)。
Claims (4)
- 38〜40℃でのエタノール生産性、耐塩性及び高凝集性の形質を有するエタノール生産酵母、サッカロマイセス・セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)MY17株(NITE P−893)。
- 請求項1に記載の酵母を発酵菌として使用して、全糖濃度を15重量%に調整した際の総灰分が3.5重量%以上の廃糖蜜を原料として用い、38〜40℃の温度で発酵させることを特徴とする、エタノールの生産方法。
- 全糖濃度を15重量%に調整した際の総灰分が4.5重量%以上の廃糖蜜を用いることを特徴とする、請求項2に記載のエタノールの生産方法。
- 請求項2又は3に記載の方法において得られる発酵残渣を配合することを特徴とする、酵母含有飼料の製造方法。
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