JP5703129B2 - 固相化担体および固相化担体の製造方法 - Google Patents
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Description
(1) 分子複合体を介して、標識分子を担体に固相化してなる固相化担体であって、
前記分子複合体は、ゲスト分子構造と、該ゲスト分子構造に一端部が結合された直鎖状構造とを含む第1の分子と、
シクロデキストリン構造を含み、該シクロデキストリン構造が有する空孔を前記第1の分子の前記直鎖状構造が貫通した状態で、該直鎖状構造の鎖長方向の途中に位置する少なくとも1つの第2の分子と、
空孔内に前記ゲスト分子構造を包接して、前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造が前記第1の分子から離脱するのを阻止するキュカービチュリル構造を含む第3の分子とを備え、
前記第1の分子の前記直鎖状構造の他端部および前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造のいずれか一方が前記担体に結合され、他方が前記標識分子に結合されていることを特徴とする固相化担体。
前記第2の分子は、さらに、前記シクロデキストリン構造と前記担体とを接続する接続構造を含む上記(1)に記載の固相化担体。
前記第1の分子および前記第2の分子のいずれか一方が結合された前記担体と、他方が結合された前記標識分子とを用意する工程と、
前記第1の分子と前記第2の分子とを接触させることにより、前記シクロデキストリン構造で前記ゲスト分子構造を包接した包接状態を形成する工程と、
該包接状態の前記第1および第2の分子に、前記第3の分子を接近させることにより、前記シクロデキストリン構造と前記キュカービチュリル構造との前記ゲスト分子構造に対する親和性の差を利用して、前記キュカービチュリル構造で前記シクロデキストリン構造を前記第1の分子の前記直鎖状構造の他端部側に押しやるとともに、前記ゲスト分子構造を包接することにより前記分子複合体を形成し、前記固相化担体を得る工程とを有することを特徴とする固相化担体の製造方法。
図1は、本発明の固相化担体の第1実施形態の構成を示す概念図、図2は、図1に示す固相化担体の製造方法を説明するための概念図である。
[1] まず、図2(a)に示すように、第1の分子3が結合された担体100と、標識分子10が結合された第2の分子4とを用意する。
すなわち、シクロデキストリン構造41(シクロデキストリン)は、化学修飾が比較的容易である。このため、標識分子10を、直接シクロデキストリン構造41に導入(化学修飾)した分子を作成(合成)し、かかる分子で担体100に結合させた第1の分子3のゲスト分子構造31を包摂することにより、固相化担体とすることも考えられる。
図3は、本発明の固相化担体の第2実施形態の構成を示す概念図である。
なお、かかる固相化担体1も、前記第1実施形態と同様にして製造することができる。
また、固相化担体の製造方法には、任意の工程が追加されてもよい。
1.固相化基板(固相化担体)の製造
アダマンタン誘導体(第1の分子)の基板(担体)への固定化
まず、3mg/mLのアダマンタン誘導体水溶液1mLと、0.2Mの1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(WSC)水溶液1mLとを混合し、リン酸緩衝液(pH9.0)1mLを添加した。
まず、3A−アミノ−3A−デオキシ−(2AS,3AS)−β−シクロデキストリン水和物300mgをジメチルホルムアミド(DMF)に溶解し、この溶液に、シアン 3 単官能ヘキサン酸色素 サクシニミジルエステルを溶解したDMFを添加し、室温で24時間攪拌した。
アダマンタン誘導体が固定された基板を、5.7mMのCD−Cy3水溶液100μLに浸漬し、室温で1時間インキュベートした後、10mMのキュカービット[7]ウリル(Cucurbit[7]uril:CB[7]:第3の分子)水溶液100μLを添加し、さらに室温で1時間インキュベートした。その後、基板を超純水で洗浄した後、乾燥した。
これにより、実施例の固相化基板を得た。
アダマンタン誘導体が固定された基板を、5.7mMのCD−Cy3水溶液100μLに浸漬し、室温で2時間インキュベートした。その後、基板を超純水で洗浄した後、乾燥した。
これにより、比較例の固相化基板を得た。
マイクロアレイ用スキャナ(Packard BioChip Technologies社製マイクロアレイスキャナー「ScanArray」)を用いて、実施例および比較例で得られた固相化基板のスポットの蛍光を検出した。
2 分子複合体
3 第1の分子
31 ゲスト分子構造
32 直鎖状構造
4 第2の分子
41 シクロデキストリン構造
42 接続構造
5 第3の分子
51 キュカービチュリル構造
10 標識分子
100 担体
Claims (9)
- 分子複合体を介して、標識分子を担体に固相化してなる固相化担体であって、
前記分子複合体は、ゲスト分子構造と、該ゲスト分子構造に一端部が結合された直鎖状構造とを含む第1の分子と、
シクロデキストリン構造を含み、該シクロデキストリン構造が有する空孔を前記第1の分子の前記直鎖状構造が貫通した状態で、該直鎖状構造の鎖長方向の途中に位置する少なくとも1つの第2の分子と、
空孔内に前記ゲスト分子構造を包接して、前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造が前記第1の分子から離脱するのを阻止するキュカービチュリル構造を含む第3の分子とを備え、
前記第1の分子の前記直鎖状構造の他端部および前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造のいずれか一方が前記担体に結合され、他方が前記標識分子に結合されていることを特徴とする固相化担体。 - 前記第1の分子の前記直鎖状構造の他端部が前記担体に結合され、かつ、前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造が前記標識分子に結合された状態となっている請求項1に記載の固相化担体。
- 前記第1の分子の前記直鎖状構造が、複数の前記第2の分子の各前記シクロデキストリン構造の空孔を貫通している請求項2に記載の固相化担体。
- 前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造が前記担体に結合され、かつ、前記第1の分子の前記直鎖状構造の他端部が前記標識分子に結合され、
前記第2の分子は、さらに、前記シクロデキストリン構造と前記担体とを接続する接続構造を含む請求項1に記載の固相化担体。 - 前記第1の分子の前記ゲスト分子構造は、前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造に対する親和性より、前記第3の分子の前記キュカービチュリル構造に対する親和性の方が高い請求項1ないし4のいずれかに記載の固相化担体。
- 前記第2の分子の前記シクロデキストリン構造を構成するグルコース単位の数をAとし、前記第3の分子の前記キュカービチュリル構造を構成するグライコウリル単位の数をBとしたとき、B/Aが0.7〜1.3なる関係を満足する請求項5に記載の固相化担体。
- 前記第3の分子の前記キュカービチュリル構造は、これを構成するグライコウリル単位の数が7である請求項5または6に記載の固相化担体。
- 前記第1の分子の前記ゲスト分子構造は、アダマンチル構造である請求項7に記載の固相化担体。
- 請求項1ないし8のいずれかに記載の固相化担体の製造方法であって、
前記第1の分子および前記第2の分子のいずれか一方が結合された前記担体と、他方が結合された前記標識分子とを用意する工程と、
前記第1の分子と前記第2の分子とを接触させることにより、前記シクロデキストリン構造で前記ゲスト分子構造を包接した包接状態を形成する工程と、
該包接状態の前記第1および第2の分子に、前記第3の分子を接近させることにより、前記シクロデキストリン構造と前記キュカービチュリル構造との前記ゲスト分子構造に対する親和性の差を利用して、前記キュカービチュリル構造で前記シクロデキストリン構造を前記第1の分子の前記直鎖状構造の他端部側に押しやるとともに、前記ゲスト分子構造を包接することにより前記分子複合体を形成し、前記固相化担体を得る工程とを有することを特徴とする固相化担体の製造方法。
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