JP5671336B2 - 組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子および血管石灰化を処置するためのそれらの使用 - Google Patents

Description

関連出願への相互参照
この出願は、２００７年５月８日に出願された、米国仮出願第６０／９２８，４００号（これは、その全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。

連邦政府支援による研究であることの表明
本発明に至る研究は、一部、米国国立衛生研究所助成番号：ＮＩＨ−ＤＥ１２８８９による資金援助を受けて行われたものである。米国政府は、本発明について一定の権利を有するものである。

本明細書には、組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子である化合物が開示されている。開示された化合物は、血管石灰化、動脈石灰化、およびその他の心臓血管疾患を治療、予防、または軽減するために使用される。

血管石灰化は、ヒドロキシアパタイト（ＨＡ）が動脈および心臓弁などの心臓血管組織に蓄積されると起きる。ＨＡは、心臓血管疾患の発病において重要な危険因子となることがあり、心筋梗塞および冠動脈死と関連づけられている（非特許文献１）。病的血管石灰化のメカニズムは、胎児期の正常な骨形成と同様であると考えられている（非特許文献２）。骨量の低下と心臓血管疾患リスクの増加との間に関連性があることが研究によって示されている（非特許文献３）。

心臓血管疾患と骨形成との間の関連性がインビボにおいて確認されている。マトリックスＧｌａタンパク質（ＭＧＰ）欠損マウス（Ｍｇｐ−／−）は、例えば、動脈石灰化を伴う、骨減少症的な骨の表現型を示す（非特許文献４）。骨粗鬆症的な表現型をもつ、破骨細胞形成抑制因子（ＯＰＧ）をノックアウトしたマウスなどにおける破骨細胞系に影響を及ぼす変異も動脈石灰化と関連性がある（非特許文献５）。また、石灰化阻害因子であるオステオポンチン（ＯＰＮ）には、骨および心臓において二つの役割があることが知られている（非特許文献６）。ＯＰＮは骨芽細胞や、損傷した動脈の活性化炎症細胞の中でも発現され、ＯＰＮ欠損マウスが、心血管系への負荷に応答すると障害を受けることから、動脈石灰化に対して保護的役割を果たしていると考えられる（非特許文献７）。

これらの観察結果は、骨石灰化と動脈石灰化には共通の類似した基礎病理があるという主張を裏付けるものである。さらに、石灰化阻害物質である無機ピロリン酸（ＰＰｉ）の主な生成源であるＮＰＰ１（Ｅｎｐｐ１−／−）を欠損したマウスは、若年で自然発症的に関節軟骨、脊椎周囲、および大動脈の石灰化を発症する（Ｏｋａｗａ Ａ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｉ，Ｇｏｔｏ Ｓ，Ｍｏｒｉｙａ Ｈ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ｙ，Ｉｋｅｇａｗａ
Ｓ １９９８ “Ｍｕｔａｔｉｏｎ ｉｎ Ｎｐｐｓ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｏｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ ｌｉｇａｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｉｎｅ．”Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．１９：２７１−２７３）。これらのマウスは、ヒトの疾患である突発性小児動脈石灰化（ＩＩＡＣ）と共通した同種の表現型特性をもっている（Ｒｕｔｓｃｈ Ｆ，Ｖａｉｎｇａｎｋａｒ Ｓ，Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ，Ｇｏｌｄｆｉｎｅ Ｉ，Ｍａｄｄｕｘ Ｂ，Ｓｃｈａｕｅｒｔｅ Ｐ，Ｋａｌｈｏｆｆ Ｈ，Ｓａｎｏ Ｋ，Ｂｏｉｓｖｅｒｔ Ｗ Ａ，“Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕｒｇａ Ａ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ ２００１ ＰＣ−１
ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｉｎｆａｎｔｉｌｅ
ａｒｔｅｒｉａｌ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ．”Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １５８：５４３−５５４；Ｒｕｔｓｃｈ Ｆ，Ｒｕｆ Ｎ，Ｖａｉｎｇａｎｋａｒ Ｓ，Ｔｏｌｉａｔ Ｍ Ｒ，Ｓｕｋ Ａ，Ｈｏｈｎｅ Ｗ，Ｓｃｈａｕｅｒ Ｇ，Ｌｅｈｍａｎｎ Ｍ， Ｒｏｓｃｉｏｌｉ Ｔ，Ｓｃｈｎａｂｅｌ Ｄ，Ｅｐｐｌｅｎ Ｊ Ｔ，Ｋｎｉｓｅｌｙ Ａ，Ｓｕｐｅｒｔｉ−Ｆｕｒｇａ Ａ，ＭｃＧｉｌｌ Ｊ，Ｆｉｌｉｐｐｏｎｅ Ｍ，Ｓｉｎａｉｋｏ Ａ Ｒ，Ｖａｌｌａｎｃｅ Ｈ，Ｈｉｎｒｉｃｈｓ Ｂ，Ｓｍｉｔｈ Ｗ，Ｆｅｒｒｅ Ｍ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ，Ｎｕｒｎｂｅｒｇ Ｐ ２００３“Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ＥＮＰＰ１ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ‘ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ‘ ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ａｒｔｅｒｉａｌ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ．”Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ． ３４：３７９−３８１）。さらに、細胞外ＰＰｉ（ｅＰＰｉ）濃度が低下している別のマウスモデルでは、膜貫通型タンパク質ＡＮＫの輸送機能に欠陥がある（ａｎｋ／ａｎｋ変異マウス）ため、Ｅｎｐｐ１−／−マウスにおけると同様に、軟部組織の骨化が見られる（Ｈｏ Ａ Ｍ，Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍ Ｄ，Ｋｉｎｇｓｌｅｙ Ｄ Ｍ ２０００“Ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｕｓｅ ａｎｋ ｇｅｎｅ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．”Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８９：２６５−２７０−１３；Ｈａｒｍｅｙ Ｄ，Ｈｅｓｓｌｅ Ｌ，Ｎａｒｉｓａｗａ Ｓ， Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ，Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ ２００４ “Ｃｏｎｃｅｒｔｅｄ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｎｄ ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ ｂｙ Ａｋｐ２，Ｅｎｐｐ１ ａｎｄ Ａｎｋ．Ａｎ ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．”Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １６４：１１９９−１２０９；Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ，Ｐｏｌｅｗｓｋｉ Ｍ，ｖａｎ Ｅｔｔｅｎ Ｄ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ ２００５“Ｃｈｏｎｄｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ＰＰｉ ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ａｏｒｔｉｃ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ＮＰＰ１−／− ｍｉｃｅ．”Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ ２５：６８６−６９１）。

アルカリホスファターゼ（Ｅ．Ｃ．３．１．３．１）（ＡＰ）は、ほとんどの生物に存在する二量体の酵素である（Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ ２００６“Ｍａｍｍａｌｉａｎ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅｓ．Ｆｒｏｍ ｂｉｏｌｏｇｙ ｔｏ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．”Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ， Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ ｐｐ．１−３２２）。これらは、ホスホモノエステルの加水分解を触媒して、無機リン酸（Ｐｉ）とアルコールに分解する。ヒトにおいて、４つのイソ酵素のうちの３つ、すなわち、小腸型ＡＰ（ＩＡＰ）、胎盤型ＡＰ（ＰＬＡＰ）、および生殖細胞型ＡＰ（ＧＣＡＰ）は組織特異的であるが、第４のＡＰは組織非特異的（ＴＮＡＰ）であって、骨、肝臓、および腎臓で発現される。

最近の研究によって、骨組織におけるＴＮＡＰの主な役目は、ｅＰＰｉを加水分解してこの石灰化阻害因子の蓄積を阻止し、その結果、正常な骨石灰化を確保することであるという有力な証拠が提出されている（Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ Ａ，Ｈｅｓｓｌｅ Ｌ，Ｗｅｎｎｂｅｒｇ Ｃ， Ｍａｕｒｏ Ｓ，Ｎａｒｉｓａｗａ Ｓ，Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ，Ｓａｎｏ Ｋ，Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ ２０００“Ｔｉｓｓｕｅ−ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＴＮＡＰ）ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ−１（ＰＣ−１）ａｃｔ ａｓ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｍｕｔｕａｌ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｏｆ ｍｉｎｅｒａｌｉｚｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｍｕｒｉｎｅ ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ．”Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ２７９：Ｒ１３６５−１３７７−１７；Ｈｅｓｓｌｅ Ｌ，Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ Ａ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｈ Ｃ，Ｎａｒｉｓａｗａ Ｓ，Ｓａｌｉ Ａ，Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ Ｗ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ，Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ ２００２“Ｔｉｓｓｕｅ−ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ−１ ａｒｅ ｃｅｎｔｒａｌ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ．”Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９９：９４４５−９４４９；Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ，Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ，Ｖａｎ Ｅｔｔｅｎ Ｄ，Ｓａｌｉ Ａ，Ｈｕ Ｓ Ｉ，Ｆａｒｌｅｙ Ｄ，Ｋｒｕｇ Ｈ，Ｈｅｓｓｌｅ Ｌ，Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ ２００３“Ｌｉｎｋｅｄ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ ｉｎ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ
ＰＰ（ｉ）ａｎｄ ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ ｍｅｄｉａｔｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ
ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ
ＰＣ−１ ａｎｄ ＡＮＫ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．”Ｊ Ｂｏｎｅ Ｍｉｎ Ｒｅｓ
１８：９９４−１００４）。ＮＰＰ１ノックアウトマウスおよびＡＮＫ欠損マウスのｅＰＰｉ濃度を正常化させると、それらの軟組織骨化異常が改善する（Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ
Ａ，Ｈｅｓｓｌｅ Ｌ，Ｗｅｎｎｂｅｒｇ Ｃ，Ｍａｕｒｏ Ｓ，Ｎａｒｉｓａｗａ Ｓ，Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ，Ｓａｎｏ Ｋ，Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ ２０００“Ｔｉｓｓｕｅ−ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＴＮＡＰ）ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ−１（ＰＣ−１）ａｃｔ ａｓ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｍｕｔｕａｌ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ ｏｆ ｍｉｎｅｒａｌｉｚｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ｍｕｒｉｎｅ ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｓ．”Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ２７９：Ｒ１３６５−１３７７，１６；Ｈｅｓｓｌｅ Ｌ，Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ Ａ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ
Ｈ Ｃ，Ｎａｒｉｓａｗａ Ｓ，Ｓａｌｉ Ａ，Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ Ｗ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ，Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ ２００２“Ｔｉｓｓｕｅ−ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｃｅｌｌ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ−１ ａｒｅ ｃｅｎｔｒａｌ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ．”Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９９：９４４５−９４４９）．Ｃｒｏｓｓｂｒｅｅｄｉｎｇ ｅｉｔｈｅｒ ｔｈｅ Ｅｎｐｐ１−／− ｏｒ ｔｈｅ
ａｎｋ／ａｎｋ ｍｉｃｅ ｔｏ ｍｉｃｅ ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｉｎ ＴＮＡＰ（Ａｋｐ２−／−）ｍｉｃｅ ｎｏｒｍａｌｉｚｅｓ ｅＰＰｉ ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅｓ ａ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｕｐ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＯＰＮ ｌｅｖｅｌｓ（Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｋ，Ｇｏｄｉｎｇ Ｊ，Ｖａｎ Ｅｔｔｅｎ Ｄ，ＳａｌＩ Ａ，Ｈｕ Ｓ Ｉ，Ｆａｒｌｅｙ Ｄ，Ｋｒｕｇ Ｈ，Ｈｅｓｓｌｅ Ｌ，Ｍｉｌｌａｎ Ｊ Ｌ，Ｔｅｒｋｅｌｔａｕｂ Ｒ ２００３“Ｌｉｎｋｅｄ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ ｉｎ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ＰＰ（ｉ）ａｎｄ ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ ｍｅｄｉａｔｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ ＰＣ−１ ａｎｄ ＡＮＫ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．”Ｊ Ｂｏｎｅ Ｍｉｎ Ｒｅｓ １８：９９４−１００４）。

重要なことには、これらの研究によって、ＴＮＡＰが、強直症および変形関節炎などの病気のみならず動脈石灰化を治療する上で有用な治療標的となりうることが示されたのである。実際、実質的証拠によって、ヒトの動脈における石灰化部位には、ＴＮＡＰに富んだ小胞が存在することが指摘されている。ヒトアテローム性動脈硬化症の病変部にＴＮＡＰに富んだ基質小胞（ＭＶ）が存在することは、それに伴う血管石灰化を促進する積極的な役割があることを示唆している（Ｈｓｕ Ｈ Ｈ，Ｃａｍａｃｈｏ Ｎ Ｐ １９９９“Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｌｃｉｆｉａｂｌｅ ｖｅｒｓｉｃｌｅｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃ ａｏｒｔａｓ．”Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ １４３：３５３−３６２；Ｈｕｉ Ｍ，Ｌｉ Ｓ Ｑ，Ｈｏｌｍｙａｒｄ
Ｄ，Ｃｈｅｎｇ Ｐ １９９７“Ｓｔａｂｌｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｎｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｗｉｔｈ ｔｉｓｓｕｅ ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｍｉｎｅｒａｌ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｂｏｔｈ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ａｎｄ ａｂｓｅｎｃｅ ｏｆ ｂｅｔａ−ｇｌｙｃｅｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ：ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｉｎ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎ．”Ｃａｌｃｉｆｉｅｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ６０：４６７−７２；Ｈｕｉ Ｍ，Ｔｅｎｅｎｂａｕｍ Ｈ Ｃ １９９８“Ｎｅｗ ｆａｃｅ ｏｆ ａｎ ｏｌｄ ｅｎｚｙｍｅ：ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｍａｙ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｔｉｓｓｕｅ ａｇｉｎｇ ｂｙ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｔｉｓｓｕｅ ｈａｒｄｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ．”Ａｎａｔｏｍｉｃａｌ Ｒｅｃｏｒｄ ２５３：９１−９４．Ｔａｎｉｍｕｒａ Ａ，ＭｃＧｒｅｇｏｒ Ｄ Ｈ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｈ Ｃ １９８６“Ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ．Ｉ．Ｈｕｍａｎ ｓｔｕｄｉｅｓ．”Ｊ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２：２６１−２７３．Ｔａｎｉｍｕｒａ Ａ，ＭｃＧｒｅｇｏｒ Ｄ Ｈ，Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｈ Ｃ １９８６“Ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ． ＩＩ． Ａｎｉｍａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ．”Ｊ Ｅｘｐ Ｐａｔｈｏｌ ２：２７５−２９７）。ＴＮＡＰの発現が増加すると、ウシ血管平滑筋細胞（ＶＳＭＣ）による石灰化が加速され（Ｓｈｉｏｉ Ａ，Ｎｉｓｈｉｚａｗａ Ｙ，Ｊｏｎｏ Ｓ，Ｋｏｙａｍａ Ｈ，Ｈｏｓｏｉ Ｍ，Ｍｏｒｉｉ Ｈ １９９５ Ｂｅｔａ−ｇｌｙｃｅｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｓ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｂｏｖｉｎｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ．Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ １５：２００３−２００９）、また、マクロファージは、ＩＦＮγおよび１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の存在下でＴＮＡＰを活性化させることによって、ヒトＶＳＭＣにおける石灰化表現型を誘導することができる（Ｓｈｉｏｉ Ａ，Ｋａｔａｇｉ Ｍ，Ｏｋｕｎｏ Ｙ，Ｍｏｒｉ Ｋ，Ｊｏｎｏ Ｓ，Ｋｏｙａｍａ Ｈ， Ｎｉｓｈｉｚａｗａ Ｙ ２００２“Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｎｅ−ｔｙｐｅ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｖａｓｃｕｌａｒ ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌｓ：ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ ａｎｄ ｏｎｃｏｓｔａｔｉｎ Ｍ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．”Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ ９１：９−１６）。培養ラット大動脈およびヒト弁間質細胞の石灰化は、ＴＮＡＰ活性に依存することが明らかになっている（Ｌｏｍａｓｈｖｉｌｉ Ｋ，Ｃｏｂｂｓ Ｓ，Ｈｅｎｎｉｇａｒ Ｒ，Ｈａｒｄｃａｓｔｌｅ Ｋ，Ｏ‘Ｎｅｉｌｌ Ｗ Ｃ ２００４“Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｖａｓｃｕｌａｒ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ：ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ａｎｄ ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ．”Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１５：１３９２−１４０１；Ｍａｔｈｉｅｕ Ｐ，Ｖｏｉｓｉｎｅ Ｐ，Ｐｅｐｉｎ Ａ，Ｓｈｅｔｔｙ Ｒ，Ｓａｖａｒｄ Ｎ，Ｄａｇｅｎａｉｓ Ｆ ２００５“Ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｖａｌｖｅ ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｏｎ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ．”Ｊ Ｈｅａｒｔ Ｖａｌｖｅ Ｄｉｓｅａｓｅ １４：３５３−３５７）。

Ｄｅｔｒａｎｏ Ｒ Ｃ，Ｄｏｈｅｒｔｙ Ｔ Ｍ，Ｄａｖｉｅｓ Ｍ Ｊ，Ｓｔａｒｙ Ｈ Ｃ "Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ ｃｏｒｏｎａｒｙ ｅｖｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｏｒｏｎａｒｙ ｃａｌｃｉｕｍ： ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｒｏｂｌｅｍｓ．"Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｂｌ Ｃａｒｄｉｏｌ（２０００）２５：３７４−４０２ Ｄｏｈｅｒｔｙ Ｔ Ｍ，Ｕｚｕｉ Ｈ，Ｆｉｔｚｐａｔｒｉｃｋ Ｌ Ａ，Ｔｒｉｐａｔｈｉ Ｐ Ｖ，Ｄｕｎｓｔａｎ Ｃ Ｒ，Ａｓｏｔｒａ Ｋ，Ｒａｊａｖａｓｈｉｓｔｈ Ｔ Ｂ "Ｒａｔｉｏｎａｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ−ｌｉｋｅ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ａｒｔｅｒｉａｌ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ．"Ｆａｓｅｂ Ｊ（２００２）１６：５７７−５８２ ｖｏｎ ｄｅｒ Ｒｅｃｋｅ Ｐ，Ｈａｎｓｅｎ Ｍ Ａ，Ｈａｓｓａｇｅｒ Ｃ "Ｔｈｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｏｗ ｂｏｎｅ ｍａｓｓ ａｔ ｔｈｅ ｍｅｎｏｐａｕｓｅ ａｎｄ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ．"Ａｍ Ｊ Ｍｅｄ（１９９９）１０６：２７３−２７８ Ｓｐｅｅｒ Ｍ Ｙ，ＭｃＫｅｅ Ｍ Ｄ，Ｇｕｌｄｂｅｒｇ Ｒ Ｅ，Ｌｉａｗ Ｌ， Ｙａｎｇ Ｈ Ｙ，Ｔｕｎｇ Ｅ，Ｋａｒｓｅｎｔｙ Ｇ，Ｇｉａｃｈｅｌｌｉ Ｃ Ｍ "Ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ ｇｅｎｅ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｖａｓｃｕｌａｒ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｔｒｉｘ Ｇｌａ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ ａｓ ａｎ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ｖａｓｃｕｌａｒ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｖｏ．"Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ（２００２）１９６：１０４７−１０５５ Ｂｕｃａｙ Ｎ，Ｓａｒｏｓｉ Ｉ，Ｄｕｎｓｔａｎ Ｃ Ｒ，Ｍｏｒｏｎｙ Ｓ，Ｔａｒｐｌｅｙ Ｊ，Ｃａｐｐａｒｅｌｌｉ Ｃ，Ｓｃｕｌｌｙ Ｓ，Ｔａｎ Ｈ Ｌ， Ｘｕ Ｗ，Ｌａｃｅｙ Ｄ Ｌ，Ｂｏｙｌｅ Ｗ Ｊ，Ｓｉｍｏｎｅｔ Ｗ Ｓ ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｍｉｃｅ ｄｅｖｅｌｏｐ ｅａｒｌｙ ｏｎｓｅｔ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ａｎｄ ａｒｔｅｒｉａｌ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ． Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ（１９９８）１２：１２６０−１２６８ Ｓｔｅｉｔｚ Ｓ Ａ，Ｓｐｅｅｒ Ｍ Ｙ，ＭｃＫｅｅ Ｍ Ｄ，Ｌｉａｗ Ｌ，Ａｌｍｅｉｄａ Ｍ，Ｙａｎｇ Ｈ，Ｇｉａｃｈｅｌｌｉ Ｃ Ｍ "Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｍｉｎｅｒａｌ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｅｃｔｏｐｉｃ ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ．"Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ（２００２）１６１：２０３５−２０４６ Ｍｙｅｒｓ Ｄ Ｌ， Ｈａｒｍｏｎ Ｋ Ｊ，Ｌｉｎｄｎｅｒ Ｖ，Ｌｉａｗ Ｌ Ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ａｒｔｅｒｉａｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ｉｎ ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ−ｎｕｌｌ ｍｉｃｅ．Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ Ｔｈｒｏｍｂ Ｖａｓｃ Ｂｉｏｌ（２００３）２３：１０２１−１０２８

本明細書において具体化され、かつ広範に説明されているように、本発明の目的によれば、本発明は、組織非特異的なアルカリホスファターゼ阻害因子、ならびに、それらを用いて血管石灰化、動脈石灰化、またはその他の心臓血管疾患を治療、予防、または軽減させることに関する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
対象における血管石灰化を治療または予防する方法であって、式：

を有する一つ以上の化合物を該対象に投与する工程を含む方法であって、ただし、式中、Ｒは以下：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；ｉｉｉ）Ｃ _２ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルケニル；
ｉｖ）Ｃ _２ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
ｖ）置換型または非置換型のアリール；
ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉ）置換型または非置換型の複素環；
ｖｉｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ _３ ；
ｉｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ _３ ；または
ｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＨ；
から選択され
Ｒ ^１ は以下：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；ｉｉｉ）Ｃ _２ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルケニル；
ｉｖ）Ｃ _２ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
ｖ）置換型または非置換型のアリール；
ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉ）置換型または非置換型の複素環；
ｖｉｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ _３ ；
ｉｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ _３ ；
ｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＨ；
ｘｉ）−ＯＨ；または
ｘｉｉ）−ＮＨ _２ ；
から選択され、
Ｒ ^２ は：
ｉ）水素；
ｉｉ）ハロゲン；または
ｉｉｉ）ＲおよびＲ ^２ またはＲ ^１ およびＲ ^２ が一緒になって、１つ以上の５員または６員の置換型または非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型または非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む５員または６員のヘテロアリール縮合環、または、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む置換型または非置換型の５員、６員、または７員の複素環式縮合環を含むＡ環を形成することができ；
Ｌは、式：
−［Ｒ ^５ ］ _ｚ ［Ｃ（Ｒ ^３ａ Ｒ ^３ｂ ）］ _ｘ ［Ｒ ^５ ］ _ｚ ［Ｃ（Ｒ ^４ａ Ｒ ^４ｂ ）］ _ｙ ［Ｒ ^５ ］ _ｚ −
を有する結合ユニットであり、各Ｒ ^３ａ 、Ｒ ^３ｂ 、Ｒ ^４ａ 、およびＲ ^４ｂ が、それぞれ独立して、以下のものから選択され：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ _１ 〜Ｃ _４ の直鎖状または分枝状のアルキル；
ｉｉｉ）フェニル；
ｉｖ）ヒドロキシル；または
ｖ）シアノ；
ｖｉ）または、２個の隣接Ｒ ^３ａ ユニットもしくは２個の隣接Ｒ ^３ｂ ユニットが一緒になって、二重結合を形成することができ；
Ｒ ^５ は以下：
ｉ）−ＮＲ ^６ −；
ｉｉ）−ＮＲ ^６ Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ ^６ −；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉｉｉ）−ＮＨ（＝ＮＲ ^６ ）ＮＨ−；
ｉｘ）−Ｏ−；
ｘ）−Ｓ−；または
ｘｉ）−ＣＲ ^６ ＝ＣＲ ^６ −；
から選択され、
Ｒ ^６ は、水素またはメチルから選択され；
指数ｘは０〜６であり；
指数ｙは０〜６であり；
指数ｚはそれぞれ、０または１であり；
Ｌ ^１ は、式：
−［Ｒ ^９ ］ _ｒ ［Ｃ（Ｒ ^７ａ Ｒ ^７ｂ ）］ _ｐ ［Ｒ ^９ ］ _ｒ ［Ｃ（Ｒ ^８ａ Ｒ ^８ｂ ）］ _ｑ ［Ｒ ^９ ］ _ｒ −
を有する結合ユニットであり、各Ｒ ^７ａ 、Ｒ ^７ｂ 、Ｒ ^８ａ 、およびＲ ^８ｂ は、それぞれ独立して、以下：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ _１ 〜Ｃ _４ の直鎖状または分枝状のアルキル；
ｉｉｉ）フェニル；
ｉｖ）ヒドロキシル；または
ｖ）シアノ；
から選択され、
Ｒ ^９ は、それぞれ、以下：
ｉ）−ＮＲ ^１０ −；
ｉｉ）−ＮＲ ^１０ Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ ^１０ −；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｘ）−ＮＨ（＝ＮＲ ^１０ ）ＮＨ−；
ｘ）−Ｏ−；
ｘｉ）−Ｓ−；または
ｘｉｉ）−ＣＲ ^１０ ＝ＣＲ ^１０ −；
から選択され、
Ｒ ^１０ は、それぞれ水素またはメチルから選択され；
指数ｐは０〜６であり；
指数ｑは０〜６であり；そして、
指数ｒは、それぞれ０または１である、
方法。
（項目２）
Ｒ、Ｒ ^１ 、およびＲ ^２ を、以下：
ｉ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
ｉｉ）Ｃ _２ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルケニル；
ｉｉｉ）Ｃ _２ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
ｉｖ）Ｃ _６ またはＣ _１０ の置換型または非置換型のアリール；
ｖ）Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；
ｖｉ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ ＯＲ ^１５ ；
ただし、Ｒ ^１５ は、以下から選択され：
ａ）−Ｈ；
ｂ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル、またはＣ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のハロアルキル；
ｃ）Ｃ _６ またはＣ _１０ の置換型または非置換型のアリール、またはＣ _７ 〜Ｃ _２０ のアルキレンアリール；
ｄ）Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；および
ｅ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ Ｎ（Ｒ ^１６ａ ）（Ｒ ^１６ｂ ）；
ただし、Ｒ ^１６ａ およびＲ ^１６ｂ は、それぞれ独立して以下から選択され：
ａ）−Ｈ；
ｂ）−ＯＲ ^１７ ；
ただし、Ｒ ^１７ は、水素またはＣ _１ 〜Ｃ _４ の直鎖状アルキル；
ｃ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
ｄ）Ｃ _６ またはＣ _１０ の置換型または非置換型のアリール；
ｅ）Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；
ｆ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；および
ｇ）Ｒ ^１６ａ およびＲ ^１６ｂ は一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ Ｃ（Ｏ）Ｒ ^１８ ；
ただし、Ｒ ^１８ は、以下から選択され：
ａ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
ｂ）−ＯＲ ^１９ ；
ただし、Ｒ ^１９ は、水素、Ｃ _１ 〜Ｃ _４ の置換型または非置換型の直鎖状アルキル；Ｃ _６ またはＣ _１０ の置換型または非置換型のアリール、Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；Ｃ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；および
ｃ）−Ｎ（Ｒ ^２０ａ ）（Ｒ ^２０ｂ ）
ただし、Ｒ ^２０ａ およびＲ ^２０ｂ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；Ｃ _６ またはＣ _１０ の置換型または非置換型のアリール；Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；Ｃ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；またはＲ ^２０ａ およびＲ ^２０ｂ は一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
ｘ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ ＯＣ（Ｏ）Ｒ ^２１ ；
ただし、Ｒ ^２１ は、以下から選択され：
ａ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；および
ｂ）−Ｎ（Ｒ ^２２ａ ）（Ｒ ^２２ｂ ）
ただし、Ｒ ^２２ａ およびＲ ^２２ｂ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；Ｃ _６ またはＣ _１０ の置換型または非置換型のアリール；Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；Ｃ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；またはＲ ^２２ａ およびＲ ^２２ｂ は一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ ＮＲ ^２３ Ｃ（Ｏ）Ｒ ^２４ ；
ただし、Ｒ ^２３ は、以下から選択され：
ａ）−Ｈ；および
ｂ）Ｃ _１ 〜Ｃ _４ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
ただし、Ｒ ^２４ は、以下から選択され：
ａ）Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；および
ｂ）−Ｎ（Ｒ ^２５ａ ）（Ｒ ^２５ｂ ）
ただし、Ｒ ^２５ａ およびＲ ^２５ｂ は、それぞれ独立して、水素、Ｃ _１ 〜Ｃ _１２ の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；Ｃ _６ またはＣ _１０ の置換型または非置換型のアリール；Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；Ｃ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；またはＲ ^２５ａ およびＲ ^２５ｂ は一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ ＣＮ；
ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ ＮＯ _２ ；
ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ ^１４ａ ）（Ｒ ^１４ｂ ）］ _ｋ ＳＯ _２ Ｒ ^２６ ；
ただし、Ｒ ^２６ は、水素、ヒドロキシル、置換型または非置換型のＣ _１ 〜Ｃ _４ の直鎖状または分枝状のアルキル；置換型または非置換型のＣ _６ 、Ｃ _１０ 、またはＣ _１４ のアリール；Ｃ _７ 〜Ｃ _１５ のアルキレンアリール；Ｃ _１ 〜Ｃ _９ の置換型または非置換型の複素環；またはＣ _１ 〜Ｃ _１１ の置換型または非置換型のヘテロアリール；ならびに
ｘｖ）ハロゲン；
から選択される１つ以上のユニットによって置換することができ、
ここで、Ｒ ^１４ａ およびＲ ^１４ｂ は、それぞれ独立して、水素またはＣ _１ 〜Ｃ _４ のアルキルであり；そして
指数ｋは０〜５である、
項目１記載の方法。
（項目３)
以下の式：

を有する、項目２記載の方法であって、式中、
Ｒは：
ｉ）水素；
ｉｉ）置換型または非置換型のアリール；または
ｉｉｉ）置換型または非置換型のヘテロアリールであり；
Ｒ ^１ は以下：
ｉ）水素；
ｉｉ）置換型または非置換型のアリール；または
ｉｉｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；および
ｉｖ）置換型または非置換型の複素環；
から選択され、
Ｒ ^９ は、それぞれ独立して、以下：
ｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉ）−ＮＨ（＝ＮＲ ^１０ ）ＮＨ−；または
ｖｉｉ）−Ｏ−；
から選択され、
指数ｐは１〜３であり；
指数ｑは１〜３であり；および、
指数ｒは、１または０である、
方法。
（項目４)
以下の式：

を有する、項目１記載の方法であって、式中、Ｒ ^ａ は、以下：
ｉ）クロロ；
ｉｉ）フルオロ；
ｉｉｉ）ブロモ；
ｉｖ）メトキシ；および
ｖ）シアノ；
から選択される、水素に対する０〜５個の置換であり、
Ｒ ^１ は以下：
ｉ）置換型または非置換型のアリール；または
ｉｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
から選択され、
Ｒ ^９ は、それぞれ、以下：
ｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；または
ｖｉ）−Ｏ−；
から選択され、
指数ｐは１〜３であり；
指数ｑは１〜３であり；および、
指数ｒは、１または０である、
方法。
（項目５)
Ｒが、２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−ブロモフェニル、４−ブロモフェニル、２−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、および４−メチルフェニルから選択される、項目１記載の方法。
（項目６)
前記化合物が以下：
２−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）−１，２−ジフェニルエタノン；
２−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）−Ｎ−（２−フェノキシエチル）アセトアミド；
２−（５−ベンジル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン；
メチル３−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸；
Ｎ−［５−（プロピルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル］アセトアミド；
メチル５−（１Ｈ−インドール３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート；３−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸：
メチル３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
（Ｚ）−４−［５−（２−ブロモフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ］−３−ヒドロキシ−２−（１−イミノエチル）ブト−２−エンニトリル；
Ｎ−（フラン−２−イルメチルカルバモイル）−２−（５−フェニル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）アセトアミド；
Ｎ−［５−（２−メトキシフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル］アセトアミド；
Ｎ ^２ −フェニル−６−［（５−フェニル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）メチル］−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン；
３，４，５−トリメトキシ−Ｎ−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ベンズアミド；
３−（２−クロロフェニル）−５−フェニル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール；
２−［５−（２−ブロモフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ］−Ｎ−（フラン−２−イルメチルカルバモイル）アセトアミド；
３−（ナフタレン−１−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−オール；
２−｛［５−（２−メトキシフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ］メチル｝ピリジン；
５−（アリルチオ）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール；
エチル４−シアノ−５−（２−（５−（２−メトキシフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）アセトアミド）−３−メチルチオフェン−２−カルボキシレート；および
３−（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、から選択される、項目１記載の方法。
（項目７)
ＲおよびＲ ^２ またはＲ ^１ およびＲ ^２ が一緒になって、インダゾリル、ピラゾール［３，４−ｂ］ピリジン、ピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オールイル、ピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オンイル、６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オンイル、２，４−ジヒドロクロメノ［３，４−ｃ］ピラゾリル；５Ｈ−［１，２，４］トリアゾール［５，１−ｂ］［１，３］チアジン−７（６Ｈ）−オン、１，５，６，７−テトラヒドロピラノ［３，２−ｃ］ピラゾリル、および７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジニルから選択されるヘテロアリール縮合環または複素環式縮合環を形成する、項目１記載の方法。
（項目８)
前記化合物が以下：
７−メトキシ−４，５−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｇ］インダゾール−３−カルボン酸；３−ベンジル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
メチル５−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート；
４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
３−フェニル−１Ｈ−インダゾール；
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
２，４−ジヒドロクロメノ［４，３−ｃ］ピラゾール−３−カルボキシレート；
３−ブチル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
６，６−ジメチル−３（チオフェン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
５−（フラン−２−イル）−２−（４−メトキシフェニル）−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［５，１−ｂ］［１，３］チアジン−７（６Ｈ）−オン；
２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（２，５−ジメトキシフェニル）エタノン；
６−アミノ−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−３−（メトキシメチル）−１，４−ジヒドロピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボニトリル；
５−クロロ−１−フェニル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−オール；
３−（２−クロロフェニル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（４−フルオロフェニル）エタノン；
３−（（２，６−ジメチルフェノキシ）メチル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
７−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−７Ｈ−ピロロ［３，２−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
２−（５−メチルイソキサゾール−３−イルアミノ）−２−オキソエチル２Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート；
５−（２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ）−２−イソプロピルイミダゾ［１，２−ｃ］キナゾリン−３（２Ｈ）−オン；
（Ｚ）−５−（（３−メチルチオフェン−２−イル）メチレン）チアゾロ［３，２−ｂ］［１，２，４］トリアゾール−６（５Ｈ）−オン；
７−（３，４−ジメチルフェニル）−２−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン；および
７−メチル−２−フェネチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン、
から選択される、項目１記載の方法。
（項目９)
対象における血管石灰化を治療または予防する方法であって、以下の式：
を有する一つ以上の化合物を投与する工程を含み、ただし、式中、Ｃは、置換型または非置換型のＣ _６ またはＣ _１０ のアリール環であり；Ｄは、置換型または非置換型のＣ _６ またはＣ _１０ のアリール環、または置換型もしくは非置換型のＣ _５ 〜Ｃ _９ へテロアリール環であり；さらに該置換が、それぞれ独立して、以下：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）ヒドロキシ；
ｉｉｉ）Ｃ _１ 〜Ｃ _４ アルキル；
ｉｖ）Ｃ _１ 〜Ｃ _４ アルコキシ；
ｖ）置換型または非置換型の複素環；
ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉ）置換型または非置換型のアリール；
ｖｉｉｉ）アミノ；
ｉｘ）モノ−Ｃ _１ 〜Ｃ _４ アルキルアミノ；
ｘ）ジ−Ｃ _１ 〜Ｃ _４ アルキルアミノ；
ｘｉ）ニトロ；および
ｘｉｉ）シアノ
から選択される、方法。
（項目１０)
前記化合物が以下：
２−ジメトキシ−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼン−スルホンアミド；
２−メトキシ−５−メチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド；
２−エトキシ−５−メチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド；および
Ｎ−［３−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）−４−ヒドロキシフェニル）−２，５−ジメチオキシベンゼンスルホンアミド、
から選択される、項目９記載の方法。
（項目１１)
対象における血管石灰化を治療または予防する方法であって、以下の式：

を有する一つ以上の化合物を投与する工程を含み、式中、Ｌ ^８ は、２〜２０個の炭素原子および１〜１０個の酸素原子を有するポリアルキレン結合ユニットまたはポリアルキレンオキシ結合ユニットを表す、方法。
（項目１２)
前記一つ以上の化合物が以下：
２，２’−［２，２’−オキシビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（オキシ）］ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸；および
２，２’−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸、
から選択される、項目１１記載の方法。
（項目１３)
対象における血管石灰化を治療または予防する方法であって、以下：
４−｛２−［２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ］−４−オキソキナゾリン−３（４Ｈ）−イル｝−Ｎ−［（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル］ブタンアミド；および
（Ｅ）−２−シアノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（３−フェニルプロピル）アクリルアミド、
から選択される一つ以上の化合物を投与する工程を含む、方法。
（項目１４)
対象における血管石灰化を治療または予防する方法であって、以下：
３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸；
メチル３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
３−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸；
メチル３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
３−（ナフタレン−１−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−オール；
３−（４−ブロモフェニル）−４−クロロ−１−Ｈ−ピラゾール−５−アミン；
３−（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
メチル３−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
３−ブチル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
６，６−ジメチル−３（チオフェン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
３−ベンジル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
６−アミノ−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−３−（メトキシメチル）−１，４−ジヒドロピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボニトリル；
３−フェニル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｃ］ピラゾール；
２−（５−メチルイソキサゾール−３−イルアミノ）−２−オキソエチル２Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート；
７−メトキシ−４，５−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｇ］インダゾール−３−カルボン酸；２，４−ジヒドロクロメノ［４，３−ｃ］ピラゾール−３−カルボン酸；
３−フェニル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｃ］ピラゾール；
Ｎ ^２ −フェニル−６−［（５−フェニル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）メチル］−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン；
２−（（５−（２−メトキシフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）メチル）ピリジン；
エチル４−シアノ−５−｛２−［５−（２−メトキシフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ］アセトアミド｝−３−メチルチオフェン−２−カルボキシレート；
２−［５−（２−ブロモフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ］−Ｎ−（フラン−２−イルメチルカルバモイル）アセトアミド；
Ｎ−（フラン−２−イルメチルカルバモイル）−２−（５−フェニル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）アセトアミド；
Ｎ ^２ −フェニル−６−［（５−フェニル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）メチル］−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン；
２−（（５−（２−メトキシフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）メチル）ピリジン
６−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルチオ）−Ｎ ^２ ，Ｎ ^４ −ジフェニル−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン；
２−（５−ベンジル−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）−３ａ，４，７，７ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イソインドール１，３（２Ｈ）−ジオン；
Ｎ−（５−（プロピルチオ）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）アセトアミド；
（Ｚ）−４−（５−（２−ブロモフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）−３−ヒドロキシ−２−（１−イミノエチル）ブト−２−エンニトリル；
Ｎ−（５−（２−メトキシフェニル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イル）アセトアミド；
３，３’−（２，５−ジメトキシ−１，４−フェニレン）−ビス（メチレン）ビス（スルファンジイル）ビス（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール）；
３，４，５−トリメトキシ−Ｎ−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ベンズアミド；
３−（２−クロロフェニル）−５−フェニル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール；
５−（フラン−２−イル）−２−（４−メトキシフェニル）−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［５，１−ｂ］［１，３］チアジン−７（６Ｈ）−オン；
５−（アリルチオ）−３−（４−メトキシフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール；
２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（２，５−ジメトキシフェニル）エタノン；
５−クロロ−１−フェニル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−オール；
３−（２−クロロフェニル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（４−フルオロフェニル）エタノン；
３−（（２，６−ジメチルフェノキシ）メチル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
７−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−７Ｈ−ピロロ［３，２−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
５−（２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ）−２−イソプロピルイミダゾ［１，２−ｃ］キナゾリン−３（２Ｈ）−オン；
（Ｚ）−５−（（３−メチルチオフェン−２−イル）メチレン）チアゾロ［３，２−ｂ］［１，２，４］トリアゾロ−６（５Ｈ）−オン；
７−（３，４−ジメチルフェニル）−２−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン；
７−メチル−２−フェネチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン；
２−ジメトキシ−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼン−スルホンアミド；
２−メトキシ−５−メチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド；
２−エトキシ−５−メチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド；
Ｎ−［３−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルチオ）−４−ヒドロキシフェニル）−２，５−ジメチオキシベンゼンスルホンアミド；
２，２’−［２，２’−オキシビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（オキシ）］ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸；
２，２’−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸；
４−｛２−［２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ］−４−オキソキナゾリン−３（４Ｈ）−イル｝−Ｎ−［（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル］ブタンアミド；および、
（Ｅ）−２−シアノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（３−フェニルプロピル）アクリルアミド、
から選択される一つ以上の化合物を投与する工程を含む、方法。
（項目１５)
対象における血管石灰化を治療または予防する方法であって、以下：

から選択される一つ以上の化合物を投与する工程を含む、方法。

本開示の方法および組成物の更なる利点は、一部が以下の説明に記載され、また、一部が、その説明から理解でき、あるいは、本開示の方法および組成物を実施することによって会得することができるであろう。本開示の方法および組成物の利点は、添付の請求の範囲に具体的に示された構成およびそれらを組み合わせたものを用いることにより実現および達成されるであろう。上記した一般的な説明および以下の詳細な説明は、例示的かつ説明的なものに過ぎず、請求の範囲に記載された発明を限定するものではないと理解されるべきである。

添付の図面は、本明細書に組み込まれて、その一部を構成するものであるが、本開示の方法および組成物のいくつかの実施態様を具体的に説明し、説明と合わせて、本開示の方法および組成物の原理を説明するのに役に立つものである。

図１Ａは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスの心臓および大動脈の全量標本が、多発性の大動脈石灰化病変を呈していることを示している。対照用マウス（Ｗｔ）由来の標本は、大動脈石灰化の兆候を示していない。図１Ｂは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウス、ａｎｋ／ａｎｋマウス、および対照（Ｗｔ）マウスにおけるカルシウム沈着を定量化した結果を示しており、Ｅｎｐｐ１ ^−／− マウスが、ａｎｋ／ａｎｋマウスよりも高水準の石灰化を示すことを明らかにしている。図１Ｃは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスに由来するＶＳＭＣが、対照（Ｗｔ）の活性レベルよりも高いＴＮＡＰ活性レベルを示すことが示されている。また、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスに由来するＶＳＭＣは、対照（Ｗｔ）細胞よりも有意に多量の無機物を産生する。 図１Ａは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスの心臓および大動脈の全量標本が、多発性の大動脈石灰化病変を呈していることを示している。対照用マウス（Ｗｔ）由来の標本は、大動脈石灰化の兆候を示していない。図１Ｂは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウス、ａｎｋ／ａｎｋマウス、および対照（Ｗｔ）マウスにおけるカルシウム沈着を定量化した結果を示しており、Ｅｎｐｐ１−／−マウスが、ａｎｋ／ａｎｋマウスよりも高水準の石灰化を示すことを明らかにしている。図１Ｃは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスに由来するＶＳＭＣが、対照（Ｗｔ）の活性レベルよりも高いＴＮＡＰ活性レベルを示すことが示されている。また、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスに由来するＶＳＭＣは、対照（Ｗｔ）細胞よりも有意に多量の無機物を産生する。 図１Ａは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスの心臓および大動脈の全量標本が、多発性の大動脈石灰化病変を呈していることを示している。対照用マウス（Ｗｔ）由来の標本は、大動脈石灰化の兆候を示していない。図１Ｂは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウス、ａｎｋ／ａｎｋマウス、および対照（Ｗｔ）マウスにおけるカルシウム沈着を定量化した結果を示しており、Ｅｎｐｐ１−／−マウスが、ａｎｋ／ａｎｋマウスよりも高水準の石灰化を示すことを明らかにしている。図１Ｃは、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスに由来するＶＳＭＣが、対照（Ｗｔ）の活性レベルよりも高いＴＮＡＰ活性レベルを示すことが示されている。また、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスに由来するＶＳＭＣは、対照（Ｗｔ）細胞よりも有意に多量の無機物を産生する。 ３種類の新規かつ有効なＴＮＡＰ阻害因子の構造が定義されていることを示している。これら３種類の化合物の窒素含有量は、阻害因子あたり３〜７個のＮ原子である。 阻害因子の濃度が増加する（０〜３０μＭ）と、ＴＮＡＰ、ＰＬＡＰ、およびＩＡＰの活性レベルが低下することを示している。 図４Ａは、さまざまな濃度に関する１／ｖ対１／［Ｓ］の二重逆数プロットが、３種類の新規阻害因子についての平行線になることを示している。これらのプロットは、各ＴＮＡＰ阻害因子が非競合的に作用することを示している。図４Ｂは、ｙ切片の二次的な再プロットがＫ_ｉを決定し、それにより、各新規阻害因子の有効性が決定されることを示している。 図４Ａは、さまざまな濃度に関する１／ｖ対１／［Ｓ］の二重逆数プロットが、３種類の新規阻害因子についての平行線になることを示している。これらのプロットは、各ＴＮＡＰ阻害因子が非競合的に作用することを示している。図４Ｂは、ｙ切片の二次的な再プロットがＫ_ｉを決定し、それにより、各新規阻害因子の有効性が決定されることを示している。 図５Ａは、阻害因子または基質の濃度を大幅に上回る濃度でも、競合的阻害因子であるＰ_ｉの存在は、化合物５８０４０７９の有効性に影響を及ぼさないことを示している。図５Ｂは、高濃度のＰＰ_ｉが、化合物５８０４０７９による阻害の程度に影響を及ぼさないことを示している。 ３種類の新規化合物のうちの２種類が、結合部位であるＲ４３３／Ｈ４３４領域に優先的にドッキングすることを示している。 ３種類の新規化合物のうちの２種類が、結合部位であるＲ４３３／Ｈ４３４領域に優先的にドッキングすることを示している。 ３種類の新規化合物のうちの２種類が、結合部位であるＲ４３３／Ｈ４３４領域に優先的にドッキングすることを示している。 ４種類の化合物すべてが、ある程度まで、ＶＳＭＣにおける石灰化を抑制することを示している。

本開示の方法および組成物は、以下に記載する具体的な実施態様の詳細な説明およびそこに含まれる実施例、ならびに図表およびそれらについて前述した、および後述する説明を参照することにより容易に理解することができる。

開示されているものは、本開示の方法および組成物のために使用することができ、それらとともに使用することができ、それらの調製に使用することができる物質、組成物、および成分、または本開示の方法および組成物の産物である。これらまたはその他の物質が開示されているため、これらの物質の組み合わせ、サブセット、相互作用、群などが開示されている場合には、これらの化合物の各々の多様な個別または集合的な組み合わせおよび置換が明示的に開示されていなくとも、それぞれが具体的に想定されて本明細書に開示されていると理解できる。例えば、ある化合物が開示および検討されており、該化合物を含むいくつかの分子に対して行うことのできるいくつかの改変が検討されているならば、具体的に別段の記載がない限り、化合物のあらゆる組み合わせおよび置換、ならびに可能な改変について具体的に想定されているのである。すなわち、一群の分子Ａ、Ｂ、およびＣが、一群の分子Ｄ、Ｅ、およびＦとともに開示されており、かつ分子の組み合わせ例であるＡ−Ｄが開示されているならば、それぞれが個別に記載されていなくても、それぞれは、個別的かつ集合的に想定されているのである。すなわち、この例では、Ａ、Ｂ、およびＣ；Ｄ、Ｅ、およびＦ；ならびにＡ−Ｄという組み合わせ例が開示されていることから、Ａ−Ｅ、Ａ−Ｆ、Ｂ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、Ｃ−Ｄ、Ｃ−Ｅ、およびＣ−Ｆの各組み合わせが具体的に想定されており、これらが開示されているとみなされるべきなのである。同様に、これらの任意の部分集団または組み合わせも具体的に想定され開示されている。すなわち、例えば、Ａ、Ｂ、およびＣ；Ｄ、Ｅ、およびＦ；ならびにＡ−Ｄという組み合わせ例が開示されていることから、Ａ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、およびＣ−Ｅという部分集団も具体的に想定され、開示されているとみなされるべきである。この概念は、本開示の組成物を製造し使用する方法における工程を含むがそれらに限らない、本出願のすべての態様に適用される。すなわち、実施可能な追加的工程が多様にある場合には、そのような多様な追加的工程を、本開示の方法の具体的な実施態様または実施態様を組み合わせたものとともに実施することができると理解できるため、そのような組み合わせのそれぞれが具体的に想定され開示されているとみなされるべきである。

当業者は、日常的な実験を用いるだけで、本明細書に記載されている方法および組成物の具体的な実施態様との同等物を数多く認識し、または確認することが可能であろう。そのような同等物も、以下の請求の範囲に包含されるよう意図するものである。

当然のことながら、本開示の方法および組成物は、開示された特定の方法論、プロトコル、および試薬に限定されるものではない。なぜなら、これらを変えることは可能であるからである。本明細書において使用される用語は、具体的な実施態様を説明する目的のためだけのものであって、添付の請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を制限することを意図するものではない。

Ａ．組成物
１．ＴＮＡＰ阻害因子
本明細書には、組織非特異的なアルカリホスファターゼ（ＴＮＡＰ）を阻害することができる化合物が開示される。これらの化合物を用いて、血管石灰化、動脈石灰化、および心臓血管疾患を、そのような症状または病気を患っているか、そのような症状または病気の危険性がある患者において治療または予防することができる。

本開示の化合物は、以下のものを含むことができる：
Ａ）２個以上の窒素原子を含む環；
Ｂ）アリールスルホンアミド；および
Ｃ）ＩＣ_５０が２０μＭ以下である組織非特異的なアルカリホスファターゼを阻害する化合物であって、一つ以上のアリールホスホン酸ユニットまたはホスホン酸ユニットを含むもの。

本開示の化合物は、ヘテロアリール環に２個または３個の窒素原子を有する以下の化合物を含む：
ｉ）以下の化学式を有するピラゾール類

ｉｉ）以下の化学式を有するピラゾール環を含む縮合環：

ｉｉｉ）以下の化学式を有する［１，２，４］トリアゾール類：

ｉｖ）以下の化学式を有する［１，２，４］トリアゾール環を含む縮合環：

ｖ）以下の化学式を有するイミダゾール類：

；または
ｖｉ）以下の化学式を有するイミダゾール環を含む縮合環：

ただし、式中、Ｒは以下のものから選択され：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；ｉｉｉ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルケニル；
ｉｖ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
ｖ）置換型または非置換型のアリール；
ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉ）置換型または非置換型の複素環；
ｖｉｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３；または
ｉｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３；
ｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＨ；
Ｒ^１は以下のものから選択され：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；ｉｉｉ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルケニル；
ｉｖ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
ｖ）置換型または非置換型のアリール；
ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉ）置換型または非置換型の複素環；
ｖｉｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３；
ｉｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３；
ｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＨ；
ｘｉ）−ＯＨ；または
ｘｉｉ）−ＮＨ_２；
Ｒ^２は以下のものであり：
ｉ）水素；
ｉｉ）ハロゲン；または
ｉｉｉ）ＲおよびＲ^２またはＲ^１およびＲ^２が一緒になって、１つ以上の５員または６員の置換型または非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型または非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む５員または６員のヘテロアリール縮合環、または、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む置換型または非置換型の５員、６員、または７員の複素環式縮合環を形成することができ；
Ｌは、以下の化学式を有する結合ユニットであり：
−［Ｒ^５］_ｚ［Ｃ（Ｒ^３ａＲ^３ｂ）］_ｘ［Ｒ^５］_ｚ［Ｃ（Ｒ^４ａＲ^４ｂ）］_ｙ［Ｒ^５］_ｚ−
各Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、およびＲ^４ｂは、それぞれ独立して、以下のものから選択され：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；
ｉｉｉ）フェニル；
ｉｖ）ヒドロキシル；または
ｖ）シアノ；
ｖｉ）または、２個の隣接Ｒ^３ａユニットもしくは２個の隣接Ｒ^３ｂユニットが一緒になって、二重結合を形成することができ；
Ｒ^５は以下のものから選択され：
ｉｉ）−ＮＲ^６−；
ｉｉｉ）−ＮＲ^６Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^６−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｖｉ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖｉｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉｉｉ）−ＮＨ（＝ＮＲ^６）ＮＨ−；
ｉｘ）−Ｏ−；
ｘ）−Ｓ−；または
ｘｉ）−ＣＲ^６＝ＣＲ^６−；
Ｒ^６は、水素またはメチルから選択され；
指数ｘは０〜６であり；
指数ｙは０〜６であり；
指数ｚはそれぞれ、０または１であり；
Ｌ^１は、以下の化学式を有する結合ユニットであり：
−［Ｒ^９］_ｒ［Ｃ（Ｒ^７ａＲ^７ｂ）］_ｐ［Ｒ^９］_ｒ［Ｃ（Ｒ^８ａＲ^８ｂ）］_ｑ［Ｒ^９］_ｒ−
各Ｒ^７ａ、Ｒ^７ｂ、Ｒ^８ａ、およびＲ^８ｂは、それぞれ独立して、以下のものから選択され：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；
ｉｉｉ）フェニル；
ｉｖ）ヒドロキシル；または
ｖ）シアノ；
Ｒ^９は、それぞれ、以下のものから選択され：
ｉ）−ＮＲ^１０−；
ｉｉ）−ＮＲ^１０Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１０−；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｘ）−ＮＨ（＝ＮＲ^１０）ＮＨ−；
ｘ）−Ｏ−；
ｘｉ）−Ｓ−；または
ｘｉｉ）−ＣＲ^１０＝ＣＲ^１０−；
Ｒ^１０は、それぞれ水素またはメチルから選択され；
指数ｐは０〜６であり；
指数ｑは０〜６であり；そして、指数ｒは、それぞれ０または１である。

上記したピラゾール環系、［１，２，４］トリアゾール環系、およびイミダゾール環系以外に、本開示の化合物は、さらに、４個よりも多い窒素原子を有する１つ以上の環系、または下記の説明および実施例に開示されているような、環内に硫黄原子および酸素原子を含む環系を含むことができる。

以下のものは、本開示の化合物が含む環系の更なる非限定的な例である：
ｉ）７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾール［１，５−ｃ］ピリミジン、例えば：

ｉｉ）３ａ，６−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｄ］ピラゾール［３，４−ｂ］ピリジン、例えば：

ｉｉｉ）５ａ，６−ジヒドロ−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール［３，４−ｂ］プリン、例えば：

ｉ．Ｒユニット
Ｒユニットの第一のカテゴリーは、Ｒが、水素原子を一つ以上置換することができる置換型、または非置換型のアリール環である化合物に関する。アリールＲユニットの第一の態様は、以下の化学式を有する置換型または非置換型のフェニル環に関する：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１〜５個の置換があることを表す。

この態様の一つの実施態様は、Ｒが非置換フェニル環である化合物に関する。以下は、本実施態様の非限定的な例である。

この態様の別の実施態様は、Ｒが置換フェニル環であって、置換が以下のものから選択される化合物に関する：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

本実施態様の一つの反復態様は、Ｒがモノ置換フェニル環であって、その非限定的な例が以下のものを含む化合物に関する：２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−ブロモフェニル、４−ブロモフェニル、２−ヨードフェニル、３−ヨードフェニル、４−ヨードフェニル、２−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシフェニル、４−ヒドロキシフェニル、２−メトキシフェニル、２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、２−アミノフェニル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、２−（メチルアミノ）フェニル、３−（メチルアミノ）フェニル、４−（メチルアミノ）フェニル、２−（ジメチルアミノ）フェニル、３−（ジメチルアミノ）フェニル、４−（ジメチルアミノ）フェニル、２−ニトロフェニル、３−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、２−シアノフェニル、３−シアノフェニル、および４−シアノフェニル。

本実施態様の別の反復態様は、Ｒがモノ置換フェニル環であって、その非限定的な例が以下のものを含む化合物に関する：２，３−ジフルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、２，５−ジフルオロフェニル、２，６−ジフルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、３，５−ジフルオロフェニル、２，３−ジクロロフェニル、２，４−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３，５−ジクロロフェニル、２，３−ジブロモフェニル、２，４−ジブロモフェニル、２，５−ジブロモフェニル、２，６−ジブロモフェニル、３，４−ジブロモフェニル、３，５−ジブロモフェニル、２，３−ジヒドロキシフェニル、２，４−ジヒドロキシフェニル、２，５−ジヒドロキシフェニル、２，６−ジヒドロキシフェニル、３，４−ジヒドロキシフェニル、３，５−ジヒドロキシフェニル、２，３−ジメトキシフェニル、２，４−ジメトキシフェニル、２，５−ジメトキシフェニル、２，６−ジメトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、２，３−ジアミノフェニル、２，４−ジアミノフェニル、２，５−ジアミノフェニル、２，６−ジアミノフェニル、３，４−ジアミノフェニル、および３，５−ジアミノフェニル。

本カテゴリーの別の態様は、以下の化学式を有する置換型および非置換型のナフタレン環に関する：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１〜７個の置換があることを表している。

本態様の一つの実施態様は、Ｒが非置換ナフタレン環である化合物に関する。以下は、本実施態様の非限定的な例である。

本態様の別の実施態様は、Ｒが置換ナフタレン環であって、該置換が以下のものから選択される化合物に関する：
ｉｘ）ハロゲン；
ｘ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｘｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｘｉｉ）アミノ；
ｘｉｉｉ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｘｉｖ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｘｖ）ニトロ；および
ｘｖｉ）シアノ。

本実施態様の一つの反復態様は、Ｒがモノ置換ナフタレン−１−イル環であって、その非限定的な例が以下のものを含む化合物に関する：２−フルオロナフタレン−１−イル、３−フルオロナフタレン−１−イル、４−フルオロナフタレン−１−イル、５−フルオロナフタレン−１−イル、６−フルオロナフタレン−１−イル、７−フルオロナフタレン−１−イル、８−フルオロナフタレン−１−イル、２−クロロナフタレン−１−イル、３−クロロナフタレン−１−イル、４−クロロナフタレン−１−イル、５−クロロナフタレン−１−イル、６−クロロナフタレン−１−イル、７−クロロナフタレン−１−イル、８−クロロナフタレン−１−イル、２−ブロモナフタレン−１−イル、３−ブロモナフタレン−１−イル、４−ブロモナフタレン−１−イル、５−ブロモナフタレン−１−イル、６−ブロモナフタレン−１−イル、７−ブロモナフタレン−１−イル、８−ブロモナフタレン−１−イル、２−メチルナフタレン−１−イル、３−メチルナフタレン−１−イル、４−メチルナフタレン−１−イル、５−メチルナフタレン−１−イル、６−メチルナフタレン−１−イル、７−メチル−ナフタレン−１−イル、８−メチルナフタレン−１−イル、２−メトキシナフタレン−１−イル、３−メトキシナフタレン−１−イル、４−メトキシナフタレン−１−イル、５−メトキシナフタレン−１−イル、６−メトキシナフタレン−１−イル、７−メトキシナフタレン−１−イル、８−メトキシナフタレン−１−イル、２−シアノナフタレン−１−イル、３−シアノナフタレン−１−イル、４−シアノナフタレン−１−イル、５−シアノナフタレン−１−イル、６−シアノナフタレン−１−イル、７−シアノナフタレン−１−イル、８−シアノナフタレン−１−イル、２−ニトロナフタレン−１−イル、３−ニトロナフタレン−１−イル、４−ニトロナフタレン−１−イル、５−ニトロナフタレン−１−イル、６−ニトロナフタレン−１−イル、７−ニトロナフタレン−１−イル、および８−ニトロナフタレン−１−イル。

本実施態様の別の反復態様は、Ｒがモノ置換ナフタレン−２−イル環であって、その非限定的な例が以下のものを含む化合物に関する：１−フルオロナフタレン−２−イル、３−フルオロナフタレン−２−イル、４−フルオロナフタレン−２−イル、５−フルオロナフタレン−２−イル、６−フルオロ−ナフタレン−２−イル、７−フルオロナフタレン−２−イル、８−フルオロナフタレン−２−イル、１−クロロナフタレン−２−イル、３−クロロナフタレン−２−イル、４−クロロナフタレン−２−イル、５−クロロナフタレン−２−イル、６−クロロナフタレン−２−イル、７−クロロナフタレン−２−イル、８−クロロナフタレン−２−イル、１−ブロモナフタレン−２−イル、３−ブロモナフタレン−２−イル、４−ブロモナフタレン−２−イル、５−ブロモナフタレン−２−イル、６−ブロモナフタレン−２−イル、７−ブロモナフタレン−２−イル、８−ブロモナフタレン−２−イル、１−メチルナフタレン−２−イル、３−メチルナフタレン−２−イル、４−メチルナフタレン−２−イル、５−メチルナフタレン−２−イル、６−メチルナフタレン−２−イル、７−メチルナフタレン−２−イル、８−メチルナフタレン−２−イル、１−メトキシナフタレン−２−イル、３−メトキシ−ナフタレン−２−イル、４−メトキシナフタレン−２−イル、５−メトキシナフタレン−２−イル、６−メトキシナフタレン−２−イル、７−メトキシナフタレン−２−イル、８−メトキシナフタレン−２−イル、１−シアノナフタレン−２−イル、３−シアノ−ナフタレン−２−イル、４−シアノナフタレン−２−イル、５−シアノナフタレン−２−イル、６−シアノナフタレン−２−イル、７−シアノナフタレン−２−イル、８−シアノナフタレン−２−イル、１−ニトロナフタレン−２−イル、３−ニトロナフタレン−２−イル、４−ニトロナフタレン−２−イル、５−ニトロナフタレン−２−イル、６−ニトロナフタレン−２−イル、７−ニトロナフタレン−２−イル、および８−ニトロナフタレン−２−イル。

Ｒユニットの別のカテゴリーは、水素であるＲユニットに関する。このカテゴリーの非限定的な例には、以下のものが含まれる：

Ｒユニットの更なるカテゴリーは、置換型または非置換型のヘテロアリール環であるＲユニットに関する。一つの実施態様は、置換型または非置換型の５員のヘテロアリール環または複素環に関する。本実施態様の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）以下の化学式を有するピロリジニル環；

ｉｉ）以下の化学式を有するピロリル環；

ｉｉｉ）以下の化学式を有する４，５−ジヒドロイミダゾリル環；

ｉｖ）以下の化学式を有するピラゾリル環；

ｖ）以下の化学式を有するイミダゾリル環；

ｖｉ）以下の化学式を有する［１，２，３］トリアゾリル環；

ｖｉｉ）以下の化学式を有する［１，２，４］トリアゾリル環；

ｖｉｉｉ）以下の化学式を有するテトラゾリル環；

ｉｘ）以下の化学式を有する［１，３，４］オキサジアゾリル環または［１，２，４］オキサジアゾリル環；

ｘ）以下の化学式を有するピロリジノニル環；

ｘｉ）以下の化学式を有するイミダゾリジノリル環；

ｘｉｉ）以下の化学式を有するイミダゾール２−オンイル（ｏｎｌｙ）環；

ｘｉｉｉ）以下の化学式を有するオキサゾリル環；

ｘｉｖ）以下の化学式を有するイソオキサゾリル環；

ｘｖ）以下の化学式を有するチアゾリル環；

ｘｖｉ）以下の化学式を有するフラニル環；

ｘｖｉｉ）以下の化学式を有するチオフェニル；

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１〜３個の置換があることを表している。水素に対する置換の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

本カテゴリーの非限定的な例には、以下のものが含まれる：

別の実施態様は、置換型または非置換型の６員のヘテロアリール環または複素環式環に関する。本実施態様の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）以下の化学式を有するモルホリニル環：

ｉｉ）以下の化学式を有するピペリジニル環：

ｉｉｉ）以下の化学式を有するピリジニル環：

ｉｖ）以下の化学式を有するピリミジニル環：

ｖ）以下の化学式を有するピペラジニル環：

ｖｉ）以下の化学式を有するトリアジニル環：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１〜５個の置換があることを表している。水素に対する置換の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

Ｒユニットの別のカテゴリーは、置換型または非置換型のＣ_７複素環式縮合環、Ｃ_８複素環式縮合環、もしくはＣ_９複素環式縮合環、またはＣ_７ヘテロアリール縮合環、Ｃ_８ヘテロアリール縮合環、もしくはＣ_９ヘテロアリール縮合環であって、その非限定的な例が、以下のものから独立して選択することができるものに関する：
ｉ）以下の化学式を有するベンゾイミダゾリル環：

ｉｉ）以下の化学式を有するベンゾチアゾリル環：

ｉｉｉ）以下の化学式を有するベンゾオキサゾリル環：

ｉｖ）以下の化学式を有するキナゾリニル環：

ｖ）以下の化学式を有する２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシニル環：

；および
ｖｉ）以下の化学式を有するテトラヒドロキノリニル環：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１個以上の置換があることを表している。水素に対する置換の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

このカテゴリーの非限定的な例には、次のものが含まれる：

ｉｉ．Ｒ^１ユニット
Ｒ^１ユニットの第一のカテゴリーは、Ｒ^１が置換型または非置換型のアリール環であって、水素原子について１個以上の置換を有していてもよい化合物に関する。アリールＲユニットの第一の態様は、以下の化学式を有する置換型または非置換型のフェニル環に関する：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１〜５個の置換があることを表している。

本態様の一つの実施態様は、Ｒ^１が非置換フェニル環である化合物に関する。以下は、本実施態様の非限定的な例である：

本態様の別の実施態様は、Ｒ^１が置換フェニル環であって、該置換が以下のものから選択される化合物に関する：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

本実施態様の一つの反復態様は、Ｒ^１がモノ置換フェニル環であって、その非限定的な例が以下のものを含む化合物に関する：２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−ブロモフェニル、４−ブロモフェニル、２−ヨードフェニル、３−ヨードフェニル、４−ヨードフェニル、２−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシフェニル、４−ヒドロキシフェニル、２−メトキシフェニル、２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、２−アミノフェニル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、２−（メチルアミノ）フェニル、３−（メチルアミノ）フェニル、４−（メチルアミノ）フェニル、２−（ジメチルアミノ）フェニル、３−（ジメチルアミノ）フェニル、４−（ジメチルアミノ）フェニル、２−ニトロフェニル、３−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、２−シアノフェニル、３−シアノフェニル、および４−シアノフェニル。

本実施態様の別の反復態様は、Ｒ^１がモノ置換フェニル環であって、その非限定的な例が以下のものを含む化合物に関する：２，３−ジフルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニル、２，５−ジフルオロフェニル、２，６−ジフルオロフェニル、３，４−ジフルオロフェニル、３，５−ジフルオロフェニル、２，３−ジクロロフェニル、２，４−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、３，５−ジクロロフェニル、２，３−ジブロモフェニル、２，４−ジブロモフェニル、２，５−ジブロモフェニル、２，６−ジブロモフェニル、３，４−ジブロモフェニル、３，５−ジブロモフェニル、２，３−ジヒドロキシフェニル、２，４−ジヒドロキシフェニル、２，５−ジヒドロキシフェニル、２，６−ジヒドロキシフェニル、３，４−ジヒドロキシフェニル、３，５−ジヒドロキシフェニル、２，３−ジメトキシフェニル、２，４−ジメトキシフェニル、２，５−ジメトキシフェニル、２，６−ジメトキシフェニル、３，４−ジメトキシフェニル、３，５−ジメトキシフェニル、２，３−ジアミノフェニル、２，４−ジアミノフェニル、２，５−ジアミノフェニル、２，６−ジアミノフェニル、３，４−ジアミノフェニル、および３，５−ジアミノフェニル。

本実施態様の非限定的な例には、以下のものが含まれる：

Ｒ^１ユニットの更なるカテゴリーは、置換型または非置換型のヘテロアリール環であるＲ^１ユニットに関する。一つの実施態様は、置換型または非置換型の５員のヘテロアリール環または複素環式環に関する。本実施態様の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）以下の化学式を有するピロリジニル環：

ｉｉ）以下の化学式を有するピロリル環：

ｉｉｉ）以下の化学式を有する４，５−ジヒドロイミダゾリル環：

ｉｖ）以下の化学式を有するピラゾリル環：

ｖ）以下の化学式を有するイミダゾリル環：

ｖｉ）以下の化学式を有する［１，２，３］トリアゾリル環：

ｖｉｉ）以下の化学式を有する［１，２，４］トリアゾリル環：

ｖｉｉｉ）以下の化学式を有するテトラゾリル環：

ｉｘ）以下の化学式を有する［１，３，４］オキサジアゾリル環または［１，２，４］オキサジアゾリル環：

ｘ）以下の化学式を有するピロリジノニル環：

ｘｉ）以下の化学式を有するイミダゾリジノニル環：

ｘｉｉ）以下の化学式を有するイミダゾール２−オンイル環：

ｘｉｉｉ）以下の化学式を有するオキサゾリル環：

ｘｉｖ）以下の化学式を有するイソオキサゾリル環：

ｘｖ）以下の化学式を有するチアゾリル環：

ｘｖｉ）以下の化学式を有するフラニル環：

ｘｖｉｉ）以下の化学式を有するチオフェニル：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１〜３個の置換があることを表している。水素に対する置換の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

本カテゴリーの非限定的な例には、以下のものが含まれる：

別の実施態様は、置換型または非置換型の６員のヘテロアリール環または複素環式環に関する。本実施態様の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）以下の化学式を有するモルホリニル環：

ｉｉ）以下の化学式を有するピペリジニル環：

ｉｉｉ）以下の化学式を有するピリジニル環：

ｉｖ）以下の化学式を有するピリミジニル環：

ｖ）以下の化学式を有するピペラジニル環：

；および
ｖｉ）以下の化学式を有するトリアジニル環：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１〜５個の置換があることを表している。水素に対する置換の非限定的な例には、以下のものが含まれる：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

本カテゴリーの非限定的な例には、以下のものが含まれる：

Ｒ^１ユニットの別のカテゴリーは、置換型または非置換型のＣ_７複素環式縮合環、Ｃ_８複素環式縮合環、もしくはＣ_９複素環式縮合環、またはＣ_７ヘテロアリール縮合環、Ｃ_８ヘテロアリール縮合環、もしくはＣ_９ヘテロアリール縮合環であって、その非限定的な例が、以下のものから独立して選択することができるものに関する：
ｉ）以下の化学式を有するベンゾイミダゾリル環：

ｉｉ）以下の化学式を有するベンゾチアゾリル環：

ｉｉｉ）以下の化学式を有するベンゾオキサゾリル環：

ｉｖ）以下の化学式を有するキナゾリニル環：

ｖ）以下の化学式を有する２，３−ジヒドロベンゾ［１，４］ジオキシニル環：

；および
ｖｉ）以下の化学式を有するテトラヒドロキノリニル環：

ただし、式中、Ｒ^ａは、水素に対して１個以上の置換があることを表している。水素に対する置換の非限定的な例には、以下のものなどが含まれる：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｉｖ）アミノ；
ｖ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｖｉｉ）ニトロ；および
ｖｉｉｉ）シアノ。

Ｒ^１ユニットのなお更なるカテゴリーは、以下のものから選択されるＲ^１ユニットに関する：
ｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＯＨ；
ｉｖ）−ＯＨ；または
ｖ）−ＮＨ_２。

本カテゴリーの非限定的な例には、以下のものが含まれる：

ｉｉｉ．Ｒ^２ユニット
Ｒ^２ユニットの一つのカテゴリーは、ＲおよびＲ^２またはＲ^１およびＲ^２が一緒になって、一つ以上の５員もしくは６員の置換型もしくは非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型もしくは非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む５員もしくは６員のヘテロアリール縮合環、または窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む、置換型もしくは非置換型の５員、６員、もしくは７員の複素環式縮合環を含むＡ環を形成することができる化合物に関する。

本カテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有する環系を一緒になって形成するＲおよびＲ^２ユニットに関する：

ただし、式中、Ｒ^１、Ｌ^１、および指数ｎは、上記で定義されたものと同じである。本実施態様の一つの反復態様は、Ａ環が、置換型または非置換型のシクロアルキル環であって、さらに二重結合を含むことができる環系に関する。非限定的な例には、以下のものが含まれる：

本実施態様の別の反復態様は、Ａ環が置換型または非置換型のアリール環である環系に関する。非限定的な例には、以下のものが含まれる：

本実施態様の更なる反復態様は、Ａ環が置換型または非置換型のヘテロアリール環または複素環式環である環系に関する。非限定的な例には、以下のものが含まれる：

別のカテゴリーは、一緒になって以下の化学式を有する環系を形成するＲ^１およびＲ^２またはＲおよびＲ^２のユニットに関する：

ただし、式中、Ｒ、Ｒ^１、Ｌ、Ｌ^１、および指数ｍおよびｎは、本明細書においてさらに定義される。Ａ環は、置換型または非置換型のシクロアルキル環、アリール環、複素環式環、またはヘテロアリール環である。本カテゴリーの非限定的な例には、以下のものが含まれる：

ｉｖ．Ｌユニット
Ｌユニットは、Ｒユニットを、本明細書に開示された窒素含有環に結合させることができる結合ユニットである。Ｌユニットは、ＲおよびＲ^２ユニットが一緒になって、一つ以上の５員もしくは６員の置換型もしくは非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型もしくは非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む５員もしくは６員のヘテロアリール縮合環、または窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む、置換型もしくは非置換型の５員、６員、もしくは７員の複素環式縮合環を含むＡ環を形成している環形成の一部でもあってもよい。

Ｌユニットは、以下の化学式を有する：
−［Ｒ^５］_ｚ［Ｃ（Ｒ^３ａＲ^３ｂ）］_ｘ［Ｒ^５］_ｚ［Ｃ（Ｒ^４ａＲ^４ｂ）］_ｙ［Ｒ^５］_ｚ−
ただし、式中、各Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、およびＲ^４ｂは、それぞれ独立して、以下のものから選択される：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；
ｉｉｉ）フェニル；
ｉｖ）ヒドロキシル；または
ｖ）シアノ；
ｖｉ）または２個の隣接したＲ^３ａユニットまたは２個の隣接したＲ^３ｂユニットが一緒になって二重結合を形成することができ；
指数ｘは０〜６の整数、指数ｙは０〜６の整数である。

Ｒ^５は、それぞれ独立して、以下のものから選択される結合ユニットである。
ｉ）−ＮＲ^６−；
ｉｉ）−ＮＲ^６Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^６−；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉｉｉ）−ＮＨ（＝ＮＨ^６）ＮＨ−；
ｉｘ）−Ｏ−；
ｘ）−Ｓ−；またはｘｉ）−ＣＲ^６＝ＣＲ^６−；
ただし、Ｒ^６は、水素またはメチルから選択される。指数ｚが０に等しいとき、特定のＲ^５ ユニットは存在せず、ｚが１に等しければ、特定のＲ^５ ユニットが存在する。

Ｌユニットの一つのカテゴリーは、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−［ＣＨ_２）］_ｘ−
ただし、式中、指数ｘは１〜６である。このカテゴリーの例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｖ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｖ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｖｉ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−。

Ｌユニットの別のカテゴリーは、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−［Ｒ^５］［Ｃ（Ｒ^３ａＲ^３ｂ）］_ｘ［Ｒ^５］−
ただし、式中、Ｒ^３ａおよびＲ^３ｂは、それぞれ独立して、水素またはメチルであり、Ｒ^５は、以下のものから選択される：
ｉ）−ＮＲ^６Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^６−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉ）−Ｏ−；または
ｖｉｉ）−Ｓ−。

本カテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２］］_ｘＮＨＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−。

本カテゴリーの別の実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＣ（Ｏ）ＮＨ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−。

本カテゴリーの更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｏ［ＣＨ_２）］_ｘＮＨＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−。

本カテゴリーのなお更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−。
本カテゴリーのなお一層更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｏ［ＣＨ_２）］_ｘＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−。

Ｌユニットの更なるカテゴリーは、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−［Ｒ^５］［Ｃ（Ｒ^３ａＲ^３ｂ）］_ｘ［Ｒ^５］［Ｃ（Ｒ^４ａＲ^４ｂ）］_ｙ［Ｒ^５］_ｚ−
ただし、式中、Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、およびＲ^４ｂは、それぞれ独立して、水素またはメチルであり、かつ、Ｒ^５は、以下のものから選択され：
ｉ）−ＮＲ^６Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^６−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉ）−Ｏ−；または
ｖｉｉ）−Ｓ−；
かつ、指数Ｚは０または１である。

本カテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｙ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−。

本カテゴリーの別の実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｙ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−。

本カテゴリーの更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｙ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−。

本カテゴリーのなお更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｙＳ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ−；
ｖｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２Ｓ−；
ｖｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ−；および
ｖｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ−。

本カテゴリーのさらに別の実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｙＯ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−；
ｖｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−；および
ｖｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−。

本カテゴリーのなお一層更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｘＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｙＯ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨＯ_２−；
ｖｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−；および
ｖｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−。

ｖ．Ｌ^１ユニット
Ｌ^１ユニットは、Ｒユニットを、本明細書に開示された窒素含有環に結合させることができる結合ユニットである。Ｌ^１ユニットは、Ｒ^１およびＲ^２ユニットが一緒になって、一つ以上の５員もしくは６員の置換型もしくは非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型もしくは非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む５員もしくは６員のヘテロアリール縮合環、または窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む、置換型もしくは非置換型の５員、６員、もしくは７員の複素環式縮合環を含むＡ環を形成している環形成の一部でもあってもよい。

Ｌ^１ユニットは、以下の化学式を有する：
−［Ｒ^９］_ｒ［Ｃ（Ｒ^７ａＲ^７ｂ）］_ｐ［Ｒ^９］_ｒ［Ｃ（Ｒ^８ａＲ^８ｂ）］_ｑ［Ｒ^９］_ｒ−
ただし、式中、Ｒ^７ａ、Ｒ^７ｂ、Ｒ^８ａ、およびＲ^８ｂは、それぞれ独立して、以下のものから選択される：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状もしくは分枝状のアルキル；
ｉｉｉ）フェニル；
ｉｖ）ヒドロキシル；または
ｖ）シアノ；
ｖｉ）あるいは、２個の隣接したＲ^７ａユニットまたは２個の隣接したＲ^７ｂユニットは一緒になって二重結合を形成することができ、指数ｐは０〜６の整数、および指数ｑは０〜６の整数である。

Ｒ^９は、それぞれ独立して、以下のものから選択される結合ユニットであるが、
ｉ）−ＮＲ^１０−；
ｉｉ）−ＮＲ^１０Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１０−；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉｉｉ）−ＮＨ（＝ＮＲ^１０）ＮＨ−；
ｉｘ）−Ｏ−；
ｘ）−Ｓ−；または
ｘｉ）−ＣＲ^１０＝ＣＲ^１０−；
ただし、Ｒ^１０は水素またはメチルから選択される。指数ｒが０に等しいとき、特定のＲ^９ ユニットは存在せず、ｚが１に等しければ、特定のＲ^９ ユニットが存在する。

Ｌユニットの一つのカテゴリーは、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−［ＣＨ _２ ）］_ｐ−
ただし、式中、指数ｐは１〜６である。このカテゴリーの例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｖ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｖ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｖｉ）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−。

Ｌユニットの別のカテゴリーは、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−［Ｒ^９］［Ｃ（Ｒ^７ａＲ^７ｂ）］_ｐ［Ｒ^９］−
ただし、式中、Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂは、それぞれ独立して、水素またはメチルであり、Ｒ^９は、以下のものから選択される：
ｉ）−ＮＲ^６Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^６−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉ）−Ｏ−；または
ｖｉｉ）−Ｓ−。

本カテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＮＨＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−。

本カテゴリーの別の実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＣ（Ｏ）ＮＨ−ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−。

本カテゴリーの更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｏ［ＣＨ_２）］_ｐＮＨＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）−。

本カテゴリーのなお更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−。

本カテゴリーのなお一層更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｏ［ＣＨ_２）］_ｐＣ（Ｏ）−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉｉ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−；および
ｉｖ）−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）−。

Ｌユニットの更なるカテゴリーは、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−［Ｒ^９］［Ｃ（Ｒ^７ａＲ^７ｂ）］_ｐ［Ｒ^９］［Ｃ（Ｒ^８ａＲ^８ｂ）］_ｑ［Ｒ^９］_ｒ−
ただし、式中、Ｒ^７ａおよびＲ^７ｂ、Ｒ^８ａ、Ｒ^８ｂは、それぞれ独立して、水素またはメチルであり、Ｒ^９は、以下のものから選択され：
ｉ）−ＮＲ^６Ｃ（Ｏ）−；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^６−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
ｖｉ）−Ｏ−；または
ｖｉｉ）−Ｓ−；
かつ、指数ｒは０または１である。

本カテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｑ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−。

本カテゴリーの別の実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｑ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−。

本カテゴリーの更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｑ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２−。

本カテゴリーのなお更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｑＳ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２Ｓ−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｓ−。

このカテゴリーのさらに別の実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｑＯ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｏ−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−。

このカテゴリーのなお一層更なる実施態様は、以下の化学式を有する結合ユニットに関する：
−Ｓ［ＣＨ_２）］_ｐＮＨＣ（Ｏ）［ＣＨ_２）］_ｑＯ−
ただし、式中、ｘは２〜６である。本実施態様の例には、以下のものが含まれる：
ｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨＯ_２−；
ｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２Ｏ−；
ｉｉｉ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−；および
ｉｖ）−ＳＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ−。

組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子の一つのカテゴリーは、以下の化学式を有するピラゾール類に関する：

ただし、式中のＲ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｌ、Ｌ^１、ｍ、およびｎは、上記に定義されている。

このカテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有するピラゾール類に関する：

ただし、式中、Ｒは、置換型または非置換型のアリールまたはヘテロアリール；Ｒ^１は、水素、−ＮＨ_２、−ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３、または−Ｃ（Ｏ）ＯＨから選択される。本実施態様の非限定的な例には、以下のものが含まれる：

本実施態様の更なる非限定的な例には、３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−オール、３−（３−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、メチル３−（３−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート、３−（３−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン、３−（３−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、メチル３−（３−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート、３−（１Ｈ−ピロール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、メチル３−（１Ｈ−ピロール２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート、３−（１Ｈ−ピロール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン、３−（１Ｈ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、メチル３−（１Ｈ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート、３−（１Ｈ−フラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン、３−（１Ｈ−ピロール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、メチル３−（１Ｈ−ピロール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート、３−（１Ｈ−ピロール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミン、３−（１Ｈ−フラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、メチル３−（１Ｈ−フラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート、および３−（１Ｈ−フラン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−アミンなどが含まれる。

以下の表は、本実施態様に係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

本カテゴリーの別の実施態様は、以下の化学式を有するピラゾール類に関する：

ただし、式中、ＲおよびＲ^２は一緒になって、一つ以上の５員もしくは６員の置換型もしくは非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型もしくは非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む５員もしくは６員のヘテロアリール縮合環、または窒素、酸素、および硫黄から選択される一つ以上の原子を含む５員型、６員、もしくは７員の置換型もしくは非置換型の複素環式縮合環を含むＡ環を形成している。

本実施態様の一つの反復態様は、Ａ環が置換型または非置換型のシクロアルキル環であり、かつＲ^１、Ｌ^１、および指数ｎが上記で定義されたものと同じである化合物に関する。本反復態様の非限定的な例には、以下の化学式を有する化合物が含まれる：

本実施態様の別の反復態様は、Ａ環が置換型または非置換型の複素環であり、かつＲ^１、Ｌ^１、および指数ｎが上記で定義されたものと同じである化合物に関する。本反復態様の非限定的な例には、以下の化学式を有する化合物が含まれる：

本実施態様の更なる反復態様は、Ａ環が置換型または非置換型のアリール環であり、かつＲ^１、Ｌ^１、および指数ｎが上記で定義されたものと同じである化合物に関する。本反復態様の非限定的な例には、以下の化学式を有する化合物が含まれる：

本実施態様のなお更なる反復態様は、Ａ環が置換型または非置換型のシクロアルキル環と置換型または非置換型のアリール環とを組み合わせたものであり、かつＲ^１、Ｌ^１、および指数ｎが上記で定義されたものと同じである化合物に関する。本反復態様の非限定的な例には、以下の化学式を有する化合物が含まれる：

以下の表は、本実施態様に係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子の別のカテゴリーは、以下の化学式を有する［１，２，４］トリアゾール類に関する：

本カテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有する化合物に関する：

ただし、式中、Ｒは置換型または非置換型のフェニルであり；
Ｒ^１は置換型または非置換型のヘテロアリールであり；
Ｒ^９は、それぞれ独立して、以下のものから選択され：
ｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）−；
ＩＩ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉ）−ＮＨ（＝ＮＲ^１０）ＮＨ−；または
ｖｉｉ）−Ｏ−；
指数ｐは１〜３であり；指数ｑは１〜３であり；および、指数ｒは、１または０である。以下は、本実施態様の非限定的な例である：

以下の表は、本実施態様に係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

本カテゴリーの別の実施態様は、以下の化学式を有する化合物に関する：

ただし、式中、Ｒ^１は：
ｉｘ）置換型または非置換型のアリール；または
ｘ）置換型または非置換型のヘテロアリールであり；
Ｒ^２は水素またはメチルであり；
Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、およびＲ^４ｂは、それぞれ独立して、以下のものから選択され：
ｉ）水素；
ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；
ｉｉｉ）フェニル；
ｉｖ）ヒドロキシル；もしくは
ｖ）シアノ；
ｖｉ）または２個の隣接したＲ^３ａユニットもしくは２個の隣接したＲ^３ｂユニットが一緒になって二重結合を形成することができ；
Ｒ^９は、それぞれ独立して、以下のものから選択され：
ｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）−；
ｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）−；
ｉｖ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
ｖｉ）−ＮＨ（＝ＮＲ^１０）ＮＨ−；または
ｖｉｉ）−Ｏ−；
指数ｐが１〜３であり；指数ｑが１〜３であり；指数ｒが１または０である。
以下は、本実施態様の非限定的な例である：

以下の表は、本実施態様に係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

本明細書に開示された化合物のなお更なるカテゴリーは、以下の化学式を有するイミダゾ−ル類に関する：

ただし、式中、Ａは、一つ以上のシクロアルキル環、複素環式環、またはヘテロアリール環を含む環であり、Ｒ、Ｒ^１、Ｌ、Ｌ^１、および指数ｍおよびｎは、上記に定義されている。

以下の表は、本開示に係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のなお一層更なるカテゴリーは、以下の化学式を有するアリールスルホンアミド類に関する：

ただし、式中、Ｃは、置換または非置換Ｃ_６またはＣ_１０アリール環であり；Ｄは、置換型または非置換型のＣ_５〜Ｃ_９へテロアリール環であり；さらに該置換が、それぞれ独立して、以下のものから選択される：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）ヒドロキシ；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｖ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｖ）置換型または非置換型の複素環；
ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉ）置換型または非置換型のアリール；
ｖｉｉｉ）アミノ；
ｉｘ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｘ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｘｉ）ニトロ；および
ｘｉｉ）シアノ。

本カテゴリーの一つの実施態様は、以下の化学式を有する化合物に関する：

ただし、式中、Ａ^１、Ａ^２、Ａ^３、Ａ^４、およびＡ^５は、それぞれ独立して、−ＣＨ−または−Ｎ−を表し；Ｒ^ｃは、水素に対する１〜５個の任意に存在する置換を表し、Ｒ^ｄは、水素に対する１〜４個の任意に存在する置換を表す。本実施態様に係る化合物の非限定的な例は、以下の化学式を有する：

本カテゴリーの更なる実施態様は、以下の化学式を有する化合物に関する：

ただし、式中、Ａ^１、Ａ^２、Ａ^３、Ａ^４、Ａ^５、Ａ^６、およびＡ^７は、それぞれ独立して、−ＣＨ−または−Ｎ−を表す；Ｒ^ｃは、水素に対する１〜５個の任意に存在する置換を表し、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅは、水素に対する１〜４個の任意に存在する置換を表す。本実施態様に係る化合物の非限定的な例には、以下の化学式を有する２−ジメトキシ−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼン−スルホンアミドが含まれる：

このカテゴリーの組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子の別の実施態様は、以下の化学式を有するアリールスルホンアミド類に関する：

ただし、式中、Ｃは、置換または非置換Ｃ_６またはＣ_１０アリール環であり；Ｄは、置換型または非置換型のアリール環であり；さらに該置換は、それぞれ独立して、以下のものから選択される：
ｉ）ハロゲン；
ｉｉ）ヒドロキシ；
ｉｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル；
ｉｖ）Ｃ_１〜Ｃ_４アルコキシ；
ｖ）置換型または非置換型の複素環；
ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
ｖｉｉ）置換型または非置換型のアリール；
ｖｉｉｉ）アミノ；
ｉｘ）モノ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｘ）ジ−Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルアミノ；
ｘｉ）ニトロ；および
ｘｉｉ）シアノ。

本実施態様の非限定的な例には、以下の化学式を有するＮ−［３−１Ｈ−１，２，４，−トリアゾール−３−イルチオ）−４−ヒドロキシフェニル）−２，５−ジメチオキシベンゼンスルホンアミドなどがある：

以下の表は、本実施態様に係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のなお更なるカテゴリーは、以下の化学式を有する連結型（ｔｅｔｈｅｒｅｄ）アリールビスホスホン酸に関する：

ただし、式中、Ｌ^８は、２〜２０個の炭素原子および１〜１０個の酸素原子を有するポリアルキレン結合ユニットまたはポリアルキレンオキシ結合ユニットを表す。このカテゴリーの非限定的な例には、以下の化学式を有する２，２’−［２，２’−オキシビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（オキシ）］ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸および２，２’−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸などがある：

以下の表は、本カテゴリーに係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のなお一層更なるカテゴリーは、以下の化学式を有する化合物、例えば、４−｛２−［２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ］−４−オキソキナゾリン−３（４Ｈ）−イル｝−Ｎ−［（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル］ブタンアミド：

および、以下の化学式を有する（Ｅ）−２−シアノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（３−フェニルプロピル）アクリルアミドに関する：

以下の表は、本カテゴリーに係るさまざまな組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子のＩＣ_５０値の例を示したものである。

本明細書に開示されているのは、開示された組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子を含む組成物である。そのため、該組成物は、有効量の一種類以上の組織非特異的アルカリホスファターゼ阻害因子、および薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤を含む。

２．投薬形態
ｉ．プロドラッグ
本明細書に開示されているように、プロドラッグは、当技術分野において知られている方法（例えば、化合物または薬物に存在する官能基を修飾し、日常的な操作またはインビボで該修飾が切断されて親化合物になるようにすること）によって調製することができる。プロドラッグには、プロドラッグが対象に投与されると、遊離型のカルボニル基、カルボン酸基、ヒドロキシ基、またはアミノ基が生成されるよう切断する任意の基に、カルボニル基、カルボン酸基、ヒドロキシ基、またはアミノ基を結合させることができる、本明細書に開示された化合物が含まれる。プロドラッグの例には、アルコールの酢酸誘導体、ギ酸誘導体、および／または安息香酸誘導体、ならびにアミン官能基を含む化合物があるが、これらに限定されない。

プロドラッグには、既知のヒドロキシル誘導体およびアミノ誘導体、例えば、親ヒドロキシル化合物を適当なカルボン酸と反応させて調製されるエステル、または親アミノ化合物を適当なカルボン酸と反応させて調製されるアミドなどがある。用いられる化合物の上またはその内部で垂れ下がったヒドロキシル基から得られる単純な脂肪族エステルまたは芳香族エステルが適当なプロドラッグである。いくつかの態様において、（アシロキシ）アルキルエステルまたは（（アルコキシカルボニル）オキシ）アルキルエステルのような二重エステル型プロドラッグを調製するのが適当であることもある。プロドラッグとして適当な具体的なエステルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、モルホリノエチルなどを含む。

薬物およびプロドラッグの加水分解に関与する代謝反応および酵素反応の総説は、“Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ ａｎｄ Ｐｒｏ−ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ａｎｄ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ”（２００３）に記載されており、本文献は、参照されて本明細書に組み込まれる。本明細書に開示されているようなプロドラッグを設計するのに役立つ別の参考文献には、例えば、“Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇｓ”（１９８８）；“Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｂｉｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｇｅｎｔ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｔｈｒｏｕｇｈ Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ ａｎｄ Ａｎａｌｏｇｓ”（１９７７）；“Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ： Ｔｏｐｉｃａｌ ａｎｄ Ｏｃｕｌａｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ”（１９９２）；“Ｅｎｚｙｍｅ−Ｐｒｏ−ｄｒｕｇ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ”（１９９９）；“Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ”（１９８６）；“Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ”（１９９１）；“Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ Ｎｏｎ−Ｔｏｘｉｃ Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ ｔｏ Ａｃｔｉｖｅ，Ａｎｔｉ−Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ Ｄｒｕｇｓ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ”（２０００）；および“Ｍａｒｉｎｅ ｌｉｐｉｄｓ ｆｏｒ ｐｒｏｄｒｕｇｓ，ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ａｎｄ ｏｔｈｅｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｇｅｎｔ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”（２０００）などがある。

本明細書に開示されているように、プロドラッグは、加溶媒分解によるか、または生理的条件下で、化学的または代謝的に切断されて生物活性化合物を生じさせることができる任意の適当な官能基を含むことができる。適当な官能基は、例えば、カルボン酸エステル、カルボン酸アミド、およびカルボン酸チオエステルなどである。生物活性化合物の反応性官能基に応じて、適当なリンカー前駆体の対応する官能基を選択して、プロドラッグの中に、例えば、エステル結合、チオエステル結合、またはアミド結合を生じさせることができる。

３．担体
開示されているＴＮＡＰ阻害因子を、担体およびその他の組成物と混合、結合、または共役させて、該阻害因子の投与、送達、またはその他の態様、およびそれらの使用を補助することができる。便宜上、このような組成物を、本明細書においては担体と呼ぶことにする。担体は、例えば、低分子、調合薬、脂肪酸、検出可能なマーカー、結合タグ、ナノ粒子、または酵素であってもよい。

開示されている組成物を、薬学的に許容される担体と組み合わせて、治療用に使用することができる。「薬学的に許容される」とは、生物学的に、またはそれ以外の意味でも、望ましくないとはいえない物質を意味する。すなわち、該物質は、望ましくない生物学的作用を引き起こすことなく、または、それが含まれる薬学的組成物の他の成分のいずれとも有害に相互作用することなく、該組成物とともに該物質を対象に投与することができる。担体は、当業者によく知られているように、当然ながら、対象において活性成分の分解を最小に抑え、かつ有害な副作用を最小化するように選択されるであろう。

適当な担体およびそれらの処方については、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（１９ｔｈ ｅｄ．）ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．１９９５に記載されている。一般的には、適正量の薬学的に許容される塩を処方剤に使用して、該処方剤を等張にする。薬学的に許容される担体の例には、食塩水、リンゲル液、およびデキストロース溶液などがあるが、これらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは約５〜約８、より好ましくは約７〜約７．５である。さらに別の担体には、徐放性製剤、例えば、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性基質であって、造形された製品、例えば、フィルム、リポソーム、またはミクロ粒子である基質などが含まれる。例えば、投与される組成物の投与経路および濃度によっては、一定の担体のほうが好ましいことは、当業者には明白であろう。

医薬用担体は当業者に知られている。これらは、最も一般的には、無菌水、食塩水、および生理的ｐＨの緩衝液など、ヒトへの薬剤投与用の標準的な担体であろう。該組成物を筋肉内または皮下に投与することができる。その他の化合物は、当業者によって利用されている標準的な方法に従って投与することができる。

薬学的組成物は、選択された分子以外に、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝剤、保存剤、界面活性剤などを含むことができる。また、薬学的組成物は、抗菌剤、抗炎症剤、麻酔剤など、一つ以上の活性成分も含むことができる。

非経口投与用製剤は、無菌の水溶液もしくは非水溶液、懸濁液、および乳液などである。非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注射可能な有機エステルである。水性担体は、水、アルコール性／水性溶液、乳液または懸濁液などであり、食塩水および緩衝媒体を含む。非経口用ビヒクルは、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸リンゲル液、または固定油などである。静脈内用ビヒクルは、流動性の栄養補充剤、電解質補充剤（リンゲルデキストロースをベースにしたものなど）などである。保存剤およびその他の添加剤、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、および不活性ガスなども入れることができる。

局所投与用処方剤は、軟膏、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、滴剤、座薬、スプレー剤、液剤、および散剤を含むことができる。通常の薬学的担体、水性、粉末、または油性の基剤、増粘剤などが必要または所望であるかもしれない。

経口投与用組成物は、散剤もしくは顆粒剤、水中もしくは非水性媒体中の懸濁液もしくは溶液、カプセル剤、分包剤、または錠剤などである。増粘剤、着香料、希釈剤、乳化剤、分散助剤、または結合剤が所望であるかもしれない。

この組成物のいくつかには、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸、およびリン酸などの無機酸、ならびにギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、およびフマル酸などの有機酸と反応させることによって、または水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウムなどの無機塩基、ならびにモノアルキルアミン、ジアルキルアミン、トリアルキルアミン、アリールアミン、および置換エタノールアミンなどの有機塩基と反応させることによって生成された、薬学的に許容される酸付加塩または塩基付加塩として投与可能なものもあるかもしれない。

これらの物質は、溶液、懸濁液（例えば、ミクロ粒子、リポソーム、または細胞に取り込まれたもの）などにしてもよい。これらは、抗体、受容体、または受容体リガンドを介して特定の細胞型を標的とすることができる。以下の参考文献は、本技術を利用して腫瘍組織に対して特定のタンパク質を標的とした例である（Ｓｅｎｔｅｒら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，２：４４７−４５１，（１９９１）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，Ｋ．Ｄ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６０：２７５−２８１，（１９８９）；Ｂａｇｓｈａｗｅら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，５８：７００−７０３，（１９８８）；Ｓｅｎｔｅｒら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，４：３−９，（１９９３）；Ｂａｔｔｅｌｌｉら、Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．，３５：４２１−４２５， （１９９２）；Ｐｉｅｔｅｒｓｚ ａｎｄ ＭｃＫｅｎｚｉｅ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ．Ｒｅｖｉｅｗｓ，１２９：５７−８０，（１９９２）；およびＲｏｆｆｌｅｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，４２：２０６２−２０６５，（１９９１））。「ステルス」や、その他の抗体結合リポソームなどのビヒクル（結腸癌に対する脂質介在による薬標的化など）、細胞特異的リガンドを介した受容体によるＤＮＡ標的化、リンパ球を対象とする腫瘍標的化、および非常に特異的な治療用レトロウイルスによる、インビボにおけるマウスグリオーマ細胞の標的化。以下の参考文献は、本技術を利用して腫瘍組織に対して特定のタンパク質を標的とした例である（Ｈｕｇｈｅｓら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４９：６２１４−６２２０，（１９８９）；およびＬｉｔｚｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｈｕａｎｇ，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ，１１０４：１７９−１８７，（１９９２））。一般的に、受容体は、構成的またはリガンド誘導性いずれのエンドサイトーシスの経路にも関係している。これらの受容体は、クラスリン被覆小窩に集積し、クラスリン被覆小胞体を介して細胞に入り込み、酸性化エンドソームを通過し、そこで受容体が選別され、その後、細胞表面へ再循環するか、細胞内に蓄えられるか、またはリソソームで分解される。内部移行経路は、栄養摂取、活性化タンパク質の除去、高分子の排除、ウイルスおよび毒素の日和見侵入、リガンドの解離および分解、ならびに受容体レベルの調節など、さまざまな機能に役立っている。多くの受容体は、細胞型、受容体濃度、リガンドの種類、リガンドの価数、およびリガンド濃度に応じて、２つ以上の細胞内経路を辿る。受容体依存性エンドサイトーシスの分子機構および細胞機構が総説されている（Ｂｒｏｗｎ ａｎｄ Ｇｒｅｅｎｅ，ＤＮＡ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １０：６，３９９−４０９（１９９１））。

担体分子は、開示されている阻害因子に共有結合させることができる。担体分子を、開示されているペプチドのアミノ末端に結合させることができる。担体分子を、開示されているペプチドのカルボキシ末端に結合させることができる。担体分子を、開示されているペプチド内部にあるアミノ酸に結合させることができる。本明細書に提供されている組成物は、さらに、担体分子と開示されている阻害因子を連結するリンカーを含むことができる。また、開示されている阻害因子を、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）など、該阻害因子でミクロ粒子、ナノ粒子、またはナノシェルを被覆するために用いることができるコーティング分子（Ｔｋａｃｈｅｎｋｏら、（２００３）Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ，１２５，４７００−４７０１参照）に結合させることができる。

開示されているペプチドのように、担体分子と阻害因子を架橋するために使用することができるタンパク質クロスリンカーが、当技術分野において知られており、用途および構造に基づいて定義されており、以下のものを含む：ＤＳＳ（ジスクシンイミジルスベレート）、ＤＳＰ（ジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート））、ＤＴＳＳＰ（３，３’−ジチオビス（スルホスクシンイミジルプロピオネート））、ＳＵＬＦＯ ＢＳＯＣＯＥＳ（ビス［２−（スルホスクシンイミドオキシカルボニルオキシ）エチル］スルホン）、ＢＳＯＣＯＥＳ（ビス［２−（スクシンイミドオキシカルボニルオキシ）エチル］スルホン）、ＳＵＬＦＯ ＤＳＴ（ジスルホスクシンイミジルタルトレート）、ＤＳＴ（ジスクシンイミジルタルトレート）、ＳＵＬＦＯ ＥＧＳ（エチレングリコールビス（スクシンイミジルスクシネート））、ＥＧＳ（エチレングリコールビス（スルホスクシンイミジルスクシネート））、ＤＰＤＰＢ（１，２−ジ［３’−（２’ピリジルジチオ）プロピオンアミド］ブタン）、ＢＳＳＳ（ビス（スルホスクシンイミジル）スベレート）、ＳＭＰＢ（スクシンイミジル−４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチレート）、ＳＵＬＦＯ ＳＭＰＢ（スルホスクシンイミジル−４−（ｐ−マレイミドフェニル）ブチレート）、ＭＢＳ（３−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、ＳＵＬＦＯ ＭＢＳ（３−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル）、ＳＩＡＢ（Ｎ−スクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート）、ＳＵＬＦＯ ＳＩＡＢ（Ｎ−スルホスクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート）、ＳＭＣＣ（スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート）、ＳＵＬＦＯ ＳＭＣＣ（スルホスクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート）、ＮＨＳ ＬＣ ＳＰＤＰ（スクシンイミジル−６−［３−（２−ピリジルジチオ）プロピオンアミド）ヘキサノエート）、ＳＵＬＦＯ ＮＨＳ ＬＣ ＳＰＤＰ（スルホスクシンイミジル−６−［３−（２−ピリジルジチオ）プロピオンアミド）ヘキサノエート）、ＳＰＤＰ（プロピオン酸Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート）、ＮＨＳ ＢＲＯＭＯＡＣＥＴＡＴＥ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルブロモアセテート）、ＮＨＳ ＩＯＤＯＡＣＥＴＡＴＥ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルヨードアセテート）、ＭＰＢＨ（４−（Ｎ−マレイミドフェニル）酪酸ヒドラジド塩酸塩）、ＭＣＣＨ（４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボン酸ヒドラジド塩酸塩）、ＭＢＨ（ｍ−マレイミド安息香酸ヒドラジド塩酸塩）、ＳＵＬＦＯ ＥＭＣＳ（Ｎ−（イプシロン−マレイミドカプロイルオキシ）スルホスクシンイミド）、ＥＭＣＳ（Ｎ−（イプシロン−マレイミドカプロイルオキシ）スクシンイミド）、ＰＭＰＩ（Ｎ−（ｐ−マレイミドフェニル）イソシアネート）、ＫＭＵＨ（Ｎ−（κ−マレイミドウンデカン酸）ヒドラジド）、ＬＣ ＳＭＣＣ（スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシ（６−アミドカプロエート））、ＳＵＬＦＯ ＧＭＢＳ（Ｎ−（γ−マレイミドブチルオキシ）スルホスクシンイミドエステル）、ＳＭＰＨ（スクシンイミジル−６−（β−マレイミドプロピオンアミドヘキサノエート））、ＳＵＬＦＯ ＫＭＵＳ（Ｎ−（κ−マレイミドウンデカノイルオキシ）スルホスクシンイミドエステル）、ＧＭＢＳ（Ｎ−（γ−マレイミドブチルオキシ）スクシンイミド）、ＤＭＰ（ジメチルピメリミデート塩酸塩）、ＤＭＳ（ジメチルスベリミデート塩酸塩）、ＭＨＢＨ（ウッド試薬（Ｗｏｏｄ’ｓ
ｒｅａｇｅｎｔ）（メチル−ｐ−ヒドロキシベンズイミデート塩酸塩、９８％）、ＤＭＡ（ジメチルアジピメデート塩酸塩）など。

ｉ．ナノ粒子、ミクロ粒子、およびミクロ気泡
「ナノ粒子」という用語は、ナノメートル単位で計測されるサイズをもつナノスケール粒子、例えば、少なくとも一つの次元の寸法が約１００ｎｍよりも小さいナノスケールの粒子を意味する。ナノ粒子の例には、常磁性ナノ粒子、超常磁性ナノ粒子、金属ナノ粒子、フラーレン様物質、無機ナノチューブ、デンドリマー（共有結合した金属キレートをもつものなど）、ナノファイバー、ナノホーン、ナノオニオン、ナノロッド、ナノロープ、および量子ドットが含まれる。ナノ粒子は、例えば、光子（高周波および可視光子など）およびプラズモン共鳴の吸収および／または放出により、検出可能なシグナルを生成することができる。

ミクロスフェア（またはマイクロバブル）も、本明細書に開示されている方法とともに用いることができる。発色団を含むミクロスフェアには、フォトニック結晶、生物学的標識、および微小流体チャネルにおける流動の可視化など、広範で多様な用途に利用されてきた。例えば、Ｙ．Ｌｉｎら、Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓ Ｌｅｔｔ．２００２，８１，３１３４；Ｄ．Ｗａｎｇら、Ｃｈｅｍ．Ｍａｔｅｒ．２００３，１５，２７２４；Ｘ．Ｇａｏら、Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｏｐｔ．２００２，７，５３２；Ｍ．Ｈａｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．２００１，１９，６３１；Ｖ．Ｍ．Ｐａｉら、Ｍａｇ．＆ Ｍａｇｎｅｔｉｃ Ｍａｔｅｒ．１９９９，１９４，２６２などを参照。これらの文献はそれぞれ、その全体が参照されて組み込まれる、発色団の光安定性およびミクロスフェアの単分散性が、いずれも重要であるかもしれない。

例えば、シリカナノ粒子、金属ナノ粒子、金属酸化物ナノ粒子、または半導体ナノ結晶などのナノ粒子をミクロスフェアに取り込ませることができる。ナノ粒子の光学特性、磁気特性、および電子特性によって、ミクロスフェアに結合している間に該ナノ粒子を観察することが可能になり、また、そのミクロスフェアを同定して空間的に監視することが可能になるかもしれない。例えば、コロイド状に合成された半導体ナノ結晶の高い光安定性、優れた蛍光効率、および広範な発光調節性によって、これらは、発色団の優れた選択肢となる可能性がある。有機色素とは異なり、さまざまな色（すなわち、さまざまな波長）を発するナノ結晶は、単一光源を用いて同時に励起させることができる。コロイド状に合成された半導体ナノ結晶（例えば、コアシェルＣｄＳｅ／ＺｎＳおよびＣｄＳ／ＺｎＳナノ結晶など）は、ミクロスフェアの中に取り込ませることができる。ミクロスフェアは、単分散シリカミクロスフェアであってもよい。

ナノ粒子は、金属ナノ粒子、金属酸化物ナノ粒子、または半導体ナノ結晶であってもよい。金属ナノ粒子または金属酸化物ナノ粒子の金属としては、チタニウム、ジルコニウム、ハフニウム、バナジウム、ニオブ、タンタル、クロム、モリブデン、タングステン、マンガン、テクネチウム、レニウム、鉄、ルテニウム、オスミウム、コバルト、ロジウム、イリジウム、ニッケル、パラジウム、白金、銅、銀、金、亜鉛、カドミウム、スカンジウム、イットリウム、ランタン、ランタニド系列もしくはアクチニド系列の元素（例えば、セリウム、プラセオジム、ネオジム、プロメチウム、サマリウム、ユーロピウム、ガドリニウム、テルビウム、ジスプロシウム、ホルミウム、エルビウム、ツリウム、イッテルビウム、ルテチウム、トリウム、プロトアクチニウム、およびウラン）、ホウ素、アルミニウム、ガリウム、インジウム、タリウム、シリコン、ゲルマニウム、スズ、鉛、アンチモン、ビスマス、ポロニウム、マグネシウム、カルシウム、ストロンチウム、およびバリウムなどを挙げることができる。一定の実施態様において、この金属は、鉄、ルテニウム、コバルト、ロジウム、ニッケル、パラジウム、白金、銀、金、セリウム、またはサマリウムであってもよい。この金属酸化物は、これらの物質のいずれかまたは物質の混合物を酸化した物であってもよい。例えば、金属は金であってもよく、または、金属酸化物は、酸化鉄、酸化コバルト、酸化亜鉛、酸化セリウム、または酸化チタンであってもよい。金属ナノ粒子および金属酸化物ナノ粒子の調製については、例えば、米国特許第５，８９７，９４５号および第６，７５９，１９９号に記載されており、この文献はそれぞれ、その全体が参照されて本明細書に組み込まれる。

例えば、ＴＮＡＰ阻害因子は、シリカナノ粒子（ＳＮＰ）に固定され得る。ＳＮＰは、良好な表面積／体積比、製造のしやすさ、および蛍光標識付与能力、磁気ナノ粒子（Ｙａｎｇ、Ｈ，Ｈら、２００５）および半導体ナノ結晶（Ｌｉｎ，Ｙ．Ｗら、２００６）といった特性を有することから、バイオセンシングおよび触媒分野の応用例に広範に用いられている。

また、ナノ粒子は、例えば、発熱ナノシェルであってもよい。本明細書において、「ナノシェル」は、一つ以上の導電シェル層に囲まれた離散型の誘電体コアまたは半導体コアを有するナノ粒子である。米国特許第６，５３０，９４４号には、金属ナノシェルの製造法および使用法が記載されているため、その全体が参照されて本明細書に組み込まれる。

標的分子を、開示されている組成物および／または担体に結合させることができる。例えば、標的分子は、抗体またはその断片、特異的受容体に対するリガンド、または標的となる細胞の表面に特異的に結合する、それ以外のタンパク質であってもよい。

ｉｉ．リポソーム
本明細書において、「リポソーム」という用語は、内部の水性空間を取り囲む脂質の二重層または多重層の外膜を含む構造体を意味する。リポソームを利用して、細胞へ送達するために生物活性薬剤を封入することができる。

リポソームを形成させるための材料および処理手順は、当業者に周知である。適当な媒体に分散されると、多様なリン脂質が膨張し、水和して、脂質の二重層を分離する水媒体層をもつマルチラメラ状の同心的な二重層の小胞を形成する。これらの系は、多重膜リポソームまたは多重脂質小胞（「ＭＬＶ」）と呼ばれ、直径が１０ｎｍ〜１００μｍである。これらのＭＬＶは、Ｂａｎｇｈａｍら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１３：２３８−２５２（１９６５）によって最初に記述された。一般的に、脂質または親脂質物質は、有機溶媒に溶解する。例えば、回転蒸発法により真空下で溶媒を除去すると、脂質残留物は、容器の壁に膜を形成する。次に、電解液または親水性の生物活性物質を典型的には含む水溶液をこの膜に添加する。撹拌すると、大きなＭＬＶが生じる。より小型のＭＬＶが所望である場合には、より大きい小胞を超音波処理し、フィルターの孔径を小さくしながら連続濾過するか、または別の形の機械的剪断によって小型化する。例えば、加圧押し出し（ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ ｅｘｔｒｕｓｉｏｎ）によって、ＭＬＶの大きさおよびラメラ数を減らすことができる技術も存在する（Ｂａｒｅｎｈｏｌｚら、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．９９：２１０−２１４（１９７９））。

リポソームは単層状の小胞の形をとることもできるが、それらは、ＭＬＶをより強力に超音波処理して調製され、水溶液を取り囲む単一の球状脂質二重膜からなる。単層小胞（「ＵＬＶ」）は、直径が２０〜２００ｎｍという小型なものでもよく、一方、より大型のＵＬＶは、２００ｎｍ〜２μｍの直径をもつことができる。単層小胞を作製する技術がいくつかよく知られている。Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １３５：６２４−２３８（１９６８）では、リン脂質の水性分散液の超音波処理によって、水溶液を取り囲む脂質二重層をもつ小型ＵＬＶが生成する。Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ、米国特許第４，０８９，８０１号には、超音波処理によってリポソーム前駆体を形成させた後、両親媒性化合物を含む水性媒体を添加して遠心分離すると、生体分子脂質層系が形成されることが記載されている。

小型ＵＬＶは、Ｂａｔｚｒｉら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ２９８：１０１５−１０１９（１９７３）に記載されているエタノール注入技術、およびＤｅａｍｅｒら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ４４３：６２９−６３４（１９７６）のエーテル注入技術によって調製することも可能である。これらの方法は、脂質の有機溶液を緩衝液の中に急速に注入して、単層リポソームを急速に形成させることを含む。ＵＬＶを作製する別の技術が、Ｗｅｄｅｒら、“Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ”，ｅｄ．Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，Ｖｏｌ．Ｉ，Ｃｈａｐｔｅｒ ７，ｐｇ．７９−１０７（１９８４）によって教示されている。この界面活性剤除去法は、所望の小胞を作製するため、撹拌または超音波処理によって、界面活性剤で脂質および添加物を可溶化させることを含む。

Ｐａｐａｈａｄｊｏｐｏｕｌｏｓら、米国特許第４，２３５，８７１号には、有機溶媒中で脂質の油中水乳剤を形成させることを含む逆相蒸発法による大型ＵＬＶの調製法、および水性緩衝液の中に封入される薬剤が記載されている。圧力下で有機溶媒を除去すると混合物が得られ、それは、水性媒体中で撹拌または分散すると大型のＵＬＶに変化する。Ｓｕｚｕｋｉら、米国特許第４，０１６，１００号には、薬剤および脂質のリン脂質水性分散液を凍結／融解して、単層小胞の中に薬剤を封入する別の方法が記載されている。

ＭＬＶおよびＵＬＶに加えて、リポソームは多胞性であってもよい。Ｋｉｍら、Ｂｉｏｃｈｉｍ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ ７２８：３３９−３４８（１９８３）に記載されているように、これらの多胞性リポソームは球状で、顆粒状の内部構造体を含む。外膜は脂質二重層であり、内部領域には二層隔膜によって分割された小さなコンパートメントが含まれている。さらに別の型のリポソームがオリゴ多重層小胞（「ＯＬＶ」）であって、いくつかの脂質周辺層に囲まれた大型の中心コンパートメントをもつ。これらの小胞は、直径が２〜１５μｍであり、Ｃａｌｌｏら、Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ ２２（３）：２５１−２６７（１９８５）に記載されている。

Ｍｅｚｅｉら、米国特許第４，４８５，０５４号および第４，７６１，２８８号にも、脂質小胞の調製法が記載されている。最近になって、Ｈｓｕが、米国特許第５，６５３，９９６号に、エアロゾル化を利用するリポソーム調製法を記載し、Ｙｉｏｕｒｎａｓらが、米国特許第５，０１３，４９７号に、高速剪断混合用チャンバーを利用するリポソーム調製法を記載している。特異的な出発物質を利用して、ＵＬＶ（Ｗａｌｌａｃｈら、米国特許第４，８５３，２２８号）またはＯＬＶ（Ｗａｌｌａｃｈら、米国特許第５，４７４，８４８号および第５，６２８，９３６号）を製造する方法も記載されている。

上記した脂質小胞およびそれらの調製法のすべての総説が“Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ”，ｅｄ．Ｇ．Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，Ｖｏｌ．Ｉ，ＩＩ ＆ ＩＩＩ（１９８４）に記載されている。本発明で使用するのに適したさまざまな脂質小胞を記載している、この参考文献および上記した参考文献は、参照されて本明細書に組み込まれる。

提供された組成物に結合させることができる脂肪酸（すなわち脂質）は、リポソームの中に前駆タンパク質転換酵素を効率的に取り込ませることができるものなどである。一般的に、本脂肪酸は極性脂質である。すなわち、本脂肪酸はリン脂質であってもよい。提供された組成物は、天然または合成のリン脂質を含むことができる。このようなリン脂質は、置換型もしくは非置換型のモノ置換脂肪酸もしくはジ置換脂肪酸およびこれらを組み合わせたものを含むリン脂質から選択することができる。これらのリン脂質は、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルセリン、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン、ジオレオイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスファチジン酸、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルセリン、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミトイルオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミトイルオレオイルホスファチジン酸、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルコリン、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルセリン、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミテライドイルオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミテライドイルオレオイルホスファチジン酸、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルコリン、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルセリン、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン、ミリストレオイルオレオイルホスファチジルグリセロール、ミリストレオイルオレオイルホスファチジン酸、ジリノレオイルホスファチジルコリン、ジリノレオイルホスファチジルセリン、ジリノレオイルホスファチジルエタノールアミン、ジリノレオイルホスファチジルグリセロール、ジリノレオイルホスファチジン酸、パルミチクリンオレオイルホスファチジルコリン（ｐａｌｍｉｔｉｃｌｉｎｏｌｅｏｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）、パルミチクリンオレオイルホスファチジルセリン、パルミチクリンオレオイルホスファチジルエタノールアミン、パルミチクリンオレオイルホスファチジルグリセロール、パルミチクリンオレオイルホスファチジン酸であってもよい。また、これらのリン脂質は、ホスファチジルコリン（リゾホスファチジルコリン）、ホスファチジルセリン（リゾホスファチジルセリン）、ホスファチジルエタノールアミン（リゾホスファチジルエタノールアミン）、ホスファチジルグリセロール（リゾホスファチジルグリセロール）、およびホスファチジン酸（リゾホスファチジン酸）のモノアシル化誘導体であってもよい。これらのリゾホスファチジル誘導体のモノアシル鎖は、パルミトイル、オレオイル、パルミトレオイル、リノレオイル、ミリストイル、またはミリストレオイルであってもよい。リン脂質は合成のものであってもよい。合成リン脂質は、さまざまな供給源、例えば、ＡＶＡＮＴＩ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ（Ａｌｂａｓｔｅｒ，Ａｌａ．）；Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）などから容易に購入可能である。これらの合成化合物は変化させることができ、その脂肪酸側鎖に、天然のリン脂質には存在しない変異があるかもしれない。脂肪酸には、ＰＳまたはＰＣの一方または両方に、Ｃ１４鎖、Ｃ１６鎖、Ｃ１８鎖、またはＣ２０鎖の長さの不飽和脂肪酸側鎖があってもよい。合成リン脂質には、ジオレオイル（１８：１）−ＰＳ、パルミトイル（１６：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＳ、ジミリストイル（１４：０）−ＰＳ、ジパルミトレオイル（１６：１）−ＰＣ、ジパルミトイル（１６：０）−ＰＣ、ジオレオイル（１８：１）−ＰＣ、パルミトイル（１６：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＣ、およびミリストイル（１４：０）−オレオイル（１８：１）−ＰＣが構成要素としてあってもよい。このように、一例として、提供された組成物は、パルミトイル１６：０を含むことができる。

ｉｉｉ．インビボ／エクスビボ
上記したように、本組成物は、薬学的に許容される担体に入れて投与し、当技術分野において公知の多様な機構（例えば、裸のＤＮＡの取り込み、リポソーム融合、遺伝子銃によるＤＮＡの筋肉内注入、エンドサイトーシスなど）によって、インビボおよび／またはエクスビボで対象の細胞に送達することができる。

エクスビボ法を用いる場合には、当技術分野において公知の標準的なプロトコルに従って、細胞または組織を取り出して体外で維持することができる。本組成物は、例えば、リン酸カルシウムによる遺伝子送達、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、またはプロテオリポソームなど、任意の遺伝子導入機構を介して細胞の中に導入することができる。そして、形質導入された細胞を、細胞型または組織型に対する標準的な方法により、対象に（例えば、薬学的に許容される担体に入れて）注入するか、または同じ場所に再移植することができる。対象にさまざまな細胞を移植または注入する標準的な方法が知られている。

Ｂ．方法
本明細書に開示されるＴＮＡＰ阻害因子を用いて、血管石灰化を治療または予防することができる。すなわち、本明細書には、対象において血管石灰化を治療または予防する方法であって、本明細書に開示されるＴＮＡＰ阻害因子を該対象に投与することを含む方法が開示されている。

１．血管石灰化
血管石灰化は、慢性腎臓病（ＣＫＤ）のよく知られた一般的な合併症であり、心血管疾患の罹患率および死亡率のリスクを増大させる（Ｇｉａｃｈｅｌｌｉ，Ｃ．Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１５：２９５９−６４，２００４；Ｒａｇｇｉ，Ｐ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．３９：６９５−７０１，２００２）。ＣＫＤにおける血管石灰化の原因は未だ解明されていないが、関係するリスク因子には、年齢、性別、高血圧、透析時間、糖尿病および耐糖能異常、肥満、ならびに喫煙などがある（Ｚｏｃｃａｌｉ Ｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．Ｄｉａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ １５：４５４−７，２０００）。しかし、これら従来からのリスク因子は、患者集団における心血管に起因する死亡率の高さを十分に説明するものではない。最近の観察から、末期腎疾患を患っている患者において、カルシウムおよびリンの代謝の一定の異常が、カルシウム−リン生成物の血清中濃度（Ｃａ×Ｐ（Ｃａ．ｔｉｍｅｓ．Ｐ））を上昇させて、動脈石灰化の発生、および、恐らくは心血管疾患の発症の一因となることが示唆されている（Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｗ．ら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：１４７８−８３，２０００；Ｇｕｅｒｉｎ，Ａ．ら、Ｎｅｐｈｒｏｌ．Ｄｉａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ１５：１０１４−２１，２０００；Ｖａｔｔｉｋｕｔｉ，Ｒ．および Ｔｏｗｌｅｒ，Ｄ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．２８６：Ｅ６８６−９６，２００４）。

進行したＣＫＤのもう一つの顕著な特徴は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）レベルの上昇および無機物代謝異常を特徴とする二次性副甲状腺機能亢進症（ＨＰＴ）である。二次性ＨＰＴを患っている患者で観察されるカルシウム、リン、およびＣａ×Ｐの上昇が、血管石灰化のリスク増大と関係づけられてきた（Ｃｈｅｒｔｏｗ，Ｇ．ら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．６２：２４５−５２，２００２；Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｗ．ら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：１４７８−８３，２０００；Ｒａｇｇｉ，Ｐ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．３９：６９５−７０１，２００２）。二次性ＨＰＴに対して一般的に用いられる治療介入、例えば、カルシウム性のリン酸塩結合剤および数回分の活性ビタミンＤステロールなどが、高カルシウム血症および高リン酸血症を引き起こす可能性がある（Ｃｈｅｒｔｏｗ，Ｇ．ら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ．６２：２４５−５２，２００２；Ｔａｎ，Ａ．ら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ ５１：３１７−２３，１９９７；Ｇａｌｌｉｅｎｉ，Ｍ．ら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ ４２：１１９１−８，１９９２）が、これらは、血管石灰化の発生または悪化と関連がある。

血管石灰化は、慢性腎不全の重要で重篤となる可能性がある合併症である。血管石灰化の２つの明確なパターンが同定されており（Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔ，ＤおよびＳｈａｎａｈａｎ，Ｃ．Ｈｅｒｚ ２６：２４５−５１，２００１）、いずれの型も***患者に存在するのが一般的である（Ｃｈｅｎ，Ｎ．およびＭｏｅ，Ｓ．Ｓｅｍｉｎ Ｎｅｐｈｒｏｌ
２４：６１−８，２００４）。最初のパターンは、中膜石灰化であって、それは、平滑筋細胞が骨芽細胞様細胞に形質転換するのと同時に、血管の中膜において生じる。もう一つのパターンであるアテローム発生は、脂質をもつマクロファージおよび内膜過形成と関係している。

内壁の石灰化は、慢性腎不全を患っている比較的若い人々で発症することがあり、腎疾患がなくとも真性糖尿病を患っている患者では一般的である。動脈の内壁にカルシウムが存在することにより、このタイプの血管石灰化は、アテローム性動脈硬化に関連するタイプと区別される（Ｓｃｈｉｎｋｅ Ｔ．およびＫａｒｓｅｎｔｙ Ｇ．Ｎｅｐｈｒｏｌ Ｄｉａｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ １５：１２７２−４，２０００）。アテローム硬化型血管石灰化は、動脈の内膜層に沿ったアテローム斑の中に生じる（Ｆａｒｚａｎｅｈ−Ｆａｒ Ａ．ＪＡＭＡ ２８４：１５１５−６，２０００）。石灰化は、通常、大きな十分に発達した病変部で最大であり、年齢とともに増加する（Ｗｅｘｌｅｒ Ｌ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９４：１１７５−９２，１９９６；Ｒｕｍｂｅｒｇｅｒ Ｊ．ら、Ｍａｙｏ Ｃｌｉｎ Ｐｒｏｃ １９９９；７４：２４３−５２．）。アテローム性動脈硬化症患者における動脈石灰化の程度は、通常、病気の重篤度に対応している。内壁石灰化とは異なり、アテローム硬化性の血管病変部は、カルシウムの有無に関わらず、動脈内腔に侵入して血流を低下させる。酸化脂質およびその他の酸化的ストレス、ならびに単核球およびマクロファージの浸潤による炎症が原因となって、アテローム斑内部へのカルシウムの局所的沈着が生じる可能性がある（Ｂｅｒｌｉｎｅｒ Ｊ．ら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９１：２４８８−９６，１９９５）。

末期腎疾患患者には、カルシフィラキシスまたは石灰沈着性***性動脈病と呼ばれる重篤な形態の閉塞性動脈疾患を発症するものもいる。この症候群は、小動脈における広範なカルシウム沈着を特徴とする（Ｇｉｐｓｔｅｉｎ Ｒ．ら、Ａｒｃｈ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ １３６：１２７３−８０，１９７６；Ｒｉｃｈｅｎｓ Ｇ．ら、Ｊ Ａｍ Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．６：５３７−９，１９８２）。この病気を患っている患者では、動脈石灰化および血管閉塞が組織の虚血および壊死を引き起こす。末梢血管が関係すると、下肢の皮膚の潰瘍または手足の指の壊疽を起こすことがある。腹壁、大腿部、および／または臀部の皮膚および皮下脂肪組織の虚血および壊死が、石灰沈着性***性動脈病の近似した形態の特徴である（Ｂｕｄｉｓａｖｌｊｅｖｉｃ Ｍ．ら、Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ．７：９７８−８２，１９９６；Ｒｕｇｇｉａｎ Ｊ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｋｉｄｎｅｙ
Ｄｉｓ．２８：４０９−１４，１９９６）。この症候群は、未だ明確ではない理由によって、肥満者でより頻繁に発症し、男性よりも女性のほうが罹りやすい（Ｇｏｏｄｍａｎ
Ｗ．Ｊ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１５（６）：Ｓ８２−Ｓ８５，２００２）。

血清中の無機物濃度を正常化したり、血管組織または移植片の石灰化を低下、抑制、または予防したりするための現行の治療法は、効果が限定的であり、受け入れがたい副作用をもたらす。したがって、血管石灰化を抑制および予防する有効な方法が必要とされている。

本明細書において、「血管石灰化」とは、血管の中で細胞外マトリックスのヒドロキシアパタイト（リン酸カルシウム）結晶沈着物が形成、増殖、または沈着することを意味する。血管石灰化は、冠状動脈、心臓弁膜、大動脈、およびその他の血管の石灰化を含む。この用語は、アテローム性動脈硬化症および内壁の石灰化を含む。

「アテローム硬化型血管石灰化」は、動脈内膜層に沿ったアテローム斑に生じる血管石灰化を意味する。

本明細書において、「中膜石灰化」、「内壁石灰化」、または「メンケベルク硬化症」は、動脈内壁にカルシウムが存在することを特徴とする石灰化を意味する。

２．血管石灰化の評価
血管石灰化を検出および測定する方法は、当技術分野においてよく知られている。いくつかの態様において、石灰化を測定する方法には、血管におけるカルシウム−リン沈着の程度を検出して測定する直接的な方法が含まれる。

いくつかの態様において、血管石灰化を直接測定する方法は、単純フィルムレントゲン撮影法（ｐｌａｉｎ ｆｉｌｍ ｒｏｅｎｔｇｅｎｏｇｒａｐｈｙ）、冠動脈造影法；デジタル・サブトラクション蛍光透視法などの蛍光透視法；シネ蛍光写真法；従来型、ヘリカル型、および電子ビーム型のコンピューター断層撮影法；血管内超音波法（ＩＶＵＳ）；磁気共鳴画像法；ならびに経胸腔心エコー法および経食道心エコー法などのインビボ画像化法を含む。当業者は、非侵襲的に石灰化を検出するために、蛍光透視法およびＥＢＣＴを最も一般的に利用する。冠動脈を治療する医師（Ｃｏｒｏｎａｒｙ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌｉｓｔ）は、血管形成術の前に特異的病変における石灰化を評価するためにシネ蛍光写真法およびＩＶＵＳを利用する。

いくつかの態様において、血管石灰化は、単純フィルムレントゲン撮影法によって検出することができる。この方法の利点は、フィルムが利用可能なこと、およびコストが低廉なことであるが、欠点はその感度が低いことである（Ｋｅｌｌｅｙ Ｍ．およびＮｅｗｅｌｌ Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ Ｃｌｉｎ．１：５７５−５９５，１９８３）。

いくつかの態様において、蛍光透視法を用いて冠状動脈の石灰化を検出することができる。蛍光透視法は、中程度から大規模な石灰化を検出することはできるが、微小な石灰沈着物を同定する能力は低い（Ｌｏｅｃｋｅｒら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．１９：１１６７−１１７２，１９９２）。蛍光透視法は入院施設および外来施設で広く利用可能で、比較的安価である。

いくつかの態様において、従来型のコンピューター断層撮影法（ＣＴ）によって、血管検出を行うことができる。カルシウムがｘ線ビームを減衰させるため、コンピューター断層撮影法（ＣＴ）は、血管石灰化を検出する感度が極めて高い。従来型ＣＴは、蛍光透視法よりも良好に冠状動脈石灰化を検出できると考えられるが、その限界は、スキャン時間が長いことであり、その結果、モーションアーチファクト、容積平均、呼吸性ミスレジストレーション、およびプラーク量の定量不能が生じる（Ｗｅｘｌｅｒら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ９４：１１７５−１１９２， １９９６）。

いくつかの態様において、石灰化は、スキャン時間が従来型ＣＴよりもかなり速い、ヘリカル型またはスパイラル型のコンピューター断層撮影法によって検出することができる。オーバーラップ区間によっても、カルシウム検出が改善される。血管造影的に顕著な冠状動脈閉塞性疾患と比較した場合、ヘリカルＣＴによる冠状動脈カルシウム造影の感度は９１％であり、特異度は５２％である（Ｓｈｅｍｅｓｈら、Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ １９７：７７９−７８３，１９９５）。シングルヘリカルスキャナーよりもダブルヘリカルＣＴスキャナーの方が、解像度および薄層スライス能が高いため、冠状動脈石灰化を検出する感度が高い。

いくつかの態様において、電子ビームコンピューター断層撮影法（ＥＢＣＴ）を、血管石灰化の検出に利用することができる。ＥＢＣＴは、ｘ線を発生させるために、標準的なｘ線管ではなく電子銃および静的タングステン「標的」を使用するため、スキャニング時間を非常に短くすることができる。もともとはシネＣＴまたは超高速ＣＴと呼ばれていたが、最新式のスパイラルスキャナーも、秒単位以下のスキャニング時間を達成しつつあるため、ＥＢＣＴという用語を使用して標準型ＣＴスキャンと区別している。冠動脈石灰化を検出するためには、走査断面厚が３ｍｍのＥＢＣＴ画像を１００ｍｓで得る。テーブルインクリメンテーションによって、隣接する体軸断層画像が３０〜４０枚得られる。このような断層撮影画像は、普通、１回または２回の別々の息止めシーケンスで得られるものであるが、心臓の動きの影響を最小化するために、拡張期の終わり間近で、かつ心房収縮前であるＲＲ間隔の８０％のところで心電図信号により開始される。高速の画像取得時間によって、心収縮に関連したモーションアーチファクトを実質的に度外視することができる。動脈周囲の脂肪はＣＴ密度が低いために冠動脈中の血液と明確な明暗差が生じるせいで、不透明にならなかった（ｕｎｏｐａｃｉｆｉｅｄ）冠状動脈はＥＢＣＴによって容易に識別できるが、一方、壁在性のカルシウムは、血液と比べてＣＴ密度が高いため明確に分かる。さらに、スキャナーのソフトウェアによってカルシウムの領域および密度の定量化が可能となる。任意評価システム（ａｒｂｉｔｒａｒｙ ｓｃｏｒｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ）が、ｘ線減衰係数、またはハウンスフィールド単位で計られたＣＴ数、および石灰化沈着物の面積に基づいて考案されている（Ａｇａｔｓｔｏｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．１５：８２７−８３２，１９９０）。冠動脈カルシウムのスクリーニング試験は、スキャン時間が数秒しかかからないため、１０〜１５分以内に終わることができる。電子ビーム型ＣＴスキャナーは、従来型またはスパイラル型のＣＴスキャナーよりも高価であり、比較的少ない場所でしか利用できない。

いくつかの態様において、血管内超音波（ＩＶＵＳ）法を、血管石灰化、特に冠動脈アテローム性硬化症を検出するために用いることができる（Ｗａｌｌｅｒら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ８５：２３０５−２３１０，１９９２）。カテーテル先端に取り付けられた回転式リフレクターが付いたトランスデューサーを用いて、心臓カテーテル検査の過程で、冠動脈の断面像を得ることが可能である。超音波画像から、動脈内腔に関する情報だけでなく、動脈壁の厚さおよび組織特性に関する情報も提供される。石灰化は、陰影のある高エコー域として見え、一方、線維性非石灰化プラークは、陰影のない高エコー域として見える（Ｈｏｎｙｅら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｍｅｄ．１：３０５−３１１，１９９１）。ＩＶＵＳを利用することの欠点は、他の画像診断法とは反対に、侵襲性であって、現在のところ、選択的冠動脈造影法併用してのみ実施されており、冠動脈枝の限られた部分しか可視化しないことである。この手法は侵襲性ではあるが、冠動脈造影図では正常所見の患者のアテローム性動脈硬化を示すことができ、また、バルーン血管形成術およびアテローム除去装置の選択の前に狭窄性病変の形態学的特性を明示するのに役立つため、診療的には重要である（Ｔｕｚｃｕら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．２７：８３２−８３８， １９９６）。

いくつかの態様において、血管石灰化は、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）法によって測定することができる。いくつかの態様において、血管石灰化は、経胸壁（表面）心エコー検査法により測定することができるが、この方法は、僧帽弁および大動脈弁の石灰化を検出する感度が高い。

いくつかの態様において、血管石灰化は、バン・コッサ法によってエクスビボで評価することができる。この方法は、電気化学的系列におけるそれぞれの位置のせいで、銀イオンを炭酸イオンまたはリン酸イオンによって溶液から除くことができるという原理に依拠している。銀親和性反応は、本来、光化学的なものであり、活性化エネルギーは強力な可視光または紫外線から供給される。確認可能な、組織の炭酸イオンまたはリン酸イオンの形態は、常にカルシウムイオンに結合しているため、この方法は、組織のカルシウム沈着部位を示すものであると考えることができる。

直接的に石灰化を測定する他の方法には、免疫蛍光染色法および濃度測定法が含まれうるが、これらに限定されない。別の態様において、血管石灰化を評価する方法は、血管石灰化の決定因子および／またはリスク因子を測定する方法を含む。そのような因子は、リン、カルシウム、およびカルシウム×リン産物の血清中濃度、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、低比重リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ）、高比重リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ）、トリグリセリド、およびクレアチニンを含むが、これらに限定されない。これらの因子の測定法は、当技術分野においてよく知られている。血管石灰化を評価する他の方法は、骨形成因子を評価することを含む。そのような因子には、骨特異的アルカリホスファターゼ（ＢＳＡＰ）、オステオカルシン（ＯＣ）、Ｉ型コラーゲンのカルボキシ末端プロペプチド（ＰＩＣＰ）、およびＩ型コラーゲンアミノ末端プロペプチド（ＰＩＮＰ）など骨形成マーカー；Ｉ型コラーゲン架橋Ｃ−テロペプチド（ＩＣＴＰ）、酒石酸塩耐性酸性ホスファターゼ、ＴＲＡＣＰおよびＴＲＡＰ５Ｂ、コラーゲン架橋結合のＮ−テロペプチド（ＮＴｘ）、およびコラーゲン架橋結合のＣ−テロペプチド（ＣＴｘ）などの血清中骨吸収マーカー；ならびにヒドロキシプロリン、遊離型ピリジノリンおよび総ピリジノリン（Ｐｙｄ）、遊離型デオキシピリジノリンおよび総デオキシピリジノリン（Ｄｐｄ）、コラーゲン架橋結合のＮ−テロペプチド （ＮＴｘ）、およびコラーゲン架橋結合のＣ−テロペプチド（ＣＴｘ）などの尿中骨吸収マーカーが含まれる。

３．治療法
いくつかの態様において、本発明は、個体における血管石灰化を抑制、低下、または予防する方法を提供する。本方法は、治療上有効量の開示されているＴＮＡＰ阻害因子を個体に投与することを含む。一つの態様において、本開示の化合物の投与によって、細胞外マトリックス上のヒドロキシアパタイト結晶沈着物の形成、成長、または沈着が遅延または逆転する。別の態様において、本発明に係る化合物の投与によって、細胞外マトリックス上のヒドロキシアパタイトの結晶沈着物の形成、成長、または沈着を防止する。

本明細書に開示される方法を用いて、アテローム硬化性石灰化および中膜石灰化ならびに血管石灰化を特徴とする他の症状を予防または治療することが可能である。一つの態様において、血管石灰化は、慢性腎不全または末期腎疾患に付随することがある。別の態様において、血管石灰化は、透析前後または***に付随することがある。さらなる態様において、血管石灰化は、Ｉ型またはＩＩ型の糖尿病に付随することがある。さらに別の態様において、血管石灰化は、心血管疾患に付随することがある。

いくつかの態様において、有効量のＴＮＡＰ阻害因子の投与によって、大動脈石灰化をもたらすことなく血清中ＰＴＨを低下させることができる。別の態様において、ＴＮＡＰ阻害因子の投与によって、血清中クレアチニン濃度を低下させたり、その増加を予防したりすることができる。別の態様において、ＴＮＡＰ阻害因子の投与によって、副甲状腺（ＰＴ）過形成を減衰させることができる。

ＴＮＡＰ阻害因子は、単独、または他の血管石灰化治療薬、例えば、ビタミンＤステロールおよび／またはＲＥＮＡＧＥＬ（登録商標）と併用して投与することができる。ビタミンＤステロールとしては、カルシトリオール、アルファカルシドール、ドキセルカルシフェロール、マキサカルシトール、またはパリカルシトールなどを挙げることができる。

本明細書に開示されるＴＮＡＰ阻害因子は、カルシウム擬態薬、ビタミン類、およびその類似体、抗生物質、炭酸ランタン、ＬＩＰＩＴＯＲ（登録商標）などの抗脂血薬、降圧薬、抗炎症薬（ステロイド性および非ステロイド性）、炎症性サイトカイン阻害薬（ＥＮＢＲＥＬ（登録商標）、ＫＩＮＥＲＥＴ（登録商標））、ならびに心血管治療薬と併用することができる。

いくつかの態様において、本明細書に開示される組成物は、カルシウム擬態薬、ビタミンＤステロール、および／またはＲＥＮＡＧＥＬ（登録商標）の投与と同時またはその前後に投与することができる。本明細書に開示される併用療法によって病状を治療するための投薬計画は、患者のタイプ、年齢、体重、性別、および病状、病気の重篤度、投与経路、ならびに使用される具体的な化合物などさまざまな因子に応じて選択される。そのため、大幅に変化することがある。

いくつかの態様において、ＴＮＡＰ阻害因子は、ビタミンＤステロールの投与の前後に投与することができる。いくつかの態様において、ＴＮＡＰ阻害因子は、ビタミンＤステロールと同時投与することができる。本明細書に開示される方法を実施して、血管組織へのカルシトリオールの石灰化作用を弱めることができる。いくつかの態様において、本明細書に開示される方法を用いて、カルシウム、リン、およびカルシウム−リン産物（Ｃａ×Ｐ）の血清中濃度を増大させるカルシトリオールの作用を逆転させて、血管石灰化を予防または抑制することができる。いくつかの態様において、本明細書に開示される方法を用いて、血清中クレアチニン濃度を安定化または低下させることができる。いくつかの態様において、病気に起因するクレアチニン濃度の増大に加え、クレアチニン濃度のさらなる増大は、カルシトリオールなどのビタミンＤステロールによる治療に起因することがある。

また、ＴＮＡＰ阻害因子は、外科的治療および非外科的治療と併用して投与することができる。一つの態様において、本明細書に開示される方法は、透析と併用して実施することができる。

４．投与
開示されている化合物および組成物は、適切な方法で投与することができる。投与方法は、例えば、局所治療または全身治療が望ましいかに基づき、また、治療すべき領域に基づいて選択することができる。例えば、組成物を、経口的、非経口的（例えば、静脈内注射、皮下注射、腹腔内注射、または筋肉内注射）、吸入により、体外に、局所的（経皮、眼、膣、直腸、鼻腔など）などの経路で投与することができる。

本明細書において、「鼻腔内局所投与」は、鼻孔の片方または両方を通して鼻および鼻道の中に組成物を送達することを意味し、スプレー装置もしくは液滴装置による送達、または核酸もしくはベクターのエアゾル化による送達を含むことができる。吸入による組成物の投与は、スプレー装置または液滴装置によって鼻または口を介して行うことができる。また、送達は、挿管によって呼吸器系の任意の領域（例えば、肺）に直接行うこともできる。

本開示の阻害因子は、先端にバルーンを付けたカテーテルおよび／またはステントと併用して投与することができると、さらに理解され、かつ本明細書において想定されている。ステント、カテーテル、および／またはバルーンは、ＴＮＡＰ阻害因子と結合させるか、それらの使用と同時に投与することができると、本明細書において想定されている。「結合する」または「結合される」とは、ステント上にＴＮＡＰ阻害因子を配置する方法を意味し、例えば、浸漬、被覆、注入、または任意の既知の化学的方法などがある。また、本明細書において想定されているのは、バルーンまたはステントにＴＮＡＰ阻害因子を付着させる持続放出法である。すなわち、例えば、本明細書には、血管障害の治療に利用されるステントであって、ＴＮＡＰ阻害因子でコーティングされているステントが開示されている。また、本明細書には、ＴＮＡＰ阻害因子に結合したステント、バルーン、および／またはカテーテルを個体に投与することを含む、血管石灰化を抑制、低下、または予防する方法も開示される。したがって、例えば、本明細書に開示されているのは、ＴＮＡＰ阻害因子でコーティングされた血管ステントを対象に投与することを含む、血管石灰化を抑制、低減、または予防する方法である。
組成物の非経口投与は、利用する場合、一般的には、注射によるという特徴がある。注射薬は、溶液または懸濁液として通常の形状に調製するか、注射直前に溶液または液体の懸濁液とするのに適した固体状に調製するか、または乳剤として調製することができる。最近になって改良された非経口投与法は、一定の投薬量が維持されるように、徐放系もしくは持続放出系の使用を含む。米国特許第３，６１０，７９５号参照。この文献は、参照されて本明細書に組み込まれる。

必要とされる組成物の正確な量は、対象の種、年齢、体重、および全身状態、治療中のアレルギー障害の重篤度、使用される具体的な核酸もしくはベクター、その投与モードなどに応じて、対象ごとに変わることがある。そのため、すべての組成物について正確な量を特定することはできない。しかし、当業者は、本明細書に記載されている教示内容を考慮して、日常的な実験のみを用いて、適当な量を決めることができる。すなわち、組成物を投与するための有効な投薬量および投薬計画は実験的に決定することができ、そのような決定を下すことは当業者が適宜なしうることである。組成物を投与するための投薬量の範囲は、症状や障害にもたらされる所望の効果を生じさせるのに十分な範囲である。投薬量は、不要な交差反応、アナフィラキシー反応など、有害な副作用を引き起こすほど大量であってはならない。一般的に、投薬量は、患者の年齢、体調、性別、および病気の程度、投与経路、または他の薬物がその投与計画に含まれているか否かにより変わることがあるので、当業者によって決定することができる。反対症状の徴候が生じた場合には、各医師が投薬量を調整することができる。投薬量は変えることができ、一日または数日間、毎日一回分以上の用量にして投与することができる。適当な投薬量については、所定の薬剤製品の種類ごとに文献の中に手引きが記載されている。

例えば、単独で使用されるＴＮＡＰ阻害因子の一般的な一日分投薬量は、上記の因子に応じて、１日あたり体重１ｋｇにつき約１μｇから１００ｍｇであろう。

本明細書に開示される組成物は、患者、または血管石灰化のリスクがあるか、新たに血管石灰化ありと診断された対象に対して予防的に投与することもできる。

また、開示されている組成物および方法は、例えば、さまざまな血管石灰化関連疾患用の新しい薬剤候補を単離して試験するためのツールとして利用することもできる。

本明細書には、組織非特異的アルカリホスファターゼを阻害する方法であって、インビボ、インビトロ、またはエクスビボにおいて、組織非特異的アルカリホスファターゼを、有効量の一つ以上の本明細書に開示される化合物と接触させることを含む方法が開示される。

本明細書には、さらに、一種類以上の心血管疾患を予防するかまたは制御する方法であって、治療を必要とする人に、有効量の一つ以上の本明細書に開示される化合物を投与することを含む方法が開示される。

さらにまた、開示されている化合物を、一種類以上の心血管疾患の治療に有用な医薬を製造するために利用することも開示される。心血管疾患には、血管石灰化および動脈石灰化が含まれる。

さらにまた、開示されている化合物を医薬において使用することが開示される。

本発明の範囲または精神を逸脱することなく、本発明にさまざまな修正および変更を加えることができることは、当業者には明白であろう。本明細書に開示されている本発明の詳細な説明およびその実施を考慮すれば、当業者にとって、本発明の他の実施態様が明白となろう。本発明の明細書および実施例は単に例示的なものと見なされるべきで、本発明の真の範囲および精神は、下記の請求の範囲に記載されている。

Ｃ．定義
別段の記載がない限り、本明細書で用いられる全ての技術用語および科学用語の意味は、開示されている方法および組成物が属する技術分野における当業者によって共通に理解されている意味と同じである。本明細書に記載されている方法および材料と類似もしくは同等のものを、本発明の方法および組成物を実施または試験するときに使用することができるが、特に有用な方法、装置、および材料は、本明細書に記載されているものである。本明細書の引用された刊行物、およびそれらに引用された資料は、参照されて具体的に本明細書に組み込まれる。本明細書が、本発明には、先行発明があるため、それらの開示内容に先行する権利がないことを認めていると決して解してはならない。参考文献のいずれかが、先行技術を構成していると認めるものではない。参考文献の考察は、それらの著者が何を主張しているかを述べているにすぎず、出願人は、引用文献の正確さと関連性に対して異議を申し立てる権利を留保するものである。

本明細書および添付の請求の範囲において、単数形の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上明らかにそうでないとの記載がない限り、複数の指示対象も含む。したがって、例えば、「一つの化合物」、「一つの製剤」、または「一つの薬物」というときには、二つ以上の化合物、製剤、薬物などを混合したものを含む。

「任意の」または「任意に」は、その後ろに記載された事象、状況、または物質が発生または存在しているか否かを問わないことを意味するため、この表現は、その事象、状況、または物質が発生または存在する場合と、それらが発生または存在しない場合とを含む。

範囲は、本明細書では、「約」一つの具体的な値からとして、および／または、「約」別の具体的な値までとして表すことができる。このような範囲を表す場合、別の実施態様は、その一つの具体値から、および／またはその別の具体値までを含む。同様に、前に「約」という語が使用されて、数値が近似値で表示されている場合、その具体的な数値は、別の実施態様を形成するものと理解されるべきである。さらに、各範囲の終点は、もう一方の終点との関係においても、また、もう一方の終点とは無関係にも重要であると理解される。また、本明細書にはいくつかの数値が開示されており、各数値は、その数値そのものに加えて、「約」その具体的数値としても本明細書に開示されていると理解されるべきである。例えば、「１０」という数値が開示されている場合、「約１０」も開示されていることになる。また、当業者には正しく理解されているように、ある数値が開示されている場合、その数値「以下」、「その数値以上」、および数値間の可能な範囲についても開示されていると解されるべきである。例えば、「１０」という数値が開示されている場合、「１０以下」および「１０以上」も開示されている。また、本出願全体では、データは、いくつかの異なった形式で提示されているため、このデータは、終点と始点で表されたり、データ点を組み合わせる範囲で表されたりしていると理解される。例えば、「１０」という具体的なデータ点と、１５という具体的なデータ点が開示されている場合、１０および１５よりも大きい、これら以上、これら未満、これら以下、およびこれらに等しいデータ点も、１０から１５の間のデータ点と同じように開示されていると理解される。また、２つの具体的な単位の間の各単位も開示されていると理解される。例えば、１０および１５が開示されている場合には、１１、１２、１３、および１４も開示されている。

本明細書に記載されている化合物または性質の「有効量」という用語は、有効量が表示されている、該化合物または性質の機能を行うことが可能な量である。下記で指摘されるであろうが、必要とされる正確な量は、利用される化合物および観察される処理条件など、知られている変数に依存して、処理ごとに変わるであろう。したがって、正確な「有効量」を特定することは可能ではない。しかし、適切な有効量は、日常的な実験のみを用いて当業者が決定することができる。

本明細書において、「任意の」または「任意に」という用語は、その後ろに記載された事象または状況が起きたり、起きなかったりするため、その記載には、その事象または状況が起きる場合と起きない場合とが含まれることを意味する。

本明細書において、「投与する」または「投与」という用語は、医薬製剤を対象に提供する任意の方法を意味する。そのような方法は当業者に周知されており、経口投与、経皮投与、吸入による投与、経鼻投与、局所投与、膣内投与、眼内投与、耳内投与、脳内投与、経直腸投与、ならびに静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、および皮下投与など注射可能なものを含む非経口投与などが含まれるが、それらに限定されない。特に、「投与」は、注射器および注射針によるボーラス注入によるか、または血管内に置かれたカテーテルを介した注入によるものであってもよい。血管は、動脈または静脈であってもよい。投与は、連続的または断続的なものであってもよい。本明細書に開示される固形脂質ナノ粒子を利用する、皮下循環への経皮投与によるペイロードの全身送達は、化学浸透促進剤との併用で行うことができる。

本明細書において、「対象」という用語は、投与の任意の標的を意味する。対象は動物、例えば、哺乳類であってもよい。さらなる例において、対象はヒトであってもよい。別のさらなる例において、対象は細胞であってもよい。

本明細書において、「プロドラッグ」という用語は、投与されたときには必ずしも生物学的に活性ではないが、投与されると、代謝またはその他いくつかの機序により生物活性剤に変換させることができる物質を意味する。プロドラッグは、対象に投与されると、本明細書に開示されている活性な薬物またはその他の処方物もしくは化合物をインビボで放出することができる、任意の共有結合した物質を含むことができる。

本明細書の説明および請求の範囲を通して、「含む」という語およびその変化形、例えば、「含んでいる」および「（三人称単数形の）含む」などは、「含むが、それらに限定されない」ことを意味し、例えば、他の添加物、成分、整数、または工程を除外しようとするものではない。

本出願全体にわたって、さまざまな刊行物が参照されている。本出願が属する技術分野の状況をより十分に説明するために、これらの出版物の開示内容は、その全体が参照されて本出願に組み込まれる。また、開示された参考文献は、それらに含まれている、その参照に依拠している文で検討されている情報について、参照されて、個別的かつ具体的に本明細書に組み込まれる。

当然のことながら、本明細書に開示される組成物には一定の機能がある。本明細書には、開示されている機能を果たすための一定の構造要件が開示されている。そして、開示された構造に関連する同じ機能を果たすことが可能なさまざまな構造が存在するため、これらの構造によって、一般的には、同一の結果が得られると理解できる。

本明細書全体にわたって、以下の化学的分類体系を用いて、本発明の範囲を説明し、実施可能にし、かつ、本発明の化合物を含むユニットを具体的に指摘して明確に請求しているが、特段の記載がない限り、本明細書で使用される用語は、当業者において使用されるものと同じである。「ヒドロカルビル」という用語は、炭素原子ベースのユニット（有機分子）であって、無機原子を含む、一つ以上の有機官能基を任意で含み、塩、とりわけ、カルボキシレート、四級アンモニウム塩を含むユニットを意味する。「ヒドロカルビル」という用語の広義の意味には、「非環式ヒドロカルビル」および「環式ヒドロカルビル」という種類があり、これらの用語を用いて、ヒドロカルビルユニットを環式と非環式に分類する。

以下の定義に関して、「環式ヒドロカルビル」ユニットは、環（炭素環およびアリール環）の中に炭素原子のみを含むことも、環（複素環式環およびヘテロアリール環）の中に一つ以上のヘテロ原子を含むことも可能である。「炭素」環については、環の中に含まれる炭素原子の最小数は３個の炭素原子であり、シクロプロピルである。「アリール」環については、環に含まれる炭素原子の最小数は炭素原子６個であり、フェニルである。「複素環式」環については、環に含まれる炭素原子の最小数は炭素原子１個であり、ジアジリニルである。エチレンオキシドは、２個の炭素原子を含み、Ｃ_２複素環となる。「ヘテロアリール」環については、環に含まれる炭素原子の最小数は炭素原子１個であり、１，２，３，４−テトラゾリルである。以下は、本明細書で用いられる「非環式ヒドロカルビル」および「環式ヒドロカルビル」という用語の非限定的な説明である：
Ａ．置換型または非置換型の非環式ヒドロカルビル：
本発明の目的にとって、「置換型および非置換型の非環式ヒドロカルビル」という用語には、３つのカテゴリーのユニットが含まれる：
１）直鎖状または分枝状のアルキルであって、その非限定的な例には、メチル（Ｃ_１）、エチル（Ｃ_２）、ｎ−プロピル（Ｃ_３）、イソ−プロピル（Ｃ_３）、ｎ−ブチル（Ｃ_４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ_４）、イソブチル（Ｃ_４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ_４）などが含まれる；置換された直鎖状または分枝状のアルキルであって、その非限定的な例には、ヒドロキシメチル（Ｃ_１）、クロロメチル（Ｃ_１）、トリフルオロメチル（Ｃ_１）、アミノメチル（Ｃ_１）、１−クロロエチル（Ｃ_２）、２−ヒドロキシエチル（Ｃ_２）、１，２−ジフルオロエチル（Ｃ_２）、３−カルボキシプロピル（Ｃ_３）などが含まれる。

２）直鎖状または分枝状のアルケニルであって、その非限定的な例には、エテニル（Ｃ_２）、３−プロペニル（Ｃ_３）、１−プロペニル（また２−メチルエテニル）（Ｃ_３）、イソプロペニル（また２−メチルエテン−２−イル）（Ｃ_３）、ブテン−４−イル（Ｃ_４）などが含まれる；置換された直鎖状または分枝状のアルケニルであって、その非限定的な例には、２−クロロエテニル（また２−クロロビニル）（Ｃ_２）、４−ヒドロキシブテン−１−イル（Ｃ_４）、７−ヒドロキシ−７−メチルオクト−４−エン−２−イル（Ｃ_９）、７−ヒドロキシ−７−メチルオクト−３，５−ジエン−２−イル（Ｃ_９）などが含まれる。

３）直鎖状または分枝状のアルキニルであって、その非限定的な例には、エチニル（Ｃ_２）、プロパ−２−イニル（またプロパルギル）（Ｃ_３）、プロピン−１−イル（Ｃ_３）、および２−メチル−ヘキサ−４−イン−１−イル（Ｃ_７）が含まれる；置換された直鎖状または分枝状のアルキニルであって、その非限定的な例には、５−ヒドロキシ−５−メチルヘキサ−３−イニル（Ｃ_７）、６−ヒドロキシ−６−メチルヘプタ−３−イン−２−イル（Ｃ_８）、５−ヒドロキシ−５−エチルヘプタ−３−イニル（Ｃ_９）などが含まれる。

Ｂ．置換型または非置換型の環式ヒドロカルビル：
本発明の目的にとって、「置換型および非置換型の環式ヒドロカルビル」という用語には、５つのカテゴリーのユニットが含まれる。

１）「炭素環式」という用語は、本明細書では、「３〜２０個の炭素原子を含む環であって、該環を含む原子は炭素原子に限られ、さらに、各環が、それぞれ独立して、一つ以上の水素原子を置換することができる一つ以上の部分（ｍｏｉｅｔｉｅｓ）によって置換されうる環を包含するもの」と定義される。以下は、以下のカテゴリーのユニットを包含する「置換型および非置換型の炭素環」の非限定的な例である：
ｉ）置換型または非置換型の単環炭化水素環を有する炭素環であって、その非限定的な例には、シクロプロピル（Ｃ_３）、２−メチルシクロプロピル（Ｃ_３）、シクロプロペニル（Ｃ_３）、シクロブチル（Ｃ_４）、２，３−ジヒドロキシシクロブチル（Ｃ_４）、シクロブテニル（Ｃ_４）、シクロペンチル（Ｃ_５）、シクロペンテニル（Ｃ_５）、シクロペンタジエニル（Ｃ_５）、シクロヘキシル（Ｃ_６）、シクロヘキセニル（Ｃ_６）、シクロヘプチル（Ｃ_７）、シクロオクタニル（Ｃ_８）、デカリニル（Ｃ_１０）、２，５−ジメチルシクロペンチル（Ｃ_５）、３，５−ジクロロシクロヘキシル（Ｃ_６）、４−ヒドロキシシクロヘキシル（Ｃ_６）、および３，３，５−トリメチルシクロヘキサ−１−イル（Ｃ_６）が含まれる。

ｉｉ）２つ以上の置換型または非置換型の炭化水素縮合環を有する炭素環であって、その非限定的な例には、オクタヒドロペンタレニル（Ｃ_８）、オクタヒドロ−１Ｈ−インデニル（Ｃ_９）、３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−３Ｈ−インデン−４−イル（Ｃ_９）、デカヒドロアズレニル（Ｃ_１０）が含まれる。

ｉｉｉ）置換型または非置換型の二環式炭化水素環である炭素環であって、その非限定的な例には、ビシクロ−［２．１．１］ヘキサニル、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、ビシクロ［３．１．１］ヘプタニル、１，３−ジメチル［２．２．１］ヘプタン−２−イル、ビシクロ［２．２．２］オクタニル、およびビシクロ［３．３．３］インデカニルが含まれる。

２） 本明細書において、「アリール」という用語は、「少なくとも一つのフェニル環またはナフチル環を含むユニットであって、そのフェニル環またはナフチル環と縮合したヘテロアリール環も複素環式環もなく、さらに、各環が、それぞれ独立して、一つ以上の水素原子を置換することができる一つ以上の部分（ｍｏｉｅｔｉｅｓ）によって置換されうるユニット」と定義される。以下は、以下のカテゴリーのユニットを包含する「置換型および非置換型のアリール環」の非限定的な例である：
ｉ）置換型および非置換型のＣ_６またはＣ_１０のアリール環；置換型または非置換型のフェニル環またはナフチル環であって、その非限定的な例には、フェニル（Ｃ_６）、ナフチレン−１−イル（Ｃ_１０）、ナフチレン−２−イル（Ｃ_１０）、４−フルオロフェニル（Ｃ_６）、２−ヒドロキシフェニル（Ｃ_６）、３−メチルフェニル（Ｃ_６）、２−アミノ−４−フルオロフェニル（Ｃ_６）、２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）フェニル（Ｃ_６）、２−シアノフェニル（Ｃ_６）、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル（Ｃ_６）、３−メトキシフェニル（Ｃ_６）、８−ヒドロキシナフチレン−２−イル（Ｃ_１０）、４，５−ジメトキシナフチレン−１−イル（Ｃ_１０）、および６−シアノ−ナフチレン−１−イル（Ｃ_１０）が含まれる。

ｉｉ）１個または２個の飽和環と縮合したＣ_６またはＣ_１０のアリール環であって、その非限定的な例には、ビシクロ［４．２．０］オクタ−１，３，５−トリエニル（Ｃ_８）、およびインダニル（Ｃ_９）が含まれる。

３）本明細書において、「複素環式」および／または「複素環」という用語は、「少なくとも一つの環の中にある少なくとも一つの原子が、窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）、もしくは硫黄（Ｓ）から選択されるヘテロ原子、またはＮ、Ｏ、およびＳの混合物であり、さらに、ヘテロ原子を含む環は芳香環でもないものである、３〜２０個の原子を有する一つ以上の環を含むユニット」と定義される。以下は、以下のカテゴリーのユニットを包含する「置換型および非置換型の複素環式環」の非限定的な例である：
ｉ）一つ以上のヘテロ原子を含む単環を有する複素環ユニットであって、その非限定的な例には、ジアジリニル（Ｃ_１）、アジリジニル（Ｃ_２）、ウラゾリル（Ｃ_２）、アゼチジニル（Ｃ_３）、ピラゾリジニル（Ｃ_３）、イミダゾリジニル（Ｃ_３）、オキサゾリジニル（Ｃ_３）、イソキサゾリニル（Ｃ_３）、イソキサゾリル（Ｃ_３）、チアゾリジニル（Ｃ_３）、イソチアゾリル（Ｃ_３）、イソチアゾリニル（Ｃ_３）、オキサチアゾリジノニル（Ｃ_３）、オキサゾリジノニル（Ｃ_３）、ヒダントイニル（Ｃ_３）、テトラヒドロフラニル（Ｃ_４）、ピロリジニル（Ｃ_４）、モルホリニル（Ｃ_４）、ピペラジニル（Ｃ_４）、ピペリジニル（Ｃ_４）、ジヒドロピラニル（Ｃ_５）、テトラヒドロピラニル（Ｃ_５）、ピペリジン−２−オンイル（バレロラクタム）（Ｃ_５）、２，３，４，５−テトラヒドロ−１Ｈ−アゼピニル（Ｃ_６）、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドール（Ｃ_８）、および１，２，３，４−テトラヒドロ−キノリン（Ｃ_９）が含まれる。

ｉｉ）２つ以上の環を有し、その一つが複素環である複素環式ユニットであって、その非限定的な例には、ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピロリジニル（Ｃ_７）、３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾリル（Ｃ_７）、３ａ，４，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−１Ｈ−インドリル（Ｃ_８）、１，２，３，４−テトラヒドロキノリニル（Ｃ_９）、およびデカヒドロ−１Ｈ−シクロオクタ［ｂ］ピロリル（Ｃ_１０）が含まれる。

４）本明細書において、「ヘテロアリール」という用語は、「少なくとも一つの環の中にある少なくとも一つの原子が窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）、または硫黄（Ｓ）から選択されるヘテロ原子、またはＮ、Ｏ、およびＳの混合物である、５〜２０個の原子を含む、一つ以上の環であって、さらに、ヘテロ原子を含む環の少なくとも一つが芳香環である環を含むもの」と定義される。以下は、以下のカテゴリーのユニットが包含される「置換型および非置換型の複素環式環」の非限定的な例である：
ｉ）単環を含むヘテロアリール環であって、その非限定的な例には、１，２，３，４−テトラゾリル（Ｃ_１）、［１，２，３］トリアゾリル（Ｃ_２）、［１，２，４］トリアゾリル（Ｃ_２）、トリアジニル（Ｃ_３）、チアゾリル（Ｃ_３）、１Ｈ−イミダゾリル（Ｃ_３）、オキサゾリル（Ｃ_３）、フラニル（Ｃ_４）、チオフェニル（Ｃ_４）、ピリミジニル（Ｃ_４）、２−フェニルピリミジニル（Ｃ_４）、ピリミジニル（Ｃ_５）、３−メチルピリミジニル（Ｃ_５）、および４−ジメチルアミノピリジニル（Ｃ_５）が含まれる。

ｉｉ）その一つがヘテロアリール環である２つ以上の縮合環を含むヘテロアリール環であって、その非限定的な例には、７Ｈ−プリニル（Ｃ_５）、９Ｈ−プリニル（Ｃ_５）、６−アミノ−９Ｈ−プリニル（Ｃ_５）、５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジニル（Ｃ_６）、７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジニル（Ｃ_６）、ピリド［２，３−ｄ］ピリミジニル（Ｃ_７）、２−フェニルベンゾ［ｄ］チアゾリル（Ｃ_７）、１Ｈ−インドリル（Ｃ_８）、４，５，６，７−テトラヒドロ−１−Ｈ−インドリル（Ｃ_８）、キノキサリニル（Ｃ_８）、５−メチルキノキサリニル（Ｃ_８）、キナゾリニル（Ｃ_８）、キノリニル（Ｃ_９）、８−ヒドロキシ−キノリニル（Ｃ_９）、およびイソキノリニル（Ｃ_９）が含まれる。

５）Ｃ_１〜Ｃ_６アルキレンユニットを経由して、分子の別の部分、ユニット、またはコアに結合しているＣ_１〜Ｃ_６の連結環式ヒドロカルビルユニット（炭素環ユニット、Ｃ_６またはＣ_１０のアリールユニット、複素環ユニット、またはヘテロアリールユニット）。連結環式ヒドロカルビルユニットの非限定的な例には、以下の化学式を有するベンジルＣ_１〜（Ｃ_６）が含まれる：

ただし、式中、Ｒ^ａは、任意で、独立して選択される、水素に対する一つ以上の置換である。さらなる例には、他のアリールユニット、とりわけ、（２−ヒドロキシフェニル）ヘキシルＣ_６〜（Ｃ_６）；ナフタレン−２−イルメチルＣ_１〜（Ｃ_１０）、４−フルオロベンジルＣ_１〜（Ｃ_６）、２−（３−ヒドロキシ−フェニル）エチルＣ_２〜（Ｃ_６）、および置換型および非置換型のＣ_３〜Ｃ_１０アルキレン炭素環ユニット、例えば、シクロプロピルメチルＣ_１〜（Ｃ_３）、シクロペンチルエチルＣ_２〜（Ｃ_５）、シクロヘキシルメチルＣ_１〜（Ｃ_６）が含まれる。本カテゴリーには、置換型および非置換型のＣ_１〜Ｃ_１０のアルキレン−ヘテロアリールユニット、例えば、以下の化学式を有する２−ピコリルＣ_１〜（Ｃ_６）ユニットが含まれる：

ただし、式中、Ｒ^ａは、上記で定義されたものと同じである。また、Ｃ_１〜Ｃ_１２の連結環式ヒドロカルビルユニットは、Ｃ_１〜Ｃ_１０のアルキレン複素環ユニットおよびアルキレン−ヘテロアリールユニットを含み、その非限定的な例には、アジリジニルメチルＣ_１〜（Ｃ_２）およびオキサゾール−２−イルメチルＣ_１〜（Ｃ_３）が含まれる。

本発明の目的にとって、炭素環はＣ_３〜Ｃ_２０であり；アリール環はＣ_６ またはＣ_１０であり；複素環はＣ_１〜Ｃ_９であり；ヘテロアリール環はＣ_１〜Ｃ_９である。

本発明の目的にとって、また、本発明の定義が一貫されるように、１個のヘテロ原子を含むスピロ環、二環式環などと同様に、縮合環ユニットは、ヘテロ原子含有環に対応する環ファミリーに包含されるものとしての特徴を有し、本明細書ではそのように言及されている、ただし、当業者は別の特徴付けをするかもしれない。例えば、以下の化学式：

をもつ１，２，３，４−テトラヒドロキノリンは、本発明の目的にとっては、複素環式ユニットとみなされる。以下の化学式：

をもつ６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタピリミジンは、本発明の目的にとっては、ヘテロアリールユニットとみなされる。縮合環ユニットが、飽和環（複素環）とアリール環（ヘテロアリール環）の両方にヘテロ原子を含む場合、このアリール環が重要で、本発明を説明する目的で本明細書において、環が分類されるカテゴリーの種類を決定する。例えば、以下の化学式：

をもつ１，２，３，４−テトラヒドロ−［１，８］ナフチリジンは、本発明の目的にとっては、ヘテロアリールユニットとみなされる。

「置換された」という用語が本明細書全体にわたって使用されている。「置換された」という用語は、本明細書において「置換されたユニットまたは部分は、非環式であるか環式であるかを問わず、下記に定義される１個または数個の置換基によって置換された一つ以上の水素原子を有するヒドロカルビルのユニットまたは部分である」と説明されるユニットに適用される。このユニットは、水素原子を置換すると、ヒドロカルビル部分の１個、２個、または３個の水素原子を同時に置き換えることができる。さらに、これらの置換基は、２個の隣接した炭素上の２個の水素原子を置き換えて、上記置換基、新たな部分、またはユニットを形成することができる。例えば、単一の水素原子の置換を必要とする置換ユニットは、ハロゲン、ヒドロキシルなどである。２個の水素原子の置換は、カルボニル、オキシイミノなどである。隣接する炭素原子からの２個の水素原子の置換は、エポキシなどである。３個の水素原子の置換は、シアノなどである。置換されたという用語は、本明細書全体にわたり、ヒドロカルビル部分、とりわけ、芳香環、アルキル鎖が、置換基によって置換された１個以上の水素原子を有することが可能なことを示すために使用されている。ある部分が「置換された」と記載されている場合、任意の数の水素原子が置換されている。例えば、４−ヒドロキシフェニルは「置換された芳香族炭素環（アリール環）」であり、（Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−アミノ）オクタニルは「置換されたＣ_８直鎖状アルキルユニット」であり、３−グアニジノプロピルは「置換されたＣ_３直鎖状アルキルユニット」であり、２−カルボキシピリジニルは「置換されたヘテロアリールユニット」である。

以下は、炭素環ユニット、アリールユニット、複素環ユニット、またはヘテロアリールユニット上で水素原子を置換することができるユニットの非限定的な例である：
ｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；例えば、メチル（Ｃ_１）、エチル（Ｃ_２）、ｎ−プロピル（Ｃ_３）、イソ−プロピル（Ｃ_３）、ｎ−ブチル（Ｃ_４）、イソ−ブチル（Ｃ_４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ_４）、およびｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ_４）；
ｉｉ）−ＯＲ^３０；例えば、−ＯＨ、−ＯＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_３、−ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３；
ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^３０；例えば、−ＣＯＣＨ_３、−ＣＯＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３；
ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^３０；例えば、−ＣＯ_２ＣＨ_３、−ＣＯ_２ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＯ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３；
ｖ）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^３０）_２；例えば、−ＣＯＮＨ_２、−ＣＯＮＨＣＨ_３、−ＣＯＮ（ＣＨ_３）_２；
ｖｉ）−Ｎ（Ｒ^３０）_２；例えば、−ＮＨ_２、―ＮＨＣＨ_３、−Ｎ（ＣＨ_３）_２、−ＮＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）；
ｖｉｉ）ハロゲン：−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、および−Ｉ；
ｖｉｉｉ）−ＣＨ_ｍＸ_ｎ；ただし、Ｘはハロゲン、ｍは０〜２、ｍ＋ｎ＝３；例えば、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨＦ_２、−ＣＦ_３、−ＣＣｌ_３、または−ＣＢｒ_３；および
ｉｘ） −ＳＯ_２Ｒ^３０；例えば、−ＳＯ_２Ｈ、−ＳＯ_２ＣＨ_３；−ＳＯ_２Ｃ_６Ｈ_５
ただし、式中、Ｒ^３０は、独立して、水素、置換型または非置換型のＣ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状の、もしくは環式のアルキルであり；または、２つのＲ^３０ユニットは一緒になって、３〜７個の原子を含む環を形成することができる。水素原子を置換するのに適した置換基が、下記でさらに定義される。

本明細書に開示される化合物は、すべての塩形態を含み、例えば、酸性基の塩、とりわけ、カルボン酸のみならず、塩基性基の塩、とりわけ、アミンを含む。以下は、塩基性基をもつ塩を形成することができる陰イオンの非限定的な例である：塩化物、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩、重硫酸塩、炭酸塩、重炭酸塩、リン酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ピルビン酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩など。以下は、酸性基の塩を形成することができる陽イオンの非限定的な例である：ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、ビスマスなど。

Ｄ．実施例
以下の実施例は、本明細書に記載した化合物、組成物、製品、装置、および／または方法がどのようにして作出され、評価されるかを、当業者に対して完全に開示および説明するために提示されるものであって、単なる例示に過ぎず、本開示を制限するものではない。数字（例えば、量、温度など）に関する正確さを期するよう努力を払ったが、誤差および偏差がいくらか含まれているはずである。別段の記載がない限り、割合は重量あたりの割合であり、温度は℃で表示されるか、周辺温度であり、圧力は大気圧であるか、ほぼ大気圧である。

１．実施例１
ｉ．試験用酵素の発現と調製
分泌されたエピトープ標識ＴＮＡＰ、ＰＬＡＰ、およびＩＡＰを含む発現プラスミドを、標準的なエレクトロポレーション法を用いて、一過性発現用のＣＯＳ−１細胞にトランスフェクトした。２４時間後に、培地をＯｐｔｉ−ＭＥＭに交換し、エレクトロポレーションの６０時間後に、分泌タンパク質を含む無血清培地を回収した。調整培地を、１ｍＭのＭｇＣｌ_２および２０μＭのＺｎＣｌ_２を（リン酸塩を取り除くために）含むＴＢＳに対して透析し、２μｍの酢酸セルロースフィルターで濾過した。

ｉｉ．ハイスループット・スクリーニング
ａ．ＴＮＡＰ比色分析
ＴＮＡＰ原液を１２０倍に希釈し、約１２ｕｌのＴＮＡＰ希釈液を、自動分注器（Ｍａｔｒｉｘ，Ｈｕｄｓｏｎ，Ｎ．Ｈ．）で９６ウェルのハーフエリア・マイクロタイタープレート（Ｃｏｓｔａｒ，Ｃｏｒｎｉｎｇ，Ｎ．Ｙ．）に分注した。ロボット式液体ハンドラーであるＢｉｏｍｅｋ（商標）ＦＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，Ｃａｌｉｆ．）が、ライブラリープレートから（１０％のＤＭＳＯに溶解した）各化合物を約２．５μｌ分注した。プレートを少なくとも１時間室温でインキュベートして、約１０．５μｌの基質溶液（１．１９ｍＭのｐＮＰＰ）を加える前に、ＴＮＡＰを各化合物と相互作用させた。約３０分間インキュベーションした後、マイクロタイタープレートリーダーであるＡｎａｌｙｓｔ（商標）ＨＴ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，Ｃａｌｉｆ．）で、Ａ_{４０５ ｎｍ}を測定した。酵素（ＴＮＡＰ）溶液も基質（ｐＮＰＰ）溶液も、ジエタノールアミン緩衝液（ＤＥＡ）で作成し；最終反応液は、約１ｍＭのＭｇＣｌ_２および約２０μＭのＺｎＣｌ_２を含む、１ＭのＤＥＡ−ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ約９．８を含む。ＴＮＡＰおよびｐＮＰＰの濃度（最終は約０．５ｍＭ）を調整して、陽性対照として用いられた既知の阻害剤であるレバミゾールおよびリン酸塩に対して良好な感受性を維持したまま、約０．４というＡ_{４０５ｎｍ}値を得た。ＴＮＡＰの１／１２０の希釈液および約３０分間の静置インキュベーション期間によって得られたＫ_ｍは、０．５８＋０．０８１ｍＭであった。

ｂ．ＴＮＡＰ発光分析
化合物の等量液（１０％のＤＭＳＯ中１００ｕＭを４ｕＬ）を、２．５倍のアッセイ用緩衝液（２５０ｍＭ ＤＥＡ、ｐＨ９．８、２．５ｍＭ ＭｇＣｌ _２ 、０．０５ｍＭ ＺｎＣｌ _２ ）に入れたＴＮＡＰの８００倍希釈液によって調製された、約８ｕＬのＴＮＡＰの実験用溶液とともに加えた。ＣＤＰ−スター基質溶液（水中で１２５ｕＭを約８ｕＬ）を、各ウェルに加えた。ＣＤＰ−スターの最終濃度は、アッセイ用緩衝液の中で測定された、そのＫｍ値と等しかった。プレート（３８４ウェルの小容量Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７５ホワイトプレート）を室温で約０．５時間インキュベートし、ＥｎＶｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いて発光シグナルを測定した。レバミゾール（最終濃度１ｍＭ）または２％のＤＭＳＯを、それぞれ陽性対照および陰性対照として用いた。１０段階の２倍連続希釈化合物を用いて、用量反応確認試験を同様の条件下で実施した。

ｉｉｉ．酵素動態実験
候補阻害因子の阻害選択性を判定するために、ヒトのＴＮＡＰ、ＰＬＡＰ、およびＩＡＰをマイクロタイタープレートに加え、次に、基質であるｐＮＰＰ（０．５ｍＭ）を加えて、阻害因子である可能性があるものの存在下（０〜３０μＭ）で、１ｍＭのＭｇＣｌ_２および２０μＭのＺｎＣｌ_２を含む、１ＭのＤＥＡ−ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ９．８、または１ＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ７．５の中で活性を測定した。ＴＮＡＰ、ＰＬＡＰ、およびＩＡＰの活性を、適切なΔＡ_{４０５ ｎｍ}、すなわち、３０分後に測定して、１に等しくなるよう調整した。阻害因子の存在下での残存ＡＰ活性を、対照の活性の百分比で表した。阻害の機序を調べるために、さまざまな濃度の添加阻害因子（０〜３０μＭ）の存在下で、酵素活性（ｍＡ_{４０５ ｎｍ}ｍｉｎ^−１で表示）対基質濃度の二重逆数プロットを構築した。１／ｖ対１／［Ｓ］プロットのｙ軸切片を、［Ｉ］に対してプロットして、このプロットのｘ切片としてＫ_ｉ値を、グラフを使って抽出した。Ｐｒｉｓｍ ３．０２ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ ＳＯＦＴＷＡＲＥ，ＣＡ）を用いて、線形回帰分析によって、ｙ−切片およびｘ−切片から数値を得た。これらの分析は、ｐＮＰＰを、１ＭのＤＥＡ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ９．８）中、および１ＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．５）中の基質として用いて実施し、それぞれ、最適なｐＨおよび生理学的ｐＨにおけるＫ_ｉ値を測定した。阻害因子をさらに試験して、ＴＮＡＰの関連天然基質であるＰＰ_ｉを用いて、ｐＨ７．４におけるそれらの動態特性に基づいて選別した。研究のこの部分では、ピロリン酸ナトリウム塩（９９％ＡＣＳ試薬、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ．）を基質として使用した。放出されたリン酸塩の量を、Ｂｉｏｍｏｌ Ｇｒｅｅｎ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｂｉｏｍｏｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｐｌｙｍｏｕｔｈ Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ｐａ．）を用いて測定した。最後に、生理的媒体における選択された阻害因子の効力を記録するために、化合物５８０４０７９（０〜３０μＭ）によるＴＮＡＰ阻害を、Ｎａ_２ＨＰＯ_４（０〜１０ｍＭ）およびピロリン酸塩（０〜４０ｍＭ）の濃度を上げながら存在させて、０．１ｍＭのｐＮＰＰを触媒する過程で、ｐＨ７．４にて調べた。

Ｔｒｉｏｓ，Ｉｎｃ．のＳｙｂｙｌパッケージの一部であるＦｌｅｘｘプログラムを用いて、化合物ドッキングを実施した。形式電荷をタンパク質および化合物の原子に用いた。ヘテロ原子（リン酸塩、亜鉛、およびマグネシウム）は、ドッキングしている間のポケットの一部と考えられた。

ｉｖ．組織標本および形態学的解析
マウスの皮膚および内臓を除去し、１００％のエタノールに１週間浸漬した後、１００％のアセトンに浸漬して、骨格の全載標本を調製した。そして、試料を、０．０１％のアリザリンレッドＳ、０．０１５％のアルシアンブルー８ＧＸ、および０．５％の酢酸を含む１００％のエタノール溶液に移して、３週間置いた。その後、標本を、１％（ｖｏｌ／ｖｏｌ）のＫＯＨ／５０％のグリセロール溶液で脱染した。きれいになった標本を１００％グリセロール中で保存した。

ｖ．初代ＶＳＭＣの単離および培養
血管ＳＭＣを、コラゲナーゼ分解法を用いて外植片から単離し、平滑筋の表現型を、平滑筋α−アクチンについて、ＲＴ−ＰＣＲ解析法によって確認した。一匹のマウスの大動脈から、平均５×１０^５個の細胞がもたらされた。これらの細胞を、β−グリセロリン酸塩（１０ｍＭ）および５０μｇ／ｍｌのアスコルビン酸を添加したα−ＭＥＭを用いて、３×１０^４細胞／ｃｍ^２の密度で、３週間培養した（３回反復）。これらの培養物に沈着したカルシウムを定量化するために、ｏ−クレゾールフタレインコンプレクソン法^（３１）または標準的なアリザリンレッド法を使用した。

ｖｉ．エクスビボにおける全大動脈によるＰＰ_ｉ加水分解
ラットを殺処分し、大動脈をハンクス塩溶液で灌流して血液を除去した。次に、大動脈を取り出し、外膜を切除し、長さ約２ｍｍの環状に切断した。４個の環を、試験すべき化合物を含み、血清を含まない、１ｍｌのＤＭＥＭ中に入れた。３７℃にて９０分置いた後、ナトリウムＰＰ_ｉ（最終濃度１μＭ）および［^３２Ｐ］Ｐ_ｉ（最終濃度１μキュリー／ｍｌ）を添加して、４時間にわたって６個の試料を取り出した。試料に、０．７５ＭのＨ_２ＳＯ_４中０．０２８Ｍのモリブデン酸アンモニウム８００μｌを加えて、Ｐ_ｉをＰＰ_ｉから分離し、１６００μｌのイソブタノールおよび石油エーテル（４：１）で抽出した。チェレンコフ放射によって、有機相中で^３２Ｐを計測した。ＰＰ _ｉ の加水分解は４時間以上直線的であったため、線形回帰法で速度を決定した。

表１は、本明細書に開示されている化合物と比較した、（６Ｓ）−６−フェニル−２，３，５，６−テトラヒドロ−イミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール（レバミゾール）の阻害定数を示している。

表２は、表１に示されている化合物による、ラット大動脈の環におけるＰＰ_ｉ加水分解速度の低下を示している。

２．実施例２
ＮＰＰ１機能の欠陥は、ヒトおよびマウスにおいて特発性の幼児期動脈石灰化を引き起こすことがある。Ｅｎｐｐ１の機能不全と動脈石灰化が連鎖することは、異常型ＰＰ_ｉ代謝が、血管平滑筋細胞（ＶＳＭＣ）の分化および機能にとって重要な調節因子である可能性を示唆している。細胞外ＰＰ_ｉ濃度を定めるときのＮＰＰ１およびＡＮＫの協調機能と、Ｅｎｐｐ１^−／− 変異体マウスおよびａｎｋ／ａｎｋ変異体マウスに見られる石灰化異常の類似性とを考えると、この類似性が動脈石灰化部位にまで拡大するであろうことが予想できる。大動脈石灰化の程度および重篤度を、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスで比較した。心臓および大動脈の全載標本を切り出して、アリザリンレッドで染色してカルシウム沈着を可視化した。Ｅｎｐｐ１^−／−マウスでは、大動脈石灰化の複数の病巣が存在するのを見ることができたが（図１Ａ）、対照マウスでは何も明確には見られなかった。ａｎｋ／ａｎｋマウスでも、同様の定性的結果が得られた。ＷＴ大動脈、Ｅｎｐｐ１^−／−大動脈、およびａｎｋ／ａｎｋ大動脈に沈着したカルシウムの量を定量化した。生後３ヶ月のマウスを用いた場合、得られたデータは、ｗｔ対照マウスと比較して、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスおよびａｎｋ／ａｎｋマウスでは石灰化の程度が高いことを示している。また、ａｎｋ／ａｎｋマウスよりもＥｎｐｐ１^−／−マウスで、より高い石灰化が見られ（図１Ｂ）、この結果は、Ｅｎｐｐ１^−／−マウスで観察されたより重篤な石灰化表現型と合致する。

動脈石灰化が、ａｎｋ／ａｎｋマウスよりもＥｎｐｐ１^−／−マウスで重篤である可能性を考慮して、異所性石灰化過程にＴＮＡＰが関与しているとの推定を判定するためのその後のインビトロ実験にはＥｎｐｐ１^−／−マウスを選択した。コラゲナーゼ分解法を用いて、ＶＳＭＣを分離し、免疫蛍光法、およびＳＭＣα−アクチンのＲＴ−ＰＣＲ検出法によって、それらを同定した。その結果、ＳＭＣα−アクチンについて、平均して８９％が染色されて陽性を示す細胞集団が得られた。これらのＶＳＭＣ培養物を用いて、ＷＴ−ＶＳＭＣが、ＴＮＡＰ活性を発現することが測定された。また、ＷＴ−ＶＳＭＣは、β−グリセロリン酸塩およびアスコルビン酸の存在下で培養されると、骨芽細胞培養物と同様に（例えば、動力学的に類似した態様で）無機物を沈着できることが測定された。さらに、Ｅｎｐｐ１^−／−変異マウスおよびａｎｋ／ａｎｋ変異マウスに由来するＶＳＭＣは、ＷＴ細胞よりも高いＴＮＡＰ活性を示し、これらがＷＴ細胞よりも顕著に多量の無機物を産生することが測定された（図１Ｃ）。理論に拘泥するつもりはないが、上方制御されるピロホスファターゼＴＮＡＰ活性を阻害することによって、正常なｅＰＰ _ｉ レベルを回復することが可能になり、このことが、次に、血管系におけるＨＡ沈着を抑えるのに寄与すると考えられる。このことを効率的に行うために、ＴＮＡＰの生理学的ピロホスファターゼ機能の強力な薬らしい阻害因子の開発を可能にする新規のリード化合物を同定し特徴を調べるために、網羅的な化学物質ライブラリーのスクリーニングを行った。

５３，２８０種類の化合物を含む化学物質ライブラリーをスクリーニングするアッセイ法を最適化した。これらは、以下のものを含んでいた；ａ）２０００種の化合物を含むスペクトラムコレクション（ＭｉｃｒｏＳｏｕｒｃｅ，Ｇａｙｌｏｒｄｓｖｉｌｌｅ，ＣＴ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）（２５プレート、８０化合物／プレート）；このコレクションの約半分は、既知の生物活性剤を含んでいるため、何百もの市販薬および生化学標準薬を評価することが可能である；コレクションの残り半分は、純粋な天然産物およびそれらの誘導体を含んでいる；ｂ）１２８０種の薬理学的活性化合物を含むＬＯＰＡＣ^１２８０コレクション（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ．，Ｕ．Ｓ．Ａ．）；このライブラリーは、主要な標的クラスに対するエフェクター分子を含み、このコレクションの全ての化合物は、ＳＩＧＭＡから粉末再供給（ｐｏｗｄｅｒ ｒｅ−ｓｕｐｐｌｙ）用に入手可能である；およびｃ）５０，０００種の多様な事前設計された化合物を含むＣｈｅｍｂｒｉｄｇｅ ＤＩＶＥＲＳｅｔコレクション（Ｃｈｅｍｂｒｉｄｇｅ、Ｓａｎ
Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．，Ｕ．Ｓ．Ａ）（６２５プレート、プレートあたり８０化合物）；このコレクションは、生物学的に関連する薬理作用団の広範囲の多様性スペクトルをカバーするために、３次元の薬理作用団解析に基づく方法によって選択されたものである。

化学ライブラリーのスクリーニングは、０．５ｍＭのｐＮＰＰを基質として使用する、９６ウェルプレートアッセイに基づくものであった。濃度約３０μＭの非競合的阻害薬であるレバミゾールと、約３００μＭの競合的阻害因子であるＰ_ｉを、各別のアッセイプレート中で陽性対照として使用した。反応混合物中の化学ライブラリー化合物の濃度は約１０μＭであった。毎日アッセイを行った後、２０％超の阻害を示した化合物のマニュアル試験を実施した。再現性のある阻害を示した全部で１１例を再試験して、少なくとも４つの化合物を有効なＴＮＡＰ阻害因子であると同定した；一つはレバミゾールで、周知の弱いＡＰ阻害薬であり、２０００種類の既知の薬物のＳｐｅｃｔｒｕｍ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに含まれており、本発明者らのスクリーニング過程で陽性対照として使用されている。その他３種類は、図２に示されている構造に対応していた。これらの化合物の物理化学的特性は、表Ｉに要約されている。本明細書に開示される化合物の制限態様ではないが、３つの化合物はすべて、リピンスキーの５の法則に合致する、すなわち、分子量が５００未満であり；Ｈ−結合供与体が５個未満であり；Ｈ−結合受容体が５個未満であり；回転結合が１０個未満であり、オクタノール／水の配分係数（ＬｏｇＰ）＜５である。それらの窒素含有量は、阻害因子あたり３〜７個のＮ原子である（図２）。

同定された３つのＴＮＡＰ阻害因子はいずれも、ＴＮＡＰに対して５０％および５２％の配列同一性をもつＰＬＡＰまたはＩＡＰなど、他の関連するヒトＡＰを、ｐＨ９．８でも、生理学的ｐＨでも阻害するようにはみえなかった。図３は、生理学的ｐＨにおける、阻害因子の濃度を増加させた（０〜３０μＭ）場合のＴＮＡＰ、ＰＬＡＰおよびＩＡＰに対する阻害を示している。さらに、どの阻害因子も、ＭＶによる石灰化の開始に関与すると提唱されている新規のホスファターゼであるＰＨＯＳＰＨＯ１には何ら効果を示さなかった。さまざまな阻害因子濃度に関する、１／ｖ対１／［Ｓ］の二重逆数プロットは、３種類の阻害因子すべてについて平行線を示し、各ＴＮＡＰ阻害因子が、ｐＨ９．８および生理学的ｐＨにおいて非競合的に作用できることを示している（図４Ａ）。ｙ切片の二次再プロット（図４Ｂ）によってＫ_ｉ値がもたらされたが、これは、各阻害因子の有効性を説明することができる。化合物５８０４０７９は、生理学的ｐＨで最も低いＫ_ｉ値を持っていた。すなわち、よく使われている阻害薬のレバミゾールよりも約１０倍強力であるかもしれない（表ＩＩ）。また、これは、ｐＨ９．８よりもｐＨ７．５において、より強力であるかもしれない。

図５Ａは、化合物５８０４０７９の有効性は、阻害因子または基質の濃度を大幅に超える濃度では、競合的阻害因子Ｐ_ｉの存在による影響を受けないことを示している。図５Ｂは、化合物５８０４０７９による阻害の程度は、高濃度のＰＰ_ｉによる影響を受けず、この阻害因子の非競合的性質と一致しており、酵素への結合についてＰ_ｉまたはＰＰ_ｉと競合する必要がなく、リン−酵素複合体が形成されれば、それに結合するだけである。

３種類の周知のＡＰ活性阻害因子である、Ｌ−ホモアルギニン、レバミゾールおよびテオフィリンについて、ＴＮＡＰの活性部位内における位置を決定した可能性の高いことが、最近になって報告されている。阻害因子を収容可能なＴＮＡＰ活性部位内の２つの別々の領域が発見され、第一の領域は、Ｒ４３３残基とＨ４３４残基を含み、レバミゾールおよびテオフィリンなどの疎水性環状構造体を収容する。一方、第二の領域は、Ｅ１０８／Ｇ１０９残基を含み、Ｌ−ホモアルギニンなど、より親水性で伸長した形の阻害因子を収容する。新たに同定された３種類の化合物のうち２つは、結合部位のＲ４３３／Ｈ４３４領域に主にドッキングすることが分かった（図６）。化合物５８０４０７９は、両方の結合領域にかかるようにドッキングするようにみえる。これは、この化合物のＫ_ｉ値が低いことをある程度説明し、また、ｐＨ７．５におけるこの化合物の能力がわずかに優れていることも説明しているのかもしれない。

インビトロにおける石灰化対する、３つの阻害因子すべての阻害能力を確認にするために、レバミゾールを対照として用いて、３つの阻害因子すべてが、Ｅｎｐｐ１^−／−ＶＳＭＣにおいて上方制御されているＴＮＡＰ活性を阻害できるか試験した。４つの化合物はすべて、少なくとも部分的に、この培養系での石灰化を阻害した（図７）が、化合物５８０４０７９が最も阻害的であり、この、より生理学的状況下におけるＴＮＡＰの中和に適合していた。

さらに、新規のＴＮＡＰ阻害因子によるピロホスファターゼの阻害度を測定するために、全大動脈のエクスビボ器官培養系を用いた。この解析では、大型で切り取りが容易なため、マウスではなくラットの大動脈を選択した。この解析でも、化合物５８０４０７９が、（これら高度芳香族阻害因子のすべてについて、溶解度問題を回避するために選択された）最大濃度３０μＭで、血管石灰化部位における内在性のピロホスファターゼ活性を抑制するのに最も有効であったこと（表ＩＩＩ）が示された。

Ｅ．参考文献

Claims (7)

1. 対象における血管石灰化を治療または予防するための組成物であって、式：
   を有する一つ以上の化合物を含み、
   ただし、式中、
   Ｒは以下：
   ｉ）水素；
   ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
   ｉｉｉ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルケニル；
   ｉｖ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
   ｖ）置換型または非置換型のアリール；
   ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
   ｖｉｉ）置換型または非置換型の複素環；
   ｖｉｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３；
   ｉｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３；または
   ｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＨ；
   から選択され、
   Ｒ^１は以下：
   ｉ）水素；
   ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；ｉｉｉ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルケニル；
   ｉｖ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
   ｖ）置換型または非置換型のアリール；
   ｖｉ）置換型または非置換型のヘテロアリール；
   ｖｉｉ）置換型または非置換型の複素環；
   ｖｉｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３；
   ｉｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３；
   ｘ）−Ｃ（Ｏ）ＯＨ；
   ｘｉ）−ＯＨ；または
   ｘｉｉ）−ＮＨ_２；
   から選択され、
   Ｒ^２は：
   ｉ）水素；もしくは
   ｉｉ）ハロゲン
   であるか；または
   ｉｉｉ）ＲおよびＲ^２またはＲ^１およびＲ^２が一緒になって、１つ以上の５員または６員の置換型または非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型または非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む５員または６員のヘテロアリール縮合環、または、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む置換型または非置換型の５員、６員、または７員の複素環式縮合環を含むＡ環を形成することができ；
   Ｒ ^２’ は：
   ｉ）ハロゲンであるか；または
   ｉｉ）ＲおよびＲ ^２’ またはＲ ^１ およびＲ ^２’ が一緒になって、１つ以上の５員または６員の置換型または非置換型のシクロアルキル縮合環、置換型または非置換型のアリール縮合環、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む５員または６員のヘテロアリール縮合環、または、窒素、酸素、および硫黄から選択される１つ以上の原子を含む置換型または非置換型の５員、６員、または７員の複素環式縮合環を含むＡ環を形成することができ；
   Ｌは、式：
   −［Ｒ^５］_ｚ［Ｃ（Ｒ^３ａＲ^３ｂ）］_ｘ［Ｒ^５］_ｚ［Ｃ（Ｒ^４ａＲ^４ｂ）］_ｙ［Ｒ^５］_ｚ−
   を有する結合ユニットであり、各Ｒ^３ａ、Ｒ^３ｂ、Ｒ^４ａ、およびＲ^４ｂが、それぞれ独立して、以下のものから選択され：
   ｉ）水素；
   ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；
   ｉｉｉ）フェニル；
   ｉｖ）ヒドロキシル；または
   ｖ）シアノ；
   ｖｉ）または、２個の隣接Ｒ^３ａユニットもしくは２個の隣接Ｒ^３ｂユニットが一緒になって、二重結合を形成することができ；
   Ｒ^５は以下：
   ｉ）−ＮＲ^６−；
   ｉｉ）−ＮＲ^６Ｃ（Ｏ）−；
   ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^６−；
   ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
   ｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
   ｖｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
   ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
   ｖｉｉｉ）−ＮＨ（＝ＮＲ^６）ＮＨ−；
   ｉｘ）−Ｏ−；
   ｘ）−Ｓ−；または
   ｘｉ）−ＣＲ^６＝ＣＲ^６−；
   から選択され、
   Ｒ^６は、水素またはメチルから選択され；
   指数ｘは０〜６であり；
   指数ｙは０〜６であり；
   指数ｚはそれぞれ、０または１であり；
   Ｌ^１は、式：
   −［Ｒ^９］_ｒ［Ｃ（Ｒ^７ａＲ^７ｂ）］_ｐ［Ｒ^９］_ｒ［Ｃ（Ｒ^８ａＲ^８ｂ）］_ｑ［Ｒ^９］_ｒ−
   を有する結合ユニットであり、各Ｒ^７ａ、Ｒ^７ｂ、Ｒ^８ａ、およびＲ^８ｂは、それぞれ独立して、以下：
   ｉ）水素；
   ｉｉ）Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；
   ｉｉｉ）フェニル；
   ｉｖ）ヒドロキシル；または
   ｖ）シアノ；
   から選択され、
   Ｒ^９は、それぞれ、以下：
   ｉ）−ＮＲ^１０−；
   ｉｉ）−ＮＲ^１０Ｃ（Ｏ）−；
   ｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１０−；
   ｉｖ）−Ｃ（Ｏ）−；
   ｖ）−ＯＣ（Ｏ）−；
   ｖｉ）−Ｃ（Ｏ）Ｏ−；
   ｖｉｉ）−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
   ｖｉｉｉ）−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−；
   ｉｘ）−ＮＨ（＝ＮＲ^１０）ＮＨ−；
   ｘ）−Ｏ−；
   ｘｉ）−Ｓ−；または
   ｘｉｉ）−ＣＲ^１０＝ＣＲ^１０−；
   から選択され、
   Ｒ^１０は、それぞれ水素またはメチルから選択され；
   指数ｐは０〜６であり；
   各ｍおよびｎは、０〜１であり；
   指数ｑは０〜６であり；そして、
   指数ｒは、それぞれ０または１である、
   組成物。
2. Ｒ、Ｒ^１ 、Ｒ^２ 、およびＲ ^２’ を、以下：
   ｉ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
   ｉｉ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルケニル；
   ｉｉｉ）Ｃ_２〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状または分枝状のアルキニル；
   ｉｖ）Ｃ_６またはＣ_１０の置換型または非置換型のアリール；
   ｖ）Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；
   ｖｉ）Ｃ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；
   ｖｉｉ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＯＲ^１５；
   ただし、Ｒ^１５は、以下から選択され：
   ａ）−Ｈ；
   ｂ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル、またはＣ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のハロアルキル；
   ｃ）Ｃ_６またはＣ_１０の置換型または非置換型のアリール、またはＣ_７〜Ｃ_２０のアルキレンアリール；
   ｄ）Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；および
   ｅ）Ｃ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；
   ｖｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＮ（Ｒ^１６ａ）（Ｒ^１６ｂ）；
   ただし、Ｒ^１６ａおよびＲ^１６ｂは、それぞれ独立して以下から選択され：
   ａ）−Ｈ；
   ｂ）−ＯＲ^１７；
   ただし、Ｒ^１７は、水素またはＣ_１〜Ｃ_４の直鎖状アルキル；
   ｃ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
   ｄ）Ｃ_６またはＣ_１０の置換型または非置換型のアリール；
   ｅ）Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；
   ｆ）Ｃ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；および
   ｇ）Ｒ^１６ａおよびＲ^１６ｂは一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
   ｉｘ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＣ（Ｏ）Ｒ^１８；
   ただし、Ｒ^１８は、以下から選択され：
   ａ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
   ｂ）−ＯＲ^１９；
   ただし、Ｒ^１９は、水素、Ｃ_１〜Ｃ_４の置換型または非置換型の直鎖状アルキル；Ｃ_６またはＣ_１０の置換型または非置換型のアリール、Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；Ｃ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；および
   ｃ）−Ｎ（Ｒ^２０ａ）（Ｒ^２０ｂ）
   ただし、Ｒ^２０ａおよびＲ^２０ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；Ｃ_６またはＣ_１０の置換型または非置換型のアリール；Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；Ｃ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；またはＲ^２０ａおよびＲ^２０ｂは一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
   ｘ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＯＣ（Ｏ）Ｒ^２１；
   ただし、Ｒ^２１は、以下から選択され：
   ａ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；および
   ｂ）−Ｎ（Ｒ^２２ａ）（Ｒ^２２ｂ）
   ただし、Ｒ^２２ａおよびＲ^２２ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；Ｃ_６またはＣ_１０の置換型または非置換型のアリール；Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；Ｃ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；またはＲ^２２ａおよびＲ^２２ｂは一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
   ｘｉ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＮＲ^２３Ｃ（Ｏ）Ｒ^２４；
   ただし、Ｒ^２３は、以下から選択され：
   ａ）−Ｈ；および
   ｂ）Ｃ_１〜Ｃ_４の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；
   ただし、Ｒ^２４は、以下から選択され：
   ａ）Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；および
   ｂ）−Ｎ（Ｒ^２５ａ）（Ｒ^２５ｂ）
   ただし、Ｒ^２５ａおよびＲ^２５ｂは、それぞれ独立して、水素、Ｃ_１〜Ｃ_１２の置換型または非置換型の直鎖状、分枝状、または環状のアルキル；Ｃ_６またはＣ_１０の置換型または非置換型のアリール；Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；Ｃ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；またはＲ^２５ａおよびＲ^２５ｂは一緒になって、３個から１０個の炭素原子、および酸素、窒素、および硫黄から選択される、０個から３個のヘテロ原子を有する置換型または非置換型の環を形成することができ、
   ｘｉｉ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＣＮ；
   ｘｉｉｉ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＮＯ_２；
   ｘｉｖ）−［Ｃ（Ｒ^１４ａ）（Ｒ^１４ｂ）］_ｋＳＯ_２Ｒ^２６；
   ただし、Ｒ^２６は、水素、ヒドロキシル、置換型または非置換型のＣ_１〜Ｃ_４の直鎖状または分枝状のアルキル；置換型または非置換型のＣ_６、Ｃ_１０、またはＣ_１４のアリール；Ｃ_７〜Ｃ_１５のアルキレンアリール；Ｃ_１〜Ｃ_９の置換型または非置換型の複素環；またはＣ_１〜Ｃ_１１の置換型または非置換型のヘテロアリール；ならびに
   ｘｖ）ハロゲン；
   から選択される１つ以上のユニットによって置換することができ、
   ここで、Ｒ^１４ａおよびＲ^１４ｂは、それぞれ独立して、水素またはＣ_１〜Ｃ_４のアルキルであり；そして
   指数ｋは０〜５である、
   請求項１記載の組成物。
3. Ｒが、２−フルオロフェニル、３−フルオロフェニル、４−フルオロフェニル、２−クロロフェニル、３−クロロフェニル、４−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、３−ブロモフェニル、４−ブロモフェニル、２−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、４−メトキシフェニル、２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、および４−メチルフェニルから選択される、請求項１記載の組成物。
4. 前記化合物が以下：
   メチル３−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
   ３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸；
   メチル５−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート；
   ３−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸：
   メチル３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
   ３，４，５−トリメトキシ−Ｎ−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ベンズアミド；
   ３−（ナフタレン−１−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−オール；および
   ３−（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸、から選択される、請求項１記載の組成物。
5. ＲおよびＲ^２ 、Ｒ^１およびＲ^２ 、ＲおよびＲ ^２’ またはＲ ^１ およびＲ ^２’ が一緒になって、インダゾリル、ピラゾール［３，４−ｂ］ピリジン、ピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オールイル、ピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オンイル、６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オンイル、２，４−ジヒドロクロメノ［３，４−ｃ］ピラゾリル；５Ｈ−［１，２，４］トリアゾール［５，１−ｂ］［１，３］チアジン−７（６Ｈ）−オン、１，５，６，７−テトラヒドロピラノ［３，２−ｃ］ピラゾリル、および７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジニルから選択されるヘテロアリール縮合環または複素環式縮合環を形成する、請求項１記載の組成物。
6. 前記化合物が以下：
   ７−メトキシ−４，５−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｇ］インダゾール−３−カルボン酸；３−ベンジル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
   メチル５−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート；
   ４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
   ３−フェニル−１Ｈ−インダゾール；
   ３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
   ２，４−ジヒドロクロメノ［４，３−ｃ］ピラゾール−３−カルボン酸；
   ３−ブチル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
   ６，６−ジメチル−３（チオフェン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
   ５−（フラン−２−イル）−２−（４−メトキシフェニル）−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［５，１−ｂ］［１，３］チアジン−７（６Ｈ）−オン；
   ２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（２，５−ジメトキシフェニル）エタノン；
   ６−アミノ−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−３−（メトキシメチル）−１，４−ジヒドロピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボニトリル；
   ５−クロロ−１−フェニル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−オール；
   ３−（２−クロロフェニル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
   ２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（４−フルオロフェニル）エタノン；
   ３−（（２，６−ジメチルフェノキシ）メチル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
   ７−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−７Ｈ−ピロロ［３，２−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
   ２−（５−メチルイソキサゾール−３−イルアミノ）−２−オキソエチル２Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート；
   ５−（２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ）−２−イソプロピルイミダゾ［１，２−ｃ］キナゾリン−３（２Ｈ）−オン；
   （Ｚ）−５−（（３−メチルチオフェン−２−イル）メチレン）チアゾロ［３，２−ｂ］［１，２，４］トリアゾール−６（５Ｈ）−オン；
   ７−（３，４−ジメチルフェニル）−２−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン；および
   ７−メチル−２−フェネチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン、
   から選択される、請求項１記載の組成物。
7. 対象における血管石灰化を治療または予防するための組成物であって、以下：
   ３−（２−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸；
   メチル３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
   ３−（４−クロロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボン酸；
   メチル３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
   ３−（ナフタレン−１−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−オール；
   ３−（４−ブロモフェニル）−４−クロロ−１−Ｈ−ピラゾール−５−アミン；
   ３−（１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
   メチル３−（４−ブロモフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキシレート；
   ３−ブチル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
   ６，６−ジメチル−３−（チオフェン−２−イル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
   ３−ベンジル−６，６−ジメチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−インダゾール−４（５Ｈ）−オン；
   ４−メチル−３−フェニルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
   ３−（４−メトキシフェニル）−４−メチルピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−６−オール；
   ６−アミノ−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−３−（メトキシメチル）−１，４−ジヒドロピラノ［２，３−ｃ］ピラゾール−５−カルボニトリル；
   ３−フェニル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｃ］ピラゾール；
   ２−（５−メチルイソキサゾール−３−イルアミノ）−２−オキソエチル２Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート；
   ７−メトキシ−４，５−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｇ］インダゾール−３−カルボン酸；２，４−ジヒドロクロメノ［４，３−ｃ］ピラゾール−３−カルボン酸；
   ３−フェニル−１，４，５，６−テトラヒドロシクロペンタ［ｃ］ピラゾール；
   ６−（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルチオ）−Ｎ^２，Ｎ^４−ジフェニル−１，３，５−トリアジン−２，４−ジアミン；
   ３，４，５−トリメトキシ−Ｎ−（３−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）ベンズアミド；
   ５−（フラン−２−イル）−２−（４−メトキシフェニル）−５Ｈ−［１，２，４］トリアゾロ［５，１−ｂ］［１，３］チアジン−７（６Ｈ）−オン；
   ２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（２，５−ジメトキシフェニル）エタノン；
   ５−クロロ−１−フェニル−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−オール；
   ３−（２−クロロフェニル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
   ２−（４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルチオ）−１−（４−フルオロフェニル）エタノン；
   ３−（（２，６−ジメチルフェノキシ）メチル）−７−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
   ７−（３，４−ジメチルフェニル）−３−メチル−７Ｈ−ピロロ［３，２−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ｃ］ピリミジン；
   ５−（２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ）−２−イソプロピルイミダゾ［１，２−ｃ］キナゾリン−３（２Ｈ）−オン；
   （Ｚ）−５−（（３−メチルチオフェン−２−イル）メチレン）チアゾロ［３，２−ｂ］［１，２，４］トリアゾロ−６（５Ｈ）−オン；
   ７−（３，４−ジメチルフェニル）−２−メチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン；
   ７−メチル−２−フェネチル−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン；
   ２−ジメトキシ−Ｎ−（キノリン−３−イル）ベンゼン−スルホンアミド；
   ２−メトキシ−５−メチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド；
   ２−エトキシ−５−メチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）ベンゼンスルホンアミド；
   ２，２’−［２，２’−オキシビス（エタン−２，１−ジイル）ビス（オキシ）］ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸；
   ２，２’−（ペンタン−１，５−ジイルビス（オキシ））ビス（２，１−フェニレン）ジホスホン酸；
   ４−｛２−［２−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチルチオ］−４−オキソキナゾリン−３（４Ｈ）−イル｝−Ｎ−［（テトラヒドロフラン−２−イル）メチル］ブタンアミド；および、
   （Ｅ）−２−シアノ−３−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−Ｎ−（３−フェニルプロピル）アクリルアミド、
   から選択される一つ以上の化合物を含む、組成物。