JP5611755B2

JP5611755B2 - TGF-β inhibitor

Info

Publication number: JP5611755B2
Application number: JP2010233311A
Authority: JP
Inventors: 仁恵吉川; 素子大西; 恵理子森地; 田中　浩; 浩田中; 宮本　國寛; 國寛宮本
Original assignee: Nippon Menard Cosmetic Co Ltd
Current assignee: Nippon Menard Cosmetic Co Ltd
Priority date: 2010-10-18
Filing date: 2010-10-18
Publication date: 2014-10-22
Anticipated expiration: 2030-10-18
Also published as: JP2012087076A

Description

本発明は、サクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスから選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするＴＧＦ−β抑制剤に関する。より具体的には、ＴＧＦ−βの作用を抑制することにより、ケロイド及び肥厚性瘢痕の、治療及び予防につながる薬剤に関する。 The present invention relates to a TGF-β inhibitor characterized by containing one or more selected from a cherry extract, a button pi extract, a kelp extract, and a swallow nest extract. More specifically, the present invention relates to a drug that leads to treatment and prevention of keloids and hypertrophic scars by suppressing the action of TGF-β.

ＴＧＦ（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ）−βは、ＴＧＦ−βスーパーファミリーに属するサイトカインの一種であり、極めて多様な作用を持つことが知られている。主な機能としては、様々な細胞の増殖及び分化の制御（非特許文献１）や、線維芽細胞における種々の細胞外マトリックスタンパク、例えばコラーゲン等の産生亢進（非特許文献２）等が挙げられる。 TGF (Transforming Growth Factor) -β is a kind of cytokine belonging to the TGF-β superfamily and is known to have extremely diverse actions. The main functions include control of proliferation and differentiation of various cells (Non-patent Document 1), and enhancement of production of various extracellular matrix proteins such as collagen in fibroblasts (Non-patent Document 2). .

ＴＧＦ−βは、生体の恒常性維持に非常に重要な役割を持つが、ＴＧＦ−βシグナルの異常によって強皮症や皮膚硬化症、種々の線維症等の様々な疾患を引き起こすことが知られている。これらの疾患に共通する原因としては、過度のＴＧＦ−βシグナルによって、過剰な組織の線維化が誘導されるためと考えられている。 TGF-β has a very important role in maintaining the homeostasis of the living body, but it is known that abnormalities in TGF-β cause various diseases such as scleroderma, scleroderma and various fibrosis. ing. A common cause of these diseases is considered to be that excessive tissue fibrosis is induced by an excessive TGF-β signal.

ケロイド及び肥厚性瘢痕は、皮膚損傷後の過剰な組織修復反応の結果、創面が***する結合組織の肥大増殖症を指す。非損傷組織と比較すると、外観及び内部構造共に異常であり、症状がひどい場合は、赤みを帯びたり、強い痒み、痛み及び突っ張り感等を感じることもある。 Keloids and hypertrophic scars refer to hyperplasia of connective tissue where the wound surface is elevated as a result of an excessive tissue repair response after skin injury. Compared with non-damaged tissue, both the appearance and internal structure are abnormal, and if the symptoms are severe, it may be reddish, strong itching, pain and tension may be felt.

ケロイド及び肥厚性瘢痕では、過剰な結合組織が蓄積していることから、結合組織の主成分であるコラーゲンの産生亢進に関わるＴＧＦ−βとの関連が示唆されている（非特許文献３）。よって、過度のＴＧＦ−βシグナルを抑制することは、ケロイド及び肥厚性瘢痕の治療に重要であると考えられる。 In keloids and hypertrophic scars, excess connective tissue accumulates, suggesting a relationship with TGF-β that is associated with increased production of collagen, the main component of connective tissue (Non-patent Document 3). Thus, suppressing excessive TGF-β signaling is considered important for the treatment of keloids and hypertrophic scars.

従来、ＴＧＦ−βを抑制する方法としては、シクロプロパンカルボン酸アミド化合物又は製薬学的に許容されるその塩を有効成分とするＴＧＦ−β作用抑制剤（特許文献１）、ＴＧＦ−β阻害活性を有するキノリン誘導体及びキナゾリン誘導体を含む医薬組成物（特許文献２）等の技術が報告されている。 Conventionally, as a method for suppressing TGF-β, a TGF-β action inhibitor comprising a cyclopropanecarboxylic acid amide compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient (Patent Document 1), TGF-β inhibitory activity Techniques such as a pharmaceutical composition containing a quinoline derivative having a quinoline derivative and a quinazoline derivative (Patent Document 2) have been reported.

しかし、これらの技術は副作用の危険を伴うこと、効果が十分ではないこと、又は、開発に多額のコストがかかること等から、より安全で効果の高いＴＧＦ−β抑制剤の開発が望まれている。 However, these techniques involve the risk of side effects, are not sufficiently effective, or require a large amount of development costs, and therefore, it is desired to develop safer and more effective TGF-β inhibitors. Yes.

一方、サクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスのＴＧＦ−β抑制効果については報告がなされていない。 On the other hand, there has been no report on the TGF-β inhibitory effect of cherry extract, button pi extract, kelp extract, and swallow nest extract.

特開２００４−３５４７５号JP 2004-35475 A ＷＯ２００４／０１８４３０号WO2004 / 018430

ＭａｓｓａｇｕｅＪ．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．８３：８２０６−１０，１９８６．Massague J. M .; Proc Natl Acad Sci USA. 83: 8206-10, 1986. ＲｏｂｅｒｔｓＡＢ．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．８３：４１６７−７１，１９８６．Roberts AB. Proc Natl Acad Sci USA. 83: 4167-71, 1986. ＣａｍｐａｎｅｒＡＢ．ＪＩｎｖｅｓｔＤｅｒｍａｔｏｌ．１２６：１１６８−７６，２００６．Campaner AB. J Invest Dermatol. 126: 1168-76, 2006.

本発明は、過度のＴＧＦ−βシグナルにより誘導されるケロイド及び肥厚性瘢痕を、治療及び予防する効果を有する、より安全で効果の高い薬剤を提供することを課題とする。 An object of the present invention is to provide a safer and more effective drug having an effect of treating and preventing keloid and hypertrophic scar induced by excessive TGF-β signal.

本発明者らは、この問題点を解決すべく、鋭意研究を重ねた結果、サクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスに優れたＴＧＦ−β抑制効果を発見し、本発明を完成するに至った。本発明は、過度のＴＧＦ−βシグナルにより誘導されるケロイド及び肥厚性瘢痕に対して、ＴＧＦ−βシグナルを抑制することで、治療及び予防し、並びに患部における強い痒み及び痛み等を改善するための薬剤を提供する。 As a result of intensive studies to solve this problem, the present inventors have found a TGF-β inhibitory effect excellent in cherry extract, button pi extract, kelp extract and swallow nest extract, and to complete the present invention. It came. The present invention is intended to treat and prevent keloids and hypertrophic scars induced by excessive TGF-β signal, thereby preventing and treating severe itching and pain in the affected area by suppressing TGF-β signal. Providing drugs.

本発明のサクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスは、ケロイド及び肥厚性瘢痕部位において優れたＴＧＦ−β抑制効果を示し、ケロイド及び肥厚性瘢痕の症状並びに患部における強い痒み及び痛み等を改善することができる。 The cherry extract, button pi extract, kelp extract and swallow nest extract of the present invention show an excellent TGF-β inhibitory effect at keloid and hypertrophic scar sites, and improve the symptoms of keloid and hypertrophic scars and strong itching and pain in affected areas can do.

本発明で使用されるサクラエキスは、バラ科に属するソメイヨシノ（学名：ＰｒｕｎｕｓＹｅｄｏｅｎｓｉｓ）の葉の抽出物であり、市販されている品種又は自生するものを利用することができる。 The cherry extract used in the present invention is an extract of the leaves of Yoshino cherry tree (scientific name: Prunus Yedoensis) belonging to the Rosaceae family, and commercially available varieties or native ones can be used.

本発明で使用されるボタンピエキスは、ボタン科ボタン（学名：ＰａｅｏｎｉａＳｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａ）の根皮の抽出物であり、市販されている品種又は自生するものを利用することができる。 The button pi extract used in the present invention is an extract of the root bark of a button family button (scientific name: Paeonia Suffrecticosa), and commercially available varieties or native ones can be used.

本発明で使用されるケルプエキスは、海産の多細胞藻類を中心とする褐藻植物門に属する生物群である褐藻類（学名：Ｐｈａｅｏｐｈｙｔａ）の混合物の全藻の抽出物であり、市販されている品種又は自生するものを利用することができる。 The kelp extract used in the present invention is an extract of whole algae of a mixture of brown algae (scientific name: Phaeophyta), which is a group of organisms belonging to the brown algal plant gate, mainly marine multicellular algae, and is a commercially available variety Or you can use something that grows naturally.

本発明で使用されるアナツバメ巣エキスは、アマツバメ科アナツバメ（学名：Ｃｏｌｌｏｃａｌｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａ）が産卵期に発達した唾液腺から分泌される唾液を固めて作り上げる巣の抽出物である。アナツバメ巣は、中華料理では食用素材としても広く利用されており、市販されているものを利用することができる。 The swallow nest extract used in the present invention is an extract of a nest formed by solidifying the saliva secreted from the salivary glands developed by the swallow family swallows (scientific name: Collocalialesculenta). The swallow nest is widely used as an edible material in Chinese cuisine, and commercially available products can be used.

また、本発明で使用するサクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスの抽出法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温又は低温で抽出したものであっても良い。抽出する溶媒としては、例えば、水、低級１価アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等）、炭化水素（ヘキサン、ペンタン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）、アセトニトリル等が挙げられる。これらの溶媒は単独で用いても２種以上を混合して用いてもよい。好ましくは、水あるいは水溶性溶媒（水と任意の割合で混合可能な溶媒。例えば、エタノール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール等）のうち１種又は２種以上の溶媒を用いるのが良い。抽出物はそのまま用いても良いし、溶媒を一部、又は全部留去して用いても良い。 Further, the extraction method of the cherry extract, button pi extract, kelp extract and swallow nest extract used in the present invention is not particularly limited, and for example, it may be extracted by heating, or extracted at room temperature or low temperature. Also good. Examples of the solvent to be extracted include water, lower monohydric alcohols (methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, etc.), liquid polyhydric alcohols (1,3-butylene glycol, Propylene glycol, etc.), hydrocarbons (hexane, pentane, etc.), ketones (acetone, methyl ethyl ketone, etc.), ethers (ethyl ether, tetrahydrofuran, propyl ether, etc.), acetonitrile and the like. These solvents may be used alone or in combination of two or more. Preferably, one or two or more solvents among water or a water-soluble solvent (solvent that can be mixed with water in an arbitrary ratio. For example, ethanol, 1,3-butylene glycol, propylene glycol, etc.) may be used. . The extract may be used as it is, or a part or all of the solvent may be distilled off.

本発明のＴＧＦ−β抑制剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。 In the TGF-β inhibitor of the present invention, the above extract may be used as it is, and may be used after concentration, dilution and filtration treatment, decolorization with activated carbon or the like, deodorization treatment, and the like. Further, the extracted solution may be subjected to a treatment such as concentration to dryness, spray drying, freeze drying, etc., and used as a dried product.

本発明に用いるＴＧＦ−β抑制剤は、医薬品または医薬部外品のいずれにも用いることができ、その剤型としては、例えば、軟膏剤、クリーム剤、ローション、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、注射剤等が挙げられる。 The TGF-β inhibitor used in the present invention can be used for either pharmaceutical products or quasi drugs, and examples of the dosage form include ointments, creams, lotions, emulsions, gels, aerosols, An injection agent etc. are mentioned.

本発明におけるサクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスの配合量は特に限定されないが、製剤全重量に対して、乾燥物として、０．００１〜１０重量％の範囲が好ましく、さらに好ましくは０．０１〜５重量％である。０．００１重量％未満では効果が低く、また１０重量％を超えても効果に大きな増強はみられにくく、効率的でない。又、添加の方法については、予め加えておいても製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。 The blending amounts of the cherry extract, button pi extract, kelp extract and swallow nest extract in the present invention are not particularly limited, but are preferably in the range of 0.001 to 10% by weight, more preferably 0, as a dry product based on the total weight of the preparation. 0.01 to 5% by weight. If the amount is less than 0.001% by weight, the effect is low, and if the amount exceeds 10% by weight, the effect is hardly increased and is not efficient. The addition method may be added in advance or during the production, and may be appropriately selected in consideration of workability.

本発明におけるケロイド及び肥厚性瘢痕とは、皮膚損傷後の過剰な組織修復反応の結果、創面が***する結合組織の肥大増殖症を指す。非損傷組織と比較すると、外観及び内部構造共に異常であり、症状がひどい場合は、赤みを帯びたり、強い痒み、痛み及び突っ張り感等を感じることもある。 The keloids and hypertrophic scars in the present invention refer to hyperplasia of connective tissue in which the wound surface is raised as a result of an excessive tissue repair reaction after skin damage. Compared with non-damaged tissue, both the appearance and internal structure are abnormal, and if the symptoms are severe, it may be reddish, strong itching, pain and tension may be felt.

本発明のケロイド及び肥厚性瘢痕を治療及び予防し、並びに患部における強い痒み及び痛み等を改善するための薬剤は、通常局所的に外用される。外用方法としては、患部に直接適用したり、布等に塗布及び含浸させて適用する等の方法が挙げられる。 The agents for treating and preventing keloids and hypertrophic scars of the present invention and improving severe itching and pain in affected areas are usually applied topically. Examples of external methods include direct application to the affected area, and application by applying and impregnating cloth or the like.

次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いるエキスの製造例、処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量は重量％を示す。 Next, in order to describe the present invention in detail, examples of production of an extract used in the present invention, formulation examples and experimental examples will be given as examples, but the present invention is not limited thereto. The compounding amount shown in the examples indicates% by weight.

製造例１サクラエキス１
ソメイヨシノの葉１００ｇを生のまま細かく切断し、１，３−ブチレングリコールの５０重量％水溶液を１ｋｇ加え、室温で２日間抽出した。抽出後、その抽出液を濾過してソメイヨシノの葉の５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物を９５０ｇ得た。尚、この抽出物の乾燥重量は、１９．０ｇ（２．０重量％）である。 Production Example 1 Sakura Extract 1
100 g of Yoshino cherry leaves were cut into pieces, and 1 kg of a 50 wt% aqueous solution of 1,3-butylene glycol was added, followed by extraction at room temperature for 2 days. After extraction, the extract was filtered to obtain 950 g of a 50% 1,3-butylene glycol aqueous solution extract of Yoshino cherry leaves. The dry weight of this extract is 19.0 g (2.0% by weight).

製造例２ボタンピエキス１
ボタンピの乾燥物１００ｇに、１，３−ブチレングリコールの５０重量％水溶液を１ｋｇ加え、室温で２日間抽出した。抽出後、その抽出液を濾過してボタンピの５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物を９５０ｇ得た。尚、この抽出物の乾燥重量は、８．５５ｇ（０．９重量％）である。 Production Example 2 Button pi extract 1
1 kg of a 50 wt% aqueous solution of 1,3-butylene glycol was added to 100 g of dried button pi and extracted for 2 days at room temperature. After the extraction, the extract was filtered to obtain 950 g of 50% 1,3-butylene glycol aqueous extract of buttonpi. The dry weight of this extract is 8.55 g (0.9% by weight).

製造例３ケルプエキス１
褐藻類の乾燥物１００ｇに、１，３−ブチレングリコールの５０重量％水溶液を１ｋｇ加え、室温で２日間抽出した。抽出後、その抽出液を濾過して褐藻類の５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物を９５０ｇ得た。尚、この抽出物の乾燥重量は、７．６ｇ（０．８重量％）である。 Production Example 3 Kelp Extract 1
1 kg of a 50 wt% aqueous solution of 1,3-butylene glycol was added to 100 g of the dried brown algae, and the mixture was extracted at room temperature for 2 days. After extraction, the extract was filtered to obtain 950 g of a 50% 1,3-butylene glycol aqueous solution extract of brown algae. The dry weight of this extract is 7.6 g (0.8% by weight).

製造例４アナツバメ巣エキス１
アナツバメ巣の乾燥物１００ｇに、１，３−ブチレングリコールの５０重量％水溶液を１ｋｇ加え、室温で２日間抽出した。抽出後、その抽出液を濾過してアナツバメ巣の５０％１，３−ブチレングリコール水溶液抽出物を９５０ｇ得た。尚、この抽出物の乾燥重量は、９．５ｇ（１．０重量％）である。 Production Example 4 Swallow's Nest Extract 1
1 kg of a 50% by weight aqueous solution of 1,3-butylene glycol was added to 100 g of a dried swallow nest and extracted at room temperature for 2 days. After extraction, the extract was filtered to obtain 950 g of a 50% 1,3-butylene glycol aqueous extract of swallow nests. The dry weight of this extract is 9.5 g (1.0% by weight).

製造例５サクラエキス２
ソメイヨシノの葉１００ｇを生のまま細かく切断し、１ｋｇの精製水を加え、１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、濃縮した後に凍結乾燥してソメイヨシノの葉の熱水抽出物８．５ｇを得た。 Production Example 5 Sakura Extract 2
100 g of Yoshino cherry leaves were cut into raw pieces, 1 kg of purified water was added, and the mixture was extracted at 100 ° C. for 2 hours. The obtained extract was filtered, concentrated and freeze-dried to obtain 8.5 g of a hot water extract of Yoshino cherry leaves.

製造例６ボタンピエキス２
ボタンピの乾燥物１００ｇに、１ｋｇの精製水を加え、１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、濃縮した後に凍結乾燥してボタンピの熱水抽出物４．２ｇを得た。 Production Example 6 Button pi extract 2
1 kg of purified water was added to 100 g of dried button pi and extracted at 100 ° C. for 2 hours. The obtained extract was filtered, concentrated, and lyophilized to obtain 4.2 g of hot water extract of button pie.

製造例７ケルプエキス２
褐藻類の乾燥物１００ｇに、１ｋｇの精製水を加え、１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、濃縮した後に凍結乾燥して褐藻類の熱水抽出物３．８ｇを得た。 Production Example 7 Kelp Extract 2
1 kg of purified water was added to 100 g of dried brown algae and extracted at 100 ° C. for 2 hours. The obtained extract was filtered, concentrated, and lyophilized to obtain 3.8 g of a hot water extract of brown algae.

製造例８アナツバメ巣エキス２
アナツバメ巣の乾燥物１００ｇに、１ｋｇの精製水を加え、１００℃で２時間抽出した。得られた抽出液を濾過し、濃縮した後に凍結乾燥してアナツバメ巣の熱水抽出物２．８ｇを得た。 Production Example 8 Swallow's Nest Extract 2
1 kg of purified water was added to 100 g of dried swallow nests and extracted at 100 ° C. for 2 hours. The obtained extract was filtered, concentrated, and lyophilized to obtain 2.8 g of a swallow nest hot water extract.

本発明のサクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスは、処方例として下記の製剤化を行うことができる。 The cherry extract, button pi extract, kelp extract and swallow nest extract of the present invention can be formulated as the following formulation examples.

処方例１軟膏１
処方配合量（重量％）
１．サクラエキス（製造例１）０．５
２．スクワラン５．５
３．オリーブ油３．０
４．ステアリン酸２．０
５．ミツロウ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）３．０
８．ベヘニルアルコール１．５
９．モノステアリン酸グリセリン２．５
１０．１，３−ブチレングリコール８．５
１１．パラオキシ安息香酸エチル０．０５
１２．パラオキシ安息香酸メチル０．２
１３．精製水６７．７５
［製造方法］成分２〜９を加熱して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して成分１を加え、製品とする。 Formulation Example 1 Ointment 1
Formulation amount (% by weight)
1. Sakura extract (Production Example 1) 0.5
2. Squalane 5.5
3. Olive oil 3.0
4). Stearic acid 2.0
5. Beeswax 2.0
6). Octyldodecyl myristate 3.5
7). Polyoxyethylene cetyl ether (20E.O.) 3.0
8). Behenyl alcohol 1.5
9. Glycerol monostearate2.5
10.1,3-butylene glycol 8.5
11. Ethyl paraoxybenzoate 0.05
12 Methyl paraoxybenzoate 0.2
13. Purified water 67.75
[Production Method] Components 2 to 9 are heated and mixed, and kept at 70 ° C. to obtain an oil phase. Ingredients 10 to 13 are dissolved by heating and mixed, and kept at 75 ° C. to form an aqueous phase. The aqueous phase is added to the oil phase to emulsify, and while stirring, the mixture is cooled to 30 ° C. and component 1 is added to obtain a product.

処方例２軟膏２
処方例１において、サクラエキスをボタンピエキス（製造例２）に置き換えたものを軟膏２とした。 Formulation Example 2 Ointment 2
An ointment 2 was prepared by replacing the cherry extract with the button pi extract (Production Example 2) in Formulation Example 1.

処方例３軟膏３
処方例１において、サクラエキスをケルプエキス（製造例３）に置き換えたものを軟膏３とした。 Formulation Example 3 Ointment 3
In Formulation Example 1, the ointment 3 was obtained by replacing the cherry extract with the kelp extract (Production Example 3).

処方例４軟膏４
処方例１において、サクラエキスをアナツバメ巣エキス（製造例４）に置き換えたものを軟膏４とした。 Formulation Example 4 Ointment 4
In Formulation Example 1, ointment 4 was obtained by replacing the cherry extract with the swallow nest extract (Production Example 4).

比較例１従来の軟膏
処方例１において、サクラエキスを精製水に置き換えたものを従来の軟膏とした。 Comparative Example 1 Conventional Ointment In Formulation Example 1, the cherry salmon extract was replaced with purified water to obtain a conventional ointment.

処方例５クリーム
処方配合量（重量％）
１．ボタンピエキス（製造例２）０．１
２．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）２．０
３．モノステアリン酸グリセリン１０．０
４．流動パラフィン５．０
５．セタノール６．０
６．パラオキシ安息香酸メチル０．１
７．プロピレングリコール１０．０
８．精製水６６．８
［製造方法］成分２〜５を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び６〜８を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。 Formulation Example 5 Cream Formulation Amount (% by weight)
1. Button pi extract (Production Example 2) 0.1
2. Polyoxyethylene cetyl ether (30E.O.) 2.0
3. Glycerol monostearate 10.0
4). Liquid paraffin 5.0
5. Cetanol 6.0
6). Methyl paraoxybenzoate 0.1
7). Propylene glycol 10.0
8). Purified water 66.8
[Manufacturing method] Components 2 to 5 are dissolved by heating and mixed, and kept at 70 ° C to obtain an oil phase. Ingredients 1 and 6 to 8 are dissolved by heating and mixed, and kept at 75 ° C. to obtain an aqueous phase. The aqueous phase is added to the oil phase to emulsify, and the mixture is cooled to 30 ° C. with stirring to obtain a product.

処方例６ローション
処方配合量（重量％）
１．ケルプエキス（製造例３）０．５
２．アナツバメ巣エキス（製造例４）０．５
３．１，３−ブチレングリコール８．０
４．グリセリン２．０
５．キサンタンガム０．０２
６．クエン酸０．０１
７．クエン酸ナトリウム０．１
８．エタノール５．０
９．パラオキシ安息香酸メチル０．１
１０．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）０．１
１１．精製水８３．６７
［製造方法］成分１〜７及び１１と、成分８〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。 Formulation Example 6 Lotion Formulation Amount (% by weight)
1. Kelp extract (Production Example 3) 0.5
2. Swallow's nest extract (Production Example 4) 0.5
3. 1,3-butylene glycol 8.0
4). Glycerin 2.0
5. Xanthan gum 0.02
6). Citric acid 0.01
7). Sodium citrate 0.1
8). Ethanol 5.0
9. Methyl paraoxybenzoate 0.1
10. Polyoxyethylene hydrogenated castor oil (40E.O.) 0.1
11. Purified water 83.67
[Production method] Components 1 to 7 and 11 and components 8 to 10 are uniformly dissolved, and both are mixed and filtered to obtain a product.

処方例７乳液
処方配合量（重量％）
１．アナツバメ巣エキス（製造例４）０．０５
２．サクラエキス（製造例１）０．０５
３．スクワラン５．０
４．オリーブ油５．０
５．ホホバ油５．０
６．セタノール１．５
７．モノステアリン酸グリセリン２．０
８．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）３．０
９．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート２．０
１０．プロピレングリコール１．０
１１．グリセリン２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル０．２
１３．精製水７３．２
［製造方法］成分３〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１、２及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。 Formulation Example 7 Emulsion Formulation Amount (% by weight)
1. Swallow's nest extract (Production Example 4) 0.05
2. Sakura extract (Production Example 1) 0.05
3. Squalane 5.0
4). Olive oil 5.0
5. Jojoba oil 5.0
6). Cetanol 1.5
7). Glycerol monostearate 2.0
8). Polyoxyethylene cetyl ether (20E.O.) 3.0
9. Polyoxyethylene sorbitan monooleate 2.0
10. Propylene glycol 1.0
11. Glycerin 2.0
12 Methyl paraoxybenzoate 0.2
13. Purified water 73.2
[Manufacturing method] Components 3 to 9 are dissolved by heating and mixed, and kept at 70 ° C to obtain an oil phase. Ingredients 1, 2 and 10-13 are dissolved by heating and mixed, and kept at 75 ° C. to form an aqueous phase. The aqueous phase is added to the oil phase to emulsify, and the mixture is cooled to 30 ° C. with stirring to obtain a product.

以下、本発明を効果的に説明するために、実施例３として本発明の実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。 Hereinafter, in order to explain the present invention effectively, an experimental example of the present invention is given as Example 3, but the present invention is not limited to this.

実験例１ヒトケラチノサイトにおける、試料添加によるＴＧＦ−β１遺伝子の発現変化
ヒトケラチノサイトを、１０％ＦＢＳを含むＤｅｌｂｅｃｃｏ’ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅＭｅｄｉｕｍ（以下、ＤＭＥＭとする）にて３７℃、５％ＣＯ_２条件下で培養した。セミコンフルエントになった状態で、各エキスを、乾燥物として、１、１０、１００μｇ／ｍｌとなるよう添加した１％ＦＢＳを含むＤＭＥＭにてさらに２４時間培養した後、総ＲＮＡの抽出を行った。総ＲＮＡの抽出は、ＴＲＩＺＯＬＲｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて行い、総ＲＮＡ量は分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ）を用いて２６０ｎｍにおける吸光度により求めた。ｍＲＮＡ発現量の測定は、細胞から抽出した総ＲＮＡを基にしてリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により行った。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法には、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ３ＰｌａｔｉｎｕｍＴｗｏ−Ｓｔｅｐ
ｑＲＴ−ＰＣＲＫｉｔｗｉｔｈＳＹＢＲＧｒｅｅｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いた。すなわち、５００ｎｇの総ＲＮＡを逆転写反応後、ＰＣＲ反応（９５℃：１５秒間、６０℃：３０秒間、４０ｃｙｃｌｅｓ）を行った。その他の操作は定められた方法に従い、ＴＧＦ−β１ｍＲＮＡの発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨｍＲＮＡの発現量に対する割合として求めた。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。 Experimental Example 1 Expression change of TGF-β1 gene in human keratinocytes by addition of sample Human keratinocytes were subjected to Delbecco's Modified Eagle Medium (hereinafter referred to as DMEM) containing 10% FBS under conditions of 37 ° C. and 5% CO _2. In culture. In a semi-confluent state, each extract was cultured as a dry product in DMEM containing 1% FBS added at 1, 10, 100 μg / ml for 24 hours, and then total RNA was extracted. . Total RNA was extracted using TRIZOL Reagent (Invitrogen), and the total RNA amount was determined by absorbance at 260 nm using a spectrophotometer (NanoDrop). Measurement of mRNA expression level was performed by real-time RT-PCR method based on total RNA extracted from cells. For the real-time RT-PCR method, SuperScript3 Platinum Two-Step
qRT-PCR Kit with SYBR Green (Invitrogen) was used. Specifically, 500 ng of total RNA was subjected to a reverse transcription reaction, followed by a PCR reaction (95 ° C .: 15 seconds, 60 ° C .: 30 seconds, 40 cycles). For other operations, the expression level of TGF-β1 mRNA was determined as a ratio to the expression level of GAPDH mRNA, which is an internal standard, in accordance with a predetermined method. The primers used for measuring the expression level of each gene are as follows.

ＴＧＦ−β１用のプライマーセット
ＣＣＣＴＧＣＣＣＣＴＡＣＡＴＴＴＧＧＡ（配列番号１）
ＣＧＧＧＴＴＡＴＧＣＴＧＧＴＴＧＴＡ（配列番号２）
ＧＡＰＤＨ用のプライマーセット
ＴＧＡＡＣＧＧＧＡＡＧＣＴＣＡＣＴＧＧ（配列番号３）
ＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡ（配列番号４） Primer set CCCTGCCCCTACTATTTGGA for TGF-β1 (SEQ ID NO: 1)
CGGGTTATGCTGGTTGTA (SEQ ID NO: 2)
Primer set TGAACGGGAAGCTCACTGG for GAPDH (SEQ ID NO: 3)
TCCACCACCCCTGTGCTGTA (SEQ ID NO: 4)

その結果を表１に示す。その結果、サクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスには、優れたＴＧＦ−β１抑制効果が認められた。 The results are shown in Table 1. As a result, an excellent TGF-β1 inhibitory effect was observed in the cherry extract, button pi extract, kelp extract, and swallow nest extract.

実験例２ケロイド又は肥厚性瘢痕の症状並びに痒み及び痛みに対する改善度
痒み及び痛みを伴う、ケロイド又は肥厚性瘢痕患者３０人に、サクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスを含有する処方例１〜４の軟膏又は比較例１の軟膏を患部に外用した場合の、症状並びに痒み及び痛みに対する改善度の検討を行った。ここで、症状とは、患部の大きさや厚み等の外観を意味する。患部への外用は、１日４回、２ヶ月間行った。改善度は、Ａ：著効、Ｂ：有効、Ｃ：やや有効、Ｄ：変化なし、Ｅ：悪化の５段階で評価した。その結果を表２〜３に示す。 Experimental example 2 Symptoms of keloid or hypertrophic scar and degree of improvement against itching and pain Formulation example 1 containing cherry extract, button pi extract, kelp extract and swallow nest extract to 30 patients with keloid or hypertrophic scar with itching and pain When the ointment of ˜4 or the ointment of Comparative Example 1 was externally applied to the affected area, the degree of improvement with respect to symptoms, itch and pain was examined. Here, the symptom means an appearance such as the size and thickness of the affected area. External application to the affected area was performed 4 times a day for 2 months. The degree of improvement was evaluated in five stages: A: remarkable effect, B: effective, C: somewhat effective, D: no change, E: worsening. The results are shown in Tables 2-3.

表２の結果より、比較例１を使用した場合に比べて、処方例１〜４を使用した場合の方が、患部の大きさの減少又は軽減による症状の改善度が高い。また、表３の結果より、比較例１を使用した場合に比べて、処方例１〜４を使用した場合の方が、痒み及び痛みの改善度が高い。すなわち、本発明のＴＧＦ−β抑制剤は、ケロイド又は肥厚性瘢痕患者に対して優れた症状改善効果に加え、患部における痒み及び痛みを軽減する効果を示すことが明らかとなった。 From the results in Table 2, the degree of improvement of symptoms due to the reduction or reduction in the size of the affected area is higher in the case of using Prescription Examples 1 to 4 than in the case of using Comparative Example 1. From the results in Table 3, the degree of improvement in itching and pain is higher in the case of using the prescription examples 1 to 4 than in the case of using the comparative example 1. That is, it has been clarified that the TGF-β inhibitor of the present invention exhibits an effect of reducing itch and pain in an affected area in addition to an excellent symptom improving effect for keloid or hypertrophic scar patients.

本発明のサクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスから選ばれる１種又は２種以上を含むＴＧＦ−β抑制剤は、ケロイド及び肥厚性瘢痕部位において、優れたＴＧＦ−β抑制効果を示し、ケロイド及び肥厚性瘢痕の症状を軽減し、更に、患部における強い痒み及び痛み等を、治療及び予防することができる。 The TGF-β inhibitor comprising one or more selected from the cherry extract, button pi extract, kelp extract and swallow nest extract of the present invention exhibits an excellent TGF-β inhibitory effect in keloid and hypertrophic scar sites, The symptoms of keloids and hypertrophic scars can be reduced, and further, itching and pain in the affected area can be treated and prevented.

Claims

サクラエキス、ボタンピエキス、ケルプエキス及びアナツバメ巣エキスから選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするＴＧＦ−β抑制剤。 A TGF-β inhibitor comprising one or more selected from a cherry extract, a button pi extract, a kelp extract, and a swallow nest extract.

請求項１記載のＴＧＦ−β抑制剤を含む、ケロイド及び／又は肥厚性瘢痕の治療薬。 A therapeutic agent for keloid and / or hypertrophic scar, comprising the TGF-β inhibitor according to claim 1.