JP5610846B2 - Anti-aging agent, antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, moisturizer, external preparation for skin and functional oral composition - Google Patents

Description

本発明は、ノウゼンカズラ科（Ｂｉｇｎｏｎｉａｃｅａｅ）ロウソクノキ属（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ）植物またはその抽出物を含有する抗老化剤、抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、保湿剤、皮膚外用剤および機能性経口組成物に関する。   The present invention relates to an anti-aging agent, an antioxidant, an anti-inflammatory agent, a whitening agent, a moisturizing agent, a skin external preparation, and a functional oral composition containing a Bignoniaceae plant or a extract thereof. .

加齢、疾患、ストレス、紫外線などによるシワ、シミ、皮膚の弾力低下といった皮膚症状の要因として、乾燥、細胞機能低下、紫外線によるメラニン産生や色素沈着、真皮マトリックス成分の減少や変性、紫外線等による細胞の酸化障害などが挙げられる。このような皮膚症状を防止・改善するために、様々な有効成分の検索および配合検討がなされてきた。特に天然由来成分は、様々な薬理作用や美容効果を有することが知られ、これまでにも数多くの植物や菌類等の抽出物の皮膚外用剤、経口組成物への応用が検討されてきた。 Causes of skin symptoms such as aging, disease, stress, wrinkles due to ultraviolet rays, blemishes, reduced skin elasticity, dryness, decreased cellular function, melanin production and pigmentation due to ultraviolet rays, decrease or degeneration of dermal matrix components, ultraviolet rays, etc. Examples include cell oxidative damage. In order to prevent and ameliorate such skin symptoms, various active ingredients have been searched and formulated. In particular, naturally-derived components are known to have various pharmacological and cosmetic effects, and so far, applications of extracts such as plants and fungi to skin external preparations and oral compositions have been studied.

例えば、皮膚の老化防止、改善作用を有する皮膚外用剤を得るために、真皮線維芽細胞の賦活作用を有する成分として金時草由来成分（特許文献１参照）等が、活性酸素消去作用や過酸化脂質の生成抑制作用を有する抗酸化剤を得るために、ラジカル消去作用を有する成分としてスイートピー抽出物（特許文献２参照）等がそれぞれすでに知られている。皮膚で炎症が生じるメカニズムとしては、皮膚中のヒアルロン酸がヒアルロニダーゼにより分解されることにより、皮膚等に存在する肥満細胞や血中に存在する好塩基球細胞等の炎症系細胞の透過性が高まるためと考えられており、このヒアルロニダーゼを阻害する抗炎症成分として、ゴジアオイ属シスタスインカヌス由来成分（特許文献３参照）等が知られている。また、美白剤としてはアブラナ科ケール由来成分（特許文献４参照）等が、保湿剤としてはアカザ科ソルトブッシュ由来成分（特許文献５参照）等が知られている。   For example, in order to obtain a skin external preparation having an anti-aging and improving action on the skin, an ingredient derived from Kintoki grass (see Patent Document 1) as an ingredient having an activating action of dermal fibroblasts, an active oxygen scavenging action and an excessive effect. Sweet pea extract (see Patent Document 2) and the like are already known as components having a radical scavenging action in order to obtain an antioxidant having a lipid oxide production inhibitory action. As a mechanism of inflammation in the skin, hyaluronic acid in the skin is decomposed by hyaluronidase, so that permeability of inflammatory cells such as mast cells existing in the skin and basophil cells existing in the blood is increased. For this reason, as an anti-inflammatory component that inhibits this hyaluronidase, a component derived from the genus Cistus incanus (see Patent Document 3) and the like are known. Further, as a whitening agent, a cruciferous kale-derived component (see Patent Document 4) or the like is known, and as a moisturizer, a red crustacean salt bush-derived component (see Patent Document 5) or the like is known.

特開２００８−１７４４５９号公報JP 2008-174459 A 特開２００８−２８５６３７号公報JP 2008-285637 A 特開２００８−８８０９７号公報JP 2008-88097 A 特開２００４−９１３９６号公報JP 2004-91396 A 特開２００６−２４８９３２号公報JP 2006-248932 A

このように、これまでに様々な天然由来成分が応用されている。しかし、天然由来成分の中には、未だその効果が知られていないものも数多く存在し、優れた抗老化作用、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、保湿作用を有する有効成分の開発が期待されていた。   Thus, various naturally-derived components have been applied so far. However, there are many naturally-derived ingredients whose effects are not yet known, and the development of active ingredients with excellent anti-aging, antioxidant, anti-inflammatory, whitening and moisturizing effects has been developed. It was expected.

本発明者らは、天然由来の種々の成分について検討を行った結果、従来はその効果が知られていなかったノウゼンカズラ科ロウソクノキ属植物またはその抽出物に優れた抗老化作用、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、保湿作用が存在することを見出し、さらに検討を重ねて本発明を完成させるに至った。   As a result of studying various components derived from nature, the present inventors have found that the anti-aging action, antioxidant action, The present inventors have found that an inflammatory action, a whitening action, and a moisturizing action exist, and have further studied to complete the present invention.

すなわち、本発明は、ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属植物より選ばれる１種または２種以上の植物またはその抽出物を含有する抗老化剤、抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、保湿剤、皮膚外用剤および機能性経口組成物に関する。   That is, the present invention relates to an anti-aging agent, an antioxidant, an anti-inflammatory agent, a whitening agent, a moisturizing agent, and an external preparation for skin containing one or two or more plants selected from the plant of the genus Candaceae, or an extract thereof. And functional oral compositions.

本発明によれば、ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属植物より選ばれる１種または２種以上の植物またはその抽出物を配合することにより、優れた効果を有する抗老化剤、抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、保湿剤、皮膚外用剤および機能性経口組成物を提供することができる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the anti-aging agent, antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening which had the outstanding effect by mix | blending the 1 type, 2 or more types of plant chosen from the genus Candaceae, or its extract. Agents, moisturizers, external preparations for skin and functional oral compositions can be provided.

本発明で用いるロウソクノキ属植物は、ノウゼンカズラ科に属する、原産国をパナマとする樹高３〜５ｍほどの常緑低木である。幹に直接花をつける幹生花であり、花のあとには蝋質の円柱状の大きな実をつける。特にロウソクノキ（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ ｃｅｒｅｉｆｅｒａ）では３０〜１２０ｃｍにもなる細長い実がなり、これがろうそくのようにみえることから名前の由来ともなっている。ろうそくの原料とはならない。   The plant of the genus Candlewood used in the present invention is an evergreen shrub belonging to the genus Cranaceae and having a tree height of about 3 to 5 m and having a country of origin in Panama. It is a stem flower that directly attaches a flower to the trunk, and a large waxy columnar fruit follows the flower. In particular, in the case of candle berries (Parmentiera celifera), it has a long and narrow fruit of 30-120 cm, and this is the origin of the name because it looks like a candle. It is not a raw material for candles.

本発明は、ロウソクノキ属植物であれば特に限定されないが、本発明の効果の点から、適当なものとして、ロウソクノキが挙げられる。   The present invention is not particularly limited as long as it is a candle genus plant, but from the viewpoint of the effect of the present invention, a candle is a suitable one.

これらロウソクノキ属植物を使用する際は、その使用部位には特に制限はなく、葉、根、茎、幹、花、果実などの任意の部位を使用することができ、複数の部位を組み合わせて使用してもよいが、特に果実を使うことが好ましい。   When using these candle genus plants, there are no particular restrictions on the use site, and any site such as leaves, roots, stems, trunks, flowers, fruits can be used, and multiple sites are used in combination. However, it is particularly preferable to use fruits.

抽出の際は、植物を生のまま用いてもよいが、抽出効率を考えると、細切、乾燥、粉砕等の処理を行った後に抽出を行うことが好ましい。   In the extraction, the plant may be used as it is, but considering the extraction efficiency, it is preferable to perform the extraction after performing processing such as shredding, drying, and pulverization.

抽出は、任意の抽出溶媒に所定時間浸漬して行うことができる。抽出溶媒は、必要に応じて加熱してもよい。あるいは、超臨界流体や亜臨界流体を用いた抽出方法でも行うことができる。抽出効率を上げるため、攪拌したり抽出溶媒中でホモジナイズしたりしてもよい。抽出温度としては、５℃程度から抽出溶媒の沸点以下の温度とするのが適切である。抽出時間は、抽出溶媒の種類や抽出温度によっても異なるが、１時間〜１４日間程度とするのが適切である。   The extraction can be performed by immersing in an arbitrary extraction solvent for a predetermined time. The extraction solvent may be heated as necessary. Alternatively, extraction can be performed using a supercritical fluid or a subcritical fluid. In order to increase the extraction efficiency, the mixture may be stirred or homogenized in an extraction solvent. The extraction temperature is suitably about 5 ° C. to the boiling point of the extraction solvent. The extraction time varies depending on the type of extraction solvent and the extraction temperature, but is suitably about 1 hour to 14 days.

抽出溶媒としては、水の他、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール等の低級アルコール；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール；エチルエーテル、プロピルエーテル等のエーテル類；酢酸ブチル、酢酸エチル等のエステル類；アセトン、エチルメチルケトン等のケトン類などの溶媒を用いることができる。これらは、単独で用いられる他、任意の２種以上を組み合わせて用いてもよい。生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等を用いてもよい。さらに、水や二酸化炭素、エチレン、プロピレン、エタノール、メタノール、アンモニアなどの１種または２種以上の超臨界液体や亜臨界液体を用いてもよい。   As an extraction solvent, in addition to water, lower alcohols such as methanol, ethanol, propanol and isopropanol; polyhydric alcohols such as 1,3-butylene glycol, propylene glycol, dipropylene glycol and glycerin; ethers such as ethyl ether and propyl ether Solvents such as esters; esters such as butyl acetate and ethyl acetate; ketones such as acetone and ethyl methyl ketone can be used. These may be used alone or in combination of any two or more. Saline, phosphate buffer, phosphate buffered saline, and the like may be used. Furthermore, you may use 1 type, or 2 or more types of supercritical liquids and subcritical liquids, such as water, a carbon dioxide, ethylene, propylene, ethanol, methanol, ammonia.

ロウソクノキ属植物の上記溶媒による抽出物は、そのままでも使用することができるが、一定期間そのまま静置して熟成させて用いてもよいし、濃縮、乾固した物を水や極性溶媒に再度溶解して使用することもできる。あるいは、これらの生理作用を損なわない範囲で、脱色、脱臭、脱塩等の精製処理や、カラムクロマトグラフィー等による分画処理を行った後に用いてもよい。ロウソクノキ属植物の前記抽出物やその処理物および分画物は、各処理および分画後に凍結乾燥し、用時に溶媒に溶解して用いることもできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。   An extract of the above-mentioned plant belonging to the genus C. genus can be used as it is, but it may be used by allowing it to stand for a certain period of time and ripening, or it may be dissolved and dissolved again in water or a polar solvent. Can also be used. Alternatively, it may be used after performing purification treatment such as decolorization, deodorization, and desalting, and fractionation treatment by column chromatography or the like within a range not impairing these physiological functions. The above-mentioned extract of the plant belonging to the genus Candle and its treated products and fractions can be freeze-dried after each treatment and fractionation and dissolved in a solvent at the time of use. It can also be used by encapsulating in vesicles such as liposomes or microcapsules.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物は、優れた抗老化作用、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、保湿作用を有し、抗老化剤、抗酸化剤、抗炎症剤、美白剤、保湿剤、皮膚外用剤および機能性経口組成物として利用することができる。   The candle genus plant or its extract has an excellent anti-aging action, antioxidant action, anti-inflammatory action, whitening action, moisturizing action, anti-aging agent, antioxidant, anti-inflammatory agent, whitening agent, moisturizing agent, It can be used as an external preparation for skin and a functional oral composition.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物を有効成分とする抗老化剤は、優れたヒト真皮線維芽細胞賦活作用およびヒト表皮角化細胞賦活作用を有し、老化症状の防止・改善に優れた効果を発揮する。   An anti-aging agent comprising a candle genus plant or an extract thereof as an active ingredient has an excellent human dermal fibroblast activation action and human epidermal keratinocyte activation action, and exhibits an excellent effect in preventing and improving aging symptoms. To do.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物を有効成分とする抗酸化剤は、優れたＤＰＰＨラジカル消去作用、ＳＯＤ様活性（スーパーオキサイドアニオン消去作用）およびヒト表皮角化細胞過酸化脂質耐性を有し、優れた抗酸化効果を発揮する。   Antioxidants containing a candle genus plant or its extract as an active ingredient have excellent DPPH radical scavenging activity, SOD-like activity (superoxide anion scavenging activity) and resistance to lipid peroxidation of human epidermal keratinocytes. Demonstrates antioxidant effect.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物を有効成分とする抗炎症剤は、優れたヒアルロニダーゼ阻害作用を有し、優れた抗炎症効果を発揮する。   An anti-inflammatory agent comprising a candle genus plant or an extract thereof as an active ingredient has an excellent hyaluronidase inhibitory action and exhibits an excellent anti-inflammatory effect.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物を有効成分とする美白剤は、優れたＢ１６マウスメラノーマ細胞メラニン産生抑制作用およびヒト表皮メラニン細胞チロシナーゼ活性阻害作用を有し、優れた美白効果を発揮する。   A whitening agent comprising a candle genus plant or an extract thereof as an active ingredient has an excellent B16 mouse melanoma cell melanin production inhibitory action and human epidermal melanocyte tyrosinase activity inhibitory action, and exhibits an excellent whitening effect.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物を有効成分とする保湿剤は、優れたヒト真皮線維芽細胞ヒアルロン酸産生促進作用およびヒト表皮角化細胞アルギナーゼ活性促進作用を有し、優れた保湿効果を発揮する。   A moisturizing agent containing a candle genus plant or an extract thereof as an active ingredient has an excellent human dermal fibroblast hyaluronic acid production promoting action and human epidermal keratinocyte arginase activity promoting action, and exhibits an excellent moisturizing effect.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物を含有する皮膚外用剤は、優れた抗老化作用、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、保湿作用を発揮する。   An external preparation for skin containing a candle genus plant or an extract thereof exhibits excellent anti-aging, antioxidant, anti-inflammatory, whitening and moisturizing effects.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物を含有する機能性経口組成物は、優れた抗老化作用、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、保湿作用を発揮する。   A functional oral composition containing a candle genus plant or an extract thereof exhibits an excellent anti-aging action, antioxidant action, anti-inflammatory action, whitening action, and moisturizing action.

これらの各剤は、ロウソクノキ属植物またはその抽出物を有効成分として含む限り、その形態およびその他成分の配合の有無等については、なんら制限されない。形態については、液状、ペースト状、ゲル状、固体状、粉末状等の任意の形態を、その用途等に応じて選択でき、その形態とするために必要なビヒクル（賦形剤）、溶剤、その他の一般的な添加剤（酸化防止剤、着色剤、分散剤等）を任意に含むことができる。   As long as each of these agents contains a candle genus plant or an extract thereof as an active ingredient, the form and presence / absence of addition of other ingredients are not limited at all. As for the form, any form such as liquid, paste, gel, solid, powder, etc. can be selected according to its use and the like, vehicle (excipient), solvent, Other general additives (antioxidants, colorants, dispersants, etc.) can optionally be included.

ここで、皮膚外用剤とは、化粧料、医薬部外品、外用医薬品等の、皮膚または毛髪に外用される全ての外用組成物を意味している。機能性経口組成物についても、医薬品、食品、飲料等の種類を問わず、経口により摂取される全ての組成物を意味する。   Here, the external preparation for skin means all external compositions for external use on the skin or hair, such as cosmetics, quasi-drugs, and external medicines. The functional oral composition also means all compositions that are taken orally regardless of the type of pharmaceuticals, foods, beverages and the like.

皮膚外用剤の剤型は任意であり、例えば、ローションなどの可溶化系やカラミンローション等の分散系、クリームや乳液などの乳化系として提供することができる。さらに、噴射剤と共に充填するエアゾール形態、軟膏剤、パップ剤などの種々の剤型で提供することもできる。   The dosage form of the external preparation for skin is arbitrary, and can be provided, for example, as a solubilizing system such as lotion, a dispersion system such as calamine lotion, or an emulsifying system such as cream or emulsion. Further, it can be provided in various dosage forms such as an aerosol form, an ointment, and a poultice filled with a propellant.

具体的には、乳液、クリーム、ローション、化粧水、パック、美容液、洗浄料、メイクアップ化粧料等の各種化粧料；液剤、軟膏、粉末、顆粒、エアゾール剤、貼付剤、パップ剤等の様々な形態の化粧料、医薬部外品や外用医薬品などが例示できる。   Specifically, various cosmetics such as emulsions, creams, lotions, lotions, packs, cosmetic liquids, cleaning agents, makeup cosmetics, etc .; liquids, ointments, powders, granules, aerosols, patches, poultices, etc. Various forms of cosmetics, quasi drugs, topical medicines, and the like can be exemplified.

機能性経口組成物の形態も任意であり、特に限定されることはない。具体的には、飲料を含む一般食品；錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の健康食品（サプリメント）または機能性食品；錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、エキス等の経口医薬品などが例示できる。   The form of the functional oral composition is also arbitrary and is not particularly limited. Specifically, general foods including beverages; health foods (supplements) such as tablets, capsules, granules, powders or functional foods; oral drugs such as tablets, capsules, granules, powders, syrups, extracts Etc. can be exemplified.

皮膚外用剤または機能性経口組成物には、ロウソクノキ属植物またはその抽出物の他に、その用途と必要に応じて、医薬品、医薬部外品、皮膚化粧料、毛髪用化粧料および洗浄料等に通常配合される任意の成分、例えば水、油性成分、保湿剤、粉体、色素、乳化剤、可溶化剤、ゲル化剤、洗浄剤、紫外線吸収剤、抗炎症剤、増粘剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、薬剤（薬効成分）、香料、樹脂、防菌防かび剤、抗酸化剤、アルコール類等を適宜配合することができる。さらに、本発明の効果を損なわない範囲において、他の保湿剤、抗老化剤、美白剤、抗酸化剤、抗炎症剤および痩身剤あるいはロウソクノキ属植物以外の植物またはその抽出物との併用も可能である。   For the topical skin preparation or functional oral composition, in addition to the plant of the genus Candle genus or its extract, depending on its use and necessity, pharmaceuticals, quasi-drugs, skin cosmetics, hair cosmetics and cleansing agents, etc. Optional ingredients usually formulated in water, such as water, oily ingredients, moisturizers, powders, pigments, emulsifiers, solubilizers, gelling agents, cleaning agents, UV absorbers, anti-inflammatory agents, thickeners, pH adjustment Agents, chelating agents, drugs (medicinal ingredients), fragrances, resins, antibacterial and antifungal agents, antioxidants, alcohols and the like can be appropriately blended. Furthermore, other moisturizers, anti-aging agents, whitening agents, antioxidants, anti-inflammatory agents and slimming agents, or plants other than those of the genus Candle can be used, or extracts thereof, as long as the effects of the present invention are not impaired. It is.

飲食品等の経口組成物の場合も、経口用として通常用いられる各種成分との組み合わせにおいて、特に限定されるものはない。   Also in the case of oral compositions such as foods and drinks, there is no particular limitation in combination with various components that are usually used for oral use.

ロウソクノキ属植物またはその抽出物の皮膚外用剤または機能性経口組成物への配合量は、種類や目的等によって調整することができるが、効果や安定性などの点から、全量に対して、固形分換算で、０．０００１〜１０．０質量％が好ましく、より好ましくは、０．００１〜５．０質量％であり、さらに好ましくは０．０１〜５質量％であり、一層好ましくは０．１〜５質量％である。   The blending amount of the candle genus plant or its extract into the topical skin preparation or functional oral composition can be adjusted depending on the type, purpose, etc., but from the standpoint of effects and stability, In terms of minutes, 0.0001 to 10.0% by mass is preferable, more preferably 0.001 to 5.0% by mass, still more preferably 0.01 to 5% by mass, and still more preferably 0.00. 1 to 5% by mass.

以下にロウソクノキ属植物抽出物の調製例、抗老化効果、抗酸化効果、抗炎症効果、美白効果、保湿効果を評価するための試験方法、皮膚外用剤、機能性食品としての処方例についてさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれによってなんら限定されるものではない。   The following is a more detailed example of the preparation of a plant genus plant extract, test method for evaluating anti-aging effect, antioxidant effect, anti-inflammatory effect, whitening effect, moisturizing effect, skin external preparation, functional food However, the technical scope of the present invention is not limited by this.

［抽出物１：熱水抽出物］
ロウソクノキ（部位：果実）を乾燥させて粉砕し、サンプル質量の２０倍量の精製水を加えてオートクレーブにて２０分間、１２０度に加温して抽出した。温度の高い状態を保って吸引濾過により不溶物を取り除いた後、凍結乾燥を行って抽出物を得た。 [Extract 1: Hot water extract]
The candle (part: fruit) was dried and pulverized, purified water 20 times the sample mass was added, and the mixture was extracted by heating at 120 ° C. for 20 minutes in an autoclave. An insoluble material was removed by suction filtration while maintaining a high temperature, and then lyophilized to obtain an extract.

［抽出物２：エタノール抽出物］
ロウソクノキ（部位：果実）を乾燥させて粉砕し、サンプル質量の２０倍量の５０容量％エタノールを加えて室温にて攪拌しながら３時間抽出した後、濾過により不溶物を取り除いた。減圧濃縮後、凍結乾燥を行って抽出物を得た。 [Extract 2: Ethanol extract]
Candle candle (part: fruit) was dried and pulverized, 50 volume% ethanol of 20 times the mass of the sample was added and extracted at room temperature with stirring for 3 hours, and then insoluble matter was removed by filtration. After concentration under reduced pressure, freeze-drying was performed to obtain an extract.

上記抽出物を用いて、ロウソクノキについて抗老化効果・抗酸化効果の評価を行った。なお各評価結果に記載した＊及び＊＊は、ｔ検定における有意確率Ｐ値に対し、有意確率５％未満（Ｐ＜０．０５）を＊で、有意確率１％未満（Ｐ＜０．０１）を＊＊でそれぞれ表したものである。   Using the above extract, the anti-aging effect and the antioxidant effect of the candle were evaluated. Note that * and ** described in each evaluation result indicate that the significance probability P value in the t-test is less than 5% (P <0.05) with a significance probability of *, and less than 1% significance probability (P <0.01). ) Is represented by **.

＜抗老化効果（ヒト真皮線維芽細胞賦活作用）＞
ロウソクノキ抽出物のヒト真皮線維芽細胞賦活作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Anti-aging effect (human dermal fibroblast activation)>
Evaluation of the human dermal fibroblast activation effect of the candle extract was carried out by the following method. Extracts 1 and 2 were used as samples.

正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当り２．０×１０^４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には５質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用いた。２４時間培養後、表１および表２に示す各濃度となるよう各抽出物を添加した０．５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地に交換し、さらに２４時間培養した。次に１００μｇ／ｍＬとなるよう培地にて調整したＭＴＴ試薬を、上清を除いた細胞に添加し、約２時間培養した。最後に２−プロパノールにて生じたフォルマザンを抽出し、マイクロプレートリーダーにて５５０ｎｍの吸光度を測定した。同時に濁度として６５０ｎｍの吸光度を測定し、両測定値の差を用いて細胞賦活作用を評価した。各評価結果を、試料無添加のコントロールにおける細胞賦活作用を１００とした相対値にて表１および表２に示す。 Normal human dermal fibroblasts were seeded in a 96-well microplate at 2.0 × 10 ⁴ cells per well. Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 5% by weight fetal bovine serum (FBS) was used as the seeding medium. After culturing for 24 hours, the medium was exchanged with 0.5% by mass FBS-added DMEM medium to which each extract was added so as to have the concentrations shown in Tables 1 and 2, and further cultured for 24 hours. Next, the MTT reagent adjusted with the culture medium so that it might be set to 100 microgram / mL was added to the cell except the supernatant, and it culture | cultivated for about 2 hours. Finally, formazan produced in 2-propanol was extracted, and the absorbance at 550 nm was measured with a microplate reader. At the same time, the absorbance at 650 nm was measured as turbidity, and the cell activation effect was evaluated using the difference between the two measured values. The evaluation results are shown in Tables 1 and 2 as relative values with the cell activation effect in the control with no sample added being taken as 100.

表１および表２より明らかなように、ロウソクノキ抽出物には、有意なヒト真皮線維芽細胞賦活作用が認められた。   As is clear from Tables 1 and 2, a significant effect of activating human dermal fibroblasts was observed in the candle extract.

＜抗老化効果（ヒト表皮角化細胞賦活作用）＞
ロウソクノキ抽出物のヒト表皮角化細胞賦活作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１を用いた。 <Anti-aging effect (human epidermal keratinocyte activation action)>
Evaluation of the human epidermis keratinocyte activation effect of the candle extract was performed by the method shown below. Extract 1 was used as a sample.

ヒト表皮角化細胞ＨａＣａＴを１ウェル当り２．０×１０^４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には５質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用いた。２４時間培養後、表３に示す各濃度となるように抽出物１を添加した５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地に交換し、さらに２４時間培養した。次に１００μｇ／ｍＬとなるよう培地にて調整したＭＴＴ試薬を、上清を除いた細胞に添加し、約２時間培養した。最後に２−プロパノールにて生じたフォルマザンを抽出し、５５０ｎｍの吸光度を測定した。同時に濁度として６５０ｎｍの吸光度を測定し、両測定値の差を用いて細胞賦活作用を評価した。評価結果を試料無添加のコントロールにおける細胞賦活作用を１００とした時の相対値にて表３に示す。 Human epidermal keratinocytes HaCaT were seeded in a 96-well microplate so as to be 2.0 × 10 ⁴ cells per well. Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 5% by weight fetal bovine serum (FBS) was used as the seeding medium. After culturing for 24 hours, the medium was replaced with 5% by mass FBS-added DMEM medium to which the extract 1 was added so as to have each concentration shown in Table 3, and further cultured for 24 hours. Next, the MTT reagent adjusted with the culture medium so that it might be set to 100 microgram / mL was added to the cell except the supernatant, and it culture | cultivated for about 2 hours. Finally, formazan produced in 2-propanol was extracted and the absorbance at 550 nm was measured. At the same time, the absorbance at 650 nm was measured as turbidity, and the cell activation effect was evaluated using the difference between the two measured values. The evaluation results are shown in Table 3 as relative values when the cell activation effect in the control with no sample added is taken as 100.

表３より明らかなように、ロウソクノキ抽出物には、有意なヒト表皮角化細胞賦活作用が認められた。   As is clear from Table 3, a significant effect of activating keratinocytes on human epidermis was observed in the candle extract.

表１〜３に示したとおり、ロウソクノキ抽出物は、ヒト真皮線維芽細胞賦活作用およびヒト表皮角化細胞賦活作用を示すことから、優れた抗老化効果を発揮する。   As shown in Tables 1 to 3, the candle extract extracts exhibit an excellent anti-aging effect since it exhibits a human dermal fibroblast activation action and a human epidermal keratinocyte activation action.

＜抗酸化効果（ＤＰＰＨラジカル消去作用）＞
ロウソクノキ抽出物のＤＰＰＨラジカル消去作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Antioxidant effect (DPPH radical scavenging action)>
The DPPH radical scavenging action of the candle extract was evaluated by the following method. Extracts 1 and 2 were used as samples.

各抽出物を５０質量％エタノールにて表４および表５に示す各濃度に調製したサンプル溶液１００μＬに、０．２ｍＭの１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）エタノール溶液１００μＬを添加し、よく混合した後、室温、暗所にて１０分静置し、ＤＰＰＨラジカルに由来する５１６ｎｍの吸光度を測定した。試料無添加時の吸光度を（Ａ）、試料添加時の吸光度を（Ｂ）とした時、ＤＰＰＨラジカル消去率は次式に定義される。
消去率＝｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００
評価結果を表４および表５に示す。 100 μL of each extract was adjusted to the concentration shown in Table 4 and Table 5 with 50% by mass of ethanol, and 100 μL of 0.2 mM 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) ethanol solution was added. After adding and mixing well, the mixture was allowed to stand in the dark at room temperature for 10 minutes, and the absorbance at 516 nm derived from the DPPH radical was measured. When the absorbance when no sample is added is (A) and the absorbance when the sample is added is (B), the DPPH radical elimination rate is defined by the following equation.
Erase rate = {1- (B) / (A)} × 100
The evaluation results are shown in Table 4 and Table 5.

表４および表５より明らかなように、ロウソクノキ抽出物には、高いＤＰＰＨラジカル消去作用が認められた。   As is apparent from Tables 4 and 5, the candle extract was found to have a high DPPH radical scavenging action.

＜抗酸化効果（ＳＯＤ様活性〈スーパーオキサイドアニオン消去作用〉）＞
ロウソクノキ抽出物のＳＯＤ様活性（スーパーオキサイドアニオン消去作用）の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Antioxidant effect (SOD-like activity <superoxide anion scavenging action>)>
The SOD-like activity (superoxide anion scavenging action) of the candle extract was evaluated by the method shown below. Extracts 1 and 2 were used as samples.

各抽出物を、ＨＡＮＫ’Ｓ（＋）溶液にて表６および表７に示す各濃度に調製したサンプル溶液２５μＬに、０．２５ｍＭのＷＳＴ−１、及び１ｍＭヒポキサンチンを含むＨＡＮＫ’Ｓ（＋）溶液７５μＬを添加した。さらに、キサンチンオキシダーゼ２５μＬ（０．００７５Ｕｎｉｔｓ）を添加し、３７℃にて１５分間反応後、４５０ｎｍの吸光度を測定した。試料無添加時の吸光度を（Ａ）、試料添加時の吸光度を（Ｂ）とした時、スーパーオキサイドアニオン消去率は次式に定義される。
消去率（％）＝｛１−（Ｂ）／（Ａ）｝×１００
評価結果を表６および表７に示す。 Each extract was added to 25 μL of a sample solution prepared at a concentration shown in Table 6 and Table 7 using a HANK ′S (+) solution, and HANK ′S (+) containing 0.25 mM WST-1 and 1 mM hypoxanthine. ) 75 μL of solution was added. Furthermore, 25 μL (0.0075 Units) of xanthine oxidase was added, and after reacting at 37 ° C. for 15 minutes, the absorbance at 450 nm was measured. When the absorbance when no sample is added is (A) and the absorbance when the sample is added is (B), the superoxide anion elimination rate is defined by the following equation.
Erase rate (%) = {1- (B) / (A)} × 100
The evaluation results are shown in Table 6 and Table 7.

表６および表７より明らかなように、ロウソクノキ抽出物には、高いＳＯＤ様活性（スーパーオキサイドアニオン消去作用）が認められた。   As apparent from Table 6 and Table 7, the candle extract was found to have a high SOD-like activity (superoxide anion scavenging action).

＜抗酸化効果（ヒト表皮角化細胞過酸化脂質耐性）＞
ロウソクノキ抽出物のヒト表皮角化細胞過酸化脂質耐性の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Antioxidant effect (resistant to human epidermal keratinocyte lipid peroxide)>
Evaluation of the resistance of human keratinocyte lipid peroxide to the candlestick extract was performed by the following method. Extracts 1 and 2 were used as samples.

ヒト表皮角化細胞ＨａＣａＴを１ウェル当り２．０×１０^４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には１０質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用いた。２４時間後、１０質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地にて表８および表９に示す各濃度に調整したサンプル培養液に交換し、さらに２４時間培養した。任意濃度のｔ−ブチルヒドロペルオキシドを添加したＨＡＮＫ’Ｓ（＋）溶液に交換し、２時間培養した。さらに、１５０μｇ／ｍＬニュートラルレッドを含有するＰＢＳ（−）に交換し、３７℃にて２時間培養した。次に１容量％酢酸を含む５０容量％エタノール水溶液に交換し、細胞内に取りこまれたニュートラルレッドを抽出し、抽出液の５４０ｎｍの吸光度を測定した。評価結果をｔ−ブチルヒドロペルオキシド無添加のコントロールにおける細胞生存率を１００としたときの相対値にて表８および表９に示す。 Human epidermal keratinocytes HaCaT were seeded in a 96-well microplate so as to be 2.0 × 10 ⁴ cells per well. Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 10% by weight fetal bovine serum (FBS) was used as the seeding medium. After 24 hours, the medium was replaced with a sample culture solution adjusted to each concentration shown in Table 8 and Table 9 in 10% by mass FBS-added DMEM medium, and further cultured for 24 hours. The solution was replaced with a HANK'S (+) solution to which an arbitrary concentration of t-butyl hydroperoxide was added, and cultured for 2 hours. Furthermore, it replaced | exchanged for PBS (-) containing 150 microgram / mL neutral red, and culture | cultivated at 37 degreeC for 2 hours. Next, it exchanged for 50 volume% ethanol aqueous solution containing 1 volume% acetic acid, neutral red taken in the cell was extracted, and the light absorbency of 540 nm of the extract was measured. The evaluation results are shown in Tables 8 and 9 as relative values when the cell viability in the control without addition of t-butyl hydroperoxide is taken as 100.

表８および表９より明らかなように、ロウソクノキ抽出物には、有意なヒト表皮角化細胞過酸化脂質耐性が認められた。   As is apparent from Tables 8 and 9, the candle extract was found to have significant resistance to lipid peroxidation of human epidermal keratinocytes.

表４〜表９に示したとおり、ロウソクノキ抽出物は、ＤＰＰＨラジカル消去作用、ＳＯＤ様活性（スーパーオキサイドアニオン消去作用）およびヒト表皮角化細胞過酸化脂質耐性を示すことから、優れた抗酸化効果を発揮する。   As shown in Tables 4 to 9, since the candle extract has DPPH radical scavenging action, SOD-like activity (superoxide anion scavenging action) and human epidermal keratinocyte lipid peroxide resistance, it has an excellent antioxidant effect. Demonstrate.

＜抗炎症効果（ヒアルロニダーゼ阻害作用）＞
ロウソクノキ抽出物のヒアルロニダーゼ阻害作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Anti-inflammatory effect (hyaluronidase inhibitory action)>
Evaluation of the hyaluronidase inhibitory action of the candle extract was carried out by the following method. Extracts 1 and 2 were used as samples.

ヒアルロン酸カリウム塩（ヒト臍の緒由来）を０．９ｍｇ／ｍＬになるよう０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解し、基質溶液とした。ヒアルロニダーゼ（ウシ精巣由来）を５３００ｕｎｉｔ／ｍＬとなるよう０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解し、酵素溶液とした。各抽出物を緩衝液にて表１０および表１１に示す各濃度に調製したサンプル溶液０．１ｍＬ及び酵素溶液０．０３ｍＬを試験管にとり、３７℃で２０分間反応させた。次に活性化剤を０．０６ｍＬ加え、３７℃で２０分間反応させた。さらに基質溶液を０．１５ｍＬ加え、３７℃で１時間反応させた。０．４ＮのＮａＯＨを０．０６ｍＬ加え、反応停止後すぐに氷冷し、ホウ酸緩衝液（ｐＨ９．１）を０．０６ｍＬ添加し、３分間煮沸後さらに氷冷した。ｐ−ＤＡＢＡ溶液を２．０ｍＬ添加し、３７℃で２０分間反応させた後、反応溶液を９６ウェルマイクロプレートに移し、５８５ｎｍにおける吸光度を測定した。コントロールには、試料無添加の緩衝溶液を用い、ポジティブコントロールにはグリチルリチン酸２カリウムを１１．７５ｍｇ／ｍＬとなるように添加した緩衝溶液を用いた。ヒアルロニダーゼの活性が阻害されると分解産物であるＮ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）が減少し、ｐ−ＤＡＢＡによる吸光度が低くなる。ヒアルロニダーゼ阻害作用は次式に定義される。
阻害率（％）＝（コントロール吸光度−サンプル吸光度）／コントロール吸光度×１００
評価結果を表１０および表１１に示す。 Hyaluronic acid potassium salt (derived from human umbilical cord) was dissolved in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.0) to a concentration of 0.9 mg / mL to obtain a substrate solution. Hyaluronidase (derived from bovine testis) was dissolved in 0.1 M phosphate buffer (pH 7.0) to 5300 unit / mL to obtain an enzyme solution. 0.1 mL of the sample solution and 0.03 mL of the enzyme solution prepared by adjusting each concentration of each extract to the concentrations shown in Table 10 and Table 11 were placed in a test tube and reacted at 37 ° C. for 20 minutes. Next, 0.06 mL of an activator was added and reacted at 37 ° C. for 20 minutes. Further, 0.15 mL of the substrate solution was added and reacted at 37 ° C. for 1 hour. 0.06 mL of 0.4 N NaOH was added, and ice-cooled immediately after the reaction was stopped. Boric acid buffer (pH 9.1) was added in an amount of 0.06 mL, boiled for 3 minutes, and further ice-cooled. After 2.0 mL of p-DABA solution was added and reacted at 37 ° C. for 20 minutes, the reaction solution was transferred to a 96-well microplate, and the absorbance at 585 nm was measured. For the control, a buffer solution containing no sample was used, and for the positive control, a buffer solution added with dipotassium glycyrrhizinate to 11.75 mg / mL was used. When the activity of hyaluronidase is inhibited, the degradation product N-acetylglucosamine (GlcNAc) decreases, and the absorbance by p-DABA decreases. Hyaluronidase inhibitory action is defined by the following equation.
Inhibition rate (%) = (control absorbance−sample absorbance) / control absorbance × 100
The evaluation results are shown in Table 10 and Table 11.

表１０〜表１１に示したとおり、ロウソクノキ抽出物は、高いヒアルロニダーゼ阻害作用を示すことから、優れた抗炎症効果を発揮する。   As shown in Tables 10 to 11, since the candle extract has a high hyaluronidase inhibitory action, it exhibits an excellent anti-inflammatory effect.

＜美白効果（Ｂ１６マウスメラノーマ細胞メラニン産生抑制作用）＞
ロウソクノキ抽出物のＢ１６マウスメラノーマ細胞メラニン産生抑制作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１を用いた。 <Whitening effect (B16 mouse melanoma cell melanin production inhibitory effect)>
Evaluation of the B16 mouse melanoma cell melanin production inhibitory effect of the candle extract was carried out by the following method. Extract 1 was used as a sample.

Ｂ１６マウスメラノーマ細胞（Ｂ１６Ｆ０細胞）を１ディッシュ当り１８０００個となるように９０ｍｍディッシュに播種した。播種培地には５質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用いた。２４時間培養後、表１２に示す各濃度となるように抽出物１を添加した５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地に交換し、さらに５日間培養した。培養終了後、トリプシン処理にて細胞をはがし、１．５ｍＬマイクロチューブに移して遠心操作して細胞沈殿物を得た。得られた沈殿物は下記判定表を基にその黒化状況を肉眼判定した。評価ではネガティブコントロールに５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地、ポジティブコントロールに５０ｍＭ乳酸ナトリウムを含有する５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地を用いた。これらの目視判定結果は判定５、及び判定１とし、サンプル判定の指標とした。目視判定は表１３に示す通り、５段階評価した。評価結果を表１２に示す   B16 mouse melanoma cells (B16F0 cells) were seeded in a 90 mm dish so that there were 18000 cells per dish. Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 5% by weight fetal bovine serum (FBS) was used as the seeding medium. After culturing for 24 hours, the medium was replaced with a 5% by mass FBS-added DMEM medium to which the extract 1 was added so as to have each concentration shown in Table 12, and further cultured for 5 days. After completion of the culture, cells were peeled off by trypsin treatment, transferred to a 1.5 mL microtube, and centrifuged to obtain a cell precipitate. The obtained precipitate was visually determined based on the following determination table. In the evaluation, a 5% FBS-added DMEM medium containing 5% by mass FBS was used as a negative control, and a 5% FBS-added DMEM medium containing 50 mM sodium lactate was used as a positive control. These visual determination results were determined as determination 5 and determination 1, and used as an index for sample determination. As shown in Table 13, the visual judgment was evaluated in five stages. The evaluation results are shown in Table 12.

表１２に示したとおり、ロウソクノキ抽出物には、高いＢ１６マウスメラノーマ細胞メラニン産生抑制作用が認められた。   As shown in Table 12, a high B16 mouse melanoma cell melanin production inhibitory effect was observed in the candle extract.

＜美白効果（ヒト表皮メラニン細胞チロシナーゼ活性阻害作用）＞
ロウソクノキ抽出物のヒト表皮メラニン細胞チロシナーゼ活性阻害作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Whitening effect (inhibition of human epidermal melanocyte tyrosinase activity)>
Evaluation of the human epidermis melanocyte tyrosinase activity inhibitory effect of the candle extract was carried out by the following method. Extracts 1 and 2 were used as samples.

正常ヒト表皮メラニン細胞を１ウェル当り３．０×１０^４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはＭｅｄｉｕｍ ２５４Ｓを用いた。２４時間培養後、表１４および表１５に示す各濃度となるように各抽出物を添加したＭｅｄｉｕｍ ２５４Ｓに交換し、さらに４８時間培養した。次に１質量％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘを含有するリン酸緩衝液７５μＬに交換し、細胞を完全に溶解させ、内５０μＬを粗酵素液として使用した。粗酵素液に基質となる５０μＬの０．０５質量％Ｌ−ドーパ含有リン酸緩衝液を加え、３７℃で２時間静置した。基質添加直後と反応終了時の４０５ｎｍの吸光度を測定し、生成されたドーパメラニン量は両測定値の差を次式に導入して求めた。
生成されたドーパメラニン量＝｛（反応後４０５ｎｍ値−反応前４０５ｎｍ値）−２．１６６｝／５．２３８
また、ＰＩＥＲＣＥ社製ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔにて各ウェルのタンパク量を測定し、単位タンパク量当りのドーパメラニン生成量を求めた。評価結果を試料無添加のコントロールにおける単位タンパク量当りのドーパメラニン生成量と比較し、表１４および表１５に示す。 Normal human epidermal melanocytes were seeded in a 96-well microplate so as to be 3.0 × 10 ⁴ cells per well. Medium 254S was used as the seeding medium. After culturing for 24 hours, the medium was replaced with Medium 254S to which each extract was added so that the concentrations shown in Tables 14 and 15 were obtained, and further cultured for 48 hours. Next, it was replaced with 75 μL of a phosphate buffer containing 1% by weight Triton-X to completely lyse the cells, and 50 μL was used as a crude enzyme solution. To the crude enzyme solution, 50 μL of a 0.05% by mass L-dopa-containing phosphate buffer as a substrate was added and allowed to stand at 37 ° C. for 2 hours. The absorbance at 405 nm was measured immediately after the addition of the substrate and at the end of the reaction, and the amount of dopamelanin produced was determined by introducing the difference between the two measured values into the following equation.
Amount of dopamelanin produced = {(405 nm value after reaction−405 nm value before reaction) −2.166} /5.238
In addition, the amount of protein in each well was measured with BCA Protein Assay Kit manufactured by PIERCE, and the amount of dopamelanin produced per unit protein amount was determined. The evaluation results are shown in Table 14 and Table 15 in comparison with the amount of dopamelanin produced per unit protein in the control with no sample added.

表１４および表１５に示したとおり、ロウソクノキ抽出物には、有意なヒト表皮メラニン細胞チロシナーゼ活性阻害作用が認められた。   As shown in Tables 14 and 15, the candle extract was found to have a significant inhibitory effect on human epidermal melanocyte tyrosinase activity.

表１２、表１４および表１５に示したとおり、ロウソクノキ抽出物は、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞メラニン産生抑制作用およびヒト表皮メラニン細胞チロシナーゼ活性阻害作用を示すことから、優れた美白効果を発揮する。   As shown in Table 12, Table 14, and Table 15, the candle extract exhibits an excellent whitening effect because it exhibits a B16 mouse melanoma cell melanin production inhibitory action and a human epidermal melanocyte tyrosinase activity inhibitory action.

＜保湿効果（ヒト真皮線維芽細胞ヒアルロン酸産生促進作用）＞
ロウソクノキ抽出物のヒト真皮線維芽細胞ヒアルロン酸産生促進作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Moisturizing effect (human dermal fibroblast hyaluronic acid production promoting action)>
Evaluation of the human dermal fibroblast hyaluronic acid production promoting effect of the candlestick extract was carried out by the following method. Extracts 1 and 2 were used as samples.

正常ヒト真皮線維芽細胞を１ウェル当り２．０×１０^４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地には５質量％のウシ胎児血清（ＦＢＳ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用いた。２４時間培養後、表１６および表１７に示す各濃度となるように各抽出物を添加した０．５質量％ＦＢＳ添加ＤＭＥＭ培地に交換し、さらに２日間培養した。培養上清中に分泌されたヒアルロン酸の定量には、ヒアルロン酸結合性タンパク質（ＨＡＢＰ）を用いたサンドイッチＥＬＩＳＡ法を用い、最後はアビジン化ホースラディッシュペルオキシダーゼに対し３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）を添加し反応させた。１０〜１５分後１Ｎの塩酸で反応を停止させた後、４５０ｎｍの吸光度を測定した。ＰＩＥＲＣＥ社製ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔにて各ウェルのタンパク量を測定し、単位タンパク量当りのヒアルロン酸産生量を求めた。評価結果を試料無添加のコントロールにおける単位タンパク量当りのヒアルロン酸産生量を１００とした相対値にて表１６および表１７に示す。 Normal human dermal fibroblasts were seeded in a 96-well microplate at 2.0 × 10 ⁴ cells per well. Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) supplemented with 5% by weight fetal bovine serum (FBS) was used as the seeding medium. After culturing for 24 hours, the medium was replaced with a DMEM medium supplemented with 0.5% by mass FBS to which each extract was added so as to have each concentration shown in Table 16 and Table 17, and further cultured for 2 days. For the quantification of hyaluronic acid secreted into the culture supernatant, a sandwich ELISA method using hyaluronic acid binding protein (HABP) was used. -Tetramethylbenzidine (TMB) was added and reacted. After 10 to 15 minutes, the reaction was stopped with 1N hydrochloric acid, and the absorbance at 450 nm was measured. The amount of protein in each well was measured using BCA Protein Assay Kit manufactured by PIERCE, and the amount of hyaluronic acid produced per unit amount of protein was determined. The evaluation results are shown in Tables 16 and 17 as relative values with the amount of hyaluronic acid produced per unit protein in the control with no sample added as 100.

表１６および表１７に示したとおり、ロウソクノキ抽出物には、高いヒト真皮線維芽細胞ヒアルロン酸産生促進作用が認められた。   As shown in Tables 16 and 17, the candle extract showed a high human dermal fibroblast hyaluronic acid production promoting effect.

＜保湿効果（ヒト表皮角化細胞アルギナーゼ活性促進作用）＞
ロウソクノキ抽出物のヒト表皮角化細胞アルギナーゼ活性促進作用の評価を、以下に示す方法により行った。試料として、抽出物１および抽出物２を用いた。 <Moisturizing effect (human epidermal keratinocyte arginase activity promoting action)>
Evaluation of the effect of candlestick extract on promoting human keratinocyte arginase activity was carried out by the following method. Extracts 1 and 2 were used as samples.

正常ヒト表皮角化細胞ＮＨＥＫを１ウェル当り２．０×１０^４個となるようにコラーゲンコートされた９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはＨｕｍｅｄｉａ−ＫＧ２培地（クラボウ社製のＮＨＥＫ増殖培地）を用いた。２４時間培養後、表１８および表１９に示す各濃度となるように各抽出物を添加した、１．２ｍＭのＣａＣｌ２を含むＫＧ２培地（分化誘導培地）に交換し、さらに９日間培養した。培地交換は３日に１回のペースで行った。培養上清中に分泌された尿素の定量には、尿素窒素Ｂ−テストワコー（和光純薬）を用いた。アルギナーゼはアルギニンを加水分解し、オルニチン、尿素を生成する。尿素はウレアーゼによってアンモニアに分解され、アンモニアはペンタシアノニトロシル鉄（ＩＩＩ）酸ナトリウム二水和物（ニトロプルシッドナトリウム）存在下でサリチル酸、次亜塩素酸と反応し、インドフェノールが生成する。アルカリ性条件下でインドフェノールに由来する５７０ｎｍの吸光度を測定し、尿素濃度を求め、アルギナーゼ活性の定量を行った。ＰＩＥＲＣＥ社製ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔにて各ウェルのタンパク量を測定し、単位タンパク量当りのアルギナーゼ活性を求めた。評価結果を試料無添加のコントロールにおける単位タンパク量当りのアルギナーゼ活性を１００とした時の相対値にて表１８および表１９に示す。 Normal human epidermal keratinocytes NHEK were seeded in a 96-well microplate coated with collagen so as to be 2.0 × 10 ⁴ cells per well. Humedia-KG2 medium (Kurabo NHEK growth medium) was used as the seeding medium. After culturing for 24 hours, the extract was replaced with a KG2 medium (differentiation induction medium) containing 1.2 mM CaCl2 added to each concentration shown in Table 18 and Table 19, and further cultured for 9 days. The medium was exchanged once every 3 days. Urea nitrogen B-Test Wako (Wako Pure Chemical Industries) was used for quantification of urea secreted into the culture supernatant. Arginase hydrolyzes arginine to produce ornithine and urea. Urea is decomposed into ammonia by urease, and ammonia reacts with salicylic acid and hypochlorous acid in the presence of sodium pentacyanonitrosyl iron (III) dihydrate (sodium nitroprusside) to produce indophenol. Absorbance at 570 nm derived from indophenol was measured under alkaline conditions, the urea concentration was determined, and arginase activity was quantified. The protein amount in each well was measured with BCA Protein Assay Kit manufactured by PIERCE, and the arginase activity per unit protein amount was determined. The evaluation results are shown in Table 18 and Table 19 as relative values when the arginase activity per unit protein amount in the control with no sample added is defined as 100.

表１８および表１９に示したとおり、ロウソクノキ抽出物には、有意なヒト表皮角化細胞アルギナーゼ活性促進作用が認められた。   As shown in Tables 18 and 19, a significant effect of promoting the activity of human keratinocyte arginase was observed in the candle extract.

表１６〜表１９に示したとおり、ロウソクノキ抽出物は、ヒト真皮線維芽細胞ヒアルロン酸産生促進作用およびヒト表皮角化細胞アルギナーゼ活性促進作用を示すことから、優れた保湿効果を発揮する。   As shown in Table 16 to Table 19, the candle extract extracts exhibit an excellent moisturizing effect because it exhibits a human dermal fibroblast hyaluronic acid production promoting action and a human epidermal keratinocyte arginase activity promoting action.

続いて、上記各調製方法で得られたロウソクノキ抽出物を配合した皮膚外用剤および機能性経口組成物の処方例を示す。   Subsequently, formulation examples of the external preparation for skin and the functional oral composition containing the candle extract obtained by the above preparation methods will be shown.

［実施例１］乳液
（１）スクワラン １０．０（質量％）
（２）メチルフェニルポリシロキサン ４．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）モノステアリン酸ポリオキシエチレン
ソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．） １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン １．０
（７）グリセリン ４．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）カルボキシビニルポリマー ０．１５
（１０）精製水 １００とする残部
（１１）アルギニン（１質量％水溶液） ２０．０
（１２）抽出物１ ５．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。冷却後４０℃にて、（１１）と（１２）を順次加え、均一に混合する。 [Example 1] Emulsion (1) Squalane 10.0 (mass%)
(2) Methylphenylpolysiloxane 4.0
(3) Hydrogenated palm kernel oil 0.5
(4) Hydrogenated soybean phospholipid 0.1
(5) Polyoxyethylene monostearate
Sorbitan (20E.O.) 1.3
(6) Sorbitan monostearate 1.0
(7) Glycerin 4.0
(8) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(9) Carboxyvinyl polymer 0.15
(10) Purified water 100 (11) Arginine (1% by weight aqueous solution) 20.0
(12) Extract 1 5.0
Production method: The oil phase components (1) to (6) are heated and dissolved at 80 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are dissolved by heating at 80 ° C. The oil phase component is added to this while stirring and uniformly emulsified with a homogenizer. After cooling, (11) and (12) are sequentially added at 40 ° C. and mixed uniformly.

［実施例２］化粧水
（１）エタノール １５．０（質量％）
（２）ポリオキシエチレン（４０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 ０．３
（３）香料 ０．１
（４）精製水 １００とする残部
（５）クエン酸 ０．０２
（６）クエン酸ナトリウム ０．１
（７）グリセリン １．０
（８）ヒドロキシエチルセルロース ０．１
（９）抽出物２ １．０
製法：（１）に（２）および（３）を溶解する。さらに（４）〜（８）を順次添加した後、十分に攪拌し、（９）を加え、均一に混合する。 [Example 2] Lotion (1) Ethanol 15.0 (mass%)
(2) Polyoxyethylene (40E.O.) hydrogenated castor oil 0.3
(3) Fragrance 0.1
(4) Purified water 100 (5) Citric acid 0.02
(6) Sodium citrate 0.1
(7) Glycerin 1.0
(8) Hydroxyethyl cellulose 0.1
(9) Extract 2 1.0
Production method: (2) and (3) are dissolved in (1). Further, after sequentially adding (4) to (8), the mixture is sufficiently stirred, and (9) is added and mixed uniformly.

［実施例３］クリーム
（１）スクワラン １０．０（質量％）
（２）ステアリン酸 ２．０
（３）水素添加パーム核油 ０．５
（４）水素添加大豆リン脂質 ０．１
（５）セタノール ３．６
（６）親油型モノステアリン酸グリセリン ２．０
（７）グリセリン １０．０
（８）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（９）アルギニン（２０質量％水溶液） １５．０
（１０）精製水 １００とする残部
（１１）カルボキシビニルポリマー（１質量％水溶液） １５．０
（１２）抽出物１ ５．０
製法：（１）〜（６）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（７）〜（１０）の水相成分を８０℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。（１１）を添加して攪拌後、冷却し４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。 [Example 3] Cream (1) Squalane 10.0 (mass%)
(2) Stearic acid 2.0
(3) Hydrogenated palm kernel oil 0.5
(4) Hydrogenated soybean phospholipid 0.1
(5) Cetanol 3.6
(6) Lipophilic glyceryl monostearate 2.0
(7) Glycerin 10.0
(8) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(9) Arginine (20 mass% aqueous solution) 15.0
(10) Remainder 100 (11) Carboxyvinyl polymer (1% by weight aqueous solution) 15.0
(12) Extract 1 5.0
Production method: The oil phase components (1) to (6) are heated and dissolved at 80 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are dissolved by heating at 80 ° C. The oil phase component is added to this while stirring and uniformly emulsified with a homogenizer. (11) is added and stirred, then cooled and (12) is added at 40 ° C. and mixed uniformly.

［実施例４］美容液
（１）精製水 １００とする残部（質量％）
（２）グリセリン １０．０
（３）ショ糖脂肪酸エステル １．３
（４）カルボキシビニルポリマー（１質量％水溶液） １７．５
（５）アルギン酸ナトリウム（１質量％水溶液） １５．０
（６）モノラウリン酸ポリグリセリル １．０
（７）マカデミアナッツ油脂肪酸フィトステリル ３．０
（８）Ｎ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸
ジ（フィトステリル−２−オクチルドデシル） ２．０
（９）硬化パーム油 ２．０
（１０）スクワラン（オリーブ由来） １．０
（１１）ベヘニルアルコール ０．７５
（１２）ミツロウ １．０
（１３）ホホバ油 １．０
（１４）１，３−ブチレングリコール １０．０
（１５）Ｌ−アルギニン（１０質量％水溶液） ２．０
（１６）抽出物２ ３．０
製法：（１）〜（６）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。次いで、上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化を行った後、ホモミキサーにて均一に乳化する。冷却後５０℃にて（１５）を、４０℃にて（１６）を加え、均一に混合する。 [Example 4] Cosmetic liquid (1) The balance (mass%) of purified water 100
(2) Glycerin 10.0
(3) Sucrose fatty acid ester 1.3
(4) Carboxyvinyl polymer (1% by weight aqueous solution) 17.5
(5) Sodium alginate (1% by weight aqueous solution) 15.0
(6) Polyglyceryl monolaurate 1.0
(7) Macadamia nut oil fatty acid phytosteryl 3.0
(8) N-lauroyl-L-glutamic acid di (phytosteryl-2-octyldodecyl) 2.0
(9) Hardened palm oil 2.0
(10) Squalane (derived from olive) 1.0
(11) Behenyl alcohol 0.75
(12) Beeswax 1.0
(13) Jojoba oil 1.0
(14) 1,3-butylene glycol 10.0
(15) L-arginine (10% by mass aqueous solution) 2.0
(16) Extract 2 3.0
Production method: The aqueous phase components (1) to (6) are mixed and dissolved by heating at 75 ° C. On the other hand, the oil phase components (7) to (14) are mixed and dissolved by heating at 75 ° C. Next, the oil phase component is added to the aqueous phase component and preliminary emulsification is performed, followed by uniform emulsification with a homomixer. After cooling, add (15) at 50 ° C. and (16) at 40 ° C. and mix uniformly.

［実施例５］水性ジェル
（１）カルボキシビニルポリマー ０．５（質量％）
（２）精製水 １００とする残部
（３）水酸化ナトリウム（１０質量％水溶液） ０．５
（４）エタノール １０．０
（５）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（６）香料 ０．１
（７）抽出物２ ０．５
（８）ポリオキシエチレン（６０Ｅ．Ｏ．）硬化ヒマシ油 １．０
製法：（１）を（２）に加え、均一に攪拌した後、（３）を加える。均一に攪拌した後、（４）に予め溶解した（５）を加える。均一に攪拌した後、予め混合しておいた（６）〜（８）を加え、均一に攪拌混合する。 [Example 5] Aqueous gel (1) Carboxyvinyl polymer 0.5 (mass%)
(2) The balance made into purified water 100 (3) Sodium hydroxide (10 mass% aqueous solution) 0.5
(4) Ethanol 10.0
(5) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(6) Fragrance 0.1
(7) Extract 2 0.5
(8) Polyoxyethylene (60E.O.) hydrogenated castor oil 1.0
Manufacturing method: (1) is added to (2), and after stirring uniformly, (3) is added. After stirring uniformly, (5) previously dissolved in (4) is added. After stirring uniformly, the previously mixed (6) to (8) are added and stirred and mixed uniformly.

［実施例６］クレンジング料
（１）スクワラン ８１．０（質量％）
（２）イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル １５．０
（３）抽出物１ ４．０
製法：（１）と（２）を均一に溶解する。これに、（３）を加え、均一に混合する。 [Example 6] Cleansing fee (1) Squalane 81.0 (mass%)
(2) Polyoxyethylene glyceryl isostearate 15.0
(3) Extract 1 4.0
Manufacturing method: (1) and (2) are uniformly dissolved. (3) is added to this, and it mixes uniformly.

［実施例７］洗顔フォーム
（１）ステアリン酸 １６．０（質量％）
（２）ミリスチン酸 １６．０
（３）親油型モノステアリン酸グリセリン ２．０
（４）グリセリン ２５．０
（５）水酸化ナトリウム ７．５
（６）ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン １．０
（７）精製水 １００とする残部
（８）抽出物２ ０．１
製法：（１）〜（４）の油相成分を８０℃にて加熱溶解する。一方（５）〜（７）の水相成分を８０℃にて加熱溶解し、油相成分と均一に混合攪拌する。冷却後４０℃にて（８）を加え、均一に混合する。 [Example 7] Face-wash foam (1) Stearic acid 16.0 (mass%)
(2) Myristic acid 16.0
(3) Lipophilic glyceryl monostearate 2.0
(4) Glycerin 25.0
(5) Sodium hydroxide 7.5
(6) Palm oil fatty acid amidopropyl betaine 1.0
(7) The balance which is made into purified water 100 (8) Extract 2 0.1
Production method: The oil phase components (1) to (4) are heated and dissolved at 80 ° C. On the other hand, the water phase components (5) to (7) are heated and dissolved at 80 ° C., and the oil phase components are uniformly mixed and stirred. After cooling, add (8) at 40 ° C. and mix uniformly.

［実施例８］メイクアップベースクリーム
（１）スクワラン １０．２（質量％）
（２）セタノール ２．０
（３）グリセリントリ−２−エチルヘキサン酸エステル ２．５
（４）親油型モノステアリン酸グリセリル １．０
（５）プロピレングリコール １１．０
（６）ショ糖脂肪酸エステル １．３
（７）精製水 １００とする残部
（８）酸化チタン １．０
（９）ベンガラ ０．１
（１０）黄酸化鉄 ０．４
（１１）香料 ０．１
（１２）抽出物１ ３．０
製法：（１）〜（４）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（５）〜（７）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（８）〜（１０）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散させる。この水相成分に前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。冷却後４０℃にて（１１）と（１２）の成分を加え、均一に混合する。 [Example 8] Make-up base cream (1) Squalane 10.2 (% by mass)
(2) Cetanol 2.0
(3) Glycerin tri-2-ethylhexanoate 2.5
(4) Lipophilic glyceryl monostearate 1.0
(5) Propylene glycol 11.0
(6) Sucrose fatty acid ester 1.3
(7) The balance which makes 100 purified water (8) Titanium oxide 1.0
(9) Bengala 0.1
(10) Yellow iron oxide 0.4
(11) Fragrance 0.1
(12) Extract 1 3.0
Production method: The oil phase components (1) to (4) are mixed and dissolved by heating at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (5) to (7) are mixed and dissolved by heating at 75 ° C., and the pigments (8) to (10) are added thereto and dispersed uniformly with a homomixer. The oil phase component is added to the water phase component and emulsified with a homomixer. After cooling, the components (11) and (12) are added at 40 ° C. and mixed uniformly.

［実施例９］乳液状ファンデーション
（１）メチルポリシロキサン ２．０（質量％）
（２）スクワラン ５．０
（３）ミリスチン酸オクチルドデシル ５．０
（４）セタノール １．０
（５）ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）
ソルビタンモノステアリン酸エステル １．３
（６）モノステアリン酸ソルビタン ０．７
（７）１，３−ブチレングリコール ８．０
（８）キサンタンガム ０．１
（９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（１０）精製水 １００とする残部
（１１）酸化チタン ９．０
（１２）タルク ７．４
（１３）ベンガラ ０．５
（１４）黄酸化鉄 １．１
（１５）黒酸化鉄 ０．１
（１６）香料 ０．１
（１７）抽出物２ ０．５
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解し、これに（１１）〜（１５）の顔料を加え、ホモミキサーにて均一に分散する。油相成分を加え、乳化を行う。冷却後４０℃にて（１６）と（１７）の成分を順次加え、均一に混合する。 [Example 9] Emulsion foundation (1) Methylpolysiloxane 2.0 (mass%)
(2) Squalane 5.0
(3) Octyldodecyl myristate 5.0
(4) Cetanol 1.0
(5) Polyoxyethylene (20E.O.)
Sorbitan monostearate 1.3
(6) Sorbitan monostearate 0.7
(7) 1,3-butylene glycol 8.0
(8) Xanthan gum 0.1
(9) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(10) Remainder water 100 (11) Titanium oxide 9.0
(12) Talc 7.4
(13) Bengala 0.5
(14) Yellow iron oxide 1.1
(15) Black iron oxide 0.1
(16) Fragrance 0.1
(17) Extract 2 0.5
Production method: The oil phase components (1) to (6) are mixed and dissolved by heating at 75 ° C. On the other hand, the water phase components (7) to (10) are mixed, dissolved by heating at 75 ° C., the pigments (11) to (15) are added thereto, and the mixture is uniformly dispersed with a homomixer. Add oil phase ingredients and emulsify. After cooling, components (16) and (17) are sequentially added at 40 ° C. and mixed uniformly.

［実施例１０］油中水型エモリエントクリーム
（１）流動パラフィン ３４．０（質量％）
（２）マイクロクリスタリンワックス ２．０
（３）ワセリン ５．０
（４）ジグリセリンオレイン酸エステル ５．０
（５）塩化ナトリウム １．３
（６）塩化カリウム ０．１
（７）プロピレングリコール ３．０
（８）１，３−ブチレングリコール ５．０
（９）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（１０）抽出物１ ３．０
（１１）精製水 １００とする残部
（１２）香料 ０．１
製法：（５）と（６）を（１１）の一部に溶解して５０℃とし、５０℃に加熱した（４）に攪拌しながら徐々に加える。これを混合した後、７０℃にて加熱溶解した（１）〜（３）に均一に分散する。これに（７）〜（１０）を（１１）の残部に７０℃にて加熱溶解したものを攪拌しながら加え、ホモミキサーにて乳化する。冷却後４０℃にて（１２）を加え、均一に混合する。 [Example 10] Water-in-oil emollient cream (1) Liquid paraffin 34.0 (mass%)
(2) Microcrystalline wax 2.0
(3) Vaseline 5.0
(4) Diglycerin oleate 5.0
(5) Sodium chloride 1.3
(6) Potassium chloride 0.1
(7) Propylene glycol 3.0
(8) 1,3-butylene glycol 5.0
(9) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(10) Extract 1 3.0
(11) The balance of 100 purified water (12) Fragrance 0.1
Production method: Dissolve (5) and (6) in a part of (11) to 50 ° C, and gradually add to (4) heated to 50 ° C with stirring. After mixing this, it disperse | distributes uniformly to (1)-(3) heated and melt | dissolved at 70 degreeC. (7) to (10) are added to the remainder of (11) heated and dissolved at 70 ° C. with stirring, and emulsified with a homomixer. After cooling, add (12) at 40 ° C. and mix uniformly.

［実施例１１］パック
（１）精製水 １００とする残部（質量％）
（２）ポリビニルアルコール １２．０
（３）エタノール １７．０
（４）グリセリン ９．０
（５）ポリエチレングリコール（平均分子量１０００） ２．０
（６）抽出物２ １．０
（７）香料 ０．１
製法：（２）と（３）を混合し、８０℃に加温した後、８０℃に加温した（１）に溶解する。均一に溶解した後、（４）と（５）を加え、攪拌しながら冷却する。４０℃にて（６）と（７）を加え、均一に混合する。 [Example 11] The balance (mass%) of pack (1) purified water 100
(2) Polyvinyl alcohol 12.0
(3) Ethanol 17.0
(4) Glycerin 9.0
(5) Polyethylene glycol (average molecular weight 1000) 2.0
(6) Extract 2 1.0
(7) Fragrance 0.1
Production method: (2) and (3) are mixed, heated to 80 ° C, and then dissolved in (1) heated to 80 ° C. After evenly dissolving, add (4) and (5) and cool with stirring. Add (6) and (7) at 40 ° C. and mix uniformly.

［実施例１２］入浴剤
（１）香料 ０．３（質量％）
（２）抽出物１ ３．０
（３）炭酸水素ナトリウム ５０．０
（４）硫酸ナトリウム ４６．７
製法：（１）〜（４）を均一に混合する。 [Example 12] Bath agent (1) Fragrance 0.3 (mass%)
(2) Extract 1 3.0
(3) Sodium bicarbonate 50.0
(4) Sodium sulfate 46.7
Production method: (1) to (4) are mixed uniformly.

［実施例１３］ヘアーワックス
（１）ステアリン酸 ３．０（質量％）
（２）マイクロクリスタリンワックス ２．０
（３）セチルアルコール ３．０
（４）高重合メチルポリシロキサン ２．０
（５）メチルポリシロキサン ５．０
（６）ポリ（オキシエチレン・オキシプロピレン）
メチルポリシロキサン共重合体 １．０
（７）パラオキシ安息香酸メチル ０．１
（８）１，３−ブチレングリコール ７．５
（９）アルギニン ０．７
（１０）精製水 １００とする残部
（１１）抽出物２ ２．０
（１２）香料 ０．１
製法：（１）〜（６）の油相成分を混合し、７５℃にて加熱溶解後する。一方、（７）〜（１０）の水相成分を７５℃にて加熱溶解し、前記油相成分を加え、ホモミキサーにて乳化する。冷却後４０℃にて（１１）と（１２）の成分を加え、均一に混合する。 [Example 13] Hair wax (1) Stearic acid 3.0 (mass%)
(2) Microcrystalline wax 2.0
(3) Cetyl alcohol 3.0
(4) Highly polymerized methylpolysiloxane 2.0
(5) Methylpolysiloxane 5.0
(6) Poly (oxyethylene / oxypropylene)
Methylpolysiloxane copolymer 1.0
(7) Methyl paraoxybenzoate 0.1
(8) 1,3-butylene glycol 7.5
(9) Arginine 0.7
(10) Purified water 100 (11) Extract 2 2.0
(12) Fragrance 0.1
Production method: The oil phase components (1) to (6) are mixed and heated and dissolved at 75 ° C. On the other hand, the aqueous phase components (7) to (10) are dissolved by heating at 75 ° C., the oil phase component is added, and the mixture is emulsified with a homomixer. After cooling, the components (11) and (12) are added at 40 ° C. and mixed uniformly.

［実施例１４］ヘアートニック
（１）エタノール ５０．０（質量％）
（２）精製水 １００とする残部
（３）抽出物１ ３．０
（４）香料 ０．１
製法：（１）〜（４）の成分を混合、均一化する。 Example 14 Hair artic (1) Ethanol 50.0 (mass%)
(2) The balance of purified water 100 (3) Extract 1 3.0
(4) Fragrance 0.1
Production method: Components (1) to (4) are mixed and homogenized.

［実施例１５］錠剤
（１）コーンスターチ ４４．０（質量％）
（２）結晶セルロース １００とする残部
（３）カルボキシメチルセルロースカルシウム ５．０
（４）無水ケイ酸 ０．５
（５）ステアリン酸マグネシウム ０．５
（６）抽出物１ ５．０
製法：（１）〜（６）を均一に混合し、打錠機にて圧縮成型して、１錠２００ｍｇの錠剤を得る。 Example 15 Tablet (1) Corn Starch 44.0 (mass%)
(2) Crystalline cellulose 100 (3) Carboxymethylcellulose calcium 5.0
(4) Silicic anhydride 0.5
(5) Magnesium stearate 0.5
(6) Extract 1 5.0
Production method: (1) to (6) are uniformly mixed, and compression-molded with a tableting machine to obtain one tablet of 200 mg.

［実施例１６］散剤
（１）ケイ酸アルミン酸マグネシウム ９５．３（質量％）
（２）カルボキシメチルセルロースカルシウム １００とする残部
（３）抽出物１ ４．０
製法：（１）〜（３）の粉体を混合後、粉砕機にて粉砕し、均一に分散する。 [Example 16] Powder (1) Magnesium aluminate silicate 95.3 (% by mass)
(2) Carboxymethylcellulose calcium 100 The remainder (3) Extract 1 4.0
Production method: After the powders (1) to (3) are mixed, they are pulverized by a pulverizer and uniformly dispersed.

［実施例１７］キャンデー
（１）白糖 ６０．０（質量％）
（２）水飴 １００とする残部
（３）抽出物１ ５．０
（４）香料 適量
製法：（１）と（２）を加熱混合・均一化した後冷却し、７０℃にて成分（３）と（４）を添加し、混合均一化した後成型する。 [Example 17] Candy (1) Sucrose 60.0 (mass%)
(2) Remaining as Minamata 100 (3) Extract 1 5.0
(4) Fragrance Appropriate amount Manufacturing method: (1) and (2) are heated, mixed and homogenized, cooled, components (3) and (4) are added at 70 ° C., mixed and homogenized, and then molded.

［実施例１８］ドリンク剤
（１）アミノエチルスルホン酸 １０００ｍｇ
（２）硝酸チアミン １０ｍｇ
（３）リン酸リボフラビンナトリウム ５ｍｇ
（４）塩酸ピリドキシン １０ｍｇ
（５）無水カフェイン ５０ｍｇ
（６）クエン酸 ２５０ｍｇ
（７）Ｄ−ソルビトール液 ８ｍｇ
（８）抽出物１ １０００ｍｇ
（９）香料 微量
（１０）精製水 １００ｍＬとする残部
製法：（１）〜（９）を順次（１０）に添加し、均一化する。 [Example 18] Drink (1) Aminoethylsulfonic acid 1000 mg
(2) Thiamine nitrate 10mg
(3) Riboflavin sodium phosphate 5mg
(4) Pyridoxine hydrochloride 10mg
(5) Anhydrous caffeine 50mg
(6) Citric acid 250mg
(7) D-sorbitol solution 8mg
(8) Extract 1 1000 mg
(9) Fragrance Trace amount (10) Purified water 100 mL of the remaining manufacturing method: (1) to (9) are sequentially added to (10) and homogenized.

実施例１〜実施例１４に示した皮膚外用剤は、抗老化作用、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、保湿作用を有する組成物であった。また実施例１５〜実施例１８に示した機能性経口組成物は抗老化作用、抗酸化作用、抗炎症作用、美白作用、保湿作用を有する組成物であった。   The skin external preparations shown in Examples 1 to 14 were compositions having an anti-aging action, an antioxidant action, an anti-inflammatory action, a whitening action, and a moisturizing action. The functional oral compositions shown in Examples 15 to 18 were compositions having an anti-aging action, an antioxidant action, an anti-inflammatory action, a whitening action, and a moisturizing action.

Claims (6)

ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ）植物の抽出物を有効成分とする抗老化剤。   An anti-aging agent comprising, as an active ingredient, an extract of a plant of the genus Parmentiera. ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ）植物の抽出物を有効成分とする抗酸化剤。   An antioxidant containing an extract of a plant of the genus Parmentiera as an active ingredient. ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ）植物の抽出物を有効成分とする抗炎症剤。   An anti-inflammatory agent comprising, as an active ingredient, an extract of a plant of the genus Parmentiera. ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ）植物の抽出物を有効成分とする美白剤。   A whitening agent comprising an extract of a plant of the genus Parmentiera as an active ingredient. ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ）植物の抽出物を有効成分とする保湿剤。   A moisturizing agent containing an extract of a plant of the genus Parmentiera as an active ingredient. ノウゼンカズラ科ロウソクノキ属（Ｐａｒｍｅｎｔｉｅｒａ）植物の抽出物を有効成分とする皮膚外用剤。   An external preparation for skin containing, as an active ingredient, an extract of a plant of the genus Parmentiera.