JP5366386B2 - 神経細胞賦活及び神経伸長促進用組成物 - Google Patents
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日本臨床 VOL.64,8,1553−1559(2006.8.1)
項1.下記式(1)で表される化合物を有効成分として含有することを特徴とする神経細胞賦活及び神経伸長促進用組成物。
項3.前記式(1)で表される化合物1重量部に対して前記一般式(2)で表される化合物を総量で0.00002〜7.5重量部含有する項1又は2に記載の組成物。
項4.下記式(1)で表される化合物を添加することを特徴とする、神経細胞賦活及び神経伸長促進方法。
化合物1は下記式(1)で表される化合物であって、DSM ニュートリション ジャパン株式会社などから商業的に入手可能である。
化合物2は、哺乳類の抗貧血因子としての作用が知られている下記一般式(2)で表される化合物であって、DSM ニュートリション ジャパン株式会社などから商業的に入手可能である。
本発明の組成物は、従来公知の方法に従って、経口又は非経口の別を問わず各種の製剤剤型に調製することができ、例えば、液剤(シロップ等を含む)等の液状製剤や、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤(ソフトカプセルを含む)、フィルム等の固形製剤形態の経口製剤;液剤、点滴剤、注射剤、点眼剤等の液状製剤や、錠剤、丸剤、カプセル剤(ソフトカプセルを含む)等の固形製剤形態の非経口製剤が挙げられる。
本発明は、化合物1を投与することを特徴とする神経細胞賦活及び神経伸長を促進する方法を提供するものである。本発明の方法における化合物1、化合物2の具体的種類や配合量等については、上記(1)及び(2)に記載される通りである。
<試験例>
(1)凍結保存のP19 EC cells細胞(マウス胚性腫瘍由来細胞株 理化学研究所提供)を非働化牛胎児血清(以下、FBSと記載する)を15%含有するDMEM液体培地で培養した。
(2)1×105 cells/ml/wellで、レチノイン酸(1μM)を含むDMEM液体培地(FBSなし)で37℃、CO2濃度5%で1日間培養した。
(6穴プレートを使用し、1wellに2mLで培養)
(3)上清を取り除き、下記表1〜3に示される濃度(液体培地中の濃度)の被験物質を含む液体培地で培養した。
(4)12時間後に浮遊細胞数を測定し、下記式より神経細胞賦活率を算出した。本試験例において浮遊細胞は、十分な機能、活性を得られず死滅した神経細胞である。結果を表1〜3に示す。
神経細胞賦活率=(A/B)×100(%)
A:各被験物質投与時:(初期細胞数−浮遊細胞数)/初期細胞数
B:被験物質非投与時(比較例1に相当):(初期細胞数−浮遊細胞数)/初期細胞数
(5)前記(4)から60時間後に細胞をトリパンブルーで染色し扁平な形状であって、細胞から外方向に向かって放射状の突起物を伸ばしている細胞(樹状突起を伸ばしている細胞)数を測定した。5つの視野において計測し、その平均値を用いて下記式(I)より神経伸長促進率を算出した。結果を表1及び2に示す。
式(I): 神経細胞伸長促進率=(A/B)×100(%)
A:各被験物質投与時の各視野の(樹状突起細胞数/総細胞数)
B:被験物質非投与時(比較例1に相当)の各視野の(樹状突起細胞数/総細胞数)
以下に本発明の処方例を示す。
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