JP5327945B2 - Glycoside and method for producing the same - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a method for easily producing a glucoside from an unprotected sugar. <P>SOLUTION: The production method includes the use of a haloformamidinium derivative as a dehydrating condensation agent and a sugar having a free hemiacetal hydroxy group as a starting material and the production of the corresponding glucoside in an aqueous solution in one step. The method can be applied to a longer sugar chain and is useful for the production of substances of various uses such as a physiologically active oligosaccharide, a carrier for a drug delivery system, a surfactant, a sugar chain medicine, a reagent for determining enzyme activity, a skin lightening agent, a sugar chain synthesis reagent with an enzyme catalyst, a glycopeptide, a glycoprotein, a sugar chain polymer and a sugar chain chip, and for improving the water-solubility of a fat-soluble molecule, etc. <P>COPYRIGHT: (C)2010,JPO&amp;INPIT

Description

本発明は、水溶液中における無保護糖からの配糖体の製造方法に関する。   The present invention relates to a method for producing a glycoside from an unprotected sugar in an aqueous solution.

ある化合物に糖鎖を付与した配糖体は、脂溶性分子の水溶性の向上〔特開2003-310294
号公報（特許文献１）〕、酵素の活性測定用試薬〔特開平9-275995号公報（特許文献２）〕、美白剤〔Cesk. Farm., 34, 174, 1985（非特許文献１）、特開昭60-16906号公報（特許文献３）、特開昭60-56912号公報（特許文献４）等）、酵素触媒による糖鎖合成試薬〔T. Murata, T. Usui : Enzymatic synthesis of important oligosaccharide units involved in N- and O-linked glycans, Trends in Glycosci. Glycotechnol., 12, 161-174,
2000（非特許文献２）〕、糖鎖チップ〔特開2003-083969号公報（特許文献５）〕等、産業上幅広い用途があり、その製造プロセスの簡易化は必須の技術課題である。従来の技術では、有機化学合成を用いる方法、酵素反応を活用する方法、または、それらを組み合わせて用いる方法が、所望の化合物の構造に合わせて適用されている。 A glycoside obtained by adding a sugar chain to a compound improves the water solubility of a fat-soluble molecule [Japanese Patent Laid-Open No. 2003-310294
Gazette (patent document 1)], enzyme activity measuring reagent [JP 9-275995 gazette (patent document 2)], whitening agent [Cesk. Farm., 34, 174, 1985 (non-patent document 1), JP-A-60-16906 (Patent Document 3), JP-A-60-56912 (Patent Document 4) and the like), enzyme-catalyzed sugar chain synthesis reagents [T. Murata, T. Usui: Enzymatic synthesis of important oligosaccharide units involved in N- and O-linked glycans, Trends in Glycosci.Glycotechnol., 12, 161-174,
2000 (Non-patent Document 2)], sugar chain chips [Japanese Patent Laid-Open No. 2003-083969 (Patent Document 5)], etc. have a wide range of industrial uses, and simplification of the manufacturing process is an essential technical problem. In the conventional technique, a method using organic chemical synthesis, a method utilizing an enzymatic reaction, or a method using a combination thereof is applied in accordance with the structure of a desired compound.

配糖体の基本構造としては、糖の還元末端と非糖部位と脱水縮合した構造をとるのが一般的である。単純には、脱水縮合剤を用いれば糖の還元末端と非糖部位との結合を形成せしめることになる。これまでの技術においては、非水有機溶媒中において、単糖ないし二糖に対し光延試薬を用いることにより、p-ニトロフェノールを導入した生成物を得ることができる。

As a basic structure of a glycoside, it is general to take a structure in which a reducing end of a sugar and a non-sugar moiety are dehydrated and condensed. Simply, if a dehydrating condensing agent is used, a bond is formed between the reducing end of the sugar and the non-sugar moiety. In the conventional techniques, a product in which p-nitrophenol is introduced can be obtained by using a Mitsunobu reagent for a monosaccharide or disaccharide in a non-aqueous organic solvent.

しかしながら当該技術では、ほとんどの三糖以上の糖は有機溶媒に溶解しないため、オリゴ糖の配糖体の合成には実質的に実施不可能な技術である。従って、水を主たる溶媒として配糖体を製造する、画期的な手法が望まれていた。
これまでに水溶液中で脱水縮合を達成できる技術として、糖オキサゾリン誘導体の合成法〔特願2007-059478（特許文献６）〕

However, in this technique, most of the sugars more than trisaccharide are not dissolved in an organic solvent, and therefore, this technique is substantially impossible to synthesize oligosaccharide glycosides. Therefore, an innovative method for producing glycosides using water as a main solvent has been desired.
As a technique that can achieve dehydration condensation in an aqueous solution, a method for synthesizing a sugar oxazoline derivative [Japanese Patent Application No. 2007-059478 (Patent Document 6)]

およびアンヒドロ糖の合成法〔特願2007-254281（特許文献７）〕

が報告されている。 And anhydro sugar synthesis method (Japanese Patent Application No. 2007-254281 (Patent Document 7))

Has been reported.

特開2003-310294号公報JP 2003-310294 A 特開平9-275995号公報Japanese Patent Laid-Open No. 9-275995 特開昭60-16906号公報Japanese Unexamined Patent Publication No. 60-16906 特開昭60-56912号公報JP 60-56912 A 特開2003-083969号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2003-083969 特願2007-059478Japanese Patent Application No. 2007-059478 特願2007-254281Japanese Patent Application No. 2007-254281 Cesk. Farm., 34, 174, 1985Cesk. Farm., 34, 174, 1985 T. Murata, T. Usui : Enzymatic synthesis of important oligosaccharide units involved in N- and O-linked glycans, Trends in Glycosci. Glycotechnol., 12, 161-174, 2000T. Murata, T. Usui: Enzymatic synthesis of important oligosaccharide units involved in N- and O-linked glycans, Trends in Glycosci. Glycotechnol., 12, 161-174, 2000

配糖体合成において、保護・脱保護といったステップを使用することなく、無保護糖から配糖体を簡便且つ穏和に合成する技術の開発が求められている。そして、糖鎖製造技術の大幅な改良のために、糖の良溶媒である水を主成分とする溶媒中で、所望の配糖体を一段階反応で得る手段の提供が求められている。特には、無保護糖からアジ化糖やフッ化糖などの有用な配糖体を水溶液中で合成する技術の開発が求められている。   In glycoside synthesis, development of a technique for synthesizing glycosides from unprotected sugars simply and gently without using steps such as protection and deprotection is required. In order to greatly improve the sugar chain production technology, provision of means for obtaining a desired glycoside by a one-step reaction in a solvent mainly composed of water, which is a good solvent for sugar, is required. In particular, development of a technique for synthesizing useful glycosides such as azide sugar and fluorinated sugar from an unprotected sugar in an aqueous solution is required.

本発明者らは配糖体合成法につき鋭意研究の結果、脱水縮合剤としてハロホルムアミジニウム誘導体を使用して、無保護糖を出発原料として直接配糖体を合成できることを見出すことに成功し、本発明を完成した。本発明では、糖鎖製造技術の大幅な改良技術であり、糖の良溶媒である水を主成分とする溶媒中で、所望の配糖体を一段階反応で得る手段が提供される。
本発明では、次なる態様が提供される。 As a result of diligent research on the glycoside synthesis method, the present inventors have succeeded in finding that haloformamidinium derivatives can be directly synthesized using unprotected sugar as a starting material by using a haloformamidinium derivative as a dehydrating condensing agent. The present invention has been completed. In the present invention, a sugar chain production technique is greatly improved, and a means for obtaining a desired glycoside by a one-step reaction in a solvent mainly composed of water, which is a good solvent for sugar, is provided.
In the present invention, the following modes are provided.

〔１〕 一般式(1)：

（上式中、R¹、R²、R³及びR⁴は、それぞれ同一でも異なっていてもよく、互いに独立に、水素原子、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシメチル基、カルボアルコキシメチル基、アミノ基、アセチルアミノ基を含めたアシルアミノ基、カルボキシ基、アミド
基、PO₄ ^2-、SO₄ ^-、アルキル基、アシル基、アルコキシ基、アシロキシ基、グルコース、
ガラクトース、マンノース、N-アセチルグルコサミンを含めた単糖のの糖残基、セロオリゴ糖、ラミナリオリゴ糖、キトオリゴ糖、キシロオリゴ糖を含めたオリゴ糖のの糖残基及び多糖のの糖残基からなる群から選択されたものである）
で表される無保護糖と一般式MZ（式中、Zは、水素原子、ハロゲン原子、アジド基を含め
た窒素原子含有基、炭化水素基を含めた炭素原子含有基、炭化水素基で置換されていてよいオキシ基を含めた酸素原子含有基、炭化水素基で置換されていてよいリン原子含有基、及び炭化水素基で置換されていてよいチオ基を含めた硫黄原子含有基からなる群から選択されたもので、Mは金属、-OH、アンモニウム又は水素原子である）の化合物とを、一般式(2)：

（上式中、R⁵、R⁶、R⁷及びR⁸は、それぞれ同一でも異なっていてもよく、互いに独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルケニル基及び置換されていてもよいアリール基からなる群から選択されたもので、R⁵とR⁷あるいはR⁶とR⁸で環を形成していてよいし、あるいはR⁵とR⁶あるいはR⁷とR⁸で環を形成していてよく、Xはハロゲン
原子であり、そしてY^-は陰イオンである）
で表される脱水縮合剤の存在下で処理して、一般式(3)：

（上式中、Z、R¹、R²、R³及びR⁴は、上記と同様の意味を有するものである）
で表される配糖体を得ることを特徴とする配糖体の製造方法。
〔２〕 Yが、ハロゲン原子、OH、BF₄、またはPF₆であり、一般式(2)の脱水縮合剤がハロホルムアミジニウム誘導体であり、その一般式(2)の脱水縮合剤と一般式(1)の糖との反応を、水を含む溶媒中で行うことを特徴とする上記〔１〕に記載の配糖体の製造方法。
〔３〕 一般式(2)で表される脱水縮合剤が、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド、2-クロロ−1,3−ジメチルイミダゾリニウムヘキサフルオロホスファート、1-(クロロ-1-ピロリジニルメチレン)ピロリジニウムヘキサフルオロホスファート、1-(クロ
ロ-1-ピロリジニルメチレン)ピロリジニウムテトラフルオロボラート、クロロ-N,N,N',N'-テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスファート、N,N,N',N'-テトラメチ
ル-O-(N-スクシンイミジル)ウロニウムテトラフルオロボラート、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、O-(7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)- N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート、(4R,5R)-2-クロロ-1,3-ジメチル-4,5-ジフェニル-1-イミダゾリニウムクロリド
、及び(4S,5S)-2-クロロ-1,3-ジメチル-4,5-ジフェニル-1-イミダゾリニウムクロリドか
らなる群から選択されたものであることを特徴とする上記〔１〕又は〔２〕に記載の配糖体の製造方法。
〔４〕 一般式(3)（式中、Zは、アジド基、ハロゲン原子、及びアリールチオ基からなる群から選択されたもので、R¹、R²、R³及びR⁴は、上記と同様の意味を有するものである
）で表される配糖体を得ることを特徴とする上記〔１〕〜〔３〕のいずれか一に記載の配糖体の製造方法。 [1] General formula (1):

(In the above formula, R ¹ , R ² , R ³ and R ⁴ may be the same or different, and independently of each other, a hydrogen atom, a hydroxy group, a hydroxymethyl group, a carboxymethyl group, a carboalkoxymethyl group, Amino group, acylamino group including acetylamino group, carboxy group, amide group, PO ₄ ²⁻ , SO ₄ ⁻ , alkyl group, acyl group, alkoxy group, acyloxy group, glucose,
A group consisting of sugar residues of monosaccharides including galactose, mannose and N-acetylglucosamine, sugar residues of oligosaccharides including cellooligosaccharides, laminary oligosaccharides, chitooligosaccharides, xylooligosaccharides, and sugar residues of polysaccharides Selected from)
And a general formula MZ (wherein Z is substituted with a hydrogen atom, a halogen atom, a nitrogen atom-containing group including an azide group, a carbon atom-containing group including a hydrocarbon group, or a hydrocarbon group) A group consisting of an oxygen atom-containing group including an optionally substituted oxy group, a phosphorus atom-containing group optionally substituted with a hydrocarbon group, and a sulfur atom-containing group including a thio group optionally substituted with a hydrocarbon group And M is a metal, —OH, ammonium or a hydrogen atom), and a compound of the general formula (2):

(In the above formula, R ⁵ , R ⁶ , R ⁷ and R ⁸ may be the same or different, and independently of each other, an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkenyl group and a substituted group. R ⁵ and R ⁷ or R ⁶ and R ⁸ may form a ring, or R ⁵ and R ⁶ or R ⁷ and R ^8. And X may be a halogen atom and Y ⁻ is an anion)
In the presence of a dehydration condensation agent represented by general formula (3):

(In the above formula, Z, R ¹ , R ² , R ³ and R ⁴ have the same meaning as above)
A method for producing a glycoside, comprising obtaining a glycoside represented by the formula:
[2] Y is a halogen atom, OH, BF ₄ , or PF ₆ , the dehydration condensing agent of the general formula (2) is a haloformamidinium derivative, and the dehydration condensing agent of the general formula (2) The method for producing a glycoside according to the above [1], wherein the reaction with the saccharide of formula (1) is carried out in a solvent containing water.
[3] The dehydrating condensing agent represented by the general formula (2) is 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride, 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium hexafluorophosphate, 1- (Chloro-1-pyrrolidinylmethylene) pyrrolidinium hexafluorophosphate, 1- (chloro-1-pyrrolidinylmethylene) pyrrolidinium tetrafluoroborate, chloro-N, N, N ', N'- Tetramethylformamidinium hexafluorophosphate, N, N, N ', N'-tetramethyl-O- (N-succinimidyl) uronium tetrafluoroborate, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ', N'-tetramethyluronium tetrafluoroborate, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N', N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate, O- ( 7-azabenzotriazol-1-yl)-N, N, N ', N'-tetramethyluronium tetra Fluoroborate, (4R, 5R) -2-chloro-1,3-dimethyl-4,5-diphenyl-1-imidazolinium chloride, and (4S, 5S) -2-chloro-1,3-dimethyl- The method for producing a glycoside according to [1] or [2] above, which is selected from the group consisting of 4,5-diphenyl-1-imidazolinium chloride.
[4] General formula (3) (wherein Z is selected from the group consisting of an azide group, a halogen atom and an arylthio group, and R ¹ , R ² , R ³ and R ⁴ are the same as above) The method for producing a glycoside according to any one of [1] to [3] above, wherein the glycoside represented by (1) is obtained.

本発明の製造方法によれば、余計な有機溶媒を用いることなく、単糖から重合度が100
以上の多糖にいたるまで簡便にそれらの配糖体を製造することができる。本発明では、簡便且つ穏和な手法で、そして一段階の工程で、しかも良好な収率で、無保護糖より配糖体、例えば、アジ化糖やフッ化糖などの糖誘導体を合成でき、より長い糖鎖に適用可能で、種々、様々な糖（オリゴ糖及びポリ糖、さらに分岐した糖鎖を含む糖）を、各種の糖化合物や配糖化された化合物にできる技術となるので、例えば、生理活性オリゴ糖、ドラックデリバリーシステムのキャリア、界面活性剤、糖鎖医薬、酵素の活性測定試薬、美白剤、酵素触媒による糖鎖合成試薬、糖ペプチド、糖タンパク質、糖鎖高分子、糖鎖チップなど、様々な用途の物質製造、脂溶性分子の水溶性の向上などに用いられて有用である。
本発明のその他の目的、特徴、優秀性及びその有する観点は、以下の記載より当業者にとっては明白であろう。しかしながら、以下の記載及び具体的な実施例等の記載を含めた本件明細書の記載は本発明の好ましい態様を示すものであり、説明のためにのみ示されているものであることを理解されたい。本明細書に開示した本発明の意図及び範囲内で、種々の変化及び／又は改変（あるいは修飾）をなすことは、以下の記載及び本明細書のその他の部分からの知識により、当業者には容易に明らかであろう。本明細書で引用されている全ての特許文献及び参考文献は、説明の目的で引用されているもので、それらは本明細書の一部としてその内容はここに含めて解釈されるべきものである。 According to the production method of the present invention, the degree of polymerization is 100 from monosaccharide without using an extra organic solvent.
Those glycosides can be easily produced up to the above polysaccharides. In the present invention, a glycoside, for example, a sugar derivative such as azide sugar or fluorinated sugar can be synthesized from an unprotected sugar by a simple and mild technique and in a single step and in a good yield. It can be applied to longer sugar chains, and it becomes a technology that can convert various and various sugars (oligosaccharides and polysaccharides, and sugars including branched sugar chains) into various sugar compounds and glycosylated compounds. , Bioactive oligosaccharides, drug delivery system carriers, surfactants, sugar chain drugs, enzyme activity measurement reagents, whitening agents, enzyme-catalyzed sugar chain synthesis reagents, glycopeptides, glycoproteins, sugar chains, sugar chains It is useful for manufacturing substances for various uses such as chips, and improving water solubility of fat-soluble molecules.
Other objects, features, excellence and aspects of the present invention will be apparent to those skilled in the art from the following description. However, it is understood that the description of the present specification, including the following description and the description of specific examples and the like, show preferred embodiments of the present invention and are presented only for explanation. I want. Various changes and / or modifications (or modifications) within the spirit and scope of the present invention disclosed herein will occur to those skilled in the art based on the following description and knowledge from other parts of the present specification. Will be readily apparent. All patent documents and references cited herein are cited for illustrative purposes and are not to be construed as a part of this specification. is there.

本発明により、無保護糖を出発原料として配糖体あるいは配糖化化合物を合成する方法が提供される。本発明では、それによって得られた新規化合物、さらに該配糖体の用途が提供される。
該配糖体としては、糖から誘導されたもの、例えば、糖鎖含有試薬として機能する活性を有するものであれば特に限定されないが、好ましくは、無保護糖や無保護糖鎖などであるヘミアセタール性のヒドロキシ基をもつ糖から合成されたもので、例えば、上記一般式(3)で示される配糖体が挙げられる。
一般式(3)で示される配糖体は、一般式(1)のヘミアセタール性のヒドロキシ基をもつ糖を脱水縮合剤である一般式(2)のハロホルムアミジニウム誘導体で処理して製造できる。 The present invention provides a method for synthesizing a glycoside or a glycosylated compound using an unprotected sugar as a starting material. In this invention, the use of the novel compound obtained by that and also this glycoside is provided.
The glycoside is not particularly limited as long as it is derived from a sugar, for example, has an activity that functions as a sugar chain-containing reagent, but is preferably a hemi such as an unprotected sugar or an unprotected sugar chain. It is synthesized from a sugar having an acetal hydroxy group and includes, for example, a glycoside represented by the above general formula (3).
The glycoside represented by the general formula (3) is produced by treating a sugar having a hemiacetal hydroxy group represented by the general formula (1) with a haloformamidinium derivative represented by the general formula (2) that is a dehydrating condensing agent. it can.

本明細書中、「アルキル基」としては、直鎖又は分岐鎖、さらには環式のもののいずれであってもよく、例えばC_1-22アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロ
ピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、tert-ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デカニル、ヘキサデカニル、エイコサニル等）等、さらには、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル等の環状アルキル基などが挙げられ、好ましくは、C_1-6アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、tert-ブチル、ペンチル等
）が挙げられ、さらに好ましくは、C_1-4アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、tert-ブチル等）が挙げられる。
本明細書中、「アシルアミノ基」の「アシル」としては、カルボン酸などのオキソ酸から誘導された基を包含していてよく、例えば、置換されていてもよい炭化水素基-CO-基などのカルボン酸アシル基、より具体的には、置換されていてもよいC_1-10アシル基を指す
ものであってよい。ここで、置換されていてもよい炭化水素基は、たとえば置換されていてもよいC_1-22アルキル基、置換されていてもよいC_2-10アルケニル基、置換されていてもよいC_2-10アルキニル基、置換されていてもよいアリール基、置換されていてもよいC_7-12アラルキル基、置換されていてもよい複素環式基等を示す。該C_1-22アルキル基としては
、上述したものが使用できる。該C_2-10アルケニル基としては、例えば、ビニル、アリル
、2-ブテニル、1-ペンテニル基などが用いられる。該C_2-10アルキニル基としては、例え
ば、1-エチニル、プロパルギル、2-ブチニル、1-ペンチニル基などが用いられる。該C_1-10アシル基としては、例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル等の直鎖C_1-10アシルの他、C_1-10アルキル基として前述したアルキル基の結合手側末端のメチレン基をカルボニ
ル基に置換することにより得られるアシル基等が用いられる。該アリール基としては、1-ナフチル、2-ナフチル、2-ビフェニリル、3-ビフェニリル、4-ビフェニリル、2-アンスリル、3-インデニル、5-フルオレニル等が用いられる。該C_7-12アラルキル基としては、ベ
ンジル、1-フェネチル、2-フェネチル、1-ナフチルメチル、2-ナフチルメチル等が用いられる。該複素環式基としては、同一又は異なっていてもよい、１〜４個の複素原子（酸素原子、窒素原子、硫黄原子などから選択される）を有していてよい、飽和又は不飽和の単環式あるいは縮合環式のものが包含されてよく、例えば、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル等が用いられる。本明細書中、「アシル基」としては、上述「アシル」で挙げたものが使用できる。本明細書中、「アシロキシ基」の「アシル基」部分としては、上述「アシル」で挙げたものが使用できる。 In the present specification, the “alkyl group” may be any of linear or branched, and cyclic, for example, C _1-22 alkyl (for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, Isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, isopentyl, tert-pentyl, hexyl, heptyl, octyl, nonyl, decanyl, hexadecanyl, eicosanyl, etc.), cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, etc. Cyclic alkyl groups, and the like, preferably C _1-6 alkyl (for example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert-butyl, pentyl, etc.), more preferably C _1-4 alkyl. (For example, methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert-butyl, etc.) I can get lost.
In the present specification, the “acyl” of the “acylamino group” may include a group derived from an oxo acid such as a carboxylic acid, and examples thereof include an optionally substituted hydrocarbon group —CO— group. A carboxylic acid acyl group, and more specifically, an optionally substituted C _1-10 acyl group. Here, the optionally substituted hydrocarbon group includes, for example, an _optionally substituted C _1-22 alkyl group, an _optionally substituted C _2-10 alkenyl group, and an _optionally substituted C _{2− 10 represents an} alkynyl group, an optionally substituted aryl group, an _optionally substituted C _7-12 aralkyl group, an _optionally substituted heterocyclic group and the like. As the C _1-22 alkyl group, those described above can be used. Examples of the C _2-10 alkenyl group include vinyl, allyl, 2-butenyl, and 1-pentenyl groups. Examples of the C _2-10 alkynyl group include 1-ethynyl, propargyl, 2-butynyl, 1-pentynyl group and the like. Examples of the C _1-10 acyl group include a linear C _1-10 acyl such as formyl, acetyl, propionyl, etc., as well as a methylene group at the terminal end of the above-mentioned alkyl group as a C _1-10 alkyl group. An acyl group obtained by substituting the group is used. As the aryl group, 1-naphthyl, 2-naphthyl, 2-biphenylyl, 3-biphenylyl, 4-biphenylyl, 2-anthryl, 3-indenyl, 5-fluorenyl and the like are used. As the C _7-12 aralkyl group, benzyl, 1-phenethyl, 2-phenethyl, 1-naphthylmethyl, 2-naphthylmethyl and the like are used. The heterocyclic group may have 1 to 4 heteroatoms (selected from oxygen atom, nitrogen atom, sulfur atom, etc.) which may be the same or different, saturated or unsaturated. Monocyclic or condensed ring may be included, and for example, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl and the like are used. In the present specification, as the “acyl group”, those described above for “acyl” can be used. In the present specification, as the “acyl group” part of the “acyloxy group”, those described above for “acyl” can be used.

本明細書中、「ハロゲン原子」としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等が挙げられ、好ましくはフッ素が挙げられる。本明細書中、「窒素原子含有基」としては、アジド基、アゾ基、テトラアゾニウム基、ニトロ基、その他の当該分野で窒素原子含有基として知られたもの、本明細書で言及した窒素原子を含有している基はすべて包含されると考えてよい。本明細書中、「炭素原子含有基」としては、置換されていてもよい炭化水素基などが挙げられるほか、当該分野で炭素原子含有基として知られたもの、本明細書で言及した炭素原子を含有している基はすべて包含されると考えてよい。本明細書中、「リン原子含有基」としては、リン酸、ホスホン酸、ホスフィン酸、亜リン酸、亜ホスホン酸、亜ホスフィン酸の残基、その誘導体の残基などが包含される。該リン原子含有基においては、置換されていてもよい炭化水素基がリン原子に直接結合していてもよいし、あるいは、酸素原子、硫黄原子、及び／又は、窒素原子を介してリン原子に結合していてもよい。該リン原子含有基としては、当該分野でリン原子含有基として知られたもの、本明細書で言及したリン原子を含有している基はすべて包含されると考えてよい。本明細書中、「硫黄原子含有基」としては、炭化水素基で置換されていてもよいチオ基などが挙げられるほか、当該分野で硫黄原子含有基として知られたもの、本明細書で言及した硫黄原子を含有している基はすべて包含されると考えてよい。該硫黄原子含有基としては、置換されていてもよいアリールチオ基（例、ニトロフェニルチオ基など）などが挙げられる。
一般式MZの化合物に関連して、Mにおける「金属」としては、当該分野で金属として知
られたもので、例えば、アルカリ金属（例、リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウムなど）、アルカリ土類金属（例、マグネシウム、カルシウム、バリウムなど）、遷移金属、アルミニウム、亜鉛、鉛、スズ、水銀などが挙げられる。一般式MZの化合物としては、例えば、アジ化アルカリ金属、フッ化アルカリ金属、チオフェノールなどの芳香族チオール化合物、2,4-ペンタンジオンなどのジケトン化合物などが挙げられる。 In the present specification, examples of the “halogen atom” include fluorine, chlorine, bromine, iodine and the like, preferably fluorine. In the present specification, the “nitrogen atom-containing group” includes an azide group, an azo group, a tetraazonium group, a nitro group, other known nitrogen atom-containing groups in the art, and the nitrogen mentioned in the present specification. Any group containing an atom may be considered to be included. In the present specification, examples of the “carbon atom-containing group” include an optionally substituted hydrocarbon group and the like, as well as those known in the art as carbon atom-containing groups, and the carbon atoms referred to in the present specification. Any group containing can be considered to be included. In the present specification, the “phosphorus atom-containing group” includes residues of phosphoric acid, phosphonic acid, phosphinic acid, phosphorous acid, phosphonous acid, phosphinic acid, residues of derivatives thereof, and the like. In the phosphorus atom-containing group, an optionally substituted hydrocarbon group may be directly bonded to the phosphorus atom, or may be bonded to the phosphorus atom via an oxygen atom, a sulfur atom, and / or a nitrogen atom. It may be bonded. The phosphorus atom-containing group may be considered to include all groups known in the art as phosphorus atom-containing groups and groups containing a phosphorus atom referred to in the present specification. In the present specification, examples of the “sulfur atom-containing group” include a thio group which may be substituted with a hydrocarbon group, as well as what is known in the art as a sulfur atom-containing group, and is referred to in the present specification. Any group containing a sulfur atom may be considered to be included. Examples of the sulfur atom-containing group include an optionally substituted arylthio group (eg, nitrophenylthio group).
In connection with the compound of general formula MZ, the “metal” in M is known in the art as a metal, for example, an alkali metal (eg, lithium, sodium, potassium, cesium, etc.), an alkaline earth metal (Eg, magnesium, calcium, barium, etc.), transition metals, aluminum, zinc, lead, tin, mercury and the like. Examples of the compound represented by the general formula MZ include aromatic thiol compounds such as alkali metal azide, alkali metal fluoride and thiophenol, and diketone compounds such as 2,4-pentanedione.

本明細書中、一般式(2)などに関連して、「置換されていてもよいアルキル基」中の「
アルキル基」としては、上記と同様なものが挙げられる。「置換されていてもよいアルケニル基」中の「アルケニル基」としては、直鎖又は分岐鎖のいずれであってもよく、例えばC_2-24アルケニル（例えば、ビニル、アリル、イソプロペニル、1-ブテニル、2-ブテニ
ル、3-ブテニル、2-メチル-2-プロペニル、1-メチル-2-プロペニル、2-メチル-1-プロペ
ニル等）が挙げられる。「置換されていてもよいアリール基」中の「アリール基」としては、例えばC_6-14アリール（例えば、フェニル、1-ナフチル、2-ナフチル、2-ビフェニリ
ル、3-ビフェニリル、4-ビフェニリル、2-アンスリル、3-インデニル、5-フルオレニル等）等が挙げられ、好ましくは、フェニル基である。 In the present specification, in relation to general formula (2) and the like, “an alkyl group which may be substituted” in “
Examples of the “alkyl group” include those similar to the above. The “alkenyl group” in the “optionally substituted alkenyl group” may be either linear or branched, for example, C _2-24 alkenyl (eg, vinyl, allyl, isopropenyl, 1- Butenyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-methyl-2-propenyl, 1-methyl-2-propenyl, 2-methyl-1-propenyl and the like. Examples of the “aryl group” in the “optionally substituted aryl group” include C _6-14 aryl (for example, phenyl, 1-naphthyl, 2-naphthyl, 2-biphenylyl, 3-biphenylyl, 4-biphenylyl, 2-anthryl, 3-indenyl, 5-fluorenyl, etc.) and the like, preferably a phenyl group.

また、上記「置換されていてもよい炭化水素基」、「置換されていてもよいアルキル基
」、「置換されていてもよいアルケニル基」、「置換されていてもよいアリール基」及び「置換されていてもよい複素環式基」（その他「置換されていてもよい」との修飾語の付された場合を含む）における「炭化水素基」、「アルキル基」、「アルケニル基」、「アリール基」及び「複素環式基」（その他の対応するものを包含する）は、任意に、１個又はそれ以上（例えば、１〜５個）の、同一でも異なっていてもよい、置換基で置換されていてもよく、その置換されている場合の「置換基」としては、当該分野で知られた置換基であってよく、例えば、次のものから選択されてよい： In addition, the above “optionally substituted hydrocarbon group”, “optionally substituted alkyl group”, “optionally substituted alkenyl group”, “optionally substituted aryl group” and “substituted” "Hydrocarbon group", "alkyl group", "alkenyl group" in "optionally substituted heterocyclic group" (including other cases where the modifier "optionally substituted" is attached), " “Aryl group” and “heterocyclic group” (including other corresponding groups) are optionally substituted by one or more (eg, 1-5) substituents which may be the same or different. The “substituent” in the case of the substitution may be a substituent known in the art, and may be selected from, for example, the following:

オキソ、チオキソ、置換基を有していてもよいイミノ、ハロゲン原子（例、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等）、C_1-3アルキレンジオキシ（例、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ等）、ニトロ、シアノ、C_1-6アルキル、C_2-6アルケニル、カルボキシC_2-6アルケニル（例、2-カルボキシエテニル、2-カルボキシ-2-メチルエテニル等）、C_2-6アルキニル、C_3-6シクロアルキル、C_6-14アリール（例、フェニル、1-ナフチル、4-ビフェニリル、2-アンスリル等）、C_1-8アルコキシ、C_1-6アルコキシ−カルボニル-C_1-6アルコキシ（例、エト
キシカルボニルメチルオキシ等）、ヒドロキシ、C_6-14アリールオキシ（例、フェニルオ
キシ等）、C_7-16アラルキルオキシ（例えば、ベンジルオキシ等）、メルカプト、C_1-6ア
ルキルチオ、C_6-14アリールチオ（例、フェニルチオ等）、C_7-16アラルキルチオ（例えば、ベンジルチオ等）、アミノ、モノ-C_1-6アルキルアミノ（例、メチルアミノ、エチルア
ミノ等）、モノ-C_6-14アリールアミノ（例、フェニルアミノ等）、ジ-C_1-6アルキルアミ
ノ（例、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ等）、ジ-C_6-14アリールアミノ（例、ジフェニルアミノ等）、 Oxo, thioxo, imino optionally having substituent, halogen atom (eg, fluorine, chlorine, bromine, iodine, etc.), C _1-3 alkylenedioxy (eg, methylenedioxy, ethylenedioxy, etc.), Nitro, cyano, C _1-6 alkyl, C _2-6 alkenyl, carboxy C _2-6 alkenyl (eg, 2-carboxyethenyl, 2-carboxy-2-methylethenyl, etc.), C _2-6 alkynyl, C _{3- 6} cycloalkyl, C _6-14 aryl (eg, phenyl, 1-naphthyl, 4-biphenylyl, 2-anthryl, etc.), C _1-8 alkoxy, C _1-6 alkoxy-carbonyl-C _1-6 alkoxy (eg, Ethoxycarbonylmethyloxy etc.), hydroxy, C _6-14 aryloxy (eg, phenyloxy etc.), C _7-16 aralkyloxy (eg benzyloxy etc.), mercapto, C _1-6 alkylthio, C _6-14 arylthio (Eg, phenylthi E), C _7-16 aralkylthio (eg, benzylthio, etc.), amino, mono-C _1-6 alkylamino (eg, methylamino, ethylamino, etc.), mono-C _6-14 arylamino (eg, phenyl) Amino), di-C _1-6 alkylamino (eg, dimethylamino, diethylamino, etc.), di-C _6-14 arylamino (eg, diphenylamino, etc.),

ホルミル、カルボキシ、C_1-6アルキル−カルボニル（例、アセチル、プロピオニル等）、C_3-6シクロアルキル−カルボニル（例、シクロプロピルカルボニル等）、C_1-6アルコキシ−カルボニル（例、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、tert-ブトキシカルボニル等）、C_6-14アリール−カルボニル（例、ベンゾイル等）、C_7-16アラルキル−カルボニル（例、フェニルアセチル等）、C_6-14アリールオキシ-カルボニ
ル（例、フェノキシカルボニル等）、C_7-16アラルキルオキシ-カルボニル（例、ベンジルオキシカルボニル等）、５又は６員複素環カルボニル（例、ニコチノイル、テノイル、フロイル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル、ピペラジン-1-イルカルボ
ニル、ピロリジン-1-イルカルボニル等）、カルバモイル、チオカルバモイル、モノ-C_1-6アルキル-カルバモイル（例、メチルカルバモイル等）、ジ-C_1-6アルキル-カルバモイル
（例、ジメチルカルバモイル等）、C_6-14アリール-カルバモイル（例、フェニルカルバモイル等）、５又は６員複素環カルバモイル（例、3-ピリジルカルバモイル、2-チエニルカルバモイル等）、 Formyl, carboxy, C _1-6 alkyl-carbonyl (eg, acetyl, propionyl, etc.), C _3-6 cycloalkyl-carbonyl (eg, cyclopropylcarbonyl, etc.), C _1-6 alkoxy-carbonyl (eg, methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, propoxycarbonyl, tert-butoxycarbonyl, etc.), C _6-14 aryl-carbonyl (eg, benzoyl, etc.), C _7-16 aralkyl-carbonyl (eg, phenylacetyl, etc.), C _6-14 aryloxy-carbonyl (Eg, phenoxycarbonyl, etc.), C _7-16 aralkyloxy-carbonyl (eg, benzyloxycarbonyl, etc.), 5- or 6-membered heterocyclic carbonyl (eg, nicotinoyl, thenoyl, furoyl, morpholinocarbonyl, thiomorpholinocarbonyl, piperazine- 1-ylcarbonyl, pyrrolidin-1-ylcarbonyl, etc.), Carbamoyl, thiocarbamoyl, mono-C _1-6 alkyl-carbamoyl (eg, methylcarbamoyl), di-C _1-6 alkyl-carbamoyl (eg, dimethylcarbamoyl), C _6-14 aryl-carbamoyl (eg, phenyl) Carbamoyl, etc.), 5- or 6-membered heterocyclic carbamoyl (eg, 3-pyridylcarbamoyl, 2-thienylcarbamoyl, etc.),

C_1-6アルキルスルホニル（例、メチルスルホニル等）、C_6-14アリールスルホニル（例、
フェニルスルホニル等）、C_1-6アルキルスルフィニル（例、メチルスルフィニル等）、C_6-14アリールスルフィニル（例、フェニルスルフィニル等）、ホルミルアミノ、C_1-6アル
キル−カルボニルアミノ（例、アセチルアミノ等）、C_6-14アリール-カルボニルアミノ（例、ベンゾイルアミノ等）、C_1-6アルコキシ−カルボニルアミノ（例、メトキシカルボニルアミノ等）、C_1-6アルキルスルホニルアミノ（例、メチルスルホニルアミノ等）、C_6-14アリールスルホニルアミノ（例、フェニルスルホニルアミノ等）、C_1-6アルキル−カル
ボニルオキシ（例、アセトキシ等）、C_6-14アリール−カルボニルオキシ（例、ベンゾイ
ルオキシ等）、C_1-6アルコキシ−カルボニルオキシ（例、メトキシカルボニルオキシ等）、モノ-C_1-6アルキル-カルバモイルオキシ（例、メチルカルバモイルオキシ等）、ジ-C_1-6アルキル-カルバモイルオキシ（例、ジメチルカルバモイルオキシ等）、C_6-14アリール-カルバモイルオキシ（例、フェニルカルバモイルオキシ等）、ニコチノイルオキシ、置換基を有していてもよい５ないし７員飽和環状アミノ、５ないし10員芳香族複素環基（例、2-チエニル、2-ピリジル、3-ピリジル、4-ピリジル、2-キノリル、4-キノリル、8-キノリ
ル、4-イソキノリル、1-インドリル、3-インドリル、2-ベンゾチアゾリル、2-ベンゾ[b]
チエニル、2-ベンゾ[b]フラニル、3-ベンゾ[b]フラニル等）、スルホ、スルファモイル、スルフィナモイル、スルフェナモイル等が挙げられる。ここに挙げられた置換基において「アルキル部」（アルコキシ中のアルキル部を含む）、「アルキレン部」、「アルケニル部」、「アルキニル部」、「アリール部」、及び「複素環部」は、任意に、１個又はそれ以上の置換基で置換されていてもよく、その場合の置換基としては上記で説明したような基であってよい。上記「置換基」の説明で「置換基を有していてもよい」場合の置換基は、同様に、上記で説明したような基である。 C _1-6 alkylsulfonyl (eg, methylsulfonyl), C _6-14 arylsulfonyl (eg,
Phenylsulfonyl, etc.), C _1-6 alkylsulfinyl (eg, methylsulfinyl, etc.), C _6-14 arylsulfinyl (eg, phenylsulfinyl, etc.), formylamino, C _1-6 alkyl-carbonylamino (eg, acetylamino, etc.) ), C _6-14 aryl-carbonylamino (eg, benzoylamino, etc.), C _1-6 alkoxy-carbonylamino (eg, methoxycarbonylamino, etc.), C _1-6 alkylsulfonylamino (eg, methylsulfonylamino, etc.) C _6-14 arylsulfonylamino (eg, phenylsulfonylamino, etc.), C _1-6 alkyl-carbonyloxy (eg, acetoxy, etc.), C _6-14 aryl-carbonyloxy (eg, benzoyloxy, etc.), C _{1 -6} alkoxy - carbonyloxy (e.g., methoxycarbonyloxy, etc.), mono--C _1-6 alkyl - carbamoyloxy Examples, methylcarbamoyloxy, etc.), di -C _1-6 alkyl - carbamoyloxy (e.g., dimethylcarbamoyloxy, etc.), C _6-14 aryl - carbamoyloxy (e.g., phenylcarbamoyloxy, etc.), nicotinoyloxy oxy substituent 5- to 7-membered saturated cyclic amino, which may have a 5- to 10-membered aromatic heterocyclic group (eg, 2-thienyl, 2-pyridyl, 3-pyridyl, 4-pyridyl, 2-quinolyl, 4-quinolyl) , 8-quinolyl, 4-isoquinolyl, 1-indolyl, 3-indolyl, 2-benzothiazolyl, 2-benzo [b]
Thienyl, 2-benzo [b] furanyl, 3-benzo [b] furanyl, etc.), sulfo, sulfamoyl, sulfinamoyl, sulfenamoyl and the like. In the substituents listed here, the “alkyl part” (including the alkyl part in alkoxy), “alkylene part”, “alkenyl part”, “alkynyl part”, “aryl part”, and “heterocyclic part” Optionally, it may be substituted with one or more substituents, in which case the substituents may be groups as described above. In the description of the above “substituent”, the substituent in the case of “may have a substituent” is also a group as described above.

「R⁵とR⁷あるいはR⁶とR⁸で環を形成」の場合の「環」としては、R⁵やR⁷が結合している窒素原子、あるいは、R⁶やR⁸が結合している窒素原子、と一緒になり、さらに酸素原子、窒素原子及び／又は硫黄原子を任意に１個又はそれ以上含んでいてよい炭素鎖により形成される５〜７員環であってよく、例えば、イミダゾリン環、ベンゾイミダゾリン環、ヒドロピリミジン環などであってよい。「R⁵とR⁶あるいはR⁷とR⁸で環を形成」の場合の「環」としては、R⁵やR⁶が結合している窒素原子、あるいは、R⁷やR⁸が結合している窒素原子、と一緒になり、さらに酸素原子、窒素原子及び／又は硫黄原子を任意に１個又はそれ以上含んでいてよい炭素鎖により形成される５〜７員環であってよく、例えば、ピロリジン環、ピペリジン環、ピペラジン環、モルホリン環、チオモルホリン環などであってよい。X
はハロゲン原子で、例えば、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子などである。
Y^-は、陰イオンであれば特に限定されるものではないが、適当なYとしては、例えば、
塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子などのハロゲン原子、OH、BF₄、PF₆などが挙げられる。 In the case of “R ⁵ and R ⁷ or R ⁶ and R ⁸ form a ring”, the “ring” is a nitrogen atom to which R ⁵ or R ⁷ is bonded, or R ⁶ or R ⁸ is bonded. A 5-7 membered ring formed by a carbon chain which together with the nitrogen atom may further contain one or more oxygen, nitrogen and / or sulfur atoms, for example, It may be an imidazoline ring, a benzimidazoline ring, a hydropyrimidine ring, or the like. The “ring” in the case of “R ⁵ and R ⁶ or R ⁷ and R ⁸ form a ring” is the nitrogen atom to which R ⁵ and R ⁶ are bonded, or R ⁷ and R ⁸ are bonded. A 5-7 membered ring formed by a carbon chain which together with the nitrogen atom may further contain one or more oxygen, nitrogen and / or sulfur atoms, for example, It may be a pyrrolidine ring, a piperidine ring, a piperazine ring, a morpholine ring, a thiomorpholine ring, or the like. X
Is a halogen atom, for example, a chlorine atom, a bromine atom or an iodine atom.
Y ⁻ is not particularly limited as long as it is an anion, but suitable Y is, for example,
Halogen atoms such as chlorine atom, bromine atom and iodine atom, OH, BF ₄ , PF _{6 and the} like can be mentioned.

本明細書中、糖残基とは糖から誘導されるものを指してよい。本明細書で「糖」とは、糖類、糖質、複合糖質などを含む意味と理解してよく、「糖類」とは、単糖類、単糖類が複数個縮合した小糖類（二糖類、オリゴ糖を含む）、多糖類を指すものである。糖類は、炭素原子とほぼ同数の酸素原子をもつポリヒドロキシアルデヒド、ポリヒドロキシケトン、及びこれらの誘導体（例えば、アミノ基をもつアミノ糖、アルデヒド基又は第一級ヒドロキシ基の部分がカルボキシル基となっているカルボン酸、アルデヒド基やケトン基がヒドロキシ基となっている多価アルコールなど）など、並びに、それらの縮重合体を指すものであってよい。「糖質」とは、糖類を主要な成分としてもつ物質を指すと理解してよく、糖のみから成るものを単純糖質、その他の物質（タンパク質、脂質、合成高分子などを含む）を含むものを複合糖質と考えてよい。   In the present specification, the sugar residue may refer to those derived from sugar. In the present specification, the term “sugar” may be understood to include saccharides, saccharides, complex carbohydrates, etc., and “saccharide” refers to a monosaccharide, a small saccharide condensed with a plurality of monosaccharides (disaccharide, (Including oligosaccharides) and polysaccharides. Sugars are polyhydroxy aldehydes, polyhydroxy ketones, and derivatives thereof having approximately the same number of oxygen atoms as carbon atoms (for example, amino sugars having amino groups, aldehyde groups, or primary hydroxy groups become carboxyl groups). Carboxylic acid, polyhydric alcohol in which an aldehyde group or a ketone group is a hydroxy group, and the like, and their condensation polymers. “Carbohydrate” may be understood to refer to a substance having a saccharide as a main component, and includes simple sugars and other substances (including proteins, lipids, synthetic polymers, etc.) consisting only of sugar. You can think of things as complex carbohydrates.

本発明の糖は、当該物質の起源、由来によって特に限定されることなく、天然から得られるもの、遺伝子工学的に動物細胞、植物細胞、微生物などにより合成したもの、酵素的に製造されたもの、醗酵により製造されたもの、あるいは人工的に化学合成されたものなどが包含されてよい。糖には、単糖、二糖、オリゴ糖、多糖が包含されてよく、単糖ではグルコース、ガラクトース、マンノース、グルコサミン、N-アセチルグルコサミン、ガラクトサミン、N-アセチルガラクトサミン、マンノサミン、N-アセチルマンノサミン、フルクトース、グルクロン酸、イズロン酸などが挙げられ、二糖ではマルトース、イソマルトース、ラクトース、ラクトサミン、N-アセチルラクトサミン、セロビオース、メリビオース、N,N'-ジアセチルキトビオース、ヒアルロン酸二糖、グリコサミノグリカン二糖など
が挙げられる。 The sugar of the present invention is not particularly limited by the origin and origin of the substance, but can be obtained from nature, genetically engineered by animal cells, plant cells, microorganisms, etc., or enzymatically produced Those produced by fermentation, or those artificially chemically synthesized may be included. Sugars may include monosaccharides, disaccharides, oligosaccharides, polysaccharides, and monosaccharides include glucose, galactose, mannose, glucosamine, N-acetylglucosamine, galactosamine, N-acetylgalactosamine, mannosamine, N-acetylmannos Examples of the disaccharide include maltose, isomaltose, lactose, lactosamine, N-acetyllactosamine, cellobiose, melibiose, N, N'-diacetylchitobiose, hyaluronic acid disaccharide And glycosaminoglycan disaccharide.

オリゴ糖としては、２個以上の単糖から構成される通常の意味でのオリゴ糖が包含され、通常２〜30個の単糖から構成されるもの、代表的には、２〜20個の単糖から構成されるものが挙げられ、グルコース、ガラクトース、マンノース、グルコサミン、N-アセチルグルコサミン、フルクトースなどから構成されるホモオリゴマー、あるいは、グルコース、ガラクトース、マンノース、グルコサミン、N-アセチルグルコサミン、フルクトース、シアル酸などの２成分以上より構成されるヘテロオリゴマーが挙げられ、例えば、マルトオ
リゴ糖、イソマルトオリゴ糖、ラクトオリゴ糖、ラクトサミンオリゴ糖、N-アセチルラクトサミンオリゴ糖、セロオリゴ糖、メリビオオリゴ糖、N-アセチルキトトリオース、N-アセチルキトテトラオース、N-アセチルキトペンタオースなどが挙げられる。またグリコサミノグリカンオリゴ糖、例えば、ヒアルロン酸オリゴ糖（例えば、前記したヒアルロン酸二糖や、ヒアルロン酸四糖など）、コンドロイチン硫酸オリゴ糖（例えば、コンドロイチン硫酸Ａオリゴ糖、コンドロイチン硫酸Ｃオリゴ糖など）、ケラタン硫酸オリゴ糖、ヘパリンオリゴ糖、ヘパラン硫酸オリゴ糖なども挙げられる。 Oligosaccharides include oligosaccharides in the usual sense composed of 2 or more monosaccharides, and usually composed of 2 to 30 monosaccharides, typically 2 to 20 Examples include monosaccharides, homo-oligomers composed of glucose, galactose, mannose, glucosamine, N-acetylglucosamine, fructose, etc., or glucose, galactose, mannose, glucosamine, N-acetylglucosamine, fructose, Examples include hetero-oligomers composed of two or more components such as sialic acid, such as maltooligosaccharide, isomaltooligosaccharide, lactoligosaccharide, lactosamine oligosaccharide, N-acetyllactosamine oligosaccharide, cellooligosaccharide, melivio oligosaccharide, N- Acetylchitotriose, N-acetylchitotetraose, N-acetyl Examples include chitopentaose. Also, glycosaminoglycan oligosaccharides such as hyaluronic acid oligosaccharides (for example, hyaluronic acid disaccharide and hyaluronic acid tetrasaccharide described above), chondroitin sulfate oligosaccharides (for example, chondroitin sulfate A oligosaccharide, chondroitin sulfate C oligosaccharide) And keratan sulfate oligosaccharides, heparin oligosaccharides, heparan sulfate oligosaccharides, and the like.

多糖としては、動物、植物（海藻を含む）、昆虫、微生物など広範囲な生物で見いだされているものが挙げられ、例えば、シアロ複合型糖鎖、N結合型糖鎖、O結合型糖鎖、グリコサミノグリカン、澱粉、アミロース、アミロペクチン、セルロース、キチン、グリコーゲン、アガロース、アルギン酸、ヒアルロン酸、イヌリン、グルコマンナンなどが挙げられる。
本発明において該糖残基には、糖の修飾物残基が包含されていても良い。本発明で糖の修飾物とは、天然に存在するものから単離・精製する過程で修飾されたもの、酵素的に修飾されたもの、化学的に修飾されたもの、微生物を含めて生物学的な手法で修飾されたものであってよく、糖科学の分野で知られた修飾が含まれ、例えば、加水分解、酸化還元、エステル化、アシル化、アミノ化、エーテル化、ニトロ化、脱水反応、配糖化などによる修飾が包含されていてよい。 Examples of polysaccharides include those found in a wide range of organisms such as animals, plants (including seaweed), insects, and microorganisms. For example, sialo-complex sugar chains, N-linked sugar chains, O-linked sugar chains, Examples include glycosaminoglycan, starch, amylose, amylopectin, cellulose, chitin, glycogen, agarose, alginic acid, hyaluronic acid, inulin, glucomannan and the like.
In the present invention, the sugar residue may include a modified sugar residue. In the present invention, a modified sugar is one that has been modified in the process of isolation and purification from a naturally occurring one, one that has been modified enzymatically, one that has been chemically modified, and biology including microorganisms. May be modified by conventional techniques, including modifications known in the field of glycoscience, such as hydrolysis, redox, esterification, acylation, amination, etherification, nitration, dehydration Modifications by reaction, glycosylation and the like may be included.

本発明の配糖体の製造法で用いられる脱水縮合剤としては、ハロホルムアミジニウム誘導体を好適に使用でき、代表的には、一般式(2)で表されるハロホルムアミジニウム誘導
体が使用される。該ハロホルムアミジニウム誘導体(2)は、対応する尿素誘導体を適当な
ハロゲン化剤、例えば、クロル化剤などで処理することにより得られる。該ハロゲン化剤としては、例えば、ホスゲン、塩化オキザリル、五塩化リン、三塩化リン、オキシ塩化リン、それらに相当する臭化物などが挙げられる。化合物(2)の具体例としては、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロライド(2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride; DMC)、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムヘキサフルオロホスファート(2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium hexafluorophosphate; CIP)、1-(クロロ-1-ピロリジニルメチレン)ピロリジニウムヘキサフルオロホスファート、1-(クロロ-1-ピロリジニルメチ
レン)ピロリジニウムテトラフルオロボラート、クロロ-N,N,N',N'-テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスファート、N,N,N',N'-テトラメチル-O-(N-スクシンイミジル)ウロニウムテトラフルオロボラート、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テ
トラメチルウロニウムテトラフルオロボラート、O-(ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、O-(7-アザベンゾトリアゾー
ル-1-イル)- N,N,N',N'-テトラメチルウロニウムテトラフルオロボラート、(4R,5R)-2-クロロ-1,3-ジメチル-4,5-ジフェニル-1-イミダゾリニウムクロリド、(4S,5S)-2-クロロ-1,3-ジメチル-4,5-ジフェニル-1-イミダゾリニウムクロリド、N,N,N',N'-テトラメチルクロロフォルムアミジニウムクロライド(N,N,N',N'-tetramethylchloroformamidinium chloride)、クロロ-N,N,N',N'-ビス（テトラメチレン）フォルムアミジニウムヘキサフルオロホスファート(chloro- N,N,N',N'-bis(tetramethylene)formamidinium hexafluorophosphate)、2-クロロ-1,3-ジメチル-3,4,5,6-テトラヒドロ-2(1H)-ピリミジニウムクロリドなど
が挙げられる。 As the dehydrating condensing agent used in the method for producing a glycoside of the present invention, a haloformamidinium derivative can be suitably used, and typically, a haloformamidinium derivative represented by the general formula (2) is used. Is done. The haloformamidinium derivative (2) can be obtained by treating the corresponding urea derivative with an appropriate halogenating agent such as a chlorinating agent. Examples of the halogenating agent include phosgene, oxalyl chloride, phosphorus pentachloride, phosphorus trichloride, phosphorus oxychloride, and bromides corresponding thereto. Specific examples of the compound (2) include 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC), 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium Hexafluorophosphate (2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium hexafluorophosphate; CIP), 1- (chloro-1-pyrrolidinylmethylene) pyrrolidinium hexafluorophosphate, 1- (chloro-1-pyrrolidinylmethylene) ) Pyrrolidinium tetrafluoroborate, chloro-N, N, N ', N'-tetramethylformamidinium hexafluorophosphate, N, N, N', N'-tetramethyl-O- (N-succinimidyl) ) Uronium tetrafluoroborate, O- (benzotriazol-1-yl) -N, N, N ', N'-tetramethyluronium tetrafluoroborate, O- (benzotriazol-1-yl) -N , N, N ', N'-Tetramethyluronium hexafluorophosphate, O- (7-aza Benzotriazol-1-yl) -N, N, N ', N'-tetramethyluronium tetrafluoroborate, (4R, 5R) -2-chloro-1,3-dimethyl-4,5-diphenyl-1 -Imidazolinium chloride, (4S, 5S) -2-Chloro-1,3-dimethyl-4,5-diphenyl-1-imidazolinium chloride, N, N, N ', N'-tetramethylchloroformamid Nitrogen chloride (N, N, N ', N'-tetramethylchloroformamidinium chloride), Chloro-N, N, N', N'-bis (tetramethylene) formamidinium hexafluorophosphate (chloro-N, N, N ', N'-bis (tetramethylene) formamidinium hexafluorophosphate), 2-chloro-1,3-dimethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2 (1H) -pyrimidinium chloride, and the like.

本発明を実施するに当たり、すべての糖において配糖体を製造することが可能になる。本発明は糖が溶解するすべての液体で実施可能であるが、望ましくは水で行うのが好ましい。
化合物(2)を使用しての化合物(3)の合成反応は、当該反応に悪影響を与えない限り、当該分野で知られた溶媒などの媒体中で行うことができる。当該反応は、無溶媒（反応原料が溶媒を兼ねる場合を含んでよい）中でもよいが、通常、反応に不活性な溶媒存在下にて
行うのが有利である。該溶媒は、反応が進行する限り特に限定されないが、好適には水性溶媒を使用でき、例えば、水、メタノール、エタノール、n-プロパノール、イソプロパノール、シクロヘキサノール、フルフリルアルコール、エチレングリコール、ベンジルアルコールなどのアルコール類、例えば、テトラヒドロフラン(THF)、ジオキサン、テトラヒ
ドロフルフリルアルコール、ジエチレングリコール、シクロヘキシルメチルエーテル、メチルセロソルブ、セロソルブ、ブチルセロソルブ、メチルtert-ブタノール等のエーテル
類、例えば、メチルエチルケトン、フルフラール、メチルイソブチルケトン、メシチルオキシド、ジアセトンアルコール、シクロヘキサノン等のケトン類、例えば、アセトニトリル、ベンゾニトリル等のニトリル類、例えば、ジメチルスルホキシド(DMSO)、スルホラン等のスルホキシド類、例えば、ホルムアミド、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、N,N-ジ
メチルアセトアミド等のアミド類、例えば、ギ酸メチル、ギ酸エチル、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸メトキシブチル、酢酸セロソルブ、炭酸ジエチル、炭酸グリコール等のエステル類、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、無水酢酸等の有機酸類、ヘキサメチルホスホロトリアミド、ピリジン、キノリン等の複素環化合物、アニリン、N-メチルアニリン等の芳香族アミン類、ニトロ化合物等が挙げられる。これらの溶媒は単独で用いることもできるし、また必要に応じて二種又はそれ以上の多種類を適当な割合、例えば、1:1〜1:1000の割合で混合して用いてもよい。 In practicing the present invention, glycosides can be produced for all sugars. The present invention can be practiced with any liquid in which the sugar dissolves, but preferably with water.
The synthesis reaction of compound (3) using compound (2) can be performed in a medium such as a solvent known in the art as long as the reaction is not adversely affected. The reaction may be in the absence of a solvent (including the case where the reaction raw material also serves as a solvent), but it is usually advantageous to perform in the presence of a solvent inert to the reaction. The solvent is not particularly limited as long as the reaction proceeds, but an aqueous solvent can be preferably used, such as water, methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, cyclohexanol, furfuryl alcohol, ethylene glycol, benzyl alcohol, and the like. Alcohols such as tetrahydrofuran (THF), dioxane, tetrahydrofurfuryl alcohol, diethylene glycol, cyclohexyl methyl ether, methyl cellosolve, cellosolve, butyl cellosolve, methyl tert-butanol and the like ethers such as methyl ethyl ketone, furfural, methyl isobutyl ketone, Ketones such as mesityl oxide, diacetone alcohol and cyclohexanone, for example, nitriles such as acetonitrile and benzonitrile, such as dimethyls Sulfoxides such as hydroxide (DMSO) and sulfolane, for example, amides such as formamide, N, N-dimethylformamide (DMF), and N, N-dimethylacetamide, such as methyl formate, ethyl formate, ethyl acetate, butyl acetate, Esters such as methoxybutyl acetate, cellosolve acetate, diethyl carbonate and glycol carbonate, for example, organic acids such as formic acid, acetic acid, propionic acid and acetic anhydride, heterocyclic compounds such as hexamethylphosphorotriamide, pyridine and quinoline, aniline, Aromatic amines such as N-methylaniline, nitro compounds and the like can be mentioned. These solvents can be used singly or, if necessary, two or more of them can be mixed at an appropriate ratio, for example, a ratio of 1: 1 to 1: 1000.

当該反応の反応媒体は水ならびに通常使用される有機溶媒が利用可能であるが、水溶液が好ましく、さらに水を含む有機溶媒も利用可能で、特には、アミンを有する塩水溶液がより好ましい。また、緩衝能を有する塩水溶液を使用することもできる。緩衝液としては、当該反応に悪影響を与えない限り、当該分野で知られたものの中から選択することができ、例えば、リン酸塩緩衝液、クエン酸塩緩衝液、Tris緩衝液などが挙げられる。
典型的な場合、当該アミン溶液が示す水素イオン濃度pHは1.0〜13であって、より好ま
しくは7.5〜11の範囲である。また、反応温度は、反応が進行する限り特に制限されず、
典型的には、反応混合物が凝固または沸騰しない温度範囲であればよく、具体的な場合、水溶液が凝固または沸騰しない温度範囲であれば実施可能で、例えば、0℃〜80℃から選
択でき、通常、好ましくは0℃〜50℃の範囲、より好ましくは室温で実施することが望ま
れる。ある場合には、反応温度は、0〜10℃で好ましく実施することができる。反応時間
は、特に限定されず、所望の生成物が得られる限り、適宜適切な時間とすることができるが、例えば、1分間〜24時間であってよく、通常は、15分間〜5時間であってよく、代表的な場合には、15分間〜2時間が挙げられる。反応系における添加する糖の濃度は好ましく
は1mMから飽和濃度であって、より好ましくは10mM以上で実施することが望まれる。脱水
縮合剤の量は特に制限は無いが、好適には、用いる糖に対して1当量〜5当量で行うことができ、より好ましくは糖に対して3当量加えることが望まれる。アミンの濃度は用いる脱
水縮合剤に対して0.1当量〜100当量までであって、より好ましくは1当量〜4当量で実施することが望ましい。例えば、トリエチルアミンは６〜９当量が適切である。 As the reaction medium for the reaction, water and a commonly used organic solvent can be used, but an aqueous solution is preferable, and an organic solvent containing water can also be used. In particular, an aqueous salt solution having an amine is more preferable. Moreover, the salt aqueous solution which has buffer capacity can also be used. The buffer can be selected from those known in the art as long as it does not adversely affect the reaction, and examples thereof include a phosphate buffer, a citrate buffer, and a Tris buffer. .
Typically, the hydrogen ion concentration pH exhibited by the amine solution is 1.0 to 13, more preferably 7.5 to 11. The reaction temperature is not particularly limited as long as the reaction proceeds,
Typically, it may be in a temperature range in which the reaction mixture does not solidify or boil, and in particular, it can be carried out in a temperature range in which the aqueous solution does not solidify or boil, and can be selected from 0 ° C. to 80 ° C., for example. Usually, it is desirable to carry out the reaction preferably in the range of 0 ° C to 50 ° C, more preferably at room temperature. In some cases, the reaction temperature can be preferably carried out at 0-10 ° C. The reaction time is not particularly limited and may be appropriately set as long as a desired product is obtained. For example, the reaction time may be 1 minute to 24 hours, and usually 15 minutes to 5 hours. In typical cases, it may be 15 minutes to 2 hours. The concentration of added sugar in the reaction system is preferably 1 mM to a saturated concentration, and more preferably 10 mM or more. Although the amount of the dehydrating condensing agent is not particularly limited, it can be suitably carried out at 1 to 5 equivalents, more preferably 3 equivalents with respect to the sugar. The amine concentration is 0.1 to 100 equivalents, more preferably 1 to 4 equivalents, based on the dehydration condensing agent used. For example, 6 to 9 equivalents of triethylamine is appropriate.

該アミンとしては、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミン、第四級アミンのいずれであってもよいが、例えば、脂肪族炭化水素残基、芳香族炭化水素残基、複素環残基などを有するものが挙げられ、該脂肪族炭化水素残基としては、直鎖であっても分岐鎖のものであってよく、飽和又は不飽和のものであってよく、例えば、アルキル基、アルケニル基、シクロアルキル基、アラルキル基、シクロアルキルアルキル基などが挙げられ、芳香族炭化水素残基としては、単環式のものあるいは二環又はそれ以上が縮合したものであってもよく、例えば、フェニル基、ナフチル基などが挙げられ、複素環残基としては、硫黄原子、酸素原子、窒素原子からなる群から選択されたものを１個以上有するものであってよく、ピリジル基、イミダゾリル基、チアゾリル基、キノリニル基などが包含されてよく、当該アミンとしては、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペラジン、ピロリジンなども包含されてよい。該アミンの代表的なものとしては、例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルメチルアミン、ジメチルエチルアミン、n-ブチルジメチ
ルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、テトラメチルエチレンジアミンなどの脂肪族炭化水素残基を有する第三級アミン類又はジアミン類が挙げられる。 The amine may be a primary amine, a secondary amine, a tertiary amine, or a quaternary amine. For example, an aliphatic hydrocarbon residue, an aromatic hydrocarbon residue, a complex amine The aliphatic hydrocarbon residue may be linear or branched, and may be saturated or unsaturated, such as an alkyl residue. Group, alkenyl group, cycloalkyl group, aralkyl group, cycloalkylalkyl group, etc., and the aromatic hydrocarbon residue may be monocyclic or bicyclic or more condensed For example, a phenyl group, a naphthyl group, and the like can be mentioned, and the heterocyclic residue may have one or more selected from the group consisting of a sulfur atom, an oxygen atom, and a nitrogen atom, a pyridyl group, Imidazoli Group, a thiazolyl group, may like quinolinyl groups are included, as the relevant amine, piperidine, morpholine, thiomorpholine, piperazine, pyrrolidine, etc. may also be included. Representative examples of the amine include tertiary amines having aliphatic hydrocarbon residues such as trimethylamine, triethylamine, diethylmethylamine, dimethylethylamine, n-butyldimethylamine, diisopropylethylamine, tetramethylethylenediamine, and the like. Or diamines are mentioned.

生成物は反応液のまま、あるいは粗製物として次の反応に用いることもできるが、常法に従って反応混合物から単離することもでき、濃縮、減圧濃縮、蒸留、分留、溶媒抽出、液性変換、転溶、例えば、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)、薄層クロマトグラフィー(TLC)、カラムクロマトグラフィーなどのクロマトグラフィー、結晶化、再結晶等により
、単離精製することができる。例えば、反応終了後、酢酸ブチル、酢酸エチル、トルエン、クロロホルム等の有機溶媒で反応液から生成物を抽出し、溶媒を留去することにより粗生成物を得ることができる。該粗生成物は、それをそのまま使用してもよいが、必要によりシリカゲルカラムクロマトグラフィー等の手段により精製した後、さらにセルロース誘導体等の担体（光学活性担体を含む）を使用した高速液体クロマトグラフィー等の手段により精製してもよい。本発明の実施態様では、得られた配糖化された配糖体生成物を液体クロマトグラフィーにより所望のグルコシド含有配糖体に分離及び／又は精製することを特徴とする方法も構築できる。また、液体クロマトグラフィーでは、ODS 逆相カラムを使用して、効率良く且つ工業的に有利に所望製品を取得することができる。 The product can be used in the next reaction as the reaction solution or as a crude product, but can also be isolated from the reaction mixture according to a conventional method, and can be concentrated, concentrated under reduced pressure, distillation, fractional distillation, solvent extraction, liquid It can be isolated and purified by conversion, phase transfer, chromatography such as high performance liquid chromatography (HPLC), thin layer chromatography (TLC), column chromatography, crystallization, recrystallization and the like. For example, after completion of the reaction, the product can be extracted from the reaction solution with an organic solvent such as butyl acetate, ethyl acetate, toluene, chloroform, and the solvent can be distilled off to obtain a crude product. The crude product may be used as it is, but if necessary, after purification by means such as silica gel column chromatography, high performance liquid chromatography using a carrier such as a cellulose derivative (including an optically active carrier). It may be purified by such means as above. In an embodiment of the present invention, a method characterized by separating and / or purifying the obtained glycosylated glycoside product into a desired glucoside-containing glycoside by liquid chromatography can be constructed. In liquid chromatography, an ODS reverse phase column can be used to obtain a desired product efficiently and industrially advantageously.

本発明で得られる配糖体(3)は、例えば、生理活性オリゴ糖、ドラックデリバリーシス
テムのキャリア、糖鎖医薬、界面活性剤、糖ペプチド、糖タンパク質、糖鎖高分子などの合成、酵素の活性測定試薬、界面活性剤、美白剤、酵素触媒による糖鎖合成試薬など、様々な用途に用いられて有用である。
得られた配糖体、すなわち、糖鎖を付加した化合物やオリゴ糖は、例えば、生理活性オリゴ糖、ドラックデリバリーシステムのキャリア、界面活性剤、糖鎖医薬、糖ペプチド、糖タンパク質、糖鎖高分子など、様々な用途に用いられて有用である。生成物配糖体は、細胞認識、免疫、細胞分化、細胞移動、受精、成熟、組織形態形成、炎症、創傷治癒、ガン転移、腫瘍化などの研究に有用である。
本発明で得られる配糖体(3)のうち、例えば、アジ化糖は、クリック反応、スタウディ
ンガー反応などを含めた既知の反応に利用できる。例えば、アジドは各種不飽和結合と付加環化反応をし、例えば、ニトリルに付加してテトラゾール環を形成するし、アルキンと反応して、1,2,3-トリアゾール環を形成する。アジド基を有する糖鎖を、クリック反応を利用してフィルターペーパーなどの固相あるいは担体に固定化することができ、糖鎖と生体物質との相互作用研究に有利に利用できる。さらに、アジ化糖を細胞内に取り込ませ、アルキンと結合した蛍光色素などを生体内で結合させるなどのことも可能である。アジドとホスフィン（亜リン酸エステル）とを反応させると、イミノホスホランを生成する。イミノホスホランは、加水分解により、アミンとホスフィンオキシドに変わる。また、イミノホスホランはアルデヒドと反応してイミンを与える。また、チオールを介して糖鎖を金基板などの固相に固定化し、局在表面プラズモン共鳴デバイスを作成し、レクチンなどとの相互作用を研究するのに利用できる。 Glycosides (3) obtained in the present invention include, for example, bioactive oligosaccharides, carriers of drug delivery systems, glycopharmaceuticals, surfactants, glycopeptides, glycoproteins, glycopolymers, etc. It is useful for various applications such as activity measurement reagents, surfactants, whitening agents, and enzyme-catalyzed sugar chain synthesis reagents.
The obtained glycoside, that is, a compound or oligosaccharide having a sugar chain added thereto is, for example, a bioactive oligosaccharide, a drug delivery system carrier, a surfactant, a sugar chain drug, a glycopeptide, a glycoprotein, a sugar chain height It is useful for various uses such as molecules. The product glycosides are useful for studies such as cell recognition, immunity, cell differentiation, cell migration, fertilization, maturation, tissue morphogenesis, inflammation, wound healing, cancer metastasis, tumorigenesis.
Among the glycosides (3) obtained in the present invention, for example, azide sugar can be used for known reactions including click reaction, Staudinger reaction and the like. For example, azide undergoes cycloaddition with various unsaturated bonds, for example, it adds to nitrile to form a tetrazole ring, and reacts with alkyne to form a 1,2,3-triazole ring. A sugar chain having an azide group can be immobilized on a solid phase such as filter paper or a carrier using a click reaction, and can be advantageously used for studying the interaction between a sugar chain and a biological substance. Furthermore, it is possible to incorporate azide sugar into cells and bind a fluorescent dye or the like bound to alkyne in vivo. Reaction of azide with phosphine (phosphite) produces iminophosphorane. Iminophosphorane is converted into amine and phosphine oxide by hydrolysis. Iminophosphorane also reacts with aldehydes to give imines. In addition, the sugar chain can be immobilized on a solid phase such as a gold substrate via a thiol to create a localized surface plasmon resonance device, which can be used to study interactions with lectins and the like.

本発明の技術を使用して、高度にregioselective and/or stereoselective配糖化を行
って配糖体を得ることができ、また、長い糖鎖にも適用できることから、配糖化のバライエティを高めることも可能であり、新たなオリゴ糖鎖及び／又はポリ糖鎖(oligosaccharides and/or polysaccharides)を、各種有機化合物（蛍光化合物、発光化合物などを含む
）、ペプチド、タンパク質、脂質、糖質などに導入して配糖体を得ることを可能にする。本発明技術で、構造の明らかにされているオリゴ糖鎖などを使用して配糖体を合成できるので、医薬、農薬、化粧品などの様々な分野での応用に利点がある。本発明で、糖鎖マイクロアレイ（糖鎖チップ）の作製技術が提供できる。
以下に実施例を掲げ、本発明を具体的に説明するが、この実施例は単に本発明の説明のため、その具体的な態様の参考のために提供されているものである。これらの例示は本発明の特定の具体的な態様を説明するためのものであるが、本願で開示する発明の範囲を限
定したり、あるいは制限することを表すものではない。本発明では、本明細書の思想に基づく様々な実施形態が可能であることは理解されるべきである。
全ての実施例は、他に詳細に記載するもの以外は、標準的な技術を用いて実施したもの、又は実施することのできるものであり、これは当業者にとり周知で慣用的なものである。 Using the technology of the present invention, glycosides can be obtained by highly regioselective and / or stereoselective glycosylation, and can also be applied to long sugar chains, thus increasing the glycation variety. It is possible to introduce new oligosaccharide chains and / or polysaccharides into various organic compounds (including fluorescent compounds, luminescent compounds, etc.), peptides, proteins, lipids, carbohydrates, etc. Makes it possible to obtain glycosides. With the technology of the present invention, glycosides can be synthesized using oligosaccharide chains whose structure has been clarified, which is advantageous for application in various fields such as pharmaceuticals, agricultural chemicals and cosmetics. The present invention can provide a technique for producing a sugar chain microarray (sugar chain chip).
The present invention will be described in detail with reference to the following examples, which are provided merely for the purpose of illustrating the present invention and for reference to specific embodiments thereof. These exemplifications are for explaining specific specific embodiments of the present invention, but are not intended to limit or limit the scope of the invention disclosed in the present application. In the present invention, it should be understood that various embodiments based on the idea of the present specification are possible.
All examples were performed or can be performed using standard techniques, except as otherwise described in detail, and are well known and routine to those skilled in the art. .

〔D-グルコシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-glucosyl azide)

D-グルコース（250 mM）のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-グルコースに対して10当量のトリエチルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-グルコースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、94%であった。図１に本実施例で得られた目的物を含む反応液の¹H NMRス
ペクトルを示す。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す（以下同様）。 To a solution of D-glucose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 10 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide were added to D-glucose. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-glucose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the integral value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 94%. FIG. 1 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate (the same applies hereinafter).

〔D-ガラクトシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-galactosyl azide)

D-ガラクトース(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-ガラクトースに対して9当量のトリ
エチルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-ガラクトースに対して3
当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌
した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリ
ウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積
分値から算出したところ、67%であった。図２に本実施例で得られた目的物を含む反応液
の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-galactose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide were added to D-galactose. Then 3 against D-galactose
It was mixed with an equivalent amount of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integrated value of the anomeric protons of the azide sugar produced based on the integrated value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 67%. FIG. 2 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔D-マンノシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-mannosyl azide)

D-マンノース(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-マンノースに対して9当量のトリエチ
ルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-マンノースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、92%であった。図３に本実施例で得られた目的物を含む反応液の¹H NMRス
ペクトルを示す。 To a solution of D-mannose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide were added to D-mannose. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-mannose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the integral value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and found to be 92%. FIG. 3 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔D-キシロシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-xylosyl azide)

D-キシロース(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-キシロースに対して9当量のトリエチ
ルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-キシロースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、97%であった。図４に本実施例で得られた目的物を含む反応液の¹H NMRス
ペクトルを示す。 To a solution of D-xylose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide were added to D-xylose. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-xylose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integrated value of the anomeric protons of the produced azide sugar based on the integrated value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 97%. FIG. 4 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔D-セロビオシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-cellobiosyl azide)

D-セロビオース(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-セロビオースに対して9当量のトリ
エチルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-セロビオースに対して3
当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌
した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリ
ウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積
分値から算出したところ、86%であった。図５に本実施例で得られた目的物を含む反応液
の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-cellobiose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml) was added 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide relative to D-cellobiose. Then 3 against D-cellobiose
It was mixed with an equivalent amount of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integrated value of the anomeric protons of the produced azide sugar based on the integrated value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and found to be 86%. FIG. 5 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔D-マルトシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-maltosyl azide)

D-マルトース1水和物(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-マルトースに対して9当量のトリエチルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-マルトースに対して3
当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌
した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリ
ウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積
分値から算出したところ、80%であった。図６に本実施例で得られた目的物を含む反応液
の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-maltose monohydrate (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide were added to D-maltose. Then 3 against D-Maltose
It was mixed with an equivalent amount of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value of the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 80%. FIG. 6 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔D-ラクトシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-lactosyl azide)

β-D-ラクトース(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-ラクトースに対して9当量のトリエチルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-ラクトースに対して3当量
の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した
。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、85%であった。図７に本実施例で得られた目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of β-D-lactose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide were added to D-lactose. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-lactose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and found to be 85%. FIG. 7 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔N-アセチルグルコサミノアジドの合成〕

(Synthesis of N-acetylglucosamino azide)

N-アセチルグルコサミン(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、N-アセチルグルコサミンに対して7当量の2,6-ルチジンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、N-アセチルグ
ルコサミンに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。24時間経過後、標準物質としてt-ブチルアルコール (7.36 mg
、0.094 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(t-ブチルアルコール)のメチル基のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトン
の積分値から算出したところ、95%であった。図８に本実施例で得られた目的物を含む反
応液の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of N-acetylglucosamine (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 7 equivalents of 2,6-lutidine and 10 equivalents of sodium azide were added to N-acetylglucosamine. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to N-acetylglucosamine was mixed at room temperature and stirred. After 24 hours, t-butyl alcohol (7.36 mg)
, 0.094 mmol) was added to the reaction solution, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value of the methyl group of the standard substance (t-butyl alcohol), and was 95%. FIG. 8 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔N-キトビオシルアジドの合成〕

(Synthesis of N-chitobiosyl azide)

N-キトビオース(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、N-キトビオースに対して6当量の2,6-
ルチジンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、N-キトビオースに対して3当量
の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した
。24時間経過後、標準物質としてt-ブチルアルコール (7.30 mg、0.098 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(t-ブチルアルコール)のメチル基のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、94%であった。図９に本実施例で得られた目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルを
示す。 To a solution of N-chitobiose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 6 equivalents of 2,6-
Llutidine and 10 equivalents of sodium azide were added. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to N-chitobiose were mixed at room temperature and stirred. After 24 hours, t-butyl alcohol (7.30 mg, 0.098 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value of the methyl group of the standard substance (t-butyl alcohol), and was 94%. FIG. 9 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔グルクロン酸アジドの合成〕

(Synthesis of glucuronic acid azide)

グルクロン酸ナトリウム(250 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、グルクロン酸ナトリウムに対して15当量のトリエチルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、N-キトビオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてt-ブチルアルコール (7.30 mg、0.098
mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(
ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化
糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、54%であった。図１０に本実施例で
得られた目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of sodium glucuronate (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml) was added 15 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide relative to sodium glucuronate. Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to N-chitobiose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, t-butyl alcohol (7.30 mg, 0.098
mmol) was added to the reaction solution and ¹ H NMR was measured. Sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. Yield is determined by reference material (
Based on the integral value of the proton at the o-position of sodium benzenesulfonate), it was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar, which was 54%. FIG. 10 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔D-セロトリオシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-cellotriosyl azide)

D-セロトリオース(50 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-セロトリオースに対して9当量のトリエチルアミンと10当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、D-セロトリオースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (5.0 mg、0.028 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積
分値から算出したところ、30%であった。図１１に本実施例で得られた目的物を含む反応
液の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-cellotriose (50 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of sodium azide were added to D-cellotriose. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-cellotriose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (5.0 mg, 0.028 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integrated value of the anomeric protons of the produced azide sugar based on the integrated value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 30%. FIG. 11 shows the ¹ H NMR spectrum of the reaction solution containing the target product obtained in this example.

〔D-グルコシルアジドの単離〕
D-グルコース112.5 mg (0.625 mmol)のD₂O (2.5ml)溶液に、D-グルコースに対して10当量のトリエチルアミン867.5 μl (6.250 mmol) と10当量のアジ化ナトリウム406.5 mg (6.250 mmol)を加え、氷水中で冷却した。その後、D-グルコースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC）317.0 mg (1.875 mmol)と0℃にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液を、エタノールでの再沈殿とシリカゲルカラムクロマトグラフィ(展開溶媒：アセトニトリル/水=5/1)、HPLC(溶離液：アセトニトリル/
水=3/1)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾
燥を行い、β-D-グルコシルアジド106.37 mgを得た。収率は83％であった。図１２に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-glucosyl azide]
D-glucose 112.5 mg (0.625 mmol) in D ₂ O (2.5 ml) was added 10 equivalents of triethylamine 867.5 μl (6.250 mmol) and 10 equivalents of sodium azide 406.5 mg (6.250 mmol) to D-glucose. In addition, it was cooled in ice water. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 317.0 mg (1.875 mmol) with respect to D-glucose were mixed at 0 ° C. and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was reprecipitated with ethanol and silica gel column chromatography (developing solvent: acetonitrile / water = 5/1), HPLC (eluent: acetonitrile /
Purification by water = 3/1) gave the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 106.37 mg of β-D-glucosyl azide. The yield was 83%. FIG. 12 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マンノシルアジドの単離〕
D-マンノース112.5 mg (0.625 mmol)のD₂O (2.5ml)溶液に、D-マンノースに対して10当量のトリエチルアミン867.5 μl (6.250 mmol) と10当量のアジ化ナトリウム406.5 mg (6.250 mmol)を加え、氷水中で冷却した。その後、D-マンノースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC) 317.0 mg(1.875 mmol)と 0 ℃にて混合し
、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液を、エタノールでの再沈殿とシリカゲルカラムクロマトグラフィ(展開溶媒：クロロホルム/メタノール=5/1)、HPLC(溶離液：アセトニトリル/水=3/1)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-マンノシルアジド103.9 mgを得た。収率は81％であった。図１３に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-mannosyl azide]
To a solution of D-mannose 112.5 mg (0.625 mmol) in D ₂ O (2.5 ml), 10 equivalents of triethylamine 867.5 μl (6.250 mmol) and 10 equivalents of sodium azide 406.5 mg (6.250 mmol) were added to D-mannose. In addition, it was cooled in ice water. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 317.0 mg (1.875 mmol) with respect to D-mannose was mixed at 0 ° C. and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by reprecipitation with ethanol and silica gel column chromatography (developing solvent: chloroform / methanol = 5/1), HPLC (eluent: acetonitrile / water = 3/1). The desired fraction was obtained. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 103.9 mg of D-mannosyl azide. The yield was 81%. FIG. 13 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔2-デオキシグルコシルアジドの単離〕

[Isolation of 2-deoxyglucosyl azide]

2-デオキシグルコース40.8 mg (0.250 mmol)のD₂O (1.0 m l)溶液に、2-デオキシグル
コースに対して30当量のトリエチルアミン1041 μl (7.50 mmol) と20当量のアジ化ナト
リウム325.0 mg (5.00 mmol)を加え、氷水中で冷却した。その後、2-デオキシグルコースに対して10当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC) 411.6 mg(2.50
mmol)と 0 ℃にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液を、エタノールで
の再沈殿とシリカゲルカラムクロマトグラフィ(展開溶媒：クロロホルム/メタノール=8/1)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行
い、2-デオキシグルコピラノシルアジド38.5 mgを得た。収率は82％であった。図１４に
本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of 2-deoxyglucose 40.8 mg (0.250 mmol) in D ₂ O (1.0 ml), 30 equivalents of triethylamine 1042-μl (7.50 mmol) and 20 equivalents of sodium azide 325.0 mg (5.00 mmol) ) And cooled in ice water. Then, 101.6 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) to 2-deoxyglucose 411.6 mg (2.50
mmol) at 0 ° C. and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by reprecipitation with ethanol and silica gel column chromatography (developing solvent: chloroform / methanol = 8/1) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and lyophilized to obtain 38.5 mg of 2-deoxyglucopyranosyl azide. The yield was 82%. FIG. 14 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔N-アセチルグルコサミノアジドの単離〕
N-アセチルグルコサミン138.25 mg (0.625 mmol)のD₂O (1.0 m l)溶液に、N-アセチル
グルコサミンに対して6当量の2,6-ルチジン434.3 μl (3.75 mmol)と10当量のアジ化ナトリウム406.3 mg (62.5 mmol)を加えた。その後、N-アセチルグルコサミンに対して3当量
の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC) 317.0 mg (2.50 mmol) と 0 ℃にて混合し、攪拌した。24分経過後、得られた反応溶液を、エタノールでの再沈殿とシリカゲルカラムクロマトグラフィ(展開溶媒：クロロホルム/メタノール=3/1)により精製
し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、N-アセチルグルコサミノアジド64.3 mgを得た。収率は70％であった。図１５に本実施例で得られ
た目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of N-acetylglucosamino azide]
To a solution of 138.25 mg (0.625 mmol) of N-acetylglucosamine in D ₂ O (1.0 ml) was added 434.3 μl (3.75 mmol) of 6 equivalents of 2,6-lutidine and 10 equivalents of sodium azide 406.3 with respect to N-acetylglucosamine. mg (62.5 mmol) was added. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 317.0 mg (2.50 mmol) with respect to N-acetylglucosamine were mixed at 0 ° C. and stirred. After 24 minutes, the resulting reaction solution was purified by reprecipitation with ethanol and silica gel column chromatography (developing solvent: chloroform / methanol = 3/1) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 64.3 mg of N-acetylglucosaminoazide. The yield was 70%. FIG. 15 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-セロビオシルアジドの単離〕
D-セロビオース42.8 mg (0.125 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-セロビオースに対して9当量のトリエチルアミン156 μl (1.125mmol) と10当量のアジ化ナトリウム81.26 mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-セロビオースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイ
ミダゾリニウムクロリド(DMC)63.4mg(0.375mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液を、エタノールでの再沈殿とHPLC(溶離液：アセトニトリル/水=7/3)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行
い、D-セロビオシルアジド33.6 mgを得た。収率は73％であった。図１６に本実施例で得
られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-cellobiosyl azide]
D-cellobiose 42.8 mg (0.125 mmol) in D ₂ O (0.5 ml) was charged with 9 equivalents of triethylamine 156 μl (1.125 mmol) and 10 equivalents of sodium azide 81.26 mg (1.250 mmol) with respect to D-cellobiose. added. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 63.4 mg (0.375 mmol) with respect to D-cellobiose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by reprecipitation with ethanol and HPLC (eluent: acetonitrile / water = 7/3) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 33.6 mg of D-cellobiosyl azide. The yield was 73%. FIG. 16 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトシルアジドの単離〕
D-マルトース１水和物45.04 mg (0.125 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-マルトースに対して9当量のトリエチルアミン156 μl (1.125mmol) と10当量のアジ化ナトリウム81.26 mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-マルトースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)63.4mg(0.375mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経
過後、得られた反応溶液を、エタノールでの再沈殿とHPLC(溶離液：アセトニトリル/水=7/3)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を
行い、D-マルトシルアジド28.5 mgを得た。収率は62％であった。図１７に本実施例で得
られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-maltosyl azide]
To a solution of D-maltose monohydrate 45.04 mg (0.125 mmol) in D ₂ O (0.5 ml), 9 equivalents of triethylamine 156 μl (1.125 mmol) and 10 equivalents of sodium azide 81.26 mg ( 1.250 mmol) was added. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 63.4 mg (0.375 mmol) with respect to D-maltose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by reprecipitation with ethanol and HPLC (eluent: acetonitrile / water = 7/3) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 28.5 mg of D-maltosyl azide. The yield was 62%. FIG. 17 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-ラクトシルアジドの単離〕
D-ラクトース42.79 mg (0.125 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-ラクトースに対して9当
量のトリエチルアミン156 μl (1.125mmol) と10当量のアジ化ナトリウム81.26 mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-ラクトースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダ
ゾリニウムクロリド(DMC)63.4mg(0.375mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液を、エタノールでの再沈殿とHPLC(溶離液：アセトニトリル/水=7/3)に
より精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-ラクトシルアジド34.9 mgを得た。収率は76％であった。図１８に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-lactosyl azide]
D-Lactose 42.79 mg (0.125 mmol) in D ₂ O (0.5 ml) was charged with 9 equivalents of triethylamine 156 μl (1.125 mmol) and 10 equivalents of sodium azide 81.26 mg (1.250 mmol) to D-lactose. added. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 63.4 mg (0.375 mmol) with respect to D-lactose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by reprecipitation with ethanol and HPLC (eluent: acetonitrile / water = 7/3) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 34.9 mg of D-lactosyl azide. The yield was 76%. FIG. 18 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔N-キトビオシルアジドの単離〕

[Isolation of N-chitobiosyl azide]

N-キトビオース26.53 mg (0.0625 mmol)のD₂O (0.250 ml)溶液に、N-キトビオースに対して6当量の2,6-ルチジン43.4 μl (0.375mmol) と10当量のアジ化ナトリウム40.63 mg (0.625 mmol)を加えた。その後、N-キトビオースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチル
イミダゾリニウムクロリド(DMC)31.7 mg(0.1875mmol)と室温にて混合し、攪拌した。50時間経過後、得られた反応溶液を、シリカゲルカラムクロマトグラフィ(展開溶媒：クロロ
ホルム/メタノール=3/1)とHPLC(溶離液：アセトニトリル/水=7/3)により精製し、目的の
画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、N-キトビオシルアジド13.26mgを得た。収率は49.4％であった。図１９に本実施例で得られた目的物の¹H NMR
スペクトルを示す。 To a solution of N-chitobiose 26.53 mg (0.0625 mmol) in D ₂ O (0.250 ml), 6 equivalents of 2,6-lutidine 43.4 μl (0.375 mmol) and 10 equivalents of sodium azide 40.63 mg ( 0.625 mmol) was added. Then, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 31.7 mg (0.1875 mmol) with respect to N-chitobiose was mixed at room temperature and stirred. After 50 hours, the resulting reaction solution was purified by silica gel column chromatography (developing solvent: chloroform / methanol = 3/1) and HPLC (eluent: acetonitrile / water = 7/3). Obtained. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 13.26 mg of N-chitobiosyl azide. The yield was 49.4%. FIG. 19 shows the ¹ H NMR of the target product obtained in this example.
The spectrum is shown.

〔N-キトトリオシルアジドの合成〕

(Synthesis of N-chitotriosyl azide)

N-キトトリオース(50 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、N-キトトリオースに対して10当量の2,6-ルチジンと50当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、N-キトトリオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌
した。36時間経過後、標準物質としてt-ブチルアルコール (7.52 mg、0.101 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(t-ブチルアルコール)のメチル基のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、75%であった。図２０に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of N-chitotriose (50 mM) in D ₂ O (0.5 ml) was added 10 equivalents of 2,6-lutidine and 50 equivalents of sodium azide relative to N-chitotriose. Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to N-chitotriose was mixed at room temperature and stirred. After 36 hours, t-butyl alcohol (7.52 mg, 0.101 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value of the methyl group of the standard substance (t-butyl alcohol) and found to be 75%. FIG. 20 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔N-キトテトラオシルアジドの合成〕

(Synthesis of N-chitotetraosyl azide)

N-キトテトラオース(20 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、N-キトテトラオースに対して20当
量の2,6-ルチジンと125当量のアジ化ナトリウムを加えた。その後、N-キトテトラオース
に対して10当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混
合し、攪拌した。36時間経過後、標準物質としてt-ブチルアルコール (7.90mg、0.107 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(t-ブチルアルコール)のメ
チル基のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、69%であった。図２１に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクト
ルを示す。 To a solution of N-chitotetraose (20 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 20 equivalents of 2,6-lutidine and 125 equivalents of sodium azide were added to N-chitotetraose. Thereafter, 10 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to N-chitotetraose was mixed at room temperature and stirred. After 36 hours, t-butyl alcohol (7.90 mg, 0.107 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value of the methyl group of the standard substance (t-butyl alcohol), and was 69%. FIG. 21 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトトリオシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-maltotriosyl azide)

D-マルトトリオース (50 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-マルトトリオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）と50当量のアジ化ナトリウムを加えた。
その後、D-マルトトリオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム
クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスル
ホン酸ナトリウム (10.0 mg、0.056 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、74%であった。図２２に
本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-maltotriose (50 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) and 50 equivalents of sodium azide were added to D-maltotriose. .
Then 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium to D-maltotriose
Mix with chloride (DMC) at room temperature and stir. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (10.0 mg, 0.056 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the integral value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), which was 74%. FIG. 22 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトテトラオシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-maltotetraosyl azide)

D-マルトテトラオース (50 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-マルトテトラオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）と50当量のアジ化ナトリウムを加え
た。その後、D-マルトテトラオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (5.0 mg、0.028 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収
率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、71%であった。図２
３に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-maltotetraose (50 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) and 50 equivalents of sodium azide were added to D-maltotetraose. . Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-maltotetraose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (5.0 mg, 0.028 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the azide sugar produced based on the integral value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 71%. FIG.
FIG. 3 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトペンタオシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-maltopentaosyl azide)

D-マルトペンタオース (50 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-マルトペンタオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）と50当量のアジ化ナトリウムを加え
た。その後、D-マルトペンタオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (5.02 mg、0.028 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、53%であった。図２
４に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-maltopentaose (50 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) and 50 equivalents of sodium azide were added to D-maltopentaose. . Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-maltopentaose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (5.02 mg, 0.028 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 53%. FIG.
FIG. 4 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトヘキサオシルアジドの合成〕

(Synthesis of D-maltohexaosyl azide)

D-マルトヘキサオース (50 mM)のD₂O (0.5 ml)溶液に、D-マルトヘキサオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）と50当量のアジ化ナトリウムを加え
た。その後、D-マルトヘキサオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (5.04 mg、0.028 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したアジ化糖のアノマープロトンの積分値から算出したところ、53%であった。図２
５に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-maltohexaose (50 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) and 50 equivalents of sodium azide were added to D-maltohexaose. . Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to D-maltohexaose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, sodium benzenesulfonate (5.04 mg, 0.028 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric proton of the produced azide sugar based on the proton integral value at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 53%. FIG.
5 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトトリオシルアジドの単離〕
D-マルトトリオース12.61 mg (0.025 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-マルトトリオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）65.3 μl (0.375mmol) と50当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-マルトトリオースに
対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)21.1mg(0.125mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離液：アセトニ
トリル/水=2/1)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-マルトトリオシルアジド10.3 mgを得た。収率は78％であった。図２
６に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-maltotriosyl azide]
To a solution of 12.61 mg (0.025 mmol) of D-maltotriose in D ₂ O (0.5 ml), 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) with D-maltotriose (65.3 μl, 0.375 mmol) and 50 An equivalent amount of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) was added. Thereafter, 2 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 21.1 mg (0.125 mmol) to D-maltotriose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 2/1) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 10.3 mg of D-maltotriosyl azide. The yield was 78%. FIG.
FIG. 6 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトテトラオシルアジドの単離〕
D-マルトテトラオース16.6 mg (0.025 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-マルトテトラオ
ースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）65.3 μl (0.375mmol) と50当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-マルトテトラオ
ースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)21.1mg(0.125mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離液：ア
セトニトリル/水=2/1)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-マルトテトラオシルアジド9.39 mgを得た。収率は55％であっ
た。図２７に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-maltotetraosyl azide]
To a solution of D-maltotetraose 16.6 mg (0.025 mmol) in D ₂ O (0.5 ml), 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) with D-maltotetraose 65.3 μl (0.375 mmol) and 50 An equivalent amount of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) was added. Thereafter, 2 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 21.1 mg (0.125 mmol) to D-maltotetraose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 2/1) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 9.39 mg of D-maltotetraosyl azide. The yield was 55%. FIG. 27 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトペンタオシルアジドの単離〕
D-マルトペンタオース20.7 mg (0.025 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-マルトペンタオ
ースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）65.3 μl (0.375mmol) と50当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-マルトペンタオ
ースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)21.1mg(0.125mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離液：ア
セトニトリル/水=3/2)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-マルトペンタオシルアジド15.38 mgを得た。収率は72％であった。図２８に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-maltopentaosyl azide]
A solution of 20.7 mg (0.025 mmol) of D-maltopentaose in D ₂ O (0.5 ml) was added with 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) 65.3 μl (0.375 mmol) and 50 to D-maltopentaose. An equivalent amount of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) was added. Thereafter, 2 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 21.1 mg (0.125 mmol) to D-maltopentaose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 3/2) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 15.38 mg of D-maltopentaosyl azide. The yield was 72%. FIG. 28 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-マルトヘキサオシルアジドの単離〕
D-マルトヘキサオース12.39 mg (0.0125 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-マルトヘキサ
オースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）32.66 μl (0.1875mmol) と100当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-マルトヘキサオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)10.57mg(0.0625mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離
液：アセトニトリル/水=3/2)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-マルトヘキサオシルアジド8.2 mgを得た。収率は65％であった。図２９に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-maltohexaosyl azide]
A solution of 12.39 mg (0.0125 mmol) of D-maltohexaose in D ₂ O (0.5 ml) was charged with 32.66 μl (0.1875 mmol) of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) 15 equivalents to D-maltohexaose. An equivalent amount of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) was added. Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) (10.57 mg, 0.0625 mmol) with respect to D-maltohexaose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 3/2) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 8.2 mg of D-maltohexaosyl azide. The yield was 65%. FIG. 29 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-ラミナリテトラオシルアジドの単離〕
D-ラミナリテトラオース16.7 mg (0.025 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-ラミナリテト
ラオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）65.3 μl (0.375mmol) と50当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-ラミナリテ
トラオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)21.1mg(0.125mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離
液：アセトニトリル/水=2/1)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-ラミナリテトラオシルアジド11.2 mgを得た。収率は65
％であった。図３０に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-Laminari Tetraosyl Azide]
D-laminaritetraose 16.7 mg (0.025 mmol) in D ₂ O (0.5 ml) was added to 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) 65.3 μl (0.375 mmol) And 50 equivalents of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) were added. Thereafter, 2 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 21.1 mg (0.125 mmol) to D-laminaritetraose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 2/1) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 11.2 mg of D-laminaritetraosyl azide. Yield 65
%Met. FIG. 30 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-ラミナリヘキサオシルアジドの単離〕
D-ラミナリヘキサオース12.37 mg (0.0125 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-ラミナリヘ
キサオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）32.66 μl (0.1875mmol) と100当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-ラミナリヘキサオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)10.57mg(0.0625mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離液：アセトニトリル/水=3/2)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエ
バポレート、および凍結乾燥を行い、D-ラミナリヘキサオシルアジド9.2 mgを得た。収率は75％であった。図３１に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of D-Laminarihexaosyl Azide]
D-laminarihexaose (12.37 mg, 0.0125 mmol) in D ₂ O (0.5 ml) was added to 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) 32.66 μl (0.1875 mmol) to D-laminarihexaose. And 100 equivalents of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) were added. Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) (10.57 mg, 0.0625 mmol) to D-laminarihexaose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 3/2) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 9.2 mg of D-laminarihexaosyl azide. The yield was 75%. FIG. 31 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-セロテトラオシルアジドの単離〕

[Isolation of D-cellotetraosyl azide]

D-セロテトラオース16.6 mg (0.025 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-セロテトラオース
に対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）65.3 μl (0.375mmol) と50当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-セロテトラオースに
対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)21.1mg(0.125mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離液：アセトニ
トリル/水=3/2)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-マルトテトラオシルアジド14.12 mgを得た。収率は82％であった。図
３２に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of D-cellotetraose 16.6 mg (0.025 mmol) in D ₂ O (0.5 ml), add 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) 65.3 μl (0.375 mmol) and 50 to D-cellotetraose. An equivalent amount of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) was added. Thereafter, 2 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) (21.1 mg, 0.125 mmol) to D-cellotetraose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 3/2) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 14.12 mg of D-maltotetraosyl azide. The yield was 82%. FIG. 32 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-セロペンタオシルアジドの単離〕

[Isolation of D-cellopentaosyl azide]

D-セロペンタオース10.3 mg (0.0125 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-セロペンタオースに対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）32.7 μl (0.188mmol) と100当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-セロペンタオースに対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)10.57mg(0.0625mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離液：アセト
ニトリル/水=3/2)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-セロペンタオシルアジド6.14 mgを得た。収率は70％であった。図
３３に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 D-cellopentaose 10.3 mg (0.0125 mmol) in D ₂ O (0.5 ml) was added to D-cellopentaose 15 equivalents of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) 32.7 μl (0.188 mmol) and 100 An equivalent amount of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) was added. Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) (10.57 mg, 0.0625 mmol) to D-cellopentaose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 3/2) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 6.14 mg of D-cellopentaosyl azide. The yield was 70%. FIG. 33 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔D-セロヘキサオシルアジドの単離〕

[Isolation of D-cellohexaosyl azide]

D-セロヘキサオース4.95 mg (0.005 mmol)のD₂O (0.5ml)溶液に、D-セロヘキサオース
に対して15当量のN,N-ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）13.01 μl (0.075mmol) と250当量のアジ化ナトリウム81.3mg (1.250 mmol)を加えた。その後、D-セロヘキサオース
に対して5当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)4.23mg(0.025mmol)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、得られた反応溶液をHPLC(溶離液：アセト
ニトリル/水=3/2)により精製し、目的の画分を得た。得られた画分のエバポレート、および凍結乾燥を行い、D-セロヘキサオシルアジド1.7 mgを得た。収率は34％であった。図３４に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 To a solution of 4.95 mg (0.005 mmol) of D-cellohexaose in D ₂ O (0.5 ml), 15.01 μl (0.075 mmol) of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA) with 15 equivalents of D-cellohexaose and 250 An equivalent amount of sodium azide 81.3 mg (1.250 mmol) was added. Thereafter, 5 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) 4.23 mg (0.025 mmol) with respect to D-cellohexaose was mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, the resulting reaction solution was purified by HPLC (eluent: acetonitrile / water = 3/2) to obtain the desired fraction. The obtained fraction was evaporated and freeze-dried to obtain 1.7 mg of D-cellohexaosyl azide. The yield was 34%. FIG. 34 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔（E,Z)２-ケト-３-ペンテン-４-イル-β-D-グルコピラノシドの単離〕
グルコース225 mg(1.25 mmol)のH₂O(5 ml)溶液に、グルコースに対して12当量のトリエチルアミン2.08 ml(15.0 mmol)と3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド(DMC)634mg(3.75 mmol)を加えた。その後、グルコースに対して15当量の2,4-ペンタン
ジオン1.93 ml(18.75 mmol)を加え、室温にて混合し、撹拌した。3時間経過後、得られた反応溶液を酢酸エチルにより抽出した。水層を回収した後、シリカゲルクロマトグラフィ（展開溶媒：クロロホルム/メタノール=9/1）で精製を行い、E体とZ体が混合した画分を
回収した。得られた画分をHPLC（溶離液：水100 %）で二度精製を行い、二つの画分を回
収した。それぞれの画分をエバポレートし、E-2-ケト-３-ペンテン-４-イル-β-D-グルコピラノシド13.0 mgとZ-2-ケト-３-ペンテン-４-イル-β-D-グルコピラノシド18.0 mgを得た。収率はE体が4.0 %、Z体が5.5 %であった。図３５に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Isolation of (E, Z) 2-keto-3-penten-4-yl-β-D-glucopyranoside]
A solution of 225 mg (1.25 mmol) of glucose in H ₂ O (5 ml) was charged with 2.08 ml (15.0 mmol) of 12 equivalents of triethylamine and 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride ( DMC) 634 mg (3.75 mmol) was added. Thereafter, 1.93 ml (18.75 mmol) of 2,4-pentanedione equivalent to glucose was added, and the mixture was stirred at room temperature. After 3 hours, the resulting reaction solution was extracted with ethyl acetate. After recovering the aqueous layer, purification was performed by silica gel chromatography (developing solvent: chloroform / methanol = 9/1), and a fraction in which E-form and Z-form were mixed was collected. The obtained fraction was purified twice by HPLC (eluent: water 100%), and two fractions were collected. Each fraction was evaporated to 13.0 mg of E-2-keto-3-penten-4-yl-β-D-glucopyranoside and Z-2-keto-3-penten-4-yl-β-D-glucopyranoside 18.0 mg was obtained. The yield was 4.0% for E-form and 5.5% for Z-form. FIG. 35 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔フッ化 β-グルコピラノシドの合成〕
グルコース（250 mM）のD₂O (0.5 ml)溶液に、グルコースに対して6当量のトリエチル
アミンと10当量のフッ化カリウムを加え、氷水中で冷却した。その後、グルコースに対し
て3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と0℃にて混合し、攪
拌した。15分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (9.0 mg、0.050 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したフッ化糖のアノマープロトンの積
分値から算出したところ、23%であった。図３６に本実施例で得られた目的物の¹H NMRス
ペクトルを示す。 [Synthesis of fluorinated β-glucopyranoside]
To a solution of glucose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 6 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of potassium fluoride were added to glucose and cooled in ice water. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to glucose were mixed at 0 ° C. and stirred. After 15 minutes, sodium benzenesulfonate (9.0 mg, 0.050 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric protons of the produced fluorinated sugar, based on the proton integral value at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 23%. FIG. 36 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔フッ化 β-グルコピラノシドの合成〕
グルコース（250 mM）のD₂O (0.5 ml)溶液に、グルコースに対して6当量のトリエチル
アミンと10当量のフッ化セシウムを加え、氷水中で冷却した。その後、グルコースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と0℃にて混合し、攪
拌した。15分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (9.0 mg、0.050 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したフッ化糖のアノマープロトンの積
分値から算出したところ、12%であった。図３７に本実施例で得られた目的物の¹H NMRス
ペクトルを示す。 [Synthesis of fluorinated β-glucopyranoside]
To a solution of glucose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 6 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of cesium fluoride were added to glucose and cooled in ice water. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to glucose were mixed at 0 ° C. and stirred. After 15 minutes, sodium benzenesulfonate (9.0 mg, 0.050 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric protons of the produced fluorinated sugar, based on the proton integral value at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 12%. FIG. 37 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔フッ化 β-グルコピラノシルの合成〕
グルコース（250 mM）のD₂O (0.5 ml)溶液に、グルコースに対して6当量のトリエチル
アミンと10当量のフッ化カリウムを加え、氷水中で冷却した。その後、グルコースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムヘキサフルオロフォスフェート(CIP)
と0℃にて混合し、攪拌した。15分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウ
ム (9.0 mg、0.050 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したフッ化糖の
アノマープロトンの積分値から算出したところ、34%であった。図３８に本実施例で得ら
れた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Synthesis of Fluorinated β-Glucopyranosyl]
To a solution of glucose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 6 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of potassium fluoride were added to glucose and cooled in ice water. Then 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium hexafluorophosphate (CIP) to glucose
And stirred at 0 ° C. After 15 minutes, sodium benzenesulfonate (9.0 mg, 0.050 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric protons of the produced fluorinated sugar, based on the integral value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and found to be 34%. FIG. 38 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔フッ化 β−セロビオシルの合成〕
セロビオース（250 mM）のD₂O (0.5 ml)溶液に、セロビオースに対して6当量のトリエ
チルアミンと10当量のフッ化カリウムを加え、氷水中で冷却した。その後、セロビオースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と0℃にて混合
し、攪拌した。15分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (9.0 mg、0.050 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したフッ化糖のアノマープロト
ンの積分値から算出したところ、14%であった。図３９に本実施例で得られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Synthesis of fluorinated β-cellobiosyl]
To a solution of cellobiose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 6 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of potassium fluoride were added to cellobiose and cooled in ice water. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to cellobiose were mixed at 0 ° C. and stirred. After 15 minutes, sodium benzenesulfonate (9.0 mg, 0.050 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integrated value of the anomeric protons of the produced fluorinated sugar, based on the integrated value of the proton at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 14%. FIG. 39 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔フッ化 β−ラクトシルの合成〕
ラクトース（250 mM）のD₂O (0.5 ml)溶液に、ラクトースに対して6当量のトリエチル
アミンと10当量のフッ化カリウムを加え、氷水中で冷却した。その後、ラクトースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と0℃にて混合し、攪
拌した。15分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウム (9.0 mg、0.050 mmol)を反応溶液に加え、¹H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したフッ化糖のアノマープロトンの積
分値から算出したところ、19%であった。図４０に本実施例で得られた目的物の¹H NMRス
ペクトルを示す。 [Synthesis of Fluorinated β-Lactosyl]
To a solution of lactose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 6 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of potassium fluoride were added to lactose and cooled in ice water. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to lactose were mixed at 0 ° C. and stirred. After 15 minutes, sodium benzenesulfonate (9.0 mg, 0.050 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integrated value of the anomeric proton of the produced fluorinated sugar, based on the proton integrated value at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 19%. FIG. 40 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔フッ化 β−ラクトシルの合成〕
ラクトース（250 mM）のD₂O (0.5 ml)溶液に、ラクトースに対して6当量のトリエチル
アミンと10当量のフッ化カリウムを加え、氷水中で冷却した。その後、ラクトースに対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム ヘキサフルオロフォスフェート(CIP)と0℃にて混合し、攪拌した。15分経過後、標準物質としてベンゼンスルホン酸ナトリウ
ム (9.0 mg、0.050 mmol)を反応溶液に加え、1H NMRを測定した。収率を、標準物質(ベンゼンスルホン酸ナトリウム)のo-位のプロトン積分値を基準として、生成したフッ化糖の
アノマープロトンの積分値から算出したところ、30%であった。図４１に本実施例で得ら
れた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Synthesis of Fluorinated β-Lactosyl]
To a solution of lactose (250 mM) in D ₂ O (0.5 ml), 6 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of potassium fluoride were added to lactose and cooled in ice water. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium hexafluorophosphate (CIP) with respect to lactose were mixed at 0 ° C. and stirred. After 15 minutes, sodium benzenesulfonate (9.0 mg, 0.050 mmol) was added to the reaction solution as a standard substance, and 1H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric protons of the produced fluorinated sugar, based on the proton integral value at the o-position of the standard substance (sodium benzenesulfonate), and was 30%. FIG. 41 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

〔チオグルコピラノシドの合成〕
グルコース（250 mM）のD₂O (0.25 ml)、THF (0.25 ml)混合溶液に、グルコースに対して9当量のトリエチルアミンと10当量のチオフェノールを加えた。その後、グルコースに
対して3当量の2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウム クロリド(DMC)と室温にて混合し、攪拌した。30分経過後、¹H NMRを測定した。収率を、生成物と残存する原料のアノマープロトンの積分値の合成を100%として、生成したチオグルコシドのアノマープロトンの積分値から算出したところ、30 % (α体=18%、β体=12%)であった。図４２に本実施例で得
られた目的物の¹H NMRスペクトルを示す。 [Synthesis of thioglucopyranoside]
To a mixed solution of glucose (250 mM) in D ₂ O (0.25 ml) and THF (0.25 ml), 9 equivalents of triethylamine and 10 equivalents of thiophenol were added to glucose. Thereafter, 3 equivalents of 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride (DMC) with respect to glucose were mixed at room temperature and stirred. After 30 minutes, ¹ H NMR was measured. The yield was calculated from the integral value of the anomeric protons of the produced thioglucoside, assuming the synthesis of the integral value of the product and the remaining anomeric protons as 100%. 12%). FIG. 42 shows the ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in this example.

本発明で無保護糖よりの配糖体の簡便な製造方法が提供されている。本発明では、ホルムアミジン誘導体を脱水縮合剤として用いて、遊離のヘミアセタール性ヒドロキシ基を持つ糖より水溶液中における一段階の工程で配糖体を製造している。また、本発明の製造方法によれば、糖鎖チップに用いる糖鎖プローブの製造が容易に達成できる。得られた配糖体、すなわち、糖鎖を付加した化合物やオリゴ糖の配糖体などは、例えば、生理活性オリゴ糖、ドラックデリバリーシステムのキャリア、界面活性剤、糖鎖医薬、糖ペプチド、糖タンパク質、糖鎖高分子など、様々な用途に用いられて有用であり、また、生成物配糖体は、細胞認識、免疫、細胞分化、細胞移動、受精、成熟、組織形態形成、炎症、創傷治癒、ガン転移、腫瘍化などの研究に有用である。
本発明は、前述の説明及び実施例に特に記載した以外も、実行できることは明らかである。上述の教示に鑑みて、本発明の多くの改変及び変形が可能であり、従ってそれらも本件添付の請求の範囲の範囲内のものである。
本発明は、前述の説明及び実施例に特に記載した以外も、実行できることは明らかである。上述の教示に鑑みて、本発明の多くの改変及び変形が可能であり、従ってそれらも本件添付の請求の範囲の範囲内のものである。 In the present invention, a simple method for producing a glycoside from an unprotected sugar is provided. In the present invention, a glycoside is produced in one step in an aqueous solution from a sugar having a free hemiacetal hydroxy group using a formamidine derivative as a dehydrating condensing agent. Moreover, according to the production method of the present invention, production of a sugar chain probe used for a sugar chain chip can be easily achieved. The obtained glycosides, that is, glycoside-added compounds and oligosaccharide glycosides are exemplified by bioactive oligosaccharides, carriers of drug delivery systems, surfactants, sugar chain pharmaceuticals, glycopeptides, sugars, etc. The product glycoside is useful for various applications such as protein and sugar chain macromolecules, and the product glycoside is useful for cell recognition, immunity, cell differentiation, cell migration, fertilization, maturation, tissue morphogenesis, inflammation, wound It is useful for studies such as healing, cancer metastasis, and tumorigenesis.
It will be apparent that the invention may be practiced otherwise than as particularly described in the foregoing description and examples. Many modifications and variations of the present invention are possible in light of the above teachings, and thus are within the scope of the claims appended hereto.
It will be apparent that the invention may be practiced otherwise than as particularly described in the foregoing description and examples. Many modifications and variations of the present invention are possible in light of the above teachings, and thus are within the scope of the claims appended hereto.

実施例１において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。1 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product obtained in Example 1. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例２において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product obtained in Example 2. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例３において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product, obtained in Example 3. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例４において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product, obtained in Example 4. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例５において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。 ^{1 is} a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product obtained in Example 5. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例６において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product obtained in Example 6. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例７において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product obtained in Example 7. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例８において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、2,6-Luは2,6-ルチジン、t-Buはt-ブチルアルコールを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product obtained in Example 8. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, 2,6-Lu represents 2,6-lutidine, and t-Bu represents t-butyl alcohol. 実施例９において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、2,6-Luは2,6-ルチジン、t-Buはt-ブチルアルコールを表す。 ^{1 is} a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product obtained in Example 9. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, 2,6-Lu represents 2,6-lutidine, and t-Bu represents t-butyl alcohol. 実施例10において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。 ^{1 is} a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product, obtained in Example 10. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例11において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product, obtained in Example 11. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例12において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 12. 実施例13において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 13. 実施例14において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。 ¹ is a ¹ H NMR spectrum of a target product obtained in Example 14. 実施例15において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。 ¹ is a ¹ H NMR spectrum of a target product obtained in Example 15. 実施例16において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 16. 実施例17において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 17. 実施例18において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。 ¹ is a ¹ H NMR spectrum of a target product obtained in Example 18. 実施例19において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 19. 実施例20において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 20. 実施例21において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 21. 実施例22において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 22. 実施例23において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of a target compound obtained in Example 23. 実施例24において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of a target compound obtained in Example 24. 実施例25において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。 ¹ is a ¹ H NMR spectrum of a target product obtained in Example 25. 実施例26において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of a target product obtained in Example 26. 実施例27において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of a target compound obtained in Example 27. 実施例28において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of a target product obtained in Example 28. 実施例29において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 29. 実施例30において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 30. 実施例31において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 31. 実施例32において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of the target product obtained in Example 32. 実施例33において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。2 is a ¹ H NMR spectrum of a target product obtained in Example 33. 実施例34において得られた、目的物の¹H NMRスペクトルである。 ¹ is a ¹ H NMR spectrum of a target compound obtained in Example 34. 実施例35において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。 ^{1 is} a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing a target product, obtained in Example 35. 実施例36において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing the target product, obtained in Example 36. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例37において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing the target product obtained in Example 37. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例38において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing the target product obtained in Example 38. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例39において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing the target product, obtained in Example 39. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例40において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミン、PhSO₃Naはベンゼンスルホン酸ナトリウムを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing the target product, obtained in Example 40. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, Et ₃ N represents triethylamine, and PhSO ₃ Na represents sodium benzenesulfonate. 実施例41において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミンを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing the target product obtained in Example 41. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, and Et ₃ N represents triethylamine. 実施例42において得られた、目的物を含む反応液の¹H NMRスペクトルである。図中のDMIは1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノン、Et₃Nはトリエチルアミンを表す。2 is a ¹ H NMR spectrum of a reaction solution containing the target product, obtained in Example 42. In the figure, DMI represents 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone, and Et ₃ N represents triethylamine.

Claims (3)

一般式(1)：

（上式中、R¹、R²、R³及びR⁴は、それぞれ同一でも異なっていてもよく、互いに独立に、水素原子、ヒドロキシ基、ヒドロキシメチル基、カルボキシメチル基、カルボアルコキシメチル基、アミノ基、アセチルアミノ基を含めたアシルアミノ基、カルボキシ基、アミド基、PO₄ ^2-、SO₄ ^-、アルキル基、アシル基、アルコキシ基、アシロキシ基、グルコース、ガラクトース、マンノース、N-アセチルグルコサミンを含めた単糖の糖残基、セロオリゴ糖、ラミナリオリゴ糖、キトオリゴ糖、キシロオリゴ糖を含めたオリゴ糖の糖残基及び多糖の糖残基からなる群から選択されたものである）
で表される無保護糖と一般式MZ（式中、Zは、水素原子、ハロゲン原子、アジド基、テトラアゾニウム基、ニトロ基、置換されていてもよい炭化水素基、炭化水素基で置換されていてよいオキシ基、リン酸の残基、ホスホン酸の残基、ホスフィン酸の残基、亜リン酸の残基、亜ホスホン酸の残基、亜ホスフィン酸の残基、又は、置換されていてもよい炭化水素基がリン原子に直接結合しているか、あるいは、酸素原子、硫黄原子、及び／又は、窒素原子を介してリン原子に結合しているもので且つリン酸、ホスホン酸、ホスフィン酸、亜リン酸、亜ホスホン酸若しくは亜ホスフィン酸の誘導体の残基、及び炭化水素基で置換されていてよいチオ基からなる群から選択されたもので、Mは金属、-OH、アンモニウム又は水素原子である）の化合物とを、一般式(2)：

（上式中、R ⁶ 及びR⁸は、それぞれ同一でも異なっていてもよく、互いに独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルケニル基及び置換されていてもよいアリール基からなる群から選択されたもので、R⁵−N−C⁺−N−R⁷が一緒になってイミダゾリニウムを形成しており、Xはハロゲン原子であり、そしてY⁻は陰イオンである）
で表される脱水縮合剤及びアミンの存在下水性溶液中で処理して、一般式(3)：

（上式中、Z、R¹、R²、R³及びR⁴は、上記と同様の意味を有するものである）
で表される配糖体を得ることを特徴とする配糖体の製造方法。 General formula (1):

(In the above formula, R ¹ , R ² , R ³ and R ⁴ may be the same or different, and independently of each other, a hydrogen atom, a hydroxy group, a hydroxymethyl group, a carboxymethyl group, a carboalkoxymethyl group, amino group, an acylamino group including acetylamino group, a carboxyl group, an amide _{^{group, PO 4 2-, SO 4 -}} , alkyl group, acyl group, an alkoxy group, an acyloxy group, glucose, galactose, mannose, N- acetylglucosamine Selected from the group consisting of sugar residues of monosaccharides, sugar oligosaccharides, cellooligosaccharides, laminary oligosaccharides, chitooligosaccharides, xylooligosaccharides, and sugar residues of polysaccharides)
And an unprotected sugar represented by the general formula MZ (wherein Z is substituted with a hydrogen atom, a halogen atom, an azide group , a tetraazonium group, a nitro group, an optionally substituted hydrocarbon group or a hydrocarbon group) Oxy group, phosphoric acid residue, phosphonic acid residue, phosphinic acid residue, phosphorous acid residue, phosphonous acid residue, phosphinic acid residue, or substituted The hydrocarbon group which may be directly bonded to the phosphorus atom, or bonded to the phosphorus atom through an oxygen atom, a sulfur atom and / or a nitrogen atom, and phosphoric acid, phosphonic acid, phosphinic acid, phosphorous acid, those selected from nitrous acid residues phosphonic acid or derivative of phosphinous, and Ranaru group or an optionally substituted thio group with a hydrocarbon group, M is a metal, -OH, A compound of ammonium or hydrogen) General formula (2):

(In the above formula , R ⁶ and R ⁸ may be the same or different, and independently of each other, an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkenyl group, and an optionally substituted aryl. those selected from the group consisting of groups forms a imidazolinium ^{R 5 -N-C + -N-} R 7 together, X is halogen atom, and Y ^- is an anion Is)
In an aqueous solution in the presence of an amine and a dehydrating condensing agent represented by the general formula (3):

(In the above formula, Z, R ¹ , R ² , R ³ and R ⁴ have the same meaning as above)
A method for producing a glycoside, comprising obtaining a glycoside represented by the formula: 一般式(2)で表される脱水縮合剤が、2-クロロ-1,3-ジメチルイミダゾリニウムクロリド、2-クロロ−1,3−ジメチルイミダゾリニウムヘキサフルオロホスファート、 (4R,5R)-2-クロロ-1,3-ジメチル-4,5-ジフェニル-1-イミダゾリニウムクロリド、及び(4S,5S)-2-クロロ-1,3-ジメチル-4,5-ジフェニル-1-イミダゾリニウムクロリドからなる群から選択されたものであることを特徴とする請求項１に記載の配糖体の製造方法。 The dehydrating condensing agent represented by the general formula (2) is 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium chloride, 2-chloro-1,3-dimethylimidazolinium hexafluorophosphate , ( 4R, 5R) 2-chloro-1,3-dimethyl-4,5-diphenyl-1-imidazolinium chloride, and (4S, 5S) -2-chloro-1,3-dimethyl-4,5-diphenyl-1-imidazo The method for producing a glycoside according to claim 1, wherein the glycoside is selected from the group consisting of linium chloride. 一般式(3)（式中、Zは、アジド基、ハロゲン原子、及びアリールチオ基からなる群から選択されたもので、R¹、R²、R³及びR⁴は、上記と同様の意味を有するものである）で表される配糖体を得ることを特徴とする請求項１又は２に記載の配糖体の製造方法。 General formula (3) (wherein Z is selected from the group consisting of an azide group, a halogen atom, and an arylthio group, and R ¹ , R ² , R ³ and R ⁴ have the same meaning as described above. The method for producing a glycoside according to claim 1 or 2, wherein the glycoside represented by (1) is obtained.

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