JP5224801B2 - 核酸増幅装置 - Google Patents
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Description
互いに異なる温度に設定可能な少なくとも3つの温度設定領域と、該温度設定領域のいずれか1つを中継領域として、該中継領域を経由して残りの2つの温度設定領域を繰り返し往復するように複数の往路および複数の復路を有して構成された流路と、を有し、液体が前記流路内を一方に向かって流れることによって核酸増幅の温度サイクルが該液体に与えられ、該液体中の核酸増幅反応を実現する装置であって、前記中継領域において前記流路の往路と復路の断面積が異なることを特徴とする。
(1)前記中継領域が、核酸増幅反応における伸張反応を行う領域であり、前記残りの2つの領域が、変性反応を行う領域と、結合反応を行う領域のいずれかである。
(2)前記中継領域が、結合反応を行う領域であり、前記残りの2つの領域が、変性反応を行う領域と、伸長反応を行う領域のいずれかである。
(3)前記中継領域が、変性反応を行う領域であり、前記残りの2つの領域が、結合反応を行う領域と、伸長反応を行う領域のいずれかである。
以下、本発明の核酸増幅装置を図面に基づいて説明するが、基本的に同一の部分には同じ符号を付してその説明を省略する。
図4には、本発明の核酸増幅装置の他の実施形態が示されている。図4が図1と異なる点は、図1は、ディネーチャ温度設定領域1、エクステンション温度設定領域2、アニーリング温度設定領域3で、図4は、ディネーチャ温度設定領域51、アニーリング温度設定領域52でエクステンション温度設定領域53である。エクステンション温度設定領域53とアニ−リング温度設定領域52が入れ変わっている。図4においては、ディネーチャ温度設定領域51、アニーリング温度設定領域52が隣接しているためにディネーチャ工程からアニーリング工程に流路のPCR溶液が高速に移動し、温度変化が高速に行われる。更にアニーリング温度設定領域52とエクステンション温度設定領域53も隣接しているので円滑に温度変化を行わせることが可能となる。しかしながら、エクステンション温度設定領域53からディネーチャ温度設定領域51に推移する過程においてアニーリング温度設定領域52を高速に通過させる必要がある。そのための手段として流路断面積を小さくすることにより達成することができる。図4の配置の場合は、エクステンション工程からディネーチャ工程の間にアニーリング温度設定領域52を通過するが、エクステンション工程で十分に伸張されているので再度アニーリング温度設定領域52を通過しても大きな弊害は発生しない。アニーリング工程とエクステンション工程を比較した場合、一般的にはエクステンション工程の時間が長い。更に、端に位置する温度設定領域は流路が戻る関係上流路が必然的に長くなる。図4のメリットとしては、比較的長くなるエクステンション工程の流路長を長くすることが可能となる。
図5には、本発明の核酸増幅装置の他の実施形態が示されている。図5が図1と異なる点は、図1は、ディネーチャ温度設定領域1、エクステンション温度設定領域2、アニーリング温度設定領域3で、図5は、エクステンション温度設定領域61、ディネーチャ温度設定領域62、アニーリング温度設定領域63の順番に配置している。エクステンション温度設定領域61、ディネーチャ温度設定領域62を入れ替えて配置していることである。図5において、ディネーチャ工程からアニーリング工程は、ディネーチャ温度設定領域62とアニーリング温度設定領域63の温度設定領域が隣接して配置され、ディネーチャ工程からアニーリング工程に流路のPCR溶液が高速に移動し、温度変化が高速に行われる。アニーリング工程からエクステンション工程にPCR溶液が移行する場合、図5においては、ディネーチャ温度設定領域62を通過する必要がある。アニーリング工程でテンプレートとプライマを結合させたものをディネーチャ温度設定領域で再度分離させることになる。従って、ディネーチャ温度設定領域62の流路65の溶液は高速にディネーチャ温度設定領域62を通過させることが重要である。そのための手段として、流路断面積を小さくし、流速を増大させて、通過時間を短くすることが有効となる。通常の温度サイクルの各工程の必要時間は、エクステンション時間>アニーリング時間>>ディネーチャ時間である。従って、端に位置する温度設定領域は流路が戻る関係上流路が必然的に長くなる。図5のメリットとしては、比較的長くなるエクステンション工程、アニーリング工程のための温度設定領域を端に位置させることが可能となる。
4a 導入流路
4b 取り出し流路
6,7,8,9,10 流路
11,12,13,14,15,16 流体温度
21,22,23,24,25 流体温度
51,52,53 温度制御設定領域
54,55,56 流路
61,62,63 温度制御設定領域
64,65 流路
Claims (4)
- 互いに異なる温度に設定可能な少なくとも3つの温度設定領域と、該温度設定領域のいずれか1つを中継領域として、該中継領域を経由して残りの2つの温度設定領域を繰り返し往復するように複数の往路および複数の復路を有して構成された流路と、
を有し、液体が前記流路内を一方に向かって流れることによって核酸増幅の温度サイクルが該液体に与えられ、該液体中の核酸増幅反応を実現する装置であって、
前記中継領域において前記流路の往路と復路の断面積が異なることを特徴とする核酸増幅装置。 - 前記中継領域が、核酸増幅反応における伸張反応を行う領域であり、前記残りの2つの領域が、変性反応を行う領域と、結合反応を行う領域のいずれかであり、
前記中継領域における、前記変性反応を行う領域から結合反応を行う領域に液体が移動するための前記流路の断面積が、前記結合反応を行う領域から変性反応を行う領域に液体が移動するための流路の断面積より小さい請求項1記載の核酸増幅装置。 - 前記中継領域が、結合反応を行う領域であり、前記残りの2つの領域が、変性反応を行う領域と、伸長反応を行う領域のいずれかであり、
前記中継領域における、前記変性反応を行う領域から結合反応を行う領域に液体が移動するための前記流路の断面積が、前記結合反応を行う領域から変性反応を行う領域に流体が移動するための前記流路の断面積より小さい請求項1記載の核酸増幅装置。 - 前記中継領域が、変性反応を行う領域であり、前記残りの2つの領域が、結合反応を行う領域と、伸長反応を行う領域のいずれかであり、
前記中継領域における、前記結合反応を行う領域から伸長反応を行う領域に液体が移動するための前記流路の断面積が、前記伸長反応を行う領域から結合反応を行う領域に流体が移動するための前記流路の断面積より小さい請求項1記載の核酸増幅装置。
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