JP5162177B2 - 粒子分析装置及び粒子分析方法 - Google Patents
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Description
かかる分析装置では、分析を行うのに必要な試料の量が予め規定されており、この必要量以上の試料を患者から採取する必要がある。
そこで、通常よりも少量の試料(以下、「微量試料」ともいう)で分析を行うことが知られている。例えば、患者から採取した微量試料をユーザが希釈して希釈試料を調製し、この希釈試料を分析装置の測定部に供給して測定を行う、キャピラリー測定と呼ばれる方法が知られている(例えば、特許文献1参照)。
フローセルを有しており、吸引部により吸引された生体試料と試薬とを混和して測定試料を調製し、調製された測定試料をフローセルに流して測定することで生体試料に含まれる粒子の特徴パラメータを取得する測定部と、
第1生体試料を測定するための第1測定モード及び第2生体試料を測定するための第2測定モードのいずれか一方を動作モードに設定するためのモード設定手段と、
モード設定手段により第1測定モードが設定された場合には、所定量の第1生体試料を吸引するよう前記吸引部の動作を制御し、且つ、所定の希釈度の第1測定試料を調製し、所定量の第1測定試料をフローセルに流して測定するよう前記測定部の動作を制御し、
前記モード設定手段により第2測定モードが設定された場合には、第1生体試料より少ない第2生体試料を吸引するよう前記吸引部の動作を制御し、且つ、第1測定試料より希釈度の高い第2測定試料を調製し、第1測定試料より多い量の第2測定試料をフローセルに流して測定するよう前記測定部の動作を制御する動作制御手段と
を備えることを特徴としている。
そして、第2測定モードが設定された場合は、第1測定モードの第1生体試料よりも少ない第2生体試料から、第1測定モードの第1測定試料より希釈度の高い第2測定試料が自動的に調製される。
動作モードとして第2測定モードを設定する第1工程、
試料容器から第1生体試料より少ない量の第2生体試料を吸引する第2工程、
吸引された第2生体試料に試薬を添加して、第1測定モードで測定される第1測定試料より希釈度の高い第2測定試料を調製する第3工程、及び
第1測定試料より多い量の第2測定試料をフローセルに流して測定し、生体試料に含まれる粒子の特徴パラメータを取得する第4工程
を含むことを特徴としている。
そして、第2測定モードが設定された場合は、第1測定モードの第1生体試料よりも少ない第2生体試料から、第1測定モードの第1測定試料より希釈度の高い第2測定試料が自動的に調製される。
[試料分析装置の構成]
図1は本発明の一実施の形態に係る試料分析装置Sの全体斜視図であり、図2は、この試料分析装置Sの、ケーシング1を除去した状態の斜視図であり、図3は、同じくケーシングを除去した状態の右側面説明図である。
試料分析装置Sは、サンプル容器3内に収容されている試料(血液)の測定を行う装置(血液分析装置)であり、装置本体2と、この装置本体2を収納するケーシング1とで主に構成されている。
また、前記検出部D2は、HGB測定(血液中の血色素量の測定)を行うHGB検出部として構成されている。このHGB検出部2は、SLS−ヘモグロビン法によりHGB測定を行うことができる。
側方散乱光受光系130は、側方への散乱光を側方集光レンズ131にて集光するとともに、一部の光をダイクロイックミラー132で反射させ、フォトダイオード(側方散乱光受光部)133で受光するように構成されている。
染色された血球のような蛍光物質に光を照射すると、照射した光の波長より長い波長の光を発する。蛍光の強度はよく染色されていれば強くなり、この蛍光強度を測定することによって血球の染色度合いに関する情報を得ることができる。したがって、(側方)蛍光強度の差によって、白血球の分類その他の測定を行うことができる。
部D3の一部であるフローセル101、第2混合チャンバMC2に溶血剤FFDを供給するダイアフラムポンプDP4、第2混合チャンバMC2に染色液FFSを供給するダイアフラムポンプDP5、及びフローセル101に測定用試料を供給するシリンジポンプSP2、フローセル101等を洗浄するための希釈液(洗浄液)EPKを収容するための希釈液容器EPK−Vなどが含まれる。
試料分析装置Sによる分析処理の一例の全体フローを図7に示す。なお、以下に説明する処理は、処理装置PC、より詳細には当該処理装置PCの制御部77、及び装置本体2の制御部100によって制御される処理である。
ついで、ステップS2において、制御部100によって、ユーザによりスタートスイッチが押されたか否かが判断される。制御部100は、スタートスイッチが押されたと判断する(Yes)とステップS3へ処理を進め、スタートスイッチが押されなかったと判断する(No)とステップS10へ処理を進める。
一方、処理装置PCの電源が投入されると、当該処理装置PCの制御部77の初期化が行われる(ステップS101)。この初期化動作では、プログラムの初期化などが行われる。初期化が完了すると、モード及び測定項目の選択を行う測定ダイアログの表示を指示するための測定ダイアログ表示ボタンを含むメニュー画面(図示せず)が表示部79に表示される。ユーザは、入力部78を操作することによって、メニュー画面の測定ダイアログの表示を指示するための測定ダイアログ表示ボタンを選択することができる。
ついで、ステップS105において、制御部77によって、入力された測定情報が記憶される。
装置本体2の制御部100は、ステップS4において、制御部77から測定情報を受信したか否かを判断する。制御部100は、測定情報を受信したと判断する(Yes)と、ステップS5へ処理を進め、一方、測定情報を受信していないと判断する(No)と、同ステップS4に戻る。そして、制御部100は、ステップS5において、受信した測定情報を当該制御部100の記憶部に記憶させる。
処理装置PCの制御部77は、ステップS109において、装置本体2の制御部100から測定データを受信したか否かの判断をする。制御部77は、測定データを受信したと判断する(Yes)とステップS110へ処理を進め、受信した測定データの処理を行い、さらにステップS111において、分析結果を表や分布図などを適宜用いて表示部79に表示する。一方、制御部77は、測定データを受信していないと判断する(No)と、ステップS109に戻る。
つぎに、図9を参照しつつ、ステップS8における通常量の検体を測定する通常測定モードについて説明をする。
まず、シリンジポンプによって所定量の試料(例えば、75μL。以下、カッコ内の数値は、試料又は試薬の吸引量ないしは使用量の例を示している)が吸引管により吸引される。
ついで、制御部100は、ステップS203において、測定項目としてDIFFが設定されているか否かの判断を行う。制御部100は、測定項目としてDIFFが設定されていると判断(Yes)すると、ステップS204へ処理を進め、測定項目としてDIFFが設定されていないと判断(No)すると、ステップS205へ処理を進める。
ついで、制御部100は、ステップS205において、測定項目としてNRBCが設定されているか否かの判断を行う。制御部100は、測定項目としてNRBCが設定されていると判断(Yes)すると、ステップS206へ処理を進め、測定項目としてNRBCが設定されていないと判断(No)すると、ステップS207へ処理を進める。
ついで、ステップS206において、制御部100は、NRBC測定用試料の調製及び測定を行う。
ついで、ステップS208において、制御部100は、RET測定用試料の調製及び測定を行う。具体的には、吸引管から試料の一部(5μL)が第5混合チャンバMC5に分注され所定量(1.0mL)の希釈液及び所定量(20μL)の染色液と混合され205倍に希釈されたRET用測定用試料(1.0mL)が作製される。そして、作製された測定用試料(1.0mL)がWBC検出部D3(光学検出部)に導入され、3.2sec間、粒子の検出及びデータ収集が行われる。なお、測定されるRET用測定用試料の量は2.99μLである。
図10は、ステップS202におけるWBC測定(通常)のフローを示している。
まず、ステップS301において、制御部100は希釈度52倍のWBC測定用試料の調製を行う。具体的には、吸引管から試料の一部(20μL)が第2混合チャンバMC2に分注され所定量(1.0mL)の溶血剤及び所定量(20μL)の染色液と混合され52倍に希釈されたWBC測定用試料(1.0mL)が作製される。
ついで、ステップS303において、測定用試料の供給開始からの時間の計時が開始され、ステップS304において、WBC検出部D3により測定用試料の特徴パラメータが取得される。
つぎに、図11を参照しつつ、ステップS7における微量の検体を測定する微量測定モードについて説明をする。
まず、シリンジポンプによって所定量の試料(48μL)が吸引管により吸引される。
ついで、制御部100は、ステップS403において、測定項目としてDIFFが設定されているか否かの判断を行う。制御部100は、測定項目としてDIFFが設定されていると判断(Yes)すると、ステップS404へ処理を進め、測定項目としてDIFFが設定されていないと判断(No)すると、ステップS204へ処理を進める。
ついで、制御部100は、ステップS405において、測定項目としてNRBCが設定されているか否かの判断を行う。制御部100は、測定項目としてNRBCが設定されていると判断(Yes)すると、ステップS406へ処理を進め、測定項目としてNRBCが設定されていないと判断(No)すると、ステップS407へ処理を進める。
ついで、制御部100は、ステップS407において、測定項目としてRETが設定されているか否かの判断を行う。制御部100は、測定項目としてRETが設定されていると判断(Yes)すると、ステップS408へ処理を進め、測定項目としてRETが設定されていないと判断(No)すると、ステップS9へ処理を進める。
図12は、ステップS202におけるWBC測定(微量)のフローを示している。
まず、ステップS501において、制御部100は希釈度93.7倍のWBC測定用試料の調製を行う。具体的には、吸引管から試料の一部(11μL)が第2混合チャンバMC2に分注され所定量(1.0mL)の溶血剤及び所定量(20μL)の染色液と混合され93.7倍に希釈されたWBC測定用試料(1.0mL)が作製される。
ついで、ステップS503において、測定用試料の供給開始からの時間の計時が開始され、ステップS504において、WBC検出部D3により測定用試料の特徴パラメータが取得される。
なお、試料分析装置Sは、微量測定モードの場合に検出部に供給される測定用試料の供給速度が、上述した通常測定モードの場合に検出部に供給される測定用試料の供給速度と同じになるように構成されている。
また、本実施の形態においては、微量測定モードが選択された場合、例えばWBC測定の場合には、通常測定モードの場合よりも長い時間測定用試料が測定されるため、微量測定モードの場合に検出部を流れる測定用試料の速度と、通常測定モードの場合に検出部を流れる測定用試料の速度とを同じにしても、通常測定モードの場合よりも多くの量の測定用試料を測定することができる。そのため、いずれの測定モードの場合でも検出部への測定用試料の供給速度を同じにすることができ、同一条件下で試料の測定を行うことができる。
また、前述した実施の形態における試料の吸引量や希釈度、又は測定時間などは、単なる例示にすぎず、測定用試料に応じて適宜変更することができる。
2 装置本体
3 サンプル容器
4 試料セット部
5 開口部
6 載置台
7 スライダー
8 カバー
9 凹所
13 吸引管
15 ボタン
16 排気口
77 制御部
78 入力部
79 表示部
100 制御部
S 試料分析装置
PC 処理装置
D1 RBC/PLT検出部
D2 HGB検出部
D3 WBC検出部
MC1 第1混合チャンバ
MC2 第2混合チャンバ
MC3 第3混合チャンバ
MC4 第4混合チャンバ
MC5 第5混合チャンバ
Claims (7)
- 試料容器から粒子を含む生体試料を吸引する吸引部と、
フローセルを有しており、吸引部により吸引された生体試料と試薬とを混和して測定試料を調製し、調製された測定試料をフローセルに流して測定することで生体試料に含まれる粒子の特徴パラメータを取得する測定部と、
第1生体試料を測定するための第1測定モード及び第2生体試料を測定するための第2測定モードのいずれか一方を動作モードに設定するためのモード設定手段と、
モード設定手段により第1測定モードが設定された場合には、所定量の第1生体試料を吸引するよう前記吸引部の動作を制御し、且つ、所定の希釈度の第1測定試料を調製し、所定量の第1測定試料をフローセルに流して測定するよう前記測定部の動作を制御し、
前記モード設定手段により第2測定モードが設定された場合には、第1生体試料より少ない第2生体試料を吸引するよう前記吸引部の動作を制御し、且つ、第1測定試料より希釈度の高い第2測定試料を調製し、第1測定試料より多い量の第2測定試料をフローセルに流して測定するよう前記測定部の動作を制御する動作制御手段と
を備えることを特徴とする粒子分析装置。 - 前記動作制御手段は、
前記モード設定手段により第1測定モードが設定された場合には、前記第1測定試料を第1測定時間測定するよう前記測定部の動作を制御し、
前記モード設定手段により第2測定モードが設定された場合には、前記第2測定試料を第1測定時間より長い第2測定時間測定するよう前記測定部の動作を制御する請求項1に記載の粒子分析装置。 - 前記生体試料が血液である請求項1または2に記載の粒子分析装置。
- 第1測定試料の調製に用いられる試薬の量と、第2測定試料の調製に用いられる試薬の量とが同じである請求項1〜3のいずれかに記載の粒子分析装置。
- 第1測定試料を測定する際に測定部に供給される当該第1測定試料の供給速度と、第2測定試料を測定する際に測定部に供給される当該第2測定試料の供給速度とが同じである請求項1〜4のいずれかに記載の粒子分析装置。
- 粒子を含む第1生体試料を測定するための第1測定モード及び粒子を含む第2生体試料を測定するための第2測定モードのいずれか一方を動作モードに設定することが可能な粒子分析方法であって、
動作モードとして第2測定モードを設定する第1工程、
試料容器から第1生体試料より少ない量の第2生体試料を吸引する第2工程、
吸引された第2生体試料に試薬を添加して、第1測定モードで測定される第1測定試料より希釈度の高い第2測定試料を調製する第3工程、及び
第1測定試料より多い量の第2測定試料をフローセルに流して測定し、生体試料に含まれる粒子の特徴パラメータを取得する第4工程
を含むことを特徴とする粒子分析方法。 - 第4工程は、第2測定試料を、第1測定試料を測定する第1測定時間より長い第2測定時間測定することにより実行される請求項6記載の粒子分析方法。
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