JP5099930B2 - Method for separating immunoglobulin monomer - Google Patents

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Description

本発明は、限外濾過膜を用いて、少なくとも免疫グロブリンの１量体とその凝集体を含む免疫グロブリン溶液をクロスフロー濾過することにより、免疫グロブリン１量体を高精度で分離する方法およびその限外濾過膜モジュール、クロスフロー濾過装置に関する。   The present invention relates to a method for separating an immunoglobulin monomer with high accuracy by performing cross-flow filtration on an immunoglobulin solution containing at least an immunoglobulin monomer and an aggregate thereof using an ultrafiltration membrane, and the method thereof. The present invention relates to an ultrafiltration membrane module and a cross flow filtration device.

免疫グロブリン（抗体）は、主に血液中や体液中に存在し、体内に侵入してきた細菌 ・ウイルス などの微生物や、微生物に感染した細胞を抗原として認識して結合する。抗体が抗原へ結合すると、その抗原と抗体の複合体を白血球 やマクロファージ といった食細胞が認識・貪食して体内から除去するように働いたり、リンパ球などの免疫細胞が結合して免疫反応 を引き起こしたりする。このように、免疫グロブリンは、感染防御機構において重要な役割を担っている。   Immunoglobulins (antibodies) exist mainly in blood and body fluids, and recognize and bind to microorganisms such as bacteria and viruses that have entered the body and cells infected with microorganisms as antigens. When an antibody binds to an antigen, the phagocytic cells such as leukocytes and macrophages recognize and phagocytose the antigen-antibody complex and work to remove it from the body, or immune cells such as lymphocytes bind to cause an immune reaction. Or Thus, immunoglobulins play an important role in infection defense mechanisms.

免疫グロブリンを製造する方法としては、生体成分、主に血液から分離精製する方法やハイブリドーマなどの細胞から分離精製する方法などがある。しかしながら、生体成分には１０万種以上のタンパク質やＤＮＡ、ＲＮＡ、ウイルスなどの微生物が存在し、それらを免疫グロブリンから分離する必要がある。   As a method for producing an immunoglobulin, there are a method of separating and purifying from biological components, mainly blood, and a method of separating and purifying from cells such as hybridomas. However, there are 100,000 or more kinds of microorganisms such as proteins, DNA, RNA, viruses, and the like as biological components, and it is necessary to separate them from immunoglobulins.

さらに、免疫グロブリンには、複数の免疫グロブリンが非共有結合で結合した凝集体（主に２量体）も存在している。免疫グロブリン凝集体は、免疫グロブリン製剤を人体に静脈注射した際に現われる副作用、例えば、チアノーゼや血圧低下などのショック様反応や、呼吸困難などの気道症状、さらに皮疹等の原因のひとつとされている。この凝集体は互いに凝集して、より大きな多量体を作る傾向があり、溶液中に白濁や沈殿を生じることもある。また、他の蛋白質、菌、ウイルス等を核としてその周囲に結合し、抗原抗体複合体と呼ばれる巨大な蛋白質凝集体を形成する場合もある。一旦、形成された凝集体は、一般に容易に解離させることができない。それ故に、これら凝集体を溶液中から除去する方法は、従来から数多く提案されている。   Furthermore, there are also aggregates (mainly dimers) in which a plurality of immunoglobulins are bound by non-covalent bonds in immunoglobulins. Immunoglobulin aggregates are considered to be one of the causes of side effects that appear when an immunoglobulin preparation is intravenously injected into the human body, such as shock-like reactions such as cyanosis and blood pressure reduction, respiratory tract symptoms such as dyspnea, and rashes. Yes. These agglomerates tend to aggregate with each other to form larger multimers, which can result in cloudiness and precipitation in the solution. In some cases, other proteins, bacteria, viruses, and the like are used as nuclei and bound to the periphery to form huge protein aggregates called antigen-antibody complexes. Once formed, aggregates generally cannot be easily dissociated. Therefore, many methods for removing these aggregates from the solution have been proposed.

これらが混合する溶液から免疫グロブリン１量体を分離するために数種類の精製方法が報告されている。例えば、イオン交換クロマトグラフィー法や疎水性クロマトグラフィー法、ゲルクロマトグラフィー法、化学的処理法、吸着法、限外濾過膜法などが挙げられる。
電荷や疎水性が大きく異なる物質を分離する場合、イオン交換クロマトグラフィーや疎水性クロマトグラフィー法は有効であるが、免疫グロブリン１量体と２量体のように電荷や疎水性の度合が近い物質では、十分に分離できない上、大量の溶離液、塩が必要である等の欠点がある。
一方、ゲルクロマトグラフィー法は、サイズ分離であるため、大きさの異なる免疫グロブリン１量体と２量体の分離に有効であるが、大量の免疫グロブリンを処理することはできず、作業に要する時間やコストが長大になる欠点がある。
化学物質を添加する化学的処理法は大量処理が可能であるが、処理に用いた薬品を溶液から除去する必要があり、さらには、処理によって免疫グロブリンの失活や変性を招きやすく、免疫グロブリンの透過率を低下させることとなる。
また、吸着方法も免疫グロブリン２量体の除去効率が高いとはいえず、さらに、化学的処理と同様に添加した吸着剤の除去という作業が必要となる。Several types of purification methods have been reported for separating immunoglobulin monomers from the solution in which they are mixed. For example, ion exchange chromatography method, hydrophobic chromatography method, gel chromatography method, chemical treatment method, adsorption method, ultrafiltration membrane method and the like can be mentioned.
Ion exchange chromatography and hydrophobic chromatography methods are effective for separating substances with greatly different charges and hydrophobicity, but substances with similar degrees of charge and hydrophobicity, such as immunoglobulin monomers and dimers. However, there are disadvantages such that a sufficient amount of eluent and salt are necessary in addition to sufficient separation.
On the other hand, the gel chromatography method is effective in separating immunoglobulin dimers and dimers having different sizes because of size separation, but cannot process a large amount of immunoglobulins and requires work. There is a drawback that the time and cost are long.
Chemical treatment methods that add chemical substances can be processed in large quantities, but it is necessary to remove the chemicals used in the treatment from the solution, and the treatment tends to cause inactivation or denaturation of immunoglobulins. This will reduce the transmittance.
Also, the adsorption method does not have high removal efficiency of the immunoglobulin dimer, and further, the work of removing the added adsorbent is required in the same manner as the chemical treatment.

最近、ロバストネスが高く、簡便で、大量の蛋白を処理できる限外濾過膜法が注目され、多くの報告例がある。一般に２成分を限外濾過で分離する場合、分画性能および透過量は、限外濾過膜表面に形成されるケーク層に影響されると考えられている。そのケーク層形成には、限外濾過膜の分画分子量とケーク層を構成する蛋白質などの粒子の濃度が重要因子として推測される。しかしながら、ケーク層の解析は困難であるため、ケーク層を制御する方法はほとんど分かっていない。
例えば、ウシ血清アルブミンとリゾチームの分離について報告されているが（非特許文献１）、ケーク層の解析や制御法についてはなんら記載されていない。ましてや、免疫グロブリン１量体と２量体の分離については全く記載されていない。Recently, an ultrafiltration membrane method that has high robustness, is simple, and can process a large amount of protein has attracted attention, and there are many reports. In general, when two components are separated by ultrafiltration, the fractionation performance and permeation amount are considered to be affected by the cake layer formed on the surface of the ultrafiltration membrane. For the formation of the cake layer, the fractional molecular weight of the ultrafiltration membrane and the concentration of particles such as proteins constituting the cake layer are presumed as important factors. However, since analysis of the cake layer is difficult, little is known about how to control the cake layer.
For example, although the separation of bovine serum albumin and lysozyme has been reported (Non-patent Document 1), there is no description about the analysis and control method of the cake layer. Moreover, there is no description of the separation of immunoglobulin monomers and dimers.

免疫グロブリンの膜分離法としては、ポリスルホン系高分子より成膜された限外濾過膜で濾過することによるグロブリン２量体の除去方法（特許文献１）が提案されている。しかしながら、この方法はデッドエンド法であるため膜内に大量の免疫グロブリンが捕捉され、厚いケーク層が形成されるために膜閉塞が起こる。その結果、免疫グロブリン１量体の透過率は４０％前後と極めて低く、濾過速度や濾過容量も低くなり、工業的な有効性が高いとはいえない。   As an immunoglobulin membrane separation method, a globulin dimer removal method (Patent Document 1) by filtering with an ultrafiltration membrane formed from a polysulfone polymer has been proposed. However, since this method is a dead-end method, a large amount of immunoglobulin is trapped in the membrane and a thick cake layer is formed, resulting in membrane clogging. As a result, the transmittance of the immunoglobulin monomer is as low as about 40%, the filtration rate and the filtration capacity are low, and it cannot be said that the industrial effectiveness is high.

また、再生セルロース中空糸膜を用いてデッドエンド濾過することによる免疫グロブリン凝集体の除去方法（特許文献２）も提案されているが、孔径（分画分子量）が大きいために免疫グロブリン２量体がほとんど除去されず、免疫グロブリン２量体の分離法としては十分ではなかった。   In addition, a method for removing immunoglobulin aggregates by dead-end filtration using a regenerated cellulose hollow fiber membrane (Patent Document 2) has also been proposed, but the immunoglobulin dimer has a large pore size (fractional molecular weight). Was hardly removed as a method for separating immunoglobulin dimers.

溶液内に不純物の多い場合は、膜捕捉容量を考慮し、膜閉塞が起こりにくいクロスフロー濾過法が利用されることが多い。限外濾過膜を使用し、クロスフロー濾過することによって免疫グロブリン２量体を除去する方法（特許文献３）が報告されているが、免疫グロブリン１量体と２量体の分画性能についてのデータは全く記載されていない。特許文献３ではきわめて低い濃度で濾過を実施しており、免疫グロブリン１量体と２量体を分離できるケーク層が十分にできないと推測される。   When there are many impurities in the solution, the cross-flow filtration method in which membrane clogging is unlikely to occur is often used in consideration of membrane trapping capacity. Although a method of removing immunoglobulin dimers by crossflow filtration using an ultrafiltration membrane (Patent Document 3) has been reported, the fractionation performance of immunoglobulin dimers and dimers has been reported. No data is given. In Patent Document 3, filtration is performed at a very low concentration, and it is estimated that a cake layer capable of separating immunoglobulin monomers and dimers cannot be sufficiently formed.

また、分子量の相違が１０倍未満である生体成分を、転移点での流束の５から１００％の範囲のレベルに維持しながらクロスフロー濾過することで分離する方法（特許文献４）が報告されているが、１０万以下の蛋白分離について報告されているだけで、免疫グロブリン１量体と２量体の分離についてのデータは全く記載されていない。   In addition, a method of separating biological components having a molecular weight difference of less than 10 times by cross-flow filtration while maintaining a level in the range of 5 to 100% of the flux at the transition point (Patent Document 4) has been reported. However, only a protein separation of 100,000 or less has been reported, and no data on the separation of immunoglobulin monomer and dimer is described.

また、人血漿から分画された免疫グロブリンの水溶液から凝集体を除去した後、界面活性を有する安定剤の存在下、ポリオレフィン多孔質膜で濾過し、抗補体活性を低減させる方法（特許文献５）が報告されているが、免疫グロブリン１量体と２量体の分離に関する具体的なデータはない。さらに、免疫グロブリン凝集体（３量体以上）を通過させる孔径を有する膜を使用することが好ましいと記載されており、この膜では免疫グロブリン１量体と２量体を分離することは困難である。   In addition, after removing aggregates from an aqueous immunoglobulin solution fractionated from human plasma, it is filtered through a polyolefin porous membrane in the presence of a surfactant having a surfactant activity to reduce anti-complement activity (Patent Document) Although 5) has been reported, there is no specific data on the separation of immunoglobulin monomer and dimer. Furthermore, it is described that it is preferable to use a membrane having a pore size that allows immunoglobulin aggregates (trimers or more) to pass through. It is difficult to separate immunoglobulin monomers and dimers with this membrane. is there.

さらに、血液から血漿を分離するための膜を用いても、免疫グロブリン２量体が除去できるとされているが（特許文献６）、この膜による除去効果は、２量体と孔の大きさの関係に起因するのではなく、膜素材と免疫グロブリン２量体との相互作用力による免疫グロブリン２量体の膜表面への吸着によるものであると考えられるため、吸着を起こさせ得る条件（例えば、溶液のｐＨやイオン強度）で使用する必要が生じ、わずかな条件の変化で期待される除去効果を得られないことが多い。加えて、これら従来の方法では、作業中に菌やウイルス等の微生物が外部から溶液中に混入する危険性が大きい。医薬品の場合、特にこのことは重大であるので、免疫グロブリン２量体除去の処理をした免疫グロブリン溶液に対して、これら微生物を不活化または除去する作業が必要となっている。   Furthermore, it is said that the immunoglobulin dimer can be removed even if a membrane for separating plasma from blood is used (Patent Document 6). The removal effect of this membrane is due to the dimer and the pore size. It is not caused by this relationship, but is considered to be due to the adsorption of the immunoglobulin dimer to the membrane surface due to the interaction force between the membrane material and the immunoglobulin dimer. For example, it is necessary to use the solution at the pH and ionic strength of the solution, and it is often impossible to obtain the expected removal effect by a slight change in conditions. In addition, in these conventional methods, there is a high risk that microorganisms such as bacteria and viruses are mixed into the solution from the outside during the operation. In the case of pharmaceuticals, this is particularly important, and it is necessary to inactivate or remove these microorganisms from the immunoglobulin solution subjected to the removal of the immunoglobulin dimer.

クロスフロー濾過法を行う場合、特許文献３や特許文献４のように免疫グロブリン透過液と同量の希釈液を元の生体成分溶液に添加して行う定容量濾過で実施する場合が多い。しかしながら、この濾過法では濾過が進むにつれて元の生体成分溶液の濃度が低下するため、回収率を８０％以上にするには、長大な時間がかかる場合があった。
限外濾過膜を用いたクロスフロー濾過に際して、免疫グロブリン含有溶液中に凝集物や白濁が生成する場合がある。これは、限外濾過により免疫グロブリンに負荷されるストレスにより免疫グロブリン自体又は随伴する他の夾雑物が不溶化、凝集することにより生ずると考えられる。凝集、白濁化は、透過量や分画性能に影響するため、凝集、白濁化する場合にはそれらを抑制することが重要である。When performing the cross-flow filtration method, as in Patent Document 3 and Patent Document 4, it is often performed by constant volume filtration performed by adding a diluent having the same amount as the immunoglobulin permeation solution to the original biological component solution. However, in this filtration method, since the concentration of the original biological component solution decreases as the filtration proceeds, it may take a long time to increase the recovery rate to 80% or more.
In crossflow filtration using an ultrafiltration membrane, aggregates and cloudiness may be generated in an immunoglobulin-containing solution. This is considered to be caused by insolubilization and aggregation of immunoglobulin itself or other accompanying impurities due to stress loaded on the immunoglobulin by ultrafiltration. Aggregation and white turbidity affect the amount of permeation and fractionation performance, so it is important to suppress them when agglomerating and white turbid.

一般的に免疫グロブリンの凝集を抑制する方法としては、塩濃度の調整やｐＨコントロールする方法（特許文献７）が挙げられる。凝集抑制剤として用いられる塩としては燐酸塩が挙げられる。しかし、塩濃度が低いと凝集抑制効果は低く、通常過剰に添加されるケースが多い。そのため、免疫グロブリンの析出等が問題となる場合がある。このような場合は、その後の脱塩処理プロセスが必要となり、コスト増加につながる。また、ｐＨコントロールによる凝集抑制については、免疫グロブリンの変性を伴う懸念がある。   In general, as a method for suppressing the aggregation of immunoglobulin, there is a method of adjusting salt concentration or controlling pH (Patent Document 7). Examples of the salt used as the aggregation inhibitor include phosphates. However, when the salt concentration is low, the aggregation suppressing effect is low and is usually added excessively. Therefore, immunoglobulin precipitation may be a problem. In such a case, a subsequent desalting process is required, leading to an increase in cost. In addition, there is a concern with immunoglobulin denaturation regarding the suppression of aggregation by pH control.

また、ソルビタンを使用して凝集物の生成や白濁化を抑制する方法（特許文献８）が報告されているが、抑制効果を十分に出すために必要なソルビタンを添加すると、透過量が低下する問題があった。   Moreover, although the method (patent document 8) which suppresses the production | generation and white turbidity of an aggregate using sorbitan has been reported, when sorbitan required in order to fully exhibit the inhibitory effect is added, permeation | transmission amount will fall. There was a problem.

免疫グロブリンを精製する場合、各精製工程でのウイルスクリアランス性能を有する必要がある。原理の異なる精製方法のウイルスクリアランス性能（ＬＲＶ：Ｌｏｇ Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ Ｖａｌｕｅ）の和が、１０以上（エンベロープウィルス）または６以上（ノンエンベロープウィルス）になるようＰａｕｌ−Ｅｈｒｌｉｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（独）は推奨しており、免疫グロブリン１量体を分離する膜にもウイルスクリアランス性能が必要である。しかしながら、既存の免疫グロブリン１量体と２量体を分離する限外濾過膜のウイルスクリアランス性能について報告されている例はない。

特公昭６２−３８１５号公報 特開平６−２７９２９６号公報 特許第３７４６２２３号公報 特許第３８２８１４３号公報 特公平７−７８０２５号公報 特開昭６１−６９７３２号公報 特開２００４−２６７８３０号公報 国際公開第０２／０１３８５９号パンフレット Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，３３（２），１６９−１８５（１９９８） When purifying immunoglobulin, it is necessary to have virus clearance performance in each purification step. The Paul-Ehrrich Institute (Germany) recommends that the sum of virus clearance performance (LRV: Log Reduction Value) of purification methods with different principles is 10 or more (envelope virus) or 6 or more (non-envelope virus), Virus clearance performance is also required for membranes that separate immunoglobulin monomers. However, there is no report on the virus clearance performance of an ultrafiltration membrane that separates an existing immunoglobulin monomer and dimer.

Japanese Patent Publication No.62-3815 JP-A-6-279296 Japanese Patent No. 3746223 Japanese Patent No. 3828143 Japanese Patent Publication No. 7-78025 JP-A 61-69732 JP 2004-267830 A International Publication No. 02/013859 Pamphlet Separation Science and Technology, 33 (2), 169-185 (1998)

本発明は、限外濾過膜を用いて、少なくとも免疫グロブリンの１量体とその凝集体を含む免疫グロブリン溶液をクロスフロー濾過することにより、免疫グロブリン１量体を高精度で分離する方法およびその限外濾過膜モジュール、クロスフロー濾過装置を提供する。   The present invention relates to a method for separating an immunoglobulin monomer with high accuracy by performing cross-flow filtration on an immunoglobulin solution containing at least an immunoglobulin monomer and an aggregate thereof using an ultrafiltration membrane, and the method thereof. An ultrafiltration membrane module and a crossflow filtration device are provided.

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、分画分子量が１０万以上５０万未満である限外濾過膜を用いた免疫グロブリン１量体の精製方法において、分画性能と処理量の向上という、相反する現象が存在することを見出した上で、限外濾過膜の分画分子量と、免疫グロブリン溶液の濃度の最適化を行なうことで処理量を低下させることなく、高い分画性能を発現できることを見出した。さらに、濾過中の免疫グロブリン溶液の濃度を実質一定にすることで、短時間で、効率よく、高純度の免疫グロブリン１量体を精製できることを見出した。   As a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors have found that in a method for purifying an immunoglobulin monomer using an ultrafiltration membrane having a fractional molecular weight of 100,000 or more and less than 500,000, Decrease the throughput by optimizing the molecular weight of the ultrafiltration membrane and the concentration of the immunoglobulin solution after finding the contradictory phenomena of improving the drawing performance and throughput And found that high fractionation performance can be expressed. Furthermore, it has been found that a highly pure immunoglobulin monomer can be purified efficiently in a short time by making the concentration of the immunoglobulin solution during filtration substantially constant.

すなわち、分画分子量が１０万以上５０万未満である限外濾過膜を用いて、少なくとも免疫グロブリンの１量体とその凝集体を含む免疫グロブリン溶液であって、免疫グロブリン濃度が１〜１５０ｇ／Ｌである溶液を、クロスフロー濾過することにより、免疫グロブリン１量体を８０％以上の透過率で透過させ、かつ、限外濾過膜を透過する免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比が０．２０以下となる分画性能で免疫グロブリン１量体を分離できる方法およびその限外濾過膜モジュール、クロスフロー濾過装置を発明するに至った。   That is, an immunoglobulin solution containing at least an immunoglobulin monomer and an aggregate thereof using an ultrafiltration membrane having a molecular weight cut-off of 100,000 or more and less than 500,000, and having an immunoglobulin concentration of 1 to 150 g / The solution of L is cross-flow filtered to allow the immunoglobulin monomer to permeate at a permeability of 80% or more, and to transmit the immunoglobulin monomer and dimer that permeate the ultrafiltration membrane. It came to invent the method which can isolate | separate an immunoglobulin monomer with the fractionation performance in which a ratio is 0.20 or less, its ultrafiltration membrane module, and a crossflow filtration apparatus.

即ち、本発明は、
［１］ 分画分子量が１０万以上５０万未満である限外濾過膜を用いて、少なくとも免疫グロブリンの１量体とその凝集体を含む免疫グロブリン溶液であって、免疫グロブリン濃度が１〜１５０ｇ／Ｌである溶液を、クロスフロー濾過することにより、免疫グロブリンの１量体を分離する方法。
［２］ 分画分子量が１０万以上５０万未満である限外濾過膜を用いて、免疫グロブリン濃度が１〜１５０ｇ／Ｌである溶液を、クロスフロー濾過することにより、免疫グロブリンの１量体と免疫グロブリンの凝集体を分離する方法。
［３］ 該凝集体は、少なくとも免疫グロブリンの２量体を含むことを特徴とする上記［１］または［２］に記載の分離方法。
［４］ 該免疫グロブリン濃度が、１〜１００ｇ／Ｌであることを特徴とする上記［１］〜［３］のいずれかに記載の分離方法。
［５］ 該免疫グロブリン濃度が、５〜１００ｇ／Ｌであることを特徴とする上記［１］〜［３］のいずれかに記載の分離方法。
［６］ 免疫グロブリン濃度を１００としたとき、クロスフロー濾過中の免疫グロブリン濃度の変化を５０〜２００に維持しながら、クロスフロー濾過を行うことを特徴とする上記［１］〜［５］のいずれかに記載の分離方法。
［７］ 該免疫グロブリン濃度の変化を８０〜１２０に維持しながら、クロスフロー濾過を行うことを特徴とする上記［６］に記載の分離方法。
［８］ 免疫グロブリンの濃度を実質一定に維持しながら、クロスフロー濾過することを特徴とする上記［６］または［７］に記載の分離方法。
［９］ 免疫グロブリン１量体の５０％以上が、上記［６］〜［８］のいずれかに記載の分離方法によって分離されることを特徴とする分離方法。
［１０］ 該免疫グロブリン溶液が、更に分子量３０万以上１００万未満の蛋白質、糖鎖、ＲＮＡ、及び、ＤＮＡから選ばれる少なくとも１つの生体成分を含有することを特徴とする上記［１］〜［９］のいずれかに記載の分離方法。
［１１］ 該免疫グロブリン溶液が、更に分子量３０万以上１００万未満の蛋白質から選ばれる少なくとも１つの生体成分を含有することを特徴とする上記［１０］に記載の分離方法。
［１２］ 該蛋白質が、免疫グロブリン凝集体、フィブリノーゲン、免疫グロブリンとプロテインＡからなる複合凝集体からなる群から選ばれる少なくとも１つであることを特徴とする上記［１１］に記載の分離方法。
［１３］ 該免疫グロブリン溶液が、更にウイルスを含有することを特徴とする上記［１］〜［１２］のいずれかに記載の分離方法。
［１４］ 該ウイルスが、パルボウイルスであることを特徴とする上記［１３］に記載の分離方法。
［１５］ 該免疫グロブリンが、モノクローナル抗体であることを特徴とする上記［１］〜［１４］のいずれかに記載の分離方法。
［１６］ 該限外濾過膜が、ポリスルホン系高分子、芳香族エーテル系高分子、（メタ）アクリル系高分子、（メタ）アクリロニトリル系高分子、フッ素系高分子、オレフィン系高分子、ビニルアルコール系高分子、セルロース系高分子からなる群から選ばれる１種以上の高分子からなることを特徴とする上記［１］〜［１５］のいずれかに記載の分離方法。
［１７］ 該高分子が、ポリスルホン系高分子であることを特徴とする上記［１６］に記載の分離方法。
［１８］ 該ポリスルホン系高分子が下記式（５）〜（７）で表されるポリスルホン系高分子の少なくとも１種又は２種以上の混合物であることを特徴とする上記［１７］に記載の分離方法。
［１９］ 該ポリスルホン系高分子が、ポリビニルピロリドンで親水化されたポリスルホン系高分子であることを特徴とする上記［１７］または［１８］に記載の分離方法。
［２０］ 該高分子が、芳香族エーテル系高分子であることを特徴とする上記［１６］に記載の分離方法。
［２１］ 該芳香族エーテル系高分子が、下記式（８）で表される芳香族エーテル系高分子の少なくとも１種又は２種以上であり、ポリスチレンと親水性高分子からなるブロック共重合体によって親水化された芳香族エーテル系高分子であることを特徴とする上記［２０］に記載の分離方法。
（Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は水素、炭素数１以上６以下を含む有機官能基、または、酸素、窒素または珪素を含有する炭素数６以下の非プロトン性有機官能基であり、それぞれ同一であっても、異なっても構わない。構造式中のｑは繰り返し単位数である。異なる繰り返し単位を２成分以上含む共重合体でも構わない。）
［２２］ 該親水性高分子が、ポリエチレングリコール系高分子および／またはポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントを含有する高分子であることを特徴とする上記［２１］に記載の分離方法。
［２３］ 該免疫グロブリン溶液が、更に界面活性剤を含有することを特徴とする上記［１］〜［２２］に記載の分離方法。
［２４］ 該界面活性剤が、両イオン界面活性剤であること特徴とする上記［２３］に記載の分離方法。
［２５］ 該両イオン界面活性剤が、リシン、アラニン、システイン、グリシン、セリン、プロリン、アルギニンおよびこれらの誘導体からなる群から選ばれることを特徴とする上記［２４］に記載の分離方法。
［２６］ 該両イオン界面活性剤が、アルギニンおよび／またはアルギニンの誘導体であることを特徴とする上記［２５］に記載の分離方法。
［２７］ 該両イオン界面活性剤が、リシンおよび／またはリシンの誘導体であることを特徴とする上記［２５］に記載の分離方法。
［２８］ 該界面活性剤が、非イオン界面活性剤であること特徴とする上記［２３］に記載の分離方法。
［２９］ 該非イオン界面活性剤が、ポリエチレングリコールおよび／またはポリエチレングリコール誘導体であることを特徴とする上記［２８］に記載の分離方法。
［３０］ 該ポリエチレングリコールおよび／またはポリエチレングリコール誘導体の数平均分子量が、５０〜３００００Ｄａであることを特徴とする上記［２９］に記載の分離方法。
［３１］ 上記［１］〜［３０］のいずれかに記載の分離方法であって、濾過開始から設定時間まで、免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液に再循環させることを特徴とする分離方法。
［３２］ 該免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液に再循環させる設定時間を、濾過開始から免疫グロブリン透過液に含まれる免疫グロブリン２量体の割合が１％以下になった時点に設定することを特徴とする上記［３１］に記載の分離方法。
［３３］ 該免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液に再循環させる設定時間を、濾過開始から免疫グロブリン１量体と免疫グロブリン２量体の透過率比が０．１以下に到達した時点に設定することを特徴とする上記［３１］に記載の分離方法。
［３４］ 上記［１］〜［３３］のいずれかに記載の分離方法が、該免疫グロブリン溶液のアフィニティクロマトグラフィー精製工程の後に用いられることを特徴とする分離方法。
［３５］ 該アフィニティクロマトグラフィーが、プロテインＡおよび／またはプロテインＡ誘導体を吸着剤とするアフィニティクロマトグラフィーであることを特徴とする上記［３４］に記載の分離方法。
［３６］ 該限外濾過膜が、中空糸であることを特徴とする上記［１］〜［３５］のいずれかに記載の分離方法。
［３７］ 下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上の手段を含む装置を用いて行う上記［１］〜［３６］のいずれかに記載の分離方法。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールできる手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段
［３８］ 上記［１］〜［３６］のいずれかに記載の分離方法に使用するモジュールおよび下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上の手段を含む装置。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールする手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールする手段
［３９］ 上記［１］〜［３７］のいずれかに記載の分離方法を行う分離工程と、分離工程で得られた免疫グロブリン透過液を濃縮用限外濾過膜で濃縮する濃縮工程が連続して行われることを特徴とする分離濃縮方法。
［４０］ 該濃縮用濾過限外膜の分画分子量が、１０００以上１０万未満であることを特徴とする上記［３９］に記載の分離濃縮方法。
［４１］ ［１］〜［３］および［６］〜［３７］のいずれかに記載の分離工程で透過する免疫グロブリン透過液の濃度が０．１〜１４９ｇ／Ｌであり、濃縮工程のクロスフロー濾過条件が、線速０．０１〜１００ｃｍ／秒、圧力０．０１〜０．５ＭＰａであることを特徴とする上記［３９］または［４０］に記載の分離濃縮方法。
［４２］ 上記［１］〜［３７］のいずれかに記載の分離工程で透過する免疫グロブリン透過液の濃度が０．１〜９９ｇ／Ｌであり、濃縮工程のクロスフロー濾過条件が、線速０．０１〜１００ｃｍ／秒、圧力０．０１〜０．５ＭＰａであることを特徴とする上記［３９］または［４０］に記載の分離濃縮方法。
［４３］ 限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上と、濃縮用限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（ホ）〜（チ）からなる手段の１つ以上を含む、上記［３９］〜［４２］のいずれかに記載の分離濃縮方法。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールできる手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段
（ホ）濃縮前の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（へ）濃縮後の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（ト）免疫グロブリン透過液の線速をコントロールできる手段
（チ）濃縮用限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段
［４４］ 上記［３９］〜［４２］のいずれかに記載の分離濃縮方法を行うための、限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上と、濃縮用限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（ホ）〜（チ）からなる手段の１つ以上を含む装置。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールできる手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段
（ホ）濃縮前の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（へ）濃縮後の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（ト）免疫グロブリン透過液の線速をコントロールできる手段
（チ）濃縮用限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段That is, the present invention
[1] An immunoglobulin solution containing at least an immunoglobulin monomer and an aggregate thereof using an ultrafiltration membrane having a fractional molecular weight of 100,000 or more and less than 500,000, and having an immunoglobulin concentration of 1 to 150 g A method of separating immunoglobulin monomers by cross-flow filtration of a solution that is / L.
[2] Using an ultrafiltration membrane having a molecular weight cut off of 100,000 or more and less than 500,000, a solution having an immunoglobulin concentration of 1 to 150 g / L is subjected to cross-flow filtration to produce an immunoglobulin monomer. And the method of separating immunoglobulin aggregates.
[3] The separation method according to [1] or [2], wherein the aggregate contains at least an immunoglobulin dimer.
[4] The separation method according to any one of [1] to [3], wherein the immunoglobulin concentration is 1 to 100 g / L.
[5] The separation method according to any one of [1] to [3], wherein the immunoglobulin concentration is 5 to 100 g / L.
[6] When the immunoglobulin concentration is 100, the crossflow filtration is performed while maintaining the change in the immunoglobulin concentration during the crossflow filtration at 50 to 200. The separation method according to any one of the above.
[7] The separation method according to [6], wherein crossflow filtration is performed while maintaining a change in the immunoglobulin concentration at 80 to 120.
[8] The separation method according to [6] or [7] above, wherein crossflow filtration is performed while maintaining the immunoglobulin concentration substantially constant.
[9] A separation method, wherein 50% or more of the immunoglobulin monomer is separated by the separation method according to any of [6] to [8] above.
[10] The above [1] to [1], wherein the immunoglobulin solution further contains at least one biological component selected from proteins, sugar chains, RNA, and DNA having a molecular weight of 300,000 or more and less than 1,000,000. [9] The separation method according to any one of [9].
[11] The separation method according to [10], wherein the immunoglobulin solution further contains at least one biological component selected from proteins having a molecular weight of 300,000 or more and less than 1,000,000.
[12] The separation method according to [11] above, wherein the protein is at least one selected from the group consisting of immunoglobulin aggregates, fibrinogen, and composite aggregates composed of immunoglobulin and protein A.
[13] The separation method according to any one of [1] to [12], wherein the immunoglobulin solution further contains a virus.
[14] The method according to [13] above, wherein the virus is a parvovirus.
[15] The separation method according to any one of [1] to [14], wherein the immunoglobulin is a monoclonal antibody.
[16] The ultrafiltration membrane is a polysulfone polymer, aromatic ether polymer, (meth) acrylic polymer, (meth) acrylonitrile polymer, fluorine polymer, olefin polymer, vinyl alcohol. The separation method according to any one of the above [1] to [15], comprising at least one polymer selected from the group consisting of a polymer based on cellulose and a cellulosic polymer.
[17] The separation method according to [16] above, wherein the polymer is a polysulfone polymer.
[18] The above-mentioned [17], wherein the polysulfone polymer is at least one or a mixture of two or more polysulfone polymers represented by the following formulas (5) to (7): Separation method.
[19] The separation method according to [17] or [18] above, wherein the polysulfone polymer is a polysulfone polymer hydrophilized with polyvinylpyrrolidone.
[20] The separation method as described in [16] above, wherein the polymer is an aromatic ether polymer.
[21] A block copolymer in which the aromatic ether polymer is at least one or two or more of the aromatic ether polymers represented by the following formula (8), and is composed of polystyrene and a hydrophilic polymer. The separation method according to the above [20], wherein the separation method is an aromatic ether polymer hydrophilized.
(R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 and R 6 are hydrogen, an organic functional group containing 1 to 6 carbon atoms, or an aprotic having 6 or less carbon atoms containing oxygen, nitrogen or silicon. The organic functional groups may be the same or different, and q in the structural formula represents the number of repeating units, and may be a copolymer containing two or more different repeating units.)
[22] The separation method according to [21], wherein the hydrophilic polymer is a polymer containing a polyethylene glycol polymer and / or a segment derived from a polyethylene glycol polymer.
[23] The separation method according to [1] to [22], wherein the immunoglobulin solution further contains a surfactant.
[24] The separation method according to [23], wherein the surfactant is a zwitterionic surfactant.
[25] The separation method according to [24], wherein the zwitterionic surfactant is selected from the group consisting of lysine, alanine, cysteine, glycine, serine, proline, arginine, and derivatives thereof.
[26] The separation method according to [25], wherein the zwitterionic surfactant is arginine and / or a derivative of arginine.
[27] The separation method according to [25], wherein the zwitterionic surfactant is lysine and / or a derivative of lysine.
[28] The separation method according to [23], wherein the surfactant is a nonionic surfactant.
[29] The separation method according to [28], wherein the nonionic surfactant is polyethylene glycol and / or a polyethylene glycol derivative.
[30] The separation method according to [29], wherein the polyethylene glycol and / or the polyethylene glycol derivative has a number average molecular weight of 50 to 30000 Da.
[31] The separation method according to any one of [1] to [30], wherein the immunoglobulin permeate is recycled to the immunoglobulin stock solution from the start of filtration to a set time. .
[32] The set time for recirculating the immunoglobulin permeate to the original immunoglobulin solution is set to the time when the ratio of the immunoglobulin dimer contained in the immunoglobulin permeate becomes 1% or less from the start of filtration. The separation method according to [31] above, wherein
[33] The set time for recirculating the immunoglobulin permeate to the original immunoglobulin solution is set to the time when the permeability ratio of immunoglobulin monomer to immunoglobulin dimer reaches 0.1 or less from the start of filtration. The separation method according to [31] above, wherein:
[34] A separation method, wherein the separation method according to any one of [1] to [33] is used after an affinity chromatography purification step of the immunoglobulin solution.
[35] The separation method according to [34], wherein the affinity chromatography is affinity chromatography using protein A and / or a protein A derivative as an adsorbent.
[36] The separation method according to any one of [1] to [35], wherein the ultrafiltration membrane is a hollow fiber.
[37] The separation method according to any one of [1] to [36], which is performed using an apparatus including one or more means selected from the following (a) to (d).
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane [38] A device comprising one or more means of the module comprising the module used in the separation method according to any one of [1] to [36] and means (i) to (d) below.
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane [39] Separation step for performing the separation method according to any one of [1] to [37], and concentration for concentrating the immunoglobulin permeate obtained in the separation step with an ultrafiltration membrane for concentration A separation and concentration method, wherein the steps are continuously performed.
[40] The separation and concentration method according to [39] above, wherein the molecular weight cut-off of the filtration ultrafiltration membrane for concentration is 1,000 or more and less than 100,000.
[41] The concentration of the immunoglobulin permeate that permeates in the separation step according to any one of [1] to [3] and [6] to [37] is 0.1 to 149 g / L, The separation and concentration method according to [39] or [40] above, wherein the flow filtration conditions are a linear velocity of 0.01 to 100 cm / sec and a pressure of 0.01 to 0.5 MPa.
[42] The concentration of the immunoglobulin permeate that permeates in the separation step according to any one of [1] to [37] is 0.1 to 99 g / L, and the crossflow filtration condition in the concentration step is linear velocity. The separation and concentration method according to [39] or [40] above, wherein the pressure is 0.01 to 100 cm / second and the pressure is 0.01 to 0.5 MPa.
[43] A module using an ultrafiltration membrane and one or more means comprising the following (a) to (d), and a module using an ultrafiltration membrane for concentration and the following (e) to (h) The separation and concentration method according to any one of [39] to [42] above, which comprises one or more means.
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane (E) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate before concentration (f) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate after concentration (g) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin permeate (H) Means capable of controlling the filtration pressure of the ultrafiltration membrane for concentration [44] A module using an ultrafiltration membrane for performing the separation and concentration method according to any one of [39] to [42], and From one or more of the following means (a) to (d), a module using an ultrafiltration membrane for concentration, and the following (e) to (h) An apparatus comprising one or more means.
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane (E) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate before concentration (f) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate after concentration (g) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin permeate (H) Means capable of controlling the filtration pressure of the ultrafiltration membrane for concentration

本発明の分離方法を実施することにより、免疫グロブリン１量体を８０％以上の透過率で透過させ、かつ、限外濾過膜を透過する免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比が０．２０以下となる分画性能で免疫グロブリン１量体を分離できる。
本発明は、特定の分画分子量を有する限外濾過膜を用いてクロスフロー濾過するだけであるので、クロマトグラフィーのような方法に比べてきわめて簡易な作業であり、大量の免疫グロブリンを処理できる。また、化学的処理方法とは異なり、免疫グロブリンの失活や変性を起こすこともない。さらに、公知の膜分離のように目詰まりを生じないので、免疫グロブリン１量体を高透過率で回収でき、かつ、免疫グロブリン２量体を効率よく除去することができる。By carrying out the separation method of the present invention, the permeability ratio between the immunoglobulin monomer and the dimer that allows the immunoglobulin monomer to permeate at 80% or more and permeates through the ultrafiltration membrane is obtained. An immunoglobulin monomer can be separated with a fractionation performance of 0.20 or less.
Since the present invention only requires cross-flow filtration using an ultrafiltration membrane having a specific molecular weight cut off, it is an extremely simple operation compared to a method such as chromatography and can process a large amount of immunoglobulin. . Unlike chemical treatment methods, immunoglobulins are not inactivated or denatured. Furthermore, since clogging does not occur as in known membrane separation, immunoglobulin monomer can be recovered with high permeability, and immunoglobulin dimer can be efficiently removed.

本発明のクロスフロー濾過装置を例示する図である。It is a figure which illustrates the crossflow filtration apparatus of this invention. 本発明のクロスフロー濾過装置を例示する図である。It is a figure which illustrates the crossflow filtration apparatus of this invention. 本発明のクロスフロー濾過方法を例示する図である。It is a figure which illustrates the cross flow filtration method of the present invention. 本発明のクロスフロー濾過・濃縮方法を例示する図である。It is a figure which illustrates the crossflow filtration and concentration method of this invention. デッドエンド濾過方法を例示する図である。It is a figure which illustrates a dead end filtration method. 免疫グロブリン濃度と、免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比の関係を例示する図である。It is a figure which illustrates the relationship between immunoglobulin concentration and the transmittance | permeability ratio of an immunoglobulin monomer and a dimer. 免疫グロブリン濃度と、処理量および免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比の関係を例示する図である。It is a figure which illustrates the relationship between the immunoglobulin concentration, the amount of treatment, and the transmittance ratio of immunoglobulin monomers and dimers. 限外濾過膜の分画分子量と、分画性能を例示する図である。It is a figure which illustrates the fractionation molecular weight of an ultrafiltration membrane, and fractionation performance. 濾過時間と、免疫グロブリン１量体透過率の関係を例示する図である。It is a figure which illustrates the relationship between filtration time and immunoglobulin monomer transmission. サンプリング時間と、免疫グロブリン２量体含有率の関係を例示する図である。It is a figure which illustrates the relationship between sampling time and immunoglobulin dimer content rate. サンプリング時間と、免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比の関係を例示する図である。It is a figure which illustrates the relationship between sampling time and the transmittance | permeability ratio of an immunoglobulin monomer and a dimer.

符号の説明Explanation of symbols

１ 希釈液用タンク
２ 送液ポンプ１
３ 送液ポンプ２
４ 免疫グロブリン元液タンク
５ 圧力計１
６ 圧力計２
７ 調整バルブ１
８ 限外濾過膜モジュール
９ 免疫グロブリン透過液タンク
１０ 流量計１
１１ 濃度コントローラー１
１２ 圧力・流量コントローラー１
１３ ＵＶフローセル
１４ 濃度コントローラー２
１５ 送液ポンプ３
１６ 圧力計３
１７ 圧力計４
１８ 圧力・流量コントローラー２
１９ 調整バルブ２
２０ 吸光度計
２１ 免疫グロブリン濃縮液タンク
２２ 流量計２
２３ 切換バルブ
２４ 濃縮用限外濾過膜モジュール
３１ 圧力調整機
３２ 圧力計４
３３ 免疫グロブリン元液タンク
３４ バルブ１
３５ バルブ２
３６ 限外濾過膜モジュール
３７ 透過液タンク1 Diluent tank 2 Liquid feed pump 1
3 Liquid feed pump 2
4 Immunoglobulin source solution tank 5 Pressure gauge 1
6 Pressure gauge 2
7 Adjustment valve 1
8 Ultrafiltration membrane module 9 Immunoglobulin permeate tank 10 Flow meter 1
11 Concentration controller 1
12 Pressure and flow controller 1
13 UV flow cell 14 Concentration controller 2
15 Liquid feed pump 3
16 Pressure gauge 3
17 Pressure gauge 4
18 Pressure / Flow Controller 2
19 Adjustment valve 2
20 Absorbance meter 21 Immunoglobulin concentrate tank 22 Flow meter 2
23 Switching valve 24 Ultrafiltration membrane module for concentration 31 Pressure regulator 32 Pressure gauge 4
33 Immunoglobulin source solution tank 34 Valve 1
35 Valve 2
36 Ultrafiltration membrane module 37 Permeate tank

以下、本発明に係わる限外濾過膜による免疫グロブリン１量体を高精度で分離する方法およびその限外濾過膜モジュール、クロスフロー濾過装置について具体的に説明する。   Hereinafter, a method for separating an immunoglobulin monomer by an ultrafiltration membrane according to the present invention with high accuracy, an ultrafiltration membrane module thereof, and a crossflow filtration device will be specifically described.

本発明に係わる免疫グロブリン（抗体）とは、最も広範な意味で使用され、具体的にはモノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多特異的抗体（ 例えば、二重特異性抗体）などが挙げられる。
本発明に係わる免疫グロブリン凝集体とは、免疫グロブリンが疎水結合などによって２量体以上となった状態の免疫グロブリンのことを示す。例えば、免疫グロブリン２量体、３量体、４量体、５量体などが挙げられる。The immunoglobulin (antibody) according to the present invention is used in the broadest sense, and specifically includes monoclonal antibodies (including full-length monoclonal antibodies), polyclonal antibodies, and multispecific antibodies (for example, bispecific antibodies). Etc.
The immunoglobulin aggregate according to the present invention refers to an immunoglobulin in a state in which the immunoglobulin becomes a dimer or more by a hydrophobic bond or the like. For example, immunoglobulin dimer, trimer, tetramer, pentamer and the like can be mentioned.

本発明に係わるモノクローナル抗体とは、実質的には同質な抗体の集団から入手された抗体をいう。すなわち、集団を構成する個々の抗体は、わずかに存在し得る天然に存在し得る変異を除いて同じである。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、単一の抗原部位に対して指向される。さらに、典型的には、異なる抗体を含む従来のポリクローナル抗体の調製とは対象的に、それぞれのモノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対する。修飾語「モノクローナル」は、実質的に同質の抗体集団から入手したという抗体の特徴を示す。   A monoclonal antibody according to the present invention refers to an antibody obtained from a population of substantially homogeneous antibodies. That is, the individual antibodies that make up the population are the same except for naturally occurring mutations that may be present in small numbers. Monoclonal antibodies are very specific and are directed against a single antigenic site. Furthermore, in contrast to conventional polyclonal antibody preparations that typically include different antibodies, each monoclonal antibody is directed against a single determinant on the antigen. The modifier “monoclonal” indicates the character of the antibody as being obtained from a substantially homogeneous population of antibodies.

本発明に係わる免疫グロブリン（抗体）の例としては、天然のヒト抗体、もしくは遺伝子組み換え法で調製されたヒト化抗体やヒト型抗体、完全ヒト化抗体、キメラ抗体、マウス抗体などが挙げられる。   Examples of immunoglobulins (antibodies) according to the present invention include natural human antibodies, humanized antibodies prepared by gene recombination methods, human-type antibodies, fully humanized antibodies, chimeric antibodies, mouse antibodies, and the like.

本発明に係わる抗体の具体例として、抗ＨＥＲ２レセプター抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＩＬ−８抗体、抗ＶＥＧＦ抗体、抗ＰＳＣＡ抗体、抗ＣＤ１１ａ抗体、抗ＩｇＥ抗体、抗Ａｐｏ−２レセプター抗体、抗ＴＮＦ−α抗体、抗組織因子（Ｔｉｓｓｕｅ Ｆａｃｔｏｒ）（ＴＦ）抗体、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３４抗体、抗ＣＤ４０抗体、抗ｔａｃ抗体、抗ＣＤ４抗体、抗ＣＤ５２抗体、抗Ｆｃレセプター抗体、抗癌胎児性抗原（ＣＥＡ）抗体、胸部上皮細胞に特異的な抗体、結腸癌種細胞に結合する抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ２２抗体、抗ＥｐＣＡＭ抗体、抗ＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ抗体、抗ＲＳＶ抗体、抗ＣＭＶ抗体、抗ＨＩＶ抗体、抗肝炎抗体、抗αｖβ３抗体、抗ヒト腎細胞癌腫抗体、抗ヒト１７−１Ａ抗体、抗ヒト結腸直腸腫瘍抗体、抗ヒト黒色腫抗体、抗ヒト扁平上皮癌腫抗体、抗ヒト白血病抗原（ＨＬＡ）抗体などが挙げられる。さらに具体的な例としては、Ｍｕｒａｍｏｍａｂ(製品名：Ｏｒｔｈｃｌｏｎｅ（ＯＫＴ３）、Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ（製品名：Ｒｉｔａｘａｎ）、Ｂａｓｉｌｉｘｉｍａｂ（製品名：Ｓｉｍｕｌｅｃｔ）、Ｄａｃｌｉｚｕｍａｂ（製品名：Ｚｅｎａｐａｘ）、Ｐａｌｉｖｉｚｕｍａｂ（製品名：Ｓｙｎａｇｉｓ）、Ｉｎｆｌｉｘｉｍａｂ（製品名：Ｒｅｍｉｃａｄｅ）、Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ ｚｏｇａｍｉｃｎ（製品名：Ｍｙｌｏｔａｒｇ）、Ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ（製品名：Ｍａｂｃａｍｐａｔｈ）、Ａｄａｌｉｍｕｍａｂ（製品名：Ｈｕｍｉｒａ）、Ｏｍａｌｉｚｕｍａｂ（製品名：Ｘｏｌａｉｒ）、Ｖｅｖａｃｉｚｕｍａｂ（製品名：Ａｖａｓｔｉｎ）、Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ（製品名：Ｅｒｂｉｔｕｘ）等が挙げられる。   Specific examples of antibodies according to the present invention include anti-HER2 receptor antibody, anti-CD20 antibody, anti-IL-8 antibody, anti-VEGF antibody, anti-PSCA antibody, anti-CD11a antibody, anti-IgE antibody, anti-Apo-2 receptor antibody, anti-TNF -Α antibody, anti-tissue factor (TF) antibody, anti-CD3 antibody, anti-CD25 antibody, anti-CD34 antibody, anti-CD40 antibody, anti-tac antibody, anti-CD4 antibody, anti-CD52 antibody, anti-Fc receptor antibody, anti-Fc receptor antibody Carcinoembryonic antigen (CEA) antibody, antibody specific for breast epithelial cells, antibody binding to colon cancer cell, anti-CD33 antibody, anti-CD22 antibody, anti-EpCAM antibody, anti-GpIIb / IIIa antibody, anti-RSV antibody, anti-RSV antibody CMV antibody, anti-HIV antibody, anti-hepatitis antibody, anti-αvβ3 antibody, anti-human renal cell carcinoma antibody, anti-human 17-1A antibody, anti-human tube Examples include colorectal tumor antibodies, anti-human melanoma antibodies, anti-human squamous cell carcinoma antibodies, and anti-human leukemia antigen (HLA) antibodies. More specific examples include Muramomab (product name: Orthoclone (OKT3), Rituximab (product name: Ritaxan), Basiliximab (product name: Simlect), Daclisumab (product name: Zenapax), Palivizumab (product name: S, g) Infliximab (product name: Remicade), Gemtuzumab zogamicn (product name: Mylotarg), Alemtuzumab (product name: Mabcampath), Adalimumab (product name: Humira), Omalizumab (product name: Xura, (Product name: Erbitux) and the like.

本発明に係わる免疫グロブリン（抗体）の分子標的（抗原）としては、例えば、ＣＤ蛋白質（ 例えば、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３４、およびＣＤ４０）； ＨＥＲレセプターファミリー（例えば、ＥＧＦレセプター、ＨＥＲ２，ＨＥＲ３またはＨＥＲ４レセプター）；細胞接着分子（例えば、ＬＦＡ−１，Ｍａｃ１，ｐ１５０，９５，ＶＬＡ−４，ＩＣＡＭ−１，ＶＣＡＭ およびａまたはｂのサブユニットを含むａｖ／ｂ３インテグリン（例えば、抗−ＣＤ１１ａ，抗ＣＤ１８，または、抗ＣＤ１１ｂ抗体）のメンバー；成長因子（例えば、ＶＥＧＦ）；ＩｇＥ，血液型抗原；ｆｌｋ２／ｆｌｔ３レセプター；肥満（ＯＢ）レセプター；ｍｐｌレセプター；ＣＴＬＡ−４；蛋白質Ｃなどが挙げられる。他の分子と結合した可溶性抗原またはフラグメントも分子標的となる。例えば、レセプターのような膜貫通分子の場合、レセプターの細胞外領域のフラグメントが免疫抗原となる。あるいは、膜貫通分子を発現する細胞が免疫抗原となる場合もある。   Examples of the molecular target (antigen) of the immunoglobulin (antibody) according to the present invention include, for example, CD protein (eg, CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD34, and CD40); HER receptor family (eg, EGF receptor, HER2, HER3 or HER4 receptors); cell adhesion molecules (eg LFA-1, Mac1, p150, 95, VLA-4, ICAM-1, VCAM and av / b3 integrins comprising a or b subunits (eg anti-antibodies) -Member of CD11a, anti-CD18, or anti-CD11b antibody); growth factor (eg, VEGF); IgE, blood group antigen; flk2 / flt3 receptor; obesity (OB) receptor; mpl receptor; CTLA-4; With other molecules The combined soluble antigen or fragment is also a molecular target, for example, in the case of a transmembrane molecule such as a receptor, a fragment in the extracellular region of the receptor is an immune antigen, or a cell expressing a transmembrane molecule is Sometimes it becomes.

免疫グロブリン溶液の濃度は、ケーク層の形成に大きな影響を与える。分画性能を発現させるためには、適切なケーク層の状態にする必要があり、短時間でケーク層が形成させるには、濃度の下限を考慮する必要がある。
本発明に係わる免疫グロブリン溶液の下限濃度は、他の条件よって異なるが、１ｇ／Ｌ以上、好ましくは５ｇ／Ｌ以上であれば分画性能を発現するケーク層が形成される。
一方、逆に高濃度であるほど厚いケーク層が形成され、免疫グロブリン１量体の透過率が低くなるので、膜閉塞が起こらない濃度の上限を考慮する必要がある。
本発明に係わる免疫グロブリン溶液の上限濃度は、他の条件よって異なるが、１５０ｇ／Ｌ以下、好ましくは１００ｇ／Ｌ以下、さらに好ましくは５０ｇ／Ｌ以下であれば急激な膜閉塞を引き起こさないで、免疫グロブリン１量体を透過させることができる。
以上のとおり、免疫グロブリン溶液の濃度は、適切なケーク層を形成させるためには、１ｇ／Ｌ〜１５０ｇ／Ｌ以下、好ましくは、１ｇ／Ｌ〜１００ｇ／Ｌ以下、より好ましくは５ｇ／Ｌ〜１００ｇ／Ｌ以下、さらに好ましくは５ｇ／Ｌ〜５０ｇ／Ｌ以下である。The concentration of the immunoglobulin solution has a great influence on the formation of the cake layer. In order to express the fractionation performance, it is necessary to make the state of an appropriate cake layer. In order to form the cake layer in a short time, it is necessary to consider the lower limit of the concentration.
The lower limit concentration of the immunoglobulin solution according to the present invention varies depending on other conditions, but if it is 1 g / L or more, preferably 5 g / L or more, a cake layer that exhibits fractionation performance is formed.
On the other hand, the higher the concentration, the thicker the cake layer is formed and the lower the permeability of the immunoglobulin monomer, so it is necessary to consider the upper limit of the concentration at which membrane clogging does not occur.
The upper limit concentration of the immunoglobulin solution according to the present invention varies depending on other conditions, but if it is 150 g / L or less, preferably 100 g / L or less, more preferably 50 g / L or less, a sudden membrane occlusion is not caused. It can permeate immunoglobulin monomers.
As described above, the concentration of the immunoglobulin solution is 1 g / L to 150 g / L or less, preferably 1 g / L to 100 g / L or less, more preferably 5 g / L to form an appropriate cake layer. 100 g / L or less, more preferably 5 g / L to 50 g / L or less.

濾過中の免疫グロブリン溶液の濃度変化は、免疫グロブリン１量体と免疫グロブリン２量体の分画性能や免疫グロブリン１量体の透過性能を維持させるために条件を変動させないで濾過することが好ましい。例えば、濾過中に免疫グロブリン溶液の濃度が徐々に高くなる場合、濾過閉塞が起こり、十分な透過量が得られなくなる場合がある。
一方、特許文献３や４のような透過量と同量の希釈液を添加する定容量クロスフロー濾過では、濾過が進むにつれて免疫グロブリン溶液濃度が低下する。この場合、濾過後半に透過する免疫グロブリン溶液の濃度が低下し、その結果、高収率で回収するためには長大な時間が必要となる。従って、短時間で高い分画性能と透過性能を達成するためには、免疫グロブリン溶液の濃度を一定濃度で濾過（定濃度濾過）することが好ましい。
濾過中の免疫グロブリン溶液の濃度変化は、濾過前の免疫グロブリン溶液の濃度を１００とした時、下限としては５０以上、好ましくは７０以上、より好ましくは８０以上が良く、上限としては２００以下、好ましくは１５０以下、より好ましくは１２０以下が良い。特に、免疫グロブリン溶液の濃度を実質一定に維持しながらクロスフロー濾過することが最も好ましい。ここで示す「濃度を実質一定に維持しながら」とは、「濃度を軽微な変動にとどめながら」と同意である。例えば、操作や装置で濃度をコントロール時に起こる軽微な濃度変動などが含まれる。
しかしながら、濾過後半で、免疫グロブリン溶液の残量が少なくなり、濾過が困難になった場合、膜中や装置配管に残存する免疫グロブリン１量体を回収するために、希釈液や緩衝溶液、水、生理食塩水を添加し、濾過を実施する場合は、濃度一定で濾過を行う必要はない。The concentration change of the immunoglobulin solution during filtration is preferably filtered without changing the conditions in order to maintain the fractionation performance of the immunoglobulin monomer and the immunoglobulin dimer and the permeation performance of the immunoglobulin monomer. . For example, when the concentration of the immunoglobulin solution gradually increases during filtration, filtration clogging may occur and a sufficient permeation amount may not be obtained.
On the other hand, in the constant volume cross flow filtration in which a diluent having the same amount as the permeation amount is added as in Patent Documents 3 and 4, the concentration of the immunoglobulin solution decreases as the filtration proceeds. In this case, the concentration of the immunoglobulin solution that permeates in the latter half of the filtration is reduced, and as a result, a long time is required for recovering in high yield. Therefore, in order to achieve high fractionation performance and permeation performance in a short time, it is preferable to filter the immunoglobulin solution at a constant concentration (constant concentration filtration).
The change in the concentration of the immunoglobulin solution during filtration is 50 or more, preferably 70 or more, more preferably 80 or more, and 200 or less as the upper limit when the concentration of the immunoglobulin solution before filtration is 100. Preferably it is 150 or less, more preferably 120 or less. In particular, crossflow filtration is most preferred while maintaining the concentration of the immunoglobulin solution substantially constant. Here, “while maintaining the concentration substantially constant” means “while maintaining the concentration with slight fluctuation”. For example, a slight concentration fluctuation that occurs when the concentration is controlled by an operation or an apparatus is included.
However, when the remaining amount of the immunoglobulin solution decreases in the latter half of the filtration, and the filtration becomes difficult, in order to recover the immunoglobulin monomer remaining in the membrane or in the apparatus piping, a diluent, buffer solution, water When adding physiological saline and carrying out filtration, it is not necessary to carry out filtration at a constant concentration.

本発明に係わる免疫グロブリン１量体の精製において、免疫グロブリン１量体の５０％以上が定濃度濾過で処理されることが好ましく、さらに好ましくは６０％以上、最も好ましくは７０％が定濃度濾過で処理されることが良い。たとえば、濾過開始から免疫グロブリン１量体を５０％処理した後、等容量濾過を最後まで行っても良いし、濾過開始から等容量濾過を行い、免疫グロブリン１量体を２０％処理した後、希釈液の供給を停止し、溶液濃度を濾過開始前の濃度まで戻した後、定濃度濾過を行っても良い。定濃度濾過と等容量濾過、希釈液無供給濾過を組み合わせ、免疫グロブリン１量体の５０％以上が定濃度濾過で処理されれば、その順序は何ら限定されない。これによって、短時間、且つ、高回収率で免疫グロブリン１量体を精製することができる。   In the purification of the immunoglobulin monomer according to the present invention, it is preferable that 50% or more of the immunoglobulin monomer is treated by constant concentration filtration, more preferably 60% or more, and most preferably 70% is constant concentration filtration. It is good to be processed with. For example, after 50% of the immunoglobulin monomer is processed from the start of filtration, it is possible to carry out equal volume filtration until the end, or after performing the equal volume filtration from the start of filtration and processing 20% of the immunoglobulin monomer, After the supply of the diluent is stopped and the solution concentration is returned to the concentration before the start of filtration, constant concentration filtration may be performed. As long as 50% or more of the immunoglobulin monomer is treated by constant concentration filtration by combining constant concentration filtration, equal volume filtration, and dilute-free filtration, the order is not limited. Thereby, an immunoglobulin monomer can be purified in a short time and with a high recovery rate.

免疫グロブリン以外の生体成分を含むと、高精度な免疫グロブリン１量体の分離が難しいと考えていたが、意外にも免疫グロブリン以外の生体成分を含んでいても本発明の分離方法を行うと、純度の高い免疫グロブリン１量体が得られることがわかった。
本発明に係わる免疫グロブリン溶液中には、免疫グロブリン以外の生体成分としては、蛋白質、糖鎖、ＲＮＡ、及び、ＤＮＡなどが挙げられる。具体的な例として、免疫グロブリン凝集体、フィブリノーゲン、免疫グロブリンとプロテインＡからなる複合凝集体などの血液凝固因子、細胞吸着因子、細胞成長因子、酵素、リボ蛋白、ホルモンおよびそれらの凝集物などが挙げられる。
本発明に係わる免疫グロブリン以外の生体成分の分子量の下限としては、３０万以上、好ましくは４０万以上、さらに好ましく５０万以上、上限としては、１００万未満、好ましくは９０万以下、さらに好ましく８０万以下であれば免疫グロブリン１量体と高精度に分離できる。３０万未満であれば、免疫グロブリン１量体を高精度に分離できない。一方、分子量が大きいほど高精度に分離できるが、分子量が高すぎると膜閉塞を起こしやすくなる。
以上のことは、本発明に係わる免疫グロブリン溶液には、免疫グロブリンの１量体とその凝集体（２量体、３量体、・・）及び分子量３０万以上１００万未満の生体成分を含む場合があり、この免疫グロブリン溶液であっても構わない。この場合、本発明は、免疫グロブリンの１量体とその凝集体（２量体、３量体、・・）及び分子量３０万以上１００万未満の生体成分を含む免疫グロブリン溶液から、免疫グロブリン１量体を分離することをいう。また前提として上記生体成分が含んでなく、またはほとんど含んでない免疫グロブリン溶液から、免疫グロブリン１量体を分離することも本発明では当然に意味している。Although it was thought that it was difficult to separate a highly accurate immunoglobulin monomer when a biological component other than immunoglobulin was included, the separation method of the present invention was performed even if a biological component other than immunoglobulin was unexpectedly included. It was found that a highly pure immunoglobulin monomer can be obtained.
Examples of biological components other than immunoglobulins in the immunoglobulin solution according to the present invention include proteins, sugar chains, RNA, and DNA. Specific examples include blood coagulation factors such as immunoglobulin aggregates, fibrinogen, complex aggregates composed of immunoglobulin and protein A, cell adsorption factors, cell growth factors, enzymes, riboproteins, hormones and aggregates thereof. Can be mentioned.
The lower limit of the molecular weight of biological components other than the immunoglobulin according to the present invention is 300,000 or more, preferably 400,000 or more, more preferably 500,000 or more, and the upper limit is less than 1 million, preferably 900,000 or less, more preferably 80. If it is 10,000 or less, it can be separated from immunoglobulin monomer with high accuracy. If it is less than 300,000, the immunoglobulin monomer cannot be separated with high accuracy. On the other hand, the larger the molecular weight, the higher the accuracy of separation, but if the molecular weight is too high, membrane clogging tends to occur.
As described above, the immunoglobulin solution according to the present invention contains an immunoglobulin monomer, an aggregate thereof (dimer, trimer,...), And a biological component having a molecular weight of 300,000 to less than 1,000,000. In some cases, this immunoglobulin solution may be used. In this case, the present invention relates to immunoglobulin 1 from an immunoglobulin solution containing an immunoglobulin monomer, an aggregate thereof (dimer, trimer,...), And a biological component having a molecular weight of 300,000 to less than 1,000,000. This refers to separating the mer. In addition, as a premise, the present invention naturally means that an immunoglobulin monomer is separated from an immunoglobulin solution that does not contain or hardly contains the biological component.

本発明に係わる免疫グロブリン溶液中には、ウイルスを含んでも良い。
本発明に係わるウイルスとしては、直径１８〜２４ｎｍ程度のパルボウイルスやポリオウイルス、直径約４０〜４５ｎｍ程度の日本脳炎ウイルスや肝炎ウイルス、直径８０〜１００ｎｍ程度のＨＩＶなどが挙げられる。最も除去する必要性があるものはパルボウイルスである。パルボウイルスは現在確認されているウイルスで最も小さいウイルスであるため、膜によるサイズ分画の場合、パルボウイルスが除去できれば、その他の大きいウイルスを除去できると考えられる。The immunoglobulin solution according to the present invention may contain a virus.
Examples of the virus according to the present invention include parvovirus and poliovirus having a diameter of about 18 to 24 nm, Japanese encephalitis virus and hepatitis virus having a diameter of about 40 to 45 nm, and HIV having a diameter of about 80 to 100 nm. The one that most needs to be removed is the parvovirus. Since parvovirus is the smallest virus that has been confirmed at present, in the case of size fractionation by membrane, if parvovirus can be removed, other large viruses can be removed.

ウイルスは、肝炎や後天性免疫不全症、日本脳炎、小児麻痺などの重篤な感染症を引き起こすため、ウイルス対数除去率（ＬＲＶ）が４以上であることが好ましい。ＬＲＶは、下記式（１）で計算する。
ＬＲＶ＝ｌｏｇ［（Ｎo×Ｖｏ）／（Ｎf×Ｖｆ）］ （１）
ＬＲＶ：ウイルス対数除去率
Ｎｏ：濾過前の免疫グロブリン元液中のウイルス感染価（ＴＩＣＤ５０／ｍＬ）
Ｎｆ：免疫グロブリン透過液中のウイルス感染価（ＴＩＣＤ５０／ｍＬ）
Ｖｏ：濾過前の免疫グロブリン元液の容量（ｍＬ）
Ｖｆ：免疫グロブリン透過液の容量（ｍＬ）Since viruses cause serious infections such as hepatitis, acquired immune deficiency, Japanese encephalitis, and childhood paralysis, the virus log removal rate (LRV) is preferably 4 or more. LRV is calculated by the following formula (1).
LRV = log [(No × Vo) / (Nf × Vf)] (1)
LRV: Virus logarithmic removal rate No: Virus infectivity titer in the original immunoglobulin solution before filtration (TICD 50 / mL)
Nf: virus infectivity in the immunoglobulin permeate (TICD 50 / mL)
Vo: Volume of the original immunoglobulin solution before filtration (mL)
Vf: Volume of immunoglobulin permeate (mL)

ウイルス除去性の評価に使用するパルボウイルスとしては、ヒトパルボウイルス（Ｂ１９）、ブタパルボウイルス、イヌパルボウイルス、ネコパルボウイルス、Ｍｉｎｕｔｅ ｏｆ ｍｉｃｅなどが挙げられる。これらのウイルスの大きさは直径１８〜２４ｎｍ程度であり、どれを用いても評価することができるが、簡便な感染性評価方法が確立されているブタパルボウイルスやイヌパルボウイルスを用いることが好ましい。   Examples of the parvovirus used for the evaluation of virus removability include human parvovirus (B19), porcine parvovirus, canine parvovirus, feline parvovirus, Minute of rice, and the like. These viruses have a diameter of about 18 to 24 nm and can be evaluated using any of them. However, it is preferable to use porcine parvovirus or canine parvovirus for which a simple infectivity evaluation method has been established. .

本発明に係わる「限外濾過膜」とは、免疫グロブリン１量体と少なくとも免疫グロブリン２量体を分離するために使用する膜のことである。
限外濾過膜としては、所望の分画分子量を有する膜を製造でき、免疫グロブリンが吸着しなければ何ら限定しないが、例えば、ポリスルホン系高分子膜、芳香族エーテル系高分子膜、フッ素系高分子膜、オレフィン系高分子膜、セルロース系膜、（メタ）アクリル系高分子膜、（メタ）アクリロニトリル系高分子膜、ビニルアルコール系高分子膜などが挙げられる。好ましくは、ポリスルホン系高分子膜、および、芳香族エーテル系高分子膜が良い。The “ultrafiltration membrane” according to the present invention is a membrane used for separating an immunoglobulin monomer and at least an immunoglobulin dimer.
As an ultrafiltration membrane, a membrane having a desired fractional molecular weight can be produced and is not limited at all unless immunoglobulin is adsorbed. For example, a polysulfone-based polymer membrane, an aromatic ether-based polymer membrane, a fluorine-based high-molecular membrane can be used. Examples thereof include a molecular film, an olefin polymer film, a cellulose film, a (meth) acrylic polymer film, a (meth) acrylonitrile polymer film, and a vinyl alcohol polymer film. A polysulfone polymer film and an aromatic ether polymer film are preferable.

本発明に係わるポリスルホン系高分子は特に限定されるものではなく、分子中にスルホン基を有する高分子は全て用いることができる。ポリスルホン系高分子の例としては、例えば下記式（９）で表されるポリスルホン、下記式（１０）で表されるポリエーテルスルホン、下記式（１１）で表されるポリアリールスルホン等が挙げられる。式中ｌおよびｍ、ｎは繰り返し単位を表す。
これらの高分子を二種以上、組み合わせて実施することも可能である。ポリスルホン系高分子は、必要に応じて高分子末端および／または主鎖中にエステル化、エーテル化、エポキシ化など各種変性を実施することができる。また、免疫グロブリンの静電気的な特性との相性から、アミノ基、モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、カルボキシル基、スルフォニル基、スルホン酸基などの化学構造を必要に応じて導入しても良い。The polysulfone polymer according to the present invention is not particularly limited, and all polymers having a sulfone group in the molecule can be used. Examples of the polysulfone-based polymer include polysulfone represented by the following formula (9), polyethersulfone represented by the following formula (10), polyarylsulfone represented by the following formula (11), and the like. . In the formula, l, m, and n represent repeating units.
It is also possible to carry out by combining two or more of these polymers. The polysulfone polymer can be subjected to various modifications such as esterification, etherification, and epoxidation in the polymer terminal and / or main chain as necessary. Moreover, chemical structures such as an amino group, a monoalkylamino group, a dialkylamino group, a carboxyl group, a sulfonyl group, and a sulfonic acid group may be introduced as necessary in view of compatibility with the electrostatic properties of immunoglobulins.

本発明に係るポリスルホン系高分子の重量平均分子量は、下限として５０００以上、好ましくは1万以上、さらに好ましくは２万以上のものを用いることが良く、上限としては１００万以下、好ましくは５０万以下、さらに好ましくは３０万以下のものを用いることが良い。この範囲内であれば、十分な強度と成膜性が得られる。   The weight average molecular weight of the polysulfone polymer according to the present invention is preferably 5,000 or more, preferably 10,000 or more, more preferably 20,000 or more as the lower limit, and the upper limit is 1,000,000 or less, preferably 500,000. In the following, it is more preferable to use those having 300,000 or less. Within this range, sufficient strength and film formability can be obtained.

本発明に係わるポリスルホン系高分子に親水性を付与する親水性高分子の種類は特に限定されるものではない。例えばポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、ポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどが挙げられる。中でも、ポリビニルピロリドンは、ポリスルホン系高分子との相溶性がよく、膜全体の親水性を高める上で特に好ましい。   The kind of the hydrophilic polymer that imparts hydrophilicity to the polysulfone polymer according to the present invention is not particularly limited. For example, polyvinyl pyrrolidone, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, polyvinyl alcohol, polyacrylamide, poly-N, N-dimethylacrylamide, poly-N-isopropylacrylamide, polyhydroxyacrylate, poly Examples include hydroxy methacrylate, carboxymethyl cellulose, starch, corn starch, polychitosan, and polychitin. Among these, polyvinyl pyrrolidone has good compatibility with the polysulfone-based polymer, and is particularly preferable for improving the hydrophilicity of the entire membrane.

本発明に係わるポリスルホン系高分子膜に親水性を付与する親水性高分子の重量平均分子量は、下限としては１，０００以上、好ましくは５，０００以上が良く、上限としては２００万以下、好ましくは１２０万以下が良い。例えばポリビニルピロリドンではＢＡＳＦ社より様々なグレードが市販されており、その重量平均分子量が９，０００のもの（Ｋ１７）、以下同様に４５，０００（Ｋ３０）、４５０，０００（Ｋ６０）、９００，０００（Ｋ８０）、１，２００，０００（Ｋ９０）を用いるのが好ましく、目的とする用途、特性、構造を得るために、それぞれ単独で用いてもよく、適宜２種以上を組み合わせて用いても良い。本発明においては、Ｋ９０を単独で用いるのが最も好ましい。   The weight average molecular weight of the hydrophilic polymer imparting hydrophilicity to the polysulfone polymer membrane according to the present invention is 1,000 or more, preferably 5,000 or more as a lower limit, and 2 million or less, preferably as an upper limit. Is preferably 1.2 million or less. For example, various grades of polyvinyl pyrrolidone are commercially available from BASF and have a weight average molecular weight of 9,000 (K17), and similarly 45,000 (K30), 450,000 (K60), 900,000. (K80) and 1,200,000 (K90) are preferably used, and in order to obtain the intended use, characteristics, and structure, each may be used alone or in combination of two or more. . In the present invention, it is most preferable to use K90 alone.

本発明に係わるポリスルホン系高分子膜の親水性高分子の含量は、免疫グロブリンが膜に吸着しなければ特に限定されるものではない。例えば、下限として０．１重量％以上、好ましくは０．３重量％以上、さらに好ましくは０．５重量％以上が良く、上限としては１０重量％含有以下、好ましくは８重量％以下、さらに好ましくは５重量％以下が良い。   The content of the hydrophilic polymer in the polysulfone polymer membrane according to the present invention is not particularly limited as long as the immunoglobulin is not adsorbed on the membrane. For example, the lower limit is 0.1% by weight or more, preferably 0.3% by weight or more, more preferably 0.5% by weight or more. The upper limit is 10% by weight or less, preferably 8% by weight or less, and more preferably. Is preferably 5% by weight or less.

本発明に係るポリスルホン系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cutoff of the polysulfone-based polymer membrane according to the present invention is only required to be able to sufficiently separate the immunoglobulin monomer and dimer, and is 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more, The upper limit should be set to less than 500,000, preferably 450,000 or less, and more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), polyethylene glycol (PEG), dextran and the like. , Dead-end filtration is performed, and the molecular weight is calculated as the molecular weight at which the rejection is 90% from the relationship between the molecular weight and the rejection.

本発明に係わるポリスルホン系高分子膜を製造する方法は何ら限定しないが、例えば湿式成膜法が挙げられる。湿式成膜法とは膜材料を良溶媒に溶解した膜原液と、膜原液中の良溶媒とは混和可能だが膜材料とは相溶しない他の溶媒からなる凝固液とを接触させることで、接触表面から濃度誘起による相分離を発生させて、膜を得る方法である。   The method for producing the polysulfone-based polymer membrane according to the present invention is not limited in any way, and examples thereof include a wet film-forming method. The wet film formation method is a method in which a membrane stock solution obtained by dissolving a membrane material in a good solvent is brought into contact with a coagulation liquid composed of another solvent that is miscible with the good solvent in the membrane stock solution but is not compatible with the membrane material. In this method, concentration-induced phase separation is generated from the contact surface to obtain a membrane.

本発明に係わる高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液は、目的の構造および性能を有するポリスルホン系高分子を製造できれば何ら限定はしないが、例えば、膜原液全体を１００重量％とした場合、ポリスルホン系高分子の濃度範囲としては下限として１重量％以上、好ましくは２重量％以上、特に好ましくは３重量％以上である。また上限としては４５重量％以下、好ましくは３５重量％以下、特に好ましくは２５重量％以下で均一に溶解した溶液が好適に使用される。親水性高分子は、下限として０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、上限として２０重量％以下、好ましくは１０重量％以下で、均一に溶解した溶液が好適に使用される。また、膜原液の温度は、下限として０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上、上限として膜原液中の良溶媒沸点以下が好適に使用される。この温度条件下であれば、膜原液として好ましい膜への加工を行うのに好適な粘度を得ることができる。   The membrane stock solution used in the wet film forming method for obtaining the polymer membrane according to the present invention is not limited as long as a polysulfone polymer having the desired structure and performance can be produced. For example, the entire membrane stock solution is 100% by weight. In this case, the lower limit of the polysulfone polymer concentration range is 1% by weight or more, preferably 2% by weight or more, and particularly preferably 3% by weight or more. Moreover, as an upper limit, the solution which melt | dissolved uniformly in 45 weight% or less, Preferably it is 35 weight% or less, Most preferably, it is 25 weight% or less is used suitably. The hydrophilic polymer has a lower limit of 0.1% by weight or more, preferably 0.5% by weight or more, and an upper limit of 20% by weight or less, preferably 10% by weight or less, and a uniformly dissolved solution is preferably used. . In addition, the lower limit of the temperature of the membrane stock solution is preferably 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher, and the upper limit is a good solvent boiling point or lower in the membrane stock solution. If it is this temperature condition, the viscosity suitable for processing into a film | membrane preferable as a film | membrane stock solution can be obtained.

本発明に係わるポリスルホン系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる良溶媒とは２０℃の１００ｇ純水に１０ｇ以上溶解可能であり、かつ膜材料のポリスルホン系高分子を５重量％以上溶解するものが好ましく、更に好ましくは水に混和可能なものであれば何ら限定しないが、具体的にはＮ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ−ブチロラクトンなどが挙げられる。これらは２種以上組み合わせて使用できる。   The good solvent used in the wet film-forming method for obtaining the polysulfone polymer film according to the present invention can dissolve 10 g or more in 100 g pure water at 20 ° C., and dissolves 5% by weight or more of the polysulfone polymer of the membrane material. However, there is no limitation as long as it is miscible with water. Specifically, N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide And γ-butyrolactone. These can be used in combination of two or more.

本発明に係わるポリスルホン系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液としては、膜原液と接触したとき濃度誘起相分離を引き起こし、接触面から膜を形成することができる物質であれば何ら限定しない。例えば、純水、モノアルコール系溶媒、ポリオール系溶媒又はこれら２種以上の混合液などが好適に使用される。モノアルコール系溶の例としては、メタノール、エタノール、プロパノールなどが挙げられる。また、ポリオール系溶媒の例としては、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，２−ブタンジオール、１，４−ブタンジオールなどが挙げられる。凝固液中にポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリアクリルアミド、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリイタコン酸、ポリフマル酸、ポリシトラコン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルホン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルホン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどの水溶性高分子を添加することも可能である。添加する水溶性高分子の分子量や添加量にも依存するが、これらを添加することにより濾過性能を向上させることが可能である。   The coagulating liquid used in the wet film forming method for obtaining the polysulfone-based polymer film according to the present invention is a substance that can cause concentration-induced phase separation when in contact with the membrane stock solution and can form a film from the contact surface. There is no limitation. For example, pure water, a monoalcohol solvent, a polyol solvent, or a mixture of two or more of these is preferably used. Examples of monoalcohol-based solvents include methanol, ethanol, propanol and the like. Examples of the polyol solvent include ethylene glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, tetraethylene glycol, glycerin, propylene glycol, 1,2-butanediol, 1,4-butanediol, and the like. Polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, polyacrylamide, polyvinyl pyrrolidone, polyhydroxy acrylate, polyhydroxy methacrylate, polyacrylic acid, polymethacrylic acid, polyitaconic acid in the coagulation liquid Water-soluble polymers such as polyfumaric acid, polycitraconic acid, poly-p-styrenesulfonic acid, sodium poly-p-styrenesulfonate, N, N-dimethylacrylamide, carboxymethylcellulose, starch, corn starch, polychitosan, and polychitin It is also possible to add. Although it depends on the molecular weight and the amount of the water-soluble polymer to be added, the filtration performance can be improved by adding these.

また、凝固液中に、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ―ブチロラクトンなどの良溶媒を含有させることも可能である。特に、良溶媒を非溶媒に含有させた凝固液を使用する場合、その組成は、膜原液の組成、膜原液と凝固液との接触温度などで異なるが、概ね、凝固液全体を１００重量％とした場合、良溶媒の重量％として９０重量％以下が好ましい。この範囲であれば、膜を形成するのに必要十分な濃度誘起相分離を十分に達成できる。   The coagulation liquid may contain a good solvent such as N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, and γ-butyrolactone. In particular, when using a coagulation liquid containing a good solvent in a non-solvent, the composition differs depending on the composition of the membrane stock solution, the contact temperature between the membrane stock solution and the coagulation liquid, etc. In this case, 90% by weight or less is preferable as the weight% of the good solvent. Within this range, concentration-induced phase separation necessary and sufficient for forming a film can be sufficiently achieved.

本発明に係わる湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度であり、本発明の中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。成膜温度の下限としては０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。なお、平膜においては凝固液温度で決まる。   The film forming temperature in the wet film forming method according to the present invention is a temperature at which the membrane stock solution and the coagulating liquid are brought into contact with each other to cause concentration-induced phase separation. It depends on the temperature. The lower limit of the film formation temperature is 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. For hollow fiber membranes, it depends on the temperature of the double nozzle. In a flat membrane, it is determined by the coagulation liquid temperature.

本発明に係わるポリスルホン系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液、凝固液、特に中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液（以後、内部凝固液）は均一溶解後に、溶存気体を除去することが望ましい。溶存気体を除去することで、溶存気体の発泡による膜の欠陥を著しく改善することできる。また、溶存気体のなかでも特に酸素を除くことで、高い温度下での膜加工による材料への酸化反応が減少する。膜原液および凝固液、内部凝固液に気体が溶存していない場合は、この工程を省略しても良い。   The membrane stock solution used in the wet film formation method for obtaining the polysulfone-based polymer membrane according to the present invention, the coagulation solution, especially the coagulation solution that passes through the inside of the yarn when producing the hollow fiber membrane (hereinafter referred to as the internal coagulation solution) is dissolved after uniform dissolution. It is desirable to remove the gas. By removing the dissolved gas, film defects due to foaming of the dissolved gas can be remarkably improved. Further, by removing oxygen from the dissolved gas, the oxidation reaction to the material due to film processing at a high temperature is reduced. This step may be omitted when no gas is dissolved in the membrane stock solution, the coagulation solution, and the internal coagulation solution.

本発明に係わる湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、二重紡口から出た膜原液と内部凝固液による凝固をより促進するため、紡口直下に槽（以後、凝固槽）を設け、凝固槽中に満たされた凝固液（以後、外部凝固液）と接触させることができる。   When producing a hollow fiber membrane by the wet film-forming method according to the present invention, in order to further promote the coagulation by the membrane stock solution and the internal coagulation solution discharged from the double spinning nozzle, a tank (hereinafter referred to as a coagulation tank) is provided immediately below the spinning nozzle. It can be provided and brought into contact with a coagulating liquid (hereinafter referred to as an external coagulating liquid) filled in the coagulating tank.

本発明の湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、中空糸膜の断面構造を均一構造のみならず、様々な不均一構造まで、自由に構造制御するために紡口から外部凝固液面までの距離（以後、空走距離）および紡糸口から外部凝固液面までの空間の温度と湿度を調整することができる。空間の温度と湿度を調整できれば何ら限定しないが、例えば、空走距離の下限としては０．００１ｍ以上、好ましくは０．００５ｍ以上、特に好ましくは０．０１ｍ以上、上限として２．０ｍ以下、好ましくは１．５ｍ以下、特に好ましくは１．２ｍ以下である。また紡糸口から外部凝固面までの空間における温度は、下限として１０℃以上、好ましくは２０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。湿度は温度との兼ね合いで変化するが、下限として０％以上、好ましくは１０％以上、特に好ましくは３０％以上であり、上限としては１００％以下である。   When producing a hollow fiber membrane by the wet film-forming method of the present invention, the cross-sectional structure of the hollow fiber membrane is not only a uniform structure but also various non-uniform structures. And the temperature and humidity of the space from the spinneret to the external coagulation liquid surface can be adjusted. Although there is no limitation as long as the temperature and humidity of the space can be adjusted, for example, the lower limit of the free running distance is 0.001 m or more, preferably 0.005 m or more, particularly preferably 0.01 m or more, and the upper limit is 2.0 m or less, preferably Is 1.5 m or less, particularly preferably 1.2 m or less. The temperature in the space from the spinneret to the external solidification surface is 10 ° C. or higher, preferably 20 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher as the lower limit. The humidity varies depending on the temperature, but the lower limit is 0% or more, preferably 10% or more, particularly preferably 30% or more, and the upper limit is 100% or less.

本発明に係わる湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合の巻取り速度は、製造条件である各種因子、紡口の形状、紡糸原液の組成、内部凝固液および外部凝固液の組成、原液および各凝固液の温度等で変化し得るが、概ね３００ｍ／時間から９０００ｍ／時間の速度が選択される。   The winding speed in the case of producing a hollow fiber membrane by the wet film-forming method according to the present invention is as follows: various factors as production conditions, the shape of the nozzle, the composition of the spinning stock solution, the composition of the internal coagulating liquid and the external coagulating liquid, and the stock solution Although the speed may vary depending on the temperature of each coagulating liquid, a speed of approximately 300 m / hour to 9000 m / hour is selected.

本発明に係わる湿式成膜法においては、凝固液による凝固後、膜の強度を強めるため脱溶媒槽に浸漬して脱溶媒を促進することができる。脱溶媒液には、凝固液による濃度誘起相分離後、残存している溶媒を除去できる溶媒であり、膜を溶解しないものであればいずれの溶媒でも用いることが可能である。一般には、水、エタノール等を用いることが多い。   In the wet film-forming method according to the present invention, after the solidification with the coagulating liquid, the solvent removal can be promoted by immersing in a solvent removal tank in order to increase the strength of the film. The solvent removal liquid is a solvent that can remove the remaining solvent after concentration-induced phase separation by the coagulation liquid, and any solvent that does not dissolve the membrane can be used. In general, water, ethanol or the like is often used.

湿式成膜法により得られた未乾燥の限外濾過膜は、乾燥中の膜破断が生じない温度であれば何ら限定はしないが、例えば、乾燥温度は、下限としては２０℃以上、好ましくは３０℃以上、より好ましくは５０℃以上であり、上限としては溶融温度以下、好ましくは１５０℃以下、より好ましくは１４０℃以下である。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１時間以上から４８時間までが選択される。   The undried ultrafiltration membrane obtained by the wet film formation method is not limited as long as the temperature does not cause membrane breakage during drying. For example, the drying temperature is 20 ° C. or more as a lower limit, preferably It is 30 ° C. or higher, more preferably 50 ° C. or higher, and the upper limit is the melting temperature or lower, preferably 150 ° C. or lower, more preferably 140 ° C. or lower. The time required for drying is determined by the relationship with the drying temperature, but is generally selected from 0.01 hours to 48 hours.

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子膜は特に限定されるものではなく、芳香族エーテル系高分子膜の例としては、下記式（１２）で表されるものが挙げられる。
（Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は水素、炭素数１以上６以下を含む有機官能基、または、酸素、窒素または珪素を含有する炭素数６以下の非プロトン性有機官能基であり、それぞれ同一であっても、異なっても構わない。構造式中のｑは繰り返し単位数である。異なる繰り返し単位を２成分以上含む共重合体でも構わない。）
本発明に係わる芳香族エーテル系高分子の末端のフェノール性水酸基は、免疫グロブリン溶液中で安定して存在可能であるｐＨを維持するために、必要に応じてエステル化、エーテル化、エポキシ化など各種変性を実施することができる。また、免疫グロブリンの静電気的な特性との相性から、高分子末端にアミノ基、モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、カルボキシル基、スルフォニル基、スルホン酸基などの化学構造を必要に応じて導入できる。The aromatic ether polymer film according to the present invention is not particularly limited, and examples of the aromatic ether polymer film include those represented by the following formula (12).
(R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 and R 6 are hydrogen, an organic functional group containing 1 to 6 carbon atoms, or an aprotic having 6 or less carbon atoms containing oxygen, nitrogen or silicon. The organic functional groups may be the same or different, and q in the structural formula represents the number of repeating units, and may be a copolymer containing two or more different repeating units.)
The terminal phenolic hydroxyl group of the aromatic ether polymer according to the present invention may be esterified, etherified, epoxidized, etc. as necessary in order to maintain a pH that can stably exist in an immunoglobulin solution. Various modifications can be performed. Moreover, chemical structure such as amino group, monoalkylamino group, dialkylamino group, carboxyl group, sulfonyl group, sulfonic acid group, etc. can be introduced at the end of polymer due to its compatibility with the electrostatic properties of immunoglobulin. .

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子膜は、主として芳香族エーテル系高分子からなるものであるが、芳香族エーテル系高分子の特性を損なわない範囲で他の高分子量物質や添加物を含有していてもよい。これらの高分子を二種以上、組み合わせて実施することも可能である。例えば、ポリスチレンやその誘導体を含有しても良い。   The aromatic ether polymer film according to the present invention is mainly composed of an aromatic ether polymer, but contains other high molecular weight substances and additives as long as the characteristics of the aromatic ether polymer are not impaired. You may do it. It is also possible to carry out by combining two or more of these polymers. For example, polystyrene or a derivative thereof may be contained.

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子の重量平均分子量は、下限としては５０００以上、好ましくは1万以上、特に好ましくは２万以上が良く、上限として１００万以下、好ましくは５０万以下、特に好ましくは３０万以下が良い。この範囲内であれば、十分な強度と成膜性が得られる。   The lower limit of the weight average molecular weight of the aromatic ether polymer according to the present invention is 5000 or more, preferably 10,000 or more, particularly preferably 20,000 or more, and the upper limit is 1,000,000 or less, preferably 500,000 or less. Preferably it is 300,000 or less. Within this range, sufficient strength and film formability can be obtained.

本発明においては、芳香族エーテル系高分子とともに、膜の孔の大きさをコントロールするためと、親水性を付与するために、親水性高分子が用いられることが好ましい。親水化によって分離処理に供される免疫グロブリン溶液と本発明の芳香族エーテル系高分子からなる限外濾過膜との接触を良好にするものである。
本発明に係わる親水性高分子としては、親水性を付与できるものであれば何ら限定しないが。免疫グロブリンとの電気的な相互作用を低減させるために、荷電構造を含まないノニオン性であることが望ましい。In the present invention, it is preferable to use a hydrophilic polymer together with the aromatic ether polymer in order to control the pore size of the membrane and to impart hydrophilicity. It improves the contact between the immunoglobulin solution subjected to separation treatment by hydrophilization and the ultrafiltration membrane made of the aromatic ether polymer of the present invention.
The hydrophilic polymer according to the present invention is not limited as long as it can impart hydrophilicity. In order to reduce the electrical interaction with the immunoglobulin, it is desirable to be nonionic without a charged structure.

本発明に係わる親水性高分子の分子量は、いかなる高分子化合物であっても構わない。
親水性高分子としては、例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、ポリ−Ｎ−イソプロピルアクリルアミド、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどの親水性高分子化合物が例示される。また、これらの物質を親水性セグメントと疎水性セグメント含有する界面活性剤やブロック共重合体およびグラフト共重合体も親水性高分子として十分活用できる。例えば、ポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体などが好ましい。The molecular weight of the hydrophilic polymer according to the present invention may be any polymer compound.
Examples of the hydrophilic polymer include polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, polyvinyl alcohol, polyacrylamide, poly-N, N-dimethylacrylamide, poly-N-isopropylacrylamide, Examples thereof include hydrophilic polymer compounds such as polyvinylpyrrolidone, polyhydroxyacrylate, polyhydroxymethacrylate, carboxymethylcellulose, starch, corn starch, polychitosan, and polychitin. In addition, surfactants, block copolymers, and graft copolymers containing these substances as hydrophilic segments and hydrophobic segments can be sufficiently utilized as hydrophilic polymers. For example, a polystyrene-polyethylene glycol block copolymer is preferable.

本発明に係わるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体は、高い親水性を有するポリエチレングリコールを親水性セグメントに有するため、親水性高分子として有効に活用できる。また、これらは二種以上を組み合わせて使用することもできる。この中でも好適に利用できるのは、ポリエチレングリコール、およびポリエチレングリコールを親水性セグメントとして含有するブロック共重合体およびグラフト共重合体であり、その中も特にポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体が芳香族エーテル系高分子膜の親水性を向上させる親水性高分子として好適に利用できる。   Since the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer according to the present invention has polyethylene glycol having high hydrophilicity in the hydrophilic segment, it can be effectively used as a hydrophilic polymer. Moreover, these can also be used in combination of 2 or more types. Among these, polyethylene glycol and block copolymers and graft copolymers containing polyethylene glycol as hydrophilic segments can be preferably used. Among them, polystyrene-polyethylene glycol block copolymers are particularly aromatic ethers. It can be suitably used as a hydrophilic polymer that improves the hydrophilicity of the polymer film.

本発明に係わる親水性高分子の分子量は、製造方法およびその条件によって適宜選ばれる。例えば、成膜方法が湿式成膜法で溶媒として非ハロゲン系水溶性有機溶媒を用いる場合、耐溶剤性の高い芳香族エーテル系高分子の溶解性は極めて低い。そのため、親水性高分子を膜原液にブレンドする場合、均一に溶解した膜原液を得るためには親水性高分子の分子量および添加量を適切に選択する必要がある。十分な添加量の親水性高分子を用いるためには、親水性高分子の分子量は、例えば、数平均分子量は、３００以上、１００，０００以下であることが好ましい。この領域であれば、成膜に使用する良溶媒に十分溶解可能である。より好ましい下限は、４００以上、特に好ましい下限は、５００以上であり、上限としてより好ましくは７０，０００以下、特に好ましくは、５０，０００以下である。   The molecular weight of the hydrophilic polymer according to the present invention is appropriately selected depending on the production method and its conditions. For example, when the film formation method is a wet film formation method and a non-halogen water-soluble organic solvent is used as the solvent, the solubility of the aromatic ether polymer having high solvent resistance is extremely low. Therefore, when the hydrophilic polymer is blended with the membrane stock solution, it is necessary to appropriately select the molecular weight and the addition amount of the hydrophilic polymer in order to obtain a uniformly dissolved membrane stock solution. In order to use a sufficient amount of hydrophilic polymer, the number average molecular weight of the hydrophilic polymer is preferably 300 or more and 100,000 or less, for example. If it is this area | region, it can melt | dissolve enough in the good solvent used for film-forming. A more preferable lower limit is 400 or more, and a particularly preferable lower limit is 500 or more. More preferably, the upper limit is 70,000 or less, and particularly preferably 50,000 or less.

本発明に係わる親水性高分子が疎水性セグメントと親水性セグメントからなる化合物の場合、その親水性高分子の親水性セグメントの数平均分子量は、３００以上、１００，０００以下であることが好ましい。この領域であれば、成膜に使用する良溶媒に十分溶解可能である。より好ましい下限は、４００以上、特に好ましい下限は、５００以上であり、上限としてより好ましくは７０，０００以下、特に好ましくは、５０，０００以下である。
本発明に係わるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体は、ポリスチレン系高分子由来のセグメントとポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントから成るブロック共重合体である。When the hydrophilic polymer according to the present invention is a compound comprising a hydrophobic segment and a hydrophilic segment, the number average molecular weight of the hydrophilic segment of the hydrophilic polymer is preferably 300 or more and 100,000 or less. If it is this area | region, it can melt | dissolve enough in the good solvent used for film-forming. A more preferable lower limit is 400 or more, and a particularly preferable lower limit is 500 or more. More preferably, the upper limit is 70,000 or less, and particularly preferably 50,000 or less.
The polystyrene-polyethylene glycol block copolymer according to the present invention is a block copolymer comprising a segment derived from a polystyrene polymer and a segment derived from a polyethylene glycol polymer.

本発明において用いられるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の該ポリスチレン系高分子由来のセグメントを形成するポリスチレン系高分子としては、下記式（１３）に示す繰り返し単位からなるポリスチレン系高分子が好ましい。
（Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４は水素、フッ素を除くハロゲン原子、炭素数１以上６以下を含む有機官能基、または、酸素、窒素または珪素を含有する炭素数６以下の官能基であり、それぞれ同一であっても、異なっても構わない。構造式中のｓは繰り返し単位数である。構造範囲内で異なる繰り返し単位を２成分以上含む共重合体でも構わない。）As the polystyrene polymer forming the segment derived from the polystyrene polymer of the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer used in the present invention, a polystyrene polymer comprising a repeating unit represented by the following formula (13) is preferable.
(R 7 , R 8 , R 9 , R 10 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 are hydrogen, a halogen atom excluding fluorine, an organic functional group containing 1 to 6 carbon atoms, or oxygen, nitrogen Or a silicon-containing functional group having 6 or less carbon atoms, which may be the same or different, and s in the structural formula is the number of repeating units. It may be a copolymer including the above.)

本発明に係わるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の該ポリスチレン系高分子由来のセグメントの数平均分子量は、３００以上、１，０００，０００以下であることが必要である。この領域であれば、成膜に使用する良溶媒に十分溶解可能であると同時に、水溶液に対して、溶出性が低減できる。より好ましい下限は、５００以上、特に好ましい下限は、７００以上であり、上限としてより好ましくは５００，０００以下、特に好ましい上限は、３００，０００以下である。   The number average molecular weight of the segment derived from the polystyrene-based polymer of the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer according to the present invention needs to be 300 or more and 1,000,000 or less. If it is this area | region, it can fully melt | dissolve in the good solvent used for film-forming, and it can reduce the elution property with respect to aqueous solution. The more preferable lower limit is 500 or more, and the particularly preferable lower limit is 700 or more. The upper limit is more preferably 500,000 or less, and the particularly preferable upper limit is 300,000 or less.

本発明において用いられるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の該ポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントを形成するポリエチレングリコール系高分子とは、下記式（１４）および／または（１５）に示す繰り返し単位からなるポリエチレングリコール系高分子が好ましい。
（Ｒ１５は、炭素数３以上、３０未満の有機官能基である。特に親水性が大きく低下させることがなければ、Ｒ１５にエーテル基、エステル基、水酸基、ケトン基、カルボン酸基を含有しても構わない。ｔおよびｕは繰り返し単位数である。）The polyethylene glycol polymer forming a segment derived from the polyethylene glycol polymer of the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer used in the present invention is a repeating unit represented by the following formula (14) and / or (15). A polyethylene glycol polymer is preferable.
(R 15 is an organic functional group having 3 or more carbon atoms and less than 30. Unless the hydrophilicity is greatly lowered, R 15 contains an ether group, an ester group, a hydroxyl group, a ketone group, or a carboxylic acid group. (T and u are the number of repeating units.)

本発明において用いられるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の該ポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントの数平均分子量は、例えば３００以上、１００，０００以下であることが必要である。この領域であれば、成膜に使用する良溶媒に十分溶解可能であると当時に、十分な親水性が得られる。より好ましい下限は、４００以上、特に好ましい下限は、５００以上であり、上限としてより好ましくは７０，０００以下、特に好ましくは、５０，０００以下である。   The number average molecular weight of the segment derived from the polyethylene glycol polymer of the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer used in the present invention needs to be, for example, 300 or more and 100,000 or less. If it is this area | region, sufficient hydrophilic property will be obtained at that time if it can melt | dissolve sufficiently in the good solvent used for film-forming. A more preferable lower limit is 400 or more, and a particularly preferable lower limit is 500 or more. More preferably, the upper limit is 70,000 or less, and particularly preferably 50,000 or less.

本発明に係わるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の該ポリスチレン系高分子由来のセグメントと該ポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントの組成比としては、該ポリスチレン系高分子由来のセグメントが全ポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の１０重量％以上、９９重量％以下であることが必要である。この組成比においては、十分な親水性を発現でき、かつ、溶出性が抑えられる。より好ましい下限値は、２０重量％以上、特に好ましい下限値は、３０重量％以上であり、より好ましい上限値は９８重量％以下、特に好ましい上限値は、９７重量％以下である。   As the composition ratio of the segment derived from the polystyrene polymer of the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer according to the present invention and the segment derived from the polyethylene glycol polymer, the segment derived from the polystyrene polymer is all polystyrene-polyethylene. It is necessary that the content is 10% by weight or more and 99% by weight or less of the glycol block copolymer. In this composition ratio, sufficient hydrophilicity can be expressed and elution is suppressed. A more preferred lower limit is 20% by weight or more, a particularly preferred lower limit is 30% by weight or more, a more preferred upper limit is 98% by weight or less, and a particularly preferred upper limit is 97% by weight or less.

本発明に係わるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体のブロック構造は、２つの該セグメントから構成されるジブロック共重合体、３つの該セグメントから構成されるトリブロック共重合体、４つ以上の該セグメントから構成されるマルチブロック共重合体であっても構わない。また、これら２種以上のブロック共重合体の混合物であっても構わない。構成される各該セグメントの数平均分子量は同一であっても異なっても構わない。   The block structure of the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer according to the present invention includes a diblock copolymer composed of two segments, a triblock copolymer composed of three segments, four or more It may be a multi-block copolymer composed of segments. Further, it may be a mixture of these two or more block copolymers. The number average molecular weights of the respective configured segments may be the same or different.

本発明に係わるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の該ポリスチレン系高分子由来のセグメントと該ポリエチレングリコール系高分子由来のセグメント間は、高分子末端部分で直接化学的に結合される必要がある。製造するために、必要であれば、該ポリスチレン系高分子由来のセグメントと該ポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントを接続するためのスペーサーとして低分子化合物および／または有機官能基を利用してもよい。低分子化合物および／または有機官能基の数平均分子量が５００以下の場合、該ポリスチレン系高分子由来のセグメントと該ポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントの効果を低下させること無く発現できる。具体的には、反応性官能基を有するラジカル重合開始剤を用いてスチレンを重合した後にポリエチレングリコールを縮合した際に形成されるポリスチレン−ポリエチレングリコール間の低分子化合物などが挙げられる。   In the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer according to the present invention, the segment derived from the polystyrene polymer and the segment derived from the polyethylene glycol polymer need to be directly chemically bonded at the polymer terminal portion. For production, if necessary, a low molecular compound and / or an organic functional group may be used as a spacer for connecting the segment derived from the polystyrene polymer and the segment derived from the polyethylene glycol polymer. . When the number average molecular weight of the low molecular compound and / or the organic functional group is 500 or less, the low molecular weight compound and / or the organic functional group can be expressed without reducing the effect of the segment derived from the polystyrene polymer and the segment derived from the polyethylene glycol polymer. Specific examples include low molecular weight compounds between polystyrene and polyethylene glycol formed when polyethylene glycol is condensed after polymerizing styrene using a radical polymerization initiator having a reactive functional group.

本発明に係わるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体を製造する方法の一例としては、反応性官能基を有するラジカル重合開始剤を用いる方法がある。具体的には、カルボン酸基を有するアゾ系ラジカル重合開始剤を用い、カルボン酸基を酸塩化物基に化学的に変換した後、スチレンをラジカル重合することで末端に酸塩化物基を有するポリスチレンが得られる。次いで、ポリエチレングリコールと縮合することによってポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体を得ることができる（高分子論文集、１９７６年、第３３巻、Ｐ１３１）。ポリエチレングリコールユニット含有高分子アゾ重合開始剤を用いて、スチレンをラジカル重合することによってもポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体を得ることができる。また、別の合成方法例として、リビング重合を利用する方法が挙げられる。具体的には、ニトロキシド系化合物によるリビングラジカル重合を用いてスチレンの重合を行い、高分子末端にニトロキシド化合物が結合した高分子を得られる。加水分解により高分子末端をヒドロキシル基に変換し、ポリエチレングリコールとのカップリング反応によりポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体を得ることができる（Ｐｏｌｙｍｅｒ、１９９８年、第３９巻、第4号、Ｐ９１１）。   An example of a method for producing the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer according to the present invention is a method using a radical polymerization initiator having a reactive functional group. Specifically, an azo radical polymerization initiator having a carboxylic acid group is used, and after chemically converting the carboxylic acid group to an acid chloride group, the terminal has an acid chloride group by radical polymerization of styrene. Polystyrene is obtained. Subsequently, a polystyrene-polyethylene glycol block copolymer can be obtained by condensation with polyethylene glycol (Polymer Papers, 1976, Vol. 33, P131). A polystyrene-polyethylene glycol block copolymer can also be obtained by radical polymerization of styrene using a polyethylene glycol unit-containing polymer azo polymerization initiator. Another example of the synthesis method is a method using living polymerization. Specifically, styrene is polymerized using living radical polymerization with a nitroxide compound, and a polymer in which the nitroxide compound is bonded to the polymer terminal can be obtained. A polymer end can be converted into a hydroxyl group by hydrolysis, and a polystyrene-polyethylene glycol block copolymer can be obtained by a coupling reaction with polyethylene glycol (Polymer, 1998, Vol. 39, No. 4, P911). .

本発明における親水性高分子を用いて芳香族エーテル系高分子からなる限外濾過膜を親水化する方法は、例えば、成膜時に親水性高分子をあらかじめ混合するブレンド法、親水性高分子を含む溶液に膜を浸漬した後、乾燥させて親水性高分子を残留させる塗布法、膜表面に親水性のアクリル系モノマー、メタクリル系モノマー、アクリルアミド系モノマー等をグラフト重合する方法などが挙げられる。これらの方法を２つ以上組み合わせて行うことも可能である。芳香族エーテル系高分子に化学的変性を加えないブレンド法または塗布法が好ましく、製造面においては一段階の工程で親水化処理を行うことができるブレンド法が特に好ましい。   The method of hydrophilizing an ultrafiltration membrane composed of an aromatic ether polymer using a hydrophilic polymer in the present invention is, for example, a blend method in which a hydrophilic polymer is mixed in advance at the time of film formation, Examples of the method include a coating method in which a film is immersed in a solution, and then dried to leave a hydrophilic polymer, and a method in which a hydrophilic acrylic monomer, a methacrylic monomer, an acrylamide monomer, or the like is graft-polymerized on the film surface. It is also possible to perform a combination of two or more of these methods. A blending method or a coating method in which the aromatic ether polymer is not chemically modified is preferable, and a blending method capable of performing a hydrophilization treatment in a single step is particularly preferable in terms of production.

本発明に係る芳香族エーテル系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やＰＥＧ、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cut off of the aromatic ether polymer membrane according to the present invention is not limited as long as it can sufficiently separate the immunoglobulin monomer and dimer, and is 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more. The upper limit should be set to less than 500,000, preferably 450,000 or less, and more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined by dead-end filtration using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), PEG, dextran and the like. The molecular weight is calculated as the molecular weight at which the blocking rate is 90% from the relationship between the molecular weight and the blocking rate.

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子膜を製造する方法は何ら限定しないが、例えば湿式成膜法が挙げられる。湿式成膜法とは膜材料を良溶媒に溶解した膜原液と、膜原液中の良溶媒とは混和可能だが膜材料とは相溶しない他の溶媒からなる凝固液とを接触させることで、接触表面から濃度誘起による相分離を発生させて、膜を得る方法である。   The method for producing the aromatic ether polymer film according to the present invention is not limited in any way, and examples thereof include a wet film forming method. The wet film formation method is a method in which a membrane stock solution obtained by dissolving a membrane material in a good solvent is brought into contact with a coagulation liquid composed of another solvent that is miscible with the good solvent in the membrane stock solution but is not compatible with the membrane material. In this method, concentration-induced phase separation is generated from the contact surface to obtain a membrane.

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる良溶媒は、成膜条件において膜材料である芳香族エーテル系高分子を安定に５重量％以上溶解するものであれば如何なる溶媒を使用することができる。ただし、環境面およびコストの点から非ハロゲン系水溶性有機溶媒を用いることが好ましい。本発明における水溶性有機溶媒とは、２０℃の１００ｇ純水に１０ｇ以上溶解可能である溶媒を示し、さらに好ましくは、水に混和可能なものである。具体的にはＮ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ−ブチロラクトンなどが挙げられる。これらは２種以上組み合わせて使用できる。   The good solvent used in the wet film formation method for obtaining the aromatic ether polymer film according to the present invention is one that can stably dissolve 5% by weight or more of the aromatic ether polymer as the film material under the film formation conditions. Any solvent can be used. However, it is preferable to use a non-halogen water-soluble organic solvent from the viewpoint of environment and cost. The water-soluble organic solvent in the present invention refers to a solvent that can be dissolved in 10 g or more in 100 g pure water at 20 ° C., and more preferably is miscible with water. Specific examples include N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, and γ-butyrolactone. These can be used in combination of two or more.

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液の一例としては、良溶媒に親水性高分子を下限として０．１重量％以上、好ましくは０．５重量％以上、特に好ましくは１重量％以上、上限として４５重量％以下、好ましくは３５重量％以下、特に好ましくは２５重量％以下で、均一に溶解した溶液が好適に使用される。
また、膜原液全体を１００重量％とした場合、芳香族エーテル系高分子の使用範囲としては下限として１重量％以上、好ましくは２重量％以上、特に好ましくは３重量％以上である。また上限としては４５重量％以下、好ましくは３５重量％以下、特に好ましくは２５重量％以下で均一に溶解した溶液が好適に使用される。As an example of the membrane stock solution used in the wet film-forming method for obtaining the aromatic ether polymer membrane according to the present invention, 0.1 wt% or more, preferably 0.5 wt. %, Particularly preferably 1% by weight or more, and an upper limit of 45% by weight or less, preferably 35% by weight or less, particularly preferably 25% by weight or less, and a uniformly dissolved solution is preferably used.
Further, when the total membrane stock solution is 100% by weight, the lower limit of the use range of the aromatic ether polymer is 1% by weight or more, preferably 2% by weight or more, and particularly preferably 3% by weight or more. Moreover, as an upper limit, the solution which melt | dissolved uniformly in 45 weight% or less, Preferably it is 35 weight% or less, Most preferably, it is 25 weight% or less is used suitably.

また、膜原液の温度は、下限として２５℃以上、好ましくは６５℃以上、特に好ましくは８０℃以上、上限として膜原液中の良溶媒沸点以下が好適に使用される。この温度条件下にすることにより、芳香族エーテル系高分子の溶解性を高めることができ、さらに膜原液として好ましい膜への加工を行うのに好適な粘度を得ることができる。   In addition, the lower limit of the temperature of the membrane stock solution is preferably 25 ° C. or higher, preferably 65 ° C. or higher, particularly preferably 80 ° C. or higher, and the upper limit is a good solvent boiling point or lower in the membrane stock solution. By using this temperature condition, the solubility of the aromatic ether polymer can be increased, and a viscosity suitable for processing into a film preferable as a film stock solution can be obtained.

本発明に係わる親水性芳香族エーテル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液としては、膜原液と接触したとき濃度誘起相分離を引き起こし、接触面から膜を形成することができる物質をいう。具体的には純水、モノアルコール系溶媒、下記式（１６）で表されるポリオール系溶媒又はこれら２種以上の混合液などが好適に使用される。
（Ｒ１６は炭素数１以上、２０以下を含む有機官能基、または、酸素原子を１つ以上と炭素数１以上、２０以下とを含む構造であり、Ｒ１６に水酸基、エーテル結合、エステル基、ケトン基、カルボン酸などを１つ以上含んでいてもよい。）
式（１６）に表されるポリオール系溶媒の一例として、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，２−ブタンジオール、１，４−ブタンジオールなどが挙げられる。The coagulating liquid used in the wet film forming method for obtaining the hydrophilic aromatic ether polymer film according to the present invention can cause concentration-induced phase separation when in contact with the film stock solution, and can form a film from the contact surface. A substance. Specifically, pure water, a monoalcohol solvent, a polyol solvent represented by the following formula (16), or a mixture of two or more of these are preferably used.
(R 16 is an organic functional group containing 1 or more and 20 or less carbon atoms, or a structure containing one or more oxygen atoms and 1 or more and 20 or less carbon atoms, and R 16 is a hydroxyl group, an ether bond, or an ester group. , One or more ketone groups, carboxylic acids and the like.
Examples of the polyol solvent represented by the formula (16) include ethylene glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, tetraethylene glycol, glycerin, propylene glycol, 1,2-butanediol, 1,4-butanediol, and the like. .

芳香族エーテル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液の粘度によって透水性能を制御することが可能である。凝固液の粘度を高くすることにより、凝固液の原液への浸透が緩やかになり、結果、製造した膜の透水性能が向上することを見出した。高い透水性能を得るためには、凝固液の粘度が２０℃で３ｃｐ以上であることが好ましい。より好ましくは、５ｃｐ以上である。凝固液の粘度を高めるためにポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリアクリルアミド、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリイタコン酸、ポリフマル酸、ポリシトラコン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどの水溶性高分子を添加することが可能である。また、上記ポリオール系溶媒などの２０℃で５ｃｐ以上の高粘性溶媒を含有させることも好適である。   The water permeation performance can be controlled by the viscosity of the coagulation liquid used in the wet film forming method for obtaining the aromatic ether polymer film. It has been found that by increasing the viscosity of the coagulation liquid, the permeation of the coagulation liquid into the stock solution becomes gradual, and as a result, the water permeability of the produced membrane is improved. In order to obtain high water permeability, the viscosity of the coagulation liquid is preferably 3 cp or more at 20 ° C. More preferably, it is 5 cp or more. Polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, polyacrylamide, polyvinyl pyrrolidone, polyhydroxy acrylate, polyhydroxy methacrylate, polyacrylic acid, polymethacrylic acid to increase the viscosity of the coagulation liquid Water, such as acid, polyitaconic acid, polyfumaric acid, polycitraconic acid, poly-p-styrene sulfonic acid, sodium poly-p-styrene sulfonate, N, N-dimethylacrylamide, carboxymethyl cellulose, starch, corn starch, polychitosan, polychitin It is possible to add a functional polymer. It is also preferable to contain a high viscosity solvent of 5 cp or more at 20 ° C. such as the above-mentioned polyol solvent.

本発明に係わる凝固液の粘度は、ガラス製毛細管粘度計を用いて測定した値であり、測定方法としては、２０℃恒温水槽中で恒温としたガラス製毛管粘度計に凝固液を入れ、３０分以上放置後、恒温に達したとして測定を行うことにより動粘度が得られる。この得られた動粘度の値より下記式（２）により凝固液の粘度を得ることができる。なお、ガラス製毛細管粘度計としては、柴田科学株式会社製のウベローテ粘度計などを用いることができる。
ν＝η／ρ （２）
（ν：動粘度（ｍｍ２／ｓ）、η：粘度（ｃｐ）、ρ：密度（ｇ／ｃｍ３））The viscosity of the coagulating liquid according to the present invention is a value measured using a glass capillary viscometer. As a measuring method, the coagulating liquid is put into a glass capillary viscometer made constant in a 20 ° C. constant temperature water bath, and 30 The kinematic viscosity can be obtained by allowing the sample to stand for more than a minute and then measuring that it has reached a constant temperature. From the obtained kinematic viscosity value, the viscosity of the coagulation liquid can be obtained by the following formula (2). In addition, as a glass capillary viscometer, the Uberote viscometer by Shibata Kagaku Co., Ltd. etc. can be used.
ν = η / ρ (2)
(Ν: kinematic viscosity (mm 2 / s), η: viscosity (cp), ρ: density (g / cm 3 ))

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液中に、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ―ブチロラクトンなどの良溶媒を含有させることも可能である。特に、良溶媒を非溶媒に含有させた凝固液を使用する場合、その組成は、膜原液の組成、膜原液と凝固液との接触温度などで異なるが、概ね、凝固液全体を１００重量％とした場合、良溶媒の重量％として下限０重量％以上、上限９０重量％以下が好ましい。この範囲であれば、膜を形成するのに必要十分な濃度誘起相分離を十分に達成できる。   In a coagulation liquid used in a wet film forming method for obtaining an aromatic ether polymer film according to the present invention, N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, It is also possible to include a good solvent such as γ-butyrolactone. In particular, when using a coagulation liquid containing a good solvent in a non-solvent, the composition differs depending on the composition of the membrane stock solution, the contact temperature between the membrane stock solution and the coagulation liquid, etc. In this case, the lower limit of 0% by weight and the upper limit of 90% by weight are preferable as the weight% of the good solvent. Within this range, concentration-induced phase separation necessary and sufficient for forming a film can be sufficiently achieved.

本発明に係わる湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度であり、本発明の中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。なお、平膜においては、凝固液温度で決まる。成膜温度の下限としては２５℃以上、好ましくは８０℃以上、特に好ましくは９０℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。特に成膜温度８０℃以上、各沸点から１０℃以上低い温度の範囲内で膜原液と凝固液が接触した場合において、特に高強度の膜を得ることできる。   The film forming temperature in the wet film forming method according to the present invention is a temperature at which the membrane stock solution and the coagulating liquid are brought into contact with each other to cause concentration-induced phase separation. It depends on the temperature. In the case of a flat membrane, it is determined by the coagulation liquid temperature. The lower limit of the film formation temperature is 25 ° C. or higher, preferably 80 ° C. or higher, particularly preferably 90 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. In particular, when the film stock solution and the coagulating liquid are in contact with each other within a film forming temperature of 80 ° C. or higher and a temperature range of 10 ° C. or lower from each boiling point, a particularly high strength film can be obtained.

本発明に係わる芳香族エーテル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液、凝固液、特に中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液（以後、内部凝固液）は均一溶解後に、溶存気体を除去することが望ましい。溶存気体を除去することで、溶存気体の発泡による膜の欠陥を著しく改善することできる。また、溶存気体のなかでも特に酸素を除くことで、高い温度下での膜加工による材料への酸化反応が減少する。   The membrane stock solution used in the wet film forming method for obtaining the aromatic ether polymer membrane according to the present invention, the coagulating solution, especially the coagulating solution passing through the inside of the yarn during the production of the hollow fiber membrane (hereinafter referred to as the internal coagulating solution) is uniformly dissolved. It is desirable to remove dissolved gas. By removing the dissolved gas, film defects due to foaming of the dissolved gas can be remarkably improved. Further, by removing oxygen from the dissolved gas, the oxidation reaction to the material due to film processing at a high temperature is reduced.

本発明に係わる湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、二重紡口から出た膜原液と内部凝固液による凝固を、より促進するため、紡口直下に槽（以後、凝固槽）を設け、凝固槽中に満たされた凝固液（以後、外部凝固液）と接触させることができる。   When producing a hollow fiber membrane by the wet film-forming method according to the present invention, in order to further accelerate the coagulation by the membrane stock solution and the internal coagulation liquid that has come out of the double spinning nozzle, a tank (hereinafter referred to as a coagulation tank) immediately below the spinning nozzle. And can be brought into contact with a coagulating liquid (hereinafter referred to as an external coagulating liquid) filled in the coagulating tank.

本発明に係わる湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、中空糸膜の断面構造を均一構造のみならず、様々な不均一構造まで、自由に構造制御するために紡口から外部凝固液面までの距離（以後、空走距離）および紡糸口から外部凝固液面までの空間の温度と湿度を調整することができる。
本発明に係わる湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、空走距離の下限としては０．０１ｍ以上、好ましくは０．０５ｍ以上、特に好ましくは０．１ｍ以上、上限として２．０ｍ以下、好ましくは１．５ｍ以下、特に好ましくは１．２ｍ以下である。また紡糸口から外部凝固面までの空間における温度は、下限として２０℃以上、好ましくは５０℃以上、特に好ましくは８０℃以上である。湿度は温度との兼ね合いで変化するが、下限として０％以上、好ましくは２５％以上、特に好ましくは５０％以上であり、上限としては１００％以下である。When producing a hollow fiber membrane by the wet film-forming method according to the present invention, the cross-sectional structure of the hollow fiber membrane is not only a uniform structure but also various non-uniform structures. The distance to the surface (hereinafter referred to as idle running distance) and the temperature and humidity of the space from the spinneret to the external coagulation liquid surface can be adjusted.
When producing a hollow fiber membrane by the wet film-forming method according to the present invention, the lower limit of the free running distance is 0.01 m or more, preferably 0.05 m or more, particularly preferably 0.1 m or more, and the upper limit is 2.0 m or less. , Preferably 1.5 m or less, particularly preferably 1.2 m or less. The temperature in the space from the spinneret to the external solidification surface is 20 ° C. or higher, preferably 50 ° C. or higher, particularly preferably 80 ° C. or higher, as the lower limit. The humidity varies depending on the temperature, but the lower limit is 0% or more, preferably 25% or more, particularly preferably 50% or more, and the upper limit is 100% or less.

本発明に係わる湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、巻取り速度は製造条件である各種因子、紡口の形状、紡糸原液の組成、内部凝固液および外部凝固液の組成、原液および各凝固液の温度等で変化し得るが、概ね６００ｍ／時間から９０００ｍ／時間の速度が選択される。   When the hollow fiber membrane is produced by the wet film-forming method according to the present invention, the winding speed is a factor of production conditions, the shape of the nozzle, the composition of the spinning stock solution, the composition of the internal and external coagulating solutions, the stock solution and Although the speed may vary depending on the temperature of each coagulation liquid, a speed of approximately 600 m / hour to 9000 m / hour is selected.

本発明に係わる湿式成膜法を用いることで、膜として供されるのに十分な強度、伸度を有した芳香族エーテル系高分子膜を得ることができる。また本発明の湿式成膜法においては濃度誘起相分離を利用することで、温度誘起相分離を利用する溶融成膜法では得ることが困難な、傾斜構造を有する多孔膜構造が容易に製造可能であり、得られる本発明の膜に高い透水性能を付与することが可能である。   By using the wet film-forming method according to the present invention, an aromatic ether polymer film having sufficient strength and elongation to be used as a film can be obtained. In addition, by utilizing concentration-induced phase separation in the wet film-forming method of the present invention, it is possible to easily manufacture a porous film structure having an inclined structure, which is difficult to obtain by a melt film-forming method using temperature-induced phase separation. Thus, it is possible to impart high water permeability to the obtained membrane of the present invention.

本発明に係わる湿式成膜法においては、凝固液による凝固後、膜の強度を強めるため脱溶媒槽に浸漬して脱溶媒を促進することができる。脱溶媒液には、凝固液による濃度誘起相分離後、残存している溶媒を除去できる溶媒であり、膜を溶解しないものであればいずれの溶媒でも用いることが可能である。一般には、水、エタノール等を用いることが多い。   In the wet film-forming method according to the present invention, after the solidification with the coagulating liquid, the solvent removal can be promoted by immersing in a solvent removal tank in order to increase the strength of the film. The solvent removal liquid is a solvent that can remove the remaining solvent after concentration-induced phase separation by the coagulation liquid, and any solvent that does not dissolve the membrane can be used. In general, water, ethanol or the like is often used.

本発明に係わる湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度である。即ち、膜原液の温度、凝固液の温度、中空糸膜であれば二重紡口の温度、平膜であれば膜形成をサポートする金属プレート等の温度により決まる。成膜温度の下限としては２０℃以上、好ましくは２５℃以上、特に好ましくは３０℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。特に成膜温度８０℃以上、各沸点から１０℃以上低い温度の範囲内で膜原液と凝固液が接触した場合において、特に高強度の膜を得ることできる。   The film forming temperature in the wet film forming method according to the present invention is a temperature at which the membrane stock solution and the coagulating liquid are brought into contact with each other to cause concentration-induced phase separation. That is, it depends on the temperature of the membrane stock solution, the temperature of the coagulation solution, the temperature of the double spinning nozzle if it is a hollow fiber membrane, and the temperature of a metal plate that supports membrane formation if it is a flat membrane. The lower limit of the film formation temperature is 20 ° C. or higher, preferably 25 ° C. or higher, particularly preferably 30 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. In particular, when the film stock solution and the coagulating liquid are in contact with each other within a film forming temperature of 80 ° C. or higher and a temperature range of 10 ° C. or lower from each boiling point, a particularly high strength film can be obtained.

湿式成膜法により得られた未乾燥の芳香族エーテル系高分子膜は、乾燥中の膜破断が生じない温度、例えば、２０℃以上から芳香族エーテル系高分子の溶融温度以下の温度範囲内で乾燥を行う。好ましい乾燥温度としては５０℃以上、１５０℃以下、更に好ましくは６０℃以上、１４０℃以下、特に好ましくは７０℃以上、１３０℃以下である。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１時間以上から４８時間までが選択される。   The undried aromatic ether polymer film obtained by the wet film formation method has a temperature at which film breakage during drying does not occur, for example, within a temperature range of 20 ° C. or more to the melting temperature of the aromatic ether polymer or less. Dry with. A preferable drying temperature is 50 ° C. or higher and 150 ° C. or lower, more preferably 60 ° C. or higher and 140 ° C. or lower, and particularly preferably 70 ° C. or higher and 130 ° C. or lower. The time required for drying is determined by the relationship with the drying temperature, but is generally selected from 0.01 hours to 48 hours.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜は特に限定されるものではなく、（メタ）アクリル系高分子の例としては、下記式（１７）で表されるものが挙げられる。
（式中、Ｒ１７およびＲ１８は炭素数１〜１４のアルキル基またはアラルキル基を表す。アルキル基の水素原子またはアラルキル基の水素原子は炭素数１〜１０のアルコキシ基によって置換されていてもよい。式中ｖおよびｗは繰り返し単位を表す。）
その中でも、ポリ（メタ）アクリル酸やポリ（メタ）アクリル酸エステルなど用いることができる。好ましくはポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリル酸メチル、ポリアクリル酸エチル、ポリメタアクリル酸メチル、ポリメタクリル酸エチルおよびこれら２つ以上組み合わせた共重合体が良い。必要に応じて高分子末端および／または主鎖中にエステル化、エーテル化、エポキシ化など各種変性を実施することができる。また、免疫グロブリンの静電気的な特性との相性から、アミノ基、モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、カルボキシル基、スルフォニル基、スルホン酸基などの化学構造を必要に応じて導入しても良い。The (meth) acrylic polymer film according to the present invention is not particularly limited, and examples of the (meth) acrylic polymer include those represented by the following formula (17).
(In the formula, R 17 and R 18 represent an alkyl group or aralkyl group having 1 to 14 carbon atoms. The hydrogen atom of the alkyl group or the hydrogen atom of the aralkyl group may be substituted by an alkoxy group having 1 to 10 carbon atoms. (Wherein v and w represent repeating units)
Among them, poly (meth) acrylic acid and poly (meth) acrylic acid ester can be used. Preferred are polyacrylic acid, polymethacrylic acid, polymethyl acrylate, polyethyl acrylate, polymethyl methacrylate, polyethyl methacrylate, and a copolymer of two or more thereof. Various modifications such as esterification, etherification, and epoxidation can be performed on the polymer terminal and / or main chain as necessary. Moreover, chemical structures such as an amino group, a monoalkylamino group, a dialkylamino group, a carboxyl group, a sulfonyl group, and a sulfonic acid group may be introduced as necessary in view of compatibility with the electrostatic properties of immunoglobulins.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜は、主としてポリ（メタ）アクリル酸エステルからなるものであるが、ポリ（メタ）アクリル酸エステルの特性を損なわない範囲で他の高分子量物質や添加物を含有していてもよい。これらの高分子を二種以上、組み合わせて実施することも可能である。   The (meth) acrylic polymer film according to the present invention is mainly composed of poly (meth) acrylic acid ester, but other high molecular weight substances and additives are added within the range that does not impair the properties of poly (meth) acrylic acid ester. You may contain the thing. It is also possible to carry out by combining two or more of these polymers.

本発明に係る（メタ）アクリル系高分子の重量平均分子量は、下限としては５０００以上、好ましくは１万以上、特に好ましくは２万以上が良く、上限として１００万以下、好ましくは５０万以下、特に好ましくは３０万以下が良い。この範囲内であれば、十分な強度と成膜性が得られる。   The weight average molecular weight of the (meth) acrylic polymer according to the present invention is 5000 or more, preferably 10,000 or more, particularly preferably 20,000 or more as a lower limit, and 1 million or less, preferably 500,000 or less as an upper limit. Particularly preferred is 300,000 or less. Within this range, sufficient strength and film formability can be obtained.

本発明においては、（メタ）アクリル系高分子とともに、膜の孔の大きさをコントロールするためと、親水性を付与するために、親水性高分子が用いられることが好ましい。親水性高分子としては、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリビニルアルコール、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリ−Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、ポリ−Ｎ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどが挙げられる。中でも、ポリビニルピロリドンは、（メタ）アクリル系高分子との相溶性がよく、膜全体の親水性を高める上で特に好ましい。   In the present invention, it is preferable to use a hydrophilic polymer together with the (meth) acrylic polymer in order to control the pore size of the membrane and to impart hydrophilicity. Examples of the hydrophilic polymer include polyvinyl pyrrolidone, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, polyvinyl alcohol, poly (meth) acrylamide, poly-N, N-dimethyl (meth) acrylamide, Examples thereof include poly-N-isopropyl (meth) acrylamide, polyhydroxy acrylate, polyhydroxy methacrylate, carboxymethyl cellulose, starch, corn starch, polychitosan, and polychitin. Among them, polyvinyl pyrrolidone is particularly preferable for improving the hydrophilicity of the entire film because of its good compatibility with (meth) acrylic polymers.

本発明で係わる（メタ）アクリル系高分子膜に親水性を付与する親水性高分子の重量平均分子量は下限としては１，０００以上、好ましくは５，０００以上が良く、上限として２００万以下、好ましくは１００万以下、特に好ましくは５０万以下が良い。例えばポリビニルピロリドンではＢＡＳＦ社より様々なグレードが市販されており、その重量平均分子量が９，０００のもの（Ｋ１７）、以下同様に４５，０００（Ｋ３０）、４５０，０００（Ｋ６０）、９００，０００（Ｋ８０）、１，２００，０００（Ｋ９０）を用いるのが好ましく、目的とする用途、特性、構造を得るために、それぞれ単独で用いてもよく、適宜２種以上を組み合わせて用いても良い。   The weight average molecular weight of the hydrophilic polymer imparting hydrophilicity to the (meth) acrylic polymer film according to the present invention is 1,000 or more, preferably 5,000 or more as the lower limit, and 2 million or less as the upper limit. Preferably it is 1 million or less, and particularly preferably 500,000 or less. For example, various grades of polyvinyl pyrrolidone are commercially available from BASF and have a weight average molecular weight of 9,000 (K17), and similarly 45,000 (K30), 450,000 (K60), 900,000. (K80) and 1,200,000 (K90) are preferably used, and in order to obtain the intended use, characteristics, and structure, each may be used alone or in combination of two or more. .

本発明に係る（メタ）アクリル系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やＰＥＧ、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cutoff of the (meth) acrylic polymer membrane according to the present invention is not limited as long as it can sufficiently separate the immunoglobulin monomer and dimer, and is 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more. The upper limit is less than 500,000, preferably 450,000 or less, more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined by dead-end filtration using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), PEG, dextran and the like. The molecular weight is calculated as the molecular weight at which the blocking rate is 90% from the relationship between the molecular weight and the blocking rate.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を製造する方法は何ら限定しないが、例えば湿式成膜法が挙げられる。湿式成膜法とは膜材料を良溶媒に溶解した膜原液と、膜原液中の良溶媒とは混和可能だが膜材料とは相溶しない他の溶媒からなる凝固液とを接触させることで、接触表面から濃度誘起による相分離を発生させて、膜を得る方法である。   The method for producing the (meth) acrylic polymer film according to the present invention is not limited in any way, and examples thereof include a wet film forming method. The wet film formation method is a method in which a membrane stock solution obtained by dissolving a membrane material in a good solvent is brought into contact with a coagulation liquid composed of another solvent that is miscible with the good solvent in the membrane stock solution but is not compatible with the membrane material. In this method, concentration-induced phase separation is generated from the contact surface to obtain a membrane.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる良溶媒とは、水に混和可能なものであれば何ら限定しないが、２０℃の純水１００ｇに１０ｇ以上溶解可能であり、かつ膜材料の（メタ）アクリル系高分子を５重量％以上溶解するものが好ましく、更に好ましくは、具体的にはＮ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトン、γ−ブチロラクトンなどが挙げられる。危険性、安全性、毒性の面からジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドンが好ましく用いられる。これらの溶媒は、単独で、もしくは２種以上組み合わせて使用できる。   The good solvent used in the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention is not limited as long as it is miscible with water, but 10 g or more is dissolved in 100 g of pure water at 20 ° C. Preferably, it is possible to dissolve 5% by weight or more of a (meth) acrylic polymer as a film material, and more preferably, specifically, N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl Examples thereof include sulfoxide, N, N-dimethylformamide, acetone, and γ-butyrolactone. From the viewpoint of danger, safety and toxicity, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylacetamide, and N-methyl-2-pyrrolidone are preferably used. These solvents can be used alone or in combination of two or more.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液は、目的の構造および性能を有する（メタ）アクリル系高分子膜を製造できれば何ら限定はしない。膜原液における（メタ）アクリル系高分子の濃度に関しては、濃度を上げるにつれて成膜性は向上するが、逆に膜の空孔率は減少し、透水性が低下する傾向がある。そのため、膜原液全体を１００重量％とした場合、（メタ）アクリル系高分子の濃度範囲としては分子量によって異なるが、下限として２重量％以上、好ましくは５重量％以上、特に好ましくは１０重量％以上である。また上限としては５０重量％以下、好ましくは４０重量％以下、特に好ましくは３０重量％以下で均一に溶解した溶液が好適に使用される。   The membrane stock solution used in the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention is not limited as long as a (meth) acrylic polymer film having the target structure and performance can be produced. Regarding the concentration of the (meth) acrylic polymer in the membrane stock solution, the film formability improves as the concentration increases, but conversely, the porosity of the membrane decreases and the water permeability tends to decrease. Therefore, when the whole membrane stock solution is 100% by weight, the concentration range of the (meth) acrylic polymer varies depending on the molecular weight, but the lower limit is 2% by weight or more, preferably 5% by weight or more, and particularly preferably 10% by weight. That's it. Further, an upper limit of 50% by weight or less, preferably 40% by weight or less, particularly preferably 30% by weight or less, is preferably used.

また、膜原液の温度は、下限として０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上、上限として膜原液中の良溶媒沸点以下が好適に使用される。この温度条件下であれば、膜原液として好ましい膜への加工を行うのに好適な粘度を得ることができる。   In addition, the lower limit of the temperature of the membrane stock solution is preferably 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher, and the upper limit is a good solvent boiling point or lower in the membrane stock solution. If it is this temperature condition, the viscosity suitable for processing into a film | membrane preferable as a film | membrane stock solution can be obtained.

本発明において使用する膜原液には、製造する膜の性能に影響を及ぼさない限り、目的に応じて、酸化防止剤、結晶核剤、帯電防止剤、難燃剤、滑剤、紫外線吸収剤等の添加剤を混合しても差し支えない。   Addition of antioxidants, crystal nucleating agents, antistatic agents, flame retardants, lubricants, ultraviolet absorbers, etc., depending on the purpose, as long as the membrane undiluted solution used in the present invention does not affect the performance of the membrane to be produced. Mixing agents may be used.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法で親水性高分子を用いる場合、その役割は、前述のとおり、主に外側の多孔支持層部分の多孔構造を促進して形成させるところにあり、膜原液の増粘効果を奏するものである。膜原液中に添加する親水性高分子の量は安定した成膜を行うために親水性ポリマーの分子量と添加量を適宜調整することもできる。膜原液の粘度が低い場合、成膜時に膜破れや膜切れなどを起こし、成膜性が不安定になる場合がある。逆に膜原液の粘度が高すぎる場合、多孔支持層を充分に成長させることができず、外層の多孔構造の空孔率が不十分となり、目的の高い透過性を持つ膜が得られにくくなる。更には、膜原液の粘度が上がることで、口金から吐出された原液がメルトフラクチャーを起こすことも危惧される。   When the hydrophilic polymer is used in the wet film formation method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention, its role is mainly to promote the porous structure of the outer porous support layer part as described above. It is in the place where it is formed, and has the effect of thickening the membrane stock solution. The amount of the hydrophilic polymer added to the membrane stock solution can be adjusted as appropriate in order to achieve stable film formation. When the viscosity of the film stock solution is low, film breakage or film breakage may occur at the time of film formation, and the film formability may become unstable. Conversely, if the viscosity of the membrane stock solution is too high, the porous support layer cannot be sufficiently grown, the porosity of the porous structure of the outer layer will be insufficient, and it will be difficult to obtain a membrane with the desired high permeability. . Furthermore, there is a concern that the stock solution discharged from the die may cause a melt fracture due to an increase in the viscosity of the membrane stock solution.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法において、膜原液中の親水性高分子の濃度の上限値は、使用する親水性高分子の種類と分子量に応じて最適値が決定されるが、通常４０重量％以下、好ましくは３０重量％以下である。   In the wet film formation method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention, the upper limit of the concentration of the hydrophilic polymer in the film stock solution is an optimum value according to the type and molecular weight of the hydrophilic polymer to be used. Is usually 40% by weight or less, preferably 30% by weight or less.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液としては、膜原液と接触したとき濃度誘起相分離を引き起こし、接触面から膜を形成することができる物質であれば何ら限定しないが、例えば、純水、モノアルコール系溶媒、ポリオール系溶媒又はこれら２種以上の混合液などが好適に使用される。モノアルコール系溶媒の例としては、メタノール、エタノール、プロパノールなどが挙げられる。また、ポリオール系溶媒の例としては、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，２−ブタンジオール、１，４−ブタンジオールなどが挙げられる。凝固液中にポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、ポリ（メタ）アクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリイタコン酸、ポリフマル酸、ポリシトラコン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどの水溶性高分子を添加することも可能である。添加する水溶性高分子の分子量や添加量にも依存するが、これらを添加することにより濾過性能を向上させることが可能である。また、凝固液中に、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ−ブチロラクトンなどの良溶媒を含有させることも可能である。特に、良溶媒を非溶媒に含有させた凝固液を使用する場合、その組成は、膜原液の組成、膜原液と凝固液との接触温度などで異なるが、概ね、凝固液全体を１００重量％とした場合、良溶媒の重量％として９０重量％以下が好ましい。この範囲であれば、膜を形成するのに必要十分な濃度誘起相分離を十分に達成できる。   As a coagulating liquid used in the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention, a substance capable of forming a film from the contact surface by causing concentration-induced phase separation when in contact with the film stock solution. For example, pure water, a monoalcohol solvent, a polyol solvent, or a mixture of two or more of these is preferably used. Examples of the monoalcohol solvent include methanol, ethanol, propanol and the like. Examples of the polyol solvent include ethylene glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, tetraethylene glycol, glycerin, propylene glycol, 1,2-butanediol, 1,4-butanediol, and the like. In the coagulation liquid, polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, poly (meth) acrylamide, polyvinylpyrrolidone, polyhydroxyacrylate, polyhydroxymethacrylate, poly (meth) acrylic acid, Polymethacrylic acid, polyitaconic acid, polyfumaric acid, polycitraconic acid, poly-p-styrene sulfonic acid, sodium poly-p-styrene sulfonate, N, N-dimethyl (meth) acrylamide, carboxymethylcellulose, starch, corn starch, polychitosan It is also possible to add a water-soluble polymer such as polychitin. Although it depends on the molecular weight and the amount of the water-soluble polymer to be added, the filtration performance can be improved by adding these. The coagulation liquid may contain a good solvent such as N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, and γ-butyrolactone. In particular, when using a coagulation liquid containing a good solvent in a non-solvent, the composition differs depending on the composition of the membrane stock solution, the contact temperature between the membrane stock solution and the coagulation liquid, etc. In this case, 90% by weight or less is preferable as the weight% of the good solvent. Within this range, concentration-induced phase separation necessary and sufficient for forming a film can be sufficiently achieved.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法おいて中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液（以後、内部凝固液）は、上記の外部凝固液と同様の溶液を用いてもよく、また、空気、窒素、アンモニアガス等の気体を導入する乾湿式成膜法で製造しても良い。   In the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention, the coagulating liquid (hereinafter referred to as the internal coagulating liquid) that passes through the inside of the yarn during the production of the hollow fiber membrane is the same solution as the above external coagulating liquid. Alternatively, it may be produced by a dry / wet film forming method in which a gas such as air, nitrogen or ammonia gas is introduced.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度であれば何ら限定しないが、成膜温度の下限としては０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。なお、平膜においては凝固液温度で決まる。   The film forming temperature in the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention is not limited as long as it is a temperature at which the film stock solution and the coagulating liquid are brought into contact with each other to cause concentration induced phase separation. However, the lower limit of the film formation temperature is 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. For hollow fiber membranes, it depends on the temperature of the double nozzle. In a flat membrane, it is determined by the coagulation liquid temperature.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液、凝固液、特に中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液（以後、内部凝固液）は均一溶解後に、溶存気体を除去することが望ましい。溶存気体を除去することで、溶存気体の発泡による膜の欠陥を著しく改善することできる。また、溶存気体のなかでも特に酸素を除くことで、高い温度下での膜加工による材料への酸化反応が減少する。膜原液および凝固液、内部凝固液に気体が溶存していない場合は、この工程を省略しても良い。また、乾湿式成膜法として空気、窒素、アンモニアガス等の気体を凝固剤として用いている場合には、この工程は実施しない。   The membrane stock solution and coagulation solution used in the wet film formation method for obtaining the (meth) acrylic polymer membrane according to the present invention, particularly the coagulation solution (hereinafter referred to as internal coagulation solution) that passes through the inside of the yarn during the production of the hollow fiber membrane, is uniformly dissolved. It is desirable to remove the dissolved gas later. By removing the dissolved gas, film defects due to foaming of the dissolved gas can be remarkably improved. Further, by removing oxygen from the dissolved gas, the oxidation reaction to the material due to film processing at a high temperature is reduced. This step may be omitted when no gas is dissolved in the membrane stock solution, the coagulation solution, and the internal coagulation solution. In addition, when a gas such as air, nitrogen, ammonia gas or the like is used as a coagulant as a dry / wet film forming method, this step is not performed.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、二重紡口から出た膜原液と内部凝固液による凝固をより促進するため、紡口直下に槽（以後、凝固槽）を設け、凝固槽中に満たされた凝固液（以後、外部凝固液）と接触させることができる。   When producing a hollow fiber membrane by a wet film formation method for obtaining a (meth) acrylic polymer membrane according to the present invention, in order to further accelerate the coagulation by the membrane stock solution and the internal coagulation solution from the double spinning nozzle, A tank (hereinafter referred to as a coagulation tank) is provided directly below, and can be brought into contact with a coagulation liquid (hereinafter referred to as an external coagulation liquid) filled in the coagulation tank.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、中空糸膜の断面構造を均一構造のみならず、様々な不均一構造まで、自由に構造制御するために紡口から外部凝固液面までの距離（以後、空走距離）および紡口から外部凝固液面までの空間の温度と湿度を調整することができる。空間の温度と湿度を調整できれば何ら限定しないが、例えば、空走距離の下限としては０．００１ｍ以上、好ましくは０．００５ｍ以上、特に好ましくは０．０１ｍ以上、上限として２．０ｍ以下、好ましくは１．５ｍ以下、特に好ましくは１．２ｍ以下である。また紡口から外部凝固面までの空間における温度は、下限として１０℃以上、好ましくは２０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。湿度は温度との兼ね合いで変化するが、下限として０％以上、好ましくは１０％以上、特に好ましくは３０％以上であり、上限としては１００％以下である。   When producing a hollow fiber membrane by a wet film forming method for obtaining a (meth) acrylic polymer membrane according to the present invention, the hollow fiber membrane can be freely structured not only in a uniform structure but also in various non-uniform structures. In order to control, the distance from the spinning nozzle to the external coagulation liquid surface (hereinafter referred to as idle running distance) and the temperature and humidity of the space from the spinning nozzle to the external coagulation liquid surface can be adjusted. Although there is no limitation as long as the temperature and humidity of the space can be adjusted, for example, the lower limit of the free running distance is 0.001 m or more, preferably 0.005 m or more, particularly preferably 0.01 m or more, and the upper limit is 2.0 m or less, preferably Is 1.5 m or less, particularly preferably 1.2 m or less. The temperature in the space from the spinning nozzle to the external solidification surface is 10 ° C. or higher, preferably 20 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher as the lower limit. The humidity varies depending on the temperature, but the lower limit is 0% or more, preferably 10% or more, particularly preferably 30% or more, and the upper limit is 100% or less.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合の巻取り速度は、製造条件である各種因子、紡口の形状、紡糸原液の組成、内部凝固液および外部凝固液の組成、原液および各凝固液の温度等で変化し得るが、概ね３００ｍ／時間から９０００ｍ／時間の速度が選択される。   The winding speed in the case of producing a hollow fiber membrane by a wet film forming method for obtaining the (meth) acrylic polymer membrane according to the present invention is the production conditions, factors such as the spinneret, the composition of the spinning dope, the internal Although the speed may vary depending on the composition of the coagulating liquid and the external coagulating liquid, the temperature of the raw liquid and each coagulating liquid, a speed of approximately 300 m / hour to 9000 m / hour is selected.

本発明に係わる（メタ）アクリル系高分子膜を得る湿式成膜法においては、凝固液による凝固後、膜の強度を強めるため脱溶媒槽に浸漬して脱溶媒を促進することができる。脱溶媒液には、凝固液による濃度誘起相分離後、残存している溶媒を除去できる溶媒であり、膜を溶解しないものであればいずれの溶媒でも用いることが可能である。一般には、水、エタノール等を用いることが多い。   In the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylic polymer film according to the present invention, the solvent removal can be promoted by solidifying with a coagulating liquid and then immersing in a solvent removing tank to increase the strength of the film. The solvent removal liquid is a solvent that can remove the remaining solvent after concentration-induced phase separation by the coagulation liquid, and any solvent that does not dissolve the membrane can be used. In general, water, ethanol or the like is often used.

本発明に係わる湿式成膜法により得られた未乾燥の本発明の（メタ）アクリル系高分子膜の乾燥温度は、乾燥中の膜破断が生じない温度であれば何ら限定はしないが、例えば、２０℃以上から（メタ）アクリル系高分子の溶融温度以下の温度範囲内で乾燥を行う。好ましい乾燥温度は、下限として３０℃以上、好ましくは４０℃以上、上限として８０℃以下、好ましくは７０℃以下が良い。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１時間以上から４８時間までが選択される。   The drying temperature of the undried (meth) acrylic polymer film of the present invention obtained by the wet film formation method according to the present invention is not limited as long as it does not cause film breakage during drying. The drying is performed within a temperature range from 20 ° C. or more to the melting temperature of the (meth) acrylic polymer. The preferable drying temperature is 30 ° C. or higher as the lower limit, preferably 40 ° C. or higher, and 80 ° C. or lower, preferably 70 ° C. or lower as the upper limit. The time required for drying is determined by the relationship with the drying temperature, but is generally selected from 0.01 hours to 48 hours.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系膜は特に限定されるものではなく、（メタ）アクリロニトリル系高分子の例としては、下記式（１８）で表されるものが挙げられる。
（式中、Ｒ１９およびＲ２０は、水素またはメチル基を表す。Ｒ２１は炭素数１〜１４のアルキル基またはアラルキル基を表す。アルキル基の水素原子またはアラルキル基の水素原子は、炭素数１〜１０のアルコキシ基によって置換されていてもよい。式中ｘおよｙは繰り返し単位を表す。）
その中でも、ポリ（メタ）アクリロニトリルやポリ（メタ）アクリロニトリル酸エステルなど用いることができる。好ましくはポリアクリロニトリル、ポリメタアクリロニトリルが良い。The (meth) acrylonitrile film according to the present invention is not particularly limited, and examples of the (meth) acrylonitrile polymer include those represented by the following formula (18).
(In the formula, R 19 and R 20 represent hydrogen or a methyl group. R 21 represents an alkyl group or an aralkyl group having 1 to 14 carbon atoms. The hydrogen atom of the alkyl group or the hydrogen atom of the aralkyl group represents the number of carbon atoms. (It may be substituted by an alkoxy group of 1 to 10. In the formula, x and y represent a repeating unit.)
Among these, poly (meth) acrylonitrile, poly (meth) acrylonitrile acid ester, and the like can be used. Polyacrylonitrile and polymethacrylonitrile are preferable.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子を構成するモノマー組成は、（メタ）アクリロニトリル含量が少なくとも５０重量％以上、好ましくは６０重量％以上であり、（メタ）アクリロニトリルに対して共重合性を有するビニル化合物の一種又は二種以上の含量が５０重量％以下、好ましくは４０重量％以下である。上記ビニル化合物としては、（メタ）アクリロニトリルに対して共重合性を有する公知の化合物であれば良く、特に限定されないが、好ましい共重合成分としては、（メタ）アクリル酸、（メタ）アクリル酸メチル、（メタ）アクリル酸エチル、イタコン酸、酢酸ビニル、（メタ）アクリルスルホン酸ナトリウム、ｐ（パラ）−スチレンスルホン酸ナトリウム、ヒドロキシエチルメタクリレート、メタアクリル酸エチルトリエチルアンモニウムクロライド、メタアクリル酸エチルトリメチルアンモニウムクロライド、ビニルピロリドン等を例示することができる。例えば、アクリロニトリル−アクリル酸メチル−ＰＶＰ共重合体などが挙げられる。
必要に応じて高分子末端および／または主鎖中にエステル化、エーテル化、エポキシ化など各種変性を実施することができる。また、免疫グロブリンの静電気的な特性との相性から、アミノ基、モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、カルボキシル基、スルフォニル基、スルホン酸基などの化学構造を必要に応じて導入しても良い。The monomer composition constituting the (meth) acrylonitrile polymer according to the present invention has a (meth) acrylonitrile content of at least 50% by weight, preferably 60% by weight or more, and is copolymerizable with (meth) acrylonitrile. The content of one or two or more kinds of vinyl compounds is 50% by weight or less, preferably 40% by weight or less. The vinyl compound is not particularly limited as long as it is a known compound having copolymerizability with (meth) acrylonitrile, and preferred copolymer components include (meth) acrylic acid and methyl (meth) acrylate. , Ethyl (meth) acrylate, itaconic acid, vinyl acetate, sodium (meth) acrylsulfonate, sodium p (para) -styrenesulfonate, hydroxyethyl methacrylate, ethyl triethylammonium methacrylate, ethyl trimethylammonium methacrylate Examples include chloride and vinyl pyrrolidone. Examples thereof include acrylonitrile-methyl acrylate-PVP copolymer.
Various modifications such as esterification, etherification, and epoxidation can be performed on the polymer terminal and / or main chain as necessary. Moreover, chemical structures such as an amino group, a monoalkylamino group, a dialkylamino group, a carboxyl group, a sulfonyl group, and a sulfonic acid group may be introduced as necessary in view of compatibility with the electrostatic properties of immunoglobulins.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜は、主として（メタ）アクリロニトリル系高分子からなるものであるが、（メタ）アクリロニトリル系高分子の特性を損なわない範囲で他の高分子量物質や添加物を含有していてもよい。これらの高分子を二種以上、組み合わせて実施することも可能である。   The (meth) acrylonitrile-based polymer film according to the present invention is mainly composed of a (meth) acrylonitrile-based polymer, but other high molecular weight substances and additives are added within the range not impairing the properties of the (meth) acrylonitrile-based polymer. You may contain the thing. It is also possible to carry out by combining two or more of these polymers.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子の重量平均分子量は、下限としては５０００以上、好ましくは１万以上、特に好ましくは２万以上が良く、上限として１００万以下、好ましくは５０万以下、特に好ましくは３０万以下が良い。この範囲内であれば、十分な強度と成膜性が得られる。   The weight average molecular weight of the (meth) acrylonitrile polymer according to the present invention is 5000 or more, preferably 10,000 or more, particularly preferably 20,000 or more as a lower limit, and 1 million or less, preferably 500,000 or less as an upper limit. Particularly preferred is 300,000 or less. Within this range, sufficient strength and film formability can be obtained.

本発明においては、（メタ）アクリロニトリル系高分子とともに、膜の孔の大きさをコントロールするためと、親水性を付与するために、親水性高分子が用いられることが好ましい。親水性高分子としては、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリビニルアルコール、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリ−Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、ポリ−Ｎ−イソプロピル（メタ）アクリルアミド、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどが挙げられる。中でも、ポリビニルピロリドンは、（メタ）アクリロニトリル系高分子との相溶性がよく、膜全体の親水性を高める上で特に好ましい。   In the present invention, it is preferable to use a hydrophilic polymer together with the (meth) acrylonitrile polymer in order to control the pore size of the membrane and to impart hydrophilicity. Examples of the hydrophilic polymer include polyvinyl pyrrolidone, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, polyvinyl alcohol, poly (meth) acrylamide, poly-N, N-dimethyl (meth) acrylamide, Examples thereof include poly-N-isopropyl (meth) acrylamide, polyhydroxy acrylate, polyhydroxy methacrylate, carboxymethyl cellulose, starch, corn starch, polychitosan, and polychitin. Among them, polyvinyl pyrrolidone has a good compatibility with the (meth) acrylonitrile-based polymer, and is particularly preferable for improving the hydrophilicity of the entire film.

本発明で係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜に親水性を付与する親水性高分子の重量平均分子量は、下限としては１，０００以上、好ましくは５，０００以上が良く、上限としては２００万以下、好ましくは１００万以下、特に好ましくは５０万以下が良い。
例えばポリビニルピロリドンではＢＡＳＦ社より様々なグレードが市販されており、その重量平均分子量が９，０００のもの（Ｋ１７）、以下同様に４５，０００（Ｋ３０）、４５０，０００（Ｋ６０）、９００，０００（Ｋ８０）、１，２００，０００（Ｋ９０）を用いるのが好ましく、目的とする用途、特性、構造を得るために、それぞれ単独で用いてもよく、適宜２種以上を組み合わせて用いても良い。The weight average molecular weight of the hydrophilic polymer that imparts hydrophilicity to the (meth) acrylonitrile-based polymer film according to the present invention is 1,000 or more, preferably 5,000 or more as a lower limit, and 2 million as an upper limit. Below, it is preferably 1,000,000 or less, particularly preferably 500,000 or less.
For example, various grades of polyvinyl pyrrolidone are commercially available from BASF and have a weight average molecular weight of 9,000 (K17), and similarly 45,000 (K30), 450,000 (K60), 900,000. (K80) and 1,200,000 (K90) are preferably used, and in order to obtain the intended use, characteristics, and structure, each may be used alone or in combination of two or more. .

本発明に係る（メタ）アクリロニトリル系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やＰＥＧ、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cut off of the (meth) acrylonitrile-based polymer membrane according to the present invention is not limited as long as it can sufficiently separate the immunoglobulin monomer and the dimer, and is 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more. The upper limit is less than 500,000, preferably 450,000 or less, more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined by dead-end filtration using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), PEG, dextran and the like. The molecular weight is calculated as the molecular weight at which the blocking rate is 90% from the relationship between the molecular weight and the blocking rate.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を製造する方法は何ら限定しないが、例えば湿式成膜法が挙げられる。湿式成膜法とは膜材料を良溶媒に溶解した膜原液と、膜原液中の良溶媒とは混和可能だが膜材料とは相溶しない他の溶媒からなる凝固液とを接触させることで、接触表面から濃度誘起による相分離を発生させて、膜を得る方法である。   The method for producing the (meth) acrylonitrile polymer film according to the present invention is not limited in any way, and examples thereof include a wet film forming method. The wet film formation method is a method in which a membrane stock solution obtained by dissolving a membrane material in a good solvent is brought into contact with a coagulation liquid composed of another solvent that is miscible with the good solvent in the membrane stock solution but is not compatible with the membrane material. In this method, concentration-induced phase separation is generated from the contact surface to obtain a membrane.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる良溶媒とは、水に混和可能なものであれば何ら限定しないが、２０℃の純水１００ｇに１０ｇ以上溶解可能であり、かつ膜材料の（メタ）アクリロニトリル系高分子を５重量％以上溶解するものが好ましい。例えば、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトン、γ−ブチロラクトンなどが挙げられる。危険性、安全性、毒性の面からジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドンが好ましく用いられる。これらの溶媒は、単独で、もしくは２種以上組み合わせて使用できる。   The good solvent used in the wet film formation method for obtaining the (meth) acrylonitrile polymer film according to the present invention is not limited as long as it is miscible with water, but 10 g or more is dissolved in 100 g of pure water at 20 ° C. It is preferable that it is possible to dissolve 5% by weight or more of the (meth) acrylonitrile-based polymer as a film material. For example, N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, acetone, γ-butyrolactone and the like can be mentioned. From the viewpoint of danger, safety and toxicity, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylacetamide, and N-methyl-2-pyrrolidone are preferably used. These solvents can be used alone or in combination of two or more.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液は、目的の構造および性能を有する（メタ）アクリロニトリル系高分子を製造できれば何ら限定はしないが、濃度を上げるにつれて成膜性は向上するが、逆に膜の空孔率は減少し、透水性が低下する傾向がある。そのため、膜原液全体を１００重量％とした場合、（メタ）アクリロニトリル系高分子の濃度範囲としては、分子量によって異なるが、下限として２重量％以上、好ましくは５重量％以上、特に好ましくは１０重量％以上である。また上限としては５０重量％以下、好ましくは４０重量％以下、特に好ましくは３０重量％以下で均一に溶解した溶液が好適に使用される。（メタ）アクリロニトリル系高分子の濃度が２重量％未満では成膜原液の粘度が低く、成膜しにくい傾向にあり、５０重量％より高いと成膜原液の粘度が高すぎ、成膜は困難となる傾向にある。また、原液粘度、溶解状態を制御する目的で水、塩類、アルコール類、エーテル類、ケトン類、グリコール類等の非溶剤を複数添加することも可能であり、その種類、添加量は組み合わせにより随時決定すればよい。   The membrane stock solution used in the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylonitrile polymer film according to the present invention is not limited as long as it can produce a (meth) acrylonitrile polymer having the target structure and performance, but the concentration is not limited. As the film is raised, the film formability improves, but conversely, the porosity of the film decreases and the water permeability tends to decrease. Therefore, when the whole membrane stock solution is 100% by weight, the concentration range of the (meth) acrylonitrile polymer varies depending on the molecular weight, but the lower limit is 2% by weight or more, preferably 5% by weight or more, particularly preferably 10% by weight. % Or more. Further, an upper limit of 50% by weight or less, preferably 40% by weight or less, particularly preferably 30% by weight or less, is preferably used. When the concentration of the (meth) acrylonitrile polymer is less than 2% by weight, the viscosity of the stock solution is low and tends to be difficult to form. When it is higher than 50% by weight, the viscosity of the stock solution is too high and film formation is difficult. It tends to be. It is also possible to add multiple non-solvents such as water, salts, alcohols, ethers, ketones, glycols, etc. for the purpose of controlling the viscosity of the stock solution and the dissolution state, and the type and amount of addition can be changed depending on the combination. Just decide.

また、該膜原液の温度は、下限として０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上、上限として膜原液中の良溶媒沸点以下が好適に使用される。この温度条件下であれば、膜原液として好ましい膜への加工を行うのに好適な粘度を得ることができる。
本発明において使用する膜原液には、製造する膜の性能に影響を及ぼさない限り、目的に応じて、酸化防止剤、結晶核剤、帯電防止剤、難燃剤、滑剤、紫外線吸収剤等の添加剤を混合しても差し支えない。In addition, the lower limit of the temperature of the membrane stock solution is preferably 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher, and the upper limit is a good solvent boiling point or lower in the membrane stock solution. If it is this temperature condition, the viscosity suitable for processing into a film | membrane preferable as a film | membrane stock solution can be obtained.
Addition of antioxidants, crystal nucleating agents, antistatic agents, flame retardants, lubricants, ultraviolet absorbers, etc., depending on the purpose, as long as the membrane undiluted solution used in the present invention does not affect the performance of the membrane to be produced. Mixing agents may be used.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法で親水性高分子を用いる場合、その役割は、前述のとおり、主に外側の多孔支持層部分の多孔構造を促進して形成させるところにあり、膜原液の増粘効果を奏するものである。膜原液中に添加する親水性高分子の量は安定した成膜を行うために親水性ポリマーの分子量と添加量を適宜調整することもできる。膜原液の粘度が低い場合、成膜時に糸切れ、糸揺れなどを起こし、製糸性が不安定になる場合がある。逆に膜原液の粘度が高すぎる場合、多孔支持層を充分に成長させることができず、外層の多孔構造の空孔率が不十分となり、目的の高い透過性を持つ膜が得られにくくなる。更には、膜原液の粘度が上がることで、口金から吐出された原液がメルトフラクチャーを起こすことも危惧される。   When the hydrophilic polymer is used in the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylonitrile polymer film according to the present invention, its role is mainly to promote the porous structure of the outer porous support layer part as described above. It is in the place where it is formed, and has the effect of thickening the membrane stock solution. The amount of the hydrophilic polymer added to the membrane stock solution can be adjusted as appropriate in order to achieve stable film formation. When the viscosity of the membrane stock solution is low, yarn breakage and yarn shaking may occur during film formation, which may make the yarn production unstable. Conversely, if the viscosity of the membrane stock solution is too high, the porous support layer cannot be sufficiently grown, the porosity of the porous structure of the outer layer will be insufficient, and it will be difficult to obtain a membrane with the desired high permeability. . Furthermore, there is a concern that the stock solution discharged from the die may cause a melt fracture due to an increase in the viscosity of the membrane stock solution.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法において、膜原液中の親水性高分子の濃度の上限値は、使用する親水性高分子の種類と分子量に応じて最適値が決定されるが、通常４０重量％以下、好ましくは３０重量％以下である。   In the wet film-forming method for obtaining the (meth) acrylonitrile polymer film according to the present invention, the upper limit of the concentration of the hydrophilic polymer in the membrane stock solution is an optimum value according to the type and molecular weight of the hydrophilic polymer to be used. Is usually 40% by weight or less, preferably 30% by weight or less.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液としては、膜原液と接触したとき濃度誘起相分離を引き起こし、接触面から膜を形成することができる物質であれば何ら限定しないが、例えば、純水、モノアルコール系溶媒、ポリオール系溶媒又はこれら２種以上の混合液などが好適に使用される。モノアルコール系溶の例としては、メタノール、エタノール、プロパノールなどが挙げられる。また、ポリオール系溶媒の例としては、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，２−ブタンジオール、１，４−ブタンジオールなどが挙げられる。凝固液中にポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、ポリ（メタ）アクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリイタコン酸、ポリフマル酸、ポリシトラコン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチン、などの水溶性高分子を添加することも可能である。さらにｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン等の脂肪族炭化水素類などポリマーを溶解しない液体でも良い。添加する水溶性高分子の分子量や添加量にも依存するが、これらを添加することにより濾過性能を向上させることが可能である。また、凝固液中に、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ−ブチロラクトン、プロピレンカーボネート、エチレンカーボネートなどの良溶媒を含有させることも可能である。特に、良溶媒を非溶媒に含有させた凝固液を使用する場合、その組成は、膜原液の組成、膜原液と凝固液との接触温度などで異なるが、概ね、凝固液全体を１００重量％とした場合、良溶媒の重量％として９０重量％以下が好ましい。この範囲であれば、膜を形成するのに必要十分な濃度誘起相分離を十分に達成できる。   The coagulating liquid used in the wet film-forming method for obtaining the (meth) acrylonitrile-based polymer film according to the present invention is a substance capable of causing concentration-induced phase separation when in contact with the film stock solution and forming a film from the contact surface. For example, pure water, a monoalcohol solvent, a polyol solvent, or a mixture of two or more of these is preferably used. Examples of monoalcohol-based solvents include methanol, ethanol, propanol and the like. Examples of the polyol solvent include ethylene glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, tetraethylene glycol, glycerin, propylene glycol, 1,2-butanediol, 1,4-butanediol, and the like. In the coagulation liquid, polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, poly (meth) acrylamide, polyvinylpyrrolidone, polyhydroxyacrylate, polyhydroxymethacrylate, poly (meth) acrylic acid, Polymethacrylic acid, polyitaconic acid, polyfumaric acid, polycitraconic acid, poly-p-styrene sulfonic acid, sodium poly-p-styrene sulfonate, N, N-dimethyl (meth) acrylamide, carboxymethylcellulose, starch, corn starch, polychitosan It is also possible to add a water-soluble polymer such as polychitin. Further, a liquid that does not dissolve the polymer such as aliphatic hydrocarbons such as n-hexane and n-heptane may be used. Although it depends on the molecular weight and the amount of the water-soluble polymer to be added, the filtration performance can be improved by adding these. In addition, a good solvent such as N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, γ-butyrolactone, propylene carbonate, ethylene carbonate may be contained in the coagulation liquid. Is possible. In particular, when using a coagulation liquid containing a good solvent in a non-solvent, the composition differs depending on the composition of the membrane stock solution, the contact temperature between the membrane stock solution and the coagulation liquid, etc. In this case, 90% by weight or less is preferable as the weight% of the good solvent. Within this range, concentration-induced phase separation necessary and sufficient for forming a film can be sufficiently achieved.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度であれば何ら限定しないが、成膜温度の下限としては０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。なお、平膜においては凝固液温度で決まる。   The film formation temperature in the wet film formation method for obtaining the (meth) acrylonitrile polymer film according to the present invention is not limited as long as it is a temperature at which the membrane stock solution and the coagulation liquid are brought into contact with each other to cause concentration induced phase separation. However, the lower limit of the film formation temperature is 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. For hollow fiber membranes, it depends on the temperature of the double nozzle. In a flat membrane, it is determined by the coagulation liquid temperature.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液、凝固液、特に中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液（以後、内部凝固液）は均一溶解後に、溶存気体を除去することが望ましい。溶存気体を除去することで、溶存気体の発泡による膜の欠陥を著しく改善することできる。また、溶存気体のなかでも特に酸素を除くことで、高い温度下での膜加工による材料への酸化反応が減少する。膜原液および凝固液、内部凝固液に気体が溶存していない場合は、この工程を省略しても良い。   The membrane stock solution used in the wet film-forming method for obtaining the (meth) acrylonitrile polymer membrane according to the present invention, the coagulating solution, especially the coagulating solution passing through the inside of the yarn during the production of the hollow fiber membrane (hereinafter referred to as the internal coagulating solution) is uniformly dissolved. It is desirable to remove the dissolved gas later. By removing the dissolved gas, film defects due to foaming of the dissolved gas can be remarkably improved. Further, by removing oxygen from the dissolved gas, the oxidation reaction to the material due to film processing at a high temperature is reduced. This step may be omitted when no gas is dissolved in the membrane stock solution, the coagulation solution, and the internal coagulation solution.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、二重紡口から出た膜原液と内部凝固液による凝固をより促進するため、紡口直下に槽（以後、凝固槽）を設け、凝固槽中に満たされた凝固液（以後、外部凝固液）と接触させることができる。   In the case of producing a hollow fiber membrane by a wet film forming method for obtaining a (meth) acrylonitrile-based polymer membrane according to the present invention, in order to further promote the coagulation by the membrane stock solution and the internal coagulation solution discharged from the double spinning nozzle, A tank (hereinafter referred to as a coagulation tank) is provided directly below, and can be brought into contact with a coagulation liquid (hereinafter referred to as an external coagulation liquid) filled in the coagulation tank.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、中空糸膜の断面構造を均一構造のみならず、様々な不均一構造まで、自由に構造制御するために紡口から外部凝固液面までの距離（以後、空走距離）および紡口から外部凝固液面までの空間の温度と湿度を調整することができる。空間の温度と湿度を調整できれば何ら限定しないが、例えば、空走距離の下限としては０．００１ｍ以上、好ましくは０．００５ｍ以上、特に好ましくは０．０１ｍ以上、上限として２．０ｍ以下、好ましくは１．５ｍ以下、特に好ましくは１．２ｍ以下である。また紡口から外部凝固面までの空間における温度は、下限として１０℃以上、好ましくは２０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。湿度は温度との兼ね合いで変化するが、下限として０％以上、好ましくは１０％以上、特に好ましくは３０％以上であり、上限としては１００％以下である。   When producing a hollow fiber membrane by a wet film forming method for obtaining a (meth) acrylonitrile-based polymer membrane according to the present invention, the cross-sectional structure of the hollow fiber membrane can be freely structured not only to a uniform structure but also to various non-uniform structures. In order to control, the distance from the spinning nozzle to the external coagulation liquid surface (hereinafter referred to as idle running distance) and the temperature and humidity of the space from the spinning nozzle to the external coagulation liquid surface can be adjusted. Although there is no limitation as long as the temperature and humidity of the space can be adjusted, for example, the lower limit of the free running distance is 0.001 m or more, preferably 0.005 m or more, particularly preferably 0.01 m or more, and the upper limit is 2.0 m or less, preferably Is 1.5 m or less, particularly preferably 1.2 m or less. The temperature in the space from the spinning nozzle to the external solidification surface is 10 ° C. or higher, preferably 20 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher as the lower limit. The humidity varies depending on the temperature, but the lower limit is 0% or more, preferably 10% or more, particularly preferably 30% or more, and the upper limit is 100% or less.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合の巻取り速度は、製造条件である各種因子、紡口の形状、紡糸原液の組成、内部凝固液および外部凝固液の組成、原液および各凝固液の温度等で変化し得るが、概ね３００ｍ／時間から９０００ｍ／時間の速度が選択される。   The winding speed in the case of producing a hollow fiber membrane by a wet film forming method for obtaining the (meth) acrylonitrile-based polymer membrane according to the present invention is various factors that are production conditions, the shape of the spinneret, the composition of the spinning dope, the internal Although the speed may vary depending on the composition of the coagulating liquid and the external coagulating liquid, the temperature of the raw liquid and each coagulating liquid, a speed of approximately 300 m / hour to 9000 m / hour is selected.

本発明に係わる（メタ）アクリロニトリル系高分子膜を得る湿式成膜法においては、凝固液による凝固後、膜の強度を強めるため脱溶媒槽に浸漬して脱溶媒を促進することができる。脱溶媒液には、凝固液による濃度誘起相分離後、残存している溶媒を除去できる溶媒であり、膜を溶解しないものであればいずれの溶媒でも用いることが可能である。一般には、水、エタノール等を用いることが多い。   In the wet film forming method for obtaining the (meth) acrylonitrile-based polymer film according to the present invention, after coagulation with the coagulating liquid, the solvent removal can be promoted by immersing in a solvent removal tank in order to increase the strength of the film. The solvent removal liquid is a solvent that can remove the remaining solvent after concentration-induced phase separation by the coagulation liquid, and any solvent that does not dissolve the membrane can be used. In general, water, ethanol or the like is often used.

本発明に係わる湿式成膜法により得られた未乾燥の本発明の（メタ）アクリロニトリル系高分子膜の乾燥温度は、乾燥中の膜破断が生じない温度であれば何ら限定はしないが、例えば、２０℃以上から（メタ）アクリロニトリル系高分子の溶融温度以下の温度範囲内で乾燥を行う。好ましい乾燥温度としては３０℃以上、７５℃以下である。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１時間以上から４８時間までが選択される。   The drying temperature of the undried (meth) acrylonitrile-based polymer film of the present invention obtained by the wet film forming method according to the present invention is not limited as long as it does not cause film breakage during drying. The drying is performed within a temperature range from 20 ° C. or more to the melting temperature of the (meth) acrylonitrile polymer. A preferable drying temperature is 30 ° C. or higher and 75 ° C. or lower. The time required for drying is determined by the relationship with the drying temperature, but is generally selected from 0.01 hours to 48 hours.

本発明に係わるフッ素系高分子の重量平均分子量は、下限としては５万以上、好ましくは１０万以上、特に好ましくは１５万以上が良く、上限として５００万以下、好ましくは２００万以下、特に好ましくは１００万以下が良い。一般に平均分子量が１００万を超えるような樹脂については、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）測定が困難であるので、その代用として粘度法による粘度平均分子量をあてることができる。平均分子量が５万より小さいと、溶融成型の際のメルトテンションが小さくなり成形性が悪くなったり、膜の力学強度が低くなったりするので好ましくない。平均分子量が５００万を超えると、均一な溶融混練が難しくなるために好ましくない。   The weight average molecular weight of the fluoropolymer according to the present invention is preferably 50,000 or more, preferably 100,000 or more, particularly preferably 150,000 or more as a lower limit, and 5 million or less, preferably 2 million or less, particularly preferably as an upper limit. Is preferably 1 million or less. In general, a resin having an average molecular weight exceeding 1,000,000 is difficult to measure by gel permeation chromatography (GPC). Therefore, a viscosity average molecular weight by a viscosity method can be applied as a substitute. If the average molecular weight is less than 50,000, the melt tension at the time of melt molding becomes small and the moldability is deteriorated, and the mechanical strength of the film is lowered. An average molecular weight exceeding 5 million is not preferable because uniform melt-kneading becomes difficult.

免疫グロブリンの吸着による閉塞を防ぐために、膜に親水性を付与することが必要となる。親水化処理の方法としては、例えば、界面活性剤を含む溶液にフッ素系高分子膜を浸漬した後、乾燥してフッ素系高分子膜中に界面活性剤を残留させる方法、電子線やガンマ線等の放射線を照射する、あるいは過酸化物を用いることによって、フッ素系高分子膜の細孔表面に親水性のアクリル系モノマーやメタクリル系モノマー等をグラフトする方法、成膜時に親水性高分子を予め混合する方法、親水性高分子を含む溶液にフッ素系高分子膜を浸漬した後、乾燥してフッ素系高分子膜の細孔表面に親水性高分子の被膜を作る方法等が挙げられるが、親水化の永続性や親水性添加物の漏洩の可能性を考慮するとグラフト重合が最も好ましい。特に、特開昭６２−１７９５４０号公報、特開昭６２−２５８７１１号公報、および米国特許第４，８８５，０８６号明細書に開示された放射線グラフト重合法による親水化処理は、膜内全領域の細孔内表面に均一な親水化層を形成し得る点で好ましい。   In order to prevent occlusion due to immunoglobulin adsorption, it is necessary to impart hydrophilicity to the membrane. Examples of the hydrophilization treatment method include, for example, a method in which a fluoropolymer film is immersed in a solution containing a surfactant and then dried to leave the surfactant in the fluoropolymer film. The method of grafting hydrophilic acrylic monomer, methacrylic monomer, etc. on the pore surface of the fluoropolymer film by irradiating the above-mentioned radiation or using a peroxide. A method of mixing, a method of immersing the fluoropolymer film in a solution containing a hydrophilic polymer, and then drying to form a hydrophilic polymer film on the pore surface of the fluoropolymer film. Graft polymerization is most preferable in consideration of the persistence of hydrophilization and the possibility of leakage of hydrophilic additives. In particular, the hydrophilic treatment by the radiation graft polymerization method disclosed in JP-A-62-2179540, JP-A-62-258711, and U.S. Pat. It is preferable in that a uniform hydrophilic layer can be formed on the surface of the pores.

本発明のグラフト重合に使用する親水性モノマーとしては、ビニル基を有する親水性モノマーであれば特に限定されるものではない。好ましくは、１個のビニル基を有するモノマーが良い。さらに、スルホン基、カルボキシル基、アミド基、中性水酸基、スルフォニル基、スルフォニル基、スルホン酸基等を含む（メタ）アクリル系モノマーが好適に使用できるが、免疫グロブリンを含む溶液を濾過する場合には中性水酸基を含むモノマーが特に好ましい。本発明に係わる親水性モノマーとは、大気圧下で、２５℃の純水に１容量％混合させた時に均一溶解するモノマーである。例えば、ヒドロキシプロピルアクリレート等のヒドロキシル基を有する、もしくはその前駆体となる官能基を有するビニルモノマー、メタクリル酸トリエチルアンモニウムエチル等のアニオン交換基を有するビニルモノマー、メタクリル酸スルホプロピル等のカチオン交換基を有するビニルモノマー、ビニルピロリドン等のアミド結合を有するビニルモノマー等が挙げられる。中でも、１個以上のヒドロキシル基、あるいはその前駆体となる官能基を有するビニルモノマーが、免疫グロブリン溶液の透過性が最も高いため好ましい。具体的には、ヒドロキシプロピルアクリレート、２−ヒドロキシエチルメタクリレート等の（メタ）アクリル酸と多価アルコールのエステル類、アリルアルコール等の不飽和結合を有するアルコール類、および酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル等のエノールエステル類等が挙げられる。さらに、１個のビニル基を有する親水性モノマーとともに、２個以上のビニル基を有する架橋剤を、上記親水性モノマーに対して、２０ｍｏｌ％以上、１０００ｍｏｌ％以下の割合で用いて、グラフト重合法によって共重合させることにより、充分に親水化が達成されたものである。   The hydrophilic monomer used in the graft polymerization of the present invention is not particularly limited as long as it is a hydrophilic monomer having a vinyl group. A monomer having one vinyl group is preferable. Furthermore, (meth) acrylic monomers containing a sulfone group, a carboxyl group, an amide group, a neutral hydroxyl group, a sulfonyl group, a sulfonyl group, a sulfonic acid group, etc. can be suitably used, but when filtering a solution containing an immunoglobulin Is particularly preferably a monomer containing a neutral hydroxyl group. The hydrophilic monomer according to the present invention is a monomer that is uniformly dissolved when mixed with 1% by volume of pure water at 25 ° C. under atmospheric pressure. For example, a vinyl monomer having a hydroxyl group such as hydroxypropyl acrylate, or a functional group serving as a precursor thereof, a vinyl monomer having an anion exchange group such as triethylammonium ethyl methacrylate, or a cation exchange group such as sulfopropyl methacrylate. And vinyl monomers having an amide bond such as vinyl pyrrolidone. Among these, a vinyl monomer having one or more hydroxyl groups or a functional group serving as a precursor thereof is preferable because it has the highest permeability of the immunoglobulin solution. Specifically, (meth) acrylic acid and polyhydric alcohol esters such as hydroxypropyl acrylate and 2-hydroxyethyl methacrylate, alcohols having an unsaturated bond such as allyl alcohol, and vinyl acetate and vinyl propionate. Examples include enol esters. Further, a graft polymerization method using a hydrophilic monomer having one vinyl group and a crosslinking agent having two or more vinyl groups in a proportion of 20 mol% or more and 1000 mol% or less with respect to the hydrophilic monomer. By the copolymerization, sufficient hydrophilization was achieved.

本発明に係わる使用する架橋剤は、上記親水性モノマーと共重合しうる２個以上のビニル基を有する架橋剤であり、親水性モノマーと同時に膜に接触させることにより導入する。架橋剤の数平均分子量は、下限としては、２００以上、好ましくは２５０以上、より好ましくは３００以上であり、上限としては、２０００以下、好ましくは１０００以下、より好ましくは６００以下である。架橋剤の数平均分子量が２００以上、２０００以下であると、免疫グロブリン溶液の高い濾過速度が得られ好ましい。本発明においては、２個以上のビニル基を有する架橋剤であれば、いかなる架橋剤も使用できるが、親水性の架橋剤が好ましい。ここで親水性の架橋剤とは、大気圧下で、２５℃の純水に１容量％混合させた時に均一溶解する架橋剤である。   The cross-linking agent used according to the present invention is a cross-linking agent having two or more vinyl groups that can be copolymerized with the hydrophilic monomer, and is introduced by contacting the membrane simultaneously with the hydrophilic monomer. The number average molecular weight of the crosslinking agent is 200 or more, preferably 250 or more, more preferably 300 or more as the lower limit, and the upper limit is 2000 or less, preferably 1000 or less, more preferably 600 or less. When the number average molecular weight of the crosslinking agent is 200 or more and 2000 or less, a high filtration rate of the immunoglobulin solution is obtained, which is preferable. In the present invention, any crosslinking agent having two or more vinyl groups can be used, but a hydrophilic crosslinking agent is preferred. Here, the hydrophilic cross-linking agent is a cross-linking agent that is uniformly dissolved when mixed with 1% by volume of pure water at 25 ° C. under atmospheric pressure.

本発明で用いられる架橋剤の具体例としては、芳香族系ではジビニルベンゼン誘導体、脂肪族系ではエチレングリコールジメタクリレート、ポリエチレングリコールジメタクリレート等のようなメタクリル酸系の架橋剤、エチレングリコールジアクリレート、ポリエチレングリコールジアクリレート等のような（メタ）アクリル酸系の架橋剤等が挙げられる。また、トリメチロールプロパントリメタクリレートのような３個の反応性基を有する架橋剤も用いることが出来る。また、架橋剤は２種類以上の混合物も用いることが出来る。本発明において、ポリエチレングリコールジメタクリレート、ポリエチレングリコールジアクリレート、またはそれらの混合物を用いることが、免疫グロブリン１量体透過性と免疫グロブリン２量体除去性能の観点から最も好ましい。   Specific examples of the crosslinking agent used in the present invention include divinylbenzene derivatives for aromatic systems, methacrylic acid crosslinking agents such as ethylene glycol dimethacrylate and polyethylene glycol dimethacrylate for aliphatic systems, ethylene glycol diacrylate, Examples include (meth) acrylic acid-based crosslinking agents such as polyethylene glycol diacrylate. A crosslinking agent having three reactive groups such as trimethylolpropane trimethacrylate can also be used. In addition, a mixture of two or more kinds of crosslinking agents can be used. In the present invention, it is most preferable to use polyethylene glycol dimethacrylate, polyethylene glycol diacrylate, or a mixture thereof from the viewpoints of immunoglobulin monomer permeability and immunoglobulin dimer removal performance.

本発明に係わるグラフト重合法とは、ラジカルが発生させる方法であれば何ら限定しないが、例えば、放射線開始剤の添加や電離性放射線や化学反応等の手段によってフッ素系高分子膜にラジカルを生成させ、そのラジカルを開始点として、該膜にモノマーをグラフト重合させる反応である。本発明において、フッ素系高分子膜にラジカルを生成させるためにはいかなる手段も採用しうるが、膜全体に均一なラジカルを生成させるためには、電離性放射線の照射が好ましい。電離性放射線の種類としては、γ線、電子線、β線、中性子線等が利用できるが、工業規模での実施には電子線またはγ線が最も好ましい。電離性放射線はコバルト６０、ストロンチウム９０、およびセシウム１３７などの放射性同位体から、またはＸ線撮影装置、電子線加速器および紫外線照射装置等により得られる。   The graft polymerization method according to the present invention is not particularly limited as long as it is a method of generating radicals. For example, radicals are generated in a fluorine-based polymer film by means such as addition of a radiation initiator, ionizing radiation or chemical reaction. Then, starting from the radical, the monomer is graft-polymerized to the film. In the present invention, any means can be employed for generating radicals in the fluorine-based polymer film, but irradiation with ionizing radiation is preferable in order to generate uniform radicals throughout the film. As the type of ionizing radiation, γ rays, electron beams, β rays, neutron rays and the like can be used, but electron beams or γ rays are most preferable for implementation on an industrial scale. The ionizing radiation is obtained from radioactive isotopes such as cobalt 60, strontium 90, and cesium 137, or by an X-ray imaging apparatus, an electron beam accelerator, an ultraviolet irradiation apparatus, or the like.

本発明に係わる電離性放射線の照射線量は、１ｋＧｙから１０００ｋＧｙまでが好ましい。１ｋＧｙ未満ではラジカルが均一に生成せず、１０００ｋＧｙを越えると膜強度の低下を引き起こすことがある。グラフト重合法は一般に膜にラジカルを生成した後、ついでそれを反応性化合物と接触させる前照射法と、膜を反応性化合物と接触させた状態で膜にラジカルを生成させる同時照射法に大別される。本発明においては、いかなる方法も適用しうるが、オリゴマーの生成が少ない前照射法が最も好ましい。   The dose of ionizing radiation according to the present invention is preferably from 1 kGy to 1000 kGy. If it is less than 1 kGy, radicals are not uniformly generated, and if it exceeds 1000 kGy, the film strength may be reduced. Graft polymerization is generally divided into two types: a pre-irradiation method in which radicals are generated on a film and then contacted with a reactive compound, and a simultaneous irradiation method in which radicals are generated on the film in a state where the film is in contact with the reactive compound. Is done. In the present invention, any method can be applied, but the pre-irradiation method in which oligomer formation is small is most preferable.

本発明では、ラジカルを生成したフッ素系高分子膜と、親水性モノマーおよび架橋剤との接触は、気相でも液相で達成されるが、本発明においては、グラフト反応が均一にすすむ液相で接触させる方法が好ましい方法である。グラフト反応をさらに均一に進めるために、親水性モノマーおよび架橋剤はあらかじめ溶媒中に溶解させてから、フッ素系高分子膜と接触させることが望ましい。親水性モノマーおよび架橋剤を溶解する溶媒としては、均一溶解できるものであれば特に限定されない。このような溶媒として、例えば、エタノールやイソプロパノール、ｔ−ブチルアルコール等のアルコール類、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテル類、アセトンや２−ブタノン等のケトン類、水、あるいはそれらの混合物等が挙げられる。   In the present invention, the contact between the fluorine-based polymer film that has generated radicals, the hydrophilic monomer and the cross-linking agent is achieved in the liquid phase even in the gas phase, but in the present invention, the liquid phase in which the grafting reaction proceeds uniformly. The method of contacting with is a preferred method. In order to further promote the graft reaction more uniformly, it is desirable that the hydrophilic monomer and the crosslinking agent are dissolved in a solvent in advance and then contacted with the fluoropolymer film. The solvent for dissolving the hydrophilic monomer and the crosslinking agent is not particularly limited as long as it can be uniformly dissolved. Examples of such solvents include alcohols such as ethanol, isopropanol, and t-butyl alcohol, ethers such as diethyl ether and tetrahydrofuran, ketones such as acetone and 2-butanone, water, and mixtures thereof. .

本発明に係わるグラフト重合は、親水性モノマーと架橋剤を合わせた濃度で０．３容量％〜３０容量％の反応液を用い、フッ素系高分子膜１ｇに対して１０×１０−５〜１００×１０-5ｍ3の割合で反応を行うことが望ましい。該範囲内でグラフト重合を行えば、親水化層によって孔が埋まることもなく、均一性に優れた膜が得られる。
本発明に係わるグラフト重合時の反応温度は、重合反応が起これば特に限定されるものではないが、一般的に２０℃から８０℃までで行われる。
本発明に係わるグラフト重合は、フッ素系高分子膜と親水性のモノマーを接触させる際に、親水性のモノマーは気体、液体又は溶液のいずれの状態でもよいが、均一な親水化層を形成させるためには、液体又は溶液であることが好ましく、溶液であることが特に好ましい。In the graft polymerization according to the present invention, a reaction solution of 0.3% by volume to 30% by volume with a concentration of the hydrophilic monomer and the crosslinking agent is used, and 10 × 10 −5 to 100 to 1 g of the fluorine-based polymer film. It is desirable to carry out the reaction at a rate of × 10 −5 m 3 . If graft polymerization is performed within this range, pores are not filled with the hydrophilic layer, and a film having excellent uniformity can be obtained.
The reaction temperature at the time of graft polymerization according to the present invention is not particularly limited as long as the polymerization reaction occurs, but it is generally carried out at 20 ° C. to 80 ° C.
In the graft polymerization according to the present invention, when the fluoropolymer film and the hydrophilic monomer are brought into contact with each other, the hydrophilic monomer may be in any state of gas, liquid or solution, but forms a uniform hydrophilic layer. For this purpose, a liquid or a solution is preferable, and a solution is particularly preferable.

本発明に係わる親水性フッ素系高分子膜は、疎水性のフッ素系高分子膜に強固な架橋構造を有する親水化層を導入することで、免疫グロブリン１量体透過性と免疫グロブリン２量体阻止性を高いレベルで実現することができる。そのために、親水性モノマーに対して架橋剤を、下限としては、２０ｍｏｌ％以上、好ましくは３０ｍｏｌ％以上の割合で、上限としては、１０００ｍｏｌ％以下、好ましくは５００ｍｏｌ％以下、さらに好ましくは２００ｍｏｌ％以下の割合で用いることが良い。   The hydrophilic fluoropolymer membrane according to the present invention introduces an immunoglobulin monomer permeability and an immunoglobulin dimer by introducing a hydrophilic layer having a strong cross-linking structure into a hydrophobic fluoropolymer membrane. The blocking property can be realized at a high level. Therefore, the lower limit of the crosslinking agent with respect to the hydrophilic monomer is 20 mol% or more, preferably 30 mol% or more, and the upper limit is 1000 mol% or less, preferably 500 mol% or less, more preferably 200 mol% or less. It is good to use in the ratio.

本発明は、疎水性フッ素系高分子膜に親水化層を導入し、高い免疫グロブリン１量体透過性を実現する。そのために、疎水性フッ素系高分子膜にグラフトされるグラフト率は、下限として、３％以上、好ましくは４％以上、より好ましくは５％以上、上限として、５０％以下、好ましくは３０％以下、より好ましくは２０％以下が良い。グラフト率が３％未満であると膜の親水性が不足し、タンパク質の吸着にともなう濾過速度の急激な低下を引き起こす。５０％を越えると、比較的小さな孔が親水化層によって埋まってしまい、充分な濾過速度が得られない。ここで言うグラフト率とは下記式（３）で定義される値である。
グラフト率（％）＝
（グラフト後の膜重量−グラフト前の膜重量）／グラフト前の膜重量×１００ （３）In the present invention, a hydrophilic layer is introduced into a hydrophobic fluorine-based polymer membrane to achieve high immunoglobulin monomer permeability. Therefore, the graft ratio grafted onto the hydrophobic fluorine-based polymer membrane is 3% or more as a lower limit, preferably 4% or more, more preferably 5% or more, and the upper limit is 50% or less, preferably 30% or less. More preferably, 20% or less is good. When the graft ratio is less than 3%, the hydrophilicity of the membrane is insufficient, causing a rapid decrease in the filtration rate accompanying protein adsorption. If it exceeds 50%, relatively small pores are filled with the hydrophilic layer, and a sufficient filtration rate cannot be obtained. Here, the graft ratio is a value defined by the following formula (3).
Graft rate (%) =
(Membrane weight after grafting−membrane weight before grafting) / membrane weight before grafting × 100 (3)

本発明に係わるフッ素系高分子膜の親水性の度合いは、接触角によって評価することができる。２５℃における前進接触角および後退接触角の平均値が６０度以下であることが好ましく、４５度以下であることがより好ましく、更に好ましくは３０度以下である。また、簡便な評価法としては、フッ素系高分子膜を水と接触させた際に、膜の細孔内部に水が自発的に浸透すれば充分な親水性を持つと判断してよい。   The degree of hydrophilicity of the fluoropolymer film according to the present invention can be evaluated by the contact angle. The average value of the advancing contact angle and the receding contact angle at 25 ° C. is preferably 60 degrees or less, more preferably 45 degrees or less, and still more preferably 30 degrees or less. Further, as a simple evaluation method, it may be determined that when the fluorine-based polymer membrane is brought into contact with water, water sufficiently permeates into the pores of the membrane and has sufficient hydrophilicity.

本発明に係る親水性フッ素系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やＰＥＧ、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cut off of the hydrophilic fluoropolymer membrane according to the present invention is not limited as long as it can sufficiently separate immunoglobulin monomer and dimer, and is 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more. The upper limit should be set to less than 500,000, preferably 450,000 or less, and more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined by dead-end filtration using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), PEG, dextran and the like. The molecular weight is calculated as the molecular weight at which the blocking rate is 90% from the relationship between the molecular weight and the blocking rate.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を製造する方法は何ら限定しないが、例えば、溶融成膜法や湿式成膜法が挙げられる。溶融成膜法とは、膜材料と可塑剤を加熱することで均一混合させた後、冷却することにより相分離を発生させ、得られた膜フィルムから可塑剤を抽出することで膜を得る方法である。また、湿式成膜法とは膜材料を良溶媒に溶解した膜原液と、膜原液中の良溶媒とは混和可能だが膜材料とは相溶しない他の溶媒からなる凝固液とを接触させることで、接触表面から濃度誘起による相分離を発生させて、膜を得る方法である。   The method for producing the fluorine-based polymer film according to the present invention is not limited at all, and examples thereof include a melt film forming method and a wet film forming method. The melt film-forming method is a method in which a film material and a plasticizer are uniformly mixed by heating and then phase separation is generated by cooling, and a film is obtained by extracting the plasticizer from the obtained film film. It is. In addition, the wet film formation method involves contacting a membrane stock solution in which a membrane material is dissolved in a good solvent with a coagulation liquid composed of another solvent that is miscible with the good solvent in the membrane stock solution but is incompatible with the membrane material. In this method, concentration-induced phase separation is generated from the contact surface to obtain a membrane.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る代表的な溶融成膜法は、下記（ａ）〜（ｃ）の工程を含む。
（ａ）フッ素系高分子と可塑剤を含む組成物を該フッ素系高分子の結晶融点以上に加熱して均一溶解した後、該組成物を吐出口から吐出し、膜を形成する工程；
（ｂ）下記式（４）に定義するドラフト比が１以上１５以下となるような引取速度で該膜を引取りながら、該フッ素系高分子に対して部分的な溶解性を有する不揮発性液体を、該温度が１００℃以上に加熱された状態で、膜の一方の表面に接触させ、他方の膜表面は冷却する工程：
ドラフト比＝（膜の引取速度）／（組成物の吐出口における吐出速度） （４）
（ｃ）該可塑剤および該不揮発性液体の実質的な部分を除去する工程。A typical melt film forming method for obtaining a fluorine polymer film according to the present invention includes the following steps (a) to (c).
(A) a step of heating a composition containing a fluoropolymer and a plasticizer to a temperature equal to or higher than the crystal melting point of the fluoropolymer and uniformly dissolving the composition, and then discharging the composition from a discharge port to form a film;
(B) A non-volatile liquid having partial solubility in the fluoropolymer while taking the film at a take-off speed such that the draft ratio defined in the following formula (4) is 1 or more and 15 or less. In a state where the temperature is heated to 100 ° C. or higher, and the other membrane surface is cooled:
Draft ratio = (film take-off speed) / (discharge speed at composition discharge port) (4)
(C) removing a substantial part of the plasticizer and the non-volatile liquid;

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る溶融成膜法に用いられるポリマー濃度は、フッ素系高分子および可塑剤を含む組成物中に下限として、２０重量％以上、好ましくは３０重量％以上、より好ましくは３５重量％が良く、上限としては、９０重量％以下、好ましくは８０重量％以下、より７０重量％以下が良い。ポリマー濃度が２０重量％未満になると、成膜性が低下する、充分な力学強度が得られない等の不都合が発生する。ポリマー濃度が９０重量％を超えると、得られるフッ素系高分子膜の孔径が小さくなりすぎるとともに、空孔率が小さくなるため、濾過速度が低下し、実用に耐えない。   The polymer concentration used in the melt film-forming method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention is 20% by weight or more, preferably 30% by weight or more, as the lower limit in the composition containing the fluorine-based polymer and the plasticizer. More preferably, the content is 35% by weight, and the upper limit is 90% by weight or less, preferably 80% by weight or less, and more preferably 70% by weight or less. When the polymer concentration is less than 20% by weight, the film formability deteriorates, and there are problems such as insufficient mechanical strength. If the polymer concentration exceeds 90% by weight, the pore size of the resulting fluoropolymer membrane will be too small and the porosity will be small, so the filtration rate will be low and it will not be practical.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る溶融成膜法に用いられる可塑剤としては、フッ素系高分子膜を製造する組成でフッ素系高分子と混合した際に樹脂の結晶融点以上において均一溶液を形成し得る不揮発性溶媒を用いる。ここで言う不揮発性溶媒とは、大気圧下において２５０℃以上の沸点を有するものである。可塑剤の形態は、概ね常温２０℃において、液体であっても固体であっても差し支えない。また、フッ素系高分子との均一溶液を冷却した際に、常温以上の温度において熱誘起型固液相分離点を持つような、いわゆる固液相分離系の可塑剤を用いても良い。可塑剤の中には、フッ素系高分子との均一溶液を冷却した際に、常温以上の温度において熱誘起型液液相分離点を有するものもあるが、一般に、液液相分離系の可塑剤を用いた場合は、得られたフッ素系高分子膜は大孔径化する傾向がある。ここで用いられる可塑剤は単品又は複数の物質の混合物であってもよい。   The plasticizer used in the melt film-forming method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention includes a homogeneous solution at a temperature equal to or higher than the crystal melting point of the resin when mixed with the fluorine-based polymer in the composition for producing the fluorine-based polymer film. A non-volatile solvent capable of forming is used. The non-volatile solvent mentioned here has a boiling point of 250 ° C. or higher under atmospheric pressure. The plasticizer may be liquid or solid at a room temperature of 20 ° C. Further, a so-called solid-liquid phase separation type plasticizer that has a heat-induced solid-liquid phase separation point at a temperature of room temperature or higher when a homogeneous solution with a fluorine-based polymer is cooled may be used. Some plasticizers have a heat-induced liquid-liquid phase separation point at a temperature equal to or higher than room temperature when a homogeneous solution with a fluoropolymer is cooled. When an agent is used, the obtained fluoropolymer membrane tends to have a large pore size. The plasticizer used here may be a single item or a mixture of a plurality of substances.

熱誘起型固液相分離点を測定する方法は、フッ素系高分子と可塑剤を含む所定濃度の組成物を予め溶融混練したものを試料として用い、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）などの熱分析により該樹脂の発熱ピーク温度を測定することにより求めることができる。また、該樹脂の結晶化点を測定する方法は、予め該樹脂を溶融混練したものを試料として用い、同様に熱分析により求めることができる。   The method of measuring the heat-induced solid-liquid phase separation point uses a sample obtained by pre-melting and kneading a predetermined concentration of a composition containing a fluoropolymer and a plasticizer, and performing thermal analysis such as differential scanning calorimetry (DSC). By measuring the exothermic peak temperature of the resin. Further, the method for measuring the crystallization point of the resin can be obtained by thermal analysis in the same manner using a sample obtained by previously kneading the resin as a sample.

本発明に係わる可塑剤としては、国際公開ＷＯ０１／２８６６７号に開示されている可塑剤が挙げられる。即ち、下記式（５）で定義する組成物の相分離点降下定数αが、下限として、０℃以上、好ましくは１℃以上、より好ましくは５℃以上が良く、上限として、４０℃以下、好ましくは３５℃以下、より好ましくは３０℃以下の可塑剤が良い。相分離点降下定数が４０℃を超えると、孔径の均質性や強度が低下してしまうために好ましくない。
α＝１００×（Ｔｃ ０−Ｔｃ）÷（１００−Ｃ） （５）
αは相分離点降下定数（℃）
Ｔｃ ０はフッ素系高分子の結晶化温度（℃）
Ｔｃは組成物の熱誘起固液相分離点（℃）
Ｃは組成物中のフッ素系高分子の濃度（重量％）As a plasticizer concerning this invention, the plasticizer currently disclosed by international publication WO01 / 28667 is mentioned. That is, the phase separation point depression constant α of the composition defined by the following formula (5) is 0 ° C. or higher, preferably 1 ° C. or higher, more preferably 5 ° C. or higher as the lower limit, and the upper limit is 40 ° C. or lower. A plasticizer having a temperature of 35 ° C. or lower, more preferably 30 ° C. or lower is preferable. When the phase separation point depression constant exceeds 40 ° C., the uniformity and strength of the pore diameter are lowered, which is not preferable.
α = 100 × (T c 0 −T c ) ÷ (100−C) (5)
α is the phase separation point drop constant (℃)
T c 0 is the crystallization temperature of the fluoropolymer (° C.)
T c is the thermally induced solid-liquid phase separation point (° C.) of the composition
C is the concentration of fluoropolymer in the composition (% by weight)

具体的には、エステル鎖の炭素鎖長が７以下のフタル酸エステル類、アジピン酸エステル類、セバシン酸エステル類、エステル鎖の炭素鎖長が８以下のリン酸エステル類、クエン酸エステル類等が好適に使用でき、特にフタル酸ジヘプチル、フタル酸ジシクロヘキシル、フタル酸ジブチル、フタル酸ジエチル、フタル酸ジメチル、アジピン酸ジブチル、セバシン酸ジブチル、リン酸トリフェニル、リン酸トリクレジル、リン酸ジフェニルクレジル、リン酸トリ（２−エチルヘキシル）、リン酸トリブチル、アセチルクエン酸トリブチル等が特に好ましい。   Specifically, phthalic acid esters having an ester chain carbon chain length of 7 or less, adipic acid esters, sebacic acid esters, phosphate esters having an ester chain carbon chain length of 8 or less, citrate esters, etc. Can be preferably used, especially diheptyl phthalate, dicyclohexyl phthalate, dibutyl phthalate, diethyl phthalate, dimethyl phthalate, dibutyl adipate, dibutyl sebacate, triphenyl phosphate, tricresyl phosphate, diphenyl cresyl phosphate, Tri (2-ethylhexyl) phosphate, tributyl phosphate, tributyl acetylcitrate and the like are particularly preferable.

本発明において使用する組成物には、製造する膜の性能に影響を及ぼさない限り、目的に応じて、酸化防止剤、結晶核剤、帯電防止剤、難燃剤、滑剤、紫外線吸収剤等の添加剤を混合しても差し支えない。   In the composition used in the present invention, an antioxidant, a crystal nucleating agent, an antistatic agent, a flame retardant, a lubricant, an ultraviolet absorber and the like are added depending on the purpose as long as the performance of the film to be produced is not affected. Mixing agents may be used.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る溶融成膜法において、フッ素系高分子と可塑剤を含む組成物を均一溶解させる第一の方法は、該樹脂を押出機等の連続式樹脂混練装置に投入し、樹脂を加熱溶融させながら任意の比率で可塑剤を導入してスクリュー混練することにより、均一溶液を得る方法である。投入する樹脂の形態は、粉末状、顆粒状、ペレット状の何れでもよい。また、このような方法によって均一溶解させる場合は、可塑剤の形態は常温液体であることが好ましい。押出機としては、単軸スクリュー式押出機、二軸異方向スクリュー式押出機、二軸同方向スクリュー式押出機等が使用できる。   In the melt film-forming method for obtaining a fluoropolymer film according to the present invention, a first method for uniformly dissolving a composition containing a fluoropolymer and a plasticizer is a continuous resin kneading apparatus such as an extruder. In this method, a plasticizer is introduced at an arbitrary ratio while the resin is heated and melted, and screw kneading is performed to obtain a uniform solution. The form of the resin to be charged may be any of powder, granule, and pellet. Moreover, when making it melt | dissolve uniformly by such a method, it is preferable that the form of a plasticizer is a normal temperature liquid. As an extruder, a single screw type extruder, a biaxial different direction screw type extruder, a biaxial same direction screw type extruder, etc. can be used.

フッ素系高分子と可塑剤を含む組成物を均一溶解させる第二の方法は、ヘンシェルミキサー等の撹拌装置を用いて、フッ素系高分子と可塑剤を予め混合して分散させ、得られた組成物を押出機等の連続式樹脂混練装置に投入して溶融混練することにより、均一溶液を得る方法である。投入する組成物の形態については、可塑剤が常温液体である場合はスラリー状とし、可塑剤が常温固体である場合は粉末状や顆粒状等とすればよい。   A second method for uniformly dissolving a composition containing a fluoropolymer and a plasticizer is to mix and disperse the fluoropolymer and the plasticizer in advance using a stirring device such as a Henschel mixer. This is a method of obtaining a uniform solution by putting a product into a continuous resin kneader such as an extruder and melt-kneading. The form of the composition to be added may be a slurry when the plasticizer is a liquid at room temperature, and may be a powder or a granule when the plasticizer is a solid at room temperature.

フッ素系高分子と可塑剤を含む組成物を均一溶解させる第三の方法は、ブラベンダーやミル等の簡易型樹脂混練装置を用いる方法や、その他のバッチ式混練容器内で溶融混練する方法である。この方法によれば、バッチ式の工程となるため生産性は良好とは言えないが、簡易でかつ柔軟性が高いという利点がある。   The third method of uniformly dissolving a composition containing a fluoropolymer and a plasticizer is a method using a simple resin kneader such as a Brabender or a mill, or a method of melt kneading in another batch type kneading vessel. is there. According to this method, since it is a batch type process, the productivity is not good, but there is an advantage that it is simple and highly flexible.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る溶融成膜法において、フッ素系高分子と可塑剤を含む組成物をフッ素系高分子の結晶融点以上の温度に加熱均一溶解させた後、Ｔダイやサーキュラーダイ、環状紡口の吐出口から平膜状、中空糸状の形状に押出す（ａ）の工程の後に、冷却固化させて成型を行う（ｂ）の工程に移るが、この工程において、膜構造を形成する。   In the melt film-forming method for obtaining a fluoropolymer film according to the present invention, a composition containing a fluoropolymer and a plasticizer is heated and dissolved at a temperature equal to or higher than the crystal melting point of the fluoropolymer, After the step (a) of extruding from the discharge port of the circular die and the annular nozzle into a flat membrane shape and a hollow fiber shape, the process proceeds to the step (b) in which it is cooled and solidified and molded. Form a structure.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る溶融成膜法においては、均一に加熱溶解したフッ素系高分子と可塑剤を含む組成物を吐出口から吐出させ、下記式（６）で定義するドラフト比が１以上１５以下となるような引取速度で該膜を引取りながら、該フッ素系高分子に対して部分的な溶解性を有する不揮発性液体を接触させ、膜を形成させる。
ドラフト比＝（膜の引取速度）／（組成物の吐出口における吐出速度） （６）In the melt film-forming method for obtaining a fluorine-based polymer film according to the present invention, a composition containing a fluorine-based polymer and a plasticizer that are uniformly heated and dissolved is discharged from a discharge port, and a draft defined by the following formula (6) is used. While taking the film at a take-off speed such that the ratio is 1 or more and 15 or less, a non-volatile liquid having partial solubility is brought into contact with the fluoropolymer to form a film.
Draft ratio = (film take-off speed) / (discharge speed at composition discharge port) (6)

上記ドラフト比は、好ましくは下限としては、１．５以上、より好ましくは２以上が良く、好ましくは上限としては、１０以下、より好ましくは７以下が良い。ドラフト比が１未満では膜にテンションがかからないために成型性が低下し、１５を超える場合は、膜が引伸ばされるために、充分な厚みの粗大構造層を形成させることが難しい。ここで言う組成物の吐出口における吐出速度は下記式（７）で与えられる。
組成物の吐出口における吐出速度＝
（単位時間当りに吐出される組成物の体積）／（吐出口の面積） （７）The draft ratio is preferably 1.5 or more, more preferably 2 or more as the lower limit, and preferably 10 or less, more preferably 7 or less as the upper limit. When the draft ratio is less than 1, no tension is applied to the film and the moldability is lowered. When the draft ratio exceeds 15, the film is stretched and it is difficult to form a sufficiently thick coarse structure layer. The discharge speed at the discharge port of the composition said here is given by the following formula (7).
Discharge speed at the discharge port of the composition =
(Volume of composition discharged per unit time) / (area of discharge port) (7)

吐出速度は、下限として、１ｍ／分以上、好ましくは３ｍ／分以上が良く、上限として、６０ｍ／分以下、より好ましくは４０ｍ／分以下が良い。吐出速度が１ｍ／分未満の場合は、生産性が低下することに加えて、吐出量の変動が大きくなる等の問題が発生する。反対に、吐出速度が６０ｍ／分を超える場合は、吐出量が多いために吐出口で乱流が発生し、吐出状態が不安定になる場合がある。また、引取速度は吐出速度に合わせて設定することができ、下限としては、１ｍ／分以上、好ましくは３ｍ／分以上が良く、上限としては、２００ｍ／分以下、好ましく１５０ｍ／分以下が良い。引取速度が１ｍ／分未満の場合は、生産性、成型性が低下し、引取速度が２００ｍ／分を超える場合は、冷却時間が短くなる、膜にかかるテンションが大きくなることによって膜の断裂が起き易くなる。   The lower limit of the discharge speed is 1 m / min or more, preferably 3 m / min or more, and the upper limit is 60 m / min or less, more preferably 40 m / min or less. When the discharge speed is less than 1 m / min, in addition to a decrease in productivity, problems such as a large fluctuation in discharge amount occur. On the contrary, when the discharge speed exceeds 60 m / min, since the discharge amount is large, turbulent flow may occur at the discharge port, and the discharge state may become unstable. The take-up speed can be set in accordance with the discharge speed. The lower limit is 1 m / min or more, preferably 3 m / min or more, and the upper limit is 200 m / min or less, preferably 150 m / min or less. . When the take-up speed is less than 1 m / min, productivity and moldability are deteriorated, and when the take-up speed exceeds 200 m / min, the cooling time is shortened, and the tension on the film is increased, so that the film is broken. It becomes easy to get up.

本発明においては、可塑剤を除去するために抽出溶剤を使用する。抽出溶剤はフッ素系高分子に対して貧溶媒であり、かつ可塑剤に対して良溶媒であり、沸点がフッ素系高分子膜の融点より低いことが好ましい。このような抽出溶剤としては、例えば、ヘキサンやシクロヘキサン等の炭化水素類、塩化メチレンや１，１，１−トリクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、エタノールやイソプロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテル類、アセトンや２−ブタノン等のケトン類、又は水が挙げられる。   In the present invention, an extraction solvent is used to remove the plasticizer. The extraction solvent is preferably a poor solvent for the fluorine-based polymer and a good solvent for the plasticizer, and the boiling point is preferably lower than the melting point of the fluorine-based polymer film. Examples of such extraction solvents include hydrocarbons such as hexane and cyclohexane, halogenated hydrocarbons such as methylene chloride and 1,1,1-trichloroethane, alcohols such as ethanol and isopropanol, diethyl ether and tetrahydrofuran, and the like. Ethers, ketones such as acetone and 2-butanone, and water.

本発明において、可塑剤を除去する第一の方法は、抽出溶剤が入った容器中に所定の大きさに切り取ったフッ素系高分子膜を浸漬し充分に洗浄した後に、付着した溶剤を風乾させるか、又は熱風によって乾燥させることにより行う。この際、浸漬の操作や洗浄の操作を多数回繰り返して行うとフッ素系高分子膜中に残留する可塑剤が減少するので好ましい。また、浸漬、洗浄、乾燥の一連の操作中にフッ素系高分子膜の収縮を抑えるために、フッ素系高分子膜の端部を拘束することが好ましい。   In the present invention, the first method for removing the plasticizer is to immerse the fluoropolymer film cut into a predetermined size in a container containing the extraction solvent and thoroughly wash it, and then air-dry the attached solvent. Or by drying with hot air. At this time, it is preferable to repeat the dipping operation and the washing operation many times since the plasticizer remaining in the fluoropolymer film is reduced. Moreover, in order to suppress shrinkage | contraction of a fluorine-type polymer film | membrane during a series of operation of immersion, washing | cleaning, and drying, it is preferable to restrain the edge part of a fluorine-type polymer film | membrane.

可塑剤を除去する第二の方法は、抽出溶剤で満たされた槽の中に連続的にフッ素系高分子膜を送り込み、可塑剤を除去するのに充分な時間をかけて槽中に浸漬し、しかる後に付着した溶剤を乾燥させることにより行う。この際、槽内部を多段分割することにより濃度差がついた各槽に順次フッ素系高分子膜を送り込む多段法や、フッ素系高分子膜の走行方向に対し逆方向から抽出溶剤を供給して濃度勾配をつけるための向流法のような公知の手段を適用すると、抽出効率が高められ好ましい。第一および第二の方法においては、何れも可塑剤をフッ素系高分子膜から実質的に除去することが重要である。実質的に除去するとは、分離膜としての性能を損なわない程度にフッ素系高分子膜中の可塑剤を除去することを指し、フッ素系高分子膜中に残存する可塑剤の量は１重量％以下となることが好ましく、さらに好ましくは１００重量ｐｐｍ以下である。フッ素系高分子膜中に残存する可塑剤の量は、ガスクロマトグラフィや液体クロマトグラフィー等で定量することができる。また、抽出溶剤を、該溶剤の沸点未満、好ましくは沸点−５℃以下の範囲内で加温すると、可塑剤と溶剤との拡散を促進することができるので抽出効率を高めることができ好ましい。   The second method for removing the plasticizer is to continuously feed the fluoropolymer film into a tank filled with the extraction solvent and immerse it in the tank for a sufficient time to remove the plasticizer. Thereafter, the solvent adhered thereto is dried. At this time, the inside of the tank is divided into multiple stages, and the extraction solvent is supplied from the opposite direction to the running direction of the fluorine-based polymer film, or the multi-stage method in which the fluorine-based polymer film is sequentially fed to each tank having a concentration difference. It is preferable to apply a known means such as a counter-current method for providing a concentration gradient because the extraction efficiency is increased. In both the first and second methods, it is important to substantially remove the plasticizer from the fluoropolymer film. Substantially removing means removing the plasticizer in the fluoropolymer membrane to such an extent that the performance as a separation membrane is not impaired. The amount of the plasticizer remaining in the fluoropolymer membrane is 1% by weight. It is preferable that it is below, More preferably, it is 100 weight ppm or less. The amount of the plasticizer remaining in the fluorine polymer film can be quantified by gas chromatography, liquid chromatography, or the like. Further, it is preferable to heat the extraction solvent within the range of less than the boiling point of the solvent, preferably within the range of boiling point -5 ° C. or less, because the diffusion between the plasticizer and the solvent can be promoted.

本発明においては、可塑剤を除去する工程の前若しくは後、又は前後において、フッ素系高分子膜に加熱処理を施すと、可塑剤を除去した際のフッ素系高分子膜の収縮の低減、フッ素系高分子膜の強度の向上、および耐熱性の向上といった効果が得られる。加熱処理の方法としては、熱風中にフッ素系高分子膜を配して行う方法、熱媒中にフッ素系高分子膜を浸漬して行う方法、または加熱温調した金属製のロール等にフッ素系高分子膜を接触させて行う方法がある。加熱処理において、寸法を固定した状態で行うと、特に微細な孔の閉塞を防ぐことができるために好ましい。加熱処理の温度は、融点以下で行う事が好ましい。ポリフッ化ビニリデンの場合、下限としては１２１℃以上、好ましくは１２５以下が良く、上限としては１７０℃以下、好ましくは１６５℃以下が良い。融点を超えると、加熱処理中に膜が破断する、細孔が潰れる等の不都合が発生する可能性がある。   In the present invention, when the fluoropolymer film is subjected to heat treatment before, after, or before and after the step of removing the plasticizer, the shrinkage of the fluoropolymer film when the plasticizer is removed is reduced. The effects of improving the strength and heat resistance of the polymer film can be obtained. As a heat treatment method, a fluorine polymer film is placed in hot air, a fluorine polymer film is immersed in a heat medium, or a metal roll whose temperature is controlled by heating. There is a method in which a polymer film is brought into contact. In the heat treatment, it is preferable that the dimensions are fixed because it is possible to prevent blocking of fine holes. The temperature of the heat treatment is preferably performed below the melting point. In the case of polyvinylidene fluoride, the lower limit is 121 ° C. or higher, preferably 125 or lower, and the upper limit is 170 ° C. or lower, preferably 165 ° C. or lower. If the melting point is exceeded, problems such as breakage of the membrane and collapse of the pores may occur during the heat treatment.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る代表的な湿式成膜法について説明する。
本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる良溶媒とは、水に混和可能なものであれば何ら限定しないが、２０℃の純水１００ｇに１０ｇ以上溶解可能であり、かつ膜材料のフッ素系高分子膜を５重量％以上溶解するものが好ましい。例えば、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトン、γ−ブチロラクトンなどが挙げられる。危険性、安全性、毒性の面からジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドンが好ましく用いられる。これらの溶媒は、単独で、もしくは２種以上組み合わせて使用できる。A typical wet film forming method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention will be described.
The good solvent used in the wet film formation method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention is not limited as long as it is miscible with water, but 10 g or more can be dissolved in 100 g of pure water at 20 ° C. Further, it is preferable to dissolve 5% by weight or more of the fluorine-based polymer film as a film material. For example, N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, acetone, γ-butyrolactone and the like can be mentioned. From the viewpoint of danger, safety and toxicity, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylacetamide, and N-methyl-2-pyrrolidone are preferably used. These solvents can be used alone or in combination of two or more.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液は、目的の構造および性能を有するフッ素系高分子膜を製造できれば何ら限定はしない。膜原液におけるフッ素系高分子の濃度に関しては、濃度を上げるにつれて成膜性は向上するが、逆に膜の空孔率は減少し、透水性が低下する傾向がある。そのため、膜原液全体を１００重量％とした場合、フッ素系高分子の濃度範囲としては分子量によって異なるが、下限として２重量％以上、好ましくは５重量％以上、特に好ましくは１０重量％以上である。また上限としては５０重量％以下、好ましくは４０重量％以下、特に好ましくは３０重量％以下で均一に溶解した溶液が好適に使用される。   The membrane stock solution used in the wet film-forming method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention is not limited as long as a fluorine-based polymer film having the desired structure and performance can be produced. Regarding the concentration of the fluoropolymer in the membrane stock solution, the film formability improves as the concentration increases, but conversely, the porosity of the membrane decreases and the water permeability tends to decrease. Therefore, when the whole membrane stock solution is 100% by weight, the concentration range of the fluoropolymer varies depending on the molecular weight, but the lower limit is 2% by weight or more, preferably 5% by weight or more, particularly preferably 10% by weight or more. . Further, an upper limit of 50% by weight or less, preferably 40% by weight or less, particularly preferably 30% by weight or less, is preferably used.

また、膜原液の温度は、下限として０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上、上限として膜原液中の良溶媒沸点以下が好適に使用される。この温度条件下であれば、膜原液として好ましい膜への加工を行うのに好適な粘度を得ることができる。   In addition, the lower limit of the temperature of the membrane stock solution is preferably 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher, and the upper limit is a good solvent boiling point or lower in the membrane stock solution. If it is this temperature condition, the viscosity suitable for processing into a film | membrane preferable as a film | membrane stock solution can be obtained.

本発明において使用する膜原液には、製造する膜の性能に影響を及ぼさない限り、目的に応じて、酸化防止剤、結晶核剤、帯電防止剤、難燃剤、滑剤、紫外線吸収剤等の添加剤を混合しても差し支えない。   Addition of antioxidants, crystal nucleating agents, antistatic agents, flame retardants, lubricants, ultraviolet absorbers, etc., depending on the purpose, as long as the membrane undiluted solution used in the present invention does not affect the performance of the membrane to be produced. Mixing agents may be used.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法で親水性高分子を用いる場合、その役割は、前述のとおり、主に外側の多孔支持層部分の多孔構造を促進して形成させるところにあり、膜原液の増粘効果を奏するものである。膜原液中に添加する親水性高分子の量は安定した成膜を行うために親水性ポリマーの分子量と添加量を適宜調整することもできる。膜原液の粘度が低い場合、成膜時に膜破れや膜切れなどを起こし、成膜性が不安定になる場合がある。逆に膜原液の粘度が高すぎる場合、多孔支持層を充分に成長させることができず、外層の多孔構造の空孔率が不十分となり、目的の高い透過性を持つ膜が得られにくくなる。更には、膜原液の粘度が上がることで、口金から吐出された原液がメルトフラクチャーを起こすことも危惧される。   When the hydrophilic polymer is used in the wet film forming method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention, the role is mainly to promote the porous structure of the outer porous support layer part as described above. Therefore, the thickening effect of the membrane undiluted solution is exhibited. The amount of the hydrophilic polymer added to the membrane stock solution can be adjusted as appropriate in order to achieve stable film formation. When the viscosity of the film stock solution is low, film breakage or film breakage may occur at the time of film formation, and the film formability may become unstable. Conversely, if the viscosity of the membrane stock solution is too high, the porous support layer cannot be sufficiently grown, the porosity of the porous structure of the outer layer will be insufficient, and it will be difficult to obtain a membrane with the desired high permeability. . Furthermore, there is a concern that the stock solution discharged from the die may cause a melt fracture due to an increase in the viscosity of the membrane stock solution.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法において、膜原液中の親水性高分子の濃度の上限値は、使用する親水性高分子の種類と分子量に応じて最適値が決定されるが、通常４０重量％以下、好ましくは３０重量％以下である。   In the wet film formation method for obtaining the fluorine polymer film according to the present invention, the upper limit of the concentration of the hydrophilic polymer in the membrane stock solution is determined in accordance with the type and molecular weight of the hydrophilic polymer to be used. However, it is usually 40% by weight or less, preferably 30% by weight or less.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液としては、膜原液と接触したとき濃度誘起相分離を引き起こし、接触面から膜を形成することができる物質であれば何ら限定しない。例えば、純水、モノアルコール系溶媒、ポリオール系溶媒又はこれら２種以上の混合液などが好適に使用される。モノアルコール系溶媒の例としては、メタノール、エタノール、プロパノールなどが挙げられる。また、ポリオール系溶媒の例としては、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，２−ブタンジオール、１，４−ブタンジオールなどが挙げられる。凝固液中にポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリ（メタ）アクリルアミド、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、ポリ（メタ）アクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリイタコン酸、ポリフマル酸、ポリシトラコン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどの水溶性高分子を添加することも可能である。添加する水溶性高分子の分子量や添加量にも依存するが、これらを添加することにより濾過性能を向上させることが可能である。また、凝固液中に、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ−ブチロラクトンなどの良溶媒を含有させることも可能である。特に、良溶媒を非溶媒に含有させた凝固液を使用する場合、その組成は、膜原液の組成、膜原液と凝固液との接触温度などで異なるが、概ね、凝固液全体を１００重量％とした場合、良溶媒の重量％として９０重量％以下が好ましい。この範囲であれば、膜を形成するのに必要十分な濃度誘起相分離を十分に達成できる。   The coagulating liquid used in the wet film-forming method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention is a substance that causes concentration-induced phase separation when in contact with the film stock solution and can form a film from the contact surface. There is no limitation. For example, pure water, a monoalcohol solvent, a polyol solvent, or a mixture of two or more of these is preferably used. Examples of the monoalcohol solvent include methanol, ethanol, propanol and the like. Examples of the polyol solvent include ethylene glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, tetraethylene glycol, glycerin, propylene glycol, 1,2-butanediol, 1,4-butanediol, and the like. In the coagulation liquid, polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, poly (meth) acrylamide, polyvinylpyrrolidone, polyhydroxyacrylate, polyhydroxymethacrylate, poly (meth) acrylic acid, Polymethacrylic acid, polyitaconic acid, polyfumaric acid, polycitraconic acid, poly-p-styrene sulfonic acid, sodium poly-p-styrene sulfonate, N, N-dimethyl (meth) acrylamide, carboxymethylcellulose, starch, corn starch, polychitosan It is also possible to add a water-soluble polymer such as polychitin. Although it depends on the molecular weight and the amount of the water-soluble polymer to be added, the filtration performance can be improved by adding these. The coagulation liquid may contain a good solvent such as N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, and γ-butyrolactone. In particular, when using a coagulation liquid containing a good solvent in a non-solvent, the composition differs depending on the composition of the membrane stock solution, the contact temperature between the membrane stock solution and the coagulation liquid, etc. In this case, 90% by weight or less is preferable as the weight% of the good solvent. Within this range, concentration-induced phase separation necessary and sufficient for forming a film can be sufficiently achieved.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度であれば何ら限定しないが、成膜温度の下限としては０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。なお、平膜においては凝固液温度で決まる。   The film formation temperature in the wet film formation method for obtaining the fluoropolymer film according to the present invention is not limited as long as it is a temperature at which the film stock solution and the coagulation liquid are brought into contact with each other to cause concentration-induced phase separation. The lower limit of the film temperature is 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. For hollow fiber membranes, it depends on the temperature of the double nozzle. In a flat membrane, it is determined by the coagulation liquid temperature.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液、凝固液、特に中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液（以後、内部凝固液）は均一溶解後に、溶存気体を除去することが望ましい。溶存気体を除去することで、溶存気体の発泡による膜の欠陥を著しく改善することできる。また、溶存気体のなかでも特に酸素を除くことで、高い温度下での膜加工による材料への酸化反応が減少する。膜原液および凝固液、内部凝固液に気体が溶存していない場合は、この工程を省略しても良い。   Membrane stock solution and coagulation solution used in the wet film formation method for obtaining the fluorine-based polymer membrane according to the present invention, particularly coagulation solution (hereinafter referred to as internal coagulation solution) passing through the inside of the yarn during the production of the hollow fiber membrane, is dissolved after uniform dissolution. It is desirable to remove the gas. By removing the dissolved gas, film defects due to foaming of the dissolved gas can be remarkably improved. Further, by removing oxygen from the dissolved gas, the oxidation reaction to the material due to film processing at a high temperature is reduced. This step may be omitted when no gas is dissolved in the membrane stock solution, the coagulation solution, and the internal coagulation solution.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、二重紡口から出た膜原液と内部凝固液による凝固をより促進するため、紡口直下に槽（以後、凝固槽）を設け、凝固槽中に満たされた凝固液（以後、外部凝固液）と接触させることができる。   In the case of producing a hollow fiber membrane by a wet film forming method for obtaining a fluoropolymer membrane according to the present invention, a tank is provided directly below the spinning nozzle in order to further promote the coagulation by the membrane stock solution and the internal coagulating solution that has come out of the double spinning nozzle. (Hereinafter referred to as a coagulation tank) can be provided and brought into contact with a coagulation liquid (hereinafter referred to as an external coagulation liquid) filled in the coagulation tank.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、中空糸膜の断面構造を均一構造のみならず、様々な不均一構造まで、自由に構造制御するために紡口から外部凝固液面までの距離（以後、空走距離）および紡口から外部凝固液面までの空間の温度と湿度を調整することができる。空間の温度と湿度を調整できれば何ら限定しないが、例えば、空走距離の下限としては０．００１ｍ以上、好ましくは０．００５ｍ以上、特に好ましくは０．０１ｍ以上、上限として２．０ｍ以下、好ましくは１．５ｍ以下、特に好ましくは１．２ｍ以下である。また紡口から外部凝固面までの空間における温度は、下限として１０℃以上、好ましくは２０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。湿度は温度との兼ね合いで変化するが、下限として０％以上、好ましくは１０％以上、特に好ましくは３０％以上であり、上限としては１００％以下である。   When a hollow fiber membrane is produced by a wet film-forming method for obtaining a fluorine-based polymer membrane according to the present invention, in order to freely control the cross-sectional structure of the hollow fiber membrane not only to a uniform structure but also to various non-uniform structures. In addition, the distance from the spinneret to the external coagulation liquid surface (hereinafter referred to as idle running distance) and the temperature and humidity of the space from the spinneret to the external coagulation liquid surface can be adjusted. Although there is no limitation as long as the temperature and humidity of the space can be adjusted, for example, the lower limit of the free running distance is 0.001 m or more, preferably 0.005 m or more, particularly preferably 0.01 m or more, and the upper limit is 2.0 m or less, preferably Is 1.5 m or less, particularly preferably 1.2 m or less. The temperature in the space from the spinning nozzle to the external solidification surface is 10 ° C. or higher, preferably 20 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher as the lower limit. The humidity varies depending on the temperature, but the lower limit is 0% or more, preferably 10% or more, particularly preferably 30% or more, and the upper limit is 100% or less.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合の巻取り速度は、製造条件である各種因子、紡口の形状、紡糸原液の組成、内部凝固液および外部凝固液の組成、原液および各凝固液の温度等で変化し得るが、概ね３００ｍ／時間から９０００ｍ／時間の速度が選択される。   The winding speed in the case of producing a hollow fiber membrane by a wet film-forming method for obtaining a fluorine-based polymer membrane according to the present invention includes various factors as production conditions, the shape of the spinning nozzle, the composition of the spinning stock solution, Although it may vary depending on the composition of the external coagulation liquid, the temperature of the raw liquid and each coagulation liquid, a speed of approximately 300 m / hour to 9000 m / hour is selected.

本発明に係わるフッ素系高分子膜を得る湿式成膜法においては、凝固液による凝固後、膜の強度を強めるため脱溶媒槽に浸漬して脱溶媒を促進することができる。脱溶媒液には、凝固液による濃度誘起相分離後、残存している溶媒を除去できる溶媒であり、膜を溶解しないものであればいずれの溶媒でも用いることが可能である。一般には、水、エタノール等を用いることが多い。   In the wet film-forming method for obtaining the fluorine-based polymer film according to the present invention, after coagulation with the coagulation liquid, the solvent removal can be promoted by immersing in a solvent removal tank in order to increase the strength of the film. The solvent removal liquid is a solvent that can remove the remaining solvent after concentration-induced phase separation by the coagulation liquid, and any solvent that does not dissolve the membrane can be used. In general, water, ethanol or the like is often used.

本発明に係わる湿式成膜法により得られた未乾燥の本発明のフッ素系高分子膜の乾燥温度は、乾燥中の膜破断が生じない温度であれば何ら限定はしないが、例えば、２０℃以上からフッ素系高分子の溶融温度以下の温度範囲内で乾燥を行う。乾燥温度は、下限として、３０℃以上、好ましくは４０℃以上が良く、上限としては１２０℃以下、好ましくは１００℃以下が良い。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１時間以上から４８時間までが選択される。 The drying temperature of the undried fluorinated polymer film of the present invention obtained by the wet film-forming method according to the present invention is not limited as long as it does not cause film breakage during drying. From the above, drying is performed within a temperature range below the melting temperature of the fluoropolymer. The drying temperature has a lower limit of 30 ° C. or higher, preferably 40 ° C. or higher, and the upper limit of 120 ° C. or lower, preferably 100 ° C. or lower. The time required for drying is determined by the relationship with the drying temperature, but is generally selected from 0.01 hours to 48 hours.

本発明に係わるオレフィン系高分子膜は、主としてオレフィン系高分子からなるものであるが、オレフィン系高分子の特性を損なわない範囲で他の高分子量物質や添加物を含有していてもよい。これらの高分子を二種以上、組み合わせて実施することも可能である。
本発明に係わるオレフィン系高分子は、オレフィン類やアルケンをモノマーとして合成される高分子であり、例えば、ポリエチレンやポリプロピレン、ポリ４−メチル１−ペンテンなどが挙げられる。さらに、上記ホモ重合体および上記共重合体を混合して使用することもできる。その中でも、ポリエチレンが好ましい。The olefin polymer film according to the present invention is mainly composed of an olefin polymer, but may contain other high molecular weight substances and additives as long as the characteristics of the olefin polymer are not impaired. It is also possible to carry out by combining two or more of these polymers.
The olefin polymer according to the present invention is a polymer synthesized using olefins or alkenes as monomers, and examples thereof include polyethylene, polypropylene, and poly-4-methyl 1-pentene. Furthermore, the said homopolymer and the said copolymer can also be mixed and used. Among these, polyethylene is preferable.

本発明に係わるオレフィン系高分子の重量平均分子量は、下限としては５万以上、好ましくは１０万以上、特に好ましくは１５万以上が良く、上限として５００万以下、好ましくは２００万以下、特に好ましくは１００万以下が良い。一般に平均分子量が１００万を超えるような樹脂については、ＧＰＣ測定が困難であるので、その代用として粘度法による粘度平均分子量をあてることができる。平均分子量が５万より小さいと、溶融成型の際のメルトテンションが小さくなり成形性が悪くなったり、膜の力学強度が低くなったりするので好ましくない。平均分子量が５００万を超えると、均一な溶融混練が難しくなるために好ましくない。   The weight average molecular weight of the olefin polymer according to the present invention is preferably 50,000 or more, preferably 100,000 or more, particularly preferably 150,000 or more as a lower limit, and 5 million or less, preferably 2 million or less, particularly preferably as an upper limit. Is preferably 1 million or less. In general, resins having an average molecular weight exceeding 1,000,000 are difficult to measure by GPC, and as an alternative, the viscosity average molecular weight determined by the viscosity method can be assigned. If the average molecular weight is less than 50,000, the melt tension at the time of melt molding becomes small and the moldability is deteriorated, and the mechanical strength of the film is lowered. An average molecular weight exceeding 5 million is not preferable because uniform melt-kneading becomes difficult.

免疫グロブリンの吸着による閉塞を防ぐために、膜に親水性を付与することが必要となる。親水化処理の方法としては、例えば、界面活性剤を含む溶液にオレフィン系高分子膜を浸漬した後、乾燥してオレフィン系高分子膜中に界面活性剤を残留させる方法、電子線やガンマ線等の放射線を照射する、あるいは過酸化物を用いることによって、オレフィン系高分子膜の細孔表面に親水性の（メタ）アクリル系モノマー等をグラフトする方法、成膜時に親水性高分子を予め混合する方法、親水性高分子を含む溶液にオレフィン系高分子膜を浸漬した後、乾燥してオレフィン系高分子膜の細孔表面に親水性高分子の被膜を作る方法等が挙げられるが、親水化の永続性や親水性添加物の漏洩の可能性を考慮するとグラフト重合が最も好ましい。特に、特開昭６２−１７９５４０号公報、特開昭６２−２５８７１１号公報、および米国特許第４，８８５，０８６号明細書に開示された放射線グラフト重合法による親水化処理は、膜内全領域の細孔内表面に均一な親水化層を形成し得る点で好ましい。   In order to prevent occlusion due to immunoglobulin adsorption, it is necessary to impart hydrophilicity to the membrane. Examples of the hydrophilization treatment include a method in which an olefin polymer film is immersed in a solution containing a surfactant and then dried to leave the surfactant in the olefin polymer film. A method of grafting a hydrophilic (meth) acrylic monomer or the like onto the pore surface of an olefin polymer film by irradiating the above-mentioned radiation or using a peroxide. And a method of immersing the olefin polymer film in a solution containing the hydrophilic polymer and then drying to form a hydrophilic polymer film on the pore surface of the olefin polymer film. Graft polymerization is most preferable in view of the persistence of the formation and the possibility of leakage of hydrophilic additives. In particular, the hydrophilic treatment by the radiation graft polymerization method disclosed in JP-A-62-2179540, JP-A-62-258711, and U.S. Pat. It is preferable in that a uniform hydrophilic layer can be formed on the surface of the pores.

本発明のグラフト重合に使用する親水性モノマーとしては、ビニル基を有する親水性モノマーであれば特に限定されるものではない。好ましくは、１個のビニル基を有するモノマーが良い。さらに、スルホン基、カルボキシル基、アミド基、中性水酸基、スルフォニル基、スルホン酸基等を含む（メタ）アクリル系モノマーが好適に使用できるが、免疫グロブリンを含む溶液を濾過する場合には中性水酸基を含むモノマーが特に好ましい。本発明に係わる親水性モノマーとは、大気圧下で、２５℃の純水に１容量％混合させた時に均一溶解するモノマーである。例えば、ヒドロキシプロピルアクリレート等のヒドロキシル基を有する、もしくはその前駆体となる官能基を有するビニルモノマー、メタクリル酸トリエチルアンモニウムエチル等のアニオン交換基を有するビニルモノマー、メタクリル酸スルホプロピル等のカチオン交換基を有するビニルモノマー、ビニルピロリドン等のアミド結合を有するビニルモノマー等が挙げられる。中でも、１個以上のヒドロキシル基、あるいはその前駆体となる官能基を有するビニルモノマーが、免疫グロブリン溶液の透過性が最も高いため好ましい。   The hydrophilic monomer used in the graft polymerization of the present invention is not particularly limited as long as it is a hydrophilic monomer having a vinyl group. A monomer having one vinyl group is preferable. Furthermore, (meth) acrylic monomers containing a sulfone group, a carboxyl group, an amide group, a neutral hydroxyl group, a sulfonyl group, a sulfonic acid group, etc. can be suitably used, but when filtering a solution containing an immunoglobulin, A monomer containing a hydroxyl group is particularly preferred. The hydrophilic monomer according to the present invention is a monomer that is uniformly dissolved when mixed with 1% by volume of pure water at 25 ° C. under atmospheric pressure. For example, a vinyl monomer having a hydroxyl group such as hydroxypropyl acrylate, or a functional group serving as a precursor thereof, a vinyl monomer having an anion exchange group such as triethylammonium ethyl methacrylate, or a cation exchange group such as sulfopropyl methacrylate. And vinyl monomers having an amide bond such as vinyl pyrrolidone. Among these, a vinyl monomer having one or more hydroxyl groups or a functional group serving as a precursor thereof is preferable because it has the highest permeability of the immunoglobulin solution.

具体的には、ヒドロキシプロピルアクリレート、２−ヒドロキシエチルメタクリレート等のアクリル酸又はメタクリル酸と多価アルコールのエステル類、アリルアルコール等の不飽和結合を有するアルコール類、および酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル等のエノールエステル類等が挙げられる。さらに、１個のビニル基を有する親水性モノマーとともに、２個以上のビニル基を有する架橋剤を、上記親水性モノマーに対して、２０ｍｏｌ％以上、１０００ｍｏｌ％以下の割合で用いて、グラフト重合法によって共重合させることにより、充分に親水化が達成されたものである。   Specifically, acrylic acid such as hydroxypropyl acrylate and 2-hydroxyethyl methacrylate or esters of methacrylic acid and polyhydric alcohols, alcohols having unsaturated bonds such as allyl alcohol, vinyl acetate, vinyl propionate, etc. Examples include enol esters. Further, a graft polymerization method using a hydrophilic monomer having one vinyl group and a crosslinking agent having two or more vinyl groups in a proportion of 20 mol% or more and 1000 mol% or less with respect to the hydrophilic monomer. By the copolymerization, sufficient hydrophilization was achieved.

本発明に係わる使用する架橋剤は、上記親水性モノマーと共重合しうる２個以上のビニル基を有する架橋剤であり、親水性モノマーと同時に膜に接触させることにより導入する。架橋剤は、数平均分子量２００以上、２０００以下であることが好ましく、より好ましくは数平均分子量２５０以上、１０００以下、最も好ましくは数平均分子量３００以上、６００以下である。架橋剤の数平均分子量が２００以上、２０００以下であると、免疫グロブリン溶液の高い濾過速度が得られ好ましい。本発明においては、２個以上のビニル基を有する架橋剤であれば、いかなる架橋剤も使用できるが、親水性の架橋剤が好ましい。ここで親水性の架橋剤とは、大気圧下で、２５℃の純水に１容量％混合させた時に均一溶解する架橋剤である。   The cross-linking agent used according to the present invention is a cross-linking agent having two or more vinyl groups that can be copolymerized with the hydrophilic monomer, and is introduced by contacting the membrane simultaneously with the hydrophilic monomer. The cross-linking agent preferably has a number average molecular weight of 200 or more and 2000 or less, more preferably a number average molecular weight of 250 or more and 1000 or less, and most preferably a number average molecular weight of 300 or more and 600 or less. When the number average molecular weight of the crosslinking agent is 200 or more and 2000 or less, a high filtration rate of the immunoglobulin solution is obtained, which is preferable. In the present invention, any crosslinking agent having two or more vinyl groups can be used, but a hydrophilic crosslinking agent is preferred. Here, the hydrophilic cross-linking agent is a cross-linking agent that is uniformly dissolved when mixed with 1% by volume of pure water at 25 ° C. under atmospheric pressure.

本発明で用いられる架橋剤の具体例としては、芳香族系ではジビニルベンゼン誘導体、脂肪族系ではエチレングリコールジメタクリレート、ポリエチレングリコールジメタクリレート等のようなメタクリル酸系の架橋剤、エチレングリコールジアクリレート、ポリエチレングリコールジアクリレート等のような（メタ）アクリル酸系の架橋剤等が挙げられる。また、トリメチロールプロパントリメタクリレートのような３個の反応性基を有する架橋剤も用いることが出来る。また、架橋剤は２種類以上の混合物も用いることが出来る。本発明において、ポリエチレングリコールジメタクリレート、ポリエチレングリコールジアクリレート、またはそれらの混合物を用いることが、免疫グロブリン１量体透過性と免疫グロブリン２量体除去性能の観点から最も好ましい。   Specific examples of the crosslinking agent used in the present invention include divinylbenzene derivatives for aromatic systems, methacrylic acid crosslinking agents such as ethylene glycol dimethacrylate and polyethylene glycol dimethacrylate for aliphatic systems, ethylene glycol diacrylate, Examples include (meth) acrylic acid-based crosslinking agents such as polyethylene glycol diacrylate. A crosslinking agent having three reactive groups such as trimethylolpropane trimethacrylate can also be used. In addition, a mixture of two or more kinds of crosslinking agents can be used. In the present invention, it is most preferable to use polyethylene glycol dimethacrylate, polyethylene glycol diacrylate, or a mixture thereof from the viewpoints of immunoglobulin monomer permeability and immunoglobulin dimer removal performance.

本発明に係わるグラフト重合法とは、ラジカルが発生させる方法であれば何ら限定しないが、例えば、放射線開始剤の添加や電離性放射線や化学反応等の手段によってオレフィン系高分子膜にラジカルを生成させ、そのラジカルを開始点として、該膜にモノマーをグラフト重合させる反応である。本発明において、オレフィン系高分子膜にラジカルを生成させるためにはいかなる手段も採用しうるが、膜全体に均一なラジカルを生成させるためには、電離性放射線の照射が好ましい。電離性放射線の種類としては、γ線、電子線、β線、中性子線等が利用できるが、工業規模での実施には電子線またはγ線が最も好ましい。電離性放射線はコバルト６０、ストロンチウム９０、およびセシウム１３７などの放射性同位体から、またはＸ線撮影装置、電子線加速器および紫外線照射装置等により得られる。   The graft polymerization method according to the present invention is not particularly limited as long as it is a method for generating radicals. For example, radicals are generated in an olefin polymer film by means of addition of a radiation initiator, ionizing radiation, chemical reaction, or the like. Then, starting from the radical, the monomer is graft-polymerized to the film. In the present invention, any means can be employed for generating radicals in the olefin polymer film, but irradiation with ionizing radiation is preferable in order to generate uniform radicals throughout the film. As the type of ionizing radiation, γ rays, electron beams, β rays, neutron rays and the like can be used, but electron beams or γ rays are most preferable for implementation on an industrial scale. The ionizing radiation is obtained from radioactive isotopes such as cobalt 60, strontium 90, and cesium 137, or by an X-ray imaging apparatus, an electron beam accelerator, an ultraviolet irradiation apparatus, or the like.

本発明に係わる電離性放射線の照射線量は、１ｋＧｙから１０００ｋＧｙまでが好ましい。１ｋＧｙ未満ではラジカルが均一に生成せず、１０００ｋＧｙを越えると膜強度の低下を引き起こすことがある。グラフト重合法は一般に膜にラジカルを生成した後、ついでそれを反応性化合物と接触させる前照射法と、膜を反応性化合物と接触させた状態で膜にラジカルを生成させる同時照射法に大別される。本発明においては、いかなる方法も適用しうるが、オリゴマーの生成が少ない前照射法が最も好ましい。   The dose of ionizing radiation according to the present invention is preferably from 1 kGy to 1000 kGy. If it is less than 1 kGy, radicals are not uniformly generated, and if it exceeds 1000 kGy, the film strength may be reduced. Graft polymerization is generally divided into two types: a pre-irradiation method in which radicals are generated on a film and then contacted with a reactive compound, and a simultaneous irradiation method in which radicals are generated on the film in a state where the film is in contact with the reactive compound. Is done. In the present invention, any method can be applied, but the pre-irradiation method in which oligomer formation is small is most preferable.

本発明では、ラジカルを生成したオレフィン系高分子膜と、親水性モノマーおよび架橋剤との接触は、気相でも液相で達成されるが、本発明においては、グラフト反応が均一にすすむ液相で接触させる方法が好ましい方法である。グラフト反応をさらに均一に進めるために、親水性モノマーおよび架橋剤はあらかじめ溶媒中に溶解させてから、高分子オレフィン系高分子膜と接触させることが望ましい。親水性モノマーおよび架橋剤を溶解する溶媒としては、均一溶解できるものであれば特に限定されない。このような溶媒として、例えば、エタノールやイソプロパノール、ｔ−ブチルアルコール等のアルコール類、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテル類、アセトンや２−ブタノン等のケトン類、水、あるいはそれらの混合物等が挙げられる。   In the present invention, the contact between the olefin polymer film that has generated radicals, the hydrophilic monomer and the crosslinking agent is achieved in the liquid phase even in the gas phase, but in the present invention, the liquid phase in which the grafting reaction proceeds uniformly. The method of contacting with is a preferred method. In order to further promote the graft reaction more uniformly, it is desirable that the hydrophilic monomer and the crosslinking agent are dissolved in a solvent in advance and then contacted with the polymer olefin polymer membrane. The solvent for dissolving the hydrophilic monomer and the crosslinking agent is not particularly limited as long as it can be uniformly dissolved. Examples of such solvents include alcohols such as ethanol, isopropanol, and t-butyl alcohol, ethers such as diethyl ether and tetrahydrofuran, ketones such as acetone and 2-butanone, water, and mixtures thereof. .

本発明に係わるグラフト重合は、親水性モノマーと架橋剤を合わせた濃度で０．３容量％〜３０容量％の反応液を用い、オレフィン系高分子膜１ｇに対して１０×１０−５〜１００×１０-5ｍ3の割合で反応を行うことが望ましい。該範囲内でグラフト重合を行えば、親水化層によって孔が埋まることもなく、均一性に優れた膜が得られる。
本発明に係わるグラフト重合時の反応温度は、重合反応が起これば特に限定されるものではないが、一般的に２０℃から８０℃までで行われる。
本発明に係わるグラフト重合は、オレフィン系高分子膜と親水性のモノマーを接触させる際に、親水性のモノマーは気体、液体又は溶液のいずれの状態でもよいが、均一な親水化層を形成させるためには、液体又は溶液であることが好ましく、溶液であることが特に好ましい。In the graft polymerization according to the present invention, a reaction solution of 0.3% by volume to 30% by volume with a concentration of the hydrophilic monomer and the crosslinking agent is used, and 10 × 10 −5 to 100 with respect to 1 g of the olefin polymer membrane. It is desirable to carry out the reaction at a rate of × 10 −5 m 3 . If graft polymerization is performed within this range, pores are not filled with the hydrophilic layer, and a film having excellent uniformity can be obtained.
The reaction temperature at the time of graft polymerization according to the present invention is not particularly limited as long as the polymerization reaction occurs, but it is generally carried out at 20 ° C. to 80 ° C.
In the graft polymerization according to the present invention, when the olefin polymer film and the hydrophilic monomer are brought into contact with each other, the hydrophilic monomer may be in any state of gas, liquid or solution, but forms a uniform hydrophilic layer. For this purpose, a liquid or a solution is preferable, and a solution is particularly preferable.

本発明に係わる親水性オレフィン系高分子膜は、疎水性のオレフィン系高分子膜に強固な架橋構造を有する親水化層を導入することで、免疫グロブリン１量体透過性と免疫グロブリン２量体阻止性を高いレベルで実現することができる。そのために、親水性モノマーに対して架橋剤を、下限として２０ｍｏｌ％以上、好ましくは３０ｍｏｌ％以上、上限としては１０００ｍｏｌ％以下、好ましくは５００ｍｏｌ％以下、さらに好ましくは２００ｍｏｌ％以下の割合で用いることが良い。   The hydrophilic olefin polymer membrane according to the present invention introduces an immunoglobulin monomer permeability and an immunoglobulin dimer by introducing a hydrophilic layer having a strong cross-linked structure into a hydrophobic olefin polymer membrane. The blocking property can be realized at a high level. Therefore, the crosslinking agent is used in a proportion of 20 mol% or more, preferably 30 mol% or more, and 1000 mol% or less, preferably 500 mol% or less, more preferably 200 mol% or less as the upper limit as the lower limit with respect to the hydrophilic monomer. good.

本発明は、疎水性オレフィン系高分子膜に親水化層を導入し、高い免疫グロブリン１量体透過率を実現する。そのために、疎水性オレフィン系高分子膜にグラフトされるグラフト率は、下限として３％以上、好ましくは４％以上、さらに好ましくは５％以上が良く、上限としては５０％以下、好ましくは３０％以下、さらに好ましくは２０％以下が良い。グラフト率が３％未満であると膜の親水性が不足し、タンパク質の吸着にともなう濾過速度の急激な低下を引き起こす。５０％を越えると、比較的小さな孔が親水化層によって埋まってしまい、充分な濾過速度が得られない。ここで言うグラフト率とは、下記式（８）で定義される値である。
グラフト率（％）＝
（グラフト後の膜重量−グラフト前の膜重量）／グラフト前の膜重量×１００ （８）In the present invention, a hydrophilic layer is introduced into a hydrophobic olefin polymer membrane to achieve high immunoglobulin monomer permeability. Therefore, the graft ratio grafted onto the hydrophobic olefin polymer film is preferably 3% or more, preferably 4% or more, more preferably 5% or more as the lower limit, and 50% or less, preferably 30% as the upper limit. Hereinafter, 20% or less is more preferable. When the graft ratio is less than 3%, the hydrophilicity of the membrane is insufficient, causing a rapid decrease in the filtration rate accompanying protein adsorption. If it exceeds 50%, relatively small pores are filled with the hydrophilic layer, and a sufficient filtration rate cannot be obtained. The graft ratio referred to here is a value defined by the following formula (8).
Graft rate (%) =
(Membrane weight after grafting−membrane weight before grafting) / membrane weight before grafting × 100 (8)

本発明に係わるオレフィン系高分子膜の親水性の度合いは、接触角によって評価することができる。２５℃における前進接触角および後退接触角の平均値が６０度以下であることが好ましく、４５度以下であることがより好ましく、更に好ましくは３０度以下である。また、簡便な評価法としては、オレフィン系高分子膜を水と接触させた際に、膜の細孔内部に水が自発的に浸透すれば充分な親水性を持つと判断してよい。   The degree of hydrophilicity of the olefin polymer film according to the present invention can be evaluated by the contact angle. The average value of the advancing contact angle and the receding contact angle at 25 ° C. is preferably 60 degrees or less, more preferably 45 degrees or less, and still more preferably 30 degrees or less. In addition, as a simple evaluation method, when the olefin polymer membrane is brought into contact with water, it may be determined that the membrane has sufficient hydrophilicity if water spontaneously permeates into the pores of the membrane.

本発明に係るオレフィン系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やＰＥＧ、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cutoff of the olefin polymer membrane according to the present invention is not limited as long as it can sufficiently separate the immunoglobulin monomer and dimer, and is 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more, The upper limit should be set to less than 500,000, preferably 450,000 or less, more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined by dead-end filtration using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), PEG, dextran and the like. The molecular weight is calculated as the molecular weight at which the blocking rate is 90% from the relationship between the molecular weight and the blocking rate.

本発明に係わるオレフィン系高分子膜を製造する方法は何ら限定しないが、例えば溶融成膜法が挙げられる。溶融成膜法とは、膜材料と可塑剤を加熱することで均一混合させた後、冷却することにより相分離を発生させ、得られた膜フィルムから可塑剤を抽出することで膜を得る方法である。
本発明に係わるオレフィン系高分子膜を得る代表的な溶融成膜法は、下記（ａ）〜（ｃ）の工程を含む。
（ａ）オレフィン系高分子と可塑剤を含む組成物を該オレフィン系高分子の結晶融点以上に加熱して均一溶解した後、該組成物を吐出口から吐出し、膜を形成する工程；
（ｂ）下記式（９）に定義するドラフト比が１以上１５以下となるような引取速度で該膜を引取りながら、該オレフィン系高分子に対して部分的な溶解性を有する不揮発性液体を、該温度が１００℃以上に加熱された状態で、膜の一方の表面に接触させ、他方の膜表面は冷却する工程
ドラフト比＝（膜の引取速度）／（組成物の吐出口における吐出速度） （９）
（ｃ）該可塑剤および該不揮発性液体の実質的な部分を除去する工程。The method for producing the olefin polymer film according to the present invention is not limited in any way, and examples thereof include a melt film forming method. The melt film-forming method is a method in which a film material and a plasticizer are uniformly mixed by heating and then phase separation is generated by cooling, and a film is obtained by extracting the plasticizer from the obtained film film. It is.
A typical melt film forming method for obtaining an olefin polymer film according to the present invention includes the following steps (a) to (c).
(A) A step of heating a composition containing an olefin polymer and a plasticizer to a temperature equal to or higher than the crystal melting point of the olefin polymer and uniformly dissolving the composition, and then discharging the composition from a discharge port to form a film;
(B) A non-volatile liquid having partial solubility in the olefin polymer while the membrane is taken at a take-off speed such that the draft ratio defined in the following formula (9) is 1 or more and 15 or less. In a state where the temperature is heated to 100 ° C. or higher, and the other film surface is cooled. Draft ratio = (film take-off speed) / (discharge at composition discharge port) (Speed) (9)
(C) removing a substantial part of the plasticizer and the non-volatile liquid;

本発明に係わるオレフィン系高分子膜を得る溶融成膜法に用いるポリマー濃度は、オレフィン系高分子および可塑剤を含む組成物中２０〜９０重量％が好ましく、より好ましくは３０〜８０重量％、そして最も好ましくは３５〜７０重量％である。ポリマー濃度が２０重量％未満になると、成膜性が低下する、充分な力学強度が得られない等の不都合が発生する。ポリマー濃度が９０重量％を超えると、得られるオレフィン系高分子膜の孔径が小さくなりすぎるとともに、空孔率が小さくなるため、濾過速度が低下し、実用に耐えない。   The polymer concentration used in the melt film forming method for obtaining the olefin polymer film according to the present invention is preferably 20 to 90% by weight, more preferably 30 to 80% by weight in the composition containing the olefin polymer and the plasticizer. Most preferably, it is 35 to 70% by weight. When the polymer concentration is less than 20% by weight, the film formability deteriorates, and there are problems such as insufficient mechanical strength. If the polymer concentration exceeds 90% by weight, the pore size of the resulting olefin polymer membrane will be too small and the porosity will be small, so the filtration rate will be low and it will not be practical.

本発明に係わるオレフィン系高分子膜を得る溶融成膜法に用いられる可塑剤としては、オレフィン系高分子膜を製造する組成でオレフィン系高分子と混合した際に樹脂の結晶融点以上において均一溶液を形成し得る不揮発性溶媒を用いる。ここで言う不揮発性溶媒とは、大気圧下において２５０℃以上の沸点を有するものである。可塑剤の形態は、概ね常温２０℃において、液体であっても固体であっても差し支えない。また、オレフィン系高分子との均一溶液を冷却した際に、常温以上の温度において熱誘起型固液相分離点を持つような、いわゆる固液相分離系の可塑剤を用いても良い。可塑剤の中には、オレフィン系高分子との均一溶液を冷却した際に、常温以上の温度において熱誘起型液液相分離点を有するものもあるが、一般に、液液相分離系の可塑剤を用いた場合は、得られたオレフィン系高分子膜は大孔径化する傾向がある。ここで用いられる可塑剤は単品又は複数の物質の混合物であってもよい。   The plasticizer used in the melt film forming method for obtaining the olefin polymer film according to the present invention includes a homogeneous solution at a temperature equal to or higher than the crystal melting point of the resin when mixed with the olefin polymer in the composition for producing the olefin polymer film. A non-volatile solvent capable of forming is used. The non-volatile solvent mentioned here has a boiling point of 250 ° C. or higher under atmospheric pressure. The plasticizer may be liquid or solid at a room temperature of 20 ° C. Further, a so-called solid-liquid phase separation type plasticizer that has a heat-induced solid-liquid phase separation point at a temperature of room temperature or higher when a homogeneous solution with an olefin polymer is cooled may be used. Some plasticizers have a heat-induced liquid-liquid phase separation point at a temperature equal to or higher than normal temperature when a uniform solution with an olefin polymer is cooled. When the agent is used, the obtained olefin polymer membrane tends to have a large pore size. The plasticizer used here may be a single item or a mixture of a plurality of substances.

熱誘起型固液相分離点を測定する方法は、オレフィン系高分子と可塑剤を含む所定濃度の組成物を予め溶融混練したものを試料として用い、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）などの熱分析により該樹脂の発熱ピーク温度を測定することにより求めることができる。また、該樹脂の結晶化点を測定する方法は、予め該樹脂を溶融混練したものを試料として用い、同様に熱分析により求めることができる。   The method of measuring the heat-induced solid-liquid phase separation point is a thermal analysis such as differential scanning calorimetry (DSC) using a sample obtained by previously melt-kneading a composition of a predetermined concentration containing an olefin polymer and a plasticizer. By measuring the exothermic peak temperature of the resin. Further, the method for measuring the crystallization point of the resin can be obtained by thermal analysis in the same manner using a sample obtained by previously kneading the resin as a sample.

本発明に係わる可塑剤としては、国際公開ＷＯ０１／２８６６７号に開示されている可塑剤が挙げられる。即ち、下記式（１０）で定義する組成物の相分離点降下定数αが０〜４０℃である可塑剤であり、好ましくは１〜３５℃の可塑剤、更に好ましくは５〜３０℃の可塑剤である。相分離点降下定数が４０℃を超えると、孔径の均質性や強度が低下してしまうために好ましくない。
α＝１００×（Ｔｃ ０−Ｔｃ）÷（１００−Ｃ） （１０）
αは相分離点降下定数（℃）
Ｔｃ ０はオレフィン系高分子の結晶化温度（℃）
Ｔｃは組成物の熱誘起固液相分離点（℃）
Ｃは組成物中のオレフィン系高分子の濃度（重量％）As a plasticizer concerning this invention, the plasticizer currently disclosed by international publication WO01 / 28667 is mentioned. That is, it is a plasticizer having a phase separation point depression constant α defined by the following formula (10) of 0 to 40 ° C., preferably 1 to 35 ° C., and more preferably 5 to 30 ° C. It is an agent. When the phase separation point depression constant exceeds 40 ° C., the uniformity and strength of the pore diameter are lowered, which is not preferable.
α = 100 × (T c 0 −T c ) ÷ (100−C) (10)
α is the phase separation point drop constant (℃)
T c 0 is the crystallization temperature of the olefin polymer (° C.)
T c is the thermally induced solid-liquid phase separation point (° C.) of the composition
C is the concentration of olefinic polymer in the composition (wt%)

具体的には、エステル鎖の炭素鎖長が７以下のフタル酸エステル類、アジピン酸エステル類、セバシン酸エステル類、エステル鎖の炭素鎖長が８以下のリン酸エステル類、クエン酸エステル類等が好適に使用でき、特にフタル酸ジヘプチル、フタル酸ジシクロヘキシル、フタル酸ジブチル、フタル酸ジエチル、フタル酸ジメチル、アジピン酸ジブチル、セバシン酸ジブチル、リン酸トリフェニル、リン酸トリクレジル、リン酸ジフェニルクレジル、リン酸トリ（２−エチルヘキシル）、リン酸トリブチル、アセチルクエン酸トリブチル等が特に好ましい。   Specifically, phthalic acid esters having an ester chain carbon chain length of 7 or less, adipic acid esters, sebacic acid esters, phosphate esters having an ester chain carbon chain length of 8 or less, citrate esters, etc. Can be preferably used, especially diheptyl phthalate, dicyclohexyl phthalate, dibutyl phthalate, diethyl phthalate, dimethyl phthalate, dibutyl adipate, dibutyl sebacate, triphenyl phosphate, tricresyl phosphate, diphenyl cresyl phosphate, Tri (2-ethylhexyl) phosphate, tributyl phosphate, tributyl acetylcitrate and the like are particularly preferable.

本発明において使用する組成物には、製造する膜の性能に影響を及ぼさない限り、目的に応じて、酸化防止剤、結晶核剤、帯電防止剤、難燃剤、滑剤、紫外線吸収剤等の添加剤を混合しても差し支えない。   In the composition used in the present invention, an antioxidant, a crystal nucleating agent, an antistatic agent, a flame retardant, a lubricant, an ultraviolet absorber and the like are added depending on the purpose as long as the performance of the film to be produced is not affected. Mixing agents may be used.

本発明に係わるオレフィン系高分子膜を得る溶融成膜法において、オレフィン系高分子と可塑剤を含む組成物を均一溶解させる第一の方法は、該樹脂を押出機等の連続式樹脂混練装置に投入し、樹脂を加熱溶融させながら任意の比率で可塑剤を導入してスクリュー混練することにより、均一溶液を得る方法である。投入する樹脂の形態は、粉末状、顆粒状、ペレット状の何れでもよい。また、このような方法によって均一溶解させる場合は、可塑剤の形態は常温液体であることが好ましい。押出機としては、単軸スクリュー式押出機、二軸異方向スクリュー式押出機、二軸同方向スクリュー式押出機等が使用できる。   In the melt film-forming method for obtaining the olefin polymer film according to the present invention, the first method for uniformly dissolving the composition containing the olefin polymer and the plasticizer is a continuous resin kneading apparatus such as an extruder. In this method, a plasticizer is introduced at an arbitrary ratio while the resin is heated and melted, and screw kneading is performed to obtain a uniform solution. The form of the resin to be charged may be any of powder, granule, and pellet. Moreover, when making it melt | dissolve uniformly by such a method, it is preferable that the form of a plasticizer is a normal temperature liquid. As an extruder, a single screw type extruder, a biaxial different direction screw type extruder, a biaxial same direction screw type extruder, etc. can be used.

オレフィン系高分子と可塑剤を含む組成物を均一溶解させる第二の方法は、ヘンシェルミキサー等の撹拌装置を用いて、オレフィン系高分子と可塑剤を予め混合して分散させ、得られた組成物を押出機等の連続式樹脂混練装置に投入して溶融混練することにより、均一溶液を得る方法である。投入する組成物の形態については、可塑剤が常温液体である場合はスラリー状とし、可塑剤が常温固体である場合は粉末状や顆粒状等とすればよい。   The second method for uniformly dissolving the composition containing the olefin polymer and the plasticizer is to mix and disperse the olefin polymer and the plasticizer in advance using a stirring device such as a Henschel mixer. This is a method of obtaining a uniform solution by putting a product into a continuous resin kneader such as an extruder and melt-kneading. The form of the composition to be added may be a slurry when the plasticizer is a liquid at room temperature, and may be a powder or a granule when the plasticizer is a solid at room temperature.

オレフィン系高分子と可塑剤を含む組成物を均一溶解させる第三の方法は、ブラベンダーやミル等の簡易型樹脂混練装置を用いる方法や、その他のバッチ式混練容器内で溶融混練する方法である。この方法によれば、バッチ式の工程となるため生産性は良好とは言えないが、簡易でかつ柔軟性が高いという利点がある。   The third method of uniformly dissolving a composition containing an olefin polymer and a plasticizer is a method using a simple resin kneader such as a Brabender or a mill, or a method of melt kneading in another batch kneading container. is there. According to this method, since it is a batch type process, the productivity is not good, but there is an advantage that it is simple and highly flexible.

本発明に係わるオレフィン系高分子膜を得る溶融成膜法において、オレフィン系高分子と可塑剤を含む組成物をオレフィン系高分子の結晶融点以上の温度に加熱均一溶解させた後、Ｔダイやサーキュラーダイ、環状紡口の吐出口から平膜状、中空糸状の形状に押出す（ａ）の工程の後に、冷却固化させて成型を行う（ｂ）の工程に移るが、この工程において、膜構造を形成する。   In the melt film-forming method for obtaining an olefin polymer film according to the present invention, a composition containing an olefin polymer and a plasticizer is heated and dissolved at a temperature equal to or higher than the crystal melting point of the olefin polymer, After the step (a) of extruding from the discharge port of the circular die and the annular nozzle into a flat membrane shape and a hollow fiber shape, the process proceeds to the step (b) in which it is cooled and solidified and molded. Form a structure.

本発明に係わるオレフィン系高分子膜を得る溶融成膜法においては、均一に加熱溶解したオレフィン系高分子と可塑剤を含む組成物を吐出口から吐出させ、下記式（１１）で定義するドラフト比が１以上１５以下となるような引取速度で該膜を引取りながら、該オレフィン系高分子に対して部分的な溶解性を有する不揮発性液体を接触させ、膜を形成させる。
ドラフト比＝（膜の引取速度）／（組成物の吐出口における吐出速度） （１１）

上記ドラフト比は、下限として１．５以上、好ましくは２以上、上限としては１０以下、好ましくは７以下が良い。ドラフト比が１未満では膜にテンションがかからないために成型性が低下し、１５を超える場合は、膜が引伸ばされるために、充分な厚みの粗大構造層を形成させることが難しい。In the melt film-forming method for obtaining an olefin polymer film according to the present invention, a composition containing a uniformly heated and dissolved olefin polymer and a plasticizer is discharged from a discharge port, and is defined by the following formula (11). A non-volatile liquid having partial solubility with respect to the olefin polymer is brought into contact with the olefin polymer while the film is taken at a take-up speed such that the ratio is 1 or more and 15 or less, thereby forming a film.
Draft ratio = (film take-off speed) / (discharge speed at composition discharge port) (11)

The draft ratio has a lower limit of 1.5 or more, preferably 2 or more, and an upper limit of 10 or less, preferably 7 or less. When the draft ratio is less than 1, no tension is applied to the film and the moldability is lowered. When the draft ratio exceeds 15, the film is stretched and it is difficult to form a sufficiently thick coarse structure layer.

ここで言う組成物の吐出口における吐出速度は下記式（１２）で与えられる。
組成物の吐出口における吐出速度＝
（単位時間当りに吐出される組成物の体積）／（吐出口の面積） （１２）

上記吐出速度の好ましい範囲は、下限として１ｍ／分以上、好ましくは３ｍ／分以上、上限としては６０ｍ／分以下、好ましくは４０ｍ／分以下が良い。吐出速度が１ｍ／分未満の場合は、生産性が低下することに加えて、吐出量の変動が大きくなる等の問題が発生する。反対に、吐出速度が６０ｍ／分を超える場合は、吐出量が多いために吐出口で乱流が発生し、吐出状態が不安定になる場合がある。また、引取速度は吐出速度に合わせて設定することができるが、下限として１ｍ／分以上、好ましくは３ｍ／分以上、上限として２００ｍ／分以下、好ましくは１５０ｍ／分以下が良い。引取速度が１ｍ／分未満の場合は、生産性、成型性が低下し、引取速度が２００ｍ／分を超える場合は、冷却時間が短くなる、膜にかかるテンションが大きくなることによって膜の断裂が起き易くなる。The discharge speed at the discharge port of the composition mentioned here is given by the following formula (12).
Discharge speed at the discharge port of the composition =
(Volume of composition discharged per unit time) / (area of discharge port) (12)

A preferable range of the discharge speed is 1 m / min or more, preferably 3 m / min or more as a lower limit, and 60 m / min or less, preferably 40 m / min or less as an upper limit. When the discharge speed is less than 1 m / min, in addition to a decrease in productivity, problems such as a large fluctuation in discharge amount occur. On the contrary, when the discharge speed exceeds 60 m / min, since the discharge amount is large, turbulent flow may occur at the discharge port, and the discharge state may become unstable. The take-up speed can be set according to the discharge speed, but the lower limit is 1 m / min or more, preferably 3 m / min or more, and the upper limit is 200 m / min or less, preferably 150 m / min or less. When the take-up speed is less than 1 m / min, productivity and moldability are deteriorated, and when the take-up speed exceeds 200 m / min, the cooling time is shortened, and the tension on the film is increased, so that the film is broken. It becomes easy to get up.

本発明においては、可塑剤を除去するために抽出溶剤を使用する。抽出溶剤はオレフィン系高分子に対して貧溶媒であり、かつ可塑剤に対して良溶媒であり、沸点がオレフィン系高分子膜の融点より低いことが好ましい。このような抽出溶剤としては、例えば、ヘキサンやシクロヘキサン等の炭化水素類、塩化メチレンや１，１，１−トリクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類、エタノールやイソプロパノール等のアルコール類、ジエチルエーテルやテトラヒドロフラン等のエーテル類、アセトンや２−ブタノン等のケトン類、又は水が挙げられる。   In the present invention, an extraction solvent is used to remove the plasticizer. The extraction solvent is preferably a poor solvent for the olefin polymer and a good solvent for the plasticizer, and the boiling point is preferably lower than the melting point of the olefin polymer film. Examples of such extraction solvents include hydrocarbons such as hexane and cyclohexane, halogenated hydrocarbons such as methylene chloride and 1,1,1-trichloroethane, alcohols such as ethanol and isopropanol, diethyl ether and tetrahydrofuran, and the like. Ethers, ketones such as acetone and 2-butanone, and water.

本発明において、可塑剤を除去する第一の方法は、抽出溶剤が入った容器中に所定の大きさに切り取ったオレフィン系高分子膜を浸漬し充分に洗浄した後に、付着した溶剤を風乾させるか、又は熱風によって乾燥させることにより行う。この際、浸漬の操作や洗浄の操作を多数回繰り返して行うとオレフィン系高分子膜中に残留する可塑剤が減少するので好ましい。また、浸漬、洗浄、乾燥の一連の操作中にオレフィン系高分子膜の収縮を抑えるために、オレフィン系高分子膜の端部を拘束することが好ましい。   In the present invention, the first method for removing the plasticizer is to immerse the olefin polymer film cut into a predetermined size in a container containing the extraction solvent and thoroughly wash it, and then air-dry the attached solvent. Or by drying with hot air. At this time, it is preferable to repeat the dipping operation and the washing operation many times because the plasticizer remaining in the olefin polymer film is reduced. Moreover, in order to suppress shrinkage | contraction of an olefin type polymer film during a series of operation | movement of immersion, washing | cleaning, and drying, it is preferable to restrain the edge part of an olefin type polymer film.

可塑剤を除去する第二の方法は、抽出溶剤で満たされた槽の中に連続的にオレフィン系高分子膜を送り込み、可塑剤を除去するのに充分な時間をかけて槽中に浸漬し、しかる後に付着した溶剤を乾燥させることにより行う。この際、槽内部を多段分割することにより濃度差がついた各槽に順次オレフィン系高分子膜を送り込む多段法や、オレフィン系高分子膜の走行方向に対し逆方向から抽出溶剤を供給して濃度勾配をつけるための向流法のような公知の手段を適用すると、抽出効率が高められ好ましい。   The second method for removing the plasticizer is to continuously feed the olefin polymer membrane into a tank filled with the extraction solvent and immerse it in the tank for a sufficient time to remove the plasticizer. Thereafter, the solvent adhered thereto is dried. At this time, by dividing the inside of the tank into multiple stages, the extraction solvent is supplied from the opposite direction to the running direction of the olefin polymer film, or the multi-stage method in which the olefin polymer film is sequentially fed to each tank having a concentration difference. It is preferable to apply a known means such as a counter-current method for providing a concentration gradient because the extraction efficiency is increased.

第一および第二の方法においては、何れも可塑剤をオレフィン系高分子膜から実質的に除去することが重要である。実質的に除去するとは、分離膜としての性能を損なわない程度にオレフィン系高分子膜中の可塑剤を除去することを指し、オレフィン系高分子膜中に残存する可塑剤の量は１重量％以下となることが好ましく、さらに好ましくは１００重量ｐｐｍ以下である。オレフィン系高分子膜中に残存する可塑剤の量は、ガスクロマトグラフィや液体クロマトグラフィー等で定量することができる。また、抽出溶剤を、該溶剤の沸点未満、好ましくは沸点−５℃以下の範囲内で加温すると、可塑剤と溶剤との拡散を促進することができるので抽出効率を高めることができ好ましい。   In both the first and second methods, it is important to substantially remove the plasticizer from the olefin polymer membrane. Substantially removing means removing the plasticizer in the olefin polymer membrane to such an extent that the performance as a separation membrane is not impaired. The amount of the plasticizer remaining in the olefin polymer membrane is 1% by weight. It is preferable that it is below, More preferably, it is 100 weight ppm or less. The amount of the plasticizer remaining in the olefin polymer film can be quantified by gas chromatography, liquid chromatography, or the like. Further, it is preferable to heat the extraction solvent within the range of less than the boiling point of the solvent, preferably within the range of boiling point -5 ° C. or less, because the diffusion between the plasticizer and the solvent can be promoted.

本発明においては、可塑剤を除去する工程の前若しくは後、又は前後において、オレフィン系高分子膜に加熱処理を施すと、可塑剤を除去した際のオレフィン系高分子膜の収縮の低減、オレフィン系高分子膜の強度の向上、および耐熱性の向上といった効果が得られる。加熱処理の方法としては、熱風中にオレフィン系高分子膜を配して行う方法、熱媒中にオレフィン系高分子膜を浸漬して行う方法、または加熱温調した金属製のロール等にオレフィン系高分子膜を接触させて行う方法がある。加熱処理において、寸法を固定した状態で行うと、特に微細な孔の閉塞を防ぐことができるために好ましい。加熱処理の温度は、目的やオレフィン系高分子の融点以下で行う事が好ましい。ポリエチレンの場合、乾燥温度は、下限として、６０℃以上、好ましくは６５℃以上が良く、上限としては１００℃以下、好ましくは９５℃以下が良い。融点を超えると、加熱処理中に膜が破断する、細孔が潰れる等の不都合が発生する可能性がある。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１時間以上から４８時間までが選択される。   In the present invention, when the olefin polymer film is subjected to heat treatment before, after, or before and after the step of removing the plasticizer, the shrinkage of the olefin polymer film when the plasticizer is removed is reduced. The effects of improving the strength and heat resistance of the polymer film can be obtained. The heat treatment may be performed by placing an olefin polymer film in hot air, by immersing the olefin polymer film in a heat medium, or by heating and adjusting a metal roll, etc. There is a method in which a polymer film is brought into contact. In the heat treatment, it is preferable that the dimensions are fixed because it is possible to prevent blocking of fine holes. The temperature of the heat treatment is preferably performed below the melting point of the object and the olefin polymer. In the case of polyethylene, the lower limit of the drying temperature is 60 ° C or higher, preferably 65 ° C or higher, and the upper limit is 100 ° C or lower, preferably 95 ° C or lower. If the melting point is exceeded, problems such as breakage of the membrane and collapse of the pores may occur during the heat treatment. The time required for drying is determined by the relationship with the drying temperature, but is generally selected from 0.01 hours to 48 hours.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子は、ポリビニルアルコールや部分アセタール化等の変性ポリビニルアルコールとエチレンやプロピレン、ビニルピロリドン、塩化ビニル、フッ化ビニル、メチルメタクリレート、アクリロニトリル、イタコン酸等と共重合させた共重合体（ブロック共重合体、グラフト共重合体を含む）およびその誘導体である。その中でも、エチレン−ビニルアルコールの共重合体が好ましい。
本発明に係わるビニルアルコール系高分子のケン化度は、下限としては８０ｍｏｌ％以上、好ましくは８５ｍｏｌ％以上が良く、上限としては１００ｍｏｌ％以下、好ましくは９５ｍｏｌ％以下が良い。The vinyl alcohol polymer according to the present invention was copolymerized with polyvinyl alcohol or modified polyvinyl alcohol such as partially acetalized ethylene, propylene, vinyl pyrrolidone, vinyl chloride, vinyl fluoride, methyl methacrylate, acrylonitrile, itaconic acid and the like. Copolymers (including block copolymers and graft copolymers) and derivatives thereof. Among these, an ethylene-vinyl alcohol copolymer is preferable.
The lower limit of the saponification degree of the vinyl alcohol polymer according to the present invention is 80 mol% or more, preferably 85 mol% or more, and the upper limit is 100 mol% or less, preferably 95 mol% or less.

本発明にの係わるビニルアルコール系高分子鎖中のポリビニルアルコール含量は、少なくとも３０重量％以上であることが好ましく、より好ましくは５０重量％以上である。３０重量％未満の場合は、膜の親水性が低くなる等の問題が発生するために好ましくない。   The polyvinyl alcohol content in the vinyl alcohol polymer chain according to the present invention is preferably at least 30% by weight, more preferably 50% by weight. If it is less than 30% by weight, it is not preferable because problems such as low hydrophilicity of the film occur.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜は、主としてビニルアルコール系高分子からなるものであるが、ビニルアルコール系高分子の特性を損なわない範囲で他の高分子量物質や添加物を含有していてもよい。これらの高分子を二種以上、組み合わせて実施することも可能である。   The vinyl alcohol polymer film according to the present invention is mainly composed of a vinyl alcohol polymer, but contains other high molecular weight substances and additives as long as the characteristics of the vinyl alcohol polymer are not impaired. Also good. It is also possible to carry out by combining two or more of these polymers.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子の重量平均分子量は、下限としては５０００以上、好ましくは１万以上、特に好ましくは５万以上が良く、上限として２００万以下、好ましくは９０万以下、特に好ましくは８０万以下が良い。一般に平均分子量が１００万を超えるような樹脂については、ＧＰＣ測定が困難であるので、その代用として粘度法による粘度平均分子量をあてることができる。平均分子量が５０００より小さいと、膜の力学強度が低くなるため好ましくない。平均分子量が２００万を超えると、均一な溶融混練が難しくなるために好ましくない。   The weight average molecular weight of the vinyl alcohol polymer according to the present invention is 5000 or more, preferably 10,000 or more, particularly preferably 50,000 or more as the lower limit, and 2 million or less, preferably 900,000 or less, particularly preferably as the upper limit. Is less than 800,000. In general, resins having an average molecular weight exceeding 1,000,000 are difficult to measure by GPC, and as an alternative, the viscosity average molecular weight determined by the viscosity method can be assigned. An average molecular weight of less than 5000 is not preferable because the mechanical strength of the film is lowered. An average molecular weight exceeding 2 million is not preferable because uniform melt kneading becomes difficult.

本発明においては、ビニルアルコール系高分子膜に悪影響を及ぼさない範囲内で、更に付加的処理を施してもよい。付加的処理としては、例えば、架橋処理、化学的表面修飾による官能基導入などが挙げられる。   In the present invention, additional treatment may be performed within a range that does not adversely affect the vinyl alcohol polymer film. Examples of the additional treatment include cross-linking treatment and functional group introduction by chemical surface modification.

本発明に係るビニルアルコール系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やＰＥＧ、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cut off of the vinyl alcohol polymer membrane according to the present invention is not limited as long as it can sufficiently separate immunoglobulin monomer and dimer, and is preferably 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more. The upper limit should be set to less than 500,000, preferably 450,000 or less, more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined by dead-end filtration using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), PEG, dextran and the like. The molecular weight is calculated as the molecular weight at which the blocking rate is 90% from the relationship between the molecular weight and the blocking rate.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を製造する方法は何ら限定しないが、例えば湿式成膜法が挙げられる。湿式成膜法とは、膜材料を良溶媒に溶解した膜原液と、膜原液中の良溶媒とは混和可能だが膜材料とは相溶しない他の溶媒からなる凝固液とを接触させることで、接触表面から濃度誘起による相分離を発生させて膜を得る方法である。   The method for producing the vinyl alcohol polymer film according to the present invention is not limited in any way, and examples thereof include a wet film forming method. The wet film-forming method is a method in which a membrane stock solution in which a membrane material is dissolved in a good solvent is brought into contact with a coagulation liquid composed of another solvent that is miscible with the good solvent in the membrane stock solution but is incompatible with the membrane material. In this method, concentration-induced phase separation is generated from the contact surface to obtain a membrane.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる良溶媒としては、膜材料であるビニルアルコール系高分子を５重量％以上溶解するものが好ましく、水、アルコール、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン等が例示できる。これらの溶媒は単独で、もしくは２種以上組み合わせて仕様できる。工業的な面から水が最も好ましい。また、上記組成以外に凝固を促進するホウ酸や成膜安定性を向上させる界面活性剤、消泡剤等を適宜添加してもよい。   The good solvent used in the wet film-forming method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention is preferably a solvent capable of dissolving 5% by weight or more of the vinyl alcohol polymer as the film material. Water, alcohol, dimethyl sulfoxide N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide, N-methyl-2-pyrrolidone and the like. These solvents can be used alone or in combination of two or more. Water is most preferable from an industrial viewpoint. In addition to the above composition, boric acid that promotes coagulation, a surfactant that improves film formation stability, an antifoaming agent, and the like may be added as appropriate.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液は、目的の構造および性能を有するビニルアルコール系高分子膜を製造できれば何ら限定はしない。通常、ビニルアルコール系高分子および孔径形成剤をこれらに共通の溶媒で溶解したものが用いられる。膜原液におけるビニルアルコール系高分子の濃度に関しては、濃度を上げるにつれて成膜性は向上するが、逆に膜の空孔率は減少し、透水性が低下する傾向がある。そのため、膜原液全体を１００重量％とした場合、ビニルアルコール系高分子の濃度範囲としては分子量によって異なるが、下限として２重量％以上、好ましくは５重量％以上、特に好ましくは１０重量％以上である。また上限としては５０重量％以下、好ましくは４０重量％以下、特に好ましくは３０重量％以下で均一に溶解した溶液が好適に使用される。   The membrane stock solution used in the wet film-forming method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention is not limited as long as a vinyl alcohol polymer film having the desired structure and performance can be produced. Usually, a vinyl alcohol polymer and a pore size forming agent dissolved in a common solvent are used. Regarding the concentration of the vinyl alcohol polymer in the membrane stock solution, the film formability improves as the concentration increases, but conversely, the porosity of the membrane decreases and the water permeability tends to decrease. Therefore, when the whole membrane stock solution is 100% by weight, the concentration range of the vinyl alcohol polymer varies depending on the molecular weight, but the lower limit is 2% by weight or more, preferably 5% by weight or more, particularly preferably 10% by weight or more. is there. Further, an upper limit of 50% by weight or less, preferably 40% by weight or less, particularly preferably 30% by weight or less, is preferably used.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法における膜原液の温度は、下限として０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上、上限として膜原液中の良溶媒沸点以下が好適に使用される。この温度条件下であれば、膜原液として好ましい膜への加工を行うのに好適な粘度を得ることができる。   The temperature of the membrane stock solution in the wet film formation method for obtaining the vinyl alcohol polymer membrane according to the present invention is 0 ° C. or more, preferably 10 ° C. or more, particularly preferably 25 ° C. or more as a lower limit, and a good solvent in the film stock solution as an upper limit. The boiling point or lower is preferably used. If it is this temperature condition, the viscosity suitable for processing into a film | membrane preferable as a film | membrane stock solution can be obtained.

本発明において使用する膜原液には、製造する膜の性能に影響を及ぼさない限り、目的に応じて、酸化防止剤、結晶核剤、帯電防止剤、難燃剤、滑剤、紫外線吸収剤等の添加剤を混合しても差し支えない。   Addition of antioxidants, crystal nucleating agents, antistatic agents, flame retardants, lubricants, ultraviolet absorbers, etc., depending on the purpose, as long as the membrane undiluted solution used in the present invention does not affect the performance of the membrane to be produced. Mixing agents may be used.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる孔形成剤としては、平均分子量２００〜４００００００のポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、テトラエチレングリコール、トリエチレングリコール、エチレングリコール等のグリコール類、メタノール、エタノール、プロパノール等のアルコール類、グリセリン、ブタンジオール等の多価アルコール類、乳酸エチル、乳酸ブチル等のエステル類等が例示でき、単独あるいは２種類以上の混合物が用いられる。
本発明に係わる孔形成剤の添加量は、ビニルアルコール系高分子の種類、孔形成剤の種類により適宜異なるが、膜原液が後述する上限臨界共溶点を有するような添加量にするのが好ましい。上記の上限臨界共溶点とは、膜原液を高温で透明な均一状態とし、該原液の温度を徐々に下げていった時に透明溶液から白濁溶液に変化する時の温度のことで、白化点や曇点と同義である。Examples of the pore forming agent used in the wet film forming method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention include glycols such as polyethylene glycol, polypropylene glycol, tetraethylene glycol, triethylene glycol, and ethylene glycol having an average molecular weight of 200 to 4000000. , Alcohols such as methanol, ethanol and propanol, polyhydric alcohols such as glycerin and butanediol, esters such as ethyl lactate and butyl lactate, etc. can be used alone or in combination of two or more.
The addition amount of the pore-forming agent according to the present invention varies depending on the type of vinyl alcohol polymer and the type of pore-forming agent, but the addition amount should be such that the membrane stock solution has an upper critical solution point described later. preferable. The upper limit critical eutectic point is the temperature at which the membrane undiluted solution becomes transparent and uniform at a high temperature and changes from a transparent solution to a cloudy solution when the temperature of the undiluted solution is gradually lowered. Synonymous with cloud point.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法で親水性高分子を用いる場合、その役割は、主に外側の多孔支持層部分の多孔構造を促進して形成させるところにあり、膜原液の増粘効果を奏するものである。膜原液中に添加する親水性高分子の量は安定した成膜を行うために親水性ポリマーの分子量と添加量を適宜調整することもできる。膜原液の粘度が低い場合、成膜時に膜破れや膜切れなどを起こし、成膜性が不安定になる場合がある。逆に膜原液の粘度が高すぎる場合、多孔支持層を充分に成長させることができず、外層の多孔構造の空孔率が不十分となり、目的の高い透過性を持つ膜が得られにくくなる。更には、膜原液の粘度が上がることで、口金から吐出された原液がメルトフラクチャーを起こすことも危惧される。
本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法において、膜原液中の親水性高分子の濃度の上限値は、使用する親水性高分子の種類と分子量に応じて最適値が決定されるが、通常４０重量以下％、好ましくは３０重量％以下である。When a hydrophilic polymer is used in a wet film forming method for obtaining a vinyl alcohol polymer film according to the present invention, its role is mainly to promote and form the porous structure of the outer porous support layer portion, It has the effect of thickening the membrane stock solution. The amount of the hydrophilic polymer added to the membrane stock solution can be adjusted as appropriate in order to achieve stable film formation. When the viscosity of the film stock solution is low, film breakage or film breakage may occur at the time of film formation, and the film formability may become unstable. Conversely, if the viscosity of the membrane stock solution is too high, the porous support layer cannot be sufficiently grown, the porosity of the porous structure of the outer layer will be insufficient, and it will be difficult to obtain a membrane with the desired high permeability. . Furthermore, there is a concern that the stock solution discharged from the die may cause a melt fracture due to an increase in the viscosity of the membrane stock solution.
In the wet film-forming method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention, the upper limit of the concentration of the hydrophilic polymer in the membrane stock solution is determined in accordance with the type and molecular weight of the hydrophilic polymer used However, it is usually 40% by weight or less, preferably 30% by weight or less.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液としては、膜原液と接触したとき濃度誘起相分離を引き起こし、接触面から膜を形成することができる物質であれば何ら限定しないが、例えば、水系凝固剤としては、純水、硫酸ナトリウム等の脱水性塩類の水溶液、水酸化ナトリウムやアンモニア水等のアルカリ性物質の水溶液などが例示することができ、単独で使用することもできるし、組み合わせて使用してもよい。水系凝固剤以外にも、例えばメタノールやエタノール、プロパノールなどが挙げられる。また、ポリオール系溶媒の例としては、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、テトラエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，２−ブタンジオール、１，４−ブタンジオール等のようなビニルアルコール系高分子の凝固能を有する有機系凝固剤を使用したり、水と組み合わせて使用することは自由である。凝固液中にポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、ポリビニルアルコールアミド、ポリビニルピロリドン、ポリヒドロキシアクリレート、ポリヒドロキシメタクリレート、ポリビニルアルコール酸、ポリメタクリル酸、ポリイタコン酸、ポリフマル酸、ポリシトラコン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸、ポリ−ｐ−スチレンスルフォン酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ−ジメチルビニルアルコールアミド、カルボキシメチルセルロース、澱粉、コーンスターチ、ポリキトサン、ポリキチンなどの水溶性高分子を添加することも可能である。添加する水溶性高分子の分子量や添加量にも依存するが、これらを添加することにより濾過性能を向上させることが可能である。また、凝固液中に、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、γ−ブチロラクトンなどの良溶媒を含有させることも可能である。特に、良溶媒を非溶媒に含有させた凝固液を使用する場合、その組成は、膜原液の組成、膜原液と凝固液との接触温度などで異なるが、概ね、凝固液全体を１００重量％とした場合、良溶媒の重量％として９０重量％以下が好ましい。この範囲であれば、膜を形成するのに必要十分な濃度誘起相分離を十分に達成できる。   The coagulating liquid used in the wet film formation method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention is a substance that can cause concentration-induced phase separation when in contact with the film stock solution and form a film from the contact surface. For example, the water-based coagulant can be exemplified by pure water, an aqueous solution of a dehydrating salt such as sodium sulfate, an aqueous solution of an alkaline substance such as sodium hydroxide or aqueous ammonia, and the like. It can also be used or may be used in combination. In addition to the water-based coagulant, for example, methanol, ethanol, propanol and the like can be mentioned. Examples of polyol solvents include vinyl alcohol polymers such as ethylene glycol, diethylene glycol, triethylene glycol, tetraethylene glycol, glycerin, propylene glycol, 1,2-butanediol, 1,4-butanediol, and the like. It is free to use an organic coagulant having a coagulation ability of water or in combination with water. In the coagulation liquid, polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymer, polyvinyl alcohol amide, polyvinyl pyrrolidone, polyhydroxy acrylate, polyhydroxy methacrylate, polyvinyl alcohol acid, polymethacrylic acid, polyitacon Water-soluble acids, polyfumaric acid, polycitraconic acid, poly-p-styrene sulfonic acid, sodium poly-p-styrene sulfonate, N, N-dimethylvinyl alcohol amide, carboxymethyl cellulose, starch, corn starch, polychitosan, polychitin It is also possible to add a polymer. Although it depends on the molecular weight and the amount of the water-soluble polymer to be added, the filtration performance can be improved by adding these. The coagulation liquid may contain a good solvent such as N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, N, N-dimethylformamide, and γ-butyrolactone. In particular, when using a coagulation liquid containing a good solvent in a non-solvent, the composition differs depending on the composition of the membrane stock solution, the contact temperature between the membrane stock solution and the coagulation liquid, etc. In this case, 90% by weight or less is preferable as the weight% of the good solvent. Within this range, concentration-induced phase separation necessary and sufficient for forming a film can be sufficiently achieved.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法おいて中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液（以後、内部凝固液）は、上記の外部凝固液と同様の溶液を用いてもよく、また、ヘキサン、流動パラフィン等といったビニルアルコール系高分子に対して全く凝固能を有さずしかも膜原液の溶媒と混和しないような有機溶剤を用いてもよい。また空気、窒素、アンモニアガス等の気体を導入した乾湿式成膜法で行っても良い。   In the wet film forming method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention, the coagulating liquid (hereinafter referred to as the internal coagulating liquid) that passes through the inside of the yarn during the production of the hollow fiber membrane is the same solution as the above external coagulating liquid. Alternatively, an organic solvent that has no coagulation ability with respect to a vinyl alcohol polymer such as hexane or liquid paraffin and is not miscible with the solvent of the membrane stock solution may be used. Alternatively, a dry / wet film forming method in which a gas such as air, nitrogen, or ammonia gas is introduced may be used.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度であれば何ら限定しないが、成膜温度の下限としては０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。なお、平膜においては凝固液温度で決まる。   The film formation temperature in the wet film formation method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention is not limited as long as it is a temperature at which the film stock solution and the coagulation liquid are brought into contact with each other to cause concentration-induced phase separation. The lower limit of the film formation temperature is 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. For hollow fiber membranes, it depends on the temperature of the double nozzle. In a flat membrane, it is determined by the coagulation liquid temperature.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液、凝固液、中空糸膜製造時に糸の内部を通す凝固液は均一溶解後に、溶存気体を除去することが望ましい。溶存気体を除去することで、溶存気体の発泡による膜の欠陥を著しく改善することできる。また、溶存気体のなかでも特に酸素を除くことで、高い温度下での膜加工による材料への酸化反応が減少する。膜原液および凝固液、内部凝固液に気体が溶存していない場合は、この工程を省略しても良い。また、乾湿式成膜法として空気、窒素、アンモニアガス等の気体を凝固剤として用いている場合には、この工程は実施しない。   It is desirable to remove the dissolved gas after uniform dissolution of the membrane stock solution used in the wet film formation method for obtaining the vinyl alcohol polymer membrane according to the present invention, the coagulation solution, and the coagulation solution passing through the inside of the yarn when producing the hollow fiber membrane. . By removing the dissolved gas, film defects due to foaming of the dissolved gas can be remarkably improved. Further, by removing oxygen from the dissolved gas, the oxidation reaction to the material due to film processing at a high temperature is reduced. This step may be omitted when no gas is dissolved in the membrane stock solution, the coagulation solution, and the internal coagulation solution. In addition, when a gas such as air, nitrogen, ammonia gas or the like is used as a coagulant as a dry / wet film forming method, this step is not performed.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、二重紡口から出た膜原液と内部凝固液による凝固をより促進するため、紡口直下に槽（以後、凝固槽）を設け、凝固槽中に満たされた凝固液（以後、外部凝固液）と接触させることができる。   When producing a hollow fiber membrane by a wet film-forming method for obtaining a vinyl alcohol polymer membrane according to the present invention, in order to further promote the coagulation by the membrane stock solution and the internal coagulation solution from the double spinning nozzle, A tank (hereinafter referred to as a coagulation tank) can be provided and brought into contact with a coagulation liquid (hereinafter referred to as an external coagulation liquid) filled in the coagulation tank.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合、中空糸膜の断面構造を均一構造のみならず、様々な不均一構造まで、自由に構造制御するために紡口から外部凝固液面までの距離（以後、空走距離）および紡口から外部凝固液面までの空間の温度と湿度を調整することができる。空間の温度と湿度を調整できれば何ら限定しないが、例えば、空走距離の下限としては０．００１ｍ以上、好ましくは０．００５ｍ以上、特に好ましくは０．０１ｍ以上、上限として２．０ｍ以下、好ましくは１．５ｍ以下、特に好ましくは１．２ｍ以下である。また紡口から外部凝固面までの空間における温度は、下限として１０℃以上、好ましくは２０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。湿度は温度との兼ね合いで変化するが、下限として０％以上、好ましくは１０％以上、特に好ましくは３０％以上であり、上限としては１００％以下である。   When producing a hollow fiber membrane by a wet film forming method for obtaining a vinyl alcohol polymer membrane according to the present invention, the structure of the hollow fiber membrane is freely controlled not only to a uniform structure but also to various non-uniform structures. Therefore, the distance from the spinning nozzle to the external coagulation liquid surface (hereinafter referred to as idle running distance) and the temperature and humidity of the space from the spinning nozzle to the external coagulation liquid surface can be adjusted. Although there is no limitation as long as the temperature and humidity of the space can be adjusted, for example, the lower limit of the free running distance is 0.001 m or more, preferably 0.005 m or more, particularly preferably 0.01 m or more, and the upper limit is 2.0 m or less, preferably Is 1.5 m or less, particularly preferably 1.2 m or less. The temperature in the space from the spinning nozzle to the external solidification surface is 10 ° C. or higher, preferably 20 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher as the lower limit. The humidity varies depending on the temperature, but the lower limit is 0% or more, preferably 10% or more, particularly preferably 30% or more, and the upper limit is 100% or less.

本発明に係わる湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合の巻取り速度は、製造条件である各種因子、紡口の形状、紡糸原液の組成、内部凝固液および外部凝固液の組成、原液および各凝固液の温度等で変化し得るが、概ね３００ｍ／時間から９０００ｍ／時間の速度が選択される。   The winding speed in the case of producing a hollow fiber membrane by the wet film-forming method according to the present invention is as follows: various factors as production conditions, the shape of the nozzle, the composition of the spinning stock solution, the composition of the internal coagulating liquid and the external coagulating liquid, and the stock solution Although the speed may vary depending on the temperature of each coagulating liquid, a speed of approximately 300 m / hour to 9000 m / hour is selected.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜を得る湿式成膜法においては、凝固液による凝固後、必要に応じて延伸、中和、水洗や湿熱処理、硫酸アンモニウム置換、乾燥などの処理をすることができる。膜の強度を強めるため脱溶媒槽に浸漬して脱溶媒を促進することができる。脱溶媒液には、凝固液による濃度誘起相分離後、残存している溶媒を除去できる溶媒であり、膜を溶解しないものであればいずれの溶媒でも用いることが可能である。一般には、水、エタノール等を用いることが多い。さらに、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、ベンズアルデヒド、グリオキザール、ノナンジアール等のモノアルデヒドおよび／又は多価アルデヒドによるアセタール化や、エステル化、エーテル化等の変性処理をしたり、メチロール化合物や多価イソシアネートを用いた架橋化処理を単独あるいは組み合わせて行うことが可能である。また、紡糸後熱延伸および／又は熱処理したり、更に熱延伸および／又は熱処理後に上記の各種変性処理をすることができる。   In the wet film formation method for obtaining the vinyl alcohol polymer film according to the present invention, after coagulation with the coagulation liquid, it may be subjected to treatment such as stretching, neutralization, washing with water, wet heat treatment, ammonium sulfate substitution, and drying as necessary. it can. In order to increase the strength of the membrane, it can be immersed in a solvent removal tank to promote solvent removal. The solvent removal liquid is a solvent that can remove the remaining solvent after concentration-induced phase separation by the coagulation liquid, and any solvent that does not dissolve the membrane can be used. In general, water, ethanol or the like is often used. Furthermore, it is modified by acetalization with monoaldehyde and / or polyhydric aldehyde such as formaldehyde, glutaraldehyde, benzaldehyde, glyoxal, nonane dial, esterification, etherification, etc., or cross-linking with methylol compound or polyisocyanate It is possible to perform the conversion process alone or in combination. In addition, it can be subjected to hot drawing and / or heat treatment after spinning, and further to the above-described various modification treatments after hot drawing and / or heat treatment.

本発明に係わる湿式成膜法により得られた未乾燥の本発明のビニルアルコール系高分子膜の乾燥温度は、乾燥中の膜破断が生じない温度であれば何ら限定はしないが、例えば、２０℃以上からビニルアルコール系高分子の溶融温度以下の温度範囲内で乾燥を行う。好ましい乾燥温度としては３０℃以上、８０℃以下である。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１時間以上から４８時間までが選択される。   The drying temperature of the undried vinyl alcohol polymer film of the present invention obtained by the wet film-forming method according to the present invention is not limited as long as it does not cause film breakage during drying. Drying is performed within a temperature range from ℃ to the melting temperature of the vinyl alcohol polymer. A preferable drying temperature is 30 ° C. or higher and 80 ° C. or lower. The time required for drying is determined by the relationship with the drying temperature, but is generally selected from 0.01 hours to 48 hours.

本発明に係わるビニルアルコール系高分子膜の親水性の度合いは、接触角によって評価することができる。２５℃における前進接触角および後退接触角の平均値が６０度以下であることが好ましく、４５度以下であることがより好ましく、更に好ましくは３０度以下である。また、簡便な評価法としては、ビニルアルコール系高分子膜を水と接触させた際に、膜の細孔内部に水が自発的に浸透すれば充分な親水性を持つと判断してよい。   The degree of hydrophilicity of the vinyl alcohol polymer film according to the present invention can be evaluated by the contact angle. The average value of the advancing contact angle and the receding contact angle at 25 ° C. is preferably 60 degrees or less, more preferably 45 degrees or less, and still more preferably 30 degrees or less. Further, as a simple evaluation method, when the vinyl alcohol polymer membrane is brought into contact with water, it may be determined that it has sufficient hydrophilicity if water spontaneously permeates into the pores of the membrane.

本発明に係わるセルロース系高分子膜は、主としてセルロース系高分子からなるものであるが、セルロース系高分子の特性を損なわない範囲で他の高分子量物質や添加物を含有していてもよい。これらの高分子を二種以上、組み合わせて実施することも可能である。
本発明に係わるセルロース系高分子は、銅アンモニア再生セルロースやセルロースジアセテート、セルローストリアセテート、セルロースプロピオネート、セルロースブチレート、セルロースフェニルカルバニレートなどのセルロースエステル化合物、メチルセルロース、エチルセルロースなどのセルロースエーテルなど、およびこれらを組み合わせたブレンド化合物が挙げられる。その中でも、銅アンモニア再生セルロースが良い。The cellulose polymer membrane according to the present invention is mainly composed of a cellulose polymer, but may contain other high molecular weight substances and additives as long as the characteristics of the cellulose polymer are not impaired. It is also possible to carry out by combining two or more of these polymers.
Cellulose polymers according to the present invention include cellulose ester compounds such as copper ammonia regenerated cellulose, cellulose diacetate, cellulose triacetate, cellulose propionate, cellulose butyrate, and cellulose phenylcarbanilate, and cellulose ethers such as methylcellulose and ethylcellulose. , And blend compounds combining these. Among them, copper ammonia regenerated cellulose is preferable.

本発明に係わるセルロース系高分子の重量平均分子量は、下限としては５０００以上、好ましくは１万以上、特に好ましくは５万以上が良く、上限として１００万以下、好ましくは９０万以下、特に好ましくは８０万以下が良い。この範囲内であれば、十分な強度と成膜性が得られる。   The weight average molecular weight of the cellulosic polymer according to the present invention is 5,000 or more, preferably 10,000 or more, particularly preferably 50,000 or more as a lower limit, and 1,000,000 or less, preferably 900,000 or less, particularly preferably as an upper limit. 800,000 or less is good. Within this range, sufficient strength and film formability can be obtained.

本発明に係るセルロース系高分子膜の分画分子量は、免疫グロブリン１量体と２量体を十分に分離できれば良く、１０万以上、好ましくは１５万以上、さらに好ましくは２５万以上が良く、上限としては５０万未満、好ましくは４５万以下、さらに好ましくは４０万以下に設定する必要がある。分画分子量が１０万未満であると、免疫グロブリンの透過量が低下する問題があり、また、５０万以上であると免疫グロブリン１量体および２量体が共に膜を透過し、分画性能が低下する。
本発明に係る分画分子量は、アルブミン（６６０００）、γ−グロブリン（１６００００）、カタラーゼ（２３２０００）、フェリチン（４４００００）、サイログロブリン（６６９０００）などの蛋白質やＰＥＧ、デキストラン等を用いて、デッドエンド濾過を行い、分子量と阻止率の関係から阻止率が９０％となる分子量として算出される。The molecular weight cutoff of the cellulosic polymer membrane according to the present invention is only required to be able to sufficiently separate the immunoglobulin monomer and the dimer, and is 100,000 or more, preferably 150,000 or more, more preferably 250,000 or more, The upper limit should be set to less than 500,000, preferably 450,000 or less, and more preferably 400,000 or less. If the molecular weight cut-off is less than 100,000, there is a problem that the amount of immunoglobulin permeated decreases, and if it is more than 500,000, both the immunoglobulin monomer and dimer permeate through the membrane. Decreases.
The molecular weight cut-off according to the present invention is determined by dead-end filtration using proteins such as albumin (66000), γ-globulin (160000), catalase (232000), ferritin (440000), thyroglobulin (669000), PEG, dextran and the like. The molecular weight is calculated as the molecular weight at which the blocking rate is 90% from the relationship between the molecular weight and the blocking rate.

本発明に係わるセルロース系高分子膜の中空糸を製造する方法は何ら限定しないが、例えば、環状二重紡口の外側紡出口より紡糸原液を、該環状二重紡口の中央紡出口より上記紡糸原液に対するミクロ相分離兼凝固液である内部凝固液を、同時に吐出し、紡出筒に導入する。紡出筒とは紡口に直接連結された筒である。紡出筒には、紡糸原液が吐出された直後に外部凝固液と接触させるために外液で満たされており、定常的に送液され、紡糸原液とともに、下行管中を流下する。この時にミクロ相分離により粒子が形成され、三次元的につながった膜構造が固定されて多孔膜構造が完成される。   The method for producing the hollow fiber of the cellulosic polymer membrane according to the present invention is not limited in any way. For example, the spinning dope is supplied from the outer spinning outlet of the annular double spinning nozzle, and the above-mentioned spinning from the central spinning outlet of the annular double spinning nozzle The internal coagulation liquid, which is a microphase separation and coagulation liquid for the spinning dope, is simultaneously discharged and introduced into the spinning cylinder. A spinning cylinder is a cylinder directly connected to a spinning nozzle. The spinning cylinder is filled with an external liquid to be brought into contact with the external coagulation liquid immediately after the spinning raw liquid is discharged, and is constantly fed, and flows down in the descending pipe together with the spinning raw liquid. At this time, particles are formed by microphase separation, and the three-dimensionally connected membrane structure is fixed to complete the porous membrane structure.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる良溶媒とは、セルロース系高分子を溶解させるものであれば何ら限定しないが、例えば、銅アンモニア溶液、などが挙げられる。   The good solvent used in the wet film forming method for obtaining the cellulose polymer film according to the present invention is not limited as long as it dissolves the cellulose polymer, and examples thereof include a copper ammonia solution.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液は、目的の構造および性能を有するセルロース系高分子膜を製造できれば何ら限定はしない。膜原液におけるセルロース系高分子の濃度に関しては、濃度を上げるにつれて成膜性は向上するが、逆に膜の空孔率は減少し、透水性が低下する傾向がある。そのため、膜原液全体を１００重量％とした場合、セルロース系高分子の濃度範囲としては分子量によって異なるが、下限として２重量％以上、好ましくは５重量％以上、特に好ましくは１０重量％以上である。また上限としては２５重量％以下、好ましくは２０重量％以下、特に好ましくは１５重量％以下で均一に溶解した溶液が好適に使用される。セルロース濃度が２重量％未満の時は、得られる中空糸膜の力学的特性が不十分となり、２５重量％を越えると紡糸液調整および紡糸操作が困難になる。   The membrane stock solution used in the wet film-forming method for obtaining the cellulose polymer film according to the present invention is not particularly limited as long as a cellulose polymer film having a target structure and performance can be produced. Regarding the concentration of the cellulosic polymer in the membrane stock solution, the film formability improves as the concentration increases, but conversely, the porosity of the membrane decreases and the water permeability tends to decrease. Therefore, when the whole membrane stock solution is 100% by weight, the concentration range of the cellulosic polymer varies depending on the molecular weight, but the lower limit is 2% by weight or more, preferably 5% by weight or more, particularly preferably 10% by weight or more. . Moreover, as an upper limit, the solution which melt | dissolved uniformly in 25 weight% or less, Preferably it is 20 weight% or less, Most preferably, it is 15 weight% or less is used suitably. When the cellulose concentration is less than 2% by weight, the mechanical properties of the resulting hollow fiber membrane are insufficient, and when it exceeds 25% by weight, the spinning solution adjustment and spinning operation become difficult.

本発明に係わる膜原液の温度は、下限として０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上、上限として膜原液中の良溶媒沸点以下が好適に使用される。この温度条件下であれば、膜原液として好ましい膜への加工を行うのに好適な粘度を得ることができる。   The lower limit of the temperature of the membrane stock solution according to the present invention is preferably 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher, and the upper limit is a good solvent boiling point or lower in the membrane stock solution. If it is this temperature condition, the viscosity suitable for processing into a film | membrane preferable as a film | membrane stock solution can be obtained.

本発明に係わる膜原液には、製造する膜の性能に影響を及ぼさない限り、目的に応じて、酸化防止剤、結晶核剤、帯電防止剤、難燃剤、滑剤、紫外線吸収剤等の添加剤を混合しても差し支えない。   The film stock solution according to the present invention includes additives such as an antioxidant, a crystal nucleating agent, an antistatic agent, a flame retardant, a lubricant, and an ultraviolet absorber as long as the performance of the film to be produced is not affected. Can be mixed.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる凝固液としては、膜原液と接触したとき濃度誘起相分離を引き起こし、接触面から膜を形成することができる物質であれば何ら限定しないが、例えば、純水、水、パークレン、トリクレン、トリクロロトリフルオロエタン、メタノール、エタノール、プロパノール、アセトン、メチルエチルケトン、水酸化ナトリウム、硫酸、硫酸アンモニウム、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリセリン、ポリエチレングリコール等のポリオール等、紡糸液に対して非凝固性又は微凝固性を示す液体などが挙げられる。このような凝固剤は、紡糸液の種類によって適宜選択して用いる。これらの凝固液から選ばれる少なくとも１種を含む溶液又はこれらの混合液が好ましく用いられる。好ましくは、アセトンとアンモニア、水からなる混合溶液が良い。   The coagulating liquid used in the wet film-forming method for obtaining the cellulose polymer film according to the present invention is a substance that can cause concentration-induced phase separation when in contact with the membrane stock solution and can form a film from the contact surface. Although it does not limit at all, for example, pure water, water, perchlene, trichlene, trichlorotrifluoroethane, methanol, ethanol, propanol, acetone, methyl ethyl ketone, sodium hydroxide, sulfuric acid, ammonium sulfate, formic acid, acetic acid, propionic acid, glycerin, polyethylene glycol Examples thereof include a liquid that exhibits non-coagulability or fine coagulation with respect to the spinning solution. Such a coagulant is appropriately selected depending on the type of spinning solution. A solution containing at least one selected from these coagulating liquids or a mixed liquid thereof is preferably used. Preferably, a mixed solution composed of acetone, ammonia and water is good.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる内部凝固液と外部凝固液は、同じ凝固液でも異なる凝固液でも良い。   The internal coagulating liquid and the external coagulating liquid used in the wet film forming method for obtaining the cellulose polymer film according to the present invention may be the same coagulating liquid or different coagulating liquids.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る成膜法として、空気、窒素、二酸化炭素、アルゴン、酸素、テトラフルオロメタン、ヘキサフルオロエタン等のいわゆるフロンガス、その他ハロゲンガス等の気体を使用した乾湿式成膜法で製造しても良い。
本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法における成膜温度とは、膜原液と凝固液を接触させ、濃度誘起相分離を生じさせる時の温度であれば何ら限定しないが、成膜温度の下限としては０℃以上、好ましくは１０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。上限としては膜原液もしくは凝固液の各沸点以下、好ましくは各沸点から５℃以上低い温度、特に好ましくは沸点から１０℃以上低い温度である。中空糸膜であれば二重紡口の温度により決まる。なお、平膜においては凝固液温度で決まる。As a film forming method for obtaining a cellulose polymer film according to the present invention, dry, wet using gas such as air, nitrogen, carbon dioxide, argon, oxygen, so-called Freon gas such as tetrafluoromethane, hexafluoroethane, and other halogen gas. You may manufacture by the film-forming method.
The film formation temperature in the wet film formation method for obtaining the cellulose polymer film according to the present invention is not limited as long as it is a temperature at which the membrane stock solution and the coagulation liquid are brought into contact with each other to cause concentration-induced phase separation. The lower limit of the film temperature is 0 ° C. or higher, preferably 10 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher. The upper limit is a temperature below each boiling point of the membrane stock solution or coagulation liquid, preferably a temperature lower by 5 ° C. or more from each boiling point, particularly preferably a temperature lower by 10 ° C. or more from the boiling point. For hollow fiber membranes, it depends on the temperature of the double nozzle. In a flat membrane, it is determined by the coagulation liquid temperature.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法に用いられる膜原液、凝固液、特に中空糸膜製造時に糸の内部を通す内部凝固液は均一溶解後に、溶存気体を除去することが望ましい。溶存気体を除去することで、溶存気体の発泡による膜の欠陥を著しく改善することができる。また、溶存気体のなかでも特に酸素を除くことで、高い温度下での膜加工による材料への酸化反応が減少する。膜原液および凝固液、内部凝固液に気体が溶存していない場合は、この工程を省略しても良い。また、乾湿式成膜法として空気、窒素、アンモニアガス等の気体を凝固剤として用いている場合には、この工程は実施しない。   The membrane stock solution used in the wet film forming method for obtaining the cellulose polymer membrane according to the present invention, the coagulating solution, in particular, the internal coagulating solution passing through the inside of the yarn during the production of the hollow fiber membrane can be dissolved uniformly and then the dissolved gas can be removed. desirable. By removing the dissolved gas, film defects due to foaming of the dissolved gas can be remarkably improved. Further, by removing oxygen from the dissolved gas, the oxidation reaction to the material due to film processing at a high temperature is reduced. This step may be omitted when no gas is dissolved in the membrane stock solution, the coagulation solution, and the internal coagulation solution. In addition, when a gas such as air, nitrogen, ammonia gas or the like is used as a coagulant as a dry / wet film forming method, this step is not performed.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法で紡口から外部凝固液面までの距離（以後、空走距離）を設けて外部凝固液中に導入しても、あるいは直接外部凝固液に導入してもよい。空走距離は、紡糸原液が真っすぐに外部凝固液に進入する長さが好ましい。例えば、０．５ｍ以下、好ましくは０．２ｍ以下、特に好ましくは０．１ｍ以下である。空走距離が長くなると成型性が悪くなり、中空糸形状を保持できなくなる。
本発明に係わる空走距離の空間における温度は、下限として１０℃以上、好ましくは２０℃以上、特に好ましくは２５℃以上である。湿度は温度との兼ね合いで変化するが、下限として０％以上、好ましくは１０％以上、特に好ましくは３０％以上であり、上限としては１００％以下である。In the wet film forming method for obtaining the cellulose polymer film according to the present invention, a distance from the spinning nozzle to the external coagulation liquid surface (hereinafter referred to as an idle running distance) is provided and introduced into the external coagulation liquid, or directly external coagulation. It may be introduced into the liquid. The idle running distance is preferably such a length that the spinning dope enters the external coagulation liquid straight. For example, it is 0.5 m or less, preferably 0.2 m or less, particularly preferably 0.1 m or less. If the free running distance is long, the moldability is deteriorated and the hollow fiber shape cannot be maintained.
The temperature in the space of the free running distance according to the present invention is 10 ° C. or higher, preferably 20 ° C. or higher, particularly preferably 25 ° C. or higher as the lower limit. The humidity varies depending on the temperature, but the lower limit is 0% or more, preferably 10% or more, particularly preferably 30% or more, and the upper limit is 100% or less.

紡糸原液は、下行管中を流下している段階で中空糸膜の形状を有するようになり、この中空糸膜は、上行管の開口部より引き出され巻取枠に巻取られる。
本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法で中空糸膜を製造する場合の巻取り速度は、製造条件である各種因子、紡口の形状、紡糸原液の組成、内部凝固液および外部凝固液の組成、原液および各凝固液の温度等で変化し得るが、下限としては、１００ｍ／時間以上、より好ましくは２００ｍ／時間以上が良く、上限としては、１０００ｍ／時間以下、より好ましくは５００ｍ／時間以下が良い。The spinning dope has a shape of a hollow fiber membrane when it flows down the descending tube, and this hollow fiber membrane is drawn out from the opening of the ascending tube and wound around the winding frame.
The winding speed in the case of producing a hollow fiber membrane by a wet film-forming method for obtaining a cellulose polymer membrane according to the present invention is as follows: various factors that are production conditions, the shape of the spinning nozzle, the composition of the spinning dope, Although it may vary depending on the composition of the external coagulation liquid, the temperature of the raw liquid and each coagulation liquid, etc., the lower limit is 100 m / hour or more, more preferably 200 m / hour or more, and the upper limit is 1000 m / hour or less, more preferably Is preferably 500 m / hour or less.

本発明に係わるセルロース系高分子膜を得る湿式成膜法においては、凝固液による凝固後、膜の強度を強めるため脱溶媒槽に浸漬して脱溶媒を促進することができる。脱溶媒液には、凝固液による濃度誘起相分離後、残存している溶媒を除去できる溶媒であり、膜を溶解しないものであればいずれの溶媒でも用いることが可能である。一般には、水、エタノール等を用いることが多い。   In the wet film forming method for obtaining the cellulose polymer film according to the present invention, after the coagulation with the coagulating liquid, the desolvation can be promoted by immersing in a solvent removal tank in order to increase the strength of the film. The solvent removal liquid is a solvent that can remove the remaining solvent after concentration-induced phase separation by the coagulation liquid, and any solvent that does not dissolve the membrane can be used. In general, water, ethanol or the like is often used.

本発明に係わる湿式成膜法により得られた未乾燥のセルロース系高分子膜の乾燥温度は、乾燥中の膜破断が生じない温度であれば何ら限定はしないが、例えば、２０℃以上からセルロース系高分子の溶融温度以下の温度範囲内で乾燥を行う。乾燥温度は、下限としては、３０℃以上、より好ましくは４０℃以上が良く、上限としては、８０℃以下、より好ましくは７０℃以下が良い。乾燥に要する時間は、乾燥温度との関係で決まるが、概ね０．０１〜４８時間までが選択される。また、水および無機塩水溶液で精練された後に、グリセリンあるいはポリエチレングリコール等の公知の膜孔径保持剤が付与して、乾燥しても良い。   The drying temperature of the undried cellulosic polymer film obtained by the wet film-forming method according to the present invention is not limited as long as it does not cause film breakage during drying. Drying is performed within a temperature range below the melting temperature of the polymer. The lower limit of the drying temperature is 30 ° C or higher, more preferably 40 ° C or higher, and the upper limit is 80 ° C or lower, more preferably 70 ° C or lower. The time required for drying is determined depending on the relationship with the drying temperature, but is generally from 0.01 to 48 hours. Further, after scouring with water and an aqueous inorganic salt solution, a known membrane pore size retaining agent such as glycerin or polyethylene glycol may be applied and dried.

本発明に係わる紡出筒中の外部凝固液の流れの速度（外部凝固液速度）は、巻取速度より極端に遅い場合は、紡出筒中で延伸がかかるようになり、好ましくない。本発明では、外部凝固液速度と巻取速度の関係は、その速度差が２０％以下にあることが望ましい。
本発明に係わる外部凝固液速度は凝固浴中の浴抵抗を抑えるために早い方が良い。しかしながら、外液流速が速くなりすぎると中空糸膜の糸揺れが激しくなり紡糸が困難になるので、適切な値に設定する必要がある。最も好ましくは、中空糸膜の糸揺れが生じない範囲での最大流速を選ぶことである。When the flow rate of the external coagulating liquid in the spinning cylinder according to the present invention (external coagulating liquid speed) is extremely slower than the winding speed, it becomes undesirably stretched in the spinning cylinder. In the present invention, the relationship between the external coagulation liquid speed and the winding speed is preferably such that the speed difference is 20% or less.
The external coagulation liquid speed according to the present invention is preferably high in order to suppress the bath resistance in the coagulation bath. However, if the flow rate of the external liquid is too high, the yarn swinging of the hollow fiber membrane becomes intense and spinning becomes difficult. Most preferably, the maximum flow rate is selected in such a range that the yarn does not sway in the hollow fiber membrane.

本発明に係わる紡出筒の径は、大きい方が紡出作業は容易であるが、凝固液量を多量に必要とするために小さい方が望ましく、下限としては、３ｍｍ以上、より好ましくは５ｍｍ以上が良く、上限としては、２０ｍｍ以下、より好ましくは１０ｍｍ以下が良い。
本発明に係わる紡出筒の長さは、中空糸膜構造の形成に対応して適切な凝固時間を与え得るものでなければならないために、中空糸膜の紡糸速度に対応して適切な長さに設定されることが好ましい。その材質は、凝固液に対して耐久性のある素材であればどのような素材でも使用することが可能であるが、紡糸状態を観察することのできる透明の材質が望ましく、例えば、ガラス、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン等が使用できる。その中でも、紡糸原液が付着しにくいため紡出作業が容易であるという特徴をもつポリテトラフルオロエチレンが最も好適な材質である。The larger the diameter of the spinning cylinder according to the present invention, the easier the spinning operation, but a smaller one is desirable because a large amount of coagulation liquid is required, and the lower limit is 3 mm or more, more preferably 5 mm. The upper limit is good, and the upper limit is 20 mm or less, more preferably 10 mm or less.
The length of the spinning tube according to the present invention must be capable of providing an appropriate coagulation time corresponding to the formation of the hollow fiber membrane structure. It is preferable to be set to this. Any material can be used as long as it is durable to the coagulating liquid, but a transparent material that can observe the spinning state is desirable, for example, glass, polyethylene. Polypropylene, polytetrafluoroethylene, etc. can be used. Among them, polytetrafluoroethylene having the feature that the spinning operation is easy because the spinning stock solution is difficult to adhere is the most preferable material.

本発明の限外濾過膜の膜厚は、下限としては１５μｍ以上、好ましくは２０μｍ以上が良く、上限としては２０００μｍ以下、好ましくは１０００μｍ以下、特に好ましくは５００μｍ以下が良い。膜厚が１５μｍ未満であると限外濾過膜の強度が不充分になる傾向があり好ましくない。また、２０００μｍを超えると免疫グロブリン１量体の透過性能が不充分となる傾向があり好ましくない。   The film thickness of the ultrafiltration membrane of the present invention is 15 μm or more, preferably 20 μm or more as the lower limit, and 2000 μm or less, preferably 1000 μm or less, particularly preferably 500 μm or less as the upper limit. If the film thickness is less than 15 μm, the strength of the ultrafiltration membrane tends to be insufficient, such being undesirable. On the other hand, if it exceeds 2000 μm, the permeation performance of the immunoglobulin monomer is liable to be insufficient.

本発明に係わる限外濾過膜の中空糸の内表面、あるいは、平膜の片面に緻密な層を有している場合、その緻密層の厚みは、免疫グロブリン溶液の透過を向上させるために通常１００μｍ以下、好ましくは１０μｍ以下、さらに好ましくは１μｍ以下が良い。   When the ultrafiltration membrane according to the present invention has a dense layer on the inner surface of the hollow fiber or on one side of the flat membrane, the thickness of the dense layer is usually in order to improve the permeation of the immunoglobulin solution. It is 100 μm or less, preferably 10 μm or less, and more preferably 1 μm or less.

本発明に係わる限外濾過膜の空孔率は、下限としては３０％以上、好ましくは４０％以上、特に好ましくは５０％が良く、上限としては９５％以下、好ましくは９０％以下、特に好ましくは８５％以下が良い。空孔率が３０％未満であると濾過速度が不充分となり、９５％を超えると限外濾過膜の強度が不充分となることから好ましくない。空孔率は、膜の断面積および長さから求めた見かけ体積と該膜の重量および膜素材の真密度から求めた数値である。   The porosity of the ultrafiltration membrane according to the present invention has a lower limit of 30% or more, preferably 40% or more, particularly preferably 50%, and an upper limit of 95% or less, preferably 90% or less, particularly preferably. Is preferably 85% or less. If the porosity is less than 30%, the filtration rate becomes insufficient, and if it exceeds 95%, the strength of the ultrafiltration membrane becomes insufficient. The porosity is a numerical value obtained from the apparent volume obtained from the cross-sectional area and length of the membrane, the weight of the membrane, and the true density of the membrane material.

本発明に係わる限外濾過膜の形状は、分画性能を発現できれば特に限定されるものではないが、例えば、中空糸状、平膜状、チューブ状等、種々の形状を用いることができるが、体積に比して濾過有効膜面積の大きい中空糸状が有効である。   The shape of the ultrafiltration membrane according to the present invention is not particularly limited as long as the fractionation performance can be expressed.For example, various shapes such as a hollow fiber shape, a flat membrane shape, and a tube shape can be used. A hollow fiber shape having a large filtration effective membrane area compared to the volume is effective.

本発明に係わる限外濾過膜の膜表面構造についてはとくに制限はなく、円形、楕円形等の単独孔や連続的に繋がった連続孔、網状微細孔、スリット状微細孔等が挙げられる。   The membrane surface structure of the ultrafiltration membrane according to the present invention is not particularly limited, and examples thereof include single holes such as a circle and an ellipse, continuous holes continuously connected, net-like fine holes, slit-like fine holes, and the like.

本発明における限外濾過膜は、免疫グロブリンが接触する膜表面が限外濾過膜であれば良く、構造を保持するためには、如何なる材質から成る基材（支持体）を用いてもよい。例えば、物理的強度を高めるために他の基材（支持体）として織布又は不織布の支持体や多孔性無機体など用い、これらの基材の上に限外濾過膜を成型した膜などが挙げられる。   In the present invention, the ultrafiltration membrane may be an ultrafiltration membrane as long as the surface of the membrane in contact with the immunoglobulin is used, and a substrate (support) made of any material may be used in order to maintain the structure. For example, in order to increase physical strength, a woven fabric or nonwoven fabric support or a porous inorganic material is used as another substrate (support), and a membrane obtained by molding an ultrafiltration membrane on these substrates is used. Can be mentioned.

一般に、濾過方法としてクロスフロー濾過とデッドエンド濾過が汎用濾過法として実施されている。クロスフロー濾過とは、蛋白質等の微細粒子が含まれる被処理液を膜に供給しつつ濾過して、異径の微粒子を分離するものである。膜面に堆積する微粒子（ケーク層）を微粒子溶液の平行流による剪断力にて掻き取りながら、安定したケーク層の状態を長期にわたって維持することで、分画性能を維持しようとするものである。一方、デッドエンド濾過は、膜面に対して垂直に微粒子を流すため、膜表面に微粒子が蓄積し、濾過時間と共に透過抵抗が次第に増加し、透過微粒子濃度が変化してしまう。垂直濾過やノーマル濾過とも呼称される。   In general, cross-flow filtration and dead-end filtration are performed as general-purpose filtration methods as filtration methods. Cross-flow filtration is a process in which a liquid to be treated containing fine particles such as proteins is filtered while being supplied to a membrane to separate fine particles having different diameters. It is intended to maintain the fractionation performance by maintaining the state of a stable cake layer over a long period of time while scraping the fine particles (cake layer) deposited on the film surface with the shearing force by the parallel flow of the fine particle solution. . On the other hand, in the dead-end filtration, fine particles are flowed perpendicularly to the membrane surface, so that fine particles accumulate on the membrane surface, the permeation resistance gradually increases with the filtration time, and the permeate fine particle concentration changes. Also called vertical filtration or normal filtration.

本発明に係わるクロスフロー濾過（十字流濾過や平行濾過、タンジェンシャルフロー濾過とも呼称される）とは、膜面に対して平行に免疫グロブリン溶液を流し、せん断力により膜表面に堆積する物を押し流すことで、動的平衡が成立した一定のケーク層の状態を形成し、分画性能を維持したまま連続運転を可能にする濾過方式である。   Cross-flow filtration according to the present invention (also called cross-flow filtration, parallel filtration, or tangential flow filtration) is a method in which an immunoglobulin solution is allowed to flow parallel to the membrane surface, and deposits on the membrane surface by shearing force. This is a filtration system that forms a constant cake layer state in which dynamic equilibrium is established by swirling, and enables continuous operation while maintaining fractionation performance.

本発明に係わる濾過線速とは、膜面に対して平行流れる溶液の速度である。濾過線速は、ケーク層を大きく変動させず、分画性能を発現させることができれば特に限定されるものではないが、例えば、下限としては０．１ｃｍ／秒以上、好ましくは１ｃｍ／秒以上、より好ましくは１０ｃｍ／秒以上が良く、上限としては２００ｃｍ／秒以下、より好ましくは１００ｃｍ／秒以下が良い。２００ｃｍ／秒超えると、免疫グロブリンへのストレスがかかり、凝集や白濁が起こりやすくなり、逆に、０．１ｃｍ／秒未満では、処理量が小さくなり、その結果、コストが高くなるなどの問題がある。   The filtration linear velocity according to the present invention is the velocity of the solution flowing parallel to the membrane surface. The filtration linear speed is not particularly limited as long as the cake layer can be expressed without greatly changing the cake layer. For example, the lower limit is 0.1 cm / second or more, preferably 1 cm / second or more, More preferably, it is 10 cm / second or more, and the upper limit is 200 cm / second or less, more preferably 100 cm / second or less. If it exceeds 200 cm / sec, stress is applied to the immunoglobulin, and aggregation or cloudiness is likely to occur. Conversely, if it is less than 0.1 cm / sec, the amount of processing becomes small, resulting in high costs. is there.

本発明に係わる濾過圧力は、分画性能を発現させることができれば特に限定されるものではない。特許文献４では、膜全体に均一の圧力がかかるようにするため、免疫グロブリン透過液側から背圧をかけ、転移点でのトランスメンブラン圧（ＴＭＰ）以下で濾過することで分画性能を発現させている。しかしながら、背圧をかけるための装置や低い圧力での濾過のため、処理量が低い問題点がある。本発明の分離方法では、転移点のＴＭＰより高い圧力で濾過を行っても分画性能が維持することができ、その結果、免疫グロブリンの透過速度、すなわち処理量も大きいものとなる。
本発明に係わる濾過圧力としては、下限として０．００１ＭＰａ以上、好ましくは０．００５ＭＰａ以上であり、上限としては０．３ＭＰａ以下、好ましくは０．２０ＭＰａ以下が良い。
０．００１ＭＰａ未満では、処理量が低くなるため生産性が悪くなり、一方０．３ＭＰａ超えると急激なケーク層形成が引き起こされ、膜閉塞が起こる問題がある。The filtration pressure according to the present invention is not particularly limited as long as the fractionation performance can be expressed. In Patent Document 4, in order to apply a uniform pressure to the entire membrane, back pressure is applied from the immunoglobulin permeate side, and filtration is performed at a transmembrane pressure (TMP) or less at the transition point to express fractionation performance. I am letting. However, there is a problem that the amount of processing is low due to a device for applying back pressure and filtration at a low pressure. In the separation method of the present invention, the fractionation performance can be maintained even when filtration is performed at a pressure higher than the TMP at the transition point, and as a result, the permeation rate of immunoglobulin, that is, the throughput is large.
The filtration pressure according to the present invention has a lower limit of 0.001 MPa or more, preferably 0.005 MPa or more, and an upper limit of 0.3 MPa or less, preferably 0.20 MPa or less.
If the pressure is less than 0.001 MPa, the throughput becomes low and the productivity is deteriorated. On the other hand, if the pressure exceeds 0.3 MPa, a rapid cake layer formation is caused and the film is blocked.

本発明に係わるクロスフロー濾過を行うための装置は、免疫グロブリン濃度や線速、圧力などをコントロールできる装置であれば何ら限定しないが、例えば、免疫グロブリン溶液の濃度を吸光度計でモニタリングし、免疫グロブリン溶液の濃度を一定にするために希釈液を供給する装置と限外濾過膜に対して接線方向の線速と限外濾過膜を横切る圧力をコントロールする装置が一体となったクロスフロー濾過装置が挙げられる。   The apparatus for performing crossflow filtration according to the present invention is not limited as long as it can control the immunoglobulin concentration, linear velocity, pressure, etc. For example, the concentration of an immunoglobulin solution is monitored with an absorptiometer, A cross-flow filtration device in which a device for supplying a diluting solution and a device for controlling the tangential line speed and the pressure across the ultrafiltration membrane are integrated with the ultrafiltration membrane in order to keep the concentration of the globulin solution constant. Is mentioned.

具体的には、図１のようなクロスフロー濾過装置が挙げられる。免疫グロブリン元液タンク（４）内の溶液の濃度を吸光度計が組み込まれた濃度コントローラー（１１）でモニタリングし、その信号をポンプ１（２）に信号を送って回転をコントロールし、希釈液用タンク（１）中の希釈液を添加しながら免疫グロブリン元液タンク（４）中の溶液濃度をコントロールする。さらに、圧力計１（５）および圧力計２（６）、流量計（１０）で圧力と流量をモニタリングし、圧力・流量コントローラー（１２）から調整バルブ（７）とポンプ２（３）に信号を送って、限外濾過膜モジュール（８）に対して接線方向の線速と限外濾過膜を横切る圧力が設定値になるようにコントロールする。得られた免疫グロブリン透過液タンク（９）中の免疫グロブリン透過液の濃度および免疫グロブリン１量体と免疫グロブリン２量体の割合を測定できる装置、例えば、吸光度計やＧＰＣが本クロスフロー濾過装置に連結していても良い。   Specifically, a cross flow filtration apparatus as shown in FIG. The concentration of the solution in the immunoglobulin source solution tank (4) is monitored by a concentration controller (11) incorporating an absorptiometer, and the signal is sent to the pump 1 (2) to control rotation and for dilution liquid The solution concentration in the immunoglobulin source solution tank (4) is controlled while adding the diluent in the tank (1). In addition, pressure and flow are monitored by pressure gauge 1 (5), pressure gauge 2 (6), and flow meter (10), and signals are sent from pressure / flow controller (12) to adjustment valve (7) and pump 2 (3). To control the ultrafiltration membrane module (8) so that the tangential line speed and the pressure across the ultrafiltration membrane become set values. An apparatus capable of measuring the concentration of the immunoglobulin permeate in the obtained immunoglobulin permeate tank (9) and the ratio of the immunoglobulin monomer to the immunoglobulin dimer, such as an absorptiometer or GPC It may be connected to.

本発明に係わる「免疫グロブリン元液」とは、分画性能評価を行うために使用する免疫グロブリン溶液のことである。この溶液には、免疫グロブリン以外の生体成分やウイルスなどが含まれても良い。また、「免疫グロブリン透過液」とは、「限外濾過膜」によって分離・透過した溶液のことである。   The “immunoglobulin base solution” according to the present invention is an immunoglobulin solution used for performing fractionation performance evaluation. This solution may contain biological components other than immunoglobulins and viruses. Further, the “immunoglobulin permeate” is a solution separated and permeated by an “ultrafiltration membrane”.

また、図２のようなクロスフロー濾過装置でも良い。免疫グロブリン元液タンク（４）と限外濾過膜モジュール（８）との間に濃度をモニタリングできる装置、例えば、ＵＶフローセル（１３）などを設け、免疫グロブリン元液タンク（４）中の溶液濃度を濃度コントローラー（１１）でモニタリングし、その信号をポンプ１（２）に信号を送って回転をコントロールし、希釈液用タンク（１）中の希釈液を添加しながら免疫グロブリン元液タンク（４）中の溶液濃度をコントロールする。さらに、圧力計１（５）および圧力計２（６）、流量計（１０）で圧力と流量をモニタリングし、圧力・流量コントローラー（１２）から調整バルブ（７）とポンプ２（３）に信号を送って、限外濾過膜モジュール（８）に対して接線方向の線速と限外濾過膜を横切る圧力が設定値になるようにコントロールする。得られた免疫グロブリン透過液タンク（９）中の免疫グロブリン透過液の濃度および免疫グロブリン１量体、２量体の割合を測定できる装置、例えば、吸光度計やＧＰＣが本クロスフロー濾過装置に連結していても良い。   Further, a cross flow filtration device as shown in FIG. 2 may be used. A device capable of monitoring the concentration between the immunoglobulin source solution tank (4) and the ultrafiltration membrane module (8), for example, a UV flow cell (13) is provided, and the solution concentration in the immunoglobulin source solution tank (4) Is monitored by the concentration controller (11), and the signal is sent to the pump 1 (2) to control the rotation, and while adding the diluent in the diluent tank (1), the immunoglobulin source solution tank (4 ) Control the solution concentration. In addition, pressure and flow are monitored by pressure gauge 1 (5), pressure gauge 2 (6), and flow meter (10), and signals are sent from pressure / flow controller (12) to adjustment valve (7) and pump 2 (3). To control the ultrafiltration membrane module (8) so that the tangential line speed and the pressure across the ultrafiltration membrane become set values. A device capable of measuring the concentration of the immunoglobulin permeate in the obtained immunoglobulin permeate tank (9) and the ratio of the immunoglobulin monomer and dimer, for example, an absorptiometer or GPC is connected to the present crossflow filtration device. You may do it.

本発明に関わる免疫グロブリン濃度を調整するため溶媒や希釈液としては、免疫グロブリンの変性や凝集を起こすことがなければ何ら限定はしない。例えば、リン酸カルシウム・生理食塩水（ＰＢＳ）や生理食塩水、Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］グリシン（Ｔｒｉｃｉｎｅ）、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン、Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳ）、３−［（１，１−ジメチル−２−ヒドロキシエチル）アミノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸］（ＡＭＰＳＯ）、Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−３−アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳＯ）、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール（ＡＭＰ）、Ｎ−シクロヘキシル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳ）、ピペラジン−１，４−ビス（２−エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）等のグッド緩衝剤、酢酸塩、グリシン、クエン酸塩、リン酸塩、ベロナール、ホウ酸塩、コハク酸塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、イミダゾール等の緩衝液等が挙げられる。また、これら緩衝液に免疫グロブリンを含んだ希釈液を使用しても良い。   In order to adjust the immunoglobulin concentration according to the present invention, the solvent and diluent are not limited as long as they do not cause denaturation or aggregation of immunoglobulin. For example, calcium phosphate and physiological saline (PBS), physiological saline, N- [tris (hydroxymethyl) methyl] glycine (Tricine), N, N-bis (2-hydroxyethyl) glycine, N-tris (hydroxymethyl) Methyl-3-aminopropanesulfonic acid (TAPS), 3-[(1,1-dimethyl-2-hydroxyethyl) amino-2-hydroxypropanesulfonic acid] (AMPSO), N-cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid (CHES), N-cyclohexyl-2-hydroxy-3-aminopropanesulfonic acid (CAPSO), 2-amino-2-methyl-1-propanol (AMP), N-cyclohexyl-3-aminopropanesulfonic acid (CAPS) Piperazine-1,4-bis (2-ethanesulfonic acid) (P Good buffers PES), etc., acetate, glycine, citrate, phosphate, veronal, borate, succinate, tris (hydroxymethyl) aminomethane, and a buffer solution of imidazole and the like. Moreover, you may use the diluent which contains immunoglobulin in these buffers.

本発明に係わる緩衝剤の濃度は、免疫グロブリンの変性や凝集を起こすことがなければ何ら限定はしないが、例えば、下限として、１ｍＭ以上、好ましくは１０ｍＭ以上、より好ましくは５０ｍＭ以上が良く、上限としては、１Ｍ以下、好ましくは５００ｍＭ以下、より好ましくは２００ｍＭ以下が良い。
本発明に係わる緩衝剤のｐＨは、免疫グロブリンの変性や凝集を起こすことがなければ何ら限定はしないが、例えば、下限として、ｐＨ３以上、好ましくはｐＨ４以上、より好ましくはｐＨ５以上が良く、上限としては、ｐＨ１０以下、好ましくはｐＨ９以下、より好ましくはｐＨ８以下が良い。The concentration of the buffering agent according to the present invention is not particularly limited as long as it does not cause denaturation or aggregation of immunoglobulin. For example, the lower limit is 1 mM or more, preferably 10 mM or more, more preferably 50 mM or more. 1M or less, preferably 500 mM or less, more preferably 200 mM or less.
The pH of the buffering agent according to the present invention is not limited as long as it does not cause denaturation or aggregation of immunoglobulin. For example, the lower limit is pH 3 or higher, preferably pH 4 or higher, more preferably pH 5 or higher, and the upper limit. The pH is 10 or less, preferably 9 or less, more preferably 8 or less.

免疫グロブリン溶液には、必要に応じ、凝集抑制剤や安定化剤、防腐剤などを添加しても良い。   If necessary, an aggregation inhibitor, stabilizer, preservative, etc. may be added to the immunoglobulin solution.

濾過中、免疫グロブリンにストレスがかかるために凝集し、白濁する場合がある。その場合、界面活性剤や糖類などを凝集抑制剤として添加しても良い。
界面活性剤は、分子内に水になじみやすい部分（親水基）と、疎水部になじみやすい部分（疎水基）を持つ両親媒性分子である。界面活性剤は、その疎水基が免疫グロブリンの疎水部に相互作用し、免疫グロブリンの水への溶解性を高めると同時に、免疫グロブリン同士の疎水性相互作用を抑制し、凝集を抑制すると考えられている。
本発明に係わる界面活性剤としては、免疫グロブリンの変性や凝集を起こさず、分画性能に影響しなければ何ら限定されないが、両イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、カチオン系界面活性剤、アニオン系界面活性剤等が挙げられる。During filtration, the immunoglobulin is stressed and may aggregate and become cloudy. In that case, a surfactant or saccharide may be added as an aggregation inhibitor.
The surfactant is an amphipathic molecule having a portion (hydrophilic group) that is familiar with water and a portion (hydrophobic group) that is easily compatible with the hydrophobic portion in the molecule. Surfactants are thought to have a hydrophobic group that interacts with the hydrophobic part of immunoglobulins, increasing the solubility of immunoglobulins in water, and at the same time, suppressing hydrophobic interactions between immunoglobulins and suppressing aggregation. ing.
The surfactant according to the present invention is not limited in any way as long as it does not cause denaturation or aggregation of immunoglobulin and does not affect the fractionation performance, but it is not limited to amphoteric surfactants, nonionic surfactants, cationic interfaces. An activator, an anionic surfactant, etc. are mentioned.

本発明に係わる両イオン性界面活性剤としては、例えば、アミノ酸、アミノ酸誘導体、アルキルアミノ脂肪酸ナトリウム、アルキルベタイン、アルキルアミンオキシドなどが挙げられる。この中でも、特に、アミノ酸および／またはアミノ酸誘導体が良い。アミノ酸は免疫グロブリンの凝集を抑制する効果を発現する物質で、免疫グロブリン溶液に溶解することが可能であれば特に種類は限定しないが、例えば、リシン、アルギニン、アラニン、システイン、グリシン、セリン、プロリンなどが挙げられる。その中でも、リシンおよびアルギニン、アラニンが好ましく、特にリシンが効果を発現する。
本発明に関わるアミノ酸誘導体は、アミノ酸を化学修飾した物質であり、アセチル化アミノ酸、アシル化アミノ酸等がある。該アミノ酸および／または該アミノ酸誘導体は酸付加塩の形態で使用することもできる。酸付加塩を形成し得る酸としては、塩酸、硫酸等が挙げられる。これらを２種以上組み合わせて使用することも可能である。また、他の凝集抑制剤との併用も可能である。Examples of the amphoteric surfactant according to the present invention include amino acids, amino acid derivatives, sodium alkylamino fatty acids, alkylbetaines, and alkylamine oxides. Among these, amino acids and / or amino acid derivatives are particularly preferable. An amino acid is a substance that exhibits an effect of suppressing the aggregation of immunoglobulin, and is not particularly limited as long as it can be dissolved in an immunoglobulin solution. For example, lysine, arginine, alanine, cysteine, glycine, serine, proline Etc. Among these, lysine, arginine, and alanine are preferable, and lysine exhibits an effect in particular.
The amino acid derivative according to the present invention is a substance obtained by chemically modifying an amino acid, and includes acetylated amino acid, acylated amino acid and the like. The amino acid and / or the amino acid derivative can also be used in the form of an acid addition salt. Examples of the acid that can form an acid addition salt include hydrochloric acid and sulfuric acid. Two or more of these can be used in combination. Further, it can be used in combination with other aggregation inhibitors.

本発明に係わる非イオン性界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、しょ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸アルカノールアミドなどが挙げられる。この中でも、特に、ポリオキシエチレンアルキルエーテル系高分子および／その誘導体が良い。ポリオキシエチレンアルキルエーテルは、免疫グロブリンの凝集を抑制する効果を発現する物質で、免疫グロブリン溶液に溶解することが可能であれば特に種類は限定しないが、例えば、ポリエチレングリコールおよび／またはポリエチレングリコール誘導体が挙げられ、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体、また、ポリエチレングリコールを親水性セグメントとして含有する界面活性剤やブロック共重合体およびグラフト共重合体も凝集抑制剤として十分活用できる。これらを２種以上組み合わせて使用することも可能である。また、他の凝集抑制剤との併用も可能である。これらを２種以上組み合わせて使用することも可能である。また、他の凝集抑制剤との併用も可能である。   Examples of the nonionic surfactant according to the present invention include polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene alkylphenyl ether, sucrose fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, and fatty acid alkanolamide. . Of these, polyoxyethylene alkyl ether polymers and / or derivatives thereof are particularly preferable. Polyoxyethylene alkyl ether is a substance that exhibits the effect of suppressing the aggregation of immunoglobulin and is not particularly limited as long as it can be dissolved in an immunoglobulin solution. For example, polyethylene glycol and / or polyethylene glycol derivatives Polyethylene glycol, polyethylene oxide, polyethylene glycol-polypropylene glycol block copolymers, and surfactants, block copolymers, and graft copolymers containing polyethylene glycol as hydrophilic segments are also sufficient as aggregation inhibitors. Can be used. Two or more of these can be used in combination. Further, it can be used in combination with other aggregation inhibitors. Two or more of these can be used in combination. Further, it can be used in combination with other aggregation inhibitors.

本発明に係わるカチオン系界面活性剤としては、例えば、アルキルトリメチルアンモニウム塩、ジアルキルジメチルアンモニウム塩などが挙げられる。
本発明に係わるアニオン系界面活性剤としては、例えば、脂肪酸ナトリウム、脂肪酸カリウム、アルファスルホ脂肪酸エステルナトリウム、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、アルキル硫酸エステルナトリウム、アルキルエーテル硫酸エステルナトリウム、アルファオレフィンスルホン酸ナトリウム、アルキルスルホン酸ナトリウムなどが挙げられる。Examples of the cationic surfactant according to the present invention include alkyltrimethylammonium salts and dialkyldimethylammonium salts.
Examples of the anionic surfactant according to the present invention include fatty acid sodium, fatty acid potassium, sodium alphasulfo fatty acid ester, linear sodium alkylbenzene sulfonate, sodium alkyl sulfate, sodium alkyl ether sulfate, sodium alpha olefin sulfonate, Examples include sodium alkyl sulfonate.

本発明に係わる界面活性剤の分子量の下限値としては３０Ｄａ以上、さらに好ましくは、５０Ｄａ以上であり、上限値としては、５００００Ｄａ以下、さらに好ましくは、３００００Ｄａ以下である。３０Ｄａ以下では十分な凝集抑制効果が得られず、逆に、３００００Ｄａを超えると界面活性剤や、免疫グロブリンと界面活性剤の複合体が膜への詰まりやファウリングの原因となる場合がある。   The lower limit of the molecular weight of the surfactant according to the present invention is 30 Da or more, more preferably 50 Da or more, and the upper limit is 50000 Da or less, more preferably 30000 Da or less. If it is 30 Da or less, a sufficient aggregation suppressing effect cannot be obtained. Conversely, if it exceeds 30000 Da, a surfactant or a complex of immunoglobulin and surfactant may cause clogging or fouling in the membrane.

本発明に関わる糖類としては、免疫グロブリンの凝集を抑制する効果を発現する物質で、免疫グロブリン溶液に溶解することが可能であれば特に種類は限定しないが、具体的な糖類の例としては、グルコース、ソルビトール、ショ糖が挙げられる。   The saccharide according to the present invention is a substance that expresses the effect of suppressing the aggregation of immunoglobulin, and is not particularly limited as long as it can be dissolved in an immunoglobulin solution. Examples include glucose, sorbitol, and sucrose.

本発明における凝集抑制剤の濃度は、凝集抑制剤の種類に依存されるが、下限値としては、０．１ｇ／Ｌ以上が好ましく、さらに好ましくは、０．５ｇ／Ｌ以上であり、上限値としては、２００ｇ／Ｌ以下が好ましく、さらに好ましくは、１５０ｇ／Ｌ以下である。下限値０．１ｇ／Ｌ未満であれば、免疫グロブリンの凝集を抑制する効果が低く、上限値２００ｇ／Ｌ超えると、免疫グロブリン溶液の粘性が増加などによって免疫グロブリンの透過率の低下を引き起こす場合がある。   The concentration of the aggregation inhibitor in the present invention depends on the type of the aggregation inhibitor, but the lower limit is preferably 0.1 g / L or more, more preferably 0.5 g / L or more, and the upper limit. Is preferably 200 g / L or less, more preferably 150 g / L or less. When the lower limit value is less than 0.1 g / L, the effect of suppressing the aggregation of immunoglobulin is low, and when the upper limit value exceeds 200 g / L, the viscosity of the immunoglobulin solution increases, causing a decrease in immunoglobulin permeability. There is.

また、上記界面活性剤、糖類等は、凝集抑制効果以外に免疫グロブリンの劣化防止や吸着防止などの効果もある。さらに、無機塩も免疫グロブリンの劣化防止や吸着防止などの効果を有する。
本発明に係わる無機塩としては、塩化ナトリウムや塩化カリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、硫酸マグネシウム等が挙げられる。その濃度としては、例えば、下限値としては、１ｍＭ以上が好ましく、より好ましくは１０ｍＭ以上、最も好ましくは５０ｍＭ以上が良い。上限値としては、１Ｍ以下が好ましく、より好ましくは５００ｍＭ以下、最も好ましくは２００ｍＭ以下が良い。In addition to the aggregation suppressing effect, the surfactants, saccharides, and the like have effects such as prevention of immunoglobulin deterioration and adsorption. Furthermore, inorganic salts also have effects such as prevention of immunoglobulin degradation and adsorption.
Examples of the inorganic salt according to the present invention include sodium chloride, potassium chloride, magnesium chloride, calcium chloride, and magnesium sulfate. As the concentration, for example, the lower limit is preferably 1 mM or more, more preferably 10 mM or more, and most preferably 50 mM or more. The upper limit is preferably 1 M or less, more preferably 500 mM or less, and most preferably 200 mM or less.

本発明に係わる防腐剤としては、免疫グロブリンの性状や分画性能に影響を与えなければ何ら限定はしないが、例えば、アジ化ナトリウム等が挙げられる。その濃度の下限としては０．００１重量％以上、好ましくは０．００５重量％以上、下限としては１重量％以下、好ましくは０．５重量％以下が良い。   The preservative according to the present invention is not limited as long as it does not affect the properties and fractionation performance of the immunoglobulin, and examples thereof include sodium azide. The lower limit of the concentration is 0.001% by weight or more, preferably 0.005% by weight or more, and the lower limit is 1% by weight or less, preferably 0.5% by weight or less.

本発明において、免疫グロブリン１量体及び２量体等の凝集体を含む免疫グロブリン溶液から、免疫グロブリン１量体を分離する際の分画性能の指標は、次のとおり考えられる。
免疫グロブリン１量体を医薬品として使用する場合、副作用を引き起こす可能性のある不純生体成分をできるだけ除去した方が良い。免疫グロブリン２量体含有率が１％以下であれば、医薬品として安全性の高いものと考えられているので、それを達成できる免疫グロブリン１量体の透過率と免疫グロブリン２量体の透過率の比（免疫グロブリン２量体の透過率／免疫グロブリン１量体の透過率＝透過率比）としては０．２０以下が良く、好ましくは０．１５以下、より好ましくは０．１０以下が良い。また、免疫グロブリン元液に含まれる免疫グロブリン２量体が少ない場合、透過液中の免疫グロブリン２量体含有率を１％以下にするためには、免疫グロブリン１量体の透過率と免疫グロブリン２量体の透過率の比が０．３０以下であっても良い。 一方、免疫グロブリン１量体はできるだけ回収できる方が好ましい。従って、本発明に係わる免疫グロブリン１量体の透過率は８０％以上が良く、好ましくは８５％以上、より好ましくは９０％以上が良い。 In the present invention, the index of fractionation performance when separating an immunoglobulin monomer from an immunoglobulin solution containing aggregates such as immunoglobulin monomers and dimers is considered as follows.
When using an immunoglobulin monomer as a pharmaceutical product, it is better to remove as much as possible impure biological components that may cause side effects. If the content of the immunoglobulin dimer is 1% or less, it is considered to be highly safe as a pharmaceutical product. Therefore, the transmittance of the immunoglobulin dimer and the transmittance of the immunoglobulin dimer that can achieve this. Ratio (immunoglobulin dimer permeability / immunoglobulin dimer permeability = permeability ratio) is preferably 0.20 or less, preferably 0.15 or less, more preferably 0.10 or less. . Further, when the immunoglobulin dimer contained in the immunoglobulin original solution is small, in order to reduce the immunoglobulin dimer content in the permeate to 1% or less, the transmittance of the immunoglobulin monomer and the immunoglobulin The transmittance ratio of the dimer may be 0.30 or less. On the other hand, it is preferable that immunoglobulin monomer can be recovered as much as possible. Therefore, the transmittance of the immunoglobulin monomer according to the present invention is preferably 80% or more, preferably 85% or more, more preferably 90% or more.

クロスフロー濾過の場合、濾過開始後すぐにケーク層が形成され、分画性能が発現されると考えられていた。しかしながら、意外にも、ケーク層の形成には時間を要し、濾過初期の濾液中の免疫グロブリン２量体含有率がかなり高いことが分かった。従って、本発明では、所定時間、濾過初期の免疫グロブリン２量体を多く含有する免疫グロブリン透過液を再度、元液に循環した後、分画性能が発現した後の免疫グロブリン透過液を回収することで、免疫グロブリン１量体をロスすることなく、免疫グロブリン２量体の含有量を低下させる方法を見出した。   In the case of cross-flow filtration, it was thought that a cake layer was formed immediately after the start of filtration and fractionation performance was expressed. However, surprisingly, it took time to form the cake layer, and it was found that the content of immunoglobulin dimer in the filtrate in the early stage of filtration was considerably high. Therefore, in the present invention, an immunoglobulin permeate containing a large amount of immunoglobulin dimer in the initial stage of filtration is circulated again to the original solution for a predetermined time, and then the immunoglobulin permeate after the fractionation performance is recovered is collected. Thus, the present inventors have found a method for reducing the content of an immunoglobulin dimer without losing the immunoglobulin monomer.

本発明に係わる免疫グロブリン透過液を元液に再循環させる設定時間としては、最終的に得られる免疫グロブリン透過液中に含まれる免疫グロブリン２量体の含有率が目的値まで低減することが可能であれば何ら限定しないが、例えば、濾過開始から、免疫グロブリン透過液に含まれる全免疫グロブリン中の免疫グロブリン２量体の含有率、もしくは免疫グロブリン１量体と免疫グロブリン２量体の透過率比などが設定値に到達した時点までの時間が挙げられる。免疫グロブリン１量体を医薬品として使用する場合、副作用を引き起こす可能性のある不純生体成分をできるだけ除去した方が良い。従って、免疫グロブリン２量体の含有率としては１％以下、好ましくは、０．７５％以下が良く、所望する含有率に応じた時間設定を行えば良い。
また、免疫グロブリン１量体の透過率と免疫グロブリン２量体の透過率の比（免疫グロブリン２量体の透過率／免疫グロブリン１量体の透過率＝透過率比）から設定することも可能である。透過率比が低い程、分画性能が高いことを示しており、透過率比は０．２０以下、好ましくは０．１５以下、より好ましくは０．１０以下、最も好ましいのは０．０７５以下が良く、所望する透過率比に応じた時間設定を行えば良い。
さらに、免疫グロブリン２量体の含有量と相関性が得られる他の分析装置で得られるデータ値を用いて時間を設定することも可能である。例えば、紫外可視吸収強度や赤外分光光度などが挙げられる。As the set time for recirculating the immunoglobulin permeate according to the present invention to the original solution, the content of the immunoglobulin dimer contained in the finally obtained immunoglobulin permeate can be reduced to the target value. If it is not limited at all, for example, from the start of filtration, the content of immunoglobulin dimers in the total immunoglobulin contained in the immunoglobulin permeate, or the permeability of immunoglobulin monomers and immunoglobulin dimers The time until the time when the ratio reaches the set value is mentioned. When using an immunoglobulin monomer as a pharmaceutical product, it is better to remove as much as possible impure biological components that may cause side effects. Therefore, the content of the immunoglobulin dimer is 1% or less, preferably 0.75% or less, and the time may be set according to the desired content.
It is also possible to set from the ratio of the transmittance of the immunoglobulin monomer to the transmittance of the immunoglobulin dimer (the transmittance of the immunoglobulin dimer / the transmittance of the immunoglobulin monomer = the transmittance ratio). It is. The lower the transmittance ratio, the higher the fractionation performance. The transmittance ratio is 0.20 or less, preferably 0.15 or less, more preferably 0.10 or less, and most preferably 0.075 or less. The time may be set according to the desired transmittance ratio.
Furthermore, it is also possible to set the time using data values obtained by other analyzers that are correlated with the content of immunoglobulin dimers. For example, ultraviolet visible absorption intensity, infrared spectrophotometry, etc. are mentioned.

モノクローナル抗体の精製において、アフィニティクロマトグラフィー精製工程は必須な工程となっている。特に、プロテインＡなどをリガンドとしたアフィニティクロマトグラフィーが利用されている。その分離原理は、リガンドに対する免疫グロブリンとその他の生体成分の親和性を利用して分離している。具体的には、免疫グロブリンや夾雑蛋白質、糖鎖、核酸を含む生体成分をアフィニティクロマトグラフィーに通し、免疫グロブリンだけを固定化したリガンドに特異的に結合させる。この特異的に結合した免疫グロブリンを、低いｐＨ、高いｐＨ、高い塩、競合リガンドなどを用いて固定リガンドからはずし、回収することで精製された免疫グロブリンが得られる。   In the purification of monoclonal antibodies, the affinity chromatography purification step is an essential step. In particular, affinity chromatography using protein A or the like as a ligand is used. The separation principle is based on the affinity of immunoglobulin and other biological components for the ligand. Specifically, biological components including immunoglobulins, contaminating proteins, sugar chains, and nucleic acids are passed through affinity chromatography to specifically bind only to the immobilized immunoglobulin. The specifically bound immunoglobulin is removed from the immobilized ligand using a low pH, high pH, high salt, competitive ligand, etc., and recovered to obtain a purified immunoglobulin.

しかしながら、アフィニティクロマトグラフィー精製工程で注意すべき点は、リガンドから免疫グロブリンを溶離するために低いｐＨや高い塩に接触させることが必要であるが、同時に免疫グロブリンを凝集させ、２量体以上の免疫グロブリン凝集体が副生させる問題やリガンド（例えば、プロテインＡ）が溶出し、免疫グロブリンと凝集体を形成する問題などがあった。
したがって、プロテインＡなどをリガンドしたアフィニティクロマトグラフィー精製を行った後、本発明に係わる分離方法を行うことによって、免疫グロブリンを十分に精製することができる。However, it should be noted in the affinity chromatography purification step that it is necessary to contact low pH and high salt in order to elute the immunoglobulin from the ligand. There have been problems such as formation of immunoglobulin aggregates as a by-product and formation of aggregates with immunoglobulins by elution of a ligand (for example, protein A).
Accordingly, immunoglobulins can be sufficiently purified by carrying out the separation method according to the present invention after performing affinity chromatography purification using protein A as a ligand.

本発明に係わるプロテインＡとは、天然の供給源から回収されたプロテインＡ、合成的に生成されたプロテインＡ（例えば、ペプチド合成によって、または組換え技術によって）、およびＣＨ２／ＣＨ３領域（例えば、Ｆｃ領域）を有するタンパク質に結合する能力を保持するそれらの改変体を包含する。プロテインＡは、Ｒｅｐｌｉｇｅｎ、ＰｈａｒｍａｃｉａおよびＦｅｒｍａｔｅｃｈから商業的に購入できる。プロテインＡは、一般に、固相支持体材料にリガンドとして固定される。さらにプロテインＡカラムとは、プロテインＡが共有結合するクロマトグラフィー固体支持体マトリックスを含むアフィニティクロマトグラフィー樹脂またはカラムを示す。また、プロテインＡ以外のアフィニティクロマトグラフィーのリガンドとしては、プロテインＬ、プロテインＧなどが挙げられる。これらのプロテインＬおよびプロテインＧについても、天然の供給源から回収されたもの、合成的に生成されたもの（例えば、ペプチド合成、または、組換え技術によって）、およびＣＨ２／ＣＨ３領域（例えば、Ｆｃ領域）を有するタンパク質に結合する能力を保持するそれらの改変体を包含する。さらに、プロテインＡ、プロテインＬおよびプロテインＧを組み合わせて作成されたアフィニティクロマトグラフィー樹脂またはカラムを用いたアフィニティグラフィー精製方法も含有する。   Protein A according to the present invention includes protein A recovered from natural sources, synthetically produced protein A (eg, by peptide synthesis or by recombinant techniques), and CH2 / CH3 regions (eg, And variants thereof that retain the ability to bind to proteins having the Fc region). Protein A can be purchased commercially from Repligen, Pharmacia and Fermatech. Protein A is generally immobilized as a ligand on a solid support material. Furthermore, protein A column refers to an affinity chromatography resin or column containing a chromatographic solid support matrix to which protein A is covalently bonded. Examples of affinity chromatography ligands other than protein A include protein L and protein G. These Protein L and Protein G are also those recovered from natural sources, synthetically produced (eg, by peptide synthesis or recombinant techniques), and CH2 / CH3 regions (eg, Fc And variants thereof that retain the ability to bind to proteins having a region. Furthermore, an affinity chromatography purification method using an affinity chromatography resin or column prepared by combining protein A, protein L and protein G is also included.

限外濾過膜を用いた蛋白溶液のクロスフロー濾過方法は、分離プロセスの連続運転を可能にする濾過方法として主流を占めているが、課題の一つとして、濾過後の蛋白質濃度が低くなるために、再度、濃縮工程が必要となることが挙げられる。そのために、免疫グロブリン透過液を貯蔵するための免疫グロブリン透過液タンクのサイズが大きくなり、設備コストが増大する。また、加水型クロスフロー濾過方法では、希釈液として用いられる溶液タンク設備や緩衝剤、添加剤のコストが問題となる。
本発明に係わる分離・濃縮方法は、分離工程で希釈された免疫グロブリン透過液を、同時に、連続して濃縮する方法であるため、短時間で一連の工程を行うことができ、低コストとなる。さらに、濃縮工程で透過した液を分離工程に使用する希釈液として再利用することが好ましい。希釈液には緩衝剤や塩、安定化剤などが含まれており、それらは低分子量であるので、一連の分離・濃縮工程によって膜に捕捉されることはない。すなわち、分離工程で使用する希釈液中の緩衝剤や塩、安定化剤の濃度は、濃縮工程で透過する免疫グロブリン透過液中のそれらの濃度とほとんど変化が無く、そのまま分離工程で使用する希釈液として使用できる。この分離・濃縮方法によって、希釈液として用いられる溶液タンク設備や緩衝剤、添加剤のコストが大きく削減できる。The cross-flow filtration method for protein solutions using ultrafiltration membranes occupies the mainstream as a filtration method that enables continuous operation of the separation process, but one problem is that the protein concentration after filtration is low In addition, a concentration step is required again. Therefore, the size of the immunoglobulin permeate tank for storing the immunoglobulin permeate increases, and the equipment cost increases. In addition, in the water-based cross flow filtration method, the cost of solution tank equipment, buffering agents, and additives used as a diluent becomes a problem.
The separation / concentration method according to the present invention is a method in which the immunoglobulin permeate diluted in the separation step is simultaneously and continuously concentrated, so that a series of steps can be performed in a short time, resulting in low cost. . Furthermore, it is preferable to reuse the liquid that has permeated in the concentration step as a diluent used in the separation step. The diluent contains a buffer, salt, stabilizer, and the like, and since they have a low molecular weight, they are not trapped in the membrane by a series of separation / concentration steps. That is, the concentration of the buffer, salt, and stabilizer in the diluent used in the separation step is almost the same as that in the immunoglobulin permeate that permeates in the concentration step, and the dilution used in the separation step as it is. Can be used as a liquid. This separation / concentration method can greatly reduce the cost of solution tank equipment, buffering agents, and additives used as a diluent.

本発明に係わる「濃縮用限外濾過膜」とは、限外濾過膜によって分離・透過した溶液を濃縮するための膜である。
本発明に係わる濃縮工程に使用する濃縮用限外濾過膜の材質は特に限定されるものではなく、高分子膜であっても無機膜であっても構わない。例えば、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリアリールスルホンなどのポリスルホン系高分子膜、芳香族エーテル系高分子膜、ポリアクリル系高分子膜、ポリアクリロニトリル系高分子膜、セルロース系高分子膜、ポリカーボネート系高分子膜、ポリフッ化ビニリデン系高分子膜、ポリテトラフルオロエチレン系高分子膜、ポリエチレン系高分子膜、ポリプロピレン系高分子膜、ポリアミド系高分子膜、ポリエーテルイミド系高分子膜などが挙げられる。特にその中でもポリスルホン系高分子膜が好ましい。The “concentration ultrafiltration membrane” according to the present invention is a membrane for concentrating the solution separated and permeated by the ultrafiltration membrane.
The material of the ultrafiltration membrane for concentration used in the concentration step according to the present invention is not particularly limited, and may be a polymer membrane or an inorganic membrane. For example, polysulfone polymer films such as polysulfone, polyethersulfone, polyarylsulfone, aromatic ether polymer film, polyacrylic polymer film, polyacrylonitrile polymer film, cellulose polymer film, polycarbonate polymer film Examples include molecular films, polyvinylidene fluoride polymer films, polytetrafluoroethylene polymer films, polyethylene polymer films, polypropylene polymer films, polyamide polymer films, polyetherimide polymer films, and the like. Of these, polysulfone-based polymer membranes are particularly preferred.

本発明に係わる免疫グロブリン濃縮工程において用いられる免疫グロブリンを濃縮するための濃縮用限外濾過膜の分画分子量は、下限としては、１０００以上、好ましくは５０００以上、より好ましくは１万以上が良く、上限としては、１０万未満、好ましくは９万以下、さらに好ましくは８万が良い。１０万以上であると、免疫グロブリン１量体の回収率が低下し、１０００未満であれば、単位時間当たりの透液量が著しく低下する。   The molecular weight cutoff of the ultrafiltration membrane for concentration used in the immunoglobulin concentration step according to the present invention is 1,000 or more, preferably 5000 or more, more preferably 10,000 or more as a lower limit. The upper limit is less than 100,000, preferably 90,000 or less, and more preferably 80,000. If it is 100,000 or more, the recovery rate of the immunoglobulin monomer decreases, and if it is less than 1,000, the liquid permeation amount per unit time is remarkably reduced.

本発明に係わる免疫グロブリン濃縮工程で用いられる濃縮前の免疫グロブリン溶液濃度は、免疫グロブリン分離工程によって透過した免疫グロブリン溶液の濃度を示す。通常、免疫グロブリン分離工程で、初期の免疫グロブリン溶液濃度から低減する場合が多い。低減度合いは、膜モジュールや濾過条件に依存するが、初期濃度を１００とした場合、下限値としては、０．１であり、好ましくは、０．５である。上限値としては、９９であり、好ましくは９５である。例えば、１〜１５０ｇ／Ｌの免疫グロブリン溶液を濾過した場合には、透過した免疫グロブリン溶液の濃度は、０．１〜１４９ｇ／Ｌとなり、１〜１００ｇ／Ｌの免疫グロブリン溶液を濾過した場合には、透過した免疫グロブリン溶液の濃度は、０．１〜９９ｇ／Ｌとなる。   The concentration of the immunoglobulin solution before concentration used in the immunoglobulin concentration step according to the present invention indicates the concentration of the immunoglobulin solution permeated through the immunoglobulin separation step. Usually, in the immunoglobulin separation step, the initial immunoglobulin solution concentration is often reduced. The degree of reduction depends on the membrane module and filtration conditions, but when the initial concentration is 100, the lower limit is 0.1, and preferably 0.5. The upper limit is 99, preferably 95. For example, when a 1 to 150 g / L immunoglobulin solution is filtered, the permeated immunoglobulin solution concentration is 0.1 to 149 g / L, and when a 1 to 100 g / L immunoglobulin solution is filtered. The concentration of the permeabilized immunoglobulin solution is 0.1 to 99 g / L.

透過した免疫グロブリン溶液を濃縮するためのクロスフロー濾過条件としては、目的とする免疫グロブリン濃度が得られれば、特に限定されるものではないが、例えば、線速の下限としては、０．０１ｃｍ／秒以上、好ましくは０．１／秒以上が良く、上限としては、１００ｃｍ／秒以下、好ましくは７５ｃｍ／秒以下が良い。圧力の下限としては、０．０１ＭＰａ以上、好ましくは０．０２ＭＰａ以上が良く、上限としては、０．５ＭＰａ以下、好ましくは０．３ＭＰａ以下でクロスフロー濾過すること良い。   The cross-flow filtration conditions for concentrating the permeated immunoglobulin solution are not particularly limited as long as the desired immunoglobulin concentration can be obtained. For example, the lower limit of the linear velocity is 0.01 cm / Seconds or more, preferably 0.1 / seconds or more, and the upper limit is 100 cm / second or less, preferably 75 cm / second or less. The lower limit of the pressure is 0.01 MPa or more, preferably 0.02 MPa or more, and the upper limit is 0.5 MPa or less, preferably 0.3 MPa or less.

本発明に係わる免疫グロブリン濃縮工程で得られる濃縮後の免疫グロブリン溶液濃度は、免疫グロブリンの種類や用途、後段の精製工程（例えば、ウイルスを除去する工程）に依存し、目的に応じて濃縮倍率を設定する。通常、下限値としては、０．５ｇ／Ｌ以上が好ましく、さらに好ましくは１ｇ／Ｌ以上であり、上限値としては３００ｇ／Ｌ以下が好ましく、さらに好ましくは１５０ｇ／Ｌ以下が良い。   The concentration of the concentrated immunoglobulin solution obtained in the immunoglobulin concentration step according to the present invention depends on the type and use of the immunoglobulin and the subsequent purification step (for example, a step for removing viruses), and the concentration ratio is determined according to the purpose. Set. Usually, the lower limit is preferably 0.5 g / L or more, more preferably 1 g / L or more, and the upper limit is preferably 300 g / L or less, more preferably 150 g / L or less.

分離工程は、クロスフロー濾過による免疫グロブリン１量体と免疫グロブリン２量体を分離する工程であり、免疫グロブリンの濃度をモニタリングできる装置、免疫グロブリンの濃度を調整できる装置、限外濾過膜に送液される免疫グロブリン溶液の線速をコントロールする手段、限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる装置を含む装置が好ましい。該濃縮工程は、分離工程で得られた免疫グロブリン１量体溶液を濃縮する工程であり、濃縮前後の免疫グロブリン１量体溶液の濃度をモニタリングできる装置、免疫グロブリン１量体溶液の線速、濾過圧力をコントロールできる装置を含む装置が好ましい。さらに、濃縮工程で得られる免疫グロブリン透過液を分離工程で用いられる免疫グロブリン溶液の濃度を調節する希釈液として再利用することが好ましい。具体的には、図４のような装置が例示される。   The separation process is a process for separating immunoglobulin dimers and immunoglobulin dimers by cross-flow filtration, and is sent to devices that can monitor immunoglobulin concentration, devices that can adjust immunoglobulin concentration, and ultrafiltration membranes. A device including a means for controlling the linear velocity of the immunized immunoglobulin solution and a device capable of controlling the filtration pressure of the ultrafiltration membrane is preferable. The concentration step is a step of concentrating the immunoglobulin monomer solution obtained in the separation step, a device capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin monomer solution before and after the concentration, the linear velocity of the immunoglobulin monomer solution, An apparatus including an apparatus capable of controlling the filtration pressure is preferable. Furthermore, it is preferable to reuse the immunoglobulin permeate obtained in the concentration step as a diluent for adjusting the concentration of the immunoglobulin solution used in the separation step. Specifically, an apparatus as shown in FIG. 4 is exemplified.

分離工程では、送液ポンプ２（３）を用いて、免疫グロブリン元液タンク（４）内の免疫グロブリン溶液を限外濾過膜モジュール（８）に送液する。圧力計１（５）および圧力計２（６）、流量計１（１０）で濾過圧力と濾過流量をモニタリングし、圧力・流量コントローラー１（１２）から調整バルブ１（７）に信号を送って、限外濾過膜モジュール（８）に対して接線方向の線速と限外濾過膜を横切る圧力が設定値になるように調節する。限外濾過膜モジュール（８）を濾過しない液を免疫グロブリン元液タンク（４）に戻す。免疫グロブリン元液タンク（４）内の免疫グロブリン溶液の濃度を、吸光度計が組み込まれた濃度コントローラー１（１１）でモニタリングし、免疫グロブリン溶液の濃度をコントロールするために送液ポンプ１（２）に信号を送って送液量を調節し、希釈液用タンク（１）中の希釈液を添加する。限外濾過膜モジュール（８）で濾過された免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン透過液タンク（９）に送液され、濃縮工程へと移行する。濃縮工程では、送液ポンプ３（１５）を用いて、免疫グロブリン透過液を濃縮用限外濾過膜モジュール（２４）に送液する。その際、圧力計３（１６）および圧力計４（１７）、流量計２（２３）で濾過圧力と濾過流量でモニタリングし、圧力・流量コントローラー２（１８）から調整バルブ２（１９）に信号を送って、濃縮用限外濾過膜モジュール（２４）に対して接線方向の線速と限外濾過膜を横切る圧力が設定値になるように調節する。また、濃度コントローラー２（１４）および吸光度計（２０）で、免疫グロブリン溶液の濃度をモニタリングし、濃縮程度を、濃度コントローラー２（１４）および圧力・流量コントローラー２（１８）で調節する。
濃縮用限外濾過膜モジュール（２４）を透過する液は、希釈液として再利用が可能であり、希釈液用タンク（１）に送液される。濃縮された免疫グロブリン溶液の濃度を、吸光度計（２０）でモニタリングし、目的濃度に達するまで免疫グロブリン溶液を免疫グロブリン透過液タンク（９）に再循環するが、目的濃度に達すると切換バルブ（２３）で流路を変更し、免疫グロブリン濃縮液タンク（２１）に免疫グロブリン濃縮液を回収する。In the separation step, the immunoglobulin solution in the immunoglobulin source liquid tank (4) is fed to the ultrafiltration membrane module (8) using the liquid feed pump 2 (3). The pressure gauge 1 (5), the pressure gauge 2 (6), and the flow meter 1 (10) are used to monitor the filtration pressure and filtration flow rate, and a signal is sent from the pressure / flow rate controller 1 (12) to the regulating valve 1 (7). The tangential line speed and the pressure across the ultrafiltration membrane are adjusted to the set values for the ultrafiltration membrane module (8). The liquid which does not filter the ultrafiltration membrane module (8) is returned to the immunoglobulin original liquid tank (4). The concentration of the immunoglobulin solution in the immunoglobulin source solution tank (4) is monitored by a concentration controller 1 (11) incorporating an absorptiometer. Is sent to adjust the amount of liquid to be fed, and the diluent in the diluent tank (1) is added. The immunoglobulin permeate filtered by the ultrafiltration membrane module (8) is sent to the immunoglobulin permeate tank (9), and the process proceeds to the concentration step. In the concentration step, the immunoglobulin permeate is sent to the ultrafiltration membrane module for concentration (24) using the liquid feed pump 3 (15). At that time, the pressure gauge 3 (16), the pressure gauge 4 (17), and the flow meter 2 (23) monitor the filtration pressure and the filtration flow rate, and the pressure / flow rate controller 2 (18) sends a signal to the adjustment valve 2 (19). To the ultrafiltration membrane module (24) for concentration so that the tangential line speed and the pressure across the ultrafiltration membrane are adjusted to the set values. Further, the concentration of the immunoglobulin solution is monitored with the concentration controller 2 (14) and the absorbance meter (20), and the degree of concentration is adjusted with the concentration controller 2 (14) and the pressure / flow rate controller 2 (18).
The liquid that permeates the ultrafiltration membrane module for concentration (24) can be reused as a diluent, and is sent to the diluent tank (1). The concentration of the concentrated immunoglobulin solution is monitored with an absorbance meter (20), and the immunoglobulin solution is recirculated to the immunoglobulin permeate tank (9) until the target concentration is reached. 23) The flow path is changed and the immunoglobulin concentrate is recovered in the immunoglobulin concentrate tank (21).

本発明における限外濾過膜モジュールとは、例えばケーシング内に平膜もしくは中空糸膜を収容したものであり、少なくとも、免疫グロブリン溶液をケーシング内に注ぎ込む液体流入口を一つ以上、分離された液体を導出するための液体流出口を一つ以上供えたものをいう。モジュールに使用するケーシングは一つ以上のケーシング部品から組み立てられる。ケーシング部品の材料は金属、ガラス、熱可塑性樹脂、熱硬化性樹脂など、必要に応じて選択できる。好適な材料は、内部の様子が観察可能な透明性を有する熱可塑性樹脂材料であり、具体的にはポリメチルメタクリレート、ポリスチレン、硬質塩化ビニル樹脂、ポリエチレンテレフタレート、ポリプロピレン、ポリスチレンブタジエン共重合体、ポリカーボネート、ポリメタクリル酸メチルなどが挙げられる。特に好適なものは透明性を有する非晶性樹脂であり、ポリスチレンブタジエン共重合体、ポリカーボネート、ポリメタクリル酸メチルなどが挙げられる。   The ultrafiltration membrane module in the present invention is, for example, a flat membrane or hollow fiber membrane accommodated in a casing, and at least one liquid inlet into which an immunoglobulin solution is poured into the casing. Is provided with one or more liquid outlets for deriving. The casing used for the module is assembled from one or more casing parts. The material of the casing component can be selected as necessary, such as metal, glass, thermoplastic resin, thermosetting resin, and the like. A suitable material is a thermoplastic resin material having transparency in which the inside can be observed. Specifically, polymethyl methacrylate, polystyrene, hard vinyl chloride resin, polyethylene terephthalate, polypropylene, polystyrene butadiene copolymer, polycarbonate. And polymethyl methacrylate. Particularly preferred are transparent amorphous resins, such as polystyrene butadiene copolymer, polycarbonate, and polymethyl methacrylate.

本発明に係わるモジュールに使用するケーシングを組み立てる際に使用されるケーシング部品の製造方法は、成型加工が可能であれば何ら限定しないが、例えば、溶接、プレス成型、射出成型、反応射出成型、超音波圧着、プラズマ融着、接着剤による接着などである。これらは単独でも２つ以上組み合わせても良い。特に好適なケーシング部品の製造方法としては材料に透明性を有する熱可塑性樹脂を用いた射出成型品と適切な接着剤で封止する方法である。   The method of manufacturing the casing part used when assembling the casing used in the module according to the present invention is not limited as long as it can be molded. For example, welding, press molding, injection molding, reaction injection molding, super Examples include sonic pressure bonding, plasma fusion, and adhesion using an adhesive. These may be used alone or in combination of two or more. A particularly preferable method for manufacturing a casing component is a method of sealing with an injection molded product using a thermoplastic resin having transparency as a material and an appropriate adhesive.

本発明に係わるモジュールに使用するケーシングおよび／またはケーシング部品には成型中、および／または成型後、および／または組み立て中、および／または組み立て後に、分離処理される液体と接触および／または接触しない表面に表面加工が実施できる。表面加工には種々の方法があるが、例えば親水化をする場合は親水性高分子の塗布や空気中でのプラズマ処理による表面酸化などが、疎水化する場合は撥水剤および／または離型剤の塗布が、また酸素透過を減少させる場合には蒸着法などにより酸化ケイ素膜をはじめとする各種無機コートを実施することができる。ケーシングおよび／またはケーシング材料への親水化加工を行うことでモジュール組み立て時に同種および／または異種材料界面の接着性制御が容易になり、疎水化加工を行うことで組み立て時に一時的に使用される各種保護フィルムなどとの剥離性を向上させることができる。   Casings and / or casing parts used in the modules according to the invention are surfaces which are in contact with and / or not in contact with the liquid to be separated during molding and / or after molding and / or during assembly and / or after assembly. Surface processing can be performed. There are various methods for surface treatment. For example, when hydrophilizing, hydrophilic polymer coating or surface oxidation by plasma treatment in air, etc., when hydrophobizing, water repellent and / or mold release When the agent is applied or oxygen permeation is reduced, various inorganic coats including a silicon oxide film can be applied by vapor deposition or the like. Adhesive control at the interface of the same and / or different materials is facilitated during module assembly by performing hydrophilic treatment on the casing and / or casing material, and various types of temporary use during assembly by performing hydrophobic treatment The peelability from the protective film or the like can be improved.

本発明に係わるモジュールの構造は、使用する膜の形状、例えば中空糸や平膜によって異なるが、中空糸や平膜などがケーシング内に適切に収容され、分離処理される免疫グロブリン溶液が混ざらない構造であれば良い。また金属メッシュや不織布などを膜の保持材として組み合わせてケーシングに収容し、モジュール化することもできる。   The structure of the module according to the present invention varies depending on the shape of the membrane to be used, for example, hollow fiber or flat membrane, but the hollow fiber or flat membrane is properly accommodated in the casing and does not mix with the immunoglobulin solution to be separated. Any structure is acceptable. Moreover, a metal mesh, a nonwoven fabric, etc. can be combined as a film | membrane holding material, and it can accommodate in a casing, and can also be modularized.

本発明に係わる分離方法は、サイズ分画によって分離する方法であるため、合成医薬品の精製や清酒、ビール、ワイン、発泡酒、お茶、ウーロン茶、野菜ジュース、果物ジュースなど各種飲料の精製、薬液や処理水等から微粒子分離、油水分離や液ガス分離用の分離上下水の浄化を目的とする分離などの用途にも利用できる。   Since the separation method according to the present invention is a method of separation by size fractionation, purification of synthetic pharmaceuticals and refinement of various beverages such as sake, beer, wine, happoshu, tea, oolong tea, vegetable juice, fruit juice, It can also be used for applications such as separation for treating fine water from treated water, separation for oil / water separation and liquid / gas separation, for the purpose of purifying separation water and sewage.

[実施例]
本発明を次に実施例および比較例によって説明するが、これらに限定されるものではない。[Example]
The present invention will now be described by way of examples and comparative examples, but is not limited thereto.

［ポリスルホン系高分子膜の製造例］
＜中空糸膜（ＰＳｆ−１）の製造方法＞
１６５０ｇのＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（和光純薬工業株式会社製、以下、ＤＭＡｃと略す）に２８０ｇのポリスルホン（Ｐ１７００、ＵＣＣ社製、以下ＰＳｆと略す）および１１０ｇのポリビニルピロリドン（Ｋ−９０、ＢＡＳＦ社製、以下ＰＶＰと略す）を加え、膜原液用の５０００×１０−6ｍ３反応器に注ぎ込んだ。反応器の攪拌をしながら減圧と窒素置換を５回繰り返した。その後、６０℃に反応器内液温度をあげ、均一なＰＳｆのＤＭＡｃ溶液を得た。均一に溶解したことを確認し、この段階で攪拌を停止し、減圧にして脱泡を行った。その後、大気圧と同じ圧力に戻し、６０℃に保持された紡糸用の膜原液を得た。
純水４８０ｇにＤＭＡｃ５２０ｇを混合し、内部凝固液用の３０００×１０−6ｍ３反応器に加えた。減圧と窒素置換を５回繰り返し、内部凝固液を得た。
６０℃に保持された２重紡口（内直径１００μｍ、スリットの幅５０μｍ、外直径３００μｍ）に内部凝固液をおよび膜原液を通液させた。それぞれの流速は紡糸時の巻取り速度に応じて適宜調整した。
得られた中空糸膜は空走距離０．６ｍで、６０℃に保持された凝固槽中の外部凝固液（純水）中に導かれ、凝固を完了させたあと、巻取り装置で巻き取った。巻取り速度としては２４００ｍ／時間から４８００ｍ／時間で巻き取ることができた。

その後、得られた中空糸膜は６０℃の純水を用いて浸漬・洗浄を繰り返し、その後７０℃の熱風乾燥機で６時間乾燥した。この製造方法により、分画分子量３０万、内径１５１μｍ、膜厚３０μｍのポリスルホン系高分子膜を製造することができた。[Production example of polysulfone polymer membrane]
<Method for producing hollow fiber membrane (PSf-1)>
1650 g of N, N-dimethylacetamide (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., hereinafter abbreviated as DMAc), 280 g of polysulfone (P1700, UCC, abbreviated as PSf) and 110 g of polyvinyl pyrrolidone (K-90, BASF) (Hereinafter, abbreviated as “PVP”) and poured into a 5000 × 10 −6 m 3 reactor for a membrane stock solution. The pressure reduction and nitrogen substitution were repeated 5 times while stirring the reactor. Thereafter, the temperature of the solution in the reactor was raised to 60 ° C. to obtain a uniform PSf DMAc solution. After confirming uniform dissolution, stirring was stopped at this stage, and degassing was performed under reduced pressure. Thereafter, the pressure was returned to the same pressure as the atmospheric pressure, and a spinning membrane stock solution maintained at 60 ° C. was obtained.
520 g of DMAc was mixed with 480 g of pure water and added to a 3000 × 10 −6 m 3 reactor for the internal coagulation liquid. Depressurization and nitrogen substitution were repeated 5 times to obtain an internal coagulating liquid.
The internal coagulating liquid and the membrane stock solution were passed through a double spinning nozzle (inner diameter 100 μm, slit width 50 μm, outer diameter 300 μm) maintained at 60 ° C. Each flow rate was appropriately adjusted according to the winding speed during spinning.
The obtained hollow fiber membrane was introduced into an external coagulation liquid (pure water) in a coagulation tank maintained at 60 ° C. with an idle running distance of 0.6 m, and after coagulation was completed, it was wound up by a winding device. It was. The winding speed was 2400 m / hour to 4800 m / hour.

Then, the obtained hollow fiber membrane was repeatedly immersed and washed using pure water at 60 ° C., and then dried for 6 hours with a hot air dryer at 70 ° C. By this production method, a polysulfone polymer membrane having a molecular weight cut off of 300,000, an inner diameter of 151 μm, and a film thickness of 30 μm could be produced.

＜中空糸膜（ＰＳｆ−２）の製造方法＞
内部凝固液の組成（純水／ＤＭＡｃ）および膜原液中のポリスルホン濃度を変化させ、ＰＳｆ−１の製造方法と同等の条件で行うことにより、分画分子量３６万、内径２０７μｍ、膜厚４１μｍのポリスルホン系高分子膜を製造することができた。<Method for producing hollow fiber membrane (PSf-2)>
By changing the composition of the internal coagulation liquid (pure water / DMAc) and the polysulfone concentration in the membrane stock solution and performing the same conditions as in the PSf-1 production method, the molecular weight cut off was 360,000, the inner diameter was 207 μm, and the film thickness was 41 μm. A polysulfone polymer membrane could be produced.

＜中空糸膜（ＰＳｆ−３）の製造方法＞
内部凝固液の組成（純水／ＤＭＡｃ）および膜原液中のポリスルホン濃度を変化させ、ＰＳｆ−１の製造方法と同等の条件で行うことにより、分画分子量２４万、内径１９９μｍ、膜厚３７μｍのポリスルホン系高分子膜を製造することができた。<Method for producing hollow fiber membrane (PSf-3)>
By changing the composition of the internal coagulation solution (pure water / DMAc) and the polysulfone concentration in the membrane stock solution and performing the same conditions as in the PSf-1 production method, A polysulfone polymer membrane could be produced.

＜中空糸膜（ＰＳｆ−４）の製造方法＞
内部凝固液の組成（純水／ＤＭＡｃ）および膜原液中のポリスルホン濃度を変化させ、ＰＳｆ−１の製造方法と同等の条件で行うことにより、分画分子量６０万、内径１５５μｍ、膜厚３３μｍのポリスルホン系高分子膜を製造することができた。 <Method for producing hollow fiber membrane (PSf-4)>
By changing the composition of the internal coagulation liquid (pure water / DMAc) and the polysulfone concentration in the membrane stock solution and performing the same conditions as in the PSf-1 production method, A polysulfone polymer membrane could be produced.

＜中空糸膜（ＰＳｆ−５）の製造方法＞
内部凝固液の組成（純水／ＤＭＡｃ）および膜原液中のポリスルホン濃度を変化させ、ＰＳｆ−１の製造方法と同等の条件で行うことにより、分画分子量１００万、内径１５７μｍ、膜厚３６μｍのポリスルホン系高分子膜を製造することができた。<Method for producing hollow fiber membrane (PSf-5)>
By changing the composition of the internal coagulation solution (pure water / DMAc) and the polysulfone concentration in the membrane stock solution under the same conditions as the production method of PSf-1, the molecular weight cut off was 1 million, the inner diameter was 157 μm, and the film thickness was 36 μm. A polysulfone polymer membrane could be produced.

＜中空糸膜（ＰＳｆ−６）の製造方法＞
２重紡口（内直径３５０μｍ、スリットの幅７５μｍ、外直径７５０μｍ）を用い、空走距離０．１ｍであること以外は、中空糸膜（ＰＳｆ−１）の製造方法と同等の条件で行うことにより、分画分子量３０万、内径４９８μｍ、膜厚８７μｍのポリスルホン系高分子膜を製造することができた。 <Method for producing hollow fiber membrane (PSf-6)>
A double spinneret (inner diameter 350 μm, slit width 75 μm, outer diameter 750 μm) is used under the same conditions as the manufacturing method of the hollow fiber membrane (PSf-1) except that the idle running distance is 0.1 m. As a result, a polysulfone polymer membrane having a molecular weight cut-off of 300,000, an inner diameter of 498 μm, and a film thickness of 87 μm could be produced.

［芳香族エーテル系高分子膜の製造例］
＜ポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の製造例＞
２４００ｇのキシレン（和光純薬工業株式会社）が入った５０００×１０−６ｍ３の反応容器に、４８０ｇのスチレン（和光純薬工業株式会社）および１２０ｇのポリエチレングリコールユニット含有高分子アゾ重合開始剤ＶＰＥ−０２０１（和光純薬工業株式会社、ポリエチレングリコールセグメント部分の数平均分子量は約２０００）を加え、乾燥窒素によるバブリングを３０分間以上行い、反応系中を乾燥窒素雰囲気下にした。１３０℃で７時間加熱し、重合反応を行った。次いで、反応溶液を室温まで冷却した後、過剰のヘキサン（和光純薬工業株式会社、特級）中に反応溶液を徐々に注ぎ、高分子を析出させた。得られた高分子はヘキサンを用いて３回洗浄し、５０℃、０．１３３ＫＰａ条件で減圧乾燥処理を２４時間実施し、残存する溶媒、モノマー等を完全に除去した。白色粉末、４０９ｇ、６８重量％回収率。また、異なる組成比を有するポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体を製造する場合には、スチレンとポリエチレングリコールユニット含有高分子アゾ重合開始剤の添加量を変えることにより調整した。[Production example of aromatic ether polymer film]
<Production example of polystyrene-polyethylene glycol block copolymer>
In a reaction vessel of 5000 × 10 −6 m 3 containing 2400 g of xylene (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 480 g of styrene (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and 120 g of a polyethylene glycol unit-containing polymer azo polymerization initiator VPE-0201 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., the number average molecular weight of the polyethylene glycol segment part was about 2000) was added, and bubbling with dry nitrogen was performed for 30 minutes or more, and the reaction system was placed in a dry nitrogen atmosphere. The polymerization reaction was carried out by heating at 130 ° C. for 7 hours. Next, after the reaction solution was cooled to room temperature, the reaction solution was gradually poured into excess hexane (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., special grade) to precipitate a polymer. The obtained polymer was washed with hexane three times, and dried under reduced pressure at 50 ° C. and 0.133 KPa for 24 hours to completely remove the remaining solvent, monomer and the like. White powder, 409 g, 68 wt% recovery. Moreover, when manufacturing the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer which has a different composition ratio, it adjusted by changing the addition amount of a styrene and a polyethyleneglycol unit containing high molecular azo polymerization initiator.

＜中空糸膜（ＰＰＥ−１）の製造方法＞
ポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体の製造例に従い、ポリスチレンとポリエチレングリコールの組成比６２／３８（重量％）、数平均分子量２０，１００、分子量分布１．７であるポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体を製造した。
１６００ｇのＮ−メチル―２―ピロリドン（ＮＭＰ）に３２０ｇのポリ（２，６−ジメチルフェニレン−１，４−オキシド）（シグマアルドリッチジャパン株式会社、以下ＰＰＥと略す）および親水性高分子として１１０ｇのポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体を加え、分散溶液として膜原液用の５０００×１０−６ｍ３反応器に注ぎ込んだ。反応器の攪拌をしながら０．０２ＭＰａまでの減圧と窒素置換を５回繰り返した。その後、１６０℃に反応器内液温度をあげ、均一なＰＰＥのＮＭＰ溶液を得た。この段階で攪拌を停止し、反応器内部の圧力を０．０２ＭＰａの減圧状態のまま、１時間かけて反応器内部温度を９０℃にした。次いで窒素を使用して反応器内部の圧力を大気圧と同じ圧力にし、９０℃に保持された紡糸用の膜原液を得た。
純水３００ｇにＮＭＰ７００ｇを混合し、内部凝固液用の３０００×１０−６ｍ３反応器に加えた。０．０２ＭＰａまでの減圧と窒素置換を５回繰り返し、その後０．０２ＭＰａの減圧のまま、反応器内部温度を９０℃に昇温した。１時間保持後に窒素を使用して反応器内部の圧力を大気圧と同じ圧力にし、９０℃に保持された内径部を通す内部凝固液（水／ＮＭＰ（３０／７０重量％））を得た。
９０℃に保持された２重紡口（内直系１００μｍ、スリットの幅５０μｍ、外直径３００μｍ）の内直径部に９０℃に保持された内部凝固液を約６０×１０−６ｍ３／時間から約１２０×１０−６ｍ３／時間の流量で流し、次いで９０℃に保持された膜原液を９０×１０−６ｍ３／時間から２４０×１０−６ｍ３／時間の流速で通液させた。それぞれの流速は紡糸時の巻取り速度に応じて適宜調整した。
得られた中空糸膜は空走距離０．６ｍで、９０℃に保持された凝固槽中の外部凝固液（純水）中に導かれ、凝固を完了させたあと、巻取り装置で巻き取った。巻取り速度としては４，２００ｍ／時間で巻き取ることができた。その後、得られた中空糸膜は８０℃の純水を用いて５回、浸漬・洗浄を繰り返し、その後７０℃の熱風乾燥機で６時間乾燥した。
膜構造の異なる限外濾過膜を製造する場合には、ＰＰＥ／親水性高分子／良溶媒の添加量の組成比および凝固液等を適時調整することにより実施した。
この製造方法により、分画分子量３８万、内径１７３μｍ、膜厚３０μｍの中空糸膜（ＰＰＥ−１）を製造することができた。<Method for producing hollow fiber membrane (PPE-1)>
According to the production example of the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer, the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer having a composition ratio of polystyrene / polyethylene glycol of 62/38 (wt%), a number average molecular weight of 20,100, and a molecular weight distribution of 1.7. Manufactured.
1600 g of N-methyl-2-pyrrolidone (NMP), 320 g of poly (2,6-dimethylphenylene-1,4-oxide) (Sigma Aldrich Japan, hereinafter abbreviated as PPE) and 110 g of hydrophilic polymer A polystyrene-polyethylene glycol block copolymer was added and poured into a 5000 × 10 −6 m 3 reactor for a membrane stock solution as a dispersion solution. While stirring the reactor, the pressure reduction to 0.02 MPa and the nitrogen substitution were repeated 5 times. Thereafter, the temperature of the liquid in the reactor was increased to 160 ° C. to obtain a uniform NPE solution of PPE. At this stage, stirring was stopped, and the reactor internal temperature was raised to 90 ° C. over 1 hour with the pressure inside the reactor kept at a reduced pressure of 0.02 MPa. Next, nitrogen was used to bring the pressure inside the reactor to the same pressure as the atmospheric pressure, and a spinning membrane stock solution maintained at 90 ° C. was obtained.
700 g of NMP was mixed with 300 g of pure water and added to a 3000 × 10 −6 m 3 reactor for the internal coagulation liquid. The pressure reduction to 0.02 MPa and nitrogen substitution were repeated 5 times, and then the reactor internal temperature was raised to 90 ° C. while maintaining the pressure reduction of 0.02 MPa. After holding for 1 hour, the pressure inside the reactor was changed to the same pressure as the atmospheric pressure using nitrogen, and an internal coagulation liquid (water / NMP (30/70 wt%)) passing through the inner diameter part held at 90 ° C. was obtained. .
From about 60 × 10 −6 m 3 / hour of the internal coagulation liquid held at 90 ° C. in the inner diameter part of the double spinning nozzle (inner straight system 100 μm, slit width 50 μm, outer diameter 300 μm) held at 90 ° C. Flow at a flow rate of about 120 × 10 −6 m 3 / hour, and then pass the membrane stock solution maintained at 90 ° C. at a flow rate of 90 × 10 −6 m 3 / hour to 240 × 10 −6 m 3 / hour. It was. Each flow rate was appropriately adjusted according to the winding speed during spinning.
The obtained hollow fiber membrane was introduced into an external coagulation liquid (pure water) in a coagulation tank held at 90 ° C. with an idle running distance of 0.6 m, and after coagulation was completed, it was wound up by a winding device. It was. The winding speed was 4,200 m / hour. Thereafter, the obtained hollow fiber membrane was repeatedly immersed and washed 5 times using pure water at 80 ° C., and then dried for 6 hours in a hot air dryer at 70 ° C.
When producing ultrafiltration membranes having different membrane structures, the composition ratio of the addition amount of PPE / hydrophilic polymer / good solvent, the coagulating liquid, and the like were adjusted as appropriate.
By this production method, a hollow fiber membrane (PPE-1) having a fractional molecular weight of 380,000, an inner diameter of 173 μm, and a film thickness of 30 μm could be produced.

＜中空糸膜（ＰＰＥ−２）の製造方法＞
ＰＰＥ／親水性高分子／良溶媒の添加量の組成比および凝固液等を変化させ、中空糸膜（ＰＰＥ−１）の製造方法と同等の条件で行うことにより、分画分子量８９万、内径１６１μｍ、膜厚３５μｍの中空糸膜を製造することができた。<Method for producing hollow fiber membrane (PPE-2)>
By changing the composition ratio of the addition amount of PPE / hydrophilic polymer / good solvent and the coagulating liquid, etc., and carrying out under the same conditions as the production method of the hollow fiber membrane (PPE-1), the molecular weight cutoff is 890,000 and the inner diameter A hollow fiber membrane having a thickness of 161 μm and a thickness of 35 μm could be produced.

＜中空糸膜（ＰＰＥ−３）の製造方法＞
ポリスチレン−ポリエチレングリコールブロック共重合体による親水化を行わない以外、ＰＰＥ−１と同様の方法で中空糸膜を製造した結果、内径１６９μｍ、膜厚３９μｍの中空糸膜を製造することができた。蛋白質の吸着のため、分画分子量は測定できなかった。<Method for producing hollow fiber membrane (PPE-3)>
A hollow fiber membrane having an inner diameter of 169 μm and a film thickness of 39 μm was able to be produced as a result of producing a hollow fiber membrane by the same method as PPE-1, except that the hydrophilicity was not made with the polystyrene-polyethylene glycol block copolymer. The molecular weight cut-off could not be measured due to protein adsorption.

＜中空糸膜（ＰＰＥ−４）の製造方法＞
２重紡口（内直径３５０μｍ、スリットの幅７５μｍ、外直径５００μｍ）を用い、空走距離０．１ｍであること以外は、中空糸膜（ＰＰＥ−１）の製造方法と同等の条件で行うことにより、分画分子量４１万、内径５６８μｍ、膜厚１２３μｍの中空糸膜を製造することができた。<Method for producing hollow fiber membrane (PPE-4)>
A double spinneret (inner diameter 350 μm, slit width 75 μm, outer diameter 500 μm) is used under the same conditions as the manufacturing method of the hollow fiber membrane (PPE-1) except that the free running distance is 0.1 m. As a result, a hollow fiber membrane having a molecular weight cut-off of 410,000, an inner diameter of 568 μm, and a film thickness of 123 μm could be produced.

［（メタ）アクリル系高分子膜の製造例］
＜中空糸膜（ＰＭＡ）の製造方法＞
８９０ｇのジメチルスルホキシド（和光純薬工業株式会社製、以下ＤＭＳＯと略す）に１６０ｇの（メタ）アクリル系高分子（ダイヤナールＢＲ、三菱レイヨン株式会社製、以下ＰＭＭＡと略す）および５０ｇのポリビニルピロリドン（Ｋ−３０、ＢＡＳＦ社製、以下ＰＶＰと略す）を加え、膜原液用の５０００×１０−６ｍ３反応器に注ぎ込んだ。反応器の攪拌をしながら減圧と窒素置換を５回繰り返した。その後、反応器内液温度を上げて加熱溶解し、均一なＰＭＭＡのＤＭＳＯ溶液を得た。均一に溶解したことを確認し、この段階で攪拌を停止し、減圧にして脱泡を行った。その後、大気圧と同じ圧力に戻し、６０℃に保持された紡糸用の膜原液を得た。
純水５００ｇにＤＭＳＯ５００ｇを混合し、内部凝固液用の３０００×１０−６ｍ３反応器に加えた。減圧と窒素置換を５回繰り返し、内部凝固液を得た。
６０℃に保持された２重紡口（内直径１００μｍ、スリットの幅５０μｍ、外直径３００μｍ）に内部凝固液をおよび膜原液を通液させた。それぞれの流速は紡糸時の巻取り速度に応じて適宜調整した。
得られた中空糸膜は空走距離０．６ｍで、６０℃に保持された凝固槽中の外部凝固液（純水）中に導かれ、凝固を完了させたあと、巻取り装置で巻き取った。巻取り速度としては２４００ｍ／時間から４８００ｍ／時間で巻き取ることができた。
その後、得られた中空糸膜は６０℃の純水を用いて浸漬・洗浄を繰り返し、その後６０℃の熱風乾燥機で６時間乾燥した。
この製造方法により、分画分子量３５万、内径１６０μｍ、膜厚３５μｍの中空糸膜を製造することができた。[Production example of (meth) acrylic polymer film]
<Method for producing hollow fiber membrane (PMA)>
890 g of dimethyl sulfoxide (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., hereinafter abbreviated as DMSO), 160 g of (meth) acrylic polymer (Dyanal BR, manufactured by Mitsubishi Rayon Co., Ltd., hereinafter abbreviated as PMMA), and 50 g of polyvinylpyrrolidone ( K-30, manufactured by BASF, hereinafter abbreviated as PVP), and poured into a 5000 × 10 −6 m 3 reactor for a membrane stock solution. The pressure reduction and nitrogen substitution were repeated 5 times while stirring the reactor. Thereafter, the temperature in the reactor was raised and dissolved by heating to obtain a uniform PMMA DMSO solution. After confirming uniform dissolution, stirring was stopped at this stage, and degassing was performed under reduced pressure. Thereafter, the pressure was returned to the same pressure as the atmospheric pressure, and a spinning membrane stock solution maintained at 60 ° C. was obtained.
DMSO (500 g) was mixed with pure water (500 g) and added to a 3000 × 10 −6 m 3 reactor for the internal coagulation liquid. Depressurization and nitrogen substitution were repeated 5 times to obtain an internal coagulating liquid.
The internal coagulating liquid and the membrane stock solution were passed through a double spinning nozzle (inner diameter 100 μm, slit width 50 μm, outer diameter 300 μm) maintained at 60 ° C. Each flow rate was appropriately adjusted according to the winding speed during spinning.
The obtained hollow fiber membrane was introduced into an external coagulation liquid (pure water) in a coagulation tank maintained at 60 ° C. with an idle running distance of 0.6 m, and after coagulation was completed, it was wound up by a winding device. It was. The winding speed was 2400 m / hour to 4800 m / hour.
Thereafter, the obtained hollow fiber membrane was repeatedly immersed and washed using pure water at 60 ° C., and then dried for 6 hours in a hot air dryer at 60 ° C.
By this production method, a hollow fiber membrane having a fractional molecular weight of 350,000, an inner diameter of 160 μm, and a film thickness of 35 μm could be produced.

［アクリルニトリル系高分子膜の製造例］
＜中空糸膜（ＰＡＮ）の製造方法＞
８５０ｇのジメチルスルホキシド（和光純薬工業株式会社製、以下ＤＭＳＯと略す）に１４０ｇのアクリロニトリル共重合体（９１．５重量％のアクリロニトリルと８．５重量％のアクリル酸メチルの共重合体）および１０ｇのＰＶＰ（Ｋ−１７、ＢＡＳＦ社製）を加え、膜原液用の５０００×１０−６ｍ３反応器に注ぎ込んだ。反応器の攪拌をしながら減圧と窒素置換を５回繰り返した。その後、８０℃に反応器内液温度を上げ、均一なアクリロニトリル共重合体のＤＭＳＯ溶液を得た。均一に溶解したことを確認し、この段階で攪拌を停止し、減圧にして脱泡を行った。その後、大気圧と同じ圧力に戻し、８０℃に保持された紡糸用の膜原液を得た。
純水１５０ｇにＤＭＳＯ８５０ｇを混合し、内部凝固液用の３０００×１０−６ｍ３反応器に加えた。減圧と窒素置換を５回繰り返し、内部凝固液を得た。
８０℃に保持された２重紡口（内直径１００μｍ、スリットの幅５０μｍ、外直径３００μｍ）に内部凝固液をおよび膜原液を通液させた。それぞれの流速は紡糸時の巻取り速度に応じて適宜調整した。
得られた中空糸膜は空走距離０．６ｍで、６０℃に保持された凝固槽中の外部凝固液（純水）中に導かれ、凝固を完了させたあと、巻取り装置で巻き取った。巻取り速度としては２４００ｍ／時間から４８００ｍ／時間で巻き取ることができた。
その後、得られた中空糸膜は８０℃の純水を用いて浸漬・洗浄を繰り返し、その後７０℃の熱風乾燥機で６時間乾燥行い、中空糸膜を得た。この製造方法により、分画分子量３６万、内径１６９μｍ、膜厚３５μｍの中空糸膜を製造することができた。[Production example of acrylonitrile polymer film]
<Method for producing hollow fiber membrane (PAN)>
850 g of dimethyl sulfoxide (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd., hereinafter abbreviated as DMSO), 140 g of acrylonitrile copolymer (copolymer of 91.5 wt% acrylonitrile and 8.5 wt% methyl acrylate) and 10 g PVP (K-17, manufactured by BASF) was added and poured into a 5000 × 10 −6 m 3 reactor for a membrane stock solution. The pressure reduction and nitrogen substitution were repeated 5 times while stirring the reactor. Thereafter, the temperature in the reactor was raised to 80 ° C. to obtain a uniform DMSO solution of acrylonitrile copolymer. After confirming uniform dissolution, stirring was stopped at this stage, and degassing was performed under reduced pressure. Thereafter, the pressure was returned to the same pressure as the atmospheric pressure, and a spinning membrane stock solution maintained at 80 ° C. was obtained.
DMSO (850 g) was mixed with pure water (150 g) and added to a 3000 × 10 −6 m 3 reactor for the internal coagulation liquid. Depressurization and nitrogen substitution were repeated 5 times to obtain an internal coagulating liquid.
The internal coagulation liquid and the membrane stock solution were passed through a double spinning nozzle (inner diameter 100 μm, slit width 50 μm, outer diameter 300 μm) maintained at 80 ° C. Each flow rate was appropriately adjusted according to the winding speed during spinning.
The obtained hollow fiber membrane was introduced into an external coagulation liquid (pure water) in a coagulation tank maintained at 60 ° C. with an idle running distance of 0.6 m, and after coagulation was completed, it was wound up by a winding device. It was. The winding speed was 2400 m / hour to 4800 m / hour.
Thereafter, the obtained hollow fiber membrane was repeatedly immersed and washed with pure water at 80 ° C., and then dried for 6 hours with a hot air dryer at 70 ° C. to obtain a hollow fiber membrane. By this production method, a hollow fiber membrane having a fractional molecular weight of 360,000, an inner diameter of 169 μm, and a film thickness of 35 μm could be produced.

［フッ素系高分子膜の製造例］
＜中空糸膜（ＰＶＤＦ）の製造方法＞
ポリフッ化ビニリデン（株式会社クレハ製、KF７２００）４５重量％、フタル酸ジシクロヘキシル（大阪有機化学工業株式会社製）５５重量％からなる組成物を、ヘンシェルミキサーを用いて７０℃で攪拌混合した後、冷却して粉体状としたものをホッパーより投入し、二軸押出機（東洋精機株式会社製 ラボプラストミル ＭＯＤＥＬ ５０Ｃ １５０）を用いて２１０℃で溶融混合し均一溶解した。続いて、中空内部に温度が１３０℃のフタル酸ジブチル（三建化工株式会社製）を８ｍｌ／分の速度で流しつつ、２重紡口（内直径８００μｍ、外直径１２００μｍ）より吐出速度１７ｍ／分で中空糸状に押し出し、４０℃に温調された水浴中で冷却固化させて、６０ｍ／分の速度でカセに巻き取った。その後、９９％メタノール変性エタノール（今津薬品工業株式会社製 工業品）でフタル酸ジシクロヘキシルおよびフタル酸ジブチルを抽出除去し、付着したエタノールを水で置換した後、水中に浸漬した状態で高圧蒸気滅菌装置（平山製作所株式会社製 ＨＶ−８５）を用いて１２５℃の熱処理を１時間施した。その後、付着した水をエタノールで置換した後、オーブン中で６０℃の温度で乾燥することにより中空糸状のポリフッ化ビニリデン膜を得た。抽出から乾燥にかけての工程では、収縮を防止するために膜を定長状態に固定して処理を行った。
続いて、上記のポリフッ化ビニリデン膜に対し、グラフト法による親水化処理を行った。反応液は、ヒドロキシプロピルアクリレート（東京化成株式会社製 試薬グレード）を８体積％となるように、３−ブタノール（純正科学株式会社製 試薬特級）の２５体積％水溶液に溶解させ、４０℃に保持した状態で、窒素バブリングを２０分間行ったものを用いた。まず、窒素雰囲気下において、該ポリフッ化ビニリデン膜をドライアイスで−６０℃に冷却しながら、Ｃｏ６０を線源としてγ線を１００ｋＧｙ照射した。照射後の膜は、１３．４Ｐａ以下の減圧下に１５分間静置した後、上記反応液と該膜を４０℃で接触させ、１時間静置した。その後、膜をエタノールで洗浄し、６０℃真空乾燥を４時間行い、中空糸膜を得た。この製造方法により、分画分子量３５万、内径１５９μｍ、膜厚３５μｍの中空糸膜を製造することができた。[Production example of fluoropolymer film]
<Method for producing hollow fiber membrane (PVDF)>
A composition comprising 45% by weight of polyvinylidene fluoride (manufactured by Kureha Co., Ltd., KF7200) and 55% by weight of dicyclohexyl phthalate (manufactured by Osaka Organic Chemical Industry Co., Ltd.) was stirred and mixed at 70 ° C. using a Henschel mixer, and then cooled. Then, the powder was put in from a hopper and melt-mixed at 210 ° C. and uniformly dissolved using a twin screw extruder (Laboplast Mill MODEL 50C 150 manufactured by Toyo Seiki Co., Ltd.). Subsequently, while flowing dibutyl phthalate (manufactured by Sanken Chemical Co., Ltd.) having a temperature of 130 ° C. at a rate of 8 ml / min into the hollow interior, a discharge speed of 17 m / second from the double nozzle (inner diameter 800 μm, outer diameter 1200 μm). Extruded into a hollow fiber shape in minutes, cooled and solidified in a water bath adjusted to 40 ° C., and wound around a cassette at a speed of 60 m / min. After that, dicyclohexyl phthalate and dibutyl phthalate are extracted and removed with 99% methanol-modified ethanol (Industrial product manufactured by Imazu Pharmaceutical Co., Ltd.), and the attached ethanol is replaced with water, and then the high pressure steam sterilizer is immersed in water. (Hirayama Seisakusho Co., Ltd. HV-85) was used for heat treatment at 125 ° C. for 1 hour. Thereafter, the attached water was replaced with ethanol, followed by drying in an oven at a temperature of 60 ° C. to obtain a hollow fiber-like polyvinylidene fluoride membrane. In the process from extraction to drying, the film was fixed in a constant length state to prevent shrinkage.
Subsequently, the polyvinylidene fluoride film was subjected to a hydrophilic treatment by a graft method. For the reaction solution, hydroxypropyl acrylate (reagent grade, manufactured by Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.) is dissolved in 25% by volume aqueous solution of 3-butanol (reagent special grade, manufactured by Junsei Kagaku Co., Ltd.) so as to be 8% by volume, and maintained at 40 ° C. In this state, nitrogen bubbling was performed for 20 minutes. First, in a nitrogen atmosphere, the polyvinylidene fluoride film was cooled to −60 ° C. with dry ice, and γ rays were irradiated with 100 kGy using Co60 as a radiation source. The irradiated film was allowed to stand for 15 minutes under a reduced pressure of 13.4 Pa or less, and then the reaction solution and the film were brought into contact at 40 ° C. and allowed to stand for 1 hour. Thereafter, the membrane was washed with ethanol and vacuum dried at 60 ° C. for 4 hours to obtain a hollow fiber membrane. By this production method, a hollow fiber membrane having a fractional molecular weight of 350,000, an inner diameter of 159 μm, and a film thickness of 35 μm could be produced.

［オレフィン系高分子膜の製造例］
＜中空糸膜（ＰＥ）の製造方法＞
粘度平均分子量２５万の高密度ポリエチレン２５重量％と粘度平均分子量５０万の高密度ポリエチレン２０重量％、フタル酸ジオクチル４０重量％、および微粉ケイ酸１５重量％をヘンシェルミキサーで混合した後、冷却して粉体状としたものをホッパーより投入し、二軸押出機（東洋精機株式会社製 ラボプラストミル ＭＯＤＥＬ ５０Ｃ １５０）を用いて２１０℃で溶融混合し均一溶解した。続いて、中空内部に温度が１３０℃のフタル酸ジブチル（三建化工株式会社製）を８ｍｌ／分の速度で流しつつ、２重紡口（内直径８００μｍ、外直径１２００μｍ）より吐出速度１７ｍ／分で中空糸状に押し出し、４０℃に温調された水浴中で冷却固化させて、６０ｍ／分の速度でカセに巻き取った。その後、塩化メチレン（和光純薬工業株式会社製）中に浸漬してフタル酸ジオクチルを抽出除去し、ついで２５％水酸化ナトリウム水溶液中に浸漬して微粉ケイ酸を溶出除去し、水洗浄した後、水中に浸漬した状態で高圧蒸気滅菌装置（平山製作所株式会社製 ＨＶ−８５）を用いて１２０℃の熱処理を２０分間施した。その後、付着した水をエタノールで置換した後、オーブン中で６０℃の温度で乾燥することにより中空糸状のポリエチレン膜を得た。抽出から乾燥にかけての工程では、収縮を防止するために膜を定長状態に固定して処理を行った。
続いて、上記のポリエチレン膜に対し、グラフト法による親水化処理を行った。反応液は、ヒドロキシプロピルアクリレート（東京化成株式会社製 試薬グレード）を８体積％となるように、３−ブタノール（純正科学株式会社製 試薬特級）の２５体積％水溶液に溶解させ、４０℃に保持した状態で、窒素バブリングを２０分間行ったものを用いた。まず、窒素雰囲気下において、該ポリエチレン膜をドライアイスで−６０℃に冷却しながら、Ｃｏ６０を線源としてγ線を１００ｋＧｙ照射した。照射後の膜は、１３．４Ｐａ以下の減圧下に１５分間静置した後、上記反応液と該膜を４０℃で接触させ、１時間静置した。その後、膜をエタノールで洗浄し、６０℃真空乾燥を４時間行い、中空糸膜を得た。この製造方法により、分画分子量２９万、内径１７６μｍ、膜厚３６μｍの中空糸膜を製造することができた。[Examples of olefin polymer membrane production]
<Method for producing hollow fiber membrane (PE)>
25% by weight of high density polyethylene having a viscosity average molecular weight of 250,000, 20% by weight of high density polyethylene having a viscosity average molecular weight of 500,000, 40% by weight of dioctyl phthalate, and 15% by weight of fine silicic acid are mixed with a Henschel mixer and then cooled. Then, the powder was put in from a hopper, and melted and mixed at 210 ° C. using a twin screw extruder (Toyo Seiki Co., Ltd., Laboplast Mill MODEL 50C 150) to be uniformly dissolved. Subsequently, while flowing dibutyl phthalate (manufactured by Sanken Chemical Co., Ltd.) having a temperature of 130 ° C. at a rate of 8 ml / min into the hollow interior, a discharge speed of 17 m / second from the double nozzle (inner diameter 800 μm, outer diameter 1200 μm). Extruded into a hollow fiber shape in minutes, cooled and solidified in a water bath adjusted to 40 ° C., and wound around a cassette at a speed of 60 m / min. After that, it is immersed in methylene chloride (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) to extract and remove dioctyl phthalate, and then immersed in 25% aqueous sodium hydroxide solution to elute and remove finely divided silicic acid, followed by washing with water. In the state immersed in water, the heat processing of 120 degreeC was performed for 20 minutes using the high pressure steam sterilizer (HV-85 by Hirayama Manufacturing Co., Ltd.). Thereafter, the attached water was replaced with ethanol, followed by drying in an oven at a temperature of 60 ° C. to obtain a hollow fiber-like polyethylene membrane. In the process from extraction to drying, the film was fixed in a constant length state to prevent shrinkage.
Subsequently, the polyethylene film was subjected to a hydrophilic treatment by a graft method. For the reaction solution, hydroxypropyl acrylate (reagent grade, manufactured by Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.) is dissolved in 25% by volume aqueous solution of 3-butanol (reagent special grade, manufactured by Junsei Kagaku Co., Ltd.) so as to be 8% by volume, and maintained at 40 ° C. In this state, nitrogen bubbling was performed for 20 minutes. First, in a nitrogen atmosphere, the polyethylene film was irradiated with 100 kGy using Co60 as a radiation source while cooling the polyethylene film to −60 ° C. with dry ice. The irradiated film was allowed to stand for 15 minutes under a reduced pressure of 13.4 Pa or less, and then the reaction solution and the film were brought into contact at 40 ° C. and allowed to stand for 1 hour. Thereafter, the membrane was washed with ethanol and vacuum dried at 60 ° C. for 4 hours to obtain a hollow fiber membrane. By this production method, a hollow fiber membrane having a fractional molecular weight of 290,000, an inner diameter of 176 μm, and a film thickness of 36 μm could be produced.

［ビニルアルコール系高分子膜の製造例］
＜中空糸膜（ＰＶＡ）の製造方法＞
エチレン含量３２モル％、ケン化度９９％のＥＶＡ系重合体（株式会社クラレ製、ＥＶＡＬ ＥＣ−Ｆ１００Ａ）１５重量％、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）８４重量％、水１重量％を９０℃で加熱溶解し、膜原液用の５０００×１０−6ｍ３反応器に注ぎ込んだ。反応器の攪拌をしながら減圧と窒素置換を５回繰り返した。均一な膜原液を得た後、攪拌を停止し、減圧にして脱泡を行った。その後、大気圧と同じ圧力に戻し、７０℃に保持された紡糸用の膜原液を得た。
次に、内部凝固液として３０重量％ＤＭＳＯ水溶液を作製した。６５℃に保持された２重紡口（内直径１００μｍ、スリットの幅５０μｍ、外直径３００μｍ）に内部凝固液および膜原液を通液させた。それぞれの流速は紡糸時の巻取り速度に応じて適宜調整した。得られた中空糸膜は空走距離０．６ｍで、１５℃に保持された凝固槽中の外部凝固液である３０重量％ＤＭＳＯ水溶液中に導かれ、凝固を完了させたあと、巻取り装置で巻き取った。巻取り速度としては２４００ｍ／時間から４８００ｍ／時間で巻き取ることができた。その後、得られた中空繊維膜を水洗、湿熱処理、アセトン置換、乾燥、定長熱処理を行い、中空糸膜を得た。この製造方法により、分画分子量３８万、内径１５８μｍ、膜厚４１μｍの中空糸膜を製造することができた。[Production example of vinyl alcohol polymer film]
<Method for producing hollow fiber membrane (PVA)>
An EVA polymer having an ethylene content of 32 mol% and a saponification degree of 99% (Kuraray Co., Ltd., EVAL EC-F100A) 15% by weight, dimethyl sulfoxide (DMSO) 84% by weight, and water 1% by weight are dissolved at 90 ° C. And poured into a 5000 × 10 −6 m 3 reactor for the membrane stock solution. The pressure reduction and nitrogen substitution were repeated 5 times while stirring the reactor. After obtaining a uniform membrane stock solution, stirring was stopped and degassing was performed under reduced pressure. Thereafter, the pressure was returned to the same pressure as the atmospheric pressure, and a spinning membrane stock solution maintained at 70 ° C. was obtained.
Next, a 30 wt% DMSO aqueous solution was prepared as an internal coagulation liquid. The internal coagulating liquid and the membrane stock solution were passed through a double spinning nozzle (inner diameter 100 μm, slit width 50 μm, outer diameter 300 μm) maintained at 65 ° C. Each flow rate was appropriately adjusted according to the winding speed during spinning. The obtained hollow fiber membrane was introduced into a 30 wt% DMSO aqueous solution, which is an external coagulation liquid in a coagulation tank maintained at 15 ° C. with an idle running distance of 0.6 m, and after the coagulation was completed, the winding device I wound up with. The winding speed was 2400 m / hour to 4800 m / hour. Thereafter, the obtained hollow fiber membrane was washed with water, subjected to wet heat treatment, acetone substitution, drying, and constant length heat treatment to obtain a hollow fiber membrane. By this production method, a hollow fiber membrane having a molecular weight cut-off of 380,000, an inner diameter of 158 μm, and a film thickness of 41 μm could be produced.

［セルロース系高分子膜の製造例］
＜中空糸膜（ＣＥＬ）の製造方法＞
コットンリンター（平均分子量１５万 ）を銅アンモニア溶液中に溶解せしめ、ろ過脱泡を行ない、セルロース濃度が５．７重量％、アンモニア濃度が４．０重量％、銅濃度が２．１重量％の紡糸原液とした。該紡糸原液を環状二重紡口の外側紡出口より２．０ｃｃ／ｍｉｎで吐出し、アセトン濃度が４５重量％、アンモニア濃度が０．１重量％から成る内部凝固液を該紡口の中央紡出口より０．７ｃｃ／ｍｉｎで吐出した。
さらに、アセトン濃度が５５重量％、アンモニア濃度が０．７重量％から成る外部凝固液で満たされた、細管を備えた装置に、吐出した紡糸原液を導入して、ミクロ相分離を起させるとともに引き続き凝固させ、紡速５ｍ／ｍｉｎで平枠に巻取った。このとき、細管径は７ｍｍ、外液流速は１．０ｍ／ｍｉｎ、駆動変向ロール速度は４．７ｍ／ｍｉｎ、律速ロール速度は５ｍ／ｍｉｎ、平枠速度は５ｍ／ｍｉｎであった。巻取浴成分は、３０℃の水を用い、４０分間巻取った後、さらに巻取浴と同じ３０℃の水に６０分間浸漬した。巻き取った中空糸を３重量％の硫酸水溶液で再生し、さらに水洗した。さらに中空糸膜をメタノールで水分を置換し、その後、緊張状態で、５０℃、で真空乾燥を行い、中空糸膜を得た。この製造方法により、分画分子量３９万、内径１８１μｍ、膜厚３３μｍの中空糸膜を製造することができた。[Production example of cellulosic polymer membrane]
<Method for producing hollow fiber membrane (CEL)>
Cotton linter (average molecular weight 150,000 ) Was dissolved in a copper ammonia solution and filtered and defoamed to obtain a spinning dope having a cellulose concentration of 5.7 wt%, an ammonia concentration of 4.0 wt%, and a copper concentration of 2.1 wt%. The spinning dope is discharged at 2.0 cc / min from the outer spout of the annular double nozzle, and an internal coagulation liquid having an acetone concentration of 45% by weight and an ammonia concentration of 0.1% by weight is fed to the central spinning port of the nozzle. It discharged at 0.7 cc / min from the exit.
Furthermore, the discharged spinning stock solution is introduced into a device equipped with a thin tube filled with an external coagulation liquid having an acetone concentration of 55% by weight and an ammonia concentration of 0.7% by weight to cause microphase separation. Subsequently, it was solidified and wound into a flat frame at a spinning speed of 5 m / min. At this time, the diameter of the thin tube was 7 mm, the external liquid flow rate was 1.0 m / min, the drive turning roll speed was 4.7 m / min, the rate-controlling roll speed was 5 m / min, and the flat frame speed was 5 m / min. The winding bath component was 30 ° C. water, wound up for 40 minutes, and further immersed in 30 ° C. water for 60 minutes. The wound hollow fiber was regenerated with a 3% by weight aqueous sulfuric acid solution and further washed with water. Furthermore, water was substituted for the hollow fiber membrane with methanol, and then vacuum drying was performed at 50 ° C. in a tension state to obtain a hollow fiber membrane. By this production method, a hollow fiber membrane having a fractional molecular weight of 390,000, an inner diameter of 181 μm, and a film thickness of 33 μm could be produced.

＜ウシ免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用溶液の調製＞
ウシ免疫グロブリン５％溶液（牛血清ガンマグロブリン、インビトロジェン社製）を、プラノバ７５Ｎ（旭化成メディカル株式会社製）で不溶物を除去した後、ＰＢＳ（日水社株式会社製）で希釈して所定の濃度のウシ免疫グロブリン溶液を調製し、分画性能評価用溶液とした。ＧＰＣ測定の結果、ウシ免疫グロブリン１量体および２量体の含有率は、それぞれ９１％および８％であった。<Preparation of Bovine Immunoglobulin Monomer / Dimer Fractionation Performance Evaluation Solution>
A bovine immunoglobulin 5% solution (bovine serum gamma globulin, manufactured by Invitrogen) was used to remove insoluble matter with Planova 75N (manufactured by Asahi Kasei Medical Co., Ltd.), and then diluted with PBS (manufactured by Nissui Co., Ltd.) to obtain a predetermined solution. A bovine immunoglobulin solution having a concentration was prepared and used as a fractionation performance evaluation solution. As a result of the GPC measurement, the contents of bovine immunoglobulin monomer and dimer were 91% and 8%, respectively.

＜ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用溶液の調製＞
ヒト免疫グロブリン５％溶液（グロベニン−I−ニチヤク、日本製薬株式会社製）をｐＨ処理を行い、不溶物を遠心分離し、上清を０．２μｍのマイクロフィルターで濾過した後、ＰＢＳ（日水社株式会社製）で希釈して所定の濃度のヒト免疫グロブリン溶液を調製し、分画性能評価用溶液とした。ＧＰＣ測定の結果、ヒト免疫グロブリン１量体および２量体の含有率は、それぞれ９１％および８％であった。<Preparation of Human Immunoglobulin Monomer / Dimer Fraction Performance Evaluation Solution>
A human immunoglobulin 5% solution (Globenin-I-Nichiyaku, manufactured by Nippon Pharmaceutical Co., Ltd.) is subjected to pH treatment, the insoluble matter is centrifuged, the supernatant is filtered through a 0.2 μm microfilter, and then PBS (Nissui) The human immunoglobulin solution having a predetermined concentration was prepared by diluting with a product manufactured by the same company, and used as a fractionation performance evaluation solution. As a result of GPC measurement, the contents of human immunoglobulin monomer and dimer were 91% and 8%, respectively.

＜抗ＳＣＦ抗体の製造例＞
（１）免疫原の作製
ＳＣＦを高発現するＨｅＬａ細胞のｃＤＮＡライブラリーから単離したＳＣＦのｃＤＮＡを動物細胞発現用ベクターｐＢＣＭＧＳ−ｎｅｏに組み込んだ後、これをマウス繊維芽細胞株Ｂａｌｂ／３Ｔ３細胞に形質導入し、得られたトランスフェクタントを免疫原とした。
（２）ハイブリドーマの作製
（ａ）免疫
８週令のＢａｌｂ／ｃマウス（雌）に上記トランスフェクタントを２週間間隔で腹腔内投与した。免疫の効果は、マウスの尾静脈から採取した末梢血の血清と免疫原との反応性により評価した。効果を確認した後、最終免疫、細胞融合を行った。
（ｂ）細胞融合
最終免疫から４日後、免疫されたマウスの脾細胞とマウス骨髄腫由来細胞株ＳＰ−２を常法に従って細胞融合させた。
（ｃ）抗ＳＣＦ抗体産生ハイブリドーマのスクリーニング
抗ＳＣＦ抗体産生ハイブリドーマのスクリーニング法として、トランスフェクタントおよびその親株細胞（Ｂａｌｂ／３Ｔ３）を抗原とした間接抗体法を用いた。トランスフェクタントに結合し、親株細胞（Ｂａｌｂ／３Ｔ３）には結合しない抗体を産生するハイブリドーマを選択し、クローニングした。
（ｄ）抗体の精製
ＳＣＦ発現クローンの培養上清を限外ろ過濃縮した後、結合用緩衝液（ＢｉｏＲａｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＭＡＰＳ ｂｕｆｆｅｒ）と等量混合した。Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ−４Ｂ（ファルマシア）を結合用緩衝液で平衡化し、上記混合液をカラムに流して抗体を結合させた後、結合用緩衝液でカラムを洗浄した。０．２Ｍ Ｇｌｙｃｉｎｅ−ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ３．０）をカラムに流して溶出を行い抗体 画分を得た。次に、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ（ＧＥヘルスケア）、Ｐｈｅｎｙｌ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＨＰ（ＧＥヘルスケア）、Ｓｐｅｐｈａｄｅｘ−Ｇ７５（ＧＥヘルスケア）の順で精製を行い、抗ＳＣＦ抗体を単離した。
次に、抗ＳＣＦ抗体ｐＨ処理を行い、不溶物を遠心分離し、上清を０．２μｍのマイクロフィルターで濾過した後、ＰＢＳ（日水社株式会社製）で希釈して所定の濃度のヒト免疫グロブリン溶液を調製し、分画性能評価用溶液とした。ＧＰＣ測定の結果、ヒト免疫グロブリン１量体および２量体の含有率は、それぞれ９６％および４％であった。 <Example of production of anti-SCF antibody>
(1) Preparation of immunogen SCF cDNA isolated from a cDNA library of HeLa cells that highly express SCF was incorporated into an animal cell expression vector pBCMGS-neo, which was then used as mouse fibroblast cell line Balb / 3T3 cells. The transfectant obtained by transduction was used as an immunogen.
(2) Production of hybridoma (a) Immunization The above transfectants were intraperitoneally administered at intervals of 2 weeks to 8-week-old Balb / c mice (female). The effect of immunity was evaluated by the reactivity of peripheral blood serum collected from the tail vein of mice with the immunogen. After confirming the effect, final immunization and cell fusion were performed.
(B) Cell fusion Four days after the final immunization, the spleen cells of the immunized mouse and the mouse myeloma-derived cell line SP-2 were fused according to a conventional method.
(C) Screening for anti-SCF antibody-producing hybridomas As a screening method for anti-SCF antibody-producing hybridomas, an indirect antibody method using a transfectant and its parent cell line (Balb / 3T3) as an antigen was used. A hybridoma producing an antibody that binds to the transfectant and does not bind to the parent cell line (Balb / 3T3) was selected and cloned.
(D) Purification of antibody The culture supernatant of the SCF-expressing clone was concentrated by ultrafiltration, and then mixed in an equal amount with a binding buffer (BioRad Protein MAPS buffer). Protein A-Sepharose CL-4B (Pharmacia) was equilibrated with a binding buffer, and the mixture was passed through the column to bind the antibody. Then, the column was washed with the binding buffer. 0.2M Glycine-HCl buffer (pH 3.0) was passed through the column for elution to obtain an antibody fraction. Next, purification was carried out in the order of DEAE-Sepharose FF (GE Healthcare), Phenyl-Sepharose HP (GE Healthcare), and Sephadex-G75 (GE Healthcare), and anti-SCF antibodies were isolated.
Next, anti-SCF antibody pH treatment is performed, insoluble matter is centrifuged, the supernatant is filtered through a 0.2 μm microfilter, and then diluted with PBS (manufactured by Nissui Co., Ltd.) to obtain a human having a predetermined concentration. An immunoglobulin solution was prepared and used as a fractionation performance evaluation solution. As a result of the GPC measurement, the contents of human immunoglobulin monomer and dimer were 96% and 4%, respectively.

＜分画分子量の測定＞
各限外濾過膜を用いて、１ｗｔ％のウシアルブミン（シグマ−アルドリッチ社製、分子量６万）およびウシγ−グロブリン（インビトロジェン社製、分子量１５万）、フェリチン（シグマ−アルドリッチ製、分子量４５万）を０．０１０ＭＰａの定圧デッドエンドで濾過を行った。濾過開始から５分の間に透過した免疫グロブリン透過液中のアルブミンおよびγ−グロブリン、フェリチンの量を測定し、膜に捕捉された各蛋白質の捕捉率を算出した。各蛋白質の分子量と捕捉率との検量線を作製し、検量線から捕捉率９０％の時の分子量を求め、その値を分画分子量と定めた。<Measurement of molecular weight cutoff>
Using each ultrafiltration membrane, 1 wt% bovine albumin (Sigma-Aldrich, molecular weight 60,000) and bovine γ-globulin (Invitrogen, molecular weight 150,000), ferritin (Sigma-Aldrich, molecular weight 450,000) ) At a constant pressure dead end of 0.010 MPa. The amount of albumin, γ-globulin, and ferritin in the immunoglobulin permeate that permeated within 5 minutes from the start of filtration was measured, and the capture rate of each protein captured on the membrane was calculated. A calibration curve between the molecular weight and the capture rate of each protein was prepared, the molecular weight at the capture rate of 90% was determined from the calibration curve, and the value was determined as the fractional molecular weight.

＜処理量、透過量、透過率および透過率比の計算方法＞
処理量、透過量、透過率および透過率比を測定する方法としては、高速液体クロマトグラフフィー法、核磁気共鳴法、質量分析法、赤外分光法などの結果より算出する方法が挙げられるが、算出することができれば、これらに限定するものではない。本発明においては、処理量、透過量、透過率および透過率比は、下記の方法で算出した。免疫グロブリンの濃度は２８０ｎｍ波長を用いて吸光度計で吸光度を測定し算出した。免疫グロブリン１量体と２量体の重量比率は高速液体クロマトグラフフィー測定（東ソー株式会社製のカラムＧ３０００ＳＷＸＬを２本、東ソー株式会社製のＳＣ８０２０システム、東ソー株式会社製のＵＶ８０２０検出器）を行い、２８０ｎｍ波長における吸収ピーク面積比から求めた。<Calculation method of throughput, transmittance, transmittance and transmittance ratio>
Examples of the method for measuring the throughput, the transmission amount, the transmittance, and the transmittance ratio include methods that are calculated from results such as high performance liquid chromatography, nuclear magnetic resonance, mass spectrometry, and infrared spectroscopy. If it can be calculated, it is not limited to these. In the present invention, the treatment amount, the transmission amount, the transmittance, and the transmittance ratio were calculated by the following methods. The immunoglobulin concentration was calculated by measuring the absorbance with an absorptiometer using a wavelength of 280 nm. The weight ratio of immunoglobulin monomer to dimer is measured by high performance liquid chromatography (two column G3000SWXL manufactured by Tosoh Corporation, SC8020 system manufactured by Tosoh Corporation, UV8020 detector manufactured by Tosoh Corporation). It calculated | required from the absorption peak area ratio in a 280 nm wavelength.

（透過率の計算方法）
まず、膜に透過させた免疫グロブリンの全処理量は、下記式（１３）〜（１５）で計算できる。
Ｗ＝Ｗ（Ｍｏ）+ Ｗ（Ａｇ） （１３）
Ｗ（Ｍｏ）
＝Ｖ１×Ａ１／Ａ×Ｇ１（Ｍｏ）／１００−Ｖ２×Ａ２／Ａ×Ｇ２（Ｍｏ）／１００
（１４）
Ｗ（Ａｇ）
＝Ｖ１×Ａ１／Ａ×Ｇ１（Ａｇ）／１００−Ｖ２×Ａ２／Ａ×Ｇ２（Ａｇ）／１００
（１５）
Ｗ：膜に透過させた免疫グロブリンの処理量（ｇ）
Ｗ（Ｍｏ）：膜に透過させた免疫グロブリン１量体の処理量（ｇ）
Ｗ（Ａｇ）：膜に透過させた免疫グロブリン２量体の処理量（ｇ）
Ａ：１ｇ／Ｌの免疫グロブリン溶液の吸光度（Ａｂｓ）
Ｖ１：濾過前の免疫グロブリン元液の容量（Ｌ）
Ａ１：濾過前の免疫グロブリン元液の吸光度（Ａｂｓ）
Ｇ１（Ｍｏ）：濾過前の免疫グロブリン元液中の１量体含有率（％）
Ｇ１（Ａｇ）：濾過前の免疫グロブリン元液中の２量体含有率（％）
Ｖ２：濾過後の免疫グロブリン元液の容量（Ｌ）
Ａ２：濾過後の免疫グロブリン元液の吸光度（Ａｂｓ）
Ｇ２（Ｍｏ）：濾過後の免疫グロブリン元液中の１量体含有率（％）
Ｇ２（Ａｇ）：濾過後の免疫グロブリン元液中の２量体含有率（％）(Transmittance calculation method)
First, the total amount of immunoglobulin permeated through the membrane can be calculated by the following formulas (13) to (15).
W = W (Mo) + W (Ag) (13)
W (Mo)
= V1 * A1 / A * G1 (Mo) / 100-V2 * A2 / A * G2 (Mo) / 100
(14)
W (Ag)
= V1 * A1 / A * G1 (Ag) / 100-V2 * A2 / A * G2 (Ag) / 100
(15)
W: Amount of immunoglobulin processed through the membrane (g)
W (Mo): treatment amount of immunoglobulin monomer permeating through the membrane (g)
W (Ag): throughput of immunoglobulin dimer permeated through the membrane (g)
A: Absorbance (Abs) of an immunoglobulin solution of 1 g / L
V1: Volume of the original immunoglobulin solution before filtration (L)
A1: Absorbance (Abs) of immunoglobulin original solution before filtration
G1 (Mo): Monomer content (%) in the original immunoglobulin solution before filtration
G1 (Ag): Dimer content (%) in the original immunoglobulin solution before filtration
V2: Volume of the original immunoglobulin solution after filtration (L)
A2: Absorbance (Abs) of immunoglobulin original solution after filtration
G2 (Mo): Monomer content (%) in the original immunoglobulin solution after filtration
G2 (Ag): Dimer content (%) in the original immunoglobulin after filtration

但し、濾過前の免疫グロブリン元液の容量が多く、処理量が少ない場合、免疫グロブリン溶液中の１量体と２量体の組成比が殆ど変化しないため、近似値として、下記式（１６）および（１７）から処理量を計算しても良い。
Ｗ（Ｍｏ）＝（Ｖ１×Ａ１−Ｖ２×Ａ２）／Ａ×Ｇ１（Ｍｏ）／１００ （１６）
Ｗ（Ａｇ）＝（Ｖ１×Ａ１−Ｖ２×Ａ２）／Ａ×Ｇ１（Ａｇ）／１００ （１７）

次に、膜を透過した免疫グロブリン１量体の透過量Ｐ（Ｍｏ）と２量体の透過量Ｐ（Ａ
ｇ）を式（１８）および（１９）で計算した。
Ｐ（Ｍｏ）＝Ｖ３×Ａ３／Ａ×Ｇ３（Ｍｏ）／１００ （１８）
Ｐ（Ａｇ）＝Ｖ３×Ａ３／Ａ×Ｇ３（Ａｇ）／１００ （１９）
Ｐ（Ｍｏ）：膜を透過した免疫グロブリン１量体の透過量（ｇ）
Ｐ（Ａｇ）：膜を透過した免疫グロブリン２量体の透過量（ｇ）
Ａ：１ｇ／Ｌの免疫グロブリン溶液の吸光度（Ａｂｓ）
Ｖ３：免疫グロブリン透過液の容量（Ｌ）
Ａ３：免疫グロブリン透過液の吸光度（Ａｂｓ）
Ｇ３（Ｍｏ）：免疫グロブリン透過液中の１量体含有率（％）
Ｇ３（Ａｇ）：免疫グロブリン透過液中の２量体含有率（％）

さらに、免疫グロブリン１量体透過率および２量体透過率を式（２０）および（２１）で計算し、その透過率比（分画性能）を式（２２）で算出した。
１量体透過率（％）＝Ｐ（Ｍｏ）／Ｗ（Ｍｏ）×１００ （２０）
２量体透過率（％）＝Ｐ（Ａｇ）／Ｗ（Ａｇ）×１００ （２１）
透過率比＝２量体透過率／１量体透過率 （２２）However, when the volume of the original immunoglobulin solution before filtration is large and the treatment amount is small, the composition ratio of the monomer and the dimer in the immunoglobulin solution hardly changes. Therefore, as an approximate value, the following formula (16) The processing amount may be calculated from (17) and (17).
W (Mo) = (V1 * A1-V2 * A2) / A * G1 (Mo) / 100 (16)
W (Ag) = (V1 * A1-V2 * A2) / A * G1 (Ag) / 100 (17)

Next, permeation amount P (Mo) of immunoglobulin monomer passing through the membrane and permeation amount P (A of dimer).
g) was calculated by equations (18) and (19).
P (Mo) = V3 × A3 / A × G3 (Mo) / 100 (18)
P (Ag) = V3 × A3 / A × G3 (Ag) / 100 (19)
P (Mo): Permeation amount of immunoglobulin monomer passing through the membrane (g)
P (Ag): Amount of immunoglobulin dimer permeating through the membrane (g)
A: Absorbance (Abs) of an immunoglobulin solution of 1 g / L
V3: Volume of immunoglobulin permeate (L)
A3: Absorbance (Abs) of immunoglobulin permeate
G3 (Mo): Monomer content in immunoglobulin permeate (%)
G3 (Ag): Dimer content in immunoglobulin permeate (%)

Furthermore, immunoglobulin monomer transmission and dimer transmission were calculated by equations (20) and (21), and the transmittance ratio (fractionation performance) was calculated by equation (22).
Monomer transmittance (%) = P (Mo) / W (Mo) × 100 (20)
Dimer transmittance (%) = P (Ag) / W (Ag) × 100 (21)
Transmittance ratio = dimer transmittance / monomer transmittance (22)

＜凝集抑制効果の評価＞
免疫グロブリン溶液に所定濃度となるように凝集抑制剤を添加し、０．０２ｍ２のＰＳｆ−１フィルターを用いてクロスフロー濾過実験を３時間実施し、濾過実験前後の免疫グロブリンの濁度を測定することにより、免疫グロブリンの凝集抑制効果を評価した。
クロスフロー濾過実験の条件は１０ｇ／Ｌの免疫グロブリン溶液３００ｍＬを濾過装置にセットした後、供給速度：１０ｃｍ／秒、入口濾過圧と出口濾過圧の平均が０．０２７ＭＰａとなるように調整し、２５℃、２．５時間、クロスフロー濾過した。濾過されなかった溶液は、免疫グロブリン元液に戻す方法で行った。濾過の進行に従って、免疫グロブリン元液が濃縮されていく為、１５分毎にＵＶ−１６００（株式会社島津製作所製）を用いて、波長２８０ｎｍにおける免疫グロブリン元液の吸収強度（Ａｂｓ）を測定しながら、常に免疫グロブリン濃度が一定となるように加水濾過実験で行った。添加する水溶液としては、免疫グロブリン元液と同濃度の凝集抑制剤を含有する溶液を用い、系中の凝集抑制剤濃度が変化しないようにして行った。溶液の濁度をラコムテスター濁度計ＴＮ−１００（アズワン株式会社製）を用いて測定し、凝集抑制効果を式（２３）で算出し、比較評価した。凝集抑制効果値が高いほど、凝集抑制効果があることが実験証明できる。
凝集抑制効果＝［１−（Ｂａ-Ｂｏ）／（Ａａ−Ａｏ）］×１００ （２３）
Ｂａ＝凝集抑制剤を添加した濾過実験後の免疫グロブリン元液の濁度（ＮＴＵ）
Ｂｏ＝凝集抑制剤を添加した濾過実験前の免疫グロブリン元液の濁度（ＮＴＵ）
Ａａ＝凝集抑制剤を添加していない濾過実験後の免疫グロブリン元液の濁度（ＮＴＵ）
Ａｏ＝凝集抑制剤を添加していない濾過実験前の免疫グロブリン元液の濁度（ＮＴＵ）
<Evaluation of aggregation suppression effect>
Aggregation inhibitor is added to the immunoglobulin solution to a predetermined concentration, and a cross flow filtration experiment is conducted for 3 hours using a 0.02 m 2 PSf-1 filter, and the turbidity of the immunoglobulin before and after the filtration experiment is measured. By doing so, the inhibitory effect of immunoglobulin aggregation was evaluated.
The conditions of the cross-flow filtration experiment were such that 300 g of an immunoglobulin solution of 10 g / L was set in a filtration device, and then adjusted so that the supply rate was 10 cm / second and the average of the inlet filtration pressure and the outlet filtration pressure was 0.027 MPa. Cross flow filtration was performed at 25 ° C. for 2.5 hours. The solution which was not filtered was performed by the method of returning to an immunoglobulin original solution. Since the immunoglobulin stock solution is concentrated as the filtration proceeds, the absorption intensity (Abs) of the immunoglobulin stock solution at a wavelength of 280 nm is measured every 15 minutes using UV-1600 (manufactured by Shimadzu Corporation). However, the hydrofiltration experiment was performed so that the immunoglobulin concentration was always constant. As the aqueous solution to be added, a solution containing an aggregation inhibitor having the same concentration as that of the original immunoglobulin solution was used so that the concentration of the aggregation inhibitor in the system was not changed. The turbidity of the solution was measured using a Lacom Tester turbidimeter TN-100 (manufactured by AS ONE Co., Ltd.), and the aggregation suppression effect was calculated by the formula (23) for comparative evaluation. It can be experimentally proved that the higher the aggregation suppression effect value is, the aggregation suppression effect is.
Aggregation inhibiting effect = [1- (Ba-Bo) / (Aa-Ao)] × 100 (23)
Ba = turbidity (NTU) of immunoglobulin original solution after filtration experiment with addition of aggregation inhibitor
Bo = turbidity (NTU) of immunoglobulin original solution before filtration experiment with addition of aggregation inhibitor
Aa = turbidity (NTU) of immunoglobulin original solution after filtration experiment without addition of aggregation inhibitor
Ao = turbidity (NTU) of immunoglobulin original solution before filtration experiment without adding aggregation inhibitor

＜免疫グロブリン濃縮工程における濃縮倍率の計算方法＞
分離工程で得られた免疫グロブリン透過液の濃度および濃縮工程で得られた濃縮液の濃度を用い、式（２４）〜（２６）で計算することができる。
濃縮倍率＝Ｃ４／Ｃ３ （２４）
Ｃ３＝Ａ３／Ａ （２５）
Ｃ４＝Ａ４／Ａ （２６）
Ｃ３：免疫グロブリン透過液の濃度（ｇ／Ｌ）
Ｃ４：免疫グロブリン濃縮液の濃度（ｇ／Ｌ）
Ａ３：免疫グロブリン透過液の吸光度（Ａｂｓ）
Ａ４：免疫グロブリン濃縮液の吸光度（Ａｂｓ）
Ａ：１ｇ／Ｌの免疫グロブリン溶液の吸光度（Ａｂｓ）<Calculation method of concentration ratio in immunoglobulin concentration step>
Using the concentration of the immunoglobulin permeate obtained in the separation step and the concentration of the concentrate obtained in the concentration step, the calculation can be performed using equations (24) to (26).
Concentration magnification = C4 / C3 (24)
C3 = A3 / A (25)
C4 = A4 / A (26)
C3: Concentration of immunoglobulin permeate (g / L)
C4: Concentration of immunoglobulin concentrate (g / L)
A3: Absorbance (Abs) of immunoglobulin permeate
A4: Absorbance (Abs) of immunoglobulin concentrate
A: Absorbance (Abs) of an immunoglobulin solution of 1 g / L

中空糸膜（ＰＳｆ−１）の中空部分の断面積合計が０．００５ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。
次に、５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含む０．０１ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリン溶液を装置にセットし、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力の平均が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。濾過中、ヒト免疫グロブリン濃度が常に一定になるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含むＰＢＳ水溶液を免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２０分間、濾過を行うことで濾過膜表面にケーク層を形成させ後、２．５ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリン溶液に置き換え、１分間の免疫グロブリン２量体透過率／１量体透過率比（免疫グロブリン２量体透過率／１量体透過率）を測定した。
上記の方法と同様に、０．１ｇ／Ｌおよび１ｇ／Ｌ、１０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリン溶液とブランクとして希釈液を用い、同様の方法で濾過を行った後、２．５ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリン溶液に置き換え、５分間の免疫グロブリン２量体透過率／１量体透過率比（免疫グロブリン２量体透過率／１量体透過率）を測定した。
その結果（図６）、０ｇ／Ｌおよび０．０１ｇ／Ｌ、０．１ｇ／Ｌでケーク層を形成させた場合の免疫グロブリン２量体透過率／１量体透過率の比、即ち透過率比は、それぞれ０．６２および０．６２、０．５５であった。このことから、１ｇ／Ｌ未満の濃度では、短時間で免疫グロブリン１量体と２量体を分離できるケーク層が形成されていないことが分かった。一方、１ｇ／Ｌおよび１０ｇ／Ｌでケーク層を形成させた場合の透過率比は、それぞれ０．１８および０．１２であり、短時間で免疫グロブリン１量体と２量体を分離できるケーク層が形成されていることが分かった。
以上の結果より、短時間で免疫グロブリン１量体と２量体を分離できる、すなわち、免疫グロブリン２量体の透過率と疫グロブリン１量体の透過率の比が０．２以下の分離能を発現するためのケーク層を形成させるためには、１ｇ／Ｌ以上の濃度が必要であることが分かった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PSf-1) was 0.005 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG.
Next, a 0.01 g / L human immunoglobulin solution containing 50 g / L lysine hydrochloride was set in the apparatus, the line bundle in the hollow fiber membrane was 10 cm / second, and the average hollow fiber membrane outlet pressure was 0. The liquid feed pump 2 (3) was rotated so that the pressure became 0.010 MPa, and the adjustment valve 1 (7) was used for adjustment. During filtration, an aqueous PBS solution containing 50 g / L of lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is added to the immunoglobulin base solution tank (4) so that the human immunoglobulin concentration is always constant. After forming a cake layer on the surface of the filtration membrane by performing filtration for 20 minutes, it was replaced with a 2.5 g / L human immunoglobulin solution, and the immunoglobulin dimer permeability / monomer permeability ratio for 1 minute ( Immunoglobulin dimer permeability / monomer permeability) was measured.
In the same manner as described above, 0.1 g / L and 1 g / L, 10 g / L human immunoglobulin solution and a diluent as a blank were used, and after filtration in the same manner, 2.5 g / L human It was replaced with an immunoglobulin solution, and an immunoglobulin dimer permeability / monomer permeability ratio (immunoglobulin dimer permeability / monomer permeability) for 5 minutes was measured.
As a result (FIG. 6), the ratio of immunoglobulin dimer permeability / monomer permeability when a cake layer was formed at 0 g / L, 0.01 g / L, and 0.1 g / L, that is, the transmittance. The ratios were 0.62, 0.62, and 0.55, respectively. From this, it was found that at a concentration of less than 1 g / L, a cake layer capable of separating an immunoglobulin monomer and a dimer in a short time was not formed. On the other hand, when the cake layer was formed at 1 g / L and 10 g / L, the transmittance ratios were 0.18 and 0.12, respectively, and the cake capable of separating immunoglobulin monomer and dimer in a short time It was found that a layer was formed.
From the above results, it is possible to separate an immunoglobulin monomer and a dimer in a short time, that is, a resolution with a ratio of the transmittance of an immunoglobulin dimer to that of an epithelial globulin monomer is 0.2 or less. It has been found that a concentration of 1 g / L or more is necessary to form a cake layer for expressing the above.

中空糸膜（ＰＳｆ−１）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。
次に、５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含む１０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリン溶液を装置にセットし、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。濾過中、ヒト免疫グロブリン濃度が常に一定になるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含むＰＢＳ水溶液を免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った。ヒト免疫グロブリン１量体の透過量をＧＰＣで測定した結果、免疫グロブリン透過量が１５６ｇ／ｍ２であった。上記の方法と同様に、３０ｇ／Ｌおよび５０ｇ／Ｌ、１００ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリン溶液を用いて濾過を行い、濾過開始から５時間後までに透過する量を計算したところ、それぞれ２０７ｇ／ｍ２、および２４４ｇ／ｍ２、３６７ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比（ヒト免疫グロブリン２量体透過率／ヒト免疫グロブリン１量体透過率）を計算したところ、それぞれ０．１０および０．１３、０．１４、０．１７であった。
以上の結果（図７）より、１５０ｇ／Ｌ以上ではヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比が０．２０以上となり、２量体含有率が高い免疫グロブリン透過液であることが推測される。よって、免疫グロブリン元液に含まれる免疫グロブリン２量体が少ない場合、透過液中の免疫グロブリン２量体含有率を１％以下にするするためには、免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比が０．３以下でもよいことを考慮して、安定した濾過を行うための上限濃度は、１５０ｇ／Ｌ以下である。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PSf-1) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG.
Next, a 10 g / L human immunoglobulin solution containing 50 g / L lysine hydrochloride is set in the apparatus, the bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second, and the outlet pressure on the hollow fiber membrane is 0.010 MPa. The liquid feed pump 2 (3) was rotated and adjusted with the adjustment valve 1 (7). During filtration, an aqueous PBS solution containing 50 g / L of lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is added to the immunoglobulin base solution tank (4) so that the human immunoglobulin concentration is always constant. Cross flow filtration was performed at 25 ° C. for 5 hours. As a result of measuring the permeation amount of human immunoglobulin monomer by GPC, the permeation amount of immunoglobulin was 156 g / m 2 . In the same manner as in the above method, filtration was performed using human immunoglobulin solutions of 30 g / L, 50 g / L, and 100 g / L, and the amount permeated within 5 hours after the start of filtration was calculated to be 207 g / m. 2, and 244 g / m 2, was 367 g / m 2. Further, when the permeability ratio of human immunoglobulin monomer and dimer (human immunoglobulin dimer permeability / human immunoglobulin monomer permeability) was calculated, 0.10 and 0.13, 0 were obtained, respectively. .14, 0.17.
From the above results (FIG. 7), at 150 g / L or more, the permeability ratio of human immunoglobulin monomer and dimer is 0.20 or more, and the immunoglobulin permeate has a high dimer content. Guessed. Therefore, when the immunoglobulin dimer contained in the immunoglobulin source solution is small, in order to reduce the immunoglobulin dimer content in the permeate to 1% or less, the immunoglobulin dimer and dimer Considering that the transmittance ratio may be 0.3 or less, the upper limit concentration for performing stable filtration is 150 g / L or less.

内部凝固液の組成の純水量とＤＭＡｃ量を適時変化させ、分画分子量が、４．５万および１９万、２１万、２４万、３６万、４２万であるポリスルホン系中空糸膜を製造した。その中空部分の断面積合計が０．００５ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含む１０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリン溶液を装置にセットし、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。濾過中、ヒト免疫グロブリン濃度が常に一定になるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含むＰＢＳ水溶液を免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った。ヒト免疫グロブリン免疫グロブリン透過液をＧＰＣで測定し、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比（ヒト免疫グロブリン２量体透過率／ヒト免疫グロブリン１量体透過率）を計算した。その結果、ヒト免疫グロブリンは、分画分子量の４．５万のポリスルホン系高分子膜を透過できず、また、１９万および２１万、２４万、３６万、４２万のポリスルホン系高分子膜のヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比が、それぞれ０．０２および０．０４、０．０２、０．０６，０．１５であった。以上の結果（図８）より、分画分子量１０万未満では、ヒト免疫グロブリン１量体が透過せず、分画分子量５０万以上では、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率比が０．２より高くなり、十分な分画性能を発現しないことがわかった。よって、高透過率および高分画性能を発現するには、分画分子量が１０万以上５０万未満であることが重要である。The amount of pure water and the amount of DMAc in the composition of the internal coagulation liquid were changed as appropriate to produce polysulfone-based hollow fiber membranes having molecular weight cut-offs of 45,000 and 190,000, 210,000, 240,000, 360,000 and 420,000. . The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion was 0.005 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, a 10 g / L human immunoglobulin solution containing 50 g / L lysine hydrochloride is set in the apparatus, the bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second, and the outlet pressure on the hollow fiber membrane is 0.010 MPa. The liquid feed pump 2 (3) was rotated and adjusted with the adjustment valve 1 (7). During filtration, an aqueous PBS solution containing 50 g / L of lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is added to the immunoglobulin base solution tank (4) so that the human immunoglobulin concentration is always constant. Cross flow filtration was performed at 25 ° C. for 5 hours. The human immunoglobulin immunoglobulin permeate was measured by GPC, and the ratio of human immunoglobulin monomer to dimer permeability (human immunoglobulin dimer permeability / human immunoglobulin monomer permeability) was calculated. As a result, human immunoglobulin cannot permeate 45,000 polysulfone polymer membranes with a molecular weight cut off, and 190,210,000, 240,000, 360,000, 420,000 polysulfone polymer membranes. The permeability ratios of human immunoglobulin monomer and dimer were 0.02 and 0.04, 0.02, 0.06 and 0.15, respectively. From the above results (FIG. 8), when the molecular weight cut-off is less than 100,000, the human immunoglobulin monomer does not permeate, and when the molecular weight cut-off is 500,000 or more, the permeability ratio between the human immunoglobulin monomer and the dimer. Was higher than 0.2, indicating that sufficient fractionation performance was not exhibited. Therefore, in order to express high transmittance and high fractionation performance, it is important that the fractional molecular weight is 100,000 or more and less than 500,000.

中空糸膜（ＰＳｆ−１）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ウシ免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ１（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ウシ免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のウシ免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表１）、１量体透過量が１２６ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．８ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８３．７％および１３．７％であり、透過率比は０．１６であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PSf-1) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for bovine immunoglobulin monomer / dimer fractionation performance evaluation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the liquid feed pump 1 (3) is rotated so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second, and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 (7 ). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes crossflow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the bovine immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the bovine immunoglobulin amount in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate was measured with an absorptiometer, and the bovine immunoglobulin monomer and dimer content rates were determined. Measured by GPC. As a result (Table 1), monomer transmission | permeation amount was 126g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.8g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 83.7% and 13%, respectively. The transmittance ratio was 0.16.

中空糸膜（ＰＳｆ−２）の中空部分の断面積合計が０．０２ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。次に、１０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリンと５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩からなるヒト免疫グロブリン溶液を調製した。その糸束とヒト免疫グロブリン溶液１００ｍＬを図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続し、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進むヒト免疫グロブリン溶液の濃度が高くなるので、濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含有するＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で１２０分、溶液がなくなるまでクロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表１）、１量体透過量が４４ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．４ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９７．０％および９．７％であり、透過率比は０．１０であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PSf-2) was 0.02 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. Next, a human immunoglobulin solution consisting of 10 g / L human immunoglobulin and 50 g / L lysine hydrochloride was prepared. The yarn bundle and 100 mL of the human immunoglobulin solution are connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. 3 so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the outlet pressure of the hollow fiber membrane is 0.010 MPa. The liquid pump 2 (3) was rotated and adjusted with the adjusting valve 1 (7). Since the concentration of the human immunoglobulin solution that undergoes cross-flow filtration increases, the PBS aqueous solution containing 50 g / L lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is diluted so that the concentration is always 10 g / L. To the immunoglobulin original solution tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 120 minutes until the solution disappeared, the content of human immunoglobulin monomer and dimer in the immunoglobulin permeate was measured by GPC. As a result (Table 1), monomer transmission | permeation amount was 44g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 0.4g / m < 2 >. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 97.0% and 9%, respectively. The transmittance ratio was 0.10.

免疫グロブリン元液タンク（４）内の溶液が一定になるようにＰＢＳ水溶液を希釈液添加する以外、実施例５と同様の方法でクロスフロー濾過を行った。その時間と免疫グロブリン１量体透過率の関係を図９に示す。開始後３００分のヒト免疫グロブリン１量体の透過率および２量体の透過率は、それぞれ８５．７％、５．０％であり、その時の透過率比は０．０６であった。   Crossflow filtration was performed in the same manner as in Example 5 except that a dilute solution of PBS was added so that the solution in the immunoglobulin source solution tank (4) was constant. The relationship between the time and immunoglobulin monomer transmission is shown in FIG. 300 minutes after the start, the transmittance of the human immunoglobulin monomer and the transmittance of the dimer were 85.7% and 5.0%, respectively, and the transmittance ratio at that time was 0.06.

中空糸膜（ＰＳｆ−２）の中空部分の断面積合計が０．０２ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。次に、３０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリンと５０ｇ／Ｌのアルギニン塩酸塩からなるヒト免疫グロブリン溶液を調製した。その糸束とヒト免疫グロブリン溶液１００ｍＬを図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続し、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進むウシ免疫グロブリン溶液の濃度が高くなるので、濃度が常に３０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含有するＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で、溶液がなくなるまでクロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表１）、１量体透過量が１３２ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．６ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９７．０％および１３．５％であり、透過率比は０．１４であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PSf-2) was 0.02 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. Next, a human immunoglobulin solution consisting of 30 g / L human immunoglobulin and 50 g / L arginine hydrochloride was prepared. The yarn bundle and 100 mL of the human immunoglobulin solution are connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. 3 so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the outlet pressure of the hollow fiber membrane is 0.010 MPa. The liquid pump 2 (3) was rotated and adjusted with the adjusting valve 1 (7). Since the concentration of the bovine immunoglobulin solution that undergoes cross-flow filtration increases, the PBS aqueous solution containing 50 g / L lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is diluted so that the concentration is always 30 g / L. To the immunoglobulin original solution tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. until the solution disappeared, the content ratios of human immunoglobulin monomer and dimer in the immunoglobulin permeate were measured by GPC. As a result (Table 1), monomer transmission | permeation amount was 132g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.6g / m < 2 >. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 97.0% and 13%, respectively. The transmittance ratio was 0.14.

中空糸膜（ＰＳｆ−２）の中空部分の断面積合計が０．０２ｍ２となるように本数を取り出し、ＳＣＦモノクローナル抗体１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。次に、５ｇ／ＬのＳＣＦモノクローナル抗体と５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩からなるＳＣＦモノクローナル抗体溶液を調製した。その糸束とＳＣＦモノクローナル抗体溶液１５０ｍＬを図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続し、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進むＳＣＦモノクローナル抗体溶液の濃度が高くなるので、濃度が常に５ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのアルギニン塩酸塩を含有するＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で、溶液がなくなるまでクロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン透過液中のＳＣＦモノクローナル抗体１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表１）、１量体透過量が３５ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．２ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９６．０％および１４．４％であり、透過率比は０．１５であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PSf-2) was 0.02 m 2 to prepare a yarn bundle for evaluating the performance of SCF monoclonal antibody monomer / dimer fractionation. Next, an SCF monoclonal antibody solution consisting of 5 g / L SCF monoclonal antibody and 50 g / L lysine hydrochloride was prepared. The yarn bundle and 150 mL of the SCF monoclonal antibody solution are connected to a cross-flow filtration device as shown in FIG. 3 so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the outlet pressure on the hollow fiber membrane is 0.010 MPa. The liquid pump 2 (3) was rotated and adjusted with the adjusting valve 1 (7). Since the concentration of the SCF monoclonal antibody solution that undergoes cross-flow filtration increases, the PBS aqueous solution containing 50 g / L arginine hydrochloride in the diluent tank (1) is diluted so that the concentration is always 5 g / L. To the immunoglobulin original solution tank (4). After cross-flow filtration was performed at 25 ° C. until the solution disappeared, the content ratio of the SCF monoclonal antibody monomer and dimer in the immunoglobulin permeate was measured by GPC. As a result (Table 1), monomer transmission | permeation amount was 35g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 0.2g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 96.0% and 14%, respectively. The transmittance ratio was 0.15.

中空糸膜（ＰＳｆ−３）の中空部分の断面積合計が０．０２ｍ２となるように本数を取り出し、ウシ免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。次に、１０ｇ／Ｌのウシ免疫グロブリンと５０ｇ／Ｌのアルギニン塩酸塩からなるウシ免疫グロブリン溶液を調製した。その糸束とウシ免疫グロブリン溶液３００ｍＬを図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続し、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進むウシ免疫グロブリン溶液の濃度が高くなるので、濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのアルギニン塩酸塩を含有するＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で、溶液がなくなるまでクロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン透過液中のウシ免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表１）、１量体透過量が１２６ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．４ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９２．０％および１２．０％であり、透過率比は０．１３であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PSf-3) was 0.02 m 2, and a yarn bundle for bovine immunoglobulin monomer / dimer fractionation performance evaluation was prepared. Next, a bovine immunoglobulin solution consisting of 10 g / L bovine immunoglobulin and 50 g / L arginine hydrochloride was prepared. The yarn bundle and 300 mL of bovine immunoglobulin solution are connected to a cross-flow filtration device as shown in FIG. 3 so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the outlet pressure of the hollow fiber membrane is 0.010 MPa. The liquid pump 2 (3) was rotated and adjusted with the adjusting valve 1 (7). As the concentration of the bovine immunoglobulin solution that undergoes cross-flow filtration increases, dilute the aqueous PBS solution containing 50 g / L arginine hydrochloride in the diluent tank (1) so that the concentration is always 10 g / L. To the immunoglobulin original solution tank (4). After cross-flow filtration was performed at 25 ° C. until the solution disappeared, the content ratios of bovine immunoglobulin monomer and dimer in the immunoglobulin permeate were measured by GPC. As a result (Table 1), monomer transmission | permeation amount was 126g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.4g / m < 2 >. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and the transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 92.0% and 12%, respectively. The transmittance ratio was 0.13.

比較例１Comparative Example 1

中空糸膜（ＰＳｆ−１）を中空糸膜（ＰＳｆ−４）に変えた以外、実施例４と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表１）、１量体透過量が２０１ｇ／ｍ２、２量体透過量が１０．４ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９２．５％および５４．２％であり、透過率比は０．５９であった。The permeation amount, the transmittance and the transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 4 except that the hollow fiber membrane (PSf-1) was changed to the hollow fiber membrane (PSf-4). As a result (Table 1), monomer transmission | permeation amount was 201g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 10.4g / m < 2 >. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and the transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 92.5% and 54%, respectively. The transmittance ratio was 0.59.

比較例２Comparative Example 2

中空糸膜（ＰＳｆ−１）を中空糸膜（ＰＳｆ−５）に変えた以外、実施例４と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表１）、１量体透過量が３６３ｇ／ｍ２、２量体透過量が３０．９ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９４．２％および９１．２％であり、透過率比は０．９７であった。The permeation amount, the transmittance and the transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 4 except that the hollow fiber membrane (PSf-1) was changed to the hollow fiber membrane (PSf-5). As a result (Table 1), monomer transmission | permeation amount was 363g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 30.9g / m < 2 >. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and the transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 94.2% and 91%, respectively. The transmittance ratio was 0.97.

中空糸膜（ＰＳｆ−６）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ウシ免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線束が１００ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．１ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、送液ポンプ１（２）を回転させ、ウシ免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のウシ免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表１）、１量体透過量が８７５ｇ／ｍ２、２量体透過量が１２．４ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９０．３％および１４．６％であり、透過率比は０．１６であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PSf-6) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for bovine immunoglobulin monomer / dimer fractionation performance evaluation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 100 cm / sec, and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.1 MPa, and the adjustment valve 1 (7 ). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the liquid feed pump 1 (2) is rotated so that the bovine immunoglobulin concentration is always 10 g / L in the diluent tank (1). The PBS aqueous solution is added as a diluent to the immunoglobulin source solution tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the bovine immunoglobulin amount in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate was measured with an absorptiometer, and the bovine immunoglobulin monomer and dimer content rates were determined. Measured by GPC. The results (Table 1), 1 dimer permeation amount was 875 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 12.4 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 90.3% and 14%, respectively. The transmittance ratio was 0.16.

比較例３Comparative Example 3

実施例１０で作製した糸束を用い、図５のデッドエンド濾過装置を使用して濾過を行った。バルブ１（３４）を開放しバルブ２（３５）を閉塞した状態で圧力調整機（３１）を作動させ、中空糸膜入り側圧力を０．１ＭＰａに設定してデッドエンド濾過を行なった。この場合、濾過初期は高い透過性能を示したが、次第に透過性能が低下し、最終的には、免疫グロブリン透過液が出なくなった。すなわち、デッドエンド濾過では安定な連続運転が出来なかった。１量体透過量が４１３ｇ／ｍ２、２量体透過量が２８．８ｇ／ｍ２であり、透過量が大きく減少した。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果（表１）、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８８．２％および６９．８％であり、透過率比は０．７９であり、分画性能が悪くなった。
Using the yarn bundle prepared in Example 10, filtration was performed using the dead-end filtration device of FIG. The pressure regulator (31) was operated with the valve 1 (34) opened and the valve 2 (35) closed, and dead-end filtration was performed by setting the hollow fiber membrane containing side pressure to 0.1 MPa. In this case, high permeation performance was shown at the beginning of filtration, but the permeation performance gradually decreased, and finally, the immunoglobulin permeate did not come out. That is, stable continuous operation could not be performed by dead end filtration. 1 dimer permeation amount was 413g / m 2, 2 dimer permeation amount was 28.8 g / m 2, permeation amount was reduced significantly. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer (Table 1), the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 88. 2% and 69.8%, and the transmittance ratio was 0.79, resulting in poor fractionation performance.

中空糸膜（ＰＰＥ−１）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表２）、１量体透過量が１６４ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．２ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８８．６％および１３．３％であり、透過率比は０．１５であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PPE-1) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate is measured with an absorptiometer, and the content ratio of immunoglobulin monomer and dimer is measured with GPC. Measured with The results (Table 2), 1-mer permeation amount 164 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 2.2 g / m 2. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 88.6% and 13 respectively. The transmittance ratio was 0.15.

中空糸膜（ＰＰＥ−１）の中空部分の断面積合計が０．０２ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。次に、１０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリンと５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩からなるヒト免疫グロブリン溶液を調製した。その糸束とヒト免疫グロブリン溶液１００ｍＬを図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続し、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１０ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進むヒト免疫グロブリン溶液の濃度が高くなるので、濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含有するＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で、溶液がなくなるまでクロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表２）、１量体透過量が４２．５ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．６０ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９３．４％および１５．０％であり、透過率比は０．１６であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PPE-1) was 0.02 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. Next, a human immunoglobulin solution consisting of 10 g / L human immunoglobulin and 50 g / L lysine hydrochloride was prepared. The yarn bundle and 100 mL of the human immunoglobulin solution are connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. 3 so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the outlet pressure of the hollow fiber membrane is 0.010 MPa. The liquid pump 2 (3) was rotated and adjusted with the adjusting valve 1 (7). Since the concentration of the human immunoglobulin solution that undergoes cross-flow filtration increases, the PBS aqueous solution containing 50 g / L lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is diluted so that the concentration is always 10 g / L. To the immunoglobulin original solution tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. until the solution disappeared, the content ratios of human immunoglobulin monomer and dimer in the immunoglobulin permeate were measured by GPC. The results (Table 2), 1-mer permeation amount 42.5 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 0.60 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 93.4% and 15%, respectively. The transmittance ratio was 0.16.

ヒト免疫グロブリンを抗ＳＣＦ抗体（モノクローナル）に変えた以外、実施例１１と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表２）、抗ＳＣＦ抗体１量体透過量が２４３ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．４ｇ／ｍ２であった。さらに、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９０．８％および１２．５％であり、透過率比は０．１４であった。The permeation amount, the transmittance and the transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 11 except that the human immunoglobulin was changed to an anti-SCF antibody (monoclonal). The results (Table 2), anti-SCF antibody 1 dimer permeation amount was 243 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 1.4 g / m 2. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of the anti-SCF antibody monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 90.8% and 12%, respectively. The transmittance ratio was 0.14.

比較例４Comparative Example 4

中空糸膜（ＰＰＥ−１）を中空糸膜（ＰＰＥ−２）に変えた以外、実施例１１と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表２）、１量体透過量が５７１ｇ／ｍ２、２量体透過量が４９．０ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９８．６％および９６．３％であり、透過率比は０．９８であった。The permeation amount, the transmittance and the transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 11 except that the hollow fiber membrane (PPE-1) was changed to the hollow fiber membrane (PPE-2). As a result (Table 2), monomer transmission | permeation amount was 571g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 49.0g / m < 2 >. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 98.6% and 96, respectively. The transmittance ratio was 0.98.

比較例５Comparative Example 5

中空糸膜（ＰＰＥ−１）を中空糸膜（ＰＰＥ−３）に変えた以外、実施例１１と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表２）、１量体透過量が３．０ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．１２ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、２１．３％および９．５％であり、透過率比は０．４５であった。The permeation amount, the transmittance and the transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 11 except that the hollow fiber membrane (PPE-1) was changed to the hollow fiber membrane (PPE-3). As a result (Table 2), monomer transmission | permeation amount was 3.0g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 0.12g / m < 2 >. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 21.3% and 9%, respectively. The transmittance ratio was 0.45.

中空糸膜（ＰＰＥ−４）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１００ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．１ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、送液ポンプ１（２）を回転させ、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表２）、１量体透過量が１１６３ｇ／ｍ２、２量体透過量が１４．９ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９０．８％および１３．２％であり、透過率比は０．１５であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PPE-4) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 100 cm / second, and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.1 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the liquid feed pump 1 (2) is rotated so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L in the diluent tank (1). The PBS aqueous solution is added as a diluent to the immunoglobulin source solution tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate is measured with an absorptiometer, and the content ratio of human immunoglobulin monomer and dimer is determined. Measured by GPC. The results (Table 2), 1-mer permeation amount 1163g / m 2, 2 dimer permeation amount was 14.9 g / m 2. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 90.8% and 13%, respectively. The transmittance ratio was 0.15.

比較例６Comparative Example 6

実施例１４で作製した糸束を用い、図５のデッドエンド濾過装置を使用して濾過を行った。バルブ１（３４）を開放しバルブ２（３５）を閉塞した状態で圧力調整機（３１）を作動させ、中空糸膜入り側圧力を０．１ＭＰａに設定してデッドエンド濾過を行なった。この場合、濾過初期は高い透過性能を示したが、次第に透過性能が低下し、最終的には、免疫グロブリン透過液が出なくなった。すなわち、デッドエンド濾過では安定な連続運転が出来なかった。１量体透過量が３２６ｇ／ｍ２、２量体透過量が１６．４ｇ／ｍ２であり、透過量が大きく減少した。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果（表２）、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９２．８％および５３．２％であり、透過率比は０．５７であり、分画性能が悪くなった。
Using the yarn bundle prepared in Example 14, filtration was performed using the dead-end filtration device of FIG. The pressure regulator (31) was operated with the valve 1 (34) opened and the valve 2 (35) closed, and dead-end filtration was performed by setting the hollow fiber membrane containing side pressure to 0.1 MPa. In this case, high permeation performance was shown at the beginning of filtration, but the permeation performance gradually decreased, and finally, the immunoglobulin permeate did not come out. That is, stable continuous operation could not be performed by dead end filtration. The monomer permeation amount was 326 g / m 2 , and the dimer permeation amount was 16.4 g / m 2 , and the permeation amount was greatly reduced. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer (Table 2), the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 92. 8% and 53.2%, the transmittance ratio was 0.57, and the fractionation performance deteriorated.

中空糸膜（ＰＭＡ）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表３）、１量体透過量が１５３ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．８ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８５．０％および１１．２％であり、透過率比は０．１３であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PMA) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate is measured with an absorptiometer, and the content ratio of human immunoglobulin monomer and dimer is determined. Measured by GPC. The results (Table 3), 1-mer permeation amount 153 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 1.8 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 85.0% and 11%, respectively. The transmittance ratio was 0.13.

免疫グロブリン（日本製薬株式会社製、グロベニン−I−ニチヤク）を抗ＳＣＦ抗体（モノクローナル）に変えた以外、実施例１５と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表３）、１量体透過量が２２２ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．３４ｇ／ｍ２であった。さらに、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９１．２％および１３．２％であり、透過率比は０．１４であった。The permeation amount, transmittance, and transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 15 except that immunoglobulin (Nippon Pharmaceutical Co., Ltd., Globenin-I-Nichiyaku) was changed to anti-SCF antibody (monoclonal). The results (Table 3), 1-mer permeation amount 222 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 1.34 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of the anti-SCF antibody monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 91.2% and 13 respectively. The transmittance ratio was 0.14.

中空糸膜（ＰＡＮ）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表３）、１量体透過量が１６９ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．１ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８８．８％および１２．３％であり、透過率比は０．１４であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PAN) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate is measured with an absorptiometer, and the content ratio of human immunoglobulin monomer and dimer is determined. Measured by GPC. As a result (Table 3), monomer transmission | permeation amount was 169g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 2.1g / m < 2 >. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 88.8% and 12%, respectively. The transmittance ratio was 0.14.

免疫グロブリン（日本製薬株式会社製、グロベニン−I−ニチヤク）を抗ＳＣＦ抗体（モノクローナル）に変えた以外、実施例１７と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表３）、１量体透過量が２２８ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．３ｇ／ｍ２であった。さらに、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９２．１％および１２．８％であり、透過率比は０．１４であった。
The permeation amount, transmittance and transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 17 except that immunoglobulin (Nippon Pharmaceutical Co., Ltd., Globenin-I-Nichiyaku) was changed to anti-SCF antibody (monoclonal). As a result (Table 3), monomer transmission | permeation amount was 228g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.3g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of the anti-SCF antibody monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 92.1% and 12%, respectively. The transmittance ratio was 0.14.

中空糸膜（ＰＶＤＦ）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表４）、１量体透過量が１７４ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．３ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９０．２％および１３．５％であり、透過率比は０．１５であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion of the hollow fiber membrane (PVDF) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate is measured with an absorptiometer, and the content ratio of human immunoglobulin monomer and dimer is determined. Measured by GPC. The results (Table 4), 1 dimer permeation amount was 174 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 2.3 g / m 2. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 90.2% and 13%, respectively. The transmittance ratio was 0.15.

免疫グロブリン濃度（日本製薬株式会社製、グロベニン−I−ニチヤク）を抗ＳＣＦ抗体（モノクローナル）に変えた以外、実施例１９と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表４）、１量体透過量が２２０ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．５ｇ／ｍ２であった。さらに、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９２．３％および１５．２％であり、透過率比は０．１６であった。The permeation amount, transmittance and transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 19 except that the immunoglobulin concentration (Glovenin-I-Nichiyaku, manufactured by Nippon Pharmaceutical Co., Ltd.) was changed to the anti-SCF antibody (monoclonal). As a result (Table 4), monomer transmission | permeation amount was 220g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.5g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of the anti-SCF antibody monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 92.3% and 15%, respectively. The transmittance ratio was 0.16.

中空糸膜（ＰＥ）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表４）、１量体透過量が１６１ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．１ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８９．３％および１３．５％であり、透過率比は０．１５であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PE) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate is measured with an absorptiometer, and the content ratio of human immunoglobulin monomer and dimer is determined. Measured by GPC. The results (Table 4), 1 dimer permeation amount was 161 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 2.1 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 89.3% and 13%, respectively. The transmittance ratio was 0.15.

免疫グロブリン（日本製薬株式会社製、グロベニン−I−ニチヤク）を抗ＳＣＦ抗体（モノクローナル）に変えた以外、実施例２１と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表４）、１量体透過量が２０３ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．２ｇ／ｍ２であった。さらに、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８９．９％および１２．５％であり、透過率比は０．１４であった。
The permeation amount, transmissivity, and transmissivity ratio were calculated in the same manner as in Example 21, except that immunoglobulin (Nippon Pharmaceutical Co., Ltd., Globenin-I-Nichiyaku) was changed to anti-SCF antibody (monoclonal). The results (Table 4), 1 dimer permeation amount was 203 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 1.2 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of the anti-SCF antibody monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 89.9% and 12%, respectively. The transmittance ratio was 0.14.

中空糸膜（ＰＶＡ）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表５）、１量体透過量が１７７ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．６ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９０．６％および１５．２％であり、透過率比は０．１７であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (PVA) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the immunoglobulin original solution and the immunoglobulin permeate is measured with an absorptiometer, and the content ratio of human immunoglobulin monomer and dimer is determined. Measured by GPC. The results (Table 5), 1 dimer permeation amount was 177 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 2.6 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 90.6% and 15%, respectively. The transmittance ratio was 0.17.

免疫グロブリン（日本製薬株式会社製、グロベニン−I−ニチヤク）を抗ＳＣＦ抗体（モノクローナル）に変えた以外、実施例２３と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表５）、１量体透過量が２１１ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．５ｇ／ｍ２であった。さらに、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９１．５％および１２．３％であり、透過率比は０．１３であった。The permeation amount, transmittance and transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 23, except that immunoglobulin (Nippon Pharmaceutical Co., Ltd., Globenin-I-Nichiyaku) was changed to anti-SCF antibody (monoclonal). As a result (Table 5), monomer transmission | permeation amount was 211 g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 2.5 g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of the anti-SCF antibody monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 91.5% and 12%, respectively. The transmittance ratio was 0.13.

中空糸膜（ＣＥＬ）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、中空糸膜中での線速が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン元液および免疫グロ免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン量を吸光度計で、また、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表５）、１量体透過量が１９３ｇ／ｍ２、２量体透過量が３．１ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８９．９％および１６．２％であり、透過率比は０．１８であった。The number was taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part of the hollow fiber membrane (CEL) was 0.01 m 2, and a yarn bundle for evaluating the performance of human immunoglobulin monomer / dimer fractionation was prepared. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, the feed pump 2 (3) is rotated so that the linear velocity in the hollow fiber membrane is 10 cm / second and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 ( It was adjusted in 7). Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the amount of human immunoglobulin in the original immunoglobulin solution and the permeated immunoglobulin solution was measured with an absorptiometer, and the content of human immunoglobulin monomer and dimer The rate was measured by GPC. The results (Table 5), 1 dimer permeation amount was 193 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 3.1 g / m 2. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and the transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 89.9% and 16%, respectively. The transmittance ratio was 0.18.

免疫グロブリン（日本製薬株式会社製、グロベニン−I−ニチヤク）を抗ＳＣＦ抗体（モノクローナル）に変えた以外、実施例２５と同様の方法で透過量、透過率および透過率比を算出した。その結果（表５）、１量体透過量が２２３ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．７ｇ／ｍ２であった。さらに、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９１．２％および１６．９％であり、透過率比は０．１９であった。
The permeation amount, transmittance and transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 25 except that immunoglobulin (Nippon Pharmaceutical Co., Ltd., Globenin-I-Nichiyaku) was changed to anti-SCF antibody (monoclonal). The results (Table 5), 1 dimer permeation amount was 223 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 1.7 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of the anti-SCF antibody monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 91.2% and 16%, respectively. The transmittance ratio was 0.19.

凝集抑制剤として、アミノ酸：Ｌ（＋）−リシン（Ｌｙｓｉｎｅ、和光純薬工業株式会社製）を用い、５０ｇ／Ｌ濃度になるようウシ免疫グロブリン溶液に添加し、ウシ免疫グロブリンの凝集抑制効果の評価および濾過実験におけるウシ免疫グロブリンの透過率および分画性能の評価を実施した。
凝集抑制効果は、＜凝集抑制効果の評価＞に従って実験を行った。その結果（表６）、凝集抑制効果は９０であり、高い凝集抑制効果が見られた。
次に、５０ｇ／ＬのＬ（＋）−リシンを含有するウシ免疫グロブリン溶液を使用し、実施例４と同様の方法で透過率および透過率比を算出した。その結果（表６）、１量体透過量が１５５ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．０ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９７．３％および１４．３％であり、透過率比は０．１５であった。これは、ウシ免疫グロブリンの２量体の膜分離ができており、さらに、高い透過率でウシ免疫グロブリン１量体を回収していることを示す。As an aggregation inhibitor, amino acid: L (+)-lysine (Lysine, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) is used and added to a bovine immunoglobulin solution so as to have a concentration of 50 g / L. Evaluation and evaluation of bovine immunoglobulin permeability and fractionation performance in filtration experiments were performed.
The aggregation suppression effect was tested according to <Evaluation of aggregation suppression effect>. As a result (Table 6), the aggregation inhibitory effect was 90, and the high aggregation inhibitory effect was seen.
Next, using a bovine immunoglobulin solution containing 50 g / L L (+)-lysine, the transmittance and transmittance ratio were calculated in the same manner as in Example 4. The results (Table 6), 1 dimer permeation amount was 155 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 2.0 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 97.3% and 14%, respectively. The transmittance ratio was 0.15. This indicates that bovine immunoglobulin dimers have been membrane-separated and that bovine immunoglobulin monomers are recovered with high permeability.

凝集抑制剤として、アミノ酸：Ｌ（＋）−リシン塩酸塩（Ｌｙｓｉｎｅ、和光純薬工業株式会社製）を用いた以外、実施例２７と同様の方法でウシ免疫グロブリンの凝集抑制効果の評価および濾過実験におけるウシ免疫グロブリンの透過率および分画性能の評価を実施した。その結果（表６）、凝集抑制効果は８８であり、高い凝集抑制効果が見られた。また、１量体透過量が１５２ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．９ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９６．６％および１３．７％であり、透過率比は０．１４であった。これは、ウシ免疫グロブリンの２量体の膜分離ができており、さらに、高い透過率でウシ免疫グロブリン１量体を回収していることを示す。Evaluation of the aggregation inhibitory effect of bovine immunoglobulin and filtration in the same manner as in Example 27, except that amino acid: L (+)-lysine hydrochloride (Lysine, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used as the aggregation inhibitor. Evaluation of bovine immunoglobulin permeability and fractionation performance in the experiment was performed. As a result (Table 6), the aggregation inhibitory effect was 88 and the high aggregation inhibitory effect was seen. Moreover, monomer transmission | permeation amount was 152g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.9g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 96.6% and 13%, respectively. The transmittance ratio was 0.14. This indicates that bovine immunoglobulin dimers have been membrane-separated and that bovine immunoglobulin monomers are recovered with high permeability.

凝集抑制剤として、アミノ酸：Ｌ（＋）−アルギニン塩酸塩（Ａｒｇｉｎｉｎｅ、和光純薬工業株式会社製）を用いた以外、実施例２７と同様の方法でウシ免疫グロブリンの凝集抑制効果の評価および濾過実験におけるウシ免疫グロブリンの透過率および分画性能の評価を実施した。
その結果（表６）、凝集抑制効果は７２であり、高い凝集抑制効果が見られた。また、１量体透過量が１４８ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．０ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９５．１％および１４．６％であり、透過率比は０．１５であった。これは、ウシ免疫グロブリンの２量体の膜分離ができており、さらに、高い透過率でウシ免疫グロブリン１量体を回収していることを示す。Evaluation of the aggregation inhibitory effect of bovine immunoglobulin and filtration in the same manner as in Example 27 except that amino acid: L (+)-arginine hydrochloride (Arginine, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used as the aggregation inhibitor. Evaluation of bovine immunoglobulin permeability and fractionation performance in the experiment was performed.
As a result (Table 6), the aggregation inhibitory effect was 72 and the high aggregation inhibitory effect was seen. Further, 1 dimer permeation amount was 148 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 2.0 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 95.1% and 14%, respectively. The transmittance ratio was 0.15. This indicates that bovine immunoglobulin dimers have been membrane-separated and that bovine immunoglobulin monomers are recovered with high permeability.

凝集抑制剤として、ポリエチレングリコール３００（分子量３００、和光純薬工業株式会社製）を用い、１０ｇ／Ｌになるようウシ免疫グロブリン溶液に添加した以外、実施例２７と同様の方法でウシ免疫グロブリンの凝集抑制効果の評価および濾過実験におけるウシ免疫グロブリンの透過率および分画性能の評価を実施した。
その結果（表６）、凝集抑制効果は８０であり、高い凝集抑制効果が見られた。また、１量体透過量が１４６ｇ／ｍ２、２量体透過量が２．０ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９６．１％および１５．０％であり、透過率比は０．１６であった。これは、ウシ免疫グロブリンの２量体の膜分離ができており、さらに、高い透過率でウシ免疫グロブリン１量体を回収していることを示す。As an aggregation inhibitor, polyethylene glycol 300 (molecular weight 300, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used, and it was added to the bovine immunoglobulin solution so as to be 10 g / L. Evaluation of the aggregation-inhibiting effect and evaluation of bovine immunoglobulin permeability and fractionation performance in filtration experiments were performed.
As a result (Table 6), the aggregation inhibitory effect was 80, and the high aggregation inhibitory effect was seen. Further, 1 dimer permeation amount was 146 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 2.0 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 96.1% and 15%, respectively. The transmittance ratio was 0.16. This indicates that bovine immunoglobulin dimers have been membrane-separated and that bovine immunoglobulin monomers are recovered with high permeability.

凝集抑制剤として、ポリエチレングリコール１Ｋ（分子量１０００、和光純薬工業株式会社製）を用い、１０ｇ／Ｌになるようウシ免疫グロブリン溶液に添加した以外、実施例２７と同様の方法でウシ免疫グロブリンの凝集抑制効果の評価および濾過実験におけるウシ免疫グロブリンの透過率および分画性能の評価を実施した。
その結果（表６）、凝集抑制効果は８０であり、高い凝集抑制効果が見られた。また、１量体透過量が１４３ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．９ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９５．２％および１４．４％であり、透過率比は０．１５であった。これは、ウシ免疫グロブリンの２量体の膜分離ができており、さらに、高い透過率でウシ免疫グロブリン１量体を回収していることを示す。As an aggregation inhibitor, polyethylene glycol 1K (molecular weight 1000, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used, and it was added to the bovine immunoglobulin solution so as to be 10 g / L. Evaluation of the aggregation-inhibiting effect and evaluation of bovine immunoglobulin permeability and fractionation performance in filtration experiments were performed.
As a result (Table 6), the aggregation inhibitory effect was 80, and the high aggregation inhibitory effect was seen. Moreover, monomer transmission | permeation amount was 143g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.9g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 95.2% and 14%, respectively. The transmittance ratio was 0.15. This indicates that bovine immunoglobulin dimers have been membrane-separated and that bovine immunoglobulin monomers are recovered with high permeability.

凝集抑制剤として、ポリエチレングリコール４Ｋ（分子量４０００、和光純薬工業株式会社製）を用い、１０ｇ／Ｌになるようウシ免疫グロブリン溶液に添加した以外、実施例２７と同様の方法でウシ免疫グロブリンの凝集抑制効果の評価および濾過実験におけるウシ免疫グロブリンの透過率および分画性能の評価を実施した。
その結果（表６）、凝集抑制効果は６９であり、高い凝集抑制効果が見られた。また、１量体透過量が１３９ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．８ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９３．７％および１３．８％であり、透過率比は０．１５であった。これは、ウシ免疫グロブリンの２量体の膜分離ができており、さらに、高い透過率でウシ免疫グロブリン１量体を回収していることを示す。
As an aggregation inhibitor, polyethylene glycol 4K (molecular weight 4000, manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used, and it was added to the bovine immunoglobulin solution so as to be 10 g / L. Evaluation of the aggregation-inhibiting effect and evaluation of bovine immunoglobulin permeability and fractionation performance in filtration experiments were performed.
As a result (Table 6), the aggregation inhibitory effect was 69 and the high aggregation inhibitory effect was seen. Moreover, monomer transmission | permeation amount was 139g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.8g / m < 2 >. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 93.7% and 13%, respectively. The transmittance ratio was 0.15. This indicates that bovine immunoglobulin dimers have been membrane-separated and that bovine immunoglobulin monomers are recovered with high permeability.

実施例４と同じと方法でウシ免疫グロブリン溶液をクロスフロー濾過し、分画性能の経時変化を分析した。濾過開始から１０分毎にフラクションを回収し、免疫グロブリン透過液中の全ウシ免疫グロブリン中のウシ免疫グロブリン２量体含有率および透過率比（分画性能）を算出した結果を、それぞれ図１０および図１１に示す。図１０および図１１が示す通り、免疫グロブリン透過液中のウシ免疫グロブリン２量体の含有率は濾過初期の０〜１０分間と１０分後以降では、分画性能およびウシ免疫グロブリン２量体含有率が異なり、１０分後以降は、分画性能が向上し、免疫グロブリン透過液中に含まれるウシ免疫グロブリン２量体の含有率が１％以下に低下した。免疫グロブリン２量体透過率／１量体透過率の透過率比も１０分後以降は、急激に低下した。
次に、濾過開始から１０分間、免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液タンク（４）に再循環させる濾過方法でクロスフロー濾過実験を行なった。濾過開始後１０分間はサンプリングを実施しないため、５時間１０分濾過実験を行い、サンプリング時間は５時間とした。その結果（表７）、１量体透過量が１２３ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．８ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８４．０％および６．２％であり、透過率比は０．０７であった。また、免疫グロブリン透過液中ウシ免疫グロブリン２量体の含有率は０．６５％であった。再循環させていない実施例４の場合、免疫グロブリン透過液中ウシ免疫グロブリン２量体の含有率は１．４２％であるため、再循環させることによってウシ免疫グロブリン１量体の精製度が高くなることがわかった。The bovine immunoglobulin solution was subjected to crossflow filtration in the same manner as in Example 4, and the change over time in the fractionation performance was analyzed. The fractions were collected every 10 minutes from the start of filtration, and the results of calculating the bovine immunoglobulin dimer content and the permeability ratio (fractionation performance) in the total bovine immunoglobulin in the immunoglobulin permeate were shown in FIG. And shown in FIG. As shown in FIG. 10 and FIG. 11, the content of bovine immunoglobulin dimer in the immunoglobulin permeate is 0 to 10 minutes after filtration and after 10 minutes, and the fractionation performance and bovine immunoglobulin dimer content are as follows. After 10 minutes, the fractionation performance was improved, and the content of bovine immunoglobulin dimer contained in the immunoglobulin permeate was reduced to 1% or less. The transmittance ratio of immunoglobulin dimer permeability / monomer permeability also decreased rapidly after 10 minutes.
Next, a cross flow filtration experiment was performed by a filtration method in which the immunoglobulin permeate was recirculated to the immunoglobulin source solution tank (4) for 10 minutes from the start of filtration. Since sampling was not performed for 10 minutes after the start of filtration, a filtration experiment was conducted for 5 hours and 10 minutes, and the sampling time was 5 hours. The results (Table 7), 1 dimer permeation amount was 123 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 0.8 g / m 2. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 84.0% and 6%, respectively. The transmittance ratio was 0.07. The content of bovine immunoglobulin dimer in the immunoglobulin permeation solution was 0.65%. In the case of Example 4 which was not recirculated, the content of bovine immunoglobulin dimer in the immunoglobulin permeate was 1.42%. Therefore, the purity of bovine immunoglobulin monomer was increased by recycling. I found out that

実施例５と同じと方法でヒト免疫グロブリン溶液をクロスフロー濾過し、濾過開始から１０分毎の免疫グロブリン透過液中に含まれるヒト免疫グロブリン２量体の含有率をモニタリングした。免疫グロブリン透過液中に含まれるヒト免疫グロブリン２量体の含有率が１％に低下するまで免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液タンク（４）に再循環させた後、クロスフロー濾過でヒト免疫グロブリン１量体と２量体の分離を行なった。その結果（表７）、１量体透過量が４２．３ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．２１ｇ／ｍ２であった。さらに、ウシ免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９３．０％および５．３％であり、透過率比は０．０６であった。また、免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン２量体の含有率は０．４９％であった。再循環させていない実施例５の場合、免疫グロブリン透過液中ヒト免疫グロブリン２量体の含有率は０．８８％であるため、再循環させることによってヒト免疫グロブリン１量体の精製度が高くなることがわかった。
The human immunoglobulin solution was cross-flow filtered by the same method as in Example 5, and the content of human immunoglobulin dimer contained in the immunoglobulin permeate every 10 minutes from the start of filtration was monitored. The immunoglobulin permeate is recirculated to the immunoglobulin source solution tank (4) until the content of the human immunoglobulin dimer in the immunoglobulin permeate decreases to 1%, and then human immunity is obtained by cross-flow filtration. Separation of globulin monomer and dimer was performed. The results (Table 7), 1 dimer permeation amount was 42.3 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 0.21 g / m 2. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and the transmittance ratio (fractionation performance) of bovine immunoglobulin monomer and dimer, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 93.0% and 5%, respectively. The transmittance ratio was 0.06. Moreover, the content rate of the human immunoglobulin dimer in the immunoglobulin permeation solution was 0.49%. In the case of Example 5 that was not recycled, the content of the human immunoglobulin dimer in the immunoglobulin permeate was 0.88%, so that the purity of the human immunoglobulin monomer was increased by recycling. I found out that

参考例１Reference example 1

免疫グロブリン透過液を元液に再循環させず、濾過開始から１０分間のサンプルを廃棄すること以外は、実施例３３と同様の方法で濾過実験を行った。その結果、はじめの１０分間で廃棄したウシ免疫グロブリン１量体は６．３ｇ／ｍ２であり、実施例３３と比較して多くのロスと生じた。A filtration experiment was conducted in the same manner as in Example 33, except that the immunoglobulin permeate was not recycled to the original solution, and the sample was discarded for 10 minutes from the start of filtration. As a result, the bovine immunoglobulin monomer that was discarded in the first 10 minutes was 6.3 g / m 2 , resulting in many losses compared to Example 33.

参考例２Reference example 2

免疫グロブリン透過液を元液に再循環させず、濾過開始から１０分間のサンプルを廃棄すること以外は、実施例３４と同様の方法で濾過実験を行った。その結果、はじめの１０分間で廃棄したヒト免疫グロブリン１量体は３．５ｇ／ｍ２であり、実施例３４と比較して多くのロスと生じた。A filtration experiment was conducted in the same manner as in Example 34, except that the immunoglobulin permeate was not recycled to the original solution and the sample was discarded for 10 minutes from the start of filtration. As a result, the amount of human immunoglobulin monomer discarded in the first 10 minutes was 3.5 g / m 2 , resulting in many losses compared to Example 34.

中空糸膜（ＰＳｆ−１）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価およびウイルスクリアランス性評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。
次に、指標ウイルスとしてブタパルボウイルス使用し、１０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリンと１０５．０ＴＣＩＤ５０／ｍｌのブタパルボウイルスを含有した溶液を免疫グロブリン元液タンク（４）に入れ、図３に示すクロスフロー濾過装置に接続した。
その後、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ヒト免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。また、免疫グロブリン透過液のブタパルボウイルスのＴＣＩＤ５０を測定し、ブタパルボウイルス対数除去率（ＬＲＶ）を計算した。その結果（表８）、１量体透過量が１１５ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．５ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８６．８％および１２．８％であり、透過率比は０．１５であった。また、ウイルスの対数除去率（ＬＲＶ）は、４．３以上であった。The number of the hollow fiber membrane (PSf-1) is taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion is 0.01 m 2, and the yarn for human immunoglobulin monomer / dimer fractionation performance evaluation and virus clearance evaluation A bundle was made. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG.
Next, a porcine parvovirus was used as the indicator virus, and a solution containing 10 g / L human immunoglobulin and 10 5.0 TCID 50 / ml porcine parvovirus was placed in the immunoglobulin source solution tank (4). It was connected to the crossflow filtration apparatus shown in FIG.
Thereafter, the liquid feed pump 2 (3) is rotated so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / sec, and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 (7) Adjusted. Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes cross-flow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the human immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the content ratio of human immunoglobulin monomer and dimer was measured by GPC. Moreover, the porcine parvovirus TCID 50 of the immunoglobulin permeate was measured, and the porcine parvovirus logarithmic removal rate (LRV) was calculated. As a result (Table 8), monomer transmission | permeation amount was 115g / m < 2 > and dimer transmission | permeation amount was 1.5g / m < 2 >. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 86.8% and 12%, respectively. The transmittance ratio was 0.15. Moreover, the logarithmic removal rate (LRV) of the virus was 4.3 or more.

中空糸膜（ＰＳｆ−２）の中空部分の断面積合計が０．０２ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体分画性能評価およびウイルスクリアランス性評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。
次に、指標ウイルスとしてブタパルボウイルス使用し、１０ｇ／Ｌのヒト免疫グロブリンと１０５．０ＴＣＩＤ５０／ｍｌのブタパルボウイルス、５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含有した溶液１００ｍＬを免疫グロブリン元液タンク（４）に入れ、図３に示すクロスフロー濾過装置に接続した。
中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進むヒト免疫グロブリン溶液の濃度が高くなるので、濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含有するＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で、溶液がなくなるまでクロスフロー濾過を行った後、免疫グロブリン透過液中のヒト免疫グロブリン１量体と２量体の含量率をＧＰＣで測定した。その結果（表８）、１量体透過量が４３．４ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．４６ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９５．４％および１１．４％であり、透過率比は０．１２であった。また、ウイルスの対数除去率（ＬＲＶ）は、４．３以上であった。The number of the hollow fiber membrane (PSf-2) is taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part is 0.02 m 2, and the yarn for human immunoglobulin monomer / dimer fractionation performance evaluation and virus clearance evaluation A bundle was made. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG.
Next, using porcine parvovirus as an indicator virus, 100 mL of a solution containing 10 g / L human immunoglobulin, 10 5.0 TCID 50 / ml porcine parvovirus, 50 g / L lysine hydrochloride was used as the original immunoglobulin solution. It put into the tank (4) and connected to the crossflow filtration apparatus shown in FIG.
The liquid feed pump 2 (3) was rotated so that the wire bundle in the hollow fiber membrane was 10 cm / second and the outlet pressure of the hollow fiber membrane was 0.01 MPa, and the adjustment valve 1 (7) was used for adjustment. Since the concentration of the human immunoglobulin solution that undergoes cross-flow filtration increases, the PBS aqueous solution containing 50 g / L lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is diluted so that the concentration is always 10 g / L. To the immunoglobulin original solution tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. until the solution disappeared, the content ratios of human immunoglobulin monomer and dimer in the immunoglobulin permeate were measured by GPC. The results (Table 8), 1 dimer permeation amount was 43.4 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 0.46 g / m 2. Furthermore, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated. As a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 95.4% and 11%, respectively. The transmittance ratio was 0.12. Moreover, the logarithmic removal rate (LRV) of the virus was 4.3 or more.

比較例７Comparative Example 7

中空糸膜（ＰＳｆ−１）を中空糸膜（ＰＳｆ−５）に変えた以外、実施例３５と同様の方法で透過量、透過率、透過率比およびウイルス対数除去率を算出した。その結果（表８）、１量体透過量が３３７ｇ／ｍ２、２量体透過量が２９．２ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９５．３％および９３．９％であり、透過率比は０．９９であった。また、ウイルスの対数除去率（ＬＲＶ）は、２．３であった。
Except for changing the hollow fiber membrane (PSf-1) to the hollow fiber membrane (PSf-5), the amount of permeation, the transmittance, the transmittance ratio, and the virus log removal rate were calculated in the same manner as in Example 35. The results (Table 8), 1 dimer permeation amount was 337 g / m 2, 2 dimer permeation amount was 29.2 g / m 2. Furthermore, as a result of calculating the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 95.3% and 93, respectively. The transmittance ratio was 0.99. Moreover, the logarithmic removal rate (LRV) of the virus was 2.3.

＜抗ＳＣＦ抗体の製造例＞で作製した抗ＳＣＦ抗体発現クローンの培養液を緩衝液で平衡化したＰｒｏｔｅｉｎ Ａ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ−４Ｂ（ファルマシア社製）に流して抗体を結合させた後、緩衝液でカラムを洗浄した。その後、０．２Ｍ Ｇｌｙｃｉｎｅ−ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ３．０）をカラムに流して抗ＳＣＦ抗体の溶出を行った。その結果、抗ＳＣＦ抗体（凝集体を含む）としての純度が、９９．５％以上、回収率が９６％であった。しかし、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体以上の凝集体組成比が、９１．０％および９％であり、２量体以上の凝集体が混在していた。
次に、実施例４と同じ濾過条件で抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体以上の凝集体の膜分離精製を行った。その結果、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体以上の凝集体組成比が９８．６％および１．４％となっており、２量体以上の凝集体の組成比が低下していた。また、１量体透過率が８３．７％と高い値を示した。以上の結果より、アフィニティクロマトグラフィー精製工程後に膜分離精製を行えば、高純度の抗ＳＣＦ抗体１量体が得られることが分かった。The culture solution of the anti-SCF antibody-expressing clone prepared in <Example of production of anti-SCF antibody> was passed through Protein A-Sepharose CL-4B (Pharmacia) equilibrated with a buffer solution to bind the antibody, and then the buffer solution The column was washed with. Thereafter, 0.2 M Glycine-HCl buffer (pH 3.0) was passed through the column to elute the anti-SCF antibody. As a result, the purity as an anti-SCF antibody (including aggregates) was 99.5% or more, and the recovery rate was 96%. However, the aggregate composition ratio of the anti-SCF antibody monomer to the dimer or higher was 91.0% and 9%, and the aggregate of the dimer or higher was mixed.
Next, membrane separation purification of anti-SCF antibody monomer and aggregates of dimer or higher was performed under the same filtration conditions as in Example 4. As a result, the aggregate composition ratios of the anti-SCF antibody monomer and dimer or higher were 98.6% and 1.4%, and the composition ratio of the aggregate of dimer or higher was decreased. Further, the monomer transmittance was as high as 83.7%. From the above results, it was found that high-purity anti-SCF antibody monomer can be obtained by carrying out membrane separation purification after the affinity chromatography purification step.

＜抗ＳＣＦ抗体の製造例＞で作製した抗ＳＣＦ抗体発現クローンの培養液を緩衝液で平衡化したＰｒｏｔｅｉｎ Ａ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ−４Ｂ（ファルマシア社製）に流して抗体を結合させた後、緩衝液でカラムを洗浄した。その後、０．２Ｍ Ｇｌｙｃｉｎｅ−ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ３．０）をカラムに流して抗ＳＣＦ抗体の溶出を行った。その結果、抗ＳＣＦ抗体（凝集体を含む）としての純度が、９９．５％以上、回収率が９６％であった。しかし、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体以上の凝集体組成比が、９１．０％および９％であり、２量体以上の凝集体が混在していた。
次に、実施例５と同じ濾過条件で抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体以上の凝集体の膜分離精製を行った。その結果、抗ＳＣＦ抗体１量体と２量体以上の凝集体組成比が９９．３％および０．７３％となっており、２量体以上の凝集体の組成比が低下していた。また、１量体透過率が９５．６％と高い値を示した。以上の結果より、アフィニティクロマトグラフィー精製工程後に膜分離精製を行えば、高純度の抗ＳＣＦ抗体１量体が得られることが分かった。The culture solution of the anti-SCF antibody-expressing clone prepared in <Example of production of anti-SCF antibody> was passed through Protein A-Sepharose CL-4B (Pharmacia) equilibrated with a buffer solution to bind the antibody, and then the buffer solution The column was washed with. Thereafter, 0.2 M Glycine-HCl buffer (pH 3.0) was passed through the column to elute the anti-SCF antibody. As a result, the purity as an anti-SCF antibody (including aggregates) was 99.5% or more, and the recovery rate was 96%. However, the aggregate composition ratio of the anti-SCF antibody monomer to the dimer or higher was 91.0% and 9%, and the aggregate of the dimer or higher was mixed.
Next, membrane separation purification of anti-SCF antibody monomer and aggregates of dimer or more was performed under the same filtration conditions as in Example 5. As a result, the aggregate composition ratios of the anti-SCF antibody monomer and the dimer or higher were 99.3% and 0.73%, and the composition ratio of the aggregate of the dimer or higher was reduced. Further, the monomer transmittance was as high as 95.6%. From the above results, it was found that high-purity anti-SCF antibody monomer can be obtained by carrying out membrane separation purification after the affinity chromatography purification step.

実施例４の分離工程の後、濃縮の検討を行った。まず、免疫グロブリン凝集体分離工程における免疫グロブリン２量体分画性能評価の結果、透過液中の１量体透過量が１２６ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．８ｇ／ｍ２であった。さらに、免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８３．７％および１３．７％であり、透過率比は０．１６であった。これは、免疫グロブリンの２量体の膜分離ができており、さらに、高い透過率で免疫グロブリン１量体を回収していることを示す。
免疫グロブリン凝集体分離工程によって０．９ｇ／Ｌまで免疫グロブリン濃度が低下していたが、免疫グロブリン濃縮工程によって、濃縮倍率１０．４倍、免疫グロブリン濃度９．４ｇ／Ｌまで濃縮することが可能であった。また、免疫グロブリン濃縮工程で得られた濾液を免疫グロブリン分離工程での希釈剤として再利用することが可能であった。処理時間としては、免疫グロブリン凝集体除去工程と免疫グロブリン濃縮工程を連続で行っているため、５時間の免疫グロブリン凝集体分離工程終了後、さらに０．５時間程度で、免疫グロブリン濃縮工程も終了することができた。
このように、免疫グロブリン凝集体除去工程と免疫グロブリン濃縮工程を連続、同時進行で行い、濃縮工程での透過した液を免疫グロブリン元液の希釈液として再利用することにより、希釈液タンクサイズを小さくすることが可能であり、緩衝剤や添加剤のコストの低減することができる。また、透過液タンクサイズも小さくすること可能であり、条件によっては、透過液タンクの設置が不要となる。さらに、同時進行による大幅な時間の短縮が可能となり、生産性向上、人件費等の固定費を削減できる。After the separation step of Example 4, the concentration was examined. First, as a result of evaluation of immunoglobulin dimer fractionation performance in the immunoglobulin aggregate separation step, the monomer permeation amount in the permeate was 126 g / m 2 and the dimer permeation amount was 1.8 g / m 2. It was. Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 83.7% and 13. The transmittance ratio was 0.16. This indicates that immunoglobulin dimer membrane separation is possible, and that the immunoglobulin monomer is recovered with high permeability.
The immunoglobulin concentration was reduced to 0.9 g / L by the immunoglobulin aggregate separation step, but it can be concentrated to an immunoglobulin concentration of 9.4 g / L by the immunoglobulin concentration step. Met. Moreover, the filtrate obtained in the immunoglobulin concentration step could be reused as a diluent in the immunoglobulin separation step. As the processing time, since the immunoglobulin aggregate removal step and the immunoglobulin concentration step are performed continuously, the immunoglobulin concentration step is completed in about 0.5 hours after the completion of the immunoglobulin aggregate separation step for 5 hours. We were able to.
In this way, the immunoglobulin aggregate removal step and the immunoglobulin concentration step are carried out continuously and simultaneously, and the liquid permeated in the concentration step is reused as the dilution solution of the immunoglobulin original solution. It is possible to reduce the size, and the cost of the buffer and the additive can be reduced. Also, the permeate tank size can be reduced, and depending on the conditions, it is not necessary to install a permeate tank. Furthermore, it is possible to shorten the time significantly due to simultaneous progress, thereby improving productivity and reducing fixed costs such as labor costs.

参考例３Reference example 3

免疫グロブリンの分離工程と濃縮工程を連続しないこと以外は、実施例３９と同等方法で実験検討を実施した。その結果、免疫グロブリン凝集体除去工程における１量体透過量が１２６ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．８ｇ／ｍ２であった。さらに、免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８３．７％および１３．７％であり、透過率比は０．１６と、実施例３９と同等値を示した。しかし、免疫グロブリン凝集体分離工程で得られた透過液は大量であり、大型サイズの透過液タンクが必要となった。
また、免疫グロブリン凝集体除去工程によって０．９ｇ／Ｌまで免疫グロブリン濃度が低下していたが、免疫グロブリン濃縮工程によって、濃縮倍率１０．４倍、免疫グロブリン濃度９．４ｇ／Ｌまで濃縮でき、実施例３９と同等の結果が得られたが、免疫グロブリン濃縮工程で得られる濾液も大量であり、濾液用のタンクが別途必要となった。さらに、処理時間としては、免疫グロブリン凝集体除去工程と濃縮工程をそれぞれ行うことにより、１０時間以上かかった。
これらの結果は、これらの大型タンク設備の導入によるコストアップや設置エリアの拡大が必要となり、さらに生産性の低下を示している。An experimental study was conducted in the same manner as in Example 39, except that the immunoglobulin separation step and the concentration step were not continued. As a result, the monomer permeation amount in the immunoglobulin aggregate removal step was 126 g / m 2 , and the dimer permeation amount was 1.8 g / m 2 . Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 83.7% and 13. The transmittance ratio was 0.16, which was the same value as in Example 39. However, a large amount of permeate was obtained in the immunoglobulin aggregate separation step, and a large sized permeate tank was required.
In addition, the immunoglobulin concentration was reduced to 0.9 g / L by the immunoglobulin aggregate removing step, but the immunoglobulin concentration step could be concentrated to 10.4 times the concentration and the immunoglobulin concentration was 9.4 g / L. The same result as in Example 39 was obtained, but the filtrate obtained in the immunoglobulin concentration step was also a large amount, and a separate tank for the filtrate was required. Furthermore, as processing time, it took 10 hours or more by performing each of the immunoglobulin aggregate removal process and the concentration process.
These results indicate that it is necessary to increase the cost and expand the installation area by introducing these large-scale tank facilities, and further show a decrease in productivity.

中空糸膜（ＰＳｆ−１）の中空部分の断面積合計が０．０１ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体およびフィブリノーゲン分画性能評価性評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、１０ｇ／Ｌのウシ免疫グロブリンと１ｇ／Ｌのフィブリノーゲン（シグマ社製、タイプＩ−Ｓ、分子量３４万）を含有した溶液を免疫グロブリン元液タンク（４）に入れ、図３に示すクロスフロー濾過装置に接続した。その後、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜入り側圧力と出側圧力の平均が０．０２７ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進む分画性能評価用溶液の濃度が高くなるので、ウシ免疫グロブリン濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内のＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で５時間、クロスフロー濾過を行った後、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体、フィブリノーゲンの含量率をＧＰＣで測定した。その結果、１量体透過量が８８ｇ／ｍ２、２量体透過量が１．０ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、８０．６％および１０．４％であり、透過率比は０．１３であった。さらに、フィブリノーゲン透過率は、１．６％であり、フィブリノーゲン透過率と１量体透過率の比（フィブリノーゲン透過率／１量体透過率）は、０．０２と極めて低く、高分子量成分であるフィブリノーゲンが除去できていることを示している。The number of the hollow fiber membranes (PSf-1) is taken out so that the total cross-sectional area of the hollow portion is 0.01 m 2, and the bundle of yarns for evaluation of human immunoglobulin monomer / dimer and fibrinogen fraction performance evaluation Was made. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, a solution containing 10 g / L of bovine immunoglobulin and 1 g / L of fibrinogen (manufactured by Sigma, type I-S, molecular weight 340,000) is placed in an immunoglobulin source solution tank (4) and shown in FIG. Connected to a cross flow filtration device. Thereafter, the liquid feed pump 2 (3) is rotated so that the wire bundle in the hollow fiber membrane is 10 cm / sec, and the average of the pressure on the hollow fiber membrane side and the pressure on the outlet side is 0.027 MPa, and the adjustment valve 1 (7) Adjusted. Since the concentration of the fractionation performance evaluation solution that undergoes crossflow filtration increases, the original immunoglobulin solution using the PBS aqueous solution in the diluent tank (1) as a diluent so that the bovine immunoglobulin concentration is always 10 g / L. Add into tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. for 5 hours, the content ratios of human immunoglobulin monomer, dimer and fibrinogen were measured by GPC. As a result, the monomer permeation amount was 88 g / m 2 and the dimer permeation amount was 1.0 g / m 2 . Furthermore, as a result of calculating the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer, the monomer transmission rate and the dimer transmission rate were 80.6% and 10%, respectively. The transmittance ratio was 0.13. Furthermore, the fibrinogen transmittance is 1.6%, and the ratio of the fibrinogen transmittance to the monomer transmittance (fibrinogen transmittance / monomer transmittance) is as low as 0.02, which is a high molecular weight component. This shows that fibrinogen has been removed.

中空糸膜（ＰＳｆ−２）の中空部分の断面積合計が０．０２ｍ２となるように本数を取り出し、ヒト免疫グロブリン１量体／２量体およびフィブリノーゲン分画性能評価性評価用の糸束を作製した。その糸束を図３に示すようなクロスフロー濾過装置に接続する。次に、１０ｇ／Ｌのウシ免疫グロブリンと１ｇ／Ｌのフィブリノーゲン（シグマ社製、タイプＩ−Ｓ、分子量３４万）５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含有した溶液１００ｍＬを免疫グロブリン元液タンク（４）に入れ、図３に示すクロスフロー濾過装置に接続した。その後、中空糸膜中での線束が１０ｃｍ／秒、中空糸膜出側圧力が０．０１ＭＰａとなるよう送液ポンプ２（３）を回転させ、調整バルブ１（７）で調整した。クロスフロー濾過が進むヒト免疫グロブリン溶液の濃度が高くなるので、濃度が常に１０ｇ／Ｌになるように希釈液用タンク（１）内の５０ｇ／Ｌのリシン塩酸塩を含有するＰＢＳ水溶液を希釈液として免疫グロブリン元液タンク（４）内に添加する。２５℃で、溶液がなくなるまでクロスフロー濾過を行った後、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体、フィブリノーゲンの含量率をＧＰＣで測定した。その結果、１量体透過量が４１．６ｇ／ｍ２、２量体透過量が０．４０ｇ／ｍ２であった。さらに、ヒト免疫グロブリン１量体と２量体の透過率と透過率比（分画性能）を算出した結果、１量体透過率および２量体透過率が、それぞれ、９１．５％および１１．４％であり、透過率比は０．１１であった。さらに、フィブリノーゲン透過率は、２．７５％であり、フィブリノーゲン透過率と１量体透過率の比（フィブリノーゲン透過率／１量体透過率）は、０．０３と極めて低く、高分子量成分であるフィブリノーゲンが除去できていることを示している。The number of the hollow fiber membranes (PSf-2) is taken out so that the total cross-sectional area of the hollow part is 0.02 m 2, and the bundle of human immunoglobulin monomer / dimer and fibrinogen fraction performance evaluation evaluation Was made. The yarn bundle is connected to a cross flow filtration device as shown in FIG. Next, 100 mL of a solution containing 10 g / L bovine immunoglobulin and 1 g / L fibrinogen (Sigma, type IS, molecular weight 340,000) 50 g / L lysine hydrochloride was added to an immunoglobulin original solution tank (4 ) And connected to the crossflow filtration apparatus shown in FIG. Thereafter, the liquid feed pump 2 (3) was rotated so that the wire bundle in the hollow fiber membrane was 10 cm / second and the outlet pressure of the hollow fiber membrane was 0.01 MPa, and the adjustment valve 1 (7) was used for adjustment. Since the concentration of the human immunoglobulin solution that undergoes cross-flow filtration increases, the PBS aqueous solution containing 50 g / L lysine hydrochloride in the diluent tank (1) is diluted so that the concentration is always 10 g / L. To the immunoglobulin original solution tank (4). After cross-flow filtration at 25 ° C. until the solution disappeared, the content ratios of human immunoglobulin monomer, dimer and fibrinogen were measured by GPC. As a result, the monomer permeation amount was 41.6 g / m 2 and the dimer permeation amount was 0.40 g / m 2 . Further, the transmittance and transmittance ratio (fractionation performance) of human immunoglobulin monomer and dimer were calculated, and as a result, the monomer transmittance and the dimer transmittance were 91.5% and 11 respectively. The transmittance ratio was 0.11. Furthermore, the fibrinogen transmittance is 2.75%, and the ratio of the fibrinogen transmittance to the monomer transmittance (fibrinogen transmittance / monomer transmittance) is 0.03, which is a very low molecular weight component. This shows that fibrinogen has been removed.

産業上の利用分野Industrial application fields

本発明に係る分離方法は、免疫グロブリンなどのバイオ医薬の分離・精製分野で好適に利用することができる。 The separation method according to the present invention can be suitably used in the field of separation and purification of biopharmaceuticals such as immunoglobulins.

Claims (43)

分画分子量が１０万以上５０万未満である限外濾過膜を用いて、少なくとも免疫グロブリンの１量体とその凝集体を含む免疫グロブリン溶液であって、免疫グロブリン濃度が１〜１５０ｇ／Ｌである溶液を、免疫グロブリンの濃度を１００としたとき、クロスフロー濾過中の免疫グロブリン濃度の変化を５０〜２００に維持しながら、クロスフロー濾過することにより、免疫グロブリンの１量体を分離する方法。  Using an ultrafiltration membrane having a molecular weight cut off of 100,000 or more and less than 500,000, an immunoglobulin solution containing at least an immunoglobulin monomer and an aggregate thereof, wherein the immunoglobulin concentration is 1 to 150 g / L A method for separating immunoglobulin monomers by crossflow filtration while maintaining a change in immunoglobulin concentration during crossflow filtration at 50 to 200, assuming that the immunoglobulin concentration is 100. . 分画分子量が１０万以上５０万未満である限外濾過膜を用いて、免疫グロブリン濃度が１〜１５０ｇ／Ｌである溶液を、免疫グロブリンの濃度を１００としたとき、クロスフロー濾過中の免疫グロブリン濃度の変化を５０〜２００に維持しながら、クロスフロー濾過することにより、免疫グロブリンの１量体と免疫グロブリンの凝集体を分離する方法。  Using an ultrafiltration membrane with a molecular weight cut off of 100,000 or more and less than 500,000, when the immunoglobulin concentration is 1 to 150 g / L and the immunoglobulin concentration is 100, immunity during crossflow filtration A method of separating an immunoglobulin monomer and an immunoglobulin aggregate by cross-flow filtration while maintaining a change in globulin concentration at 50 to 200. 該凝集体は、少なくとも免疫グロブリンの２量体を含むことを特徴とする請求項１または２に記載の分離方法。  The separation method according to claim 1 or 2, wherein the aggregate contains at least an immunoglobulin dimer. 該免疫グロブリン濃度が、１〜１００ｇ／Ｌであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の分離方法。  The separation method according to any one of claims 1 to 3, wherein the immunoglobulin concentration is 1 to 100 g / L. 該免疫グロブリン濃度が、５〜１００ｇ／Ｌであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の分離方法。  The separation method according to claim 1, wherein the immunoglobulin concentration is 5 to 100 g / L. 該免疫グロブリン濃度の変化を８０〜１２０に維持しながら、クロスフロー濾過を行うことを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の分離方法。  The separation method according to any one of claims 1 to 5, wherein the cross flow filtration is performed while maintaining the change in the immunoglobulin concentration at 80 to 120. 免疫グロブリン１量体の５０％以上が、請求項１〜６のいずれかに記載の分離方法によって分離されることを特徴とする分離方法。  A separation method, wherein 50% or more of the immunoglobulin monomer is separated by the separation method according to claim 1. 該免疫グロブリン溶液が、更に分子量３０万以上１００万未満の蛋白質、糖鎖、ＲＮＡ、及び、ＤＮＡから選ばれる少なくとも１つの生体成分を含有することを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の分離方法。  The immunoglobulin solution further contains at least one biological component selected from a protein, sugar chain, RNA, and DNA having a molecular weight of 300,000 or more and less than 1,000,000. The separation method described. 該免疫グロブリン溶液が、更に分子量３０万以上１００万未満の蛋白質から選ばれる少なくとも１つの生体成分を含有することを特徴とする請求項８に記載の分離方法。  The separation method according to claim 8, wherein the immunoglobulin solution further contains at least one biological component selected from proteins having a molecular weight of 300,000 or more and less than 1,000,000. 該蛋白質が、免疫グロブリン凝集体、フィブリノーゲン、免疫グロブリンとプロテインＡからなる複合凝集体からなる群から選ばれる少なくとも１つであることを特徴とする請求項９に記載の分離方法。  The separation method according to claim 9, wherein the protein is at least one selected from the group consisting of immunoglobulin aggregates, fibrinogen, and composite aggregates composed of immunoglobulin and protein A. 該免疫グロブリン溶液が、更にウイルスを含有することを特徴とする請求項１〜１０のいずれかに記載の分離方法。  The separation method according to claim 1, wherein the immunoglobulin solution further contains a virus. 該ウイルスが、パルボウイルスであることを特徴とする請求項１１に記載の分離方法。  The method according to claim 11, wherein the virus is a parvovirus. 該免疫グロブリンが、モノクローナル抗体であることを特徴とする請求項１〜１２のいずれかに記載の分離方法。  The separation method according to claim 1, wherein the immunoglobulin is a monoclonal antibody. 該限外濾過膜が、ポリスルホン系高分子、芳香族エーテル系高分子、（メタ）アクリル系高分子、（メタ）アクリロニトリル系高分子、フッ素系高分子、オレフィン系高分子、ビニルアルコール系高分子、セルロース系高分子からなる群から選ばれる１種以上の高分子からなることを特徴とする請求項１〜１３のいずれかに記載の分離方法。  The ultrafiltration membrane is a polysulfone polymer, aromatic ether polymer, (meth) acrylic polymer, (meth) acrylonitrile polymer, fluorine polymer, olefin polymer, vinyl alcohol polymer. The separation method according to claim 1, comprising at least one polymer selected from the group consisting of cellulose polymers. 該高分子が、ポリスルホン系高分子であることを特徴とする請求項１４に記載の分離方法。  The separation method according to claim 14, wherein the polymer is a polysulfone polymer. 該ポリスルホン系高分子が下記式（１）〜（３）で表されるポリスルホン系高分子の少なくとも１種又は２種以上の混合物であることを特徴とする請求項１５に記載の分離方法。
16. The separation method according to claim 15, wherein the polysulfone polymer is at least one kind of polysulfone polymer represented by the following formulas (1) to (3) or a mixture of two or more kinds.
該ポリスルホン系高分子が、ポリビニルピロリドンで親水化されたポリスルホン系高分子であることを特徴とする請求項１５または１６に記載の分離方法。  The separation method according to claim 15 or 16, wherein the polysulfone polymer is a polysulfone polymer hydrophilized with polyvinylpyrrolidone. 該高分子が、芳香族エーテル系高分子であることを特徴とする請求項１４に記載の分離方法。  The separation method according to claim 14, wherein the polymer is an aromatic ether polymer. 該芳香族エーテル系高分子が、下記式（４）で表される芳香族エーテル系高分子の少なくとも１種又は２種以上であり、ポリスチレンと親水性高分子からなるブロック共重合体によって親水化された芳香族エーテル系高分子であることを特徴とする請求項１８に記載の分離方法。
（Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6は水素、炭素数１以上６以下を含む有機官能基、または、酸素、窒素または珪素を含有する炭素数６以下の非プロトン性有機官能基であり、それぞれ同一であっても、異なっても構わない。構造式中のｑは繰り返し単位数である。異なる繰り返し単位を２成分以上含む共重合体でも構わない。）The aromatic ether polymer is at least one or two or more of the aromatic ether polymers represented by the following formula (4), and is made hydrophilic by a block copolymer made of polystyrene and a hydrophilic polymer. The separation method according to claim 18, wherein the separation method is an aromatic ether polymer.
(R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 and R 6 are hydrogen, an organic functional group containing 1 to 6 carbon atoms, or an aprotic having 6 or less carbon atoms containing oxygen, nitrogen or silicon. The organic functional groups may be the same or different, and q in the structural formula represents the number of repeating units, and may be a copolymer containing two or more different repeating units.) 該親水性高分子が、ポリエチレングリコール系高分子および／またはポリエチレングリコール系高分子由来のセグメントを含有する高分子であることを特徴とする請求項１９に記載の分離方法。  The separation method according to claim 19, wherein the hydrophilic polymer is a polymer containing a polyethylene glycol polymer and / or a segment derived from a polyethylene glycol polymer. 該免疫グロブリン溶液が、更に界面活性剤を含有することを特徴とする請求項１〜２０に記載の分離方法。  The separation method according to claim 1, wherein the immunoglobulin solution further contains a surfactant. 該界面活性剤が、両イオン界面活性剤であること特徴とする請求項２１に記載の分離方法。  The separation method according to claim 21, wherein the surfactant is a zwitterionic surfactant. 該両イオン界面活性剤が、リシン、アラニン、システイン、グリシン、セリン、プロリン、アルギニンおよびこれらの誘導体からなる群から選ばれることを特徴とする請求項２２に記載の分離方法。  The separation method according to claim 22, wherein the zwitterionic surfactant is selected from the group consisting of lysine, alanine, cysteine, glycine, serine, proline, arginine, and derivatives thereof. 該両イオン界面活性剤が、アルギニンおよび／またはアルギニンの誘導体であることを特徴とする請求項２３に記載の分離方法。  The separation method according to claim 23, wherein the zwitterionic surfactant is arginine and / or a derivative of arginine. 該両イオン界面活性剤が、リシンおよび／またはリシンの誘導体であることを特徴とする請求項２３に記載の分離方法。  The separation method according to claim 23, wherein the zwitterionic surfactant is lysine and / or a derivative of lysine. 該界面活性剤が、非イオン界面活性剤であること特徴とする請求項２１に記載の分離方法。  The separation method according to claim 21, wherein the surfactant is a nonionic surfactant. 該非イオン界面活性剤が、ポリエチレングリコールおよび／またはポリエチレングリコール誘導体であることを特徴とする請求項２６に記載の分離方法。  27. The separation method according to claim 26, wherein the nonionic surfactant is polyethylene glycol and / or a polyethylene glycol derivative. 該ポリエチレングリコールおよび／またはポリエチレングリコール誘導体の数平均分子量が、５０〜３００００Ｄａであることを特徴とする請求項２７に記載の分離方法。  28. The separation method according to claim 27, wherein the polyethylene glycol and / or the polyethylene glycol derivative has a number average molecular weight of 50 to 30000 Da. 請求項１〜２８のいずれかに記載の分離方法であって、濾過開始から設定時間まで、免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液に再循環させることを特徴とする分離方法。  29. The separation method according to any one of claims 1 to 28, wherein the immunoglobulin permeate is recirculated to the immunoglobulin base solution from the start of filtration until a set time. 該免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液に再循環させる設定時間を、濾過開始から免疫グロブリン透過液に含まれる免疫グロブリン２量体の割合が１％以下になった時点に設定することを特徴とする請求項２９に記載の分離方法。  The set time for recirculating the immunoglobulin permeate to the original immunoglobulin solution is set to the time when the ratio of the immunoglobulin dimer contained in the immunoglobulin permeate becomes 1% or less from the start of filtration. The separation method according to claim 29. 該免疫グロブリン透過液を免疫グロブリン元液に再循環させる設定時間を、濾過開始から免疫グロブリン１量体と免疫グロブリン２量体の透過率比が０．１以下に到達した時点に設定することを特徴とする請求項２９に記載の分離方法。  The set time for recirculating the immunoglobulin permeate to the original immunoglobulin solution is set to the time when the permeability ratio of immunoglobulin monomer to immunoglobulin dimer reaches 0.1 or less from the start of filtration. 30. A separation method according to claim 29, characterized in that: 請求項１〜３１のいずれかに記載の分離方法が、該免疫グロブリン溶液のアフィニティクロマトグラフィー精製工程の後に用いられることを特徴とする分離方法。  The separation method according to any one of claims 1 to 31, wherein the separation method is used after an affinity chromatography purification step of the immunoglobulin solution. 該アフィニティクロマトグラフィーが、プロテインＡおよび／またはプロテインＡ誘導体を吸着剤とするアフィニティクロマトグラフィーであることを特徴とする請求項３２に記載の分離方法。  The separation method according to claim 32, wherein the affinity chromatography is affinity chromatography using protein A and / or a protein A derivative as an adsorbent. 該限外濾過膜が、中空糸であることを特徴とする請求項１〜３３のいずれかに記載の分離方法。  The separation method according to any one of claims 1 to 33, wherein the ultrafiltration membrane is a hollow fiber. 下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上の手段を含む装置を用いて行う請求項１〜３４のいずれかに記載の分離方法。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールできる手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段The separation method according to any one of claims 1 to 34, which is carried out using an apparatus comprising one or more means selected from the following (a) to (d).
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane Means to control 請求項１〜３５のいずれかに記載の分離方法に使用するモジュールであって、該モジュールはケーシング内に平膜もしくは中空糸膜を収容したものであり、少なくとも、免疫グロブリン溶液をケーシング内に注ぎ込む液体流入口を一つ以上、分離された液体を導出するための液体流出口を一つ以上供えた構造を有するモジュール。36. A module used in the separation method according to claim 1 , wherein the module contains a flat membrane or a hollow fiber membrane in a casing, and at least an immunoglobulin solution is poured into the casing. A module having a structure provided with one or more liquid inlets and one or more liquid outlets for leading the separated liquid . 請求項１〜３５のいずれかに記載の分離方法に使用するモジュールおよび下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上の手段を含む装置であって、該モジュールはケーシング内に平膜もしくは中空糸膜を収容したものであり、少なくとも、免疫グロブリン溶液をケーシング内に注ぎ込む液体流入口を一つ以上、分離された液体を導出するための液体流出口を一つ以上供えた構造を有するモジュールである、装置。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールできる手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段36. An apparatus comprising one or more means of the module used in the separation method according to claim 1 and the following means (a) to (d) , wherein the module is a flat membrane in a casing: Alternatively, it contains a hollow fiber membrane, and has at least one liquid inlet for pouring the immunoglobulin solution into the casing and one or more liquid outlets for extracting the separated liquid. A device that is a module .
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane Means to control 請求項１〜３５のいずれかに記載の分離方法を行う分離工程と、分離工程で得られた免疫グロブリン透過液を濃縮用限外濾過膜で濃縮する濃縮工程が連続して行われることを特徴とする分離濃縮方法。  A separation step in which the separation method according to any one of claims 1 to 35 is performed and a concentration step in which the immunoglobulin permeate obtained in the separation step is concentrated with an ultrafiltration membrane for concentration are continuously performed. Separation and concentration method. 該濃縮用濾過限外膜の分画分子量が、１０００以上１０万未満であることを特徴とする請求項３８に記載の分離濃縮方法。  39. The separation and concentration method according to claim 38, wherein a fractional molecular weight of the concentration filter ultrafiltration membrane is 1,000 or more and less than 100,000. 請求項１〜３および５〜３５のいずれかに記載の分離方法を行う分離工程で透過する免疫グロブリン透過液の濃度が０．１〜１４９ｇ／Ｌであり、濃縮工程のクロスフロー濾過条件が、線速０．０１〜１００ｃｍ／秒、圧力０．０１〜０．５ＭＰａであることを特徴とする請求項３８または３９に記載の分離濃縮方法。The concentration of the immunoglobulin permeate that passes in the separation step for separating method according to any one of claims 1 to 3 and 5 to 3 5 are 0.1~149g / L, cross-flow filtration conditions concentration step The separation and concentration method according to claim 38 or 39, wherein the linear velocity is 0.01 to 100 cm / sec and the pressure is 0.01 to 0.5 MPa. 請求項１〜３５のいずれかに記載の分離方法を行う分離工程で透過する免疫グロブリン透過液の濃度が０．１〜９９ｇ／Ｌであり、濃縮工程のクロスフロー濾過条件が、線速０．０１〜１００ｃｍ／秒、圧力０．０１〜０．５ＭＰａであることを特徴とする請求項３８または３９に記載の分離濃縮方法。The concentration of the immunoglobulin permeate that passes in the separation step for separating method according to any one of claims 1 to 3 5 are 0.1~99g / L, cross-flow filtration conditions concentration step, the linear velocity 0 The separation and concentration method according to claim 38 or 39, wherein the pressure is 0.01 to 100 cm / sec and the pressure is 0.01 to 0.5 MPa. 限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上と、濃縮用限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（ホ）〜（チ）からなる手段の１つ以上を含み、それぞれのモジュールはケーシング内に平膜もしくは中空糸膜を収容したものであり、少なくとも、免疫グロブリン溶液をケーシング内に注ぎ込む液体流入口を一つ以上、分離された液体を導出するための液体流出口を一つ以上供えた構造を有するモジュールである、請求項３８〜４１のいずれかに記載の分離濃縮方法。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールできる手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段
（ホ）濃縮前の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（へ）濃縮後の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（ト）免疫グロブリン透過液の線速をコントロールできる手段
（チ）濃縮用限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段One or more of the module comprising the ultrafiltration membrane and the means comprising the following (a) to (d), and the module comprising the ultrafiltration membrane for concentration and one of the means comprising the following (e) to (h) one or more look-containing, each module is obtained by housing the flat membrane or hollow fiber membrane in the casing, at least, derive one or more liquid inlets pouring immunoglobulin solution in the casing, separated liquid 42. The separation and concentration method according to any one of claims 38 to 41 , which is a module having a structure in which one or more liquid outlets are provided .
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane (E) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate before concentration (f) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate after concentration (g) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin permeate (H) Means capable of controlling the filtration pressure of the ultrafiltration membrane for concentration 請求項３８〜４１のいずれかに記載の分離濃縮方法を行うための、限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（イ）〜（ニ）からなる手段の１つ以上と、濃縮用限外濾過膜を用いたモジュールおよび下記（ホ）〜（チ）からなる手段の１つ以上を含む装置であって、それぞれのモジュールはケーシング内に平膜もしくは中空糸膜を収容したものであり、少なくとも、免疫グロブリン溶液をケーシング内に注ぎ込む液体流入口を一つ以上、分離された液体を導出するための液体流出口を一つ以上供えた構造を有するモジュールである、装置。
（イ）免疫グロブリン元液の濃度をモニタリングできる手段
（ロ）免疫グロブリン元液の濃度をコントロールできる手段
（ハ）免疫グロブリン元液の線速をコントロールできる手段
（ニ）限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段
（ホ）濃縮前の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（へ）濃縮後の免疫グロブリン透過液の濃度をモニタリングできる手段
（ト）免疫グロブリン透過液の線速をコントロールできる手段
（チ）濃縮用限外濾過膜の濾過圧力をコントロールできる手段A module using an ultrafiltration membrane for performing the separation and concentration method according to any one of claims 38 to 41 and one or more means comprising the following (a) to (d), and ultrafiltration for concentration: A device using a membrane and one or more of the following means (e) to (h) , each module containing a flat membrane or a hollow fiber membrane in a casing, at least: An apparatus which is a module having a structure in which one or more liquid inlets for pouring an immunoglobulin solution into a casing and one or more liquid outlets for extracting separated liquid are provided .
(B) Means capable of monitoring the concentration of the original immunoglobulin solution (b) Means capable of controlling the concentration of the immunoglobulin original solution (c) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin original solution (d) Filtration pressure of the ultrafiltration membrane (E) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate before concentration (f) Means capable of monitoring the concentration of the immunoglobulin permeate after concentration (g) Means capable of controlling the linear velocity of the immunoglobulin permeate (H) Means capable of controlling the filtration pressure of the ultrafiltration membrane for concentration
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