JP5055617B2 - Dispensing device - Google Patents
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Description
この発明は内部に流路を形成して外部から注入した液体の反応等の処理を行い、反応後
の液体を外部に抽出することができるようにした流路形成部を用いて分注を行う分注装置に関する。
In the present invention, a flow path is formed inside, a reaction such as reaction of liquid injected from the outside is performed, and dispensing is performed using a flow path forming section that can extract the liquid after reaction to the outside. It relates to a dispensing device.
現在は医学・農学・理学・薬学等の広い分野で、例えば抗体、抗原等の免疫物質、ＤＮＡやＲＮＡ等の遺伝子物質、最近、その他の医療薬品等の有用物質について、目的物質の分離、抽出または回収を行うために、それに関連する反応、分注、単離、濃縮、攪拌、清澄、懸濁、希釈等の処理または作業を行うことが多くなっている。 Currently, in a wide range of fields such as medicine, agriculture, science and pharmacy, for example, separation and extraction of target substances for immune substances such as antibodies and antigens, genetic substances such as DNA and RNA, and recently useful substances such as other medical drugs Or, in order to carry out recovery, processes or operations such as reaction, dispensing, isolation, concentration, stirring, clarification, suspension, dilution and the like are frequently performed.
このような処理は微少な量の液体を用いることが好ましいため、マイクロメータ単位の流路及び処理室をチップ上に形成し、その流路等に極微少な量の所定の液体を注入し、例えば１μリットル未満或いは数μリットル程度の処理室内で反応等の処理を行い、その液体について更なる反応を起こさせるため、或いは反応生成物の分析等を行うために外部に注出することが行われている。 Since it is preferable to use a very small amount of liquid for such processing, a micrometer unit flow path and a processing chamber are formed on the chip, and a very small amount of a predetermined liquid is injected into the flow path, for example. Processing such as reaction is performed in a processing chamber of less than 1 μl or several μl, and the liquid is poured out to cause further reaction or to analyze the reaction product. ing.
このような微少な量の液体を取り扱うため、例えば図１０（ａ）に示すようなマイクロ流路６１の溝を表面に形成したＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン）等からなる流路基板６２を用い、これを基盤６３上に貼ると共に、表面をガラスや樹脂等からなるカバー６４を貼ってマイクロ流路６１の上方を閉じる。
In order to handle such a small amount of liquid, for example, a
このようにして形成されたマイクロ流路６１に液体を注入するため、カバー６４に対してマイクロ流路６１に通じる図中３個の注入孔６５を備え、この注入孔６５にノズル等を当接させて、外部から反応に必要な所定の液体を圧入或いは真空引き等により注入し、各々バッファ部６６を介して反応室６７内に各液体を供給する。反応室６７で反応した液体、或いはここで生成された蛋白質等の物質は、外部の検査装置等で検査し或いは更に反応処理を行うため、反応室６７に通じる排出流路６８の端部に設けた外部に通じる注出孔６９から、ここに当接させたノズル等を介して外部に注出する。ここで抽出する前記のような蛋白質等を含む液体は単なる液体ということはできないが、以降説明の都合上これらの各種物質を含む液体も「液体」と称する。
In order to inject the liquid into the
上記のような作業を行うため、例えば図１０（ｂ）に示すような分注装置７１を用いる。なお、同図の装置は、図１０（ａ）のようなマイクロチップ７０を利用して所望の反応等を行わせる装置の一例の概要を示すものである。図に示す分注装置７１においては、上記のようなマイクロチップ７０を反転させて、流路を備えた載置台７２上に固定すると共にし、この載置台７２を基台７３に固定している。基台７３には注入部７４と排出部７５とを備えるとともに、注入部７４からの液体をマイクロチップ７０の注入孔６５に供給可能とし、マイクロチップ７０の注出孔６９から排出部７５に供給可能としている。
In order to perform the above operations, for example, a
また、注入部７４に設けた注入口７６にはピペット７７等により所定の量の液体を滴下可能とし、また排出部７５には排出管７７を介してポンプ７８を接続し、注入部７４に注入した液体を、マイクロチップ７０内に吸引し、更にマイクロチップ７０内で処理が終わった液体を吸引し、廃液タンク７９に排出している。なお、基台７３を温度調節装置８０上に載置し、所定の温度条件で反応できるようにすることもある。なお、マイクロチップを用いて所望の反応等を行わせる装置としては、多数の反応を効率的に行わせるため、１つのチップ上に例えば図１０（ａ）のようなマイクロ流路を多数形成配置することも行われており、このような技術は例えば特開２００６−１２６０１１号公報等に開示されている。
In addition, a predetermined amount of liquid can be dripped into the
従来は上記のようなマイクロチップを用いて前記のような所定の作業を行うに際しては、作業者がピペット７７などで一つ一つ手作業により液体の定量・分注操作を行わなければならなかった。米国国立労働衛生研究所のレポートでは、こうした作業は一人あたり平均６０００回／日行っており、実際に行っている人たちにとって重労働となっている。その対策としてこれらの作業を自動的に行うことができる自動分注装置も開発されている。
Conventionally, when performing the above-described predetermined work using the microchip as described above, the operator must manually perform the liquid quantification / dispensing operation one by one with the
前記のような自動分注装置としては例えば特開２００１−１３１５２号公報等に開示されており、この装置においては多数のマイクロウェルを有するチッププレートに対して、各マイクロウェルに対向して上方に配置した多数のノズルから、所定の液体を同時に供給することができるようにしている。通常用いられている自動分注装置はこのように、チッププレートの多数のマイクロウェルに、或いは前記図１０（ａ）に示すようなマイクロチップの注入孔に、その上方からノズルにより液体を供給することとなる。 Such an automatic dispensing apparatus is disclosed in, for example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2001-13152. In this apparatus, a chip plate having a large number of microwells is disposed above each microwell. A predetermined liquid can be simultaneously supplied from a number of arranged nozzles. In this way, the automatic dispensing device that is usually used supplies liquid from above to a large number of microwells of the chip plate or to the injection holes of the microchip as shown in FIG. 10 (a). It will be.
また、マイクロチップについては図１０（ａ）のような矩形のもののほか、例えば特開２００６−１２６０１０号公報、及び特開２００５−５２３７２８号公報に開示されているような円板状のものに放射状にマイクロ流路を多数形成することも提案されている。
従来の自動分注装置においてマイクロ流路を形成したマイクロチップの液体注入孔に対して液体を供給する際は、前記特許文献２に記載されているような装置を用いて、マイクロチップの上方からノズルを降下し、分注を行うこととなる。更に、反応が終了した液体を注出孔から外部に注出する際には、同様に注出孔の上方から排出管を降下させ、注出孔に密着させ、ポンプにより吸引し、その作業の終了後に排出管を上昇させることとなる。
When supplying a liquid to a liquid injection hole of a microchip in which a microchannel is formed in a conventional automatic dispensing device, an apparatus such as that described in
そのため、従来の分注装置ではマイクロチップを載置する台から上方にノズルや排出管の移動スペースを必要とし、更にその移動を行わせるための駆動装置を配置することとなるため、装置全体の高さが高くならざるを得ず、装置が大がかりなものとなっていた。特にマイクロチップの反応室で反応させた後の液体を、他のマイクロ流路を備えたマイクロチップに分注する際には、片方のマイクロチップの注出孔から他方のマイクロチップの注入孔に液体を分注しながら移動する複雑な機構が必要となり、この部分の機構が大がかりなものとならざるを得ない。 For this reason, the conventional dispensing device requires a moving space for the nozzle and the discharge pipe above the stage on which the microchip is placed, and a driving device for moving the nozzle is disposed. The height was inevitably high, and the equipment was large. In particular, when the liquid that has been reacted in the reaction chamber of the microchip is dispensed into a microchip equipped with another microchannel, the liquid is discharged from the discharge hole of one microchip to the injection hole of the other microchip. A complicated mechanism that moves while dispensing liquid is required, and this portion of the mechanism is inevitably large.
このことは前記のようなマイクロメータ単位の大きさの流路を形成したマイクロチップとしての流路形成部材を用いるときのほか、例えば断面の高さや幅が１ｍｍを超えるような比較的大きな流路を形成した流路形成部材での分注に際しても同様の問題を生じる。 This is not only when using a flow path forming member as a microchip in which a flow path having a size of a micrometer unit as described above, but for example, a relatively large flow path whose cross-sectional height or width exceeds 1 mm. The same problem arises when dispensing with the flow path forming member in which is formed.
したがって本発明は、従来手作業で行っていた分注作業を自動化し、且つ分注装置の高さを低いものとし、全体として小型化することができ、特に機構が大型化する原因となる、流路形成部材内で処理した液体をキャピラリ内に、更には他の流路形成部材内の流路内に分注する機構について、その部分の高さを低くすることにより、分注装置全体を小型化することができる流路形成部材、及びその流路形成部材を用いた分注装置を提供することを主たる目的としている。 Therefore, the present invention automates the dispensing work that has been performed manually, and makes the dispensing device low in height, and can be downsized as a whole, particularly causing the mechanism to be upsized. By reducing the height of the part of the mechanism for dispensing the liquid processed in the flow path forming member into the capillary and further into the flow path in the other flow path forming member, the entire dispensing apparatus is The main object is to provide a flow path forming member that can be reduced in size and a dispensing device that uses the flow path forming member.
本発明に係る流路形成部材は、上記課題を解決するため、注入部と注出部を備えた液体の流路を内部に形成してなる平板状の流路形成部材において、内部の流路に連通する前記注入部または注出部の少なくともいずれかを前記流路形成部材の側面に開口し、前記側面に開口する注入部の注入開口部或いは注出部の注出開口部には該開口部を密封する密封部材を設け、前記開口から前記開口部の密封部材の間に、密封部材を貫通して流路内の液体吸引用のキャピラリを案内するガイド部材を設けた流路形成部材を備え、前記流路形成部材の前記開口とキャピラリ把持装置で把持したキャピラリの端部とが対向し、キャピラリの軸線が密封部材表面と垂直になるように、流路形成部材とキャピラリ把持装置の少なくとも片方を移動可能に設け、前記流路形成部材とキャピラリの少なくとも片方を相対的に移動することにより、キャピラリの端部を、前記ガイド部材で案内しつつ、前記密封部材を貫通して内部の流路内に挿入し、前記流路内の液体を所定量キャピラリ内に吸引した後、前記移動によりキャピラリを外部に引き抜く操作を繰り返すことにより、前記流路内の液体を分注する分注機構を備えたことを特徴とする。 In order to solve the above-described problems, a flow path forming member according to the present invention is a flat flow path forming member formed with a liquid flow path provided with an injecting portion and a dispensing portion. At least one of the injection portion and the extraction portion communicating with the flow passage is opened on a side surface of the flow path forming member, and the injection opening portion of the injection portion opening on the side surface or the extraction opening portion of the extraction portion has the opening A flow path forming member provided with a guide member for guiding a liquid suction capillary in the flow path through the sealing member between the opening and the sealing member of the opening. At least one of the flow path forming member and the capillary gripping device so that the opening of the flow path forming member and the end of the capillary gripped by the capillary gripping device are opposed to each other, and the capillary axis is perpendicular to the surface of the sealing member. One side is movably provided, front By relatively moving at least one of the flow path forming member and the capillary, the capillary end is inserted into the internal flow path through the sealing member while being guided by the guide member. After dispensing a predetermined amount of liquid in the channel into the capillary, a dispensing mechanism for dispensing the liquid in the flow path by repeating the operation of pulling the capillary out by the movement is provided.
また、本発明に係る他の分注装置は、前記分注装置において、前記所定量の液体を吸引したキャピラリを、前記流路形成部材と同様の密封部材を備えた他の流路における密封部材の壁を貫通し、前記他の流路形成部材内部の流路に前記所定量の液体を供給して分注することを特徴とする。 Further, another dispensing apparatus according to the present invention is the above-described dispensing apparatus, wherein the capillary that sucks the predetermined amount of liquid is used as a sealing member in another channel including a sealing member similar to the channel forming member. The predetermined amount of liquid is supplied and dispensed into a flow path inside the other flow path forming member.
また、本発明に係る他の分注装置は、前記分注装置において、前記キャピラリ把持装置をキャピラリ移動装置に固定し、前記キャピラリ移動装置は、キャピラリ把持装置によりキャピラリ供給位置の未使用キャピラリを把持して分注位置に移動し、前記他の流路内部に液体を供給して分注した後のキャピラリの把持を解放して、該キャピラリを使用済みキャピラリ集積位置に集積することを特徴とする。 Further, another dispensing apparatus according to the present invention is such that, in the dispensing apparatus, the capillary gripping device is fixed to a capillary moving device, and the capillary moving device grips an unused capillary at a capillary supply position by the capillary gripping device. Then, it moves to the dispensing position, releases the grip of the capillary after supplying and dispensing the liquid into the other flow path, and accumulates the capillary at the used capillary accumulation position. .
また、本発明に係る他の分注装置は、前記分注装置において、前記円板状の流路形成部材を連続回転及び所定角度ずつ回転するモータを設け、前記モータの作動により前記流路形成部材の連続回転によって流路内の液体を前記注出部側に移動し、また前記流路形成部材の所定角度ずつの回転により複数のマイクロ流路構成部における各注出部の開口を注出位置に回転移動することを特徴とする。 Another dispensing apparatus according to the present invention is the dispensing apparatus, wherein a motor that continuously rotates the disk-shaped flow path forming member and rotates by a predetermined angle is provided in the dispensing apparatus, and the flow path is formed by operating the motor. The liquid in the flow path is moved to the extraction section side by continuous rotation of the member, and the openings of the extraction sections in the plurality of micro flow path constituent sections are discharged by rotation of the flow path forming member by a predetermined angle. It is characterized by rotating to a position.
また、本発明に係る他の分注装置は、前記分注装置において、前記流路形成部材のたわみを押さえる押さえ具を備え、前記押さえ具には前記把持装置で把持したキャピラリ端部を流路開口に導くガイドを備えたことを特徴とする。 Further, another dispensing apparatus according to the present invention includes a pressing tool for pressing the deflection of the flow path forming member in the dispensing apparatus, and the pressing tool has a capillary end gripped by the gripping device in the flow path. A guide for guiding to the opening is provided.
本発明は上記のように構成したので、従来手作業で重労働であった分注作業を自動化し、且つ分注装置の高さを低いものとし、全体として小型化することができる。特にマイクロ流路の場合、重力より表面力が支配的となり、溶液を垂直方向的に取扱う制限がなくなる。そのため、重力を利用しない平面構造の分注を効果的に行うことができる結果、機構が大型化する原因が解消され、マイクロチップ内で反応させた液体を同じあるいは他のマイクロチップ内のマイクロ流路内に分注する機構を単純化し、分注装置全体の小型化することにより分注装置の大幅な低コスト化が可能となる。また、それによりこの種の分注装置のより広範囲な普及に寄与することもできる。 Since the present invention is configured as described above, it is possible to automate the dispensing work, which has conventionally been a heavy labor by manual work, and to reduce the height of the dispensing apparatus, thereby reducing the overall size. In particular, in the case of a microchannel, the surface force becomes more dominant than gravity, and there is no restriction on handling the solution in the vertical direction. Therefore, as a result of effective dispensing of a planar structure that does not use gravity, the cause of the increase in the size of the mechanism is eliminated, and the liquid reacted in the microchip can be microfluidized in the same or other microchip. By simplifying the mechanism for dispensing into the channel and reducing the size of the entire dispensing device, the cost of the dispensing device can be greatly reduced. It can also contribute to the wider spread of this type of dispensing device.
本発明は従来の分注装置の高さを低くし、小型の分注装置とするという課題を、注入部と注出部を備えた液体の流路を内部に形成してなる平板状の流路形成部材において、内部の流路に連通する前記注出部を前記流路形成部材の側面に開口し、前記注出部の開口には該開口を密封する弾性密封部材を設け、前記弾性密封部材は、キャピラリを前記平板状の流路形成部材の側面から前記弾性密封部材の壁を貫通して内部の流路内に挿入し、前記流路内の液体を所定量キャピラリ内に吸引した後外部に引き抜くとき、自己弾性によりキャピラリが貫通した壁部分を密封するように構成した流路形成部材を用いることにより解決し、また、前記の流路形成部材を用い、その流路形成部材の注出部に対向する位置にキャピラリ把持装置を移動可能に設け、前記流路形成部材とキャピラリの少なくとも片方を相対的に移動することにより、キャピラリの端部を、前記弾性密封部材を貫通して内部の流路内に挿入し、前記流路内の液体を所定量キャピラリ内に吸引した後、前記移動によりキャピラリを外部に引き抜く操作を繰り返すことにより、前記流路内の液体を分注する分注機構を備えた分注装置とすることにより解決したものである。 The present invention solves the problem of reducing the height of a conventional dispensing device and making it a small-sized dispensing device. A flat flow formed by forming a liquid flow path having an injection portion and a dispensing portion therein. In the path forming member, the extraction portion communicating with an internal flow path is opened in a side surface of the flow path forming member, and an elastic sealing member for sealing the opening is provided in the opening of the extraction portion, and the elastic sealing The member inserts the capillary through the wall of the elastic sealing member from the side surface of the plate-like channel forming member and inserts the capillary into the inner channel, and sucks a predetermined amount of the liquid in the channel into the capillary. The problem is solved by using a flow path forming member configured to seal the wall portion through which the capillary penetrates by self-elasticity when pulled out to the outside. Capillary gripping device can be moved to a position facing the exit The end of the capillary is inserted into the internal flow path through the elastic sealing member by relatively moving at least one of the flow path forming member and the capillary, and the liquid in the flow path is This is achieved by providing a dispensing device having a dispensing mechanism for dispensing the liquid in the flow path by repeating the operation of drawing the capillary into the outside by the movement after a predetermined amount is sucked into the capillary. is there.
図１は本発明に用いる流路形成部材１の説明図であり、同図（ｃ）の断面図に示すように、従来のマイクロチップと同様にＰＤＭＳ、アクリル樹脂、ポリカーボネイト、ガラス等の流路形成基板２の表面に、深さマイクロメータオーダーの所定平面形状の流路溝３を形成し、後にガラスやアクリル樹脂等からなるカバー４を設けることによって内部にマイクロ流路５を形成するものであり、特にＰＤＭＳのように柔軟性のある流路形成板２の場合には、その裏側に剛性の高い樹脂等からなる基板６を貼り付けて用いる。図示の例では流路形成部材１をＣＤのディスクと同様の円板状に形成し、その中心から放射方向に延びる、全体として１つのマイクロ流路構成部７を形成し、これを円周上に図中９個設けて１枚の流路形成部材１としている。なお、本発明による流路形成部材は、多くの場合従来のものと同様のマイクロチップとして用いられるが、それ以外に、より流路断面の大きなものにも用いることを考慮し、流路形成部材１と称して説明する。
FIG. 1 is an explanatory view of a flow
図１（ａ）に示す１つのマイクロ流路構造７は、同図（ｂ）に拡大して示すように、前記図１０（ａ）と同様の流路構造をなす例を示しており、図示の例ではカバー４に対してマイクロ流路５に通じる図中３個の注入部としての注入部８を備え、この注入部８にノズル等を当接させて、外部から反応に必要な所定の液体を圧入等により注入し、各々バッファ部９を介して反応室１０内に各液体を供給する。反応室１０で反応した液体、或いはここで生成された蛋白質等の物質は、外部の検査装置等で検査し或いは更に反応処理を行うため、反応室１０に通じる排出流路１１の端部に設けた比較的幅の広いマイクロ流路部分である注出部１２を備えている。したがってこの注出部１２は、円板状の流路形成部材１の側面における開口Ｍに開口する。
One
注出部１２の端部に形成される注出開口部１３は、ＰＤＭＳ等の弾性体からなり図示実施例では平面視円弧状の弾性密封部材１４の中心部に形成されるシール機能部１５によって密封状態に保っている。この流路形成板２が例えば剛性の高いアクリル樹脂等の樹脂やガラス製であるときには、弾性密封部材１４はＰＤＭＳ等の弾性の大きな別の部材によって形成され、その際には例えば図２（ａ）に示すような弾性密封部材１４を用いる。この弾性密封部材１４はその中心部のシール機能部１５が、同図（ｂ）に示すような注出部１２の端部における注出開口部１３に接して密封するように、弾性密封部材収納部１６に収納される。それにより、図２（ｂ）に示すような弾性密封部材収納部１６に、同図（ａ）に示すような弾性密封部材１４を、同図（ｃ）に示すように互いに密着状態で収納する。
The
弾性密封部材１４は図１及び図２に示すように円弧状をなしている結果、その内側に空間が形成され、その部分に後述するような注出用のキャピラリの挿入を案内するガイド部材１７を設けることができる。図２に示す実施例ではこのガイド部材１７は流路形成板２と一体的に形成しており、互いに所定の間隙からなるガイド部１８が形成されるように、２つのガイド１９、１９を対向させて配置している。同図に示すガイド１９の互いに対向する面には、後述するキャピラリが円滑に案内できるように外方に向けてラッパ状に開口させ、開口Ｍとしている。
As shown in FIG. 1 and FIG. 2, the elastic sealing
図２に示す弾性密封部材１４は、流路形成板２が例えばアクリル樹脂、ポリカーボネイト等の剛性の高い樹脂やガラス製であることによりこれとは別部材とし、ＰＤＭＳ等の弾性の大きな素材から形成する例を示している。またガイド部材１７は流路形成板２と一体形成した例を示したが、その他例えば図３（ａ）に示すように、ガイド部材１７を弾性密封部材１３と同一部材として一体成型してもよい。
The
前記図２の実施例においては、弾性密封部材１４の中心部をガイド部材１７としての２個のガイド１９、１９の端部と接触させ、弾性密封部材１４をガイド１９、１９と弾性密封部材収納部１６の円弧状壁面との間に挟み込んだ例を示したが、例えば図３（ｂ）のように、２個のガイド１９、１９の端部２１、２１を弾性密封部材１４から離して配置し、この部分で弾性密封部材１４の自由な移動を可能としてもよい。また、図３（ａ）に示す実施例では弾性密封部材１４とガイド部材１７を一体的に形成するに際して、図２に示す実施例の態様のまま一体化した例を示したが、その他例えば図３（ｃ）に示すように、弾性密封部材１４とガイド部１８を備えた一体化した部材を、弾性密封部材収納部１６の形状と同様に形成してもよい。
In the embodiment of FIG. 2, the center of the elastic sealing
また流路形成板２がＰＤＭＳ等の弾性の大きな素材から形成されるときは、図４（ａ）に示すように前記弾性シール部材１４は単に注出開口部１３を塞ぐ弾性壁として一体成形し、この部分をシール機能部１５としても良い。その際には中心にガイド部１８を備えるように互いに対向してガイド１９、１９を同様に一体成形することもできる。その時例えば図４（ｂ）に示すように、互いに対向するガイド１９を膜状連結部２６で連結し、２個のガイド１９、１９の成形時にこの部分に円滑に液体状のＰＤＭＳを流し、後に凝固させることによって正確なガイドを形成するようにしても良い。このとき、ガイド部１８を膜状連結部２６が封鎖することとなるが、後述するようにこの部分にキャピラリが挿通されるとき、特に障害となることなく貫通することができる。図４（ｃ）には同図（ａ）のガイド１９、１９を独立させることなく、全て一体成形した例を示し、このような成形により容易にガイドを形成することができる。
When the flow
上記のような構成からなる流路形成部材１を用いて、反応部１０で反応した液体、或いは蛋白質等を含む液体等を外部に抽出する際には、例えば図５に示すようにして行う。図５に示す例においては、前記図２の実施例の弾性密封部材１４とガイド部材１７の構成を備え、分注用のキャピラリ２２をガイド部材１７の２個のガイド１９、１９間のガイド部１８に挿入するとき、これらのガイド１９、１９の対向する内面に案内され、弾性密封部材１４のシール機能部１５における外側面２３に当接し、シール機能部１５を外側から注出部１２側に向けて押圧する。なお、この際、反応部１０から弾性密封部材１４のシール機能部１５までは、例えば遠心力などを用いて液を満たすようにし、内部に気泡などが残らないことが重要である。また、分注用のキャピラリ２２が数マイクロメータ程度の極めて細いときには、キャピラリ２２の先端が正確にガイド部１８に挿入されにくいので、そのようなときのためにキャピラリ保持ガイド２７を設け、その上面或いは内部等に形成したキャピラリ保持ガイド部２８にキャピラリ２２を嵌合することにより、キャピラリ先端の開口Ｍへの確実な位置合わせと、安定した摺動が可能となる。
When the flow
その際、キャピラリ保持ガイド２７におけるキャピラリ保持ガイド部２８へのキャピラリ２２の挿入を容易にするため、キャピラリ保持ガイド２７のキャピラリ挿入側にキャピラリ受け面２９を設ける。それにより、キャピラリ把持装置で把持されたキャピラリの先端がこのキャピラリ受け面２９に当接し、このキャピラリ受け面及び周囲の案内壁面に案内されて、容易にキャピラリ保持ガイド部２８に導くことができるようにする。
At that time, in order to facilitate the insertion of the capillary 22 into the capillary holding
更に、流路形成部材１は必ずしも厳密に平板ではないときがあり、５００μｍ程度のたわみを生じていることがある。このようなときでも確実にキャピラリ把持装置に把持されたキャピラリの先端を前記のように流路形成部材１の開口Ｍに導くため、例えば図５（ｃ）に示すような押さえ具３０を用いることができる。図示する押さえ具３０においては、先端を流路形成部材１を回転するテーブルの中心支持部に嵌合する嵌合孔を備え、他端側に前記図５（ａ）に示すようなキャピラリ保持ガイド部２８を備えたキャピラリ保持ガイド２７を一体的に設けている。このような押さえ具３０を用いることにより、図５（ｃ）に示す状態でテーブル上に載置された流路形成部材を上方から押さえ、流路形成部材１内の流路の開口が所定の位置になった状態で、キャピラリ把持装置で把持されたキャピラリの先端をキャピラリ受け面２９及び周囲の案内面により案内してキャピラリ保持ガイド部２８に導き、以降は前記図５（ａ）と同様の態様によりキャピラリ先端を開口に確実に導くことができるようになる。
Furthermore, the flow
キャピラリ２２を開口Ｍから挿入し、シール機能部１５を押圧する状態は図６（ａ）、（ｂ）に断面図で示しており、（ａ）のようにキャピラリ２２をキャピラリ保持ガイド２７で案内しながら、流路形成板２側に前記のように移動させ、同図（ｂ）のようにシール機能部１５における外側面２３を押圧する。それにより弾性密封部材１４のシール機能部１５は同図（ｂ）に示すように弾性変形する。なお、図示の例ではキャピラリ２２を流路形成板２、即ち流路形成部材１側に移動する例を示したが、キャピラリを同図（ａ）の位置に配置した後、流路形成部材１をキャピラリ側に移動しても同様の機能を行うことができる。また、図６（ａ）（ｂ）の例においては、前記弾性密封部材１４のシール機能部１５において、未だ後述するようにキャピラリが挿入されたことのない状態でのキャピラリの挿入操作を示している。
The state in which the capillary 22 is inserted from the opening M and the
図６に示す例において、同図（ｂ）の状態から更にキャピラリ２２を分注部１２側に移動すると、同図（ｃ）に示すように弾性密封部材１４のシール機能部１５がキャピラリ２２の先端で突き破られ、キャピラリ２２の先端が分注部１２内に挿入される。このように弾性密封部材１４が突き破られる位置は予め実験によって得ておき、それよりも余裕をもって幾分先にキャピラリ２２が移動する位置をキャピラリ２２の停止位置としておく。
In the example shown in FIG. 6, when the capillary 22 is further moved to the dispensing
図６（ｃ）のようにキャピラリ２２が分注部１２内に挿入されると、分注部１２の液体２４がキャピラリ２２の毛細管現象により管内に吸い込まれる。したがってキャピラリ２２の内径と長さにより分注量を決定することができる。なお、キャピラリ２２の内径が大きいとき、或いはその材質が毛細管現象では充分液体を吸い込まないときには、キャピラリ２２の別の端部からポンプ等により吸引してもよい。このような作用によりキャピラリ２２内に所定の量の液体が吸い込まれた後、キャピラリ２２を同図（ｄ）のように抜き取る。
When the capillary 22 is inserted into the dispensing
このとき前記のようにキャピラリ２２で突き破られた弾性密封部材１４のシール機能部１５は、例えばこの弾性密封部材１４がＰＤＭＳで作成されているときには、図５（ａ）の一部拡大図として示す同図（ｂ）において、分注部１２の幅Ｌが６００μｍ、弾性密封部材１４において最も薄く、キャピラリ２２が挿入される部分の厚さＴが６０μｍ、キャピラリの直径Ｄが２００μｍのものを作成し、キャピラリ２２を前記のように挿入した後引き抜く実験を行ったところ、弾性密封部材１４の自己弾性及び自己粘着性によりキャピラリが突き破った部分は自動的に密封されることを確認した。図６（ｄ）にはこの部分を自己密封部２５として破線で示している。
At this time, the sealing
その後この自己密封部２５に他のキャピラリを前記と同様に挿入し引き抜く作業を繰り返した結果、少なくとも数回程度は充分自己粘着性による密封が継続した。このことから、更に多数回のキャピラリの挿入及び引き抜きの操作が可能であることがわかった。したがって、分注部１２内に存在する液体は少なくとも数本分のキャピラリ２２に分注することが可能となる。また、この密封効果をより高めるためには、自己密封部２５にあらかじめ切れ込みを入れておくと良いものと考えられる。
Thereafter, another capillary was inserted into and pulled out of the self-sealing
上記のような構成からなる流路形成部材を用いる本発明の分注装置は、例えば図７に示すような装置によって分注作業を実施することができる。同図（ａ）に示す装置においては、中央部に設けたキャピラリ把持搬送装置３１を挟んで図中左側に前記ＣＤのような円板状をなす第１流路形成部材３２を第１モータ３３により回転自在に配置し、第１流路形成部材３２とは内部のマイクロ流路が適宜変更される第２流路形成部材３４を、第２モータ３５により回転自在に図中右側に配置している。
The dispensing apparatus of the present invention using the flow path forming member having the above-described configuration can perform dispensing work by using an apparatus as shown in FIG. 7, for example. In the apparatus shown in FIG. 6A, a first flow
例えば第１流路形成部材３２については、その断面を図７（ｂ）に示すような第１流路形成部材回転・移動装置３８によって回転させ、またその位置をキャピラリ把持搬送装置３１側に進退自在に移動することができるようにしている。同図に示す例においては、第１モータ３３で回転駆動されるテーブル３６上に第１流路形成部材３２を載置し、クランプ３７により回転自在に挟み、その状態で第１モータ３３を連続的に回転することにより第１流路形成部材３２を適宜の高速で回転させ、また一定角度ずつ回転可能としている。
For example, the cross section of the first flow
また、クランプ３７を駆動し、モータ３３を載置する第１流路形成部材駆動装置３８は、フレーム等に固定される第１流路形成部材駆動装置移動部材３９のピストン４０により、図７（ｂ）のように図中左右に移動可能としている。それにより、第１流路形成部材３２の前記のような分注部の開口Ｍが、前記キャピラリ把持搬送装置３１で把持されたキャピラリ２２の先端と前記図６（ａ）のように対向している状態で、第１流路形成部材駆動装置移動部材３９のピストン４０の作動により、第１流路形成部材駆動装置３８をキャピラリ２２側に移動すると、前記図６（ａ）（ｂ）のような作動によって、キャピラリ２２の先端が弾性密封部材１４を突き破って分注部１２内に挿入され、前記のように毛細管現象によって分注部内の液体はキャピラリ２２内にその全長に抽出され、所定量抽出することができる。なお、このとき図７（ｂ）に示すように、前記図５に示したようなキャピラリ保持ガイド２７を設けることのより、キャピラリ２２の先端を確実に開口Ｍの位置に合うように、またキャピラリ２２の先端がシール機能部を突き破るときの力によりキャピラリ２２が曲がらないようにすることができる。特に前記図５（ｂ）のような抑え具３０を用いることにより、流路形成部材のたわみを押さえ、直径数μｍ程度のキャピラリ２２でも確実な挿入を行うことができる。
Further, the first flow path forming
一方キャピラリ把持搬送装置３１は種々の装置によって実施することができるが、図７に示す例においては、左右のレール４１、４２上にキャピラリ２２を多数載置可能とし、またレール４１とレール４２の間の間隙部４３にキャピラリ把持装置４４を配置している。図７（ｃ）に示すキャピラリ把持装置４４においては、キャピラリ２２の片側に位置するクランプ受け部材４５をＬ字形として、その基底部４６をキャピラリ搬送装置４７に固定し、図示されない駆動装置により図７（ｃ）において例えば左方向等の片方に移動可能としている。
On the other hand, the capillary gripping and conveying
図７（ｃ）の例ではクランプ受け部材４５の基底部４６上に把持駆動部材４８を固定し、それにより図中左右に移動するピストン４９によってクランプ部材５０を図中左右に移動可能とし、それによりキャピラリ２２の強固な把持と、把持の解放を行うことができるようにしている。上記のようなキャピラリ把持搬送装置３１を用いることにより、図７（ａ）の例では、レール４１、４２の片方の長手方向端部側におけるキャピラリ供給位置５１に多数載置され、このレールをキャピラリ供給位置５１側から他側に向けて適宜下方に傾斜させておく。
In the example of FIG. 7 (c), a
且つ図示されない上下に進退可能なストッパ等によってた最初のキャピラリ２２が常にストッパの位置に存在する状態にして、前記のように別途の装置で移動するキャピラリ把持装置４４をこの部分で上昇させ、最初のキャピラリ２２を下側から挟み、且つクランプ部材５０の移動によってキャピラリを強固に把持する。その後ストッパを降下させ、キャピラリ２２を把持した状態で分注位置５２に移動する。
In addition, the
この分注位置５２においては、予め第１モータ３３の駆動により図１のように多数放射状に配置されているマイクロ流路構造の内の一つを選択して、その分注部を分注位置５２に回転させておき、キャピラリが前記のように分注位置に搬送されたときに、第１流路形成部材駆動装置移動部材３９の作動により第１流路形成部材をキャピラリ側に移動すると、前記図６の態様により相対的にキャピラリ２２が弾性密封部材を突き破って分注部に挿入され、キャピラリの長さ分だけ毛細管現象により注出する。この状態は本発明による分注装置の一連の作動を示す図８及び図９において、図８（ａ）の状態として示している。
At the dispensing
このような注出に必要な所定時間が経過した後、第１流路形成部材駆動装置移動部材３９の作動により、第１流路形成部材３２をキャピラリから離れる方向に移動する。それにより図８（ｂ）のように第１流路形成部材３２はキャピラリ２２から引き離される。その後この実施例においては、レール４１、４２を中心として、第１流路形成部材３２と反対側に対称的に配置した第２流路形成部材３４に、前記のようにキャピラリ２２に分注した液体を注入するようにしている。
After the elapse of a predetermined time required for such dispensing, the first flow
そのため、図８（ｂ）の状態で第２流路形成部材３４を前記第１流路形成部材駆動装置移動部材３９と同様の装置によって、第２流路形成部材３４をキャピラリ把持搬送装置３１側に移動する。その際、同図に示すように第２流路形成部材３４内に形成された所定のマイクロ流路に対して、第１流路形成部材３２の前記弾性密封部材１４と同様の弾性密封部材を備えており、第２流路形成部材３４の前記移動により、分注位置５２に回転している注入部５５をキャピラリ２２側に移動する。
Therefore, in the state of FIG. 8B, the second flow
その結果図９（ａ）に示すように、キャピラリ２２が第２流路形成部材３４の弾性密封部材を貫通し、弾性密封部材の内部に形成したマイクロ流路内に挿入される。そのマイクロ流路には第１流路形成部材の注入部と同様の構成で設けている注出孔５６に、ポンプの吸入孔と連通している真空配管を接続し、マイクロ流路を介してキャピラリ２２内の液体を吸引する。キャピラリ２２内の全ての液体を吸引するタイミングで真空配管のバルブを閉鎖する等により吸引を停止する。
As a result, as shown in FIG. 9A, the capillary 22 passes through the elastic sealing member of the second flow
その後第２流路形成部材３４をキャピラリ２２と反対側に移動し、前記図８（ｂ）の位置関係とする。但し、その後の作動は同じキャピラリを用い、或いは空になったキャピラリ２２をキャピラリ集積位置５３側に移動して新しいキャピラリをキャピラリ供給位置５１から分注位置５２に搬送する。その後分注位置５２に把持されているキャピラリ２２に対して、前記図８（ａ）のように第１流路形成部材３２を移動して、前記と同様の作動により空のキャピラリ２２に未だ残っている分注部の液体を注出する。上記のような作動を繰り返すことにより、第１流路形成部材３２内の１つの分注部、或いは反応部に存在する液体を第２流路形成部材３４のマイクロ流路に順に分注することができる。
Thereafter, the second flow
その後第１流路形成部材３２の１つのマイクロ流路構成部における分注部内の分注が終了した後は、図９（ａ）（ｂ）に示すように、第１流路形成部材３２を分注が終了したマイクロ流路構成部に隣接する次のマイクロ流路構成部の分注部が位置する迄回転する。なお、図９（ｂ）には第２流路形成部材３４も回転させた例を示しているが、これは第２流路形成部材３４も第１流路形成部材３２と同様に回転作動させることができる例を図示している。
Then, after the dispensing in the dispensing part in one micro-channel constituting part of the first
上記の例においては、第１流路形成部材３２の１つのマイクロ流路構成部における分注部に存在する液体を分注するに際して、キャピラリ２２の１本ずつを第１流路形成部材からの注出によるキャピラリ２２内への分注と、その後直ちに第２流路形成部材３４に対してそのキャピラリ２２内の液体を注入するようにした例を示したが、その他、第１流路形成部材３２の１つのマイクロ流路構成部における分注部に存在する液体について、キャピラリ２２の挿入による分注を連続的に行い、液体が注入されたキャピラリをキャピラリ集積部に集積しておき、１つのマイクロ流路構成部の分注作業が全て終了した後、これらを順に分注位置に搬送し、第２流路形成部材３４を所定角度ずつ回転させて、分注したキャピラリ２２の液体を第２流路形成部材のマイクロ流路内に注入するようにしても良い。また、第１流路形成部材３２にキャピラリの端部を挿入した状態で、同時にキャピラリの他端部を第２流路形成部材３４に挿入し、第２流路形成部材側から直接吸引することにより、所定量の液体を第２流路形成部材のマイクロ流路に順に分注することもできる。
In the above example, when dispensing the liquid present in the dispensing part in one micro-channel constituting part of the first
なお、第１流路形成部材３２の１つのマイクロ流路構成部の分注量が多いときには、１枚の第２流路形成部材３４のマイクロ流路のみでは不足することが考えられるが、その際には従来の音楽用ＣＤのディスクチェンジャのように、同様の流路構成を備えた他の第２流路形成部材３４と交換することにより、容易に対応することができる。このことは第１流路形成部材３２についても同様であり、同じマイクロ流路で同様の反応を行わせるもの、或いは他のマイクロ流路構成を備えたものを複数用意し、ディスクチェンジャと同様に、分注を行う流路形成部材を順次交換し、分注作業を全て連続的に行わせることもできる。
It should be noted that when there is a large amount of dispensing of one microchannel constituent part of the first
内部の液体を第２流路形成部材３４に注入後のキャピラリ２２は、レール４１、４２の前記供給側位置３１と反対側の位置である分注済キャピラリ集積位置５３に搬送する。このキャピラリ集積位置５３の近傍で把持していたキャピラリを解放すると、前記のようにレールが傾斜していることによりキャピラリ集積位置の端部に設けたストッパ５４側に順に集積される。なお、分注位置でキャピラリに分注が終了した後には、この部分でキャピラリ２２の把持を解放することにより、キャピラリのレール上の転動によって分注済キャピラリをキャピラリ集積位置５３に集積させることも可能である。同時にキャピラリ供給位置５１で予め次のキャピラリを把持して待機していたキャピラリ把持搬送装置３１により、次のキャピラリを前記と同様に分注位置５２に移動する。この状態は図８（ｂ）に示している。
After injecting the internal liquid into the second flow
前記実施例においては第１流路形成部材と第２流路形成部材を用い、第１流路形成部材からキャピラリに所定量分注した液体を第２流路形成部材の流路に吸引供給する例を示したが、そのほか、第２流路形成部材を用いることなく、第１流路形成部材に前記第１流路形成部材と同様の反応室及び注出部を備えた流路を形成すると共に、同一部材の他の部分には前記第２流路形成部材と同様の分注液体を吸引する流路と密封部材を設け、１つの流路形成部材のみによって注出部からキャピラリへの分注、及びその後の分注した液体の吸引供給を行うようにしても良い。 In the embodiment, the first flow path forming member and the second flow path forming member are used, and a predetermined amount of liquid dispensed from the first flow path forming member to the capillary is sucked and supplied to the flow path of the second flow path forming member. Although an example has been shown, a flow path including a reaction chamber and an extraction portion similar to the first flow path forming member is formed in the first flow path forming member without using the second flow path forming member. In addition, the other part of the same member is provided with a channel and a sealing member for sucking the dispensed liquid similar to the second channel forming member, and only one channel forming member is used to separate the dispensing portion from the dispensing portion to the capillary. The suction and supply of the dispensed liquid after that may be performed.
なお、前記実施例においては、本発明について効率的に実施できるように流路形成部材をディスク状に形成した例を示したが、それ以外に例えば図１０に示した矩形の流路形成部材を用い、内部に複数のマイクロ流路を形成したものを用いる等、種々の態様で実施することができる。 In addition, in the said Example, although the example which formed the flow-path formation member in the disk shape so that it could implement efficiently about this invention was shown, the rectangular flow-path formation member shown, for example in FIG. It can be carried out in various modes such as using a plurality of microchannels formed therein.
更に、前記実施例では本発明をマイクロ流路を形成した流路形成部材に適用した例を示したが、その他１ｍｍ以上の適宜の大きさの流路を形成した矩形やディスク状のチップを用いて、その分注部分に前記弾性密封部材を適用して本発明を実施することもできる。 Further, in the above embodiment, the present invention is applied to the flow path forming member in which the micro flow path is formed, but other rectangular or disk-shaped chips having a flow path of an appropriate size of 1 mm or more are used. The present invention can also be implemented by applying the elastic sealing member to the dispensing portion.
１ 流路形成部材
２ 流路形成板
３ 流路溝
４ カバー
５ マイクロ流路
６ 基板
７ マイクロ流路構成部
８ 注入部
９ バッファ部
１０ 反応室
１１ 排出流路
１２ 注出部
１３ 注出開口部
１４ 弾性密封部材
１５ シール機能部
１７ ガイド部材
Ｍ 開口
DESCRIPTION OF
Claims (5)
前記流路形成部材の前記開口とキャピラリ把持装置で把持したキャピラリの端部とが対向し、キャピラリの軸線が密封部材表面と垂直になるように、流路形成部材とキャピラリ把持装置の少なくとも片方を移動可能に設け、
前記流路形成部材とキャピラリの少なくとも片方を相対的に移動することにより、キャピラリの端部を、前記ガイド部材で案内しつつ、前記密封部材を貫通して内部の流路内に挿入し、前記流路内の液体を所定量キャピラリ内に吸引した後、前記移動によりキャピラリを外部に引き抜く操作を繰り返すことにより、前記流路内の液体を分注する分注機構を備えたことを特徴とする分注装置。In a flat-plate-shaped flow path forming member formed with a liquid flow path provided with an injection part and an extraction part, at least one of the injection part and the extraction part communicating with the internal flow path is used as the flow path. A sealing member that seals the opening is provided at the injection opening of the injection portion or the extraction opening of the injection portion that opens to the side surface of the path forming member, and seals the opening from the opening. A flow path forming member provided with a guide member that guides a capillary for liquid suction in the flow path through the sealing member between the members,
At least one of the flow path forming member and the capillary gripping device is arranged so that the opening of the flow path forming member faces the end of the capillary gripped by the capillary gripping device and the capillary axis is perpendicular to the surface of the sealing member. Set up to be movable,
By relatively moving at least one of the flow path forming member and the capillary, the end of the capillary is guided by the guide member, inserted through the sealing member into the internal flow path, A dispensing mechanism is provided for dispensing the liquid in the flow path by repeating the operation of drawing the capillary in the flow path to the outside after the suction of the liquid in the flow path to a predetermined amount. Dispensing device.
前記他の流路形成部材内部の流路に前記所定量の液体を供給して分注することを特徴とする請求項１記載の分注装置。The capillary that sucks the predetermined amount of liquid passes through the wall of the sealing member in the other flow path provided with the same sealing member as the flow path forming member,
The dispensing apparatus according to claim 1, wherein the predetermined amount of liquid is supplied and dispensed into a flow path inside the other flow path forming member.
前記キャピラリ移動装置は、キャピラリ把持装置によりキャピラリ供給位置の未使用キャピラリを把持して分注位置に移動し、
前記他の流路内部に液体を供給して分注した後のキャピラリの把持を解放して、該キャピラリを使用済みキャピラリ集積位置に集積することを特徴とする請求項１記載の分注装置。Fixing the capillary gripping device to a capillary moving device;
The capillary moving device grips an unused capillary at a capillary supply position by a capillary gripping device and moves it to a dispensing position,
2. The dispensing apparatus according to claim 1, wherein gripping of the capillary after the liquid is supplied and dispensed into the other flow path is released and the capillary is accumulated at a used capillary accumulation position.
前記押さえ具には前記把持装置で把持したキャピラリ端部を流路開口に導くガイドを備えたことを特徴とする請求項１記載の分注装置。A presser for pressing the flow path forming member is provided.
The dispensing apparatus according to claim 1, wherein the pressing tool includes a guide for guiding the end of the capillary gripped by the gripping device to the opening of the flow path.
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