JP5040091B2 - コラーゲン基材、並びにその製造方法及びその使用方法 - Google Patents
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Description
〔実施例〕
ブタ由来I型,III型混合コラーゲン粉末(日本ハム株式会社製;SOFDタイプ)を注射用蒸留水に溶解して7重量%の可溶化コラーゲン溶液を調製した。この可溶化コラーゲン溶液150mlを、図1に示すように、99.5容量%エタノール(和光純薬、特級)3Lの浴槽1中に吐出した。浴槽1から引き上げられたコラーゲン長繊維を、浴槽1と別途に設けた99.5%エタノールで満たされた浴槽2に浸漬した。浴槽2から引き上げられたコラーゲン繊維を、送風乾燥機3に約3秒間で通過させた後、コラーゲン長繊維6が弛まないようにテンションプーリ4で張力を保ちつつ、芯部材として、直径78mm、全長200mmのステンレス製ロール状巻取具5を用いて、約35rpmで回転させて巻き取った。この巻き取りの際、巻取具5の軸方向に1.5mm/sの速度で往復移動させた。
実施例で製造された綿状のコラーゲン基材を用いて、ヒト軟骨細胞の3次元培養を行った。まず、Chondrocyne Basal Medium(商品名、CELL APPLICATIONS社製)500mlにChondrocyne Glowth Supplement(商品名、CELL APPLICATIONS社製)10mlを添加した培地を用いて、細胞濃度4.0×105個/mlとなるように細胞懸濁液を調製した。次に、コラーゲン基材(約0.15g)の一部に上記細胞懸濁液0.3mlを塗布した。このコラーゲン基材を、細胞懸濁液が塗布された部分が底面となるようにシャーレ(CORNING社製、48ウェル)に静置し、上記培地0.6mlを静かに注入して、2ヶ月間静置培養を行った。培養は、37℃、5容量%CO2雰囲気下で行い、2日に1回の周期で培地を交換した。
実施例で製造された綿状のコラーゲン基材を用いて、浅い傷口に対する表面圧迫による止血実験を行った。比較例1として、酸化セルロースからなる止血材(サージセル、輸入販売:ジョンアンドジョンソン社)を用い、また、比較例2として、コラーゲンからなる止血材(インテグラン、販売:日本臓器株式会社、製造:株式会社高研)を用いた。ビーグル犬(雌)の腹部をメスで切開し、肝臓を露出させた。次に、メスを用いて肝臓の3箇所に、長さ約1cm、深さ約0.1cmの浅い傷口をそれぞれ同様に形成した。この3箇所の各傷口に、実施例に係るコラーゲン基材、比較例1の止血材、及び比較例2の止血材をそれぞれ載せて、さらにコラーゲン基材及び各止血材を医療用ガーゼで押さえることにより圧迫止血を行った。圧迫止血を約1分間を行った後、各傷口の止血の様子を目視で観察した。その観察状態を図5に示す。図5において、20は、実施例に係るコラーゲン基材により止血を行った傷口、21は、比較例1の止血材により止血を行った傷口、22は、比較例2の止血材により止血を行った傷口を示している。
実施例で製造された綿状のコラーゲン基材、比較例1の止血材、及び比較例2の止血材を用いて、深い傷口に対し、傷口に止血材を挿入して止血実験を行った。ビーグル犬(雌)の腹部をメスで切開し、肝臓を露出させた。次に、メスを用いて肝臓の3箇所に、長さ約2cm、深さ約0.7cmの深い傷口をそれぞれ同様に形成した。傷口から溢れ出た血液を医療用ガーゼで拭き取った後、この3箇所の各傷口に、実施例に係るコラーゲン基材、比較例1の止血材、及び比較例2の止血材をそれぞれ詰め込み、さらにコラーゲン基材及び各止血材を医療用ガーゼで押さえることにより圧迫止血を行った。圧迫止血を約1分間を行った後、各傷口の止血の様子を目視で観察した。その観察状態を図6に示す。図6において、30は、実施例に係るコラーゲン基材により止血を行った傷口、31は、比較例1の止血材により止血を行った傷口、32は、比較例2の止血材により止血を行おうとした傷口を示している。
2・・・浴槽
3・・・送風乾燥機
4・・・テンションプーリ
5・・・巻取具
6・・・コラーゲン長繊維
7・・・綿
20・・・実施例の綿状のコラーゲン基材で止血を行った浅い傷口
21・・・比較例1の止血材で止血を行った浅い傷口
22・・・比較例2の止血材で止血を行った浅い傷口
30・・・実施例の綿状のコラーゲン基材で止血を行った深い傷口
31・・・比較例1の止血材で止血を行った深い傷口
32・・・比較例2の止血材で止血を行った深い傷口
Claims (9)
- 長さが100mm以上のコラーゲン長繊維で構成された綿を含むコラーゲン基材であって、
上記綿は、上記コラーゲン長繊維が液中において絡められて得られたものであって、上記コラーゲン長繊維が相互に接触し且つ相互移動が可能なように接着されていない非接着接触部と、相互に接着された接着接触部とを含むものであるコラーゲン基材。 - 上記接着接触部は、架橋処理により形成されたものである請求項1に記載のコラーゲン基材。
- 上記接着接触部の架橋処理は、熱脱水架橋である請求項2に記載のコラーゲン基材。
- 上記コラーゲン長繊維は、湿式紡糸後に架橋されたものである請求項1から3のいずれかに記載のコラーゲン基材。
- 上記液中が中和液中である請求項1から4のいずれかに記載のコラーゲン基材。
- 上記コラーゲン長繊維の長さが、100mmから1000000mmの範囲内である請求項1から5のいずれかに記載のコラーゲン基材。
- 上記コラーゲン長繊維の径が、3μmから100μmの範囲内である請求項1から6のいずれかに記載のコラーゲン基材。
- コラーゲン長繊維に紡糸する紡糸工程と、
上記紡糸工程における中和液中において長さが100mm以上の上記コラーゲン長繊維を絡めて綿にする綿形成工程と、
上記綿形成工程において得られたコラーゲン長繊維の綿に架橋処理を行う架橋処理工程と、を含むものであるコラーゲン基材の製造方法。 - 請求項1から7のいずれかに記載のコラーゲン基材を培養基材として使用するものであるコラーゲン基材の使用方法。
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