JP4777645B2 - コラーゲン合成促進剤及びコラーゲン代謝賦活剤 - Google Patents
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Academy of Sciences of the U.S.A.、86巻、2632頁、1989年参照)。
コイドやレチノイン酸は、コラーゲンとコラゲナーゼの分泌をともに抑制する物質である(細胞マトリクスのバイオサイエンスとバイオテクノロジー,165頁,株式会社アイピーシー,1990年参照)。
くは類縁植物の葉、リンドウ科ゲンチアナもしくは類縁植物の根又は根茎等を、水、エタノール等の低級アルコール、プロピレングリコールや1,3−ブチレングリコール等の多価アルコール、ジエチレングリコールエーテル等の多価アルコールアルキルエーテルその他の極性溶媒、又はそれらの混液にて抽出して得ることができるが、これらに限定されるものではない。
られ、更に具体的には、例えば、モノエタノールアミン、N−メチルエタノールアミン、N,N−ジメチルエタノールアミン、2−アミノ−1−ブタノール、2−アミノ−1−プロパノール、N−メチル−2−アミノ−1−ブタノール、N−メチル−2−アミノ−1−プロパノール等を挙げることができる。エタノールアミン及びその誘導体は、遊離のアミンあるいはアミン塩の形で用いられる。アミン塩としては、例えば塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩等の鉱酸の塩、酢酸塩、乳酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、低級脂肪酸塩、高級脂肪酸塩等の有機酸の塩等が挙げられる。
ソステアリン酸、オレイン酸、イソ型長鎖脂肪酸、アンテイソ型長鎖脂肪酸等の高級脂肪酸、リモネン、水素添加ビサボロール等のテルペン類、トリカプリル・カプリン酸グリセリル、2−エチルヘキサン酸グリセリル、トリイソ型長鎖脂肪酸グリセリル、トリパルミチン酸グリセリル等のトリグリセリド、セチル硫酸ナトリウム、N−ステアロイル−L−グルタミン酸塩等の陰イオン界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン多価アルコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、多価アルコール脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、変性シリコン、蔗糖エステル等の非イオン界面活性剤、テトラアルキルアンモニウム塩等の陽イオン界面活性剤、ベタイン型、スルホベタイン型、スルホアミノ酸型等の両性界面活性剤、レシチン、リゾフォスファチジルコリン、セラミド、セレブロシド等の天然系界面活性剤、酸化チタン、酸化亜鉛等の顔料、ジブチルヒドロキシトルエン等の抗酸化剤、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、硫酸ナトリウム、硝酸カリウム、硫酸ナトリウム、メタ珪酸ナトリウム、塩化カルシウム等の無機塩類、クエン酸ナトリウム、酢酸カリウム、琥珀酸ナトリウム、アスパラギン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、ジクロロ酢酸、メバロン酸、グリチルリチン酸等の有機酸及びその塩、塩酸エタノールアミン、硝酸アンモニウム、塩酸アルギニン、ジイソプロピルアミン塩、尿素、デカルボキシカルノシン等の有機アミン類及びその塩、エデト酸等のキレート剤、キサンタンガム、カルボキシビニルポリマー、カラギーナン、ペクチン、アルキル変性カルボキシビニルポリマー、寒天等の増粘剤、水酸化カリウム、ジイソプロパノールアミン、トリエタノールアミン等の中和剤、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルフォン酸塩等の紫外線吸収剤、ジプロピレングリコール、1,3ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、マルビトール、ジグリセリン、ラフィノース等の多価アルコール、各種アミノ酸、アスコルビン酸、ビオチン、トコフェロール等のビタミン類及びアスコルビン酸硫酸エステル塩、アスコルビン酸燐酸エステル塩、ニコチン酸トコフェロール等のビタミン誘導体等を本発明の目的を達成する範囲内で適宜配合することができる。
正常ヒト線維芽細胞株[白人女性の皮膚より採取されたDetroit−551(ATCC CCL 110)]の濃度を10容量%ウシ胎仔血清(以下FBSと略記)を含むMEM培地にて1×105個/mLに調整し、2枚の24穴プレートにそれぞれ0.4mLずつ播種(4×104個/穴)し5%炭酸ガス、飽和水蒸気下、37℃で24時間培養した。なお、MEM培地は、大日本製薬社製最少必須培地10−101に、それぞれ終濃度0.1質量%ラクトアルブミン酵素水解物(シグマ社製)、1容量%非必須アミノ酸、1mmol/Lピルビン酸ナトリウム(以上いずれも大日本製薬社製)、0.12質量%炭酸水素ナトリウム及び50mg/Lストレプトマイシンを添加して調製した。24時間後培養液を吸引除去し、終濃度0.6容量%FBSを添加したMEM培地で細胞を2回洗浄した後、ポアーサイズが0.2μmのニトロセルロース膜(アドバンテック東洋製、DISMIC−25)で濾過滅菌したコラーゲン合成促進剤又はコラーゲン代謝賦活剤を添加した同培地に交換した。尚、同プレートを2枚作製して、1枚をコラーゲン産生量の測定に、残りの1枚をプロコラゲナーゼ産生量の測定に用いた。
たコラーゲン画分に取り込まれた放射活性で測定した。ペプシン処理及び食塩濃度によるコラーゲンの分画法は、Webster等の方法(Analytical Biochemistry,220頁,1979年参照)に準じた。
得られた培養上清250μLに10mmol/Lトリス塩酸緩衝液〔4℃でpH7.8に調整、1mmol/L塩化カルシウム、0.05容量%Brij−35[ICI社製ポリオキシエチレン(23)ラウリルエーテル]を含む〕を1.75mL加え、同緩衝液で平衡化したCM−セファロースCL−6B TM(ファルマシア社製、ベッド容量0.5mL)に供した。
本実験で用いた細胞では、産生されるコラゲナーゼはそのままでは活性をもたないプロコラゲナーゼとして回収されるので、プロコラゲナーゼ産生量は、トリプシンで活性化して得られるコラゲナーゼ活性として定量した。トリプシンによる活性化法、及びフルオレッセインイソチオシアネートで標識されたI型コラーゲン(コスモバイオ社製)を基質としたコラゲナーゼ活性の測定法は、永井等の方法(Japanese Journal of Inflamation、4巻、123頁、1984年参照)に準じた。
(mg/L) (%±S.E.)
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
カンゾウ 50 270 ± 8.8
12.5 135 ± 23
ソウハクヒ 200 194 ± 23
50 124 ± 17
スギナ 200 140 ± 4.8
50 84.7± 6.3
アロエ 200 137 ± 3.6
50 108 ± 8.0
キンギンカ 200 135 ± 8.0
50 128 ± 13
オウバク 20 200 ± 20
10 127 ± 13
ガイヨウ 12.5 149 ± 37
10 125 ± 25
ゲンチアナ 200 153 ± 8.0
50 107 ± 9.3
(mmol/L) (単位/mL±S.E.)
−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−
無添加 − 22.5± 3.7
硝酸ナトリウム 80 46.5± 4.8
硝酸アンモニウム 2 38.5± 6.6
酢酸アンモニウム 10 51.3± 3.8
酒石酸アンモニウム 5 49.6± 5.5
乳酸アンモニウム 5 78.7± 3.7
絹繊維加水分解物 2.5* 30.3± 6.8
N−メチルセリン 0.001 36.2± 4.2
N−メチルエタノールアミン 1 111.0±13
メタケイ酸ナトリウム 1 47.9± 6.4
*:以下、絹繊維加水分解物は特開平4−346936号公報実施例記載の方法に得られたものを用いた。
本発明のコラーゲン合成促進物質及びコラゲナーゼ産生促進物質を下記の組成でそれぞれを配合し、スキンクリームを調製した(処方例1〜3)。尚、濃度は以下全て質量%で示す。
処方例1 処方例2 処方例3
(A)
ステアリン酸 1 1 0
イソステアリン酸 0 0 1
モノステアリン酸グリセリン 2 2 2
ベヘニルアルコール 2 2 2
サラシミツロウ 1 1 0
ミリスチン酸セチル 1 1 1
セスキオレイン酸ソルビタン 1 1 1
N−ステアロイルフィトスフィンゴシン 0.1 0.1 0.1
水素添加レシチン 0.1 0.1 0.1
植物スクワラン 5 5 5
ミリスチン酸オクチルドデシル 5 5 5
(B)
オオバク 0.01 0.1 1.0
絹繊維加水分解物 0.01 0.1 1.0
1,3−ブチレングリコール 5 10 5
濃グリセリン 5 5 5
パラオキシ安息香酸メチル 0.2 0.2 0.2
アスコルビン酸燐酸エステルNa塩 0.2 0.2 0.2
γ−アミノ酪酸 0.1 0.1 0.1
N−ステアロイルグルタミン酸Na塩 0.2 0.2 0.2
アルキル変性カルボキシビニルポリマー 0.05 0.05 0.005
ニコチン酸アミド 0.1 0.1 0.1
ザルコシン 0.1 0.1 0.1
精製水 残量 残量 残量
(A)成分及び(B)成分を各々80℃に加熱溶解した後混合して、攪拌しつつ30℃まで冷却して、スキンクリームを調製した。
本発明のコラーゲン合成促進物質及びコラゲナーゼ産生促進物質を下記の組成で配合し、ローションを調製した(応用例4〜6)。
処方例4 処方例5 処方例6
カンゾウ 0.1 0.3 1.0
N−メチル−L−セリン 0.1 0.3 1.0
1,3−ブチレングリコール 5 0 5
ジプロピレングリコール 0 5 5
ラフィノース 1 1 1
エタノール 0 0 1
フェノキシエタノール 0.2 0.2 0.2
ペクチン 0 0 0.05
キサンタンガム 0 0 0.1
クエン酸ナトリウム 0.05 0.05 0.05
スギナ抽出液(エタノール抽出) 0.1 0.1 0.1
ジイソプロピルアミンジクロロ酢酸 0.2 0.2 0.2
γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸 0.2 0.2 0.2
ヒアルロン酸ナトリウム 0.001 0.001 0.001
グリチルリチン酸ジカリウム 0.2 0.2 0.2
クリタケエキス(エタノール抽出) 0.05 0.05 0.05
デカルボキシカルノシン塩酸塩 0.05 0.05 0.05
香料 0.02 0.02 0.02
精製水 残量 残量 残量
各成分をそれぞれ混合溶解し、攪拌して、ローションを調製した。
本発明のコラーゲン合成促進物質及びコラゲナーゼ産生促進物質を下記の組成でそれぞれを配合し、ジェルを調製した(処方例7〜9)。
処方例7 処方例8 処方例9
(A)
デカメチルシクロペンタシロキサン 10 10 10
イソステアリン酸イソステアリル 1 0 0
オリーブ油 0 1 0
マカデミアナッツ油 0 0 1
ユーカリ油 0.1 0 0.1
ヘキシルデカノール 1 0.1 0
POE硬化ヒマシ油(60E.O.) 2 2 2
球状シリコン粉体(注1) 1 1 5
(B)
スギナ 0.1 0.1 0.1
メタケイ酸ナトリウム 0.1 0.1 0.1
グルコサミン 0 0 0
グルクロン酸 0 0 0.1
1,3−ブチレングリコール 5 10 5
ソルビトール液 3 3 3
ポリエチレングリコール4000 1 1 1
カルボキシビニルポリマー 0.2 0.2 0.2
糖セラミド(注2) 0.1 0.1 0.1
パラオキシ安息香酸メチル 0.2 0.2 0.2
メバロノラクトン 0.5 0.5 0.5
エデト酸二ナトリウム 0.02 0.02 0.02
水酸化カリウム 0.05 0.05 0.05
精製水 残量 残量 残量
注1:東芝シリコーン社製 トスパール 145A
注2:紀文フードケミカル社製 バイオセラミド
(A)成分及び(B)成分を各々60℃に加熱溶解した後混合して、攪拌しつつ30℃まで冷却して、クリームを調製した。
本発明のコラーゲン合成促進物質及びコラゲナーゼ産生促進物質を下記の組成で配合し、親油クリームを調製した(応用例10〜12)。
処方例10 処方例11 処方例12
(A)
共変性シリコン(注3) 2 2 2
POE変性シリコン分散液(注4) 0 2 0
スクワラン 0 0 10
デカメチルシクロペンタシロキサン 15 20 10
メチルポリシロキサン 5 2 3
長鎖分岐脂肪酸コレステリル(注5) 0 0 3
シリコンエラストマー分散液(注6) 5 2 0
(B)
ソウハクヒ 0.1 0.1 0.1
硝酸アンモニウム 0.1 0.1 0.1
ナイアシン 0.1 0 0
クリタケ抽出物(エタノール抽出) 0 0.1 0
オレンジホモフルーツエキス(注7) 0 0 0.1
塩化ナトリウム 1 1 1
ジプロピレングリコール 5 5 5
濃グリセリン 5 5 5
ラフィノース 1 1 1
パラオキシ安息香酸メチル 0.3 0.3 0.3
精製水 残量 残量 残量
注3:ゴールドシュミット社製 ABIL EM90
注4:東レダウコーニングシリコーン社製 シリコンBY22ー008
注5:日本精化社製 YOFCO CLE-NH
注6:東レダウコーニングシリコーン社製 トレフィルE-500
注7:香栄興業社製 果汁濃縮液
(A)成分及び(B)成分を各々60℃に加熱溶解した後混合して、攪拌しつつ30℃まで冷却して、親油クリームを調製した。
Claims (1)
- ソウハクヒ、ガイヨウ及びゲンチアナからなる群より選ばれる少なくとも一種を含有することを特徴とするコラーゲン合成促進剤。
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