JP4616194B2 - ビオチン化合物 - Google Patents
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Description
[式中、Xはリンカー基を示す。]
カルボキシメチルデキストランがコーティングされているセンサーチップ(BIOCRE社製,Sensor Chip CM5)を、SPR測定装置(BIOCRE社製,BIOCORE J)にセットした。
上記製造例1において、カルボキシル基の活性化とそのブロッキングを含め、フォスタグを担持させる以外は同一の手法を用いて、フォスタグが結合していないレファレンス部を有するサンプル流路(フローセルB)を、フローセルAと平行に作製した。
分析サンプルとして、(i)β−カゼイン(ペンタリン酸化タンパク質,SIGMA社),(ii)脱リン酸化β−カゼイン,および(iii)牛血清アルブミン(BSA,New England BioLabs社)を使用した。脱リン酸化β−カゼインは、β−カゼイン 10mg/mL(50μL)とジャガイモ由来酸性フォスファターゼ(SIGMA社)と0.20M MES−NaOH(pH 6.8,50μL)との混合溶液を、12時間38℃でインキュベートすることにより調製した。それぞれのサンプルは、上記製造例1で用いたランニングバッファーに溶解し、サンプル濃度1.5μMのサンプル溶液を得た。
分析サンプルとして、(iv)リン酸化SRCペプチド(モノリン酸化ペプチド,ANA SPEC社)および(v)SRCペプチド(非リン酸化ペプチド,ANA SPEC社)を使用した。それぞれのサンプルは、上記製造例1で用いたランニングバッファーに溶解し、サンプル濃度1〜15μMのサンプル溶液を得た。
表面にストレプトアビジンが結合しているストレプトアビジン−センサーチップ(BIOCRE社製,Sensor Chip SA)を、SPR測定装置(BIOCRE社製,BIOCORE J)にセットした。
上記製造例2において、フォスタグを担持させる以外は同一の手法を用いて、フォスタグが結合していないセンサーチップを作製した。
分析サンプルとして、ランニングバッファー(5×10-3%(v/v)Tween 20,0.20M 硝酸ナトリウムおよび10μM 硝酸亜鉛を含む10mM HEPES−水酸化ナトリウム水溶液(pH 7.4))に溶解したβ−カゼイン(ペンタリン酸化タンパク質,SIGMA社)を使用した。サンプル濃度は、1.5μMとした。
Claims (4)
- 下記式(IX)で表されることを特徴とするビオチン化合物。
- 請求項1に記載のビオチン化合物に亜鉛イオンが配位しているビオチン化合物。
- 下記式で表されることを特徴とするビオチン化合物。
- 請求項3に記載のビオチン化合物に亜鉛イオンが配位しているビオチン化合物。
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