JP4448551B2 - 微小蛋白質不活性化樹脂組成物 - Google Patents

Description

本発明は、微小蛋白質不活性化金属超微粒子に関するものであり、より詳細には、アレルゲン物質やウィルス、細菌等の除去困難な微小蛋白質を免疫的に不活性化することが可能な金属超微粒子に関する。

ハウスダスト中に含まれるアレルゲン物質は、一般にスギ花粉等の植物性蛋白、ダニやその***物、カビ等の動物性蛋白であり、これらのアレルゲン物質は、家庭やオフィス等のカーペットやカーテン、寝具等に付着したり或いは室内の空気中に浮遊して存在している。
このようなアレルゲン物質を除去する方法としては、掃除機や空気清浄機等によって物理的に排除する方法が一般的であるが、かかる方法では微小な物質を完全に除去することは困難である。

またアレルゲン物質を免疫的に不活性化させ得る物質を用いることも提案されている。例えばチオグリコール酸、２-メルカプトエタノール、ポリフェノール化合物等のアレルゲン蛋白質のジスルフィド結合を還元乃至は開裂し得る物質の有効量と溶媒とを含んで構成されるアレルゲン中和組成物や（特許文献１）、或いは銀及び／又は亜鉛から成る高アレルゲン性金属成分を含有するアレルゲン不活性化剤（特許文献２）等が提案されている。更に、抗菌性金属イオンが担持された無機多孔質結晶を親水性高分子内部に含有する無機多孔結晶−親水性高分子複合体よりなる微小蛋白質不活性化素材が提案されている（特許文献３）。

特開２００４−２１０７４１号公報 特開２００６−２４１４３１号公報 特開２００６−２９１０３１号公報

上記特許文献に記載されたアレルゲン物質を不活性化させる物質においては、アレルゲン物質を不活性化する物質を含有させた溶液或いは分散液として、これをカーペットやカーテン或いは衣類等に噴霧又は塗布、或いは含浸させて使用していることから、かかる物質を施す基体への定着性が十分でなく、その効果の持続性の点で未だ十分満足するものではない。
また予め成形された成形体に上記物質を施すのではなく、成形体を構成する樹脂に配合して同様の効果を発揮することができれば、生産性や効果の持続性等の点でより有利である。

従って本発明の目的は、より効率的に微小蛋白質を不活性化することができると共に、樹脂組成物又はコーティング剤の形で優れた微小蛋白質不活性化効果を発現可能な微小蛋白質不活性化金属超微粒子を提供することである。

本発明によれば、樹脂中に、有機酸成分と金属間で結合を有する平均粒子径１〜１００ｎｍの金属超微粒子を含有して成り、且つ該金属超微粒子が、樹脂中に脂肪酸金属塩を配合し、これを加熱することにより樹脂中で生成されたものであることを特徴とする微小蛋白質不活性化樹脂組成物が提供される。
本発明の微小蛋白質不活性化樹脂組成物においては、
１．有機酸と金属間の結合に由来する１５１８ｃｍ^−１付近に赤外吸収ピークを有するこ と、
２．有機酸が、脂肪酸であること、
３．金属が、金、銀、銅の少なくとも一つであること、
が好適である。

本発明によればまた、上記微小蛋白質不活性化樹脂組成物を塗料成分として含有するコーティング剤が提供される。

本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子によれば、ナノ粒子化・ナノ分散された金属超微粒子であること、及びかかる金属超微粒子が有機酸と結合されていることによって微小蛋白質をより効果的に不活性化することができる。
また本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子によれば、成形体に噴霧、塗布等が可能な微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有溶液の他に、樹脂又はコーティング液中に金属超微粒子がナノ分散された樹脂組成物又はコーティング剤とすることが可能であり、当該金属超微粒子を樹脂成形体、塗膜の中に含有させることが可能である。
本発明の樹脂組成物及びコーティング剤によれば、微小蛋白質不活性化効果を有する成形体及び塗膜を直接成形することができ、かかる成形体及び塗膜は予め成形された成形品に抗菌効果或いはアレルゲン物質不活性化効果を有する物質を、噴霧、塗布、含浸させたもののように、抗菌効果或いはアレルゲン物質不活性化効果を有する物質（金属超微粒子）の定着性の問題もないので、効果の持続性の点でも優れている。
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子によれば、上述した細菌、アレルゲン物質の他、細菌、真菌、アミノ酸配列によって特定の立体構造を持つ酵素、或いはＤＮＡまたはＲＮＡ（核酸）と少数の蛋白分子からなる粒子状物質であるウィルス等の微小蛋白質も、有効に不活性化することができる。

ナノ分散を確認するための分光透過率曲線を示す図である。 実施例７で得られたフィルムの断面の透過型電子顕微鏡写真である。 実施例１９で得られたフィルムの断面の透過型電子顕微鏡写真である。 実施例１３で得られたフィルムの表面の走査型電子顕微鏡写真である。

本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子は、有機酸成分と金属間で結合を有する金属超微粒子から成ることが重要な特徴である。
従来より、銀等の金属イオンが細菌の増殖を抑制し、スギ花粉等のアレルゲン物質やダニやゴキブリ等の糞や死骸に由来するアレルゲン物質である微小蛋白質を不活性化させることが提案されているが、本発明においては粒子径が１０００ｎｍ以下の金属超微粒子を用いることにより、微小蛋白質をより効果的に不活性化できることを見出したのである。
すなわち、粒子径が１０００ｎｍ以下の金属超微粒子は通常の金属粒子とその特性が大きく異なり、特にその表面活性が高くしかも表面積が大きいことから、微小蛋白質に対する反応性に優れ、通常の金属粒子を用いた場合に比して微小蛋白質をより効率的に分解することができ、微小蛋白質に対する優れた不活性化効果を発現することが可能である。

その一方、本発明で用いる金属超微粒子は表面活性が非常に高いことから、樹脂中にこれが含有されていると樹脂の分解を促進し、樹脂の成形性を著しく阻害するという不利益があるが、本発明においては、金属超微粒子表面に有機酸成分を存在させることにより、金属表面と樹脂との直接接触を低減させることが可能となり、樹脂の分解を有効に抑制することができ、樹脂の分子量の低下等を低減することができ、成形性を阻害することがないのである。しかも金属超微粒子表面に有機酸成分が存在することにより、金属単体を用いた場合に比してより優れた微小蛋白質の不活性化効果を奏することが可能になるという予想外の効果が奏されるのである。
尚、金属超微粒子が、有機酸成分と金属間で結合を有しているか否かは、赤外吸収ピークを調べることにより明らかであり、本発明においては、１５１８ｃｍ^−１付近に有機酸と金属間の結合（ＣＯＯ−Ｍ）に由来する赤外吸収ピークを有することにより、金属超微粒子が、有機酸成分と金属間で結合を有していることが明らかとなる。

本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子の上述した優れた効果は後述する実施例の結果からも明らかである。
すなわち、平均粒子径４．５μｍの銀粒子単体を配合してなる樹脂からなるフィルムにおいては、ダニアレルゲン不活性化効果、酵素の不活性化率及び抗菌効果の何れも十分満足する結果が得られておらず（比較例２及び比較例５）、また平均粒子径が１００ｎｍと、本発明の金属超微粒子と同じ範囲にある銀超微粒子を配合して成る樹脂から成るフィルムにおいては、平均粒子径が４．５μｍのものと比べると酵素不活性化率で改善されているものの、ダニアレルゲン不活性化効果及び抗菌効果の点では、平均粒子径の大きな銀粒子単体を含有させたものと同様の結果しか得られていないのに対して（比較例３及び比較例６）、金属超微粒子表面に有機酸成分が存在する本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子においては、ダニアレルゲン不活性化効果、酵素不活性化率及び抗菌効果の何れもきわめて優れた結果が得られている（実施例１〜２０）。

また本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子においては、樹脂中で直接ナノ粒子化及びナノ分散させることが可能である。すなわち本発明においては、有機金属塩が、樹脂の加熱成形加工工程或いは塗膜の形成工程において、自己還元又は熱分解することにより金属超微粒子になることを見出し、有機金属塩を樹脂に配合し押出機等で混練或いはコーティング剤の焼付けを行うことにより、有機金属塩が熱分解によってナノ粒子化され、しかも再凝集することなくナノ分散し、成形と同時に効率的に樹脂中にナノ粒子化・ナノ分散することが可能となるのである。
このことは後述する実施例の結果からも明かであり、例えば実施例７及び１９により得られたフィルムの断面の透過型電子顕微鏡写真である図２及び３から、フィルム中に金属超微粒子（黒い部分）が形成（ナノ粒子化）されていることが明かであり、また実施例１３により得られたフィルム表面の走査型電子顕微鏡写真である図４から、金属超微粒子（白い部分）が均一に微分散（ナノ分散）していることが明かである。

尚、かかる金属超微粒子が樹脂中でナノ分散されていることは、ナノ粒子のプラズモン吸収の存在により確認することができる。図１は、ポリエチレンテレフタレートのみからなるフィルムと、ポリエチレンテレフタレートに平均粒子径１００μｍのミリスチン酸銀０．５重量％を含有させ、２７０℃で二軸押出して平均粒子径３０ｎｍを分散させて成るフィルムについての分光透過率曲線を示すものであり、この図１から明らかなように、ポリエチレンテレフタレート単体Ａでは、ピークが形成されていないのに対して、ミリスチン酸銀が含有されているポリエチレンテレフタレートＢでは、４００〜４５０ｎｍ付近にピークが得られており、銀粒子がポリエチレンテレフタレート中でナノ分散されていることを確認することができる。
尚、本明細書でいう平均粒子径とは、金属と金属との間に隙間がないものを一つの粒子とし、その平均をとったものをいう。

（金属超微粒子）
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子において、金属超微粒子の金属成分は、Ｃｕ，Ａｇ，Ａｕ，Ｉｎ，Ｐｄ，Ｐｔ，Ｆｅ，Ｎｉ，Ｃｏ，Ｎｂ，Ｒｕ，Ｒｈ、Ｓｎ等を挙げることができ、中でもＡｕ，Ａｇ，Ｃｕが好適である。これらの金属成分は、単体、混合物、合金等であってもよい。
前述したとおり、本発明においては、かかる金属が有機酸と結合を有していることが重要な特徴であり、１５１８ｃｍ^−１付近に有機酸と金属間の結合に由来する赤外吸収ピークを有している。

有機酸としては、ミリスチン酸，ステアリン酸，オレイン酸，パルミチン酸，ｎ−デカン酸，パラトイル酸，コハク酸，マロン酸，酒石酸，リンゴ酸，グルタル酸，アジピン酸、酢酸等の脂肪族カルボン酸、フタル酸，マレイン酸，イソフタル酸，テレフタル酸，安息香酸、ナフテン酸等の芳香族カルボン酸、シクロヘキサンジカルボン酸等の脂環式カルボン酸等を挙げることができる。
本発明においては、用いる有機酸が、ミリスチン酸、ステアリン酸、パルミチン酸等の高級脂肪酸であることが特に好ましく、分岐を有すると共に炭素数の多いものであることが特に好ましい。
金属超微粒子の好適な出発物質である有機酸金属塩としては、特にミリスチン酸銀、ステアリン酸銀等を挙げることができ、また平均粒子径が１乃至５００μｍ、特に１０乃至２００μｍの範囲にあることが好ましい。

本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子は、金属超微粒子の出発物質である有機酸金属塩を不活性ガス雰囲気で熱処理することにより、金属超微粒子単体を生成することができるが、好適には、有機酸金属塩を熱可塑性樹脂と混合し、熱処理を経ることによって、樹脂中でナノ粒子化・ナノ分散された金属超微粒子を生成することができる。
本発明に用いる金属超微粒子を得るために必要な加熱条件は、用いる有機酸金属塩によっても相違するので、一概には規定できないが、一般的には１２０乃至３５０℃、特に１７０乃至３００℃の温度で、３０乃至１８００秒、特に１２０乃至６００秒加熱されることが望ましい。
本発明の金属超微粒子は、その最大径が１μｍ未満で、その平均粒子径は特に１乃至１００ｎｍの範囲にあることが望ましい。

（樹脂組成物）
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子を含有して成る樹脂組成物は、金属超微粒子を含有する樹脂成形品を成形可能な樹脂組成物であり、上述したように、不活性雰囲気下で有機酸金属塩を熱処理して得られた金属超微粒子を樹脂中に配合したものでもよいが、特に、上述した金属超微粒子の出発物質である有機酸金属塩を含有する樹脂組成物であることが好ましい。
すなわち前述した通り、本発明の微小蛋白質金属超微粒子の出発物質である有機酸金属塩は、樹脂組成物の成形加工の際の熱処理によって、樹脂成形品中でナノ粒子化・ナノ分散して、樹脂成形品中に本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子が存在することが可能になる。

本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子が含有している樹脂としては、溶融成形が可能な熱可塑性樹脂であれば従来公知のものをすべて使用でき、例えば、低−，中−，高−密度ポリエチレン、線状低密度ポリエチレン、線状超低密度ポリエチレン、アイソタクティックポリプロピレン、シンジオタクティックポリプロピレン、プロピレン−エチレン共重合体、ポリブテン−１、エチレン−ブテン−１共重合体、プロピレン−ブテン−１共重合体、エチレン−プロピレン−ブテン−１共重合体等のオレフィン樹脂、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート、ポリエチレンナフタエート等のポリエステル樹脂、ナイロン６、ナイロン６，６、ナイロン６，１０等のポリアミド樹脂、ポリカーボネート樹脂等を挙げることができる。
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有樹脂組成物においては、特にポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステルを用いることが好適である。
また本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有樹脂組成物においては、その用途に応じて、それ自体公知の各種配合剤、例えば、充填剤、可塑剤、レベリング剤、増粘剤、減粘剤、安定剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤等を公知の処方に従って配合することができる。

本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有樹脂組成物においては、樹脂１００重量部当り有機酸金属塩を０．００１乃至５重量部の量で配合することが好ましく、上記範囲よりも少ないと十分な不活性化効果を得ることができず、一方上記範囲よりも多いと金属粒子が凝集し、ナノ分散が困難になるおそれがあるので好ましくない。
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有樹脂組成物は、二本ロール法、射出成形、押出成形、圧縮成形等の従来公知の溶融成形に賦することにより、最終成形品の用途に応じた形状、例えば、粒状、ペレット状、繊維状、フィルム、シート、容器等の樹脂成形品を成形することができる。
樹脂成形品への成形温度は、成形方法や用いる樹脂及び有機酸金属塩の種類によって一概に規定できないが、用いる樹脂の熱劣化を生じない温度、且つ有機金属塩がナノ粒子化及びナノ分散し得る上述した温度範囲内であることが必要である。
また本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有樹脂組成物は、それ単独で樹脂成形品を構成することもできるが、他の樹脂との組み合わせで多層構造とすることもできる。
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有樹脂組成物から得られた樹脂成形品は、スギ花粉等の植物性蛋白質アレルゲン物質や酵素、あるいはウィルス等を有効に不活性化することができ、しかも成形加工と同時にナノ粒子化及びナノ分散が可能であり、生産性に優れている。

（コーティング剤）
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有コーティング剤は、上述した本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子を含有する塗膜を形成可能なコーティング剤であり、上述したように、不活性雰囲気下で有機酸金属塩を熱処理して得られた金属超微粒子を塗料成分中に配合したものでもよいが、特に、上述した金属超微粒子の出発物質である有機酸金属塩を含有するコーティング剤であることが好ましい。
すなわち前述した通り、本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子の出発物質である有機酸金属塩は、塗膜の焼付けの際の熱処理によって、塗料成分中でナノ粒子化・ナノ分散して、塗膜中に本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子が存在することが可能になる。
有機酸金属塩等の金属有機化合物は、塗料成分１００重量部に対して０．００１乃至５重量部の量で配合させることが好ましく、上記範囲よりも少ないと微小蛋白質を十分に不活性化させることができず、一方上記範囲よりも多いと金属超微粒子が凝集するおそれがあるので好ましくない。

本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子を含有する塗料成分としては、加熱により塗膜形成が可能なものであれば種々のものを使用することができる。例えば、これに限定されないが、アクリル系塗料、エポキシ系塗料、フェノール系塗料、ウレタン系塗料、ポリエステル系塗料、アルキド樹脂塗料等の従来公知の塗料組成物を用いることができる。
またコーティング剤においても、樹脂組成物と同様に、その用途に応じて、それ自体公知の各種配合剤、例えば、レベリング剤、増粘剤、減粘剤、安定剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、着色剤等を公知の処方に従って配合することができる。
コーティング剤の熱処理条件は、用いる塗料成分及び有機酸金属塩の種類によって一概に規定できないが、用いる塗料成分の熱劣化を生じない温度、且つ有機酸金属塩がナノ粒子化及びナノ分散し得る上述した温度範囲内で、６０乃至６００秒間加熱処理を行うことが必要である。
本発明のコーティング剤から得られた塗膜は、優れた微小蛋白質不活性化効果を有し、しかも塗膜の形成と同時にナノ粒子化及びナノ分散が可能であり、生産性に優れている。

（溶液）
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有溶液は、上述した本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子を含有する溶液であり、床、壁面、カーテン、カーペット等の住宅関連部材、空調機器、織布、不織布等の繊維製品、マスク、フィルター等の濾過部材に、噴霧、塗布、含浸等させて用いることができる。
本発明の微小蛋白質不活性化金属超微粒子含有溶液においては、前述した通り、有機酸金属塩を不活性ガス雰囲気で熱処理して、予め金属超微粒子を生成し、これを溶媒中に配合することにより製造することができる。金属超微粒子は０．００１乃至２０重量％、特に０．０１乃至１０重量％の量で溶液中に含有させることが、微小蛋白質の不活性効果の点から好ましい。

微小蛋白質不活性化金属超微粒子を含有させる溶媒としては、従来この種の溶液に用いられていた公知の溶媒を使用することができ、これに限定されないが、精製水、イオン交換水等の水；メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール等の低級アルコール；メタノール変性、ベンゾール変性、トリオール変性、メチルエチルケトン変性、安息香酸デナトニウム変性、香料変性等の一般変性アルコール；エチレングリコールモノエチルエーテル、クロロホルム、炭酸ジエチル、酢酸エチル、プロピオン酸エチル、酪酸エチル、ヘキサン、工業用エチルエーテル等の変性アルコール；エチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノプロピルエーテル、プロピレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジプロピレングリコールエチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノフェニルエーテル、トリエチレングリコールモノフェニルエーテル等のグリコール系溶剤等の溶剤が挙げられる。これらの溶剤は、単独で用いても又２種以上併用しても良い。本発明においては、エタノールを好適に使用することができ、エタノール濃度が特に１乃至３０％のエタノール水溶液を好適に使用できる。

I．粒子径の測定
実施例１〜９、１１〜１９及び比較例１〜７により得られたフィルム或いは実施例１０、２０により得られたプライマー塗布フィルムのプライマー塗膜を断面スライスし、透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）にて観察した金属超微粒子のＴＥＭ写真を得る（尚、代表例として実施例７及び１９のＴＥＭ写真を図２及び３に示した）。写真に写し出された金属超微粒子の平均粒子径を画像解析式粒子分布測定ソフトウェア：ｍａｃ−ｖｉｅｗにて測定した。

（評価方法）
II．ダニアレルゲン不活性化効果の確認方法（ダニスキャン）
ダニスキャン（アサヒフードアンドヘルスケア社製）を用いて、Ｄｅｒ ｆ Ｉ（アサヒフードアンドヘルスケア社製）（ダニ虫体に含まれるアレルゲン）に対する不活性化効果の確認を行った。前記不活性化効果の確認は、ダニ抗原の存在の確認、樹脂中に金属微粒子を含有したフィルム及びプライマー塗布フィルムと抗原との接触・浸漬をそれぞれ行ない、下記に記載のダニスキャンの判定基準に従い、ダニアレルゲンの不活性化効果を確認した。

１．ダニアレルゲンの存在の確認
（１）ダニ抗原溶液：ＰＰチューブ（ＢＩＯ−ＢＩＫ社製）にＤｅｒ ｆ Ｉ溶液２０μＬ（ダニ抗原量２μｇ）を添加し、３７℃２時間インキュベートした。
（２）ダニ抗原の存在の確認：インキュベート後、溶液をダニスキャン測定部に滴下し、
下記記載のＣラインとＴラインの着色量により前記ダニ抗原の存在を確認した。

２．ダニアレルゲン不活性化効果の確認
（１）フィルムサンプル：実施例１〜９、１１〜１９及び比較例１〜７により得られたフィルム或いは実施例１０、２０により得られたプライマー塗布フィルムを幅５ｍｍ長さ１００ｍｍの短冊状に採取しフィルムサンプルとした。
（２）接触・浸漬：ＰＰチューブ（ＢＩＯ−ＢＩＫ社製）にＤｅｒ ｆ Ｉ溶液２０μＬ（抗原量２μｇ）を添加し、フィルムサンプルを挿入して接触・浸漬させて、３７℃２時間インキュベートした。
（３）判定：インキュベート後、フィルムサンプルを除去し、溶液をダニスキャン測定部に滴下し、下記記載のＣラインとＴラインの着色量により不活性化効果を確認した。

３．ダニスキャンの判定基準
１：ダニアレルゲンの汚染はない（Ｃライン着色、Ｔライン着色全くなし）
２：ややダニアレルゲンで汚染されている（Ｃライン着色＞Ｔライン着色）
３：ダニアレルゲンで汚染されている（Ｃライン着色＝Ｔライン着色）
４：非常にダニアレルゲンで汚染されている（Ｃライン着色＜Ｔライン着色）

III．酵素不活性化効果の確認方法
β-ガラクトシダーゼを用いて酵素の不活性化効果の確認を行った。前記不活性化効果の確認は、酵素の存在を確認してイニシャル値とし、一方、樹脂中に金属微粒子を含有させたフィルムとの接触・浸漬させてサンプル値とし、下記に記載する酵素不活性化率の算出を行って効果を確認した。尚、酵素の活性測定にはβ−Galactosidase Enzyme Assay System with Reporter Lysis Buffer （Promega 社製）を用い、β−ガラクトシダーゼは添付品を用いた。

１．イニシャルの酵素の存在の確認
（１） 酵素溶液調整：β−ガラクトシダーゼの濃度が０．１μＬ／１ｍＬになるように１×Reporter Lysis Bufferで希釈する。
（２） 前処理：β−ガラクトシダーゼ溶液（０．１μＬ／１ｍＬ）５０μＬをＰＰチューブ（ＢＩＯ−ＢＩＫ社製）に添加し、３７℃２時間インキュベートした。その後、１×Reporter Lysis Bufferを１００μＬ混合した。
（３） 発色反応：Assay Bufferを１５０μＬ滴下し、混合後３７℃湯浴中で３０分間反応させた。
（４） 反応停止：１Ｍ炭酸ナトリウム５００μＬ混合し、反応を停止させた。
（５） 吸光度測定：溶液の４２０ｎｍの吸光度を測定し、イニシャル値とした。

２．サンプルの酵素不活性効果の確認
（１） 酵素溶液調整：β−ガラクトシダーゼの濃度が０．１μＬ／１ｍＬになるように１×Reporter Lysis Bufferで希釈する。
（２） 接触・浸漬：β−ガラクトシダーゼ溶液（０．１μＬ／１ｍＬ）１００μＬをＰＰチューブに添加し、サンプルフィルム（幅３ｍｍ長さ２０ｍｍ）をＰＰチューブ内へ挿入し溶液に接触・浸漬させ、３７℃２時間インキュベートした。フィルムを除去後溶液５０μＬ採取し、１×Reporter Lysis Buffer１００μＬと混合した。
（３） 発色反応：Assay Bufferを１５０μＬ滴下し、混合後３７℃湯浴中で３０分間反応させた。
（４） 反応停止：３０分後１Ｍ炭酸ナトリウム５００μＬ混合し、反応を停止させた。
（５） 吸光度測定：溶液の４２０ｎｍの吸光度を測定し、サンプル値とした。

３．酵素不活性化率の算出
測定したイニシャル値とサンプル値を用いて下記式より、サンプルの酵素不活性化率を求めた。
（酵素不活性化率）＝（１−サンプル値／イニシャル値）×１００（％）

ＩＶ．抗菌効果の確認方法
実施例１〜９、１１〜１９及び比較例１〜７により得られたフィルム或いは実施例１０、２０により得られたプライマー塗布フィルムを、ＪＩＳ Ｚ ２８０１により抗菌効果の確認を行った。菌種は大腸菌（escherichia coli）を用いた。無加工フィルムの培養後菌数を抗菌加工フィルムの培養後菌数を除した数の対数値を抗菌活性値とし、抗菌効果は抗菌活性値が２．０以上の場合を○、２．０未満の場合を×とした。なお、抗菌効果の確認について黄色ブドウ球菌（S.aureus）には行っていないが、大腸菌（escherichia coli）と同様の抗菌効果があるものと推測される。

Ｖ．１５１８ｃｍ^−１付近の赤外線吸収ピークの確認
実施例１〜９、１１〜１９及び比較例１〜７により得られたフィルム或いは実施例１０、２０により得られたプライマー塗布フィルムのプライマー塗膜について、樹脂中に金属微粒子を含有させたフィルムをフーリエ変換型赤外分光光度計（（株）デジラボ・ジャパン製）により常法である全反射測定法を用いて有機酸成分と金属間の結合に起因する１５１８ｃｍ^−１付近の赤外吸光ピークを確認した。

ＶＩ．外観評価
実施例１〜９、１１〜１９及び比較例１〜７により得られたフィルム或いは実施例１０及び２０により得られたプライマー塗布フィルムについて、目視で粒子の凝集の有無を確認し、凝集がなく外観に優れているものを○、凝集があり外観不良のものを×とした。

［実施例１］
低密度ポリエチレン樹脂５ｋｇに、平均粒子径１００μｍのステアリン酸銀を１．５ｗｔ％の含有率になるように配合し、押出成形温度２２０℃で二軸押出機（（株）東洋精機製作所製）にて押し出して厚み５０μｍのフィルムを作成した。
前述したダニアレルゲン不活性化効果、酵素不活性化効果、１５１８ｃｍ^−１付近の赤外線吸収ピークの確認及び評価を行った。

［実施例２］
ステアリン酸銀の含有率を１．０ｗｔ％とした以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例３］
ステアリン酸銀の含有率を０．５ｗｔ％とした以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例４］
押出成形温度を２５０℃とした以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例５］
押出成形温度を２７０℃とした以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例６］
平均粒子径１００μｍのミリスチン酸銀を用いた以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例７］
ミリスチン酸銀の含有率を０．５ｗｔ％とした以外は、実施例６と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例８］
押出成形温度を２５０℃とした以外は、実施例６と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例９］
押出成形温度を２７０℃とした以外は、実施例６と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例１０］
高分子量ビスフェノール型エポキシ樹脂、フェノールホルムアルデヒド樹脂（レゾール型）溶液及び、硬化触媒（リン酸）、平均粒子径１００μｍのミリスチン酸銀とを４６：４６：３：５の樹脂分比率で撹拌混合し、混合溶剤（シクロヘキサノン：ＭＩＢＫ：ＭＥＫ＝１：１：１）で塗料樹脂分濃度が２０％になるようにプライマーを調整した。厚み５０μｍの２軸配向ＰＥＴ／Ｉ（テレフタル酸／イソフタル酸＝８８／１２）共重合ポリエステルフィルムに、プライマーを乾燥重量で０．６ｇ／ｍ^２となるように塗布、１８０℃で乾燥しプライマー塗布フィルムを作製し、確認、評価を行った。

［比較例１］
低密度ポリエチレン樹脂５ｋｇを押出成形温度２２０℃で二軸押出機（（株）東洋精機制作所製）にて押し出して厚み５０μｍのフィルムを作成し、前述したダニアレルゲン不活性化効果、酵素不活性化効果、１５１８ｃｍ^−１付近の赤外線吸収ピークの確認及び評価を行った。

［比較例２］
平均粒子径４．５μｍの銀を０．５ｗｔ％の含有率になるように配合した以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［比較例３］
平均粒子径１００ｎｍの銀を０．５ｗｔ％の含有率になるように配合した以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［比較例４］
公知の方法で生成したステアリン酸銀を、不活性ガス雰囲気下で温度２５０度で加熱して得られた粒子径１〜１００ｎｍのステアリン酸銀を０．５ｗｔ％の含有率になるように配合した以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、測定、算出、確認、評価を行った。

前記したダニアレルゲン不活性化効果、酵素不活性化効果、１５１８ｃｍ^−１付近の赤外線吸収ピークの確認、外観及び評価結果を表１に示す。
前記実施例、表１から、本発明の不活性化金属超微粒子が、アレルゲン、ウィルス等の微少タンパク質に対する不活性化に有効であることが判る。

［実施例１１］
低密度ポリエチレン樹脂５ｋｇに、平均粒子径１００μｍのステアリン酸銀を０．１ｗｔ％の含有率になるように配合し、押出成形温度２２０℃で二軸押出機（株）東洋精機製作所製）にて押し出して厚み５０μｍのフィルムを作成し、前述した抗菌活性値の算出、抗菌効果の有無、１５１８ｃｍ^−１付近の赤外線吸収ピークの確認及び評価を行った。

［実施例１２］
ステアリン酸銀の含有率を０．５ｗｔ％とした以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、算出、確認、評価を行った。

［実施例１３］
ステアリン酸銀の含有率を１．０ｗｔ％とした以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、算出、確認、評価を行った。

［実施例１４］
ステアリン酸銀の含有率を１．５ｗｔ％とした以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、算出、確認、評価を行った。

［実施例１５］
押出成形温度を２００℃とした以外は、実施例１４と同様にフィルムを作成し、算出、確認、評価を行った。

［実施例１６］
押出成形温度を２７０℃にした以外は、実施例１４と同様にフィルムを作成し、算出、確認、評価を行った。

［実施例１７］
ポリプロピレン樹脂にした以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、算出、確認、評価を行った。

［実施例１８］
平均粒子径１００μｍのミリスチン酸銀の含有率を０．１ｗｔ％とした以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例１９］
平均粒子径１００μｍのミリスチン酸銀の含有率を１．５ｗｔ％とした以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［実施例２０］
高分子量ビスフェノール型エポキシ樹脂、フェノールホルムアルデヒド樹脂（レゾール型）溶液及び、硬化触媒（リン酸）、平均粒子径１００μｍのステアリン酸銀とを４６：４６：３：５の樹脂分比率で撹拌混合し、混合溶剤（シクロヘキサノン：ＭＩＢＫ：ＭＥＫ＝１：１：１）で塗料樹脂分濃度が２０％になるようにプライマーを調整した。厚み５０μｍの２軸配向ＰＥＴ／Ｉ（テレフタル酸／イソフタル酸＝８８／１２）共重合ポリエステルフィルムに、プライマーを乾燥重量で０．６ｇ／ｍ^２となるように塗布、１８０℃で乾燥しプライマー塗布フィルムを作製し、確認、評価を行った。

［比較例５］
平均粒子径４．５μｍの銀を１．０ｗｔ％の含有率になるように配合した以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［比較例６］
平均粒子径１００ｎｍの銀を１．０ｗｔ％の含有率になるように配合した以外は、実施例１１と同様にフィルムを作成し、確認、評価を行った。

［比較例７］
公知の方法で生成したステアリン酸銀を、不活性ガス雰囲気下で温度２５０℃で加熱して得られた粒子径１〜１００ｎｍのステアリン酸銀を０．５ｗｔ％の含有率になるように配合した以外は、実施例１と同様にフィルムを作成し、測定、算出、確認、評価を行った。結果を表２に示す。

前記した抗菌活性値、抗菌効果、１５１８ｃｍ^−１付近の赤外線吸収ピークの確認及び外観評価結果を表１及び表２に示す。

Claims (5)

1. 樹脂中に、有機酸成分と金属間で結合を有する平均粒子径１〜１００ｎｍの金属超微粒子を含有して成り、且つ該金属超微粒子が、樹脂中に脂肪酸金属塩を配合し、これを加熱することにより樹脂中で生成されたものであることを特徴とする微小蛋白質不活性化樹脂組成物。
2. 前記有機酸と金属間の結合に由来する１５１８ｃｍ^−１付近に赤外吸収ピークを有する請求項１記載の微小蛋白質不活性化樹脂組成物。
3. 前記有機酸が、脂肪酸である請求項１記載の微小蛋白質不活性化樹脂組成物。
4. 前記金属が、金、銀、銅の少なくとも一つである請求項１記載の微小蛋白質不活性化樹脂組成物。
5. 請求項１記載の樹脂組成物を塗料成分として含有するコーティング剤。

Images