JP4387903B2 - Fermented material obtained from papaya - Google Patents

Description

本発明は、パパイヤに微生物を作用させることにより得られる発酵物、特にパパイヤを発酵することによって様々な生理作用を有する発酵物に関する。   The present invention relates to a fermented product obtained by allowing microorganisms to act on papaya, and particularly to a fermented product having various physiological effects by fermenting papaya.

微生物を用いた発酵は、古くから用いられている加工技術の一つであって、例えば、動植物由来の原料に微生物を作用させることによって、原料の嗜好性の向上、および特定の物質や新たな有用物質の生産に利用されてきた。   Fermentation using microorganisms is one of the processing techniques that have been used for a long time. For example, by causing microorganisms to act on raw materials derived from animals and plants, the palatability of raw materials can be improved, and certain substances and new materials can be used. It has been used to produce useful substances.

近年においては、発酵することによって単に有用物質の産生や嗜好性を改善するだけでなく、新たな生理活性の獲得、具体例としては、発酵前の原料よりも生理活性を増強する作用を有するなど、生理活性の高い発酵物自身についての検討がなされている。（例えば特許文献１〜３）
特許第３０６０９６５号 特公平０６−０１１２１６号 特許第３４０９０３８号 In recent years, fermenting not only improves the production and palatability of useful substances, but also acquires new physiological activities, such as having an effect of enhancing the physiological activity over the raw material before fermentation. Studies on fermented products with high physiological activity have been made. (For example, Patent Documents 1 to 3)
Patent No. 3060965 No. 06-011216 Japanese Patent No. 3490938

しかし、用いる原料、原料の処理方法、および用いる微生物等によっては、発酵物が生理活性を有するとは限らないばかりか、発酵すらしないこともあるといった問題点がある。つまり、生理活性の高い発酵物を得るために発酵させても、その発酵における方法および素材の選択が誤っていれば、生理活性が低いまたは生理活性を有さない発酵物しか得られないという問題点がある。   However, depending on the raw material used, the raw material processing method, the microorganism used, etc., there is a problem that the fermented product does not always have physiological activity, and may not even be fermented. In other words, even if fermentation is performed to obtain a fermented product with high physiological activity, if the method and material in the fermentation are wrongly selected, only a fermented product with low or no physiological activity can be obtained. There is a point.

本発明は、上記問題点に鑑みてなされたものであって、その目的は、生理活性の高い発酵物と、その発酵物を用いた経口用組成物および経皮用組成物とを提供することにある。   The present invention has been made in view of the above problems, and its object is to provide a fermented product having high physiological activity, and an oral composition and a transdermal composition using the fermented product. It is in.

本発明者は、動植物原料へ微生物を作用させて得られる発酵物について鋭意検討を行ったところ、パパイヤを微生物で発酵して、優れた生理活性を有する発酵物を得ることができることを見出し、本発明に至った。   The present inventor has conducted extensive studies on fermented products obtained by allowing microorganisms to act on animal and plant raw materials, and found that fermented products having excellent physiological activity can be obtained by fermenting papaya with microorganisms. Invented.

すなわち、本発明の発酵物は、パパイヤに乳酸菌を作用させることにより得られる発酵物であって、酵素阻害活性を有することを特徴としている。   That is, the fermented product of the present invention is a fermented product obtained by allowing lactic acid bacteria to act on papaya, and is characterized by having enzyme inhibitory activity.

好ましくは、上記発酵物は、チロシナーゼ阻害活性およびリパーゼ阻害活性の少なくともいずれかの酵素阻害活性を有する。   Preferably, the fermented product has an enzyme inhibitory activity of at least one of tyrosinase inhibitory activity and lipase inhibitory activity.

さらに好ましくは、上記乳酸菌は、ラクトバチルス属、ビフィドバクテリウム属、およびバチルス属のいずれかに分類される１種または２種以上の乳酸菌である。   More preferably, the lactic acid bacterium is one or more lactic acid bacteria classified into any of the genus Lactobacillus, Bifidobacterium, and Bacillus.

また、本発明の発酵物は、パパイヤに乳酸菌を作用させることにより得られる発酵物であって、上記乳酸菌はバチルス属に分類される乳酸菌であり、抗酸化活性を有することを特徴としている。   The fermented product of the present invention is a fermented product obtained by allowing lactic acid bacteria to act on papaya, and the lactic acid bacteria are lactic acid bacteria classified into the genus Bacillus and have an antioxidant activity.

さらに、本発明の経口用組成物は、上記発酵物を含有することを特徴としている。   Furthermore, the oral composition of the present invention is characterized by containing the fermented product.

また、本発明の経皮用組成物は、上記発酵物を含有することを特徴としている。   The transdermal composition of the present invention is characterized by containing the fermented product.

本発明によれば、所定の条件下でパパイヤに乳酸菌を作用させると、酵素阻害活性（チロシナーゼ阻害活性、リパーゼ阻害活性など）や抗酸化活性（例えばＳＯＤ活性など）といった生理活性を有する発酵物を得ることができる。さらに、その発酵物を用いれば、美容効果等を有する経口用組成物および経皮用組成物を得ることができる。   According to the present invention, when a lactic acid bacterium is allowed to act on papaya under predetermined conditions, a fermented product having physiological activities such as enzyme inhibitory activity (tyrosinase inhibitory activity, lipase inhibitory activity, etc.) and antioxidant activity (eg, SOD activity) is obtained. Obtainable. Furthermore, if the fermented product is used, an oral composition and a transdermal composition having a cosmetic effect and the like can be obtained.

以下、本発明の発酵物について説明する。なお、以下に説明する形態は、本発明を限定するものでない。すなわち、本発明は、本発明の趣旨の範囲内で種々改変することができる。   Hereinafter, the fermented product of the present invention will be described. In addition, the form demonstrated below does not limit this invention. That is, the present invention can be variously modified within the scope of the gist of the present invention.

（パパイヤ）
パパイヤとは、パパイヤ科に属する植物であって、その果実はいわゆるトロピカルフルーツとして人々に愛されている。また、パパイヤには、ビタミンＣ、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、食物繊維（例えばペクチン）などが含まれているため、有用な食品素材である。なお、本発明においては、パパイヤの果実を用いることが好ましい。 (papaya)
Papaya is a plant belonging to the family Papaya, and its fruits are loved by people as so-called tropical fruits. Papaya is a useful food material because it contains vitamin C, tartaric acid, malic acid, citric acid, dietary fiber (eg, pectin), and the like. In the present invention, it is preferable to use papaya fruit.

本発明の発酵物を得る場合、通常、洗浄後のパパイヤを、または、洗浄後にさらにカット・摩砕などの当業者が通常行う方法によって破砕したパパイヤを用いる。破砕したパパイヤを用いる場合、その破砕物の大きさに特に制限はないが、好ましくは、粒経が５０００μｍ以下、より好ましくは２０μｍ〜５０００μｍ程度の破砕物が用いられる。   When obtaining the fermented product of the present invention, the papaya that has been washed is usually used, or papaya that has been crushed by a method commonly used by those skilled in the art such as cutting and grinding after washing. When the crushed papaya is used, the size of the crushed material is not particularly limited, but a crushed material having a particle size of 5000 μm or less, more preferably about 20 μm to 5000 μm is preferably used.

本発明においては、破砕後、固液分離して得られた溶液（搾汁）も破砕物として用いることもできる。さらに、上記パパイヤまたはその破砕物を抽出した後、固液分離して用いてもよい。なお、パパイヤ由来の成分、すなわち不溶性成分および水溶性成分の全ての成分を発酵することができる点では、パパイヤまたはその破砕物を固液分離せずに用いることが好ましい。   In the present invention, a solution (squeezed juice) obtained by solid-liquid separation after crushing can also be used as a crushed product. Furthermore, after extracting the papaya or its crushed material, it may be used after solid-liquid separation. In addition, it is preferable to use a papaya or its crushed material, without solid-liquid separation, at the point which can ferment the component derived from a papaya, ie, all components, an insoluble component and a water-soluble component.

上記パパイヤおよびその破砕物は、雑菌の繁殖を防ぐ目的で、加熱処理が施されてもよく、冷凍保存されてもよい。特に、冷凍保存は、パパイヤに含有される成分および風味の保持の観点から好ましく、直ちに次工程を行わない場合に採用される。   The papaya and its crushed material may be subjected to heat treatment or may be stored frozen for the purpose of preventing propagation of various bacteria. In particular, frozen storage is preferable from the viewpoint of maintaining components and flavor contained in papaya, and is employed when the next step is not performed immediately.

上記パパイヤまたはその破砕物には、発酵を効率的に行うために、必要に応じて、加水されてもよい。加水量には、特に制限はない。例示すれば、パパイヤまたはその破砕物１質量部に対して、加える水の量の下限値は０．１質量部以上、好ましくは０．５質量部以上、加える水の量の上限値は３０質量部以下、好ましくは１０質量部以下とすればよい。   In order to perform fermentation efficiently, the papaya or a crushed product thereof may be added with water as necessary. There is no restriction | limiting in particular in the amount of water. For example, with respect to 1 part by mass of papaya or its crushed material, the lower limit of the amount of water added is 0.1 parts by mass or more, preferably 0.5 parts by mass or more, and the upper limit of the amount of water to be added is 30 parts by mass. Or less, preferably 10 parts by mass or less.

（酵素処理工程および中和処理工程）
次に、パパイヤまたはその破砕物の発酵を促進するための工程について説明する。このような発酵を促進するための工程としては、例えば、酵素による細胞壁分解処理工程、中和処理工程が挙げられる。なお、この工程は、上記細胞壁分解処理工程および中和処理工程のいずれか１種だけ用いてもよいし、両方を用いてもよい。 (Enzyme treatment process and neutralization process)
Next, a process for promoting fermentation of papaya or its crushed material will be described. Examples of the process for promoting such fermentation include a cell wall decomposing process using an enzyme and a neutralizing process. In addition, this process may use only 1 type of the said cell wall decomposition | disassembly process process and a neutralization process process, and may use both.

酵素による細胞壁分解処理工程において、用いることができる酵素としては、例えば、アミラーゼ、ペクチナーゼ、エンドアラバナーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、エンドβ−グルカナーゼ、エキソβ−グルカナーゼ、キシラーゼ、β−グルコシダーゼなどが挙げられる。そのうち、ペクチナーゼを用いることが好ましい。もちろん、上記酵素を混合して用いてもよい。特に好ましくは、ペクチナーゼと、アミラーゼ、エンドアラバナーゼ、エンドβ−グルカナーゼ、エキソβ−グルカナーゼ、キシラナーゼ、およびβ−グルコシダーゼからなる群より選択される少なくとも１種の酵素との混合酵素である。これらの添加量は、酵素の種類によって異なるが、通常、酵素濃度が、０．０００１〜０．５質量／容量％、好ましくは０．０００５〜０．３質量／容量％となるように添加される。   Examples of the enzyme that can be used in the cell wall degradation treatment step with an enzyme include amylase, pectinase, endoarabanase, cellulase, hemicellulase, endo β-glucanase, exo β-glucanase, xylase, β-glucosidase and the like. . Of these, pectinase is preferably used. Of course, you may mix and use the said enzyme. Particularly preferred is a mixed enzyme of pectinase and at least one enzyme selected from the group consisting of amylase, endoarabanase, endo β-glucanase, exo β-glucanase, xylanase, and β-glucosidase. The amount of addition varies depending on the type of enzyme, but is usually added so that the enzyme concentration is 0.0001 to 0.5 mass / volume%, preferably 0.0005 to 0.3 mass / volume%. The

酵素処理の条件は、処理するパパイヤの形状、酵素の種類、酵素濃度に応じて適宜設定すればよい。例えば、酵素処理における温度は、その下限値を３０℃以上、好ましくは３５℃以上とすればよく、その上限値を７５℃以下、好ましくは７０℃以下とすればよい。酵素処理における時間（酵素反応の時間）は、例えば、その下限値を３０分間以上、好ましくは１時間以上、その上限値を７２時間以下、好ましくは４８時間以下とすればよい。   The conditions for the enzyme treatment may be appropriately set according to the shape of the papaya to be treated, the type of enzyme, and the enzyme concentration. For example, the lower limit of the temperature in the enzyme treatment may be 30 ° C or higher, preferably 35 ° C or higher, and the upper limit may be 75 ° C or lower, preferably 70 ° C or lower. The time for enzyme treatment (enzyme reaction time) may be, for example, a lower limit of 30 minutes or longer, preferably 1 hour or longer, and an upper limit of 72 hours or shorter, preferably 48 hours or shorter.

酵素処理を行えば、例えば、発酵の阻害要因（例えば、ペクチン等の細胞壁を構成する多糖類）を分解することができ、その結果、発酵を短時間で終了させることができる。このように発酵を短時間で終了させることができれば、例えば、発酵により損失させたくない成分（例えばアスコルビン酸など）がある場合は、そのような成分の損失を最小限とすることが可能となる。具体例でいえば、発酵による損失（例えばアスコルビン酸の損失）が少ないパパイヤの発酵物を得ることができる。   When the enzyme treatment is performed, for example, a fermentation inhibiting factor (for example, a polysaccharide constituting a cell wall such as pectin) can be decomposed, and as a result, the fermentation can be completed in a short time. Thus, if fermentation can be completed in a short time, for example, when there is a component (such as ascorbic acid) that is not desired to be lost by fermentation, the loss of such component can be minimized. . As a specific example, a fermented papaya with less loss due to fermentation (for example, loss of ascorbic acid) can be obtained.

さらに、例えば、酵素処理により多糖類が分解されれば、多糖類の分解物（単糖類、オリゴ糖など）が生成される。これらは、得られるパパイヤの発酵物中における新たな成分となる。例えば、オリゴ糖は、整腸作用、発酵物の可溶化を促進するなどの様々な効果を有する。単糖類は、さらに微生物の増殖に必要な栄養素となり、微生物の有用物質の産生を促進すると考えられる。   Furthermore, for example, when a polysaccharide is decomposed by an enzyme treatment, a degradation product (monosaccharide, oligosaccharide, etc.) of the polysaccharide is generated. These become new components in the fermented papaya obtained. For example, oligosaccharides have various effects such as intestinal regulation and promoting solubilization of fermented products. Monosaccharides are thought to further become nutrients necessary for the growth of microorganisms and promote the production of useful substances of microorganisms.

中和処理は、最適なｐＨで発酵するために行われる。例えば、パパイヤまたはその破砕物のｐＨを４．０〜７．５に調節する。ｐＨの調節は、当業者が用いる通常の方法を用いて行われる。例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、重曹、クエン酸ナトリウムなどのｐＨ調整剤、電解水、緩衝液（例えばクエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩衝液）などを添加して、ｐＨを調節することができる。   The neutralization treatment is performed for fermentation at an optimum pH. For example, the pH of papaya or its crushed material is adjusted to 4.0 to 7.5. Adjustment of pH is performed using the usual method used by those skilled in the art. For example, pH adjusters such as sodium hydroxide, calcium hydroxide, sodium carbonate, sodium bicarbonate, sodium citrate, etc., electrolyzed water, buffer solution (eg citrate buffer solution, acetate buffer solution, phosphate buffer solution) etc. are added. PH can be adjusted.

上述の酵素処理および中和処理は、いずれも、発酵を促進させて比較的短時間で発酵することにより、パパイヤに含有される有効な成分の損失を少なくすることができる点で有用である。そして、酵素処理または中和処理したパパイヤまたはその破砕物と、発酵能力が高い微生物（例えば後述する特定の乳酸菌等）とを組合せて、下記の発酵工程で発酵を行えば、比較的短時間（例えば、２４時間〜７２時間）で発酵を完了させることができる。   Both the enzyme treatment and the neutralization treatment described above are useful in that the loss of effective components contained in papaya can be reduced by accelerating fermentation and fermenting in a relatively short time. And, by combining a papaya treated with an enzyme or neutralization or a crushed product thereof with a microorganism having a high fermentation ability (for example, a specific lactic acid bacterium described later) and performing fermentation in the following fermentation step, a relatively short time ( For example, fermentation can be completed in 24 hours to 72 hours).

（発酵工程）
次に、発酵工程について説明する。上記パパイヤまたはその破砕物を発酵させることにより、または、上記酵素処理および中和処理のうちの少なくとも１種で処理したパパイヤを発酵させることにより、本発明の発酵物を得ることができる。 (Fermentation process)
Next, the fermentation process will be described. The fermented product of the present invention can be obtained by fermenting the papaya or a crushed product thereof or by fermenting the papaya treated with at least one of the enzyme treatment and the neutralization treatment.

発酵としては、乳酸発酵、クエン酸発酵、アルコール発酵、酢酸発酵などが挙げられる。これらの中でも、乳酸発酵が好ましく、これらの発酵を組み合わせてもよい。発酵させる時間は、例えば２４時間〜７２時間で終了することが好ましい。また、発酵の種類に応じては、乳酸菌、酵母菌、酢酸菌などが用いられる。酵母や酢酸菌は、耐酸性が強いため、特に好ましく用いられる。   Examples of fermentation include lactic acid fermentation, citric acid fermentation, alcohol fermentation, and acetic acid fermentation. Among these, lactic acid fermentation is preferable, and these fermentations may be combined. The fermentation time is preferably finished, for example, in 24 hours to 72 hours. Moreover, lactic acid bacteria, yeasts, acetic acid bacteria, etc. are used according to the kind of fermentation. Yeast and acetic acid bacteria are particularly preferably used because of their strong acid resistance.

（乳酸発酵）
乳酸発酵は、上記パパイヤまたはその破砕物を乳酸菌と接触させることによって行われる。乳酸発酵は、得られる発酵物中に乳酸が含有される点で好ましい。含有される乳酸の量については、発酵物の乾燥質量１００ｇ当り、乳酸を乾燥質量換算で０．１ｍｇ（０．０００１質量％）以上、好ましくは０．５ｍｇ（０．０００５質量％）以上、より好ましくは１ｍｇ（０．００１質量％）以上とするのがよい。 (Lactic acid fermentation)
Lactic acid fermentation is performed by bringing the papaya or its crushed material into contact with lactic acid bacteria. Lactic acid fermentation is preferable in that lactic acid is contained in the obtained fermented product. Regarding the amount of lactic acid contained, per 100 g of dry mass of the fermented product, lactic acid is 0.1 mg (0.0001 mass%) or more, preferably 0.5 mg (0.0005 mass%) or more, in terms of dry mass. Preferably it is 1 mg (0.001 mass%) or more.

本発明で用いることができる乳酸菌としては、例えば、ロイコノストック属、ラクトバチルス属、ストレプトコッカス属、ビフィドバクテリウム属、ペディオコッカス属、エンテロコッカス属、およびペディオコッカス属に分類される乳酸菌が挙げられる。本発明で用いることができる乳酸菌の具体例としては、ロイコノストック・メセントロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ブレビス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・デルブロイキ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ（さらに具体的にはＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ ｓｕｂｓｐ． ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ））、ラクトバチルス・ガッセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、ストレプトコッカス・フェカリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ラクティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌａｃｔｉｓ）、バチルス・メセンテリカス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃｕｓ）などが挙げられる。   Examples of lactic acid bacteria that can be used in the present invention include lactic acid bacteria classified into the genus Leuconostoc, Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium, Pediococcus, Enterococcus, and Pediococcus. Can be mentioned. Specific examples of lactic acid bacteria that can be used in the present invention include Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus brevis, Lactobacillus delvis. Lactobacillus delbrueckii (more specifically, Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus), Lactobacillus gasseri (Lactobacillus gassili), Lactobacillus acidophilus acillus casei), Streptococcus thermophilus, Streptococcus faecalis (Bifidobacterium longum), Bifidobacterium longum (Bifidobacterium longum) lactis), Bacillus mesentericus, and the like.

本発明では、発酵させる素材としてパパイヤを用いているので、乳成分を要求しない乳酸菌、例えば漬物などで見られる乳酸菌を用いてもよい。そのような乳酸菌の具体例としては、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ロイコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、エンテロコッカス・フェーカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、エンテロコッカス・フェーシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）、ラクトバチルス・ブレビス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ）、ペディオコッカス・アシディラクティシ（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｃｉｄｉｌａｃｔｉｃｉ）、ペディオコッカス・ペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）、ペディオコッカス・ハロフィラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ）などが挙げられる。   In the present invention, papaya is used as a material to be fermented, so lactic acid bacteria that do not require milk components, such as lactic acid bacteria found in pickles, may be used. Specific examples of such lactic acid bacteria include Lactobacillus plantarum, Leuconostoc mesenteroides, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecalis, (Lactobacillus brevis), Pediococcus acidilactici, Pediococcus pentoaceaceus, Pediococcus halophyllus (Pediococcus halophilus) lus).

なお、本発明において、上記乳酸菌は、単独で用いてもよく、違う種類の乳酸菌を組み合わせて用いてもよい。   In the present invention, the lactic acid bacteria may be used alone or in combination with different types of lactic acid bacteria.

本発明において、微生物（特に乳酸菌）を用いて発酵を行えば、得られる発酵物は、酵素阻害活性および抗酸化活性の少なくともいずれかの活性を有する物となる。ここでいう酵素阻害活性としては、例えば、チロシナーゼ阻害活性、リパーゼ阻害活性、グルコシダーゼ阻害活性（例えばα−グルコシダーゼ阻害活性）、エラスターゼ阻害活性が挙げられる。また、ここでいう抗酸化活性としては、例えば、スーパーオキシドジスムターゼ活性（ＳＯＤ活性）が挙げられる。よって、微生物（特に乳酸菌）を用いてパパイヤを発酵させることは有用である。   In the present invention, if fermentation is performed using microorganisms (particularly lactic acid bacteria), the obtained fermented product has at least one of enzyme inhibitory activity and antioxidant activity. Examples of the enzyme inhibitory activity include tyrosinase inhibitory activity, lipase inhibitory activity, glucosidase inhibitory activity (for example, α-glucosidase inhibitory activity), and elastase inhibitory activity. Moreover, as an antioxidant activity here, superoxide dismutase activity (SOD activity) is mentioned, for example. Therefore, it is useful to ferment papaya using microorganisms (particularly lactic acid bacteria).

発酵を行うにあたり、パパイヤまたはその破砕物１００質量部に対して、微生物（特に乳酸菌）は、乾燥菌体質量で０．００５〜１０質量部、好ましくは０．０１〜５．０質量部添加するのがよい。   In performing fermentation, the microorganism (particularly lactic acid bacteria) is added in an amount of 0.005 to 10 parts by mass, preferably 0.01 to 5.0 parts by mass with respect to 100 parts by mass of papaya or its crushed material. It is good.

また、乳酸菌の優先的な生育のために、生育用の添加物を添加してもよい。ここでいう生育用の添加物としては、例えば、グルタミン酸またはその塩、酵母エキス、ペプトンなどが挙げられる。生育用の添加物の添加量は、特に限定されないが、パパイヤまたはその破砕物に対して０．０５〜１質量％程度、好ましくは０．２質量％程度とするのがよい。   Moreover, you may add the additive for growth for the preferential growth of lactic acid bacteria. Examples of the growth additive herein include glutamic acid or a salt thereof, yeast extract, peptone, and the like. Although the addition amount of the additive for growth is not particularly limited, it is about 0.05 to 1% by mass, preferably about 0.2% by mass with respect to papaya or its crushed material.

また、乳酸菌の発酵を促進するために、乳酸菌代謝性の糖を添加してもよい。この糖の添加は、糖分含量が少ない植物（例えば糖分含量が１質量％未満の植物）を発酵させる場合に有用である。もちろん、発酵の促進および発酵物への甘味の付加という目的で糖を添加してもよい。糖を添加する場合、その種別は特に限定されないが、乳酸菌が生育または発酵に利用することができる糖を添加することが好ましく、例えば、庶糖、ぶどう糖、果糖、麦芽糖などを添加するのが好ましい。もちろん、ここに例示した糖とは別の糖を添加してもよい。添加する糖の量については、糖分がパパイヤの糖分と合わせて約１〜６質量％になるように加えることが好ましい。   Moreover, in order to promote fermentation of lactic acid bacteria, lactic acid bacteria metabolic sugar may be added. This addition of sugar is useful when fermenting a plant having a low sugar content (for example, a plant having a sugar content of less than 1% by mass). Of course, sugar may be added for the purpose of promoting fermentation and adding sweetness to the fermented product. When sugar is added, the type is not particularly limited, but it is preferable to add sugar that can be used for growth or fermentation of lactic acid bacteria. For example, sucrose, glucose, fructose, maltose and the like are preferably added. Of course, sugars other than the sugars exemplified here may be added. About the quantity of the sugar to add, it is preferable to add so that sugar content may become about 1-6 mass% in total with the sugar content of papaya.

乳酸発酵は、乳酸菌が優先的に増殖できる環境をつくるため、パパイヤまたはその破砕物のｐＨを予め中和処理により調節しておくことが好ましい。例えば、ラクトバチルス・プランタラムを用いる場合は、ｐＨを４．０程度に調節した後に発酵を開始すれば、短期間でその発酵を終了させることができる。   In lactic acid fermentation, in order to create an environment in which lactic acid bacteria can proliferate preferentially, it is preferable to previously adjust the pH of papaya or its crushed material by neutralization treatment. For example, in the case of using Lactobacillus plantarum, if the fermentation is started after adjusting the pH to about 4.0, the fermentation can be completed in a short period of time.

乳酸発酵は、アスコルビン酸の分解を抑制する観点から、嫌気性条件下で行うことが好ましい。嫌気性条件は、例えば、パパイヤまたはその破砕物を発酵槽に入れた後、脱気することにより、または発酵槽を密封するか、窒素、二酸化炭素などのガスで満たすか、減圧することにより、あるいはそれらを組み合わせることにより得られる。また、嫌気条件下で発酵を行うことにより、得られる発酵物の風味も良くなる。   Lactic acid fermentation is preferably performed under anaerobic conditions from the viewpoint of suppressing the decomposition of ascorbic acid. Anaerobic conditions are, for example, by putting papaya or its crushed material into a fermenter and then degassing, or by sealing the fermenter, filling with a gas such as nitrogen or carbon dioxide, or reducing the pressure. Or it is obtained by combining them. Moreover, the flavor of the fermented material obtained by performing fermentation on anaerobic conditions also becomes good.

乳酸発酵の条件に特に制限はない。発酵温度は、通常、４℃〜５０℃で行われ得る。発酵時間は、発酵温度に応じて適宜設定すればよく、２０℃〜５０℃で発酵を行う場合、１２時間〜７２時間、好ましくは２４時間〜７２時間である。さらに、風味を高める目的で４℃〜１０℃の低温発酵を行う場合は、アスコルビン酸などのパパイヤに含有される成分の損失を考慮すると、５日間〜１４日間が好ましい。   There are no particular restrictions on the conditions for lactic acid fermentation. Fermentation temperature can be normally performed at 4 to 50 degreeC. What is necessary is just to set fermentation time suitably according to fermentation temperature, and when performing fermentation at 20 to 50 degreeC, they are 12 hours-72 hours, Preferably they are 24 hours-72 hours. Furthermore, when performing low-temperature fermentation at 4 ° C. to 10 ° C. for the purpose of enhancing the flavor, it is preferably 5 to 14 days in consideration of loss of components contained in papaya such as ascorbic acid.

乳酸発酵は、糖を加えて発酵を停止させることができる。このような糖としては、糖アルコール（例えば、ソルビトール）、オリゴ糖（例えば、マルトオリゴ糖、キトオリゴ糖、フラクトオリゴ糖）などが挙げられる。このようなオリゴ糖は、整腸作用、う蝕の予防などに効果があり、得られる発酵物に機能性を付与し得る。   Lactic acid fermentation can be stopped by adding sugar. Examples of such sugars include sugar alcohols (for example, sorbitol), oligosaccharides (for example, maltooligosaccharide, chitooligosaccharide, fructooligosaccharide) and the like. Such oligosaccharides are effective for intestinal regulation, prevention of dental caries, and the like, and can impart functionality to the obtained fermented product.

乳酸発酵は、パパイヤ中の成分を資化して有機酸やオリゴ糖などの有用成分を産生するだけでなく、発酵物を低いｐＨに維持できるため、他の雑菌の繁殖を防ぐことも可能である。また、乳酸菌を添加するため、風味の改善や整腸作用、酵素阻害作用などの生理活性の高いパパイヤ発酵物を得ることができる。   Lactic acid fermentation not only produces components such as organic acids and oligosaccharides by assimilating the components in papaya, but also can maintain the fermented product at a low pH, thus preventing the propagation of other bacteria. . In addition, since lactic acid bacteria are added, a fermented papaya product having high physiological activities such as flavor improvement, intestinal regulation and enzyme inhibition can be obtained.

（クエン酸発酵）
クエン酸発酵は、一般的には、酵母を、パパイヤまたはその破砕物と好気的条件下で接触させて培養することによって行われる。クエン酸発酵において、乳酸菌をさらに添加して発酵すると、酵母の増殖が促進されやすく、さらに得られる発酵物の嗜好性も高まるため好ましい。 (Citric acid fermentation)
Citric acid fermentation is generally performed by culturing yeast in contact with papaya or a crushed material thereof under aerobic conditions. In citric acid fermentation, it is preferable to add lactic acid bacteria and ferment, because the growth of yeast is easily promoted and the preference of the obtained fermented product is also increased.

酵母としては、清酒酵母、ワイン酵母、ビール酵母、パン酵母などが用いられる。例えば、サッカロミセス属、シゾサッカロミセス属などに属する酵母が用いられ、好ましくは、サッカロミセス・セレビシエ、サッカロミセス・パストリアヌス、シゾサッカロミセス・ポンベなどが挙げられる。特にアミノ酸やビタミンなどの有用物質を産生する点で、サッカロミセス・セレビシエおよびその単離株が好ましい。   As yeast, sake yeast, wine yeast, beer yeast, baker's yeast and the like are used. For example, yeast belonging to the genus Saccharomyces, Schizosaccharomyces, etc. is used, and preferred examples include Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces pastorianus, Schizosaccharomyces pombe and the like. In particular, Saccharomyces cerevisiae and its isolates are preferred in terms of producing useful substances such as amino acids and vitamins.

酵母は、パパイヤまたはその破砕物１００質量部に対して、乾燥体質量で０．００１〜１５質量部、好ましくは０．０１〜１０質量部添加する。   Yeast is added in an amount of 0.001 to 15 parts by mass, preferably 0.01 to 10 parts by mass with respect to 100 parts by mass of papaya or its crushed material.

クエン酸発酵は、パパイヤまたはその破砕物と酵母とを発酵槽に入れ、通気攪拌しながら、４℃〜４０℃、好ましくは１０℃〜３５℃で２４時間〜１４日間行う。特にパパイヤが酸性であると酵母発酵により香気成分が高くなるため、より嗜好性の高い発酵物を得ることができる。   Citric acid fermentation is carried out at 4 ° C. to 40 ° C., preferably 10 ° C. to 35 ° C. for 24 hours to 14 days while putting papaya or its crushed material and yeast in a fermenter and stirring with aeration. In particular, when the papaya is acidic, aroma components are increased by yeast fermentation, so that a fermented product with higher palatability can be obtained.

クエン酸発酵は、酵母を用いて行われるため、発酵物中に酵母が産生するアミノ酸、タンパク質、ビタミン類などが含まれ、栄養価が高く嗜好性に優れる点で好ましい。   Since citric acid fermentation is performed using yeast, amino acids, proteins, vitamins and the like produced by yeast are contained in the fermented product, which is preferable in terms of high nutritional value and excellent palatability.

（アルコール発酵および酢酸発酵）
アルコール発酵は、酵母を、パパイヤまたはその破砕物と嫌気条件下で接触させて培養することによって行われる。アルコール発酵に用いられる酵母の種類および量は、上記クエン酸発酵の場合と同様である。発酵条件も、嫌気条件にすること以外は、上記クエン酸発酵の場合と同様である。こうしてアルコール発酵で得られたパパイヤ発酵物は、さらに以下で述べる酢酸発酵に供することが好ましい。 (Alcohol fermentation and acetic acid fermentation)
Alcohol fermentation is performed by culturing yeast in contact with papaya or its crushed material under anaerobic conditions. The kind and amount of yeast used for alcoholic fermentation are the same as in the case of the citric acid fermentation. The fermentation conditions are the same as in the above citric acid fermentation except that the conditions are anaerobic. Thus, it is preferable that the fermented papaya obtained by alcohol fermentation is further subjected to acetic acid fermentation described below.

酢酸発酵は、パパイヤまたはその破砕物にアルコールを加え、所定のアルコール濃度にした後、酢酸発酵し得る微生物（酢酸菌）を添加することによって行われる。酢酸発酵は、一般的には、微生物（酢酸菌）を、パパイヤまたはその破砕物と好気的条件下で接触させて培養することによって行われる。あるいは上記のアルコール発酵によって得られたパパイヤ発酵物に酢酸菌を添加して二段発酵させてもよい。   Acetic acid fermentation is performed by adding alcohol to papaya or a crushed product thereof to obtain a predetermined alcohol concentration and then adding a microorganism (acetic acid bacterium) capable of acetic acid fermentation. In general, acetic acid fermentation is performed by culturing a microorganism (acetic acid bacterium) in contact with papaya or a crushed material thereof under aerobic conditions. Alternatively, acetic acid bacteria may be added to the papaya fermented product obtained by the above alcohol fermentation to cause two-stage fermentation.

アルコール濃度は、酢酸菌が生育できる濃度であれば、特に制限されず、発酵時間などに応じて適宜調整すればよい。好ましくは１０質量／容量％以下、より好ましくは１〜６質量／容量％である。   The alcohol concentration is not particularly limited as long as it is a concentration at which acetic acid bacteria can grow, and may be appropriately adjusted according to fermentation time and the like. Preferably it is 10 mass / volume% or less, More preferably, it is 1-6 mass / volume%.

酢酸菌としては、アセトバクター属に属する微生物、例えば、アセトバクター・アセチ、アセトバクター・パステウリアヌス、アセトバクター・ハンセニなどが挙げられる。   Examples of the acetic acid bacteria include microorganisms belonging to the genus Acetobacter, such as Acetobacter aceti, Acetobacter pasteurianus, Acetobacter hanseni, and the like.

酢酸菌は、適切な培地で１５℃〜４０℃、好ましくは２５℃〜３５℃にて６〜４８時間予備培養しておくことが好ましい。予備培養した酢酸菌は、例えば、次のようにして得られる。まず、ポテト２００ｇ、破砕酵母３０ｇ、肝臓エキス２５ｇ、肉エキス５ｇ、チオグリコール酸培地１０ｇ、グルコース５ｇ、グリセロール１５ｇ、および炭酸カルシウム１５ｇを含有する１Ｌの酢酸菌培地（ｐＨ７．０）に酢酸菌を添加して、１５℃〜４０℃にて２４時間予備培養する。次いで、得られた培養物を遠心分離し、回収した菌体を滅菌水で洗浄し、再度遠心分離して上清を除去することによって、予備培養した酢酸菌が得られる。   The acetic acid bacteria are preferably precultured in an appropriate medium at 15 to 40 ° C, preferably 25 to 35 ° C for 6 to 48 hours. The pre-cultured acetic acid bacteria can be obtained, for example, as follows. First, acetic acid bacteria were added to 1 L of acetic acid bacteria medium (pH 7.0) containing 200 g of potato, 30 g of crushed yeast, 5 g of liver extract, 5 g of meat extract, 10 g of thioglycolic acid medium, 5 g of glucose, 15 g of glycerol, and 15 g of calcium carbonate. Add and pre-incubate at 15-40 ° C. for 24 hours. Subsequently, the obtained culture is centrifuged, and the collected bacterial cells are washed with sterilized water, and centrifuged again to remove the supernatant, whereby a precultured acetic acid bacterium is obtained.

酢酸発酵は、攪拌培養、振盪培養、および静置培養のいずれでも行うことができる。発酵温度は１０℃〜４０℃、好ましくは２０℃〜３５℃で行われる。発酵時間は、酢酸菌の添加量に応じて適宜設定され、通常、１日〜１週間が好適である。   Acetic acid fermentation can be performed by any of stirring culture, shaking culture, and stationary culture. The fermentation temperature is 10 ° C to 40 ° C, preferably 20 ° C to 35 ° C. Fermentation time is suitably set according to the addition amount of acetic acid bacteria, and usually 1 day to 1 week is suitable.

上記発酵後は、さらに必要に応じて、殺菌または除菌してもよい。例えば、加圧式殺菌、熱交換式殺菌、蒸煮殺菌、限外ろ過などの当業者が通常用いる方法が用いられる。加熱殺菌の場合、例えば、６０℃〜１２０℃にて５秒間〜１２時間行われる。   After the fermentation, it may be further sterilized or sterilized as necessary. For example, methods commonly used by those skilled in the art such as pressure sterilization, heat exchange sterilization, steam sterilization, and ultrafiltration are used. In the case of heat sterilization, for example, it is performed at 60 ° C. to 120 ° C. for 5 seconds to 12 hours.

（発酵物）
このようにパパイヤを発酵して得られる発酵物（パパイヤ発酵物）は、そのまま使用してもよいし、必要に応じて、その後当業者が通常用いる処理方法によって種々の態様で使用してもよい。このような態様としては、例えば、上記のように発酵物を固液分離して上清を回収することにより得られた発酵エキス、該発酵物または該発酵エキスを濃縮処理した発酵ペースト、該発酵物または該発酵エキスを乾燥・粉末化処理した発酵粉末または発酵エキス末などが挙げられる。これらは、すべてパパイヤ発酵物の一態様である。 (Fermented product)
The fermented product obtained by fermenting papaya in this manner (papaya fermented product) may be used as it is, or may be used in various embodiments depending on the processing methods usually used by those skilled in the art, if necessary. . Examples of such an embodiment include a fermented extract obtained by solid-liquid separation of a fermented product as described above and collecting the supernatant, a fermented paste obtained by concentrating the fermented product or the fermented extract, and the fermentation Or a fermented powder or fermented extract powder obtained by drying / pulverizing the product or the fermented extract. These are all aspects of the papaya fermented product.

上記パパイヤ発酵物の実施態様の１つに、発酵粉末または発酵エキス末がある。それら発酵粉末または発酵エキス末は、具体的には、該発酵物または発酵エキスを、乾燥、粉末化することによって得られる。乾燥は、当業者が通常用いる種々の方法により行えばよいが、凍結乾燥、噴霧乾燥が好ましく用いられる。噴霧乾燥は、必要に応じて、デキストリン、シクロデキストリン、デンプン、マルトースなどの賦形剤を添加して行われる。発酵物または発酵エキスと賦形剤との混合比は、発酵物を乾燥する場合、好ましくは質量比で１：５〜１０：１、発酵エキスを乾燥する場合、好ましくは質量比１：１０〜５：１である。上記混合比で乾燥することにより得られる発酵粉末または発酵エキス末の褐変を防ぐことができる。   One embodiment of the papaya fermented product is a fermented powder or fermented extract powder. Specifically, these fermented powder or fermented extract powder can be obtained by drying and pulverizing the fermented product or fermented extract. Drying may be performed by various methods commonly used by those skilled in the art, but freeze drying and spray drying are preferably used. Spray drying is performed by adding excipients such as dextrin, cyclodextrin, starch, and maltose as necessary. When the fermented product is dried, the mixing ratio of the fermented product or fermented extract and the excipient is preferably 1: 5 to 10: 1 by mass ratio, and when the fermented extract is dried, the mass ratio is preferably 1:10 to 10: 1. 5: 1. Browning of the fermented powder or fermented extract powder obtained by drying at the above mixing ratio can be prevented.

本発明の発酵物は、香りおよび風味がよく嗜好性に優れている。そして、発酵によって、パパイヤが本来有しない新規な機能（活性）を付与する、または、パパイヤが本来有する生理活性を増強することができる。つまり、発酵前と比べて、発酵後の方が、高い生理活性を有する発酵物を製造することができる。ここでいう新規な機能（活性）および生理活性としては、例えば酵素阻害活性、抗酸化活性などが挙げられる。   The fermented product of the present invention has a good fragrance and flavor and is excellent in palatability. And by fermentation, the new function (activity) which papaya originally does not have can be provided, or the physiological activity which papaya originally has can be strengthened. That is, a fermented product having higher physiological activity can be produced after fermentation than before fermentation. Examples of the novel function (activity) and physiological activity mentioned here include enzyme inhibitory activity and antioxidant activity.

パパイヤが本来有している生理活性であって増強される生理活性の具体例としては、チロシナーゼ阻害活性、リパーゼ阻害活性、スーパーオキシドジスムターゼ活性（ＳＯＤ活性）が挙げられる。このような活性を有するパパイヤ発酵物は、様々な機能性食品や医薬品原料として使用することができる。   Specific examples of the physiological activity that is inherently enhanced and enhanced by papaya include tyrosinase inhibitory activity, lipase inhibitory activity, and superoxide dismutase activity (SOD activity). The papaya fermented product having such activity can be used as various functional foods and pharmaceutical raw materials.

本発明のパパイヤ発酵物は、上述のように、チロシナーゼ阻害活性、リパーゼ阻害活性、抗酸化活性といった様々な生理活性を有するため、さまざまな作用および効果が期待できる。例えば、チロシナーゼ阻害活性によれば、肌の美白効果、クスミの改善等の効果が期待できる。抗酸化活性によれば、美容効果、老化予防などが期待できる。リパーゼ阻害活性によれば、脂質の消化吸収抑制効果、血中脂質上昇抑制効果、抗肥満効果などが期待できる。   Since the papaya fermented product of the present invention has various physiological activities such as tyrosinase inhibitory activity, lipase inhibitory activity, and antioxidant activity as described above, various actions and effects can be expected. For example, according to the tyrosinase inhibitory activity, effects such as skin whitening effect and improvement of the skin can be expected. According to the antioxidant activity, a beauty effect, aging prevention, etc. can be expected. According to the lipase inhibitory activity, a lipid digestion absorption inhibitory effect, a blood lipid rise inhibitory effect, an anti-obesity effect, and the like can be expected.

（経口用組成物および経皮用組成物）
本発明のパパイヤ発酵物は、上記のような活性を有する。そのため、本発明のパパイヤ発酵物を含有させて経皮用組成物または経口用組成物として利用することは、きわめて有用である。 (Oral composition and transdermal composition)
The papaya fermented product of the present invention has the activity as described above. Therefore, it is very useful to contain the fermented papaya of the present invention and use it as a transdermal composition or oral composition.

本発明の経皮用組成物および経口用組成物は、上記発酵物を含有している。もちろん、必要に応じて、その他の成分を含有することができる。なお、ここでいう経口用組成物には、食品をはじめ、経口投与を目的とした医薬品、医薬部外品等が包含される。また、ここでいう経皮用組成物には、化粧品をはじめ、経皮投与を目的とした医薬品、医薬部外品等、トイレタリー用品などが包含される。   The transdermal composition and oral composition of the present invention contain the fermented product. Of course, other components can be contained as required. The oral composition mentioned here includes foods, pharmaceuticals intended for oral administration, quasi drugs and the like. Further, the transdermal composition referred to here includes cosmetics, pharmaceuticals intended for transdermal administration, quasi-drugs, toiletries and the like.

本発明の組成物中において、発酵物の含有量は特に制限されない。しかし、パパイヤ発酵物が有する生理作用を得ることを考慮すれば、次のような量とするのがよい。例えば、経口用組成物とする場合（食品など経口投与を目的とする場合）、発酵物の含有量の下限値は、０．００１質量％以上、好ましくは０．０１質量％以上とするのがよく、発酵物の含有量の上限値は、１００％以下、好ましくは７０％以下とするのがよい。経皮用組成物とする場合（化粧品などの経皮投与を目的とする場合）、発酵物の含有量の下限値は、０．００００１質量％以上、好ましくは０．０００１質量％以上とするのがよく、発酵物の含有量の上限値は、５０質量％以下、好ましくは３０質量％以下とするのがよい。   In the composition of the present invention, the content of the fermented product is not particularly limited. However, in view of obtaining the physiological effect of the papaya fermented product, the following amount is preferable. For example, when it is set as an oral composition (when aiming at oral administration, such as food), the lower limit of content of fermented material is 0.001 mass% or more, Preferably it is 0.01 mass% or more. The upper limit of the content of the fermented product is 100% or less, preferably 70% or less. In the case of a transdermal composition (for the purpose of transdermal administration such as cosmetics), the lower limit of the fermented product content is 0.00001% by mass or more, preferably 0.0001% by mass or more. The upper limit of the content of the fermented product is 50% by mass or less, preferably 30% by mass or less.

本発明の組成物は、上述のように、必要に応じて、種々の成分を含有し得る。種々の成分の含有量は、用途等を考慮して任意に決定すればよい。ここでいう種々の成分としては、例えば、通常の食品として添加し得る成分、具体的には、賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤（例えば寒天）、乳化剤、滑沢剤、湿潤剤、懸濁剤、着色料（色素）、食品添加物、調味料など、または、医薬部外品、化粧品、およびトイレタリー用品として添加し得る成分（基材、動植物抽出物など）が挙げられる。もちろん、これら種々の成分は、単独で含有させてもよく、組み合わせて含有させてもよい。   As described above, the composition of the present invention may contain various components as necessary. What is necessary is just to determine content of a various component arbitrarily in consideration of a use etc. Examples of the various components mentioned here include components that can be added as ordinary foods, specifically excipients, extenders, binders, thickeners (for example, agar), emulsifiers, lubricants, and wets. Ingredients (base materials, animal and plant extracts, etc.) that can be added as agents, suspensions, colorants (pigments), food additives, seasonings, etc., or quasi-drugs, cosmetics, and toiletries. Of course, these various components may be contained alone or in combination.

上記種々の成分の具体例としては、ローヤルゼリー、プロポリス、ビタミン類（Ａ、Ｂ群、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、葉酸、パントテン酸、ビオチン、これらの誘導体等）ミネラル（鉄、マグネシウム、カルシウム、亜鉛等）、セレン、キチン・キトサン、レシチン、ポリフェノール（カテキン類、アントシアニン類、プロアントシアニジンなどの縮合型タンニン、ガロタンニン等の加水分解型タンニン、フラボノイド類、これらの誘導体等）、カロテノイド（リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテイン等）、サポニン（イソフラボン、ジンセサノイド、グリチルリチン酸等）、キサンチン誘導体（カフェイン等）、脂肪酸、アミノ酸、タンパク質（コラーゲン、エラスチン等）、ムコ多糖類（ヒアルロン酸、コンドロイチン、デルマタン、ヘパラン、ヘパリン、ケタラン、これらの塩等）、アミノ糖（グルコサミン、アセチルグルコサミン、ガラクトサミン、アセチルガラクトサミン、ノイラミン酸、アセチルノイラミン酸、ヘキソサミン、それらの塩等）、食物繊維（難消化性デキストリン、アルギン酸、グアガム、ペクチン、グルコマンナン等）、オリゴ糖（イソマルトオリゴ糖、環状オリゴ糖等）リン脂質及びその誘導体（フォスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、セラミド等）、含硫化合物（アリイン、セパエン、タウリン、グルタチオン、メチルスルホニルメタン等）、糖アルコール、キノン類（コエンザイムＱ１０等）、リグナン類（セサミン等）、これらを含有する動植物抽出物、根菜類（ウコン、ショウガ等）、麦若葉末等のイネ科植物の緑葉、ケール等のアブラナ科植物の緑葉などが挙げられる。さらに、これら食品添加物を含む飲料、例えば、植物発酵ジュース、野菜ジュース（例えば、人参ジュース）、植物抽出物、果汁などを上記種々の成分として利用してもよく、これらを含有させることにより、機能性または栄養価の高い飲料を得ることができる。   Specific examples of the various components include royal jelly, propolis, vitamins (A, B group, C, D, E, K, folic acid, pantothenic acid, biotin, derivatives thereof, etc.) minerals (iron, magnesium, calcium, Zinc, etc.), selenium, chitin / chitosan, lecithin, polyphenol (condensed tannins such as catechins, anthocyanins, proanthocyanidins, hydrolyzed tannins such as gallotannins, flavonoids, derivatives thereof, etc.), carotenoids (lycopene, astaxanthin) Zeaxanthin, lutein, etc.), saponins (isoflavones, ginsaneoids, glycyrrhizic acid, etc.), xanthine derivatives (caffeine, etc.), fatty acids, amino acids, proteins (collagen, elastin, etc.), mucopolysaccharides (hyaluronic acid, chondroitin, derma) , Heparan, heparin, ketalan, and their salts), amino sugar (glucosamine, acetylglucosamine, galactosamine, acetylgalactosamine, neuraminic acid, acetylneuraminic acid, hexosamine, their salts, etc.), dietary fiber (indigestible dextrin) , Alginic acid, guar gum, pectin, glucomannan, etc.), oligosaccharides (isomalto-oligosaccharides, cyclic oligosaccharides, etc.) phospholipids and derivatives thereof (phosphatidylcholine, sphingomyelin, ceramide, etc.) Taurine, glutathione, methylsulfonylmethane, etc.), sugar alcohols, quinones (coenzyme Q10, etc.), lignans (sesamin, etc.), animal and plant extracts containing these, root vegetables (turmeric, ginger, etc.), wheat leaves, etc. Green leaves of grass family, ke Such as the green leaves of cruciferous plants such as Le and the like. Furthermore, beverages containing these food additives, for example, plant fermented juice, vegetable juice (for example, carrot juice), plant extract, fruit juice, etc. may be used as the above various components, and by containing these, Beverages with high functionality or nutritional value can be obtained.

もちろん、上記種々の成分として、調味料を添加してもよい。ここでいう調味料の具体例としては、グラニュー糖、蜂蜜、ソルビットなどの甘味料、アルコール、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸などの酸味料、および香料などが挙げられる。   Of course, you may add a seasoning as said various components. Specific examples of the seasoning herein include sweeteners such as granulated sugar, honey and sorbit, acidulants such as alcohol, citric acid, malic acid and tartaric acid, and flavors.

本発明の組成物は、目的に応じて、各種の形態に調製して利用することができる。例えば、食品などの経口用組成物として利用する場合は、ハードカプセル、ソフトカプセルなどのカプセル剤、錠剤、丸剤、粉末（散剤）、顆粒、ティーバッグ、液体（飲料）、ペーストなどの当業者が通常用いる形態とすることができる。さらに、上記液体などを加工して、ゼリー、シャーベット、フローズンヨーグルトあるいはアイスクリームとすることもできる。これらは、形状または好みに応じて、そのまま摂取してもよく、あるいは水、湯、牛乳などに溶いて、または成分を浸出して飲むことができる。なお、飲料の場合、低ｐＨであれば、１２０℃、４分の完全殺菌をしなくても、１００℃以下の殺菌条件で殺菌できる。例えば、ｐＨが４．０以下の場合では、６５℃、１０分相当の殺菌条件で十分に殺菌できる。経皮用組成物（医薬部外品、化粧品、トイレタリー用品など）として利用する場合は、例えば、化粧水、化粧クリーム、乳液、パック、ヘアトニック、シャンプー、ヘアリンス、トリートメント、ボディーシャンプー、先顔剤、石鹸、ファンデーション、口紅、育毛剤、軟膏、入浴剤、歯磨剤、マウスウウォッシュ、シップ、ゲルなどの形態とすることができる。   The composition of the present invention can be prepared and used in various forms according to the purpose. For example, when used as an oral composition for foods and the like, those skilled in the art usually use capsules such as hard capsules and soft capsules, tablets, pills, powders (powder), granules, tea bags, liquids (beverages), pastes, etc. It can be set as the form used. Furthermore, the liquid etc. can be processed into jelly, sorbet, frozen yogurt or ice cream. These may be taken as they are, depending on the shape or preference, or can be taken by dissolving in water, hot water, milk, etc. or leaching the ingredients. In the case of beverages, if the pH is low, it can be sterilized under sterilization conditions of 100 ° C. or lower without complete sterilization at 120 ° C. for 4 minutes. For example, when pH is 4.0 or less, it can fully sterilize under sterilization conditions corresponding to 65 ° C. and 10 minutes. When used as a transdermal composition (quasi-drugs, cosmetics, toiletries, etc.), for example, lotion, cosmetic cream, emulsion, pack, hair tonic, shampoo, hair rinse, treatment, body shampoo, facial preparation , Soap, foundation, lipstick, hair restorer, ointment, bathing agent, dentifrice, mouthwash, ship, gel and the like.

以下に、実施例を挙げて本発明を説明する。なお、本発明は、下記実施例により制限されない。   Hereinafter, the present invention will be described with reference to examples. In addition, this invention is not restrict | limited by the following Example.

（実施例１：発酵物の調製）
まず、食用のパパイヤをフードプロセッサで破砕した。次に、得られた破砕物（１質量部）にイオン交換水（２質量部）を加えて攪拌することにより、パパイヤ希釈液を調製した。 (Example 1: Preparation of fermented product)
First, edible papaya was crushed with a food processor. Next, ion-exchanged water (2 parts by mass) was added to the crushed product (1 part by mass) and stirred to prepare a papaya dilution.

次に、パパイヤ希釈液に乳酸菌等を添加した。具体的には、固液分離しないパパイヤ希釈液（８０ｇ）に、乳酸菌（８０ｍｇ）を添加した。そして、三角フラスコ（２００ｍＬ）にシリコン栓を施し、嫌気的条件下で、軽く振とうしながら、３５℃にて２４時間発酵させた。発酵後、得られたパパイヤの発酵物を濾過して、発酵液を得た。   Next, lactic acid bacteria and the like were added to the papaya diluted solution. Specifically, lactic acid bacteria (80 mg) were added to a papaya diluted solution (80 g) that was not subjected to solid-liquid separation. The Erlenmeyer flask (200 mL) was then sealed with a silicon stopper, and fermented at 35 ° C. for 24 hours with light shaking under anaerobic conditions. After fermentation, the obtained papaya fermented product was filtered to obtain a fermentation broth.

発酵に用いた乳酸菌は、（１）ラクトバチルス・プランタラムのヴィニフローラ株（クリスチャンハンセン社製）、（２）ラクトバチルス・カゼイ（クリスチャンハンセン社製）、（３）ビフィドバクテリウム・ロンガム（クリスチャンハンセン社製）、（４）バチルス・メセンテリカス（東亜薬品工業社製）の４種類である。   The lactic acid bacteria used for fermentation were (1) Lactobacillus plantarum Viniflora strain (Christian Hansen), (2) Lactobacillus casei (Christian Hansen), (3) Bifidobacterium longum ( (4) Bacillus mecentericus (manufactured by Toa Pharmaceutical Co., Ltd.).

なお、発酵を行うにあたっては、１Ｎの水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）を用いた中和滴定法により、発酵前後の酸度を測定した。その酸度の測定において、発酵後の酸度は、上記発酵液を用いて測定した。発酵前の酸度は、パパイヤ希釈液に乳酸菌を添加して得られた物をすぐに濾過し、その濾過により得られた濾液を用いて測定した。その結果を表１に示す。   In addition, when performing fermentation, the acidity before and behind fermentation was measured by the neutralization titration method using 1N sodium hydroxide (NaOH). In the measurement of the acidity, the acidity after fermentation was measured using the fermentation broth. The acidity before fermentation was measured by immediately filtering a product obtained by adding lactic acid bacteria to a papaya diluted solution, and using the filtrate obtained by the filtration. The results are shown in Table 1.

表１より、ラクトバチルス・プランタラムのヴィニフローラ株、ラクトバチルス・カゼイ、ビフィドバクテリウム・ロンガム、およびバチルス・メセンテリカスといった乳酸菌をパパイヤに添加後２４時間で、酸度の上昇が見られた。これは、上記４種の乳酸菌のうち、どの乳酸菌を用いても、パパイヤを発酵させることができることを示している。   From Table 1, an increase in acidity was observed 24 hours after the addition of lactic acid bacteria such as Lactobacillus plantarum Viniflora strain, Lactobacillus casei, Bifidobacterium longum, and Bacillus mecentericus to papaya. This shows that any lactic acid bacterium among the above four lactic acid bacteria can be used to ferment papaya.

なお、上記発酵液を９５℃にて８秒間殺菌した後に、これを凍結乾燥した。この凍結乾燥により、それぞれの乳酸菌で発酵したパパイヤ発酵液の各種乾燥粉末（パパイヤ発酵エキス末）を得ることができた。   The fermentation broth was sterilized at 95 ° C. for 8 seconds, and then freeze-dried. By this freeze-drying, various dry powders (papaya fermentation extract powder) of the papaya fermentation liquid fermented with each lactic acid bacterium could be obtained.

（実施例２：チロシナーゼ阻害活性）
以下の方法にて、チロシナーゼ阻害活性（阻害率）を測定した。 (Example 2: Tyrosinase inhibitory activity)
Tyrosinase inhibitory activity (inhibition rate) was measured by the following method.

まず、実施例１に記載の発酵液（１００μＬ）と、チロシナーゼ溶液（１００μＬ、１１２ｕｎｉｔ／ｍＬ）とを混合して、３７℃で１０分間保持した。なお、ここで用いたチロシナーゼ溶液は、フナコシ社製のチロシナーゼ（８００ｕｎｉｔ／ｍｇ）を、リン酸緩衝液（１／１５Ｍ、ｐＨ７．０）に溶解させて調製した溶液である。   First, the fermentation broth (100 μL) described in Example 1 and a tyrosinase solution (100 μL, 112 units / mL) were mixed and held at 37 ° C. for 10 minutes. The tyrosinase solution used here is a solution prepared by dissolving tyrosinase (800 units / mg) manufactured by Funakoshi in a phosphate buffer solution (1/15 M, pH 7.0).

その後、０．０３質量／容量％のＤＯＰＡ溶液（１００μＬ）を加えて、さらに３７℃にて５分間保持して、試験液を得た。そして、その試験液の吸光度（４７５ｎｍ）を測定した。この測定で得られた結果を、測定値Ａとする。なお、０．０３質量／容量％のＤＯＰＡ溶液は、Ｌ−ＤＯＰＡ（和光純薬工業社製）を、リン酸緩衝液（１／１５Ｍ、ｐＨ７．０）に溶解させて調製した。   Then, 0.03 mass / volume% DOPA solution (100 μL) was added, and the mixture was further maintained at 37 ° C. for 5 minutes to obtain a test solution. Then, the absorbance (475 nm) of the test solution was measured. The result obtained by this measurement is defined as a measurement value A. In addition, the 0.03 mass / volume% DOPA solution was prepared by dissolving L-DOPA (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) in a phosphate buffer solution (1/15 M, pH 7.0).

対照としては、次に示す測定値Ｂ〜Ｄの値を用いた。   As controls, the following measured values B to D were used.

測定値Ｂは、発酵液を添加しないときの値である。具体的には、実施例１に記載の発酵液の代わりにリン酸緩衝液（１／１５Ｍ、ｐＨ７．０）を用いたこと以外は、測定値Ａを得るための方法と同様の方法にて、測定値Ｂを取得した。   The measured value B is a value when no fermentation broth is added. Specifically, in the same manner as the method for obtaining the measurement value A except that a phosphate buffer (1/15 M, pH 7.0) was used instead of the fermentation broth described in Example 1. The measured value B was obtained.

測定値Ｃは、測定値Ａのブランクである。具体的には、チロシナーゼ溶液の代わりにリン酸緩衝液（１／１５Ｍ、ｐＨ７．０）を用いたこと以外は、測定値Ａを得るための方法と同様の方法にて、測定値Ｃを取得した。   The measurement value C is a blank of the measurement value A. Specifically, the measurement value C is obtained by the same method as the method for obtaining the measurement value A except that a phosphate buffer (1/15 M, pH 7.0) is used instead of the tyrosinase solution. did.

測定値Ｄは、測定値Ｂのブランクである。具体的には、チロシナーゼ溶液の代わりにリン酸緩衝液（１／１５Ｍ、ｐＨ７．０）を用いたこと以外は、測定値Ｂを得るための方法と同様の方法にて、測定値Ｄを取得した。   The measurement value D is a blank of the measurement value B. Specifically, the measurement value D is obtained by the same method as the method for obtaining the measurement value B except that a phosphate buffer (1/15 M, pH 7.0) is used instead of the tyrosinase solution. did.

各乳酸菌別および発酵前後における測定値Ａ〜Ｄの値と、下記式（I）とを用いて、チロシナーゼ阻害率（％）を算出した。結果は、下記実施例５における表２に示す。なお、本測定は、三重測定（１群あたりｎ＝３）によるものである。   The tyrosinase inhibition rate (%) was calculated using the measured values A to D before and after fermentation for each lactic acid bacterium and the following formula (I). The results are shown in Table 2 in Example 5 below. This measurement is based on a triple measurement (n = 3 per group).

なお、発酵前のチロシナーゼ阻害率については、上記実施例１に記載の発酵液の代わりに、発酵前の破砕物を濾過して得られた発酵前溶液を用いた以外は、上記と同様の方法で算出した。   In addition, about the tyrosinase inhibition rate before fermentation, it replaced with the fermentation liquid of the said Example 1, The method similar to the above except having used the solution before fermentation obtained by filtering the crushed material before fermentation. Calculated with

（実施例３：リパーゼ阻害活性）
以下の方法にて、リパーゼ阻害活性（阻害率）を測定した。 (Example 3: Lipase inhibitory activity)
The lipase inhibitory activity (inhibition rate) was measured by the following method.

まず、蒸留水で３倍希釈した牛乳を、１０質量／容量％炭酸ナトリウム水溶液でｐＨを８．５に調整して、基質溶液を得た。次に、実施例１に記載の発酵液（１ｍＬ）と基質溶液（４ｍＬ）と蒸留水（１ｍＬ）とを混合し、１０質量／容量％炭酸ナトリウム水溶液を用いてその混合された液のｐＨを８．５に調整して、基質混合液を得た。なお、ｐＨの調整は、液の温度を３７℃に保持しつつ、ｐＨメーターを用いて行った。   First, milk diluted 3-fold with distilled water was adjusted to pH 8.5 with 10 mass / volume% sodium carbonate aqueous solution to obtain a substrate solution. Next, the fermentation liquid (1 mL), the substrate solution (4 mL) and distilled water (1 mL) described in Example 1 are mixed, and the pH of the mixed liquid is adjusted using a 10 mass / volume% sodium carbonate aqueous solution. The substrate mixture was obtained by adjusting to 8.5. The pH was adjusted using a pH meter while maintaining the temperature of the liquid at 37 ° C.

次に、リパーゼ溶液（０．０４質量／容量％、２ｍＬ）を上記基質混合液に添加して、３７℃にて２０分間保持した。その後、ｐＨメーターを用いて、液のｐＨを測定した。このｐＨの測定で得られた結果を、測定値Ａとする。   Next, a lipase solution (0.04 mass / volume%, 2 mL) was added to the substrate mixture and held at 37 ° C. for 20 minutes. Thereafter, the pH of the liquid was measured using a pH meter. The result obtained by this pH measurement is defined as a measurement value A.

なお、上記リパーゼ溶液は、次のように調製した。まず、１０質量／容量％炭酸ナトリウム水溶液を用いて、蒸留水のｐＨを８．５に調整した。次に、そのｐＨ８．５の蒸留水にリパーゼ（和光純薬工業社製）を溶解させて、０．０４質量／容量％のリパーゼ溶液を得た。   The lipase solution was prepared as follows. First, the pH of distilled water was adjusted to 8.5 using a 10 mass / volume% sodium carbonate aqueous solution. Next, lipase (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was dissolved in the distilled water having a pH of 8.5 to obtain a 0.04 mass / volume% lipase solution.

対照としては、次に示す測定値Ｂ〜Ｄの値を用いた。   As controls, the following measured values B to D were used.

測定値Ｂは、発酵液を添加しないときの値である。具体的には、実施例１に記載の発酵液の代わりに蒸留水を用いたこと以外は、測定値Ａを得るための方法と同様の方法にて、測定値Ｂを取得した。   The measured value B is a value when no fermentation broth is added. Specifically, measurement value B was obtained in the same manner as the method for obtaining measurement value A, except that distilled water was used instead of the fermentation broth described in Example 1.

測定値Ｃは、測定値Ａのブランクである。具体的には、測定値Ａを得るための方法において、リパーゼ溶液を添加する前のｐＨの値（つまりｐＨ＝８．５）を、測定値Ｃとした。   The measurement value C is a blank of the measurement value A. Specifically, in the method for obtaining the measurement value A, the pH value before adding the lipase solution (that is, pH = 8.5) was defined as the measurement value C.

測定値Ｄは、測定値Ｂのブランクである。具体的には、測定値Ｂを得るための方法において、リパーゼ溶液を添加する前のｐＨの値（つまりｐＨ＝８．５）を、測定値Ｄとした。   The measurement value D is a blank of the measurement value B. Specifically, in the method for obtaining the measurement value B, the pH value before adding the lipase solution (that is, pH = 8.5) was defined as the measurement value D.

各乳酸菌別および発酵前後における測定値Ａ〜Ｄの値と、下記式（II）とを用いて、リパーゼ阻害率を算出した。結果は、下記実施例６における表２に示す。なお、本測定は、三重測定（１群あたりｎ＝３）によるものである。   The lipase inhibition rate was calculated using the measured values A to D before and after fermentation for each lactic acid bacterium and the following formula (II). The results are shown in Table 2 in Example 6 below. This measurement is based on a triple measurement (n = 3 per group).

なお、発酵前のリパーゼ阻害率については、上記実施例１に記載の発酵液の代わりに、発酵前の破砕物を濾過して得られた発酵前溶液を用いた以外は、上記と同様の方法で算出した。   In addition, about the lipase inhibition rate before fermentation, it replaces with the fermentation liquid as described in the said Example 1, The method similar to the above except having used the solution before fermentation obtained by filtering the crushed material before fermentation. Calculated with

（実施例４：抗酸化活性）
実施例１で得られた発酵液を用いて、スーパーオキシドジスムターゼ活性（ＳＯＤ活性）を測定した。具体的には、ＳＯＤ測定キット（ＮＢＴ還元法、ＳＯＤテストワコー：和光純薬工業社製）を用いた。測定結果を、実施例５の表２に示す。 (Example 4: Antioxidant activity)
Using the fermentation broth obtained in Example 1, superoxide dismutase activity (SOD activity) was measured. Specifically, an SOD measurement kit (NBT reduction method, SOD Test Wako: manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used. The measurement results are shown in Table 2 of Example 5.

なお、発酵前のＳＯＤ活性については、発酵液の代わりに、発酵前の破砕物を濾過して得られた発酵前溶液を用いた以外は、上記と同様の方法で算出した。   In addition, about the SOD activity before fermentation, it computed by the method similar to the above except having used the solution before fermentation obtained by filtering the crushed material before fermentation instead of a fermentation liquid.

（実施例５：測定結果）
実施例２〜４で求めた結果を表２に示す。なお、表２において、酵素阻害活性（チロシナーゼ阻害率、リパーゼ阻害率）については平均値±標準偏差を、抗酸化活性（ＳＯＤ活性）については平均値を示している。 (Example 5: Measurement result)
The results obtained in Examples 2 to 4 are shown in Table 2. In Table 2, the mean value ± standard deviation is shown for enzyme inhibition activity (tyrosinase inhibition rate, lipase inhibition rate), and the mean value is shown for antioxidant activity (SOD activity).

表２に記載のリパーゼ阻害率の結果によれば、発酵前と比べて、発酵後の数値が大きくなっていることが分かる。つまり、酵素阻害活性（リパーゼ阻害活性）を、発酵によって大きくすることができる。   According to the result of the lipase inhibition rate shown in Table 2, it can be seen that the numerical value after fermentation is larger than that before fermentation. That is, enzyme inhibitory activity (lipase inhibitory activity) can be increased by fermentation.

また、表２に記載のチロシナーゼ阻害率の結果では、ビフィドバクテリウムおよびバチルス・メセンテリカスによる発酵によって、発酵前よりも発酵後の数値が大きくなっていることが分かる。つまり、特定の乳酸菌を用いた発酵により、酵素阻害活性（チロシナーゼ阻害活性）を大きくすることができる。   Moreover, in the result of the tyrosinase inhibition rate shown in Table 2, it can be seen that the value after fermentation is larger than that before fermentation due to fermentation by Bifidobacterium and Bacillus mecentericus. That is, enzyme inhibition activity (tyrosinase inhibition activity) can be increased by fermentation using specific lactic acid bacteria.

また、表２の結果によれば、バチルス属に分類される乳酸菌（バチルス・メセンテリカス）で発酵させることにより、発酵前よりも発酵後の方が活性の高い物を得ることができるとともに、抗酸化活性（ＳＯＤ活性）の飛躍的な向上が可能であることが分かる。   Moreover, according to the result of Table 2, by fermenting with lactic acid bacteria (Bacillus mecentericus) classified into the genus Bacillus, it is possible to obtain a product that is more active after fermentation than before fermentation, and antioxidant. It can be seen that the activity (SOD activity) can be dramatically improved.

パパイヤに微生物を作用させて得られるパパイヤ発酵物は、リパーゼ阻害活性およびチロシナーゼ阻害活性といった優れた酵素阻害活性と、優れた抗酸化活性（ＳＯＤ活性）を有するため、極めて有用である。このような機能を有するパパイヤ発酵物は、食品や医薬品等の経口用組成物の原料として、または化粧品等の経皮用組成物の原料として利用することができる。
A papaya fermented product obtained by allowing microorganisms to act on papaya is extremely useful because it has excellent enzyme inhibitory activity such as lipase inhibitory activity and tyrosinase inhibitory activity and excellent antioxidant activity (SOD activity). The fermented papaya having such a function can be used as a raw material for oral compositions such as foods and pharmaceuticals, or as a raw material for transdermal compositions such as cosmetics.

Claims (2)

パパイヤに乳酸菌を作用させることにより得られる発酵物を含有することを特徴とするリパーゼ活性阻害剤であって、前記発酵物は発酵によりリパーゼ阻害活性が高められていることを特徴とするリパーゼ活性阻害剤。 A lipase activity inhibitor characterized by containing a fermented product obtained by the action of lactic acid bacteria in papaya, the ferment lipase activity inhibition characterized by lipase inhibitory activity is enhanced by fermentation Agent . 前記乳酸菌は、ラクトバチルス属、ビフィドバクテリウム属、およびバチルス属のいずれかに分類される１種または２種以上の乳酸菌であることを特徴とする請求項１に記載のリパーゼ活性阻害剤。
2. The lipase activity inhibitor according to claim 1, wherein the lactic acid bacteria are one or more lactic acid bacteria classified into any of the genus Lactobacillus, Bifidobacterium, and Bacillus.