JP4351314B2 - コレスタノール化合物及びこれを含有する医薬 - Google Patents
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗癌剤等の医薬として有用なコレスタノール化合物及びこれを有効成分とする医薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、生命発生の過程に見られる発生・分化において糖鎖が重要な役割を果していることが明らかになるに伴い、糖鎖の生理的意義について多くの研究者の注目を集めている。一方、コレステロールは動物細胞の形質膜、リソゾーム膜、ゴルジ膜などの主要構成脂質の１つである他に、ステロイドホルモン、ビタミンＤ、胆汁酸の前駆体としても重要な役割を担っている。
【０００３】
従って、糖鎖とコレステロールを結合させた化合物は医薬等への応用が期待される。
糖鎖とコレステロールとを結合させた化合物としては、シアル酸誘導体としてコレステロールを用いた例（特開昭６１−２４３０９６号公報）、シアロシルコレステロール（特開昭６３−６３６９７号公報）、シアロシルラクトシルコレステロール等のシアロシルコレステロールのアナログ体（特開平３−１６１４９６号公報）などが提案されている。糖鎖とコレステロールとを結合させた化合物は多彩な薬理作用を有するものであり、例えばシアロコレステロールを含有する神経障害疾患治療剤（特開昭６２−２６５２２９号公報）、シアロコレステロールを含有する脱髄性疾患治療剤（特開平１−９３５２９号公報）、シアロコレステロールを含有する抗痴呆薬（特開平３−８１２８７号公報）などが提案されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の目的は、医薬等として有用な新規なコレステロール化合物を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
このような実情において、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、コレステロールのＢ環の二重結合が飽和されたコレスタノールに糖鎖を結合させた下記一般式（１）で表わされる化合物が癌細胞の増殖を抑制し、医薬として有用であることを見出し本発明を完成した。
【０００６】
すなわち本発明は、次の一般式（１）
【０００７】
【化２】
【０００８】
で表わされるコレスタノール化合物及びこれを有効成分とする医薬を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明のコレスタノール化合物（１）のうち、Ｇａｌ−、好ましくはＧａｌβ−の基をもつ３−β−コレスタニル β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−１）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００１０】
【化３】
【００１１】
〔式中、Ａｃはアセチル基を示し、Ｃｈｏｌは３−β−コレスタニル基（β−コレスタノールから３位のＯＨを除いた基）を示す〕
【００１２】
すなわち、β−Ｄ−ガラクトピラノースペンタアセテート（２）を原料とし、これに臭化水素酸を反応させて化合物（３）とし、更に、β−コレスタノールを反応させて化合物（４）とした後、脱保護すれば３−β−コレスタニル β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−１）が得られる。
【００１３】
また、一般式（１）中、ＧがＧａｌ−Ｇｌｃ−、好ましくはＧａｌβ１，４Ｇｌｃβ−である３−β−コレスタニル ４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）β−Ｄ−グルコピラノシド（１−２）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００１４】
【化４】
【００１５】
〔式中、Ａｃ及びＣｈｏｌは前記と同じものを示し、ＡｇＯＴｆはトリフルオロメタンスルホン酸銀を示し、ＴＢＡＩはヨウ化テトラブチルアンモニウムを示し、ＭｅＯＴｆは、メチルトリフラートを示す〕
【００１６】
すなわち、４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−１，２，３，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（６）を原料とし、これにβ−コレスタノールを反応せしめて、化合物（７）とし、該化合物（７）のアセチル基を脱離することにより目的とする化合物（１−２）を得ることができる。
【００１７】
また、一般式（１）中、ＧがＧｌｃＮＡｃ−Ｇａｌ、好ましくはＧｌｃＮＡｃβ１，３−Ｇａｌβ−である３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（２−アセタミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−３）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００１８】
【化５】
【００１９】
〔式中、Ｂｎはベンジル基を、Ｅｔはエチル基を、ＮＰｈｔｈはフタルイミド基を示し、Ａｃ及びＣｈｏｌは前記と同じ〕
【００２０】
すなわち、化合物（８）を臭素化して化合物（９）を得、これにβ−コレスタノールを反応させて化合物（１０）を得、この化合物（１０）のベンジル基を脱離させて化合物（１１）とし、これに化合物（１２）を反応させて化合物（１３）を得、保護基をアセチル基に変換して化合物（１４）とした後脱保護すれば、目的とする化合物（１−３）が得られる。
【００２１】
前記反応式において、Ｏ−アセチル化反応は、糖類にピリジン等の塩基の存在下、無水酢酸を反応させることにより行なわれる。また、ブロミドの導入反応は、糖類に酢酸及び臭化水素を反応させることにより行なわれる。また、コレスタノール基（４）の導入反応は、糖類にモレキュラーシーブ、テトラメチル尿素の存在下にコレスタノールを加えて、次いでトリフルオロメタンスルホン酸銀で処理することにより行なわれる。
【００２２】
また、アセチル基の脱離反応は、ナトリウムアルコキシド、炭酸アルカリ、水酸化アルカリ等の塩基の存在下に加水分解することにより行なわれる。また、ベンジル基の脱離反応は、接触還元、例えばパラジウム−炭素等の存在下に水素添加することにより行なわれる。
【００２３】
このようにして得られる化合物（１）は癌細胞増殖抑制効果を有し、しかも安全性が高いので、抗癌剤等の医薬として有用である。
【００２４】
化合物（１）は、常法に従って薬学的に許容される担体とともに種々の剤型の医薬組成物とすることができる。また投与形態も特に限定されず治療目的に応じて適宜選択でき、例えば、経口剤、注射剤、坐剤、軟膏剤、貼付剤等のいずれでも良く、これらの投与形態は、各々当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。
経口用固形製剤を調製する場合は、化合物（１）に賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。そのような添加剤としては、当該分野で一般的に使用されるものでよく、例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等を、結合剤としては、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等を、崩壊剤としては乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等を、滑沢剤としては精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等を、矯味剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等を例示できる。
【００２５】
経口用液体製剤を調製する場合は、化合物（１）に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法により内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。この場合矯味剤としては上記に挙げられたもので良く、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００２６】
注射剤を調製する場合は、化合物（１）にpH調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内及び静脈内用注射剤を製造することができる。この場合のpH調節剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が例示できる。
【００２７】
坐剤を調製する場合は、化合物（１）に当業界において公知の製剤用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等を、更に必要に応じてツイーン（登録商標）のような界面活性剤等を加えた後、常法により製造することができる。
【００２８】
軟膏剤を調製する場合は、化合物（１）に通常使用される基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等が必要に応じて配合され、常法により混合、製剤化される。基剤としては、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィン等が挙げられる。保存剤としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル等が挙げられる。
【００２９】
貼付剤を製造する場合は、通常の支持体に前記軟膏、クリーム、ゲル、ペースト等を常法により塗布すれば良い。支持体としては、綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布や軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルムあるいは発泡体シートが適当である。
【００３０】
本発明の化合物（１）の投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり、一概には決定できないが、通常成人１日あたり本発明化合物（１）として約０．０１〜２００mg／kg、好ましくは約０．１〜５０mg／kgとすれば良く、これを１日１回又は２〜４回程度に分けて投与するのが好ましい。
【００３１】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれに何ら限定されるものではない。
【００３２】
実施例１（化合物（１−１）の合成）
（１）３−β−コレスタニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（５）
β−Ｄ−ガラクトピラノースペンタアセテート（２）４００mgに酢酸５．０ml及び３０％臭化水素酢酸溶液５．０mlを加えて遮光条件下室温で１８時間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行った。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮すると残渣が得られ、これを単離、精製することなく化合物（３）として次の反応へ用いた。この残渣にβ−コレスタノール（４）７９７mg及びモレキュラーシーブス３Ａ５００mgを加えて、３時間減圧乾燥した後、塩化メチレン５０ml及びテトラメチル尿素１８４μｌを加えて、アルゴン雰囲気中−２０℃で遮光条件下３０分間攪拌した。これにトリフルオロメタンスルホン酸銀２６３mgを加えて、室温で６５時間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行った。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１０：１，３５φ−２７５mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると（５）が１０８mg得られた。
【００３３】
（２）３−β−コレスタニル β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−１）
化合物（５）１０８mgをメタノール５ml、クロロホルム５mlの混合液に溶かし、ナトリウムメトキシド８２mgを加えて、室温で６時間攪拌した。反応液を酸性イオン交換樹脂アンバーリスト１５で中和し、濾過後、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１：１，３５φ−１３５mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１−１）が３１mg得られた。
【００３４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6／ＴＭＳ／２％Ｄ2Ｏ）：
4.22,d,1H,Gal-1,J1,2=8.0; 3.69-3.25,m,saccharide-H, cholestanol-H;
1.94-0.63,m,cholestanol-H
【００３５】
実施例２（化合物（１−２）の合成）
（１）３−β−コレスタニル ４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（７）
４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−１，２，３，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（６）８．６４ｇを酢酸５ml及び無水酢酸５mlの混合液に溶かし、３０％臭化水素酢酸溶液１５mlを加えて室温で１．５時間攪拌した。反応液を水にあけ、炭酸水素ナトリウムで中和後クロロホルムで抽出し、硫酸マグネシウムを加えて乾燥した。固形分を濾去後減圧濃縮し、コレスタノール５．９４ｇ、モレキュラーシーブＡＷ−３００ ５ｇ、塩化メチレン１００ml及びテトラメチル尿素１．２２mlを加えて室温で１０分攪拌した。これをドライアイス−アセトニトリル浴に浸して充分攪拌した後、トリフルオロメタンスルホン酸銀３．９３ｇを加えて反応液を室温にもどし１夜攪拌した。反応液を水にあけ炭酸水素ナトリウムで中和後クロロホルムで抽出し、硫酸マグネシウムを加えて乾燥した後固形分を濾去し減圧濃縮した。残渣をワコーゲルＣ−３００を用いるカラムクロマトグラフィー（ベンゼン：アセトン＝２０：１，３５φ−２６０mm）で精製し、化合物（７）を３．３９ｇ得た。
【００３６】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
5.34,t,Gal-4,J3,4=2.8,J4,5=1.2; 5.19,t,Glc-3,J2,3=9.6,J3,4=9.5;
5.10,dd,Gal-2,J1,2=8.0,J2,3=10.4; 4.95,dd,Gal-3;4.85,dd,Glc-2,
J1,2=7.9; 4.55,d,Glc-1; 4.48,d,Gal-1;4.45,dd,Glc-6a,J5,6a=2.3,
J 6a,6b=11.9; 4.13,dd,Gal-6a,J5,6a=6.9,J6a,6b=11.1;
4.10,dd,Glc-6b,J5,6b=5.1; 4.08,dd,Gal-6b,J5,6b=7.2; 3.87,t,Gal-5;
3.77,t,Glc-4,J4,5=9.8; 3.59,ddd,Glc-5; 3.57-3.48,m,cholestanol-H;
2.20-0.56,m,O-Ac,cholestanol-H.
【００３７】
（２）３−β−コレスタニル ４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１−２）
化合物（７）５０．０mgをメタノール８ml−塩化メチレン２ml混液に溶かし、ナトリウムメトキシド２６．８mgを加えて室温で２時間攪拌した。反応液を酸性イオン交換樹脂アンバーリスト１５で中和後、固形分を濾去し減圧濃縮し、化合物（１−２）を３５．３mg得た。
【００３８】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6，５％Ｄ2Ｏ／ＴＭＳ）：
4.30,d,Gal-4,J1,2=7.3; 4.20,d,Glc-1,J1,2=7.3; 3.74-2.74,m,
saccharide-H; 1.98-0.58,m,cholestanol-H.
【００３９】
実施例３（化合物（１−３）の合成）
（１）３−β−コレスタニル ２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１０）
化合物（８）２．０６ｇに酢酸４．０ml及び３０％臭化水素酢酸溶液４．０mlを加えて遮光条件下室温で４５分間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行なった。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮すると残渣が得られ、これを単離、精製することなく化合物（９）として次の反応へ用いた。この残渣にβ−コレスタノール（４）１．８３ｇ及びモレキュラシーブス３Ａ１．５ｇを加えて３時間減圧乾燥した後、塩化メチレン１００ml及びテトラメチル尿素６７６μｌを加えて、アルゴン雰囲気中−２０℃で遮光条件下３０分間攪拌した。これにトリフルオロメタンスルホン酸銀１．４５ｇを加えて、室温で１８時間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行なった。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン ４０：１，３５φ−２９０mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１０）が４３４mg得られた。
【００４０】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
7.34-7.13,m,aromatic-H; 5.49,d,1H,Gal-4;
5.08,dd,1H,Gal-2,J1,2=7.9; 4.69,d,1H,benzyl-H,J=12.3;
4.44,d,1H,Gal-1,J1,2=7.9; 4.39,d,1H,benzyl-H,J=12.3;
4.16,m,2H,Gal-6a,Gal-6b; 3.77,dd,1H,Gal-5;
3.51,m,2H,Gal-3,cholestanol-H; 2.14,s,-OAc; 2.06,s,-OAc;
2.02,s,-OAc; 1.97-0.59,m,cholestanol-H.
【００４１】
（２）３−β−コレスタニル ２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１１）
化合物（１０）７．３５ｇをメタノール２００ml、酢酸エチル５０ml、ギ酸５０mlの混合液に溶かし、アルゴン雰囲気中１０％パラジウム−炭素６．５０ｇを加えて、室温で５時間攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧濃縮すると残渣が得られた。この残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１０：１，３５φ−２９０mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１１）が１．９７ｇ得られた。
【００４２】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
5.31,d,1H,Gal-4; 4.93,dd,1H,Gal-2,J1,2=7.9;
4.51,d,1H,Gal-1,J1,2=7.9; 4.14,d,2H,Gal-6a,Gal-6b;
3.82,m,2H,Gal-3,Gal-5; 3.55,m,1H,cholestanol-H;
2.17,s,-OAc; 2.12,s,-OAc; 2.05,s,-OAc;
1.97-0.60,m,cholestanol-H.
【００４３】
（３）３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１３）
化合物（１２）５３mgと化合物（１１）２９mgをアセトニトリル１０mlに溶かし、モレキュラシーブス３Ａ１５０mgを加えて、アルゴン雰囲気中氷冷下で３０分間攪拌した。これにメチルトリフラート３９μｌを加えて室温で３時間攪拌した。反応液を減圧濃縮後、残渣に水とクロロホルムを加えて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行った。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝４０：１，２２φ−２７０mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１３）が得られた。
【００４４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
7.66,bs,aromatic-H; 7.41-7.23,m,aromatic-H; 6.97,d,aromatic-H;
6.88,m,aromatic-H; 5.38,d,1H,Gal-4; 5.16,d,1H,GlcN-1,J1,2=7.9;
4.82-4.60,m,Gal-2,benzyl-H; 4.40,d,benzyl-H; 4.35,dd,saccharidc-H;
4.29,d,1H,Gal-1,J1,2=7.9; 4.06,m,3H,GlcN-2,saccharide-H;
3.78,m,3H,Gal-3,saccharide-H; 3.71-3.61,m,3H,asccharide-H;
3.40,m,1H,cholestanol-H; 2.08-0.53,m,acetyl-H,cholestanol-H.
【００４５】
（４）３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１４）
化合物（１３）７４８mgをメタノール３６０ml、ギ酸４０mlの混合液に溶かし、アルゴン雰囲気中１０％パラジウム−炭素７００mgを加えて、室温で１８時間攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧濃縮すると残渣が得られた。この残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１：１，３５φ−２７９mm）を用いるカラムクロマトグラフィーに通し、脱ベンジル体と思われる分画を回収した。これにエタノール１００ml、ヒドラジン・１水和物２mlを加えて１００℃で６時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮後、ピリジン６０mlを加えて、氷冷下３０分間攪拌した後、無水酢酸３０mlを加えて室温で１３時間攪拌した。反応液を減圧濃縮後、更にトルエンを加えて酢酸臭がなくなるまで減圧濃縮を繰り返した。得られた残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝４：１，２２φ−２６８mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１４）が３０５mg得られた。
【００４６】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
5.91,d,1H,N-H,J2,NH=7.9; 5.51,t,1H,GlcN-3,J2,3=10.2;
5.36,d,1H,Gal-4; 5.05,m,3H,GlcN-1,GlcN-4,Gal-2; 4.46,d,1H,Gal-1,
J1,2=8; 4.28,dd,1H,GlcN-6a; 4.10,m,3H,GlcN-6b,saccharide-H;
3.82,m,2H,Gal-3,saccharide-H; 3.69,m,1H,GlcN-5;
3.52,m,1H,cholestanol-H; 3.33,m,1H,GlcN-2,J2,3=10.2,
J2,NH=7.9; 2.24-0.58,m,acetyl-H, cholestanol-H.
【００４７】
（５）３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−３）
化合物（１４）１１６mgをメタノール１０ml、クロロホルム５mlの混合液に溶かし、ナトリウムメトキシド３７mgを加えて、室温で２時間攪拌した。反応液を酸性イオン交換樹脂アンバーリスト１５で中和し、濾過後、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をワコーゲルＣ−３００（クロロホルム：メタノール＝７：１，２２φ−２６５mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製し、更にエタノールで再結晶すると化合物（１−３）が２７mg得られた。
【００４８】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6／ＴＭＳ／２％Ｄ2Ｏ）：
4.57,d,GlcN-1,J1,2=8.5; 4.24,d,1H,Gal-1,J1,2=7.3;
3.69,d,2H,saccharide-H; 3.55-3.42,m,GlcN-2,saccharide-H,
cholestanol-H; 3.34,m,Gal-2,saccharide-H; 3.15,bt,saccharide-H;
1.93-0.62,m,acetyl-H,cholestanol-H.
【００４９】
試験例１
ヒト胃癌細胞ＭＫＮ４５及びＭＫＮ７４細胞を９６ウエルプレート（１×１０5celps／well）で１６時間培養後、種々の濃度で被験化合物を添加し、更に３日間培養後、各々の細胞数をCell Counting Kit (Dojin）を用いて４５０／６９０nmの吸光度から測定した。その結果、図１及び２から明らかなように、化合物（１−１）、（１−２）及び（１−３）は、いずれもヒト胃癌細胞に対する強力な増殖抑制効果を示した。
【００５０】
【発明の効果】
本発明化合物は、優れた癌細胞増殖抑制効果を有し、抗癌剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＭＫＮ４５細胞に対する増殖抑制作用を示す図である。
【図２】ＭＫＮ７４細胞に対する増殖抑制作用を示す図である。
【発明の属する技術分野】
本発明は、抗癌剤等の医薬として有用なコレスタノール化合物及びこれを有効成分とする医薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、生命発生の過程に見られる発生・分化において糖鎖が重要な役割を果していることが明らかになるに伴い、糖鎖の生理的意義について多くの研究者の注目を集めている。一方、コレステロールは動物細胞の形質膜、リソゾーム膜、ゴルジ膜などの主要構成脂質の１つである他に、ステロイドホルモン、ビタミンＤ、胆汁酸の前駆体としても重要な役割を担っている。
【０００３】
従って、糖鎖とコレステロールを結合させた化合物は医薬等への応用が期待される。
糖鎖とコレステロールとを結合させた化合物としては、シアル酸誘導体としてコレステロールを用いた例（特開昭６１−２４３０９６号公報）、シアロシルコレステロール（特開昭６３−６３６９７号公報）、シアロシルラクトシルコレステロール等のシアロシルコレステロールのアナログ体（特開平３−１６１４９６号公報）などが提案されている。糖鎖とコレステロールとを結合させた化合物は多彩な薬理作用を有するものであり、例えばシアロコレステロールを含有する神経障害疾患治療剤（特開昭６２−２６５２２９号公報）、シアロコレステロールを含有する脱髄性疾患治療剤（特開平１−９３５２９号公報）、シアロコレステロールを含有する抗痴呆薬（特開平３−８１２８７号公報）などが提案されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の目的は、医薬等として有用な新規なコレステロール化合物を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
このような実情において、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、コレステロールのＢ環の二重結合が飽和されたコレスタノールに糖鎖を結合させた下記一般式（１）で表わされる化合物が癌細胞の増殖を抑制し、医薬として有用であることを見出し本発明を完成した。
【０００６】
すなわち本発明は、次の一般式（１）
【０００７】
【化２】
で表わされるコレスタノール化合物及びこれを有効成分とする医薬を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明のコレスタノール化合物（１）のうち、Ｇａｌ−、好ましくはＧａｌβ−の基をもつ３−β−コレスタニル β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−１）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００１０】
【化３】
〔式中、Ａｃはアセチル基を示し、Ｃｈｏｌは３−β−コレスタニル基（β−コレスタノールから３位のＯＨを除いた基）を示す〕
【００１２】
すなわち、β−Ｄ−ガラクトピラノースペンタアセテート（２）を原料とし、これに臭化水素酸を反応させて化合物（３）とし、更に、β−コレスタノールを反応させて化合物（４）とした後、脱保護すれば３−β−コレスタニル β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−１）が得られる。
【００１３】
また、一般式（１）中、ＧがＧａｌ−Ｇｌｃ−、好ましくはＧａｌβ１，４Ｇｌｃβ−である３−β−コレスタニル ４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）β−Ｄ−グルコピラノシド（１−２）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００１４】
【化４】
〔式中、Ａｃ及びＣｈｏｌは前記と同じものを示し、ＡｇＯＴｆはトリフルオロメタンスルホン酸銀を示し、ＴＢＡＩはヨウ化テトラブチルアンモニウムを示し、ＭｅＯＴｆは、メチルトリフラートを示す〕
【００１６】
すなわち、４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−１，２，３，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（６）を原料とし、これにβ−コレスタノールを反応せしめて、化合物（７）とし、該化合物（７）のアセチル基を脱離することにより目的とする化合物（１−２）を得ることができる。
【００１７】
また、一般式（１）中、ＧがＧｌｃＮＡｃ−Ｇａｌ、好ましくはＧｌｃＮＡｃβ１，３−Ｇａｌβ−である３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（２−アセタミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−３）は、例えば次の反応式に従って製造することができる。
【００１８】
【化５】
〔式中、Ｂｎはベンジル基を、Ｅｔはエチル基を、ＮＰｈｔｈはフタルイミド基を示し、Ａｃ及びＣｈｏｌは前記と同じ〕
【００２０】
すなわち、化合物（８）を臭素化して化合物（９）を得、これにβ−コレスタノールを反応させて化合物（１０）を得、この化合物（１０）のベンジル基を脱離させて化合物（１１）とし、これに化合物（１２）を反応させて化合物（１３）を得、保護基をアセチル基に変換して化合物（１４）とした後脱保護すれば、目的とする化合物（１−３）が得られる。
【００２１】
前記反応式において、Ｏ−アセチル化反応は、糖類にピリジン等の塩基の存在下、無水酢酸を反応させることにより行なわれる。また、ブロミドの導入反応は、糖類に酢酸及び臭化水素を反応させることにより行なわれる。また、コレスタノール基（４）の導入反応は、糖類にモレキュラーシーブ、テトラメチル尿素の存在下にコレスタノールを加えて、次いでトリフルオロメタンスルホン酸銀で処理することにより行なわれる。
【００２２】
また、アセチル基の脱離反応は、ナトリウムアルコキシド、炭酸アルカリ、水酸化アルカリ等の塩基の存在下に加水分解することにより行なわれる。また、ベンジル基の脱離反応は、接触還元、例えばパラジウム−炭素等の存在下に水素添加することにより行なわれる。
【００２３】
このようにして得られる化合物（１）は癌細胞増殖抑制効果を有し、しかも安全性が高いので、抗癌剤等の医薬として有用である。
【００２４】
化合物（１）は、常法に従って薬学的に許容される担体とともに種々の剤型の医薬組成物とすることができる。また投与形態も特に限定されず治療目的に応じて適宜選択でき、例えば、経口剤、注射剤、坐剤、軟膏剤、貼付剤等のいずれでも良く、これらの投与形態は、各々当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。
経口用固形製剤を調製する場合は、化合物（１）に賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。そのような添加剤としては、当該分野で一般的に使用されるものでよく、例えば、賦形剤としては、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸等を、結合剤としては、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドン等を、崩壊剤としては乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖等を、滑沢剤としては精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコール等を、矯味剤としては白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸等を例示できる。
【００２５】
経口用液体製剤を調製する場合は、化合物（１）に矯味剤、緩衝剤、安定化剤、矯臭剤等を加えて常法により内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等を製造することができる。この場合矯味剤としては上記に挙げられたもので良く、緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム等が、安定化剤としてはトラガント、アラビアゴム、ゼラチン等が挙げられる。
【００２６】
注射剤を調製する場合は、化合物（１）にpH調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内及び静脈内用注射剤を製造することができる。この場合のpH調節剤及び緩衝剤としてはクエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム等が挙げられる。安定化剤としてはピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸等が挙げられる。局所麻酔剤としては塩酸プロカイン、塩酸リドカイン等が挙げられる。等張化剤としては、塩化ナトリウム、ブドウ糖等が例示できる。
【００２７】
坐剤を調製する場合は、化合物（１）に当業界において公知の製剤用担体、例えば、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセライド等を、更に必要に応じてツイーン（登録商標）のような界面活性剤等を加えた後、常法により製造することができる。
【００２８】
軟膏剤を調製する場合は、化合物（１）に通常使用される基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等が必要に応じて配合され、常法により混合、製剤化される。基剤としては、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィン等が挙げられる。保存剤としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル等が挙げられる。
【００２９】
貼付剤を製造する場合は、通常の支持体に前記軟膏、クリーム、ゲル、ペースト等を常法により塗布すれば良い。支持体としては、綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布や軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルムあるいは発泡体シートが適当である。
【００３０】
本発明の化合物（１）の投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり、一概には決定できないが、通常成人１日あたり本発明化合物（１）として約０．０１〜２００mg／kg、好ましくは約０．１〜５０mg／kgとすれば良く、これを１日１回又は２〜４回程度に分けて投与するのが好ましい。
【００３１】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれに何ら限定されるものではない。
【００３２】
実施例１（化合物（１−１）の合成）
（１）３−β−コレスタニル ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（５）
β−Ｄ−ガラクトピラノースペンタアセテート（２）４００mgに酢酸５．０ml及び３０％臭化水素酢酸溶液５．０mlを加えて遮光条件下室温で１８時間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行った。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮すると残渣が得られ、これを単離、精製することなく化合物（３）として次の反応へ用いた。この残渣にβ−コレスタノール（４）７９７mg及びモレキュラーシーブス３Ａ５００mgを加えて、３時間減圧乾燥した後、塩化メチレン５０ml及びテトラメチル尿素１８４μｌを加えて、アルゴン雰囲気中−２０℃で遮光条件下３０分間攪拌した。これにトリフルオロメタンスルホン酸銀２６３mgを加えて、室温で６５時間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行った。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１０：１，３５φ−２７５mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると（５）が１０８mg得られた。
【００３３】
（２）３−β−コレスタニル β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−１）
化合物（５）１０８mgをメタノール５ml、クロロホルム５mlの混合液に溶かし、ナトリウムメトキシド８２mgを加えて、室温で６時間攪拌した。反応液を酸性イオン交換樹脂アンバーリスト１５で中和し、濾過後、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１：１，３５φ−１３５mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１−１）が３１mg得られた。
【００３４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6／ＴＭＳ／２％Ｄ2Ｏ）：
4.22,d,1H,Gal-1,J1,2=8.0; 3.69-3.25,m,saccharide-H, cholestanol-H;
1.94-0.63,m,cholestanol-H
【００３５】
実施例２（化合物（１−２）の合成）
（１）３−β−コレスタニル ４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−２，３，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド（７）
４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−１，２，３，６−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノース（６）８．６４ｇを酢酸５ml及び無水酢酸５mlの混合液に溶かし、３０％臭化水素酢酸溶液１５mlを加えて室温で１．５時間攪拌した。反応液を水にあけ、炭酸水素ナトリウムで中和後クロロホルムで抽出し、硫酸マグネシウムを加えて乾燥した。固形分を濾去後減圧濃縮し、コレスタノール５．９４ｇ、モレキュラーシーブＡＷ−３００ ５ｇ、塩化メチレン１００ml及びテトラメチル尿素１．２２mlを加えて室温で１０分攪拌した。これをドライアイス−アセトニトリル浴に浸して充分攪拌した後、トリフルオロメタンスルホン酸銀３．９３ｇを加えて反応液を室温にもどし１夜攪拌した。反応液を水にあけ炭酸水素ナトリウムで中和後クロロホルムで抽出し、硫酸マグネシウムを加えて乾燥した後固形分を濾去し減圧濃縮した。残渣をワコーゲルＣ−３００を用いるカラムクロマトグラフィー（ベンゼン：アセトン＝２０：１，３５φ−２６０mm）で精製し、化合物（７）を３．３９ｇ得た。
【００３６】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
5.34,t,Gal-4,J3,4=2.8,J4,5=1.2; 5.19,t,Glc-3,J2,3=9.6,J3,4=9.5;
5.10,dd,Gal-2,J1,2=8.0,J2,3=10.4; 4.95,dd,Gal-3;4.85,dd,Glc-2,
J1,2=7.9; 4.55,d,Glc-1; 4.48,d,Gal-1;4.45,dd,Glc-6a,J5,6a=2.3,
J 6a,6b=11.9; 4.13,dd,Gal-6a,J5,6a=6.9,J6a,6b=11.1;
4.10,dd,Glc-6b,J5,6b=5.1; 4.08,dd,Gal-6b,J5,6b=7.2; 3.87,t,Gal-5;
3.77,t,Glc-4,J4,5=9.8; 3.59,ddd,Glc-5; 3.57-3.48,m,cholestanol-H;
2.20-0.56,m,O-Ac,cholestanol-H.
【００３７】
（２）３−β−コレスタニル ４−Ｏ−（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシド（１−２）
化合物（７）５０．０mgをメタノール８ml−塩化メチレン２ml混液に溶かし、ナトリウムメトキシド２６．８mgを加えて室温で２時間攪拌した。反応液を酸性イオン交換樹脂アンバーリスト１５で中和後、固形分を濾去し減圧濃縮し、化合物（１−２）を３５．３mg得た。
【００３８】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6，５％Ｄ2Ｏ／ＴＭＳ）：
4.30,d,Gal-4,J1,2=7.3; 4.20,d,Glc-1,J1,2=7.3; 3.74-2.74,m,
saccharide-H; 1.98-0.58,m,cholestanol-H.
【００３９】
実施例３（化合物（１−３）の合成）
（１）３−β−コレスタニル ２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−３−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１０）
化合物（８）２．０６ｇに酢酸４．０ml及び３０％臭化水素酢酸溶液４．０mlを加えて遮光条件下室温で４５分間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行なった。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮すると残渣が得られ、これを単離、精製することなく化合物（９）として次の反応へ用いた。この残渣にβ−コレスタノール（４）１．８３ｇ及びモレキュラシーブス３Ａ１．５ｇを加えて３時間減圧乾燥した後、塩化メチレン１００ml及びテトラメチル尿素６７６μｌを加えて、アルゴン雰囲気中−２０℃で遮光条件下３０分間攪拌した。これにトリフルオロメタンスルホン酸銀１．４５ｇを加えて、室温で１８時間攪拌した。反応液を水中にあけて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行なった。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン ４０：１，３５φ−２９０mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１０）が４３４mg得られた。
【００４０】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
7.34-7.13,m,aromatic-H; 5.49,d,1H,Gal-4;
5.08,dd,1H,Gal-2,J1,2=7.9; 4.69,d,1H,benzyl-H,J=12.3;
4.44,d,1H,Gal-1,J1,2=7.9; 4.39,d,1H,benzyl-H,J=12.3;
4.16,m,2H,Gal-6a,Gal-6b; 3.77,dd,1H,Gal-5;
3.51,m,2H,Gal-3,cholestanol-H; 2.14,s,-OAc; 2.06,s,-OAc;
2.02,s,-OAc; 1.97-0.59,m,cholestanol-H.
【００４１】
（２）３−β−コレスタニル ２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１１）
化合物（１０）７．３５ｇをメタノール２００ml、酢酸エチル５０ml、ギ酸５０mlの混合液に溶かし、アルゴン雰囲気中１０％パラジウム−炭素６．５０ｇを加えて、室温で５時間攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧濃縮すると残渣が得られた。この残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１０：１，３５φ−２９０mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１１）が１．９７ｇ得られた。
【００４２】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
5.31,d,1H,Gal-4; 4.93,dd,1H,Gal-2,J1,2=7.9;
4.51,d,1H,Gal-1,J1,2=7.9; 4.14,d,2H,Gal-6a,Gal-6b;
3.82,m,2H,Gal-3,Gal-5; 3.55,m,1H,cholestanol-H;
2.17,s,-OAc; 2.12,s,-OAc; 2.05,s,-OAc;
1.97-0.60,m,cholestanol-H.
【００４３】
（３）３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（３，４，６−トリ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−２−フタルイミド−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１３）
化合物（１２）５３mgと化合物（１１）２９mgをアセトニトリル１０mlに溶かし、モレキュラシーブス３Ａ１５０mgを加えて、アルゴン雰囲気中氷冷下で３０分間攪拌した。これにメチルトリフラート３９μｌを加えて室温で３時間攪拌した。反応液を減圧濃縮後、残渣に水とクロロホルムを加えて炭酸水素ナトリウムで中和し、クロロホルム抽出を行った。抽出液を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝４０：１，２２φ−２７０mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１３）が得られた。
【００４４】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
7.66,bs,aromatic-H; 7.41-7.23,m,aromatic-H; 6.97,d,aromatic-H;
6.88,m,aromatic-H; 5.38,d,1H,Gal-4; 5.16,d,1H,GlcN-1,J1,2=7.9;
4.82-4.60,m,Gal-2,benzyl-H; 4.40,d,benzyl-H; 4.35,dd,saccharidc-H;
4.29,d,1H,Gal-1,J1,2=7.9; 4.06,m,3H,GlcN-2,saccharide-H;
3.78,m,3H,Gal-3,saccharide-H; 3.71-3.61,m,3H,asccharide-H;
3.40,m,1H,cholestanol-H; 2.08-0.53,m,acetyl-H,cholestanol-H.
【００４５】
（４）３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（２−アセトアミド−３，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−２，４，６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１４）
化合物（１３）７４８mgをメタノール３６０ml、ギ酸４０mlの混合液に溶かし、アルゴン雰囲気中１０％パラジウム−炭素７００mgを加えて、室温で１８時間攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧濃縮すると残渣が得られた。この残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝１：１，３５φ−２７９mm）を用いるカラムクロマトグラフィーに通し、脱ベンジル体と思われる分画を回収した。これにエタノール１００ml、ヒドラジン・１水和物２mlを加えて１００℃で６時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮後、ピリジン６０mlを加えて、氷冷下３０分間攪拌した後、無水酢酸３０mlを加えて室温で１３時間攪拌した。反応液を減圧濃縮後、更にトルエンを加えて酢酸臭がなくなるまで減圧濃縮を繰り返した。得られた残渣をワコーゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝４：１，２２φ−２６８mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると化合物（１４）が３０５mg得られた。
【００４６】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3／ＴＭＳ）：
5.91,d,1H,N-H,J2,NH=7.9; 5.51,t,1H,GlcN-3,J2,3=10.2;
5.36,d,1H,Gal-4; 5.05,m,3H,GlcN-1,GlcN-4,Gal-2; 4.46,d,1H,Gal-1,
J1,2=8; 4.28,dd,1H,GlcN-6a; 4.10,m,3H,GlcN-6b,saccharide-H;
3.82,m,2H,Gal-3,saccharide-H; 3.69,m,1H,GlcN-5;
3.52,m,1H,cholestanol-H; 3.33,m,1H,GlcN-2,J2,3=10.2,
J2,NH=7.9; 2.24-0.58,m,acetyl-H, cholestanol-H.
【００４７】
（５）３−β−コレスタニル ３−Ｏ−（２−アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１−３）
化合物（１４）１１６mgをメタノール１０ml、クロロホルム５mlの混合液に溶かし、ナトリウムメトキシド３７mgを加えて、室温で２時間攪拌した。反応液を酸性イオン交換樹脂アンバーリスト１５で中和し、濾過後、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をワコーゲルＣ−３００（クロロホルム：メタノール＝７：１，２２φ−２６５mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精製し、更にエタノールで再結晶すると化合物（１−３）が２７mg得られた。
【００４８】
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6／ＴＭＳ／２％Ｄ2Ｏ）：
4.57,d,GlcN-1,J1,2=8.5; 4.24,d,1H,Gal-1,J1,2=7.3;
3.69,d,2H,saccharide-H; 3.55-3.42,m,GlcN-2,saccharide-H,
cholestanol-H; 3.34,m,Gal-2,saccharide-H; 3.15,bt,saccharide-H;
1.93-0.62,m,acetyl-H,cholestanol-H.
【００４９】
試験例１
ヒト胃癌細胞ＭＫＮ４５及びＭＫＮ７４細胞を９６ウエルプレート（１×１０5celps／well）で１６時間培養後、種々の濃度で被験化合物を添加し、更に３日間培養後、各々の細胞数をCell Counting Kit (Dojin）を用いて４５０／６９０nmの吸光度から測定した。その結果、図１及び２から明らかなように、化合物（１−１）、（１−２）及び（１−３）は、いずれもヒト胃癌細胞に対する強力な増殖抑制効果を示した。
【００５０】
【発明の効果】
本発明化合物は、優れた癌細胞増殖抑制効果を有し、抗癌剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＭＫＮ４５細胞に対する増殖抑制作用を示す図である。
【図２】ＭＫＮ７４細胞に対する増殖抑制作用を示す図である。
Claims (4)
- 次の式（１a）
で表わされるコレスタノール化合物。 - Ｇが、ＧｌｃＮＡｃβ１，３−Ｇａｌβ−である請求項１記載のコレスタノール化合物。
- 次の式（１b）
で表わされるコレスタノール化合物を有効成分とする医薬。 - 次の式（１c）
で表わされるコレスタノール化合物を有効成分とする抗癌剤。
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