JP3534306B2 - Methods and systems for diagnosis of Kawasaki disease - Google Patents
Methods and systems for diagnosis of Kawasaki diseaseInfo
- Publication number
- JP3534306B2 JP3534306B2 JP2000065601A JP2000065601A JP3534306B2 JP 3534306 B2 JP3534306 B2 JP 3534306B2 JP 2000065601 A JP2000065601 A JP 2000065601A JP 2000065601 A JP2000065601 A JP 2000065601A JP 3534306 B2 JP3534306 B2 JP 3534306B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- patient
- haptoglobin
- level
- value
- index
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【0001】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、典型的川崎病およ
び非典型的(atypical)川崎病を含む川崎病の検出法に関
する。より具体的には、本発明は川崎病の診断のための
方法およびシステムに関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a method for detecting Kawasaki disease including typical Kawasaki disease and atypical Kawasaki disease. More specifically, the invention relates to methods and systems for diagnosis of Kawasaki disease.
【0002】[0002]
【従来の技術】川崎病(以後、“KD”)は、最初に日本
で川崎富作により記載された。KDは、特に5歳以下の
子供に発症する、急性全身性脈管炎である。本疾病は、
長期の熱、赤味ならびに手および足の硬化浮腫ならびに
炎症の複数の臨床的および生化学的特徴および最も一般
的に冠状動脈異常(以後、“CAA”)の合併症により特
徴付けられる。KDは、全ての人種背景の子供で世界中
で認識されている。125,000を超える例が、19
94年の最後までに報告されている(Shulman et al., K
awasaki Disease, Pediatric Rheumatology, 42:1205-
1222, 1995);日本での年間の発症例は、5歳以下の子
供100,000人当り67人である;台湾では、この
数は5歳以下の子供100,000人当り32人と概算
される。米国では、発症例は年間3,000から5,00
0の範囲である。本疾病は、最も一般的に急性冠状動脈
障害として証明されている。未処置で放置すると、重篤
な合併症および死をもたらし得る。BACKGROUND OF THE INVENTION Kawasaki Disease (hereinafter "KD") was first described in Japan by Tomisaku Kawasaki. KD is an acute systemic vasculitis that develops especially in children under the age of five. This disease is
It is characterized by multiple clinical and biochemical features of long-term fever, redness and sclerotic edema and inflammation of the hands and feet, and most commonly by complications of coronary artery abnormalities (hereinafter "CAA"). KD is recognized worldwide in children of all racial backgrounds. 19 cases with over 125,000
Reported by the end of 1994 (Shulman et al., K
awasaki Disease, Pediatric Rheumatology, 42: 1205-
1222, 1995); 67 cases per 100,000 children under the age of 5 in Japan; in Taiwan this number is estimated to be 32 per 100,000 children under the age of 5. It In the United States, cases are 3,000 to 5,000 per year.
The range is 0. The disease is most commonly documented as an acute coronary artery disorder. Leaving untreated can lead to serious complications and death.
【0003】現在、KDの診断の特異的試験は存在しな
い。病因が不明確なままであるため、初期の段階での明
確なKDの診断は非常に困難である。KDの疫学的およ
び臨床的性質に基づいて、KDは同定されいない感染性
作用因子によりもたらされ得ることが示されるが、KD
は一定の遺伝的素因の個体において免疫介在症候群を導
くことが確認されている。Currently, there is no specific test for the diagnosis of KD. The diagnosis of definite KD in the early stages is very difficult because the etiology remains unclear. Based on the epidemiological and clinical properties of KD, it has been shown that KD may be caused by an unidentified infectious agent.
Has been identified to lead to immune-mediated syndromes in individuals with certain genetic predispositions.
【0004】KDは、5日以上続く熱、結膜充血、唇お
よび口腔粘膜の変化、末梢四肢の変化、皮膚発疹および
頸部リンパ節症を含む6個の症状のうち5個の同定によ
り臨床的に診断される(Morens DM. et al., National S
urveillance of Kawasaki Disease.Pediatrics 65:21-
258, 1980)。通常、6個の症状のうち5個がKDの決定
の基準と見なされる。KD is clinical by the identification of 5 out of 6 symptoms including fever lasting 5 days or longer, conjunctival hyperemia, changes in lip and oral mucosa, changes in peripheral extremities, skin rash and cervical lymphadenopathy. (Morens DM. Et al., National S
urveillance of Kawasaki Disease.Pediatrics 65: 21-
258, 1980). Usually, 5 out of 6 symptoms are considered as the criteria for determining KD.
【0005】臨床的顕示の種々の重症度および不定の様
相のため、KDに罹患しているある患者において、特徴
的な冠状動脈異常が、KDの基準に合わない病気の発症
の後に出現し、非典型的川崎病(AKD)と呼ばれる(Row
ley et al., Incomplete Kawasaki Disease with Coron
ary Artery Involvement. Eur. J. Pediatr, 151:577-
580, 1992)。AKDの診断は、これらの患者が、6個の
症状のうち3個か4個しか有しないため、困難である。
実際、KDの決定の全ての基準に合わせるのは、AKD
の発見には厳しすぎ、心筋梗塞または突然死の続発症を
もたらす。冠状動脈脈管炎の全ての患者は、4個以下の
症状を有する(Boven et al., AtypicalKawasaki Diseas
e Citation:An Often Missed Diagnosis;(Joffe et a
l., Atypical and Complicated Kawasaki Disease in I
nfants, Do We Need Criteria?,West J Med, 162:322-
327, 1995)。冠状動脈異常(CAA)は、回復段階の間の
心臓病による突然死をもたらし得るため、KDに付随す
る最も特徴的で恐ろしい合併症である(Syed et al., Co
ronary Artery Aneurysm:A Review, Progress in Card
iovascular Diseases, 40:77-87, 1997)。ある場合アス
ピリンと組合わせる静脈内免疫グロブリン(IVIG)で
の初期治療は、急性相のCAAの発生率を減少させるの
に有効であることが判明した(Furusho et al., Japanes
e Gamma Globulin Trials for Kawasaki Disease, In S
hulman ST, ed, Kawasaki Disease.New York:Alan R L
iss Inc. pp.425-432, 1986; Newburger et al., The T
reatment of Kawasaki Syndrome With Intravenous Gam
ma Globulin. N Eng J Med315:341-347, 1986)。Because of the varying degrees of clinical manifestation and indefinite aspects, in some patients with KD, characteristic coronary artery abnormalities appear after the onset of a disease that does not meet the criteria for KD, Called Atypical Kawasaki Disease (AKD) (Row
ley et al., Incomplete Kawasaki Disease with Coron
ary Artery Involvement. Eur. J. Pediatr, 151: 577-
580, 1992). Diagnosis of AKD is difficult because these patients have only 3 or 4 out of 6 symptoms.
In fact, it is AKD that meets all the criteria of KD's decision.
Is too harsh to detect, resulting in sequelae of myocardial infarction or sudden death. All patients with coronary vasculitis have less than 4 symptoms (Boven et al., Atypical Kawasaki Diseas
e Citation: An Often Missed Diagnosis ; (Joffe et a
l., Atypical and Complicated Kawasaki Disease in I
nfants, Do We Need Criteria ?, West J Med, 162: 322-
327, 1995). Coronary artery abnormalities (CAA) are the most characteristic and horrifying complications associated with KD because they can lead to sudden death from heart disease during the recovery phase (Syed et al., Co
ronary Artery Aneurysm: A Review, Progress in Card
iovascular Diseases, 40: 77-87, 1997). Initial treatment with intravenous immunoglobulin (IVIG) in some cases in combination with aspirin has been shown to be effective in reducing the incidence of acute phase CAA (Furusho et al., Japanes.
e Gamma Globulin Trials for Kawasaki Disease, In S
hulman ST, ed, Kawasaki Disease.New York: Alan RL
iss Inc. pp.425-432, 1986; Newburger et al., The T
reatment of Kawasaki Syndrome With Intravenous Gam
ma Globulin. N Eng J Med 315: 341-347, 1986).
【0006】抗腫瘍壊死因子モノクローナル抗体を使用
した患者のKDの診断を確認する方法は、USP5,0
75,236に記載された。更に、USP5,286,6
23は、免疫アッセイまたはVβ2またはVβ8.1を
発現するmRNAを測定することにより、Vβ2または
Vβ8.1のレベルを決定するために、患者から取った
サンプルを含むT細胞レセプターをアッセイすることを
含む、患者におけるKDの可能性をスクリーニングする
方法を提供した。毒素ショック症候群毒素−1(TSS
T−1)に特異的に結合する抗体を使用した、患者のK
Dの可能性のスクリーニング法は、USP547071
6に記載された。しかし、上記の引用文献の方法は、い
ずれも、これらの既知の方法で検出する物質が、また他
の疾病に罹患している患者に存在するため、KDの厳密
な診断または検出を提供しない。A method for confirming the diagnosis of KD in a patient using an anti-tumor necrosis factor monoclonal antibody is disclosed in USP 5.0.
75,236. In addition, USP 5,286,6
23 comprises assaying T cell receptors including a sample taken from a patient to determine the level of Vβ2 or Vβ8.1, by immunoassay or measuring mRNA expressing Vβ2 or Vβ8.1 , Provided a method of screening for KD potential in patients. Toxin shock syndrome toxin-1 (TSS
K of a patient using an antibody that specifically binds to T-1)
A screening method for the possibility of D is described in USP 547071.
6 are described. However, none of the methods of the above cited references provide a rigorous diagnosis or detection of KD, because the substances detected by these known methods are also present in patients suffering from other diseases.
【0007】上記のように、KDまたはAKDの処置の
戦術を初期に決定できるように、初期段階でKDおよび
AKDを診断するための有効で特異的な方法を発見する
緊急で、非常に重要な必要性がある。As mentioned above, it is an urgent and very important finding of an effective and specific method for diagnosing KD and AKD at an early stage so that the tactics for the treatment of KD or AKD can be decided early. There is a need.
【0008】[0008]
【発明の要約】本発明の一つの目的は、患者のハプトグ
ロビン(Hp)の血中レベル対アポリポタンパク質A1
(A1)の血中レベルの比率を指数として使用した、川崎
病(KD)の疑いのある患者のKDを診断する方法の提供
である。SUMMARY OF THE INVENTION One object of the present invention is to measure blood levels of haptoglobin (Hp) in patients versus apolipoprotein A1.
The present invention provides a method for diagnosing KD in a patient suspected of having Kawasaki disease (KD), using the ratio of the blood level of (A1) as an index.
【0009】特に、請求している本発明は、
(a)A値を得るための、患者のハプトグロビン(Hp)の
血中レベル(w/v)の測定;
(b)B値を得るための、患者のアポリポタンパク質A1
(Apo A1)の血中レベル(w/v)の測定;
(c)指数としてのA/Bの計算;
(d)(c)段階で得た指数A/Bとカットオフ値(限界値)
との比較、ここでカットオフ値を基本にして、陽性予測
値(PPV)は70%より高い;そして
(e)指数がカットオフ値より高い場合、患者をKDに罹
患しているとして診断することを含む、KDの疑いのあ
る患者の川崎病(KD)の診断法を提供する。In particular, the claimed invention is (a) measuring blood levels (w / v) of haptoglobin (Hp) in a patient to obtain an A value; (b) obtaining a B value. , Patient apolipoprotein A1
Measurement of blood level (w / v) of (Apo A1); (c) Calculation of A / B as index; (d) Index A / B obtained in step (c) and cutoff value (limit value)
And a positive predictive value (PPV) higher than 70%, based on the cutoff value; and (e) an index higher than the cutoff value, diagnoses the patient as having KD A method for diagnosing Kawasaki disease (KD) in a patient suspected of having KD is provided.
【0010】本発明の他の目的は、ハプトグロビンの表
現型を使用した、KDの初期の処置の戦術を決定するた
めの、KDの疑いのある患者の、非典型的(変態性)また
は典型的川崎病の診断法の提供である。本発明はまた、
KDの疑いのある患者のKDおよび/またはAKDのを
診断するためのシステムを提供する。Another object of the invention is to use the haptoglobin phenotype to determine the atypical (metamorphic) or typical of KD suspected patients to determine the tactics of early treatment of KD. It is the provision of a diagnostic method for Kawasaki disease. The present invention also provides
Provided is a system for diagnosing KD and / or AKD in a patient suspected of having KD.
【0011】
[図面の簡単な説明]
図1はKD患者のハプトグロビンの表現型を示す。図2
(a)は、KDの疑いの有る患者が発熱した日数および患
者で提示されるHpの表現型を示す。図2(b)は、Hp
表現型が各々Hp2−2およびHp2−1+Hp1−1
である患者のHpレベルを示す。BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 shows the phenotype of haptoglobin in KD patients. Figure 2
(a) shows the days of fever in patients with suspected KD and the phenotype of Hp presented by the patients. Figure 2 (b) shows Hp
Phenotypes are Hp2-2 and Hp2-1 + Hp1-1, respectively
Shows the Hp level of the patient.
【0012】一つの態様において、本発明は、患者のハ
プトグロビン(Hp)の血中レベル(重量/容量)対アポリ
ポタンパク質A1(Apo 1)の血中レベル(重量/容
量)の比率を指数として使用した、川崎病(KD)の疑い
のある患者のKDを診断する方法の提供である。In one embodiment, the present invention uses the ratio of the blood level (weight / volume) of haptoglobin (Hp) to the blood level (weight / volume) of apolipoprotein A1 (Apo 1) in a patient as an index. The present invention also provides a method for diagnosing KD in a patient suspected of having Kawasaki disease (KD).
【0013】驚くべきことに、ハプトグロビン(Hp)の
血中レベル(重量/容量)対アポリポタンパク質AI(A
po AI)の血中レベル(重量/容量)の比率が、KD
の診断の指数として使用できることが、本発明により判
明した。Surprisingly, blood levels (weight / volume) of haptoglobin (Hp) versus apolipoprotein AI (A
The blood level (weight / volume) ratio of po AI is KD
It was found by the present invention that it can be used as an index for the diagnosis of.
【0014】ハプトグロビン(Hp)は、ヒトおよび他の
哺乳類の血液のような殆どの体液に存在するヘモグロビ
ン結合急性相タンパク質である。患者のHpの血中レベ
ルは、患者が炎症、異なる病因の感染、外傷、組織障害
および悪性増殖に罹患している時増加するが、患者が溶
血状態および重症肝細胞欠乏にある時、減少する。従っ
て、Hpの血中レベルの変化は、種々の病理学的状態に
ある患者の診断および/または処置の効果の評価に使用
できる(Dobryszycka W. 1997, Biological Funcitons o
f Haptoglobin-New Pieces to an Old Puzzle, Eur J C
lin Chem ClinBiochem;35:647-654)。Haptoglobin (Hp) is a hemoglobin-binding acute phase protein that is present in most body fluids such as blood of humans and other mammals. Blood levels of Hp in a patient increase when the patient suffers from inflammation, infection of different etiologies, trauma, tissue damage and malignant growth, but decreases when the patient is in a hemolytic condition and severe hepatocyte deficiency . Thus, changes in blood levels of Hp can be used to assess the effectiveness of diagnosis and / or treatment of patients with various pathological conditions (Dobryszycka W. 1997, Biological Funcitons.
f Haptoglobin-New Pieces to an Old Puzzle, Eur JC
lin Chem ClinBiochem; 35: 647-654).
【0015】Hpのレベルは、比濁アッセイを使用して
測定できる。アッセイは感受性であり、2.5−7.4%
の変化の係数(CV)の範囲のラン内精度および7.0(C
V)のラン間精度を示す(Lente et al., Evaluation of
a Nephelometric Assay forHaptoglobin and its Clini
cal Useness)。The level of Hp can be measured using a nephelometric assay. The assay is sensitive, 2.5-7.4%
Accuracy within the range of the coefficient of change (CV) and 7.0 (C
V) shows the accuracy between runs (Lente et al., Evaluation of
a Nephelometric Assay for Haptoglobin and its Clini
cal Useness).
【0016】アポリポタンパク質AI(Apo AI)
は、95%より高い量で高密度コレステロールを含む血
中の主要タンパク質である。Apo AIはまた比濁ア
ッセイにより測定できる。Apolipoprotein AI (Apo AI)
Is a major protein in blood containing high density cholesterol in an amount higher than 95%. Apo AI can also be measured by a nephelometric assay.
【0017】他の疾病に罹患している患者と比較して、
KDに罹患している患者は、Hpの有意に増加したレベ
ルおよびApo AIの有意に減少したレベルを有する
ことが驚くべきことに判明した。従って、本発明におい
て、HPの血中レベルとApo A1の血中レベルの比
率(Hp/Apo AI)が指数として使用できると結論
付けている。本発明に従って、本比率を使用したKDの
診断法は非常な特異性を有する。Compared to patients suffering from other diseases,
It was surprisingly found that patients suffering from KD have significantly increased levels of Hp and significantly decreased levels of Apo AI. Therefore, it is concluded in the present invention that the ratio between the blood level of HP and the blood level of Apo A1 (Hp / Apo AI) can be used as an index. According to the invention, the diagnostic method of KD using this ratio has great specificity.
【0018】特に、KDの疑いの有る患者の川崎病(K
D)の診断法は:
(a)A値を得るための、患者のハプトグロビン(Hp)の
血中レベル(w/v)の測定;
(b)B値を得るための、患者のアポリポタンパク質AI
(Apo AI)の血中レベル(w/v)の測定;
(c)指数としてのA/Bの計算;
(d)(c)段階で得た指数A/Bとカットオフ値との比
較、ここでカットオフ値を基本にして、陽性予測値(P
PV)は70%より高い;そして
(e)指数がカットオフ値より高い場合、患者をKDに罹
患しているとして診断することを含む。In particular, Kawasaki disease (K
The diagnostic method of D) is: (a) measurement of the blood level (w / v) of the patient's haptoglobin (Hp) to obtain the A value; (b) the patient's apolipoprotein AI to obtain the B value.
(Apo AI) blood level (w / v) measurement; (c) calculation of A / B as index; (d) comparison of index A / B obtained in step (c) with cutoff value, Based on the cutoff value, the positive predictive value (P
PV) is higher than 70%; and (e) if the index is higher than the cut-off value, this includes diagnosing the patient as suffering from KD.
【0019】本発明の診断試験の精度を確認するため
に、本発明の方法のおよび陽性預言的値(PPV)への特
異的、感受性を、引用して包含させるゴールド・スタン
ダード法(Charron et al., Diagnostic Value of Elect
rocardiography and Echocardiography for Familial H
ypertrophic Cardiomyopathy in a Genotyped Adult Po
pulation, Circulation Vol. 96, No. 1, pp. 214-219,
1997)により評価する。To confirm the accuracy of the diagnostic test of the present invention, the Gold Standard method (Charron et al), which incorporates by reference the specificity and sensitivity of the method of the present invention and to positive prophetic value (PPV). ., Diagnostic Value of Elect
rocardiography and Echocardiography for Familial H
ypertrophic Cardiomyopathy in a Genotyped Adult Po
pulation, Circulation Vol. 96, No. 1, pp. 214-219,
1997).
【0020】本発明に従って、カットオフ値は、陽性予
測値(PPV)の計算により決定できる。PPVは患者の
陽性試験の予測値である。例えば、患者の試験のPPV
が70%より高い場合、患者がKDに罹患している可能
性は70%より高いことを意味する。実施例1の表2に
示すように、カットオフ値が2.0である時、PPVは
70%より高いことが判明した。本発明に従って、カッ
トオフ値は2.0(PPVは70%より高い)、好ましく
は3.0(PPVは90%より高い)、および最も好まし
くは3.5(PPVは95%より高い)である。According to the invention, the cutoff value can be determined by calculating the positive predictive value (PPV). PPV is the predictive value of a patient's positive test. For example, the PPV of a patient trial
Is higher than 70%, it means that the patient is more likely to have KD. As shown in Table 2 of Example 1, it was found that the PPV was higher than 70% when the cutoff value was 2.0. In accordance with the present invention, the cutoff value is 2.0 (PPV is higher than 70%), preferably 3.0 (PPV is higher than 90%), and most preferably 3.5 (PPV is higher than 95%). is there.
【0021】本発明に従って、KDは急性段階の患者の
3−10日以内のように、好ましくは5−7日に、およ
び理論的には疾病の最初の日のように、初期に診断でき
る。本発明は、KDの診断の単純で、簡単で経済的であ
り、感受性の方法である。According to the present invention, KD can be diagnosed early, such as within 3-10 days, preferably 5-7 days, and theoretically the first day of illness in patients in the acute stage. The present invention is a simple, easy, economical, and sensitive method of diagnosing KD.
【0022】本発明の方法に従って、Hpのレベルおよ
びApo A1のレベルは、体液サンプル、好ましくは
血液サンプルで測定できる。好ましくは、サンプル中の
HpおよびApo AIのレベルは重量/容量(w/v)
で示す。KDの診断は、KDの疑いのある患者のHpお
よびApo AIのレベルの測定、指数としての比率
(Hp/Apo AI)の計算、およびカットオフ値と比
率の比較により行い、比率がカットオフ値より高い場
合、KDに罹患しているとして患者を診断する。According to the method of the present invention, the levels of Hp and Apo A1 can be measured in a body fluid sample, preferably a blood sample. Preferably, the levels of Hp and Apo AI in the sample are weight / volume (w / v)
Indicate. Diagnosis of KD is a measure of Hp and Apo AI levels in patients suspected of KD, ratio as an index
By calculating (Hp / Apo AI) and comparing the cutoff value with the ratio, if the ratio is higher than the cutoff value, the patient is diagnosed as suffering from KD.
【0023】他の態様において、本発明は、ハプトグロ
ビン(Hp)の表現型を使用した、KDの処置の戦術を決
定するための、KDの疑いのある患者の、非典型的また
は典型的川崎病の診断法を提供する。本方法は、患者の
ハプトグロビン(Hp)の表現型の同定、上記段階で同定
したハプトグロビン(Hp)の表現型を基本にした、KD
の初期の治療の戦術の決定を含む。In another aspect, the present invention provides an atypical or typical Kawasaki disease of a patient suspected of KD for determining a tactic for treatment of KD using a haptoglobin (Hp) phenotype. To provide a diagnostic method. This method is based on the phenotype of haptoglobin (Hp) of a patient, based on the haptoglobin (Hp) phenotype identified in the above step.
Including early therapeutic tactical decisions.
【0024】ハプトグロビン(Hp)は遺伝的多形性を示
す。3つの主な表現型(フェノタイプ)は、Hp1-1、
Hp2-1およびHp2-2として名付けられ、2つの対
立遺伝子はHp1およびHp2である。Hp多形性は、
免疫応答ならびに自己免疫および炎症疾患に関係すると
思われている(Angloisl et al., 1996, Biological and
Clinical Significance of Haptoglobin Polymorphism
in Humans)。ハプトグロビンの生物学的および臨床的
な意義は、本質的に、ハプトグロビンとヘモグロビンと
の反応、ヘモグロビン刺激性脂質過酸化(peroxidation)
に対する酸化防止作用およびプロスタグランジン合成に
おける阻害効果が含まれる(DobryszyckaW., Biological
Functions of Haptoglobin-New Pieces to an Old Puz
zle, Eur J Clin Chem Clin Biochem 1997;35:647-65
4)。しかし、従前の技術では、ハプトグロビンとKDの
関係は開示されていない。Haptoglobin (Hp) exhibits genetic polymorphism. The three main phenotypes (phenotypes) are Hp1-1,
Named as Hp2-1 and Hp2-2, the two alleles are Hp1 and Hp2. Hp polymorphism is
It is thought to be involved in the immune response and autoimmune and inflammatory diseases (Angloisl et al., 1996, Biological and
Clinical Significance of Haptoglobin Polymorphism
in Humans). The biological and clinical significance of haptoglobin is essentially the reaction of haptoglobin with hemoglobin, hemoglobin-stimulated lipid peroxidation.
And its inhibitory effect on prostaglandin synthesis (Dobryszycka W., Biological
Functions of Haptoglobin-New Pieces to an Old Puz
zle, Eur J Clin Chem Clin Biochem 1997; 35: 647-65
Four). However, the related art does not disclose the relationship between haptoglobin and KD.
【0025】通常、不定型KDは、疾患(illness)初日
から、7日内には見られず、患者は臨床的に診断され、
そのため、KD処置のストラテジーを早期に決定するこ
とができない。驚くべきことに、本発明により、Hpの
表現型は、KD内のCAA形成に付随することがわかっ
た。即ち、殆どのHp2-2患者は、定型KDとして臨
床的に診断され、殆どのHp2-1およびHp1-1患者
は、不定型KDとして臨床的に診断された。KDの疑い
のある患者において、Hpの表現型がHp2-1または
Hp1-1であるならば、患者のKD処置は疾患初日か
ら、7日内に決定され、CAA形成を防止できることを
示唆する。Usually, atypical KD is not seen within 7 days from the first day of illness, and the patient is clinically diagnosed,
Therefore, the strategy for KD treatment cannot be determined early. Surprisingly, the present invention revealed that the Hp phenotype was associated with CAA formation within KD. That is, most Hp2-2 patients were clinically diagnosed as atypical KD and most Hp2-1 and Hp1-1 patients were clinically diagnosed as atypical KD. If the phenotype of Hp is Hp2-1 or Hp1-1 in patients with suspected KD, then KD treatment of the patient is determined within 7 days from the first day of disease, suggesting that CAA formation can be prevented.
【0026】本発明の開示は、急性段階のHpレベルが
Hpの表現型に基づき変化することである。Hpの表現
型の同定に基づき、小児科医は、IVIG治療のよう
な、KD治療のストラテジーを早期に決定し得、またK
D処置のタイミングを決定し得、CAAを防止し得る。
本発明に示すとおり、たとえ患者がAKDであると診断
されても、Hp対立遺伝子を有する患者でCAAを患う
ケースを48.1%から8.3%に減少させることがで
き、KD処置を早期に決定できた。The disclosure of the present invention is that Hp levels in the acute phase change based on the Hp phenotype. Based on the phenotypic identification of Hp, pediatricians can determine KD treatment strategies early, such as IVIG treatment, and
The timing of D treatment may be determined and CAA may be prevented.
As shown in the present invention, even if a patient is diagnosed with AKD, the number of cases with CAA in patients with Hp allele can be reduced from 48.1% to 8.3%, and KD treatment can be performed early. I was able to decide.
【0027】ある実施態様では、本発明は、KDの疑い
のある患者のKDおよび/またはAKDの診断システム
を提供する。本発明のシステムには、以下の事項が含ま
れる。
(a)当該患者におけるハプトグロビン(Hp)のレベル
(w/v)を測定し、A値を得る方法、(b)当該患者にお
けるアポリポタンパク質AI(Apo AI)のレベル(w
/v)を測定し、B値を得る方法、(c)指標としてA/
Bの比を算出し、次いで、指標A/Bをカットオフ値
(カットオフ値に基づくと、陽性予測値(PPV)は70
%よりも高くなる。)と比較し、指標(A/B)がカット
オフ値よりも高ければ、当該患者をKD患者と診断する
方法。In one embodiment, the present invention provides a diagnostic system for KD and / or AKD in a patient suspected of having KD. The system of the present invention includes the following items. (a) Haptoglobin (Hp) level in the patient
(w / v) to obtain an A value, (b) apolipoprotein AI (Apo AI) level (w
/ V) to obtain the B value, (c) A / as an index
The ratio of B is calculated, and then the index A / B is set as the cutoff value.
(Based on the cutoff value, the positive predictive value (PPV) is 70
Higher than%. )) And the index (A / B) is higher than the cutoff value, the patient is diagnosed as a KD patient.
【0028】本発明により、HpおよびApo AIを
それぞれ検出する方法(HpおよびApo AIレベルを
同定および/または測定することを含む)には、Hpに
特異的なリガンドを用いる結合アッセイまたはApo
AIに特異的なリガンドを用いる結合アッセイのような
もの、それぞれを含む。さらに好ましくは、リガンド
は、ポリクローナル抗体であり、最も好ましくは、モノ
クローナル抗体である。HpまたはApo AIに特異
的なポリクローナルおよび/またはモノクローナル抗体
は当分野に既知の標準的技術により調製することができ
る。モノクローナル抗体を調製する方法には、任意の融
合技術を通じて所望の特異性(HpおよびAop AIと
の反応性)を有する抗体を作成できる不滅のセルライン
を調製すること、および高い反応性および特異性を有す
るハイブリドーマを得ること、およびハイブリドーマコ
ロニーの上清からモノクローナル抗体を得ることを含
む。ポリクローナル抗体は商業的に利用することができ
る(Calbiochem Inc., USAなど)。According to the present invention, methods for detecting Hp and Apo AI, respectively, including identifying and / or measuring Hp and Apo AI levels, include binding assays using Hp-specific ligands or Apo AI.
Such as binding assays using ligands specific for AI, each. More preferably, the ligand is a polyclonal antibody, most preferably a monoclonal antibody. Polyclonal and / or monoclonal antibodies specific for Hp or Apo AI can be prepared by standard techniques known in the art. Methods for preparing monoclonal antibodies include preparing immortal cell lines capable of producing antibodies with the desired specificity (reactivity with Hp and Aop AI) through any fusion technique, and high reactivity and specificity. And obtaining a monoclonal antibody from the supernatant of the hybridoma colony. Polyclonal antibodies are commercially available (Calbiochem Inc., USA etc.).
【0029】任意の既知のまたは通常の、HpまたはA
po AIを検出する方法を本発明において使用するこ
とができる。好ましい実施態様において、HpまたはA
poAIのレベルは、固体支持体に固定化した抗体を用
いるアッセイにより、測定することができる。次いで、
結合したHpまたはApo AIは、レポーターを含む
検出試薬を用い検出し得る。適当な検出試薬には、固定
化抗体-Hp/Apo AI複合体と結合し、検出するこ
とができる任意の化合物を含む。好ましいレポーターに
は、酵素、基質、補因子、阻害剤、色素、放射能物質、
発光物質および蛍光物質を含む。結合試薬とレポーター
の結合は、当分野に既知の標準的方法を用い行い得る。
通常の結合試薬も商業的に利用し得る。Any known or usual Hp or A
Methods of detecting po AI can be used in the present invention. In a preferred embodiment, Hp or A
The level of poAI can be measured by an assay using an antibody immobilized on a solid support. Then
Bound Hp or Apo AI can be detected using a detection reagent containing a reporter. Suitable detection reagents include any compound capable of binding and detecting the immobilized antibody-Hp / Apo AI complex. Preferred reporters include enzymes, substrates, cofactors, inhibitors, dyes, radioactive substances,
It includes a luminescent material and a fluorescent material. Coupling of the binding reagent and the reporter can be done using standard methods known in the art.
Conventional binding reagents are also commercially available.
【0030】次いで、検出試薬を、固定化抗体-Hp/
Apo AI複合体と十分な時間インキュベーション
し、結合したHp/Apo AIを検出する。次いで、
結合してない検出試薬を取り除き、結合した検出試薬
を、レポーター基を用い検出する。レポーター検出に用
いる方法は、レポーターの性質に依存する。放射能物質
の場合、シンチレーション・カウンティングまたは放射
能写真法が通常適当である。分光器方法を用い、色素、
発光基および蛍光基を検出し得る。レポーターとしての
酵素は、基質を加え、その後、その産物を分光器または
他の分析により、通常検出し得る。Then, the detection reagent was immobilized antibody-Hp /
Incubate with Apo AI complex for sufficient time to detect bound Hp / Apo AI. Then
Unbound detection reagent is removed and the bound detection reagent is detected using a reporter group. The method used to detect the reporter depends on the nature of the reporter. For radioactive materials, scintillation counting or radiography is usually appropriate. Using the spectroscopic method,
Luminescent and fluorescent groups can be detected. The enzyme as a reporter can usually detect the product by adding a substrate followed by spectroscopic or other analysis.
【0031】固体支持体は、当業者に既知であり、抗体
が結合し得る任意の固体物質であり得る。例えば、固体
支持体は、マイクロタイタープレートにおけるテストウ
ェルまたはニトロセルロースもしくは他の適当な膜であ
り得る。他に、支持体は、ガラスのようなビーズまたは
ディスク、ガラス繊維、ラテックス、またはポリスチレ
ンもしくは塩化ポリビニルのようなプラスチック物質で
ある。The solid support can be any solid material known to those of ordinary skill in the art to which an antibody can be attached. For example, the solid support can be a test well in a microtiter plate or nitrocellulose or other suitable membrane. Alternatively, the support is a bead or disc such as glass, fiberglass, latex, or a plastic material such as polystyrene or polyvinyl chloride.
【0032】抗体は、当分野に既知の様々な技術を用い
固体支持体に結合し得る。本発明のとおり、本明細書で
使用する“結合する”という語は、非共有結合的会合
(吸着のような)および共有結合的結合(直接結合または
架橋試薬となり得る)の両方をいう。The antibody may be attached to a solid support using various techniques known in the art. As used herein, the term "bind" as used herein refers to non-covalent association.
It refers to both (such as adsorption) and covalent binding (which can be direct binding or cross-linking reagents).
【0033】特定の実施態様では、アッセイは、免疫吸
着剤と結合した酵素(ELISA)である。アッセイは、
最初に、固体支持体上に固定化された抗体とサンプルを
接触させる。そのためサンプル内のHpおよびApo
AIは固定化抗体と結合することができる。結合してい
ないサンプルを、固定化抗体から取り除き、固定化抗体
-Hp/Apo AI複合体と結合できる検出試薬を加え
る。In a particular embodiment, the assay is an enzyme linked to an immunosorbent (ELISA). The assay is
First, the sample is contacted with the antibody immobilized on the solid support. Therefore, Hp and Apo in the sample
AI can bind to the immobilized antibody. Remove unbound sample from immobilized antibody
-Add a detection reagent capable of binding the Hp / Apo AI complex.
【0034】他の実施態様では、本発明は、KDの疑い
のある患者においてAKDまたはKDを診断し、早期に
KD処置のストラテジーを決定するシステムであって、
患者のHp表現型を同定する方法(もし患者のHp表現
型がHp2-1またはHp1-1ならば、患者のKD処置
が疾患初日から7日内に決定され、CAA形成を防止で
きることを示唆する)を含むシステムを提供する。Hp
の表現型を同定する方法は、表現型Hp1-1、Hp1-
2およびHp2-2を同定するための、Hpα2サブユ
ニットおよびHpα1サブユニットに特異的なリガンド
を用いる結合アッセイなどを含む。ハプトグロビンの表
現型はまた、ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)ゲル電気
泳動またはポリアクリルアミドゲルの等電点電気泳動の
ような当分野に既知の方法の後、上記のようにHpα1
またはHpα2サブユニットに特異的な抗体を用いてイ
ムノブロットすることにより、決定できる。In another embodiment, the present invention is a system for diagnosing AKD or KD in a patient suspected of having KD and for determining an early KD treatment strategy,
A method of identifying a patient's Hp phenotype (if the patient's Hp phenotype is Hp2-1 or Hp1-1, suggests that the patient's KD treatment can be determined within 7 days from the first day of disease, preventing CAA formation) A system including is provided. Hp
The method of identifying the phenotype of Hp1-1, Hp1-1-
2 and Hp2-2 are identified, including binding assays using ligands specific for the Hpα2 and Hpα1 subunits. The haptoglobin phenotype can also be determined by methods known in the art such as sodium dodecyl sulfate (SDS) gel electrophoresis or polyacrylamide gel isoelectric focusing, followed by Hpα1 as described above.
Alternatively, it can be determined by immunoblotting using an antibody specific to the Hpα2 subunit.
【0035】以下に実施例を、例示により提供するが、
これらに制限するものではない。The following examples are provided by way of illustration,
It is not limited to these.
【0036】実施例
実施例1 Hp/Apo AIの比率を使用することによる
KDの診断
試料収集
KDの診断は、Department of Pesliatyies of Kaoh
siung Medical Collage,台湾によるCenter of Dis
ease Control(CDC,Morensら,1980)(Morensら,
Pediatrics 65:21,1980)で確立された臨床基準
に基づいた。血清試料をKD患者から集めた。外来患者
の診療所を訪れたKDではない患者から得られた試料を
正常な対照として連続的に集めた。加えて、本発明の方
法の特異性を明らかにするために、長期にわたり発熱し
ているがKDではない肺炎の患者から得られた血清試料
を病気の対照として連続的に集めた。血清試料は全て、
24時間以内は4℃、または1ヶ月間は−20℃で保存
した後、試料を生化学的に特性決定した。EXAMPLES Example 1 Diagnostic Diagnosis of KD by Using the Ratio Hp / Apo AI The diagnosis of KD was performed using the Department of Pesliatyies of Kaoh.
siung Medical Collage, Taiwan Center of Dis
ease Control (CDC, Morens et al., 1980) (Morens et al.,
Pediatrics 65:21, 1980). Serum samples were collected from KD patients. Samples from non-KD patients visiting the outpatient clinic were serially collected as normal controls. In addition, in order to demonstrate the specificity of the method of the present invention, serum samples obtained from patients with pneumonia that had long-term fever but not KD were serially collected as disease controls. All serum samples
Samples were biochemically characterized after storage at 4 ° C for up to 24 hours or at -20 ° C for 1 month.
【0037】イムノネ(immunone)によるHpおよびApo
AIの測定
凍結させた血清試料または新たな血清試料を温めて室温
に戻した。HpおよびApo AIのレベルをレイト・イム
ノネフェロメティ(rate immunonephelomety)(IMMA
GETM 免疫化学システム,Beckman,米国)により測定
した。Hp and Apo by immunone
Measurement of AI Frozen or fresh serum samples were warmed to room temperature. The levels of Hp and Apo AI are determined by rate immunonephelomety (IMMA
GE ™ immunochemical system, Beckman, USA).
【0038】結果
KD患者、肺炎患者、および正常な患者におけるHpお
よびApo AIの血中レベルの変化を表1に示す。KD
の子供達におけるHpの血中レベルは、正常な子供達に
おけるHpの血中レベルより約5、6倍高かった。しか
しながら、KDの子供達におけるApo AIのレベル
は、正常な子供達のApo AIのレベルより約52%低
かった。肺炎のみを患っている子供達におけるHpのレ
ベルは、正常な子供達のHpのレベルより約3.0倍高か
った。肺炎を患っている子供達におけるApo AIのレ
ベルは、正常な子供達のApo AIのレベルより35%
低かった。Results Changes in blood levels of Hp and Apo AI in KD patients, pneumonia patients, and normal patients are shown in Table 1. KD
Blood levels of Hp in normal children were about 5 to 6 times higher than those in normal children. However, the level of Apo AI in children with KD was approximately 52% lower than the level of Apo AI in normal children. Hp levels in children with pneumonia alone were approximately 3.0 times higher than those in normal children. The level of Apo AI in children with pneumonia is 35% higher than that in normal children
It was low.
【0039】KD患者および正常な患者における比率
(Hp/Apo AI)は、著しく異なっていた。KD患者に
おける比率は、正常な子供達および肺炎を患っている子
供達より、各々、13.6倍および2.45倍大きかった
(表1)。従って、該比率(Hp/Apo AI)は、KDを診
断するための指標として使用することができることを提
示した。感受性、特異性、および様々な限界値に対する
陽性の予測値を表2に記した。感受性は、次の式で計算
する:
真陽性/(真陽性+偽陰性)×100。Ratio in KD and normal patients
(Hp / Apo AI) were significantly different. The ratio in KD patients was 13.6 and 2.45 times greater than in normal children and children with pneumonia, respectively.
(Table 1). Therefore, it was suggested that the ratio (Hp / Apo AI) can be used as an index for diagnosing KD. Sensitivity, specificity, and positive predictive value for various limits are listed in Table 2. Sensitivity is calculated by the following formula: true positive / (true positive + false negative) × 100.
【0040】特異性は、次の式で計算した: 真陰性/(真陰性+偽陰性)×100。The specificity was calculated by the following formula: True negative / (true negative + false negative) x 100.
【0041】PPVは、次の式で計算した: 真陰性/(真陽性+偽陽性)×100。PPV was calculated by the following formula: True negative / (true positive + false positive) × 100.
【0042】表2に示すように、限界値は、PPVが7
0%より高いことを示す2.0より大きいという結論を
下すことができ、十分な感受性および特異性は、5−1
0日間長期にわたり発熱している患者か、または5−7
日間発熱している患者に対して得ることができた。As shown in Table 2, the limit value is 7 for PPV.
It can be concluded that it is greater than 2.0, indicating higher than 0%, and that sufficient sensitivity and specificity is 5-1.
Patients who have fever for a long period of 0 days, or 5-7
It could be obtained for patients with fever for days.
【0043】[0043]
【表1】 [Table 1]
【0044】[0044]
【表2】 [Table 2]
【0045】実施例2 Hp表現型を使用するAKD診
断法サンプル収集
題目について、KDを有する3ヶ月から5歳および10
ヶ月の54人の子供に対して試験した(表3に示す)。
彼らは実際に、台湾のChungo-Ho Memorial Hospital、K
aohsiung Medical Collegeの小児科部門の患者である。
患者は、2−28日の範囲、平均で8.5日間入院し
た。KDの診断は、疾病管理センター発行の臨床標準に
基づいて行なった(Center for Disease Control: CDC,
Morens etal., 1980)。疾病段階の定義は、Schaller(19
96)の分類、これはHicksおよびMelish(1986)のものを修
正したものである、に従って行なった。従って、主要な
臨床所見および合併症を伴う1−10日の持続時間を、
KDの“急性(acute)”段階と定義した。臨床所見およ
び合併症を伴う11−20日の持続時間を、KDの“亜
急性(subacute)”段階と定義した。KD患者と対照人口
との間のHp表現型の分布を比較するために、診療所の
外来患者の子供の血清サンプルを連続的に収集した。Example 2 AKD Diagnostic Method Sample Collection Using the Hp Phenotype For the subject, 3 months to 5 years and 10 years with KD
Tested on 54 children per month (shown in Table 3).
They are actually Chungo-Ho Memorial Hospital, Taiwan, K
He is a patient in the pediatric department of aohsiung Medical College.
Patients were hospitalized for a mean of 8.5 days with a range of 2-28 days. Diagnosis of KD was based on the clinical standards published by the Center for Disease Control (CDC,
Morens et al., 1980). The definition of disease stage is Schaller (19
96), which is a modification of that of Hicks and Melish (1986). Therefore, a duration of 1-10 days with major clinical findings and complications
It was defined as the "acute" stage of KD. A duration of 11-20 days with clinical findings and complications was defined as the "subacute" stage of KD. To compare the distribution of the Hp phenotype between KD patients and the control population, serial serum samples of outpatient clinic children were collected.
【0046】方法
血清サンプルを新たに採取した血液から分離し、一定量
に分け、−20℃で保存し、臨床化学試験用および実験
室試験用とした。Hpのレベルを免疫比濁割合で測定し
た(IMMAGETM immunochemistry Systems, Beckma
n, USA)。典型および非典型KD患者全員に、二次元超
音波心臓検査を行なった。膨張および動脈瘤を含む、C
AA評価用の超音波心臓検査特徴を、日本のKD調査委
員会から採用した。この特徴とは、冠動脈の、直径3.
0mmまたはそれ以上への拡大である。表3で、亜急性段
階のKDを有すると診断されており、IVIG処置をし
ていない7患者を除外した。残った47患者(41人は
急性段階と、6人は亜急性段階と診断)に高用量のIV
IG(2g/kg体重)およびアスピリン(60-80mg/kg体
重)を投与した。亜急性KDからの回復の期間は、患者
全員に低用量のアスピリン(3-5mg/kg体重)を処方し
た。 Method Serum samples were separated from freshly drawn blood, aliquoted and stored at -20 ° C for clinical chemistry and laboratory testing. The level of Hp was measured by the immunoturbidimetric ratio (IMMAGE ™ immunochemistry Systems, Beckma.
n, USA). Two-dimensional echocardiography was performed on all typical and atypical KD patients. C, including dilation and aneurysm
Echocardiography features for AA assessment were adopted from the Japanese KD Survey Committee. This feature is the diameter of the coronary artery 3.
Expansion to 0 mm or more. In Table 3, seven patients diagnosed with subacute stage KD and not IVIG treated were excluded. High-dose IV was given to the remaining 47 patients (41 diagnosed as acute stage and 6 as subacute stage)
IG (2 g / kg body weight) and aspirin (60-80 mg / kg body weight) were administered. During the period of recovery from subacute KD, all patients were prescribed a low dose of aspirin (3-5 mg / kg body weight).
【0047】血清タンパク質のレベルをLowry方法で測
定した。ウェスタン免疫ブロット法用の血清タンパク質
100μgのサンプルを、はじめに12.5% 硫酸ドデ
シルナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SD
S-PAGE)で分析した。電気泳動後、ゲルを緩衝溶液
(transfer buffer)(50mM トリスホウ酸塩、pH8.
3、1mM EDTA)に10分間浸した。次いで、分析
したタンパク質を、ニトロセルロース膜上でセミドライ
方法により電気移動した(OWL Scientific Plastics
Inc. Cambridge, MA)。この膜を、トゥイーンを含むト
リス緩衝食塩水(TTBS: 20mM Tris-HCl、pH7.
4、500mM NaCl、005% トゥイーン20)中
3% ゼラチンで1時間インキュベートし、TTBSで
すすいだ。その後、膜を、ヒトHp(Calibiochem; 1%ゼ
ラチンを含むTTBSで1:5000希釈)のポリクロ
ーナル抗体で、室温で30分間インキュベートした。T
TBSで3回洗浄した後、膜を、アルカリホスフェート
(Sigma: 1%ゼラチンを含むTTBSで1:5000希
釈)と共役したヤギ抗ウサギ抗体と、室温で30分間反
応させた。この膜をTTBSで3回すすいで、発現緩衝
剤(ニトロブルーテトラゾリウム 15mg、0.7% N,
N-ジメチルホルムアミド、100mlに対して30mgの
5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリルホスフェート、1
mM MgCl2、および100mM NaHCO3、pH
9.8)で室温で発現させた。Serum protein levels were measured by the Lowry method. A sample of 100 μg of serum protein for Western immunoblotting was first subjected to 12.5% sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SD).
S-PAGE). After electrophoresis, gel is buffered
(transfer buffer) (50 mM tris borate, pH 8.
It was soaked in 3, 1 mM EDTA) for 10 minutes. The analyzed proteins were then electrotransferred onto the nitrocellulose membrane by the semi-dry method (OWL Scientific Plastics
Inc. Cambridge, MA). This membrane was treated with Tween-containing Tris buffered saline (TTBS: 20 mM Tris-HCl, pH 7.
4,500 mM NaCl, 005% Tween 20)
Incubate with 3% gelatin for 1 hour and rinse with TTBS. The membrane was then incubated with a polyclonal antibody of human Hp (Calibiochem; diluted 1: 5000 in TTBS containing 1% gelatin) for 30 minutes at room temperature. T
After washing 3 times with TBS, the membrane was washed with alkaline phosphate.
The reaction was carried out for 30 minutes at room temperature with a goat anti-rabbit antibody conjugated with (Sigma: diluted 1: 5000 with TTBS containing 1% gelatin). The membrane was rinsed 3 times with TTBS and the expression buffer (nitroblue tetrazolium 15 mg, 0.7% N,
N-dimethylformamide, 30 mg 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate per 100 ml, 1
mM MgCl 2 , and 100 mM NaHCO 3 , pH
It was expressed at room temperature in 9.8).
【0048】結果
KDを有する患者のHp表現型(図1および表3)を測定
し、参考対照を伴うHp表現型の分布と比較した。表3
に示すX2静止分析による結果のとおり、KDグループ
の3つの主要表現型Hp2-2、Hp2-1、およびHP
1-1の分配は、1998年に台湾で示された参考グル
ープと比べて有意な違いはなかった。 Results The Hp phenotype of patients with KD (FIG. 1 and Table 3) was measured and compared to the distribution of Hp phenotype with a reference control. Table 3
As shown by the X 2 static analysis shown in Fig. 3, the three major phenotypes of the KD group, Hp2-2, Hp2-1, and HP.
The 1-1 distribution was not significantly different from the reference group presented in Taiwan in 1998.
【0049】[0049]
【表3】
参照:台湾1998年、Lee et al., 1998; Taiwan 196
2, Blaackwell et al.,1962; China 1983, Lianh et a
l., 1983. #川崎病の患者と台湾の対照人口との間のハ
プトグロビン分布は、有意な違いはなかった(P>0.0
5)[Table 3] Reference: Taiwan 1998, Lee et al., 1998; Taiwan 196.
2, Blaackwell et al., 1962; China 1983, Lianh et a
l., 1983. # Haptoglobin distribution between Kawasaki disease patients and control population in Taiwan was not significantly different (P> 0.0).
5)
【0050】Hp表現型はCAA形成と関連することが
示唆された。表4に示すとおり、表現型Hp2-2のK
D患者は急性段階と診断され、3人の患者がCAAを有
していた。対照的に、急性段階と診断された表現型Hp
2-1のKD患者は、そのときCAAを有していた。表
現型Hp2-1の患者は最近亜急性段階と診断され、そ
のときその患者はCAAを有していた。さらに驚くべき
ことに、Hp1-1を有する全てのKD患者は、亜急性
段階でCAAを有していると診断された。3種類Hp表
現型のKD患者のCAA形成割合は、Hp対立遺伝子1
を有する患者がより高い発生率の進行CAAを有すると
いう違いが見られた。図2は、KD診断前の熱の持続期
間がHp表現型で異なることをを示す(Hp2-2:6.
90±2.4日、Hp2-1およびHp1-1:10.0±
4.4日、P=0.05)。上述の結果より、表現型と同様
に血清Hpレベルは、CAA形成と関連があることが分
かった。しかし、HP1対立遺伝子をもつKD患者は初
期発見することができず、早い段階で適切な処置を決定
することもできなかった。それゆえに、HP1対立遺伝
子をもつKDが疑われる患者を7日以内にIVIGで処
置し、CAAの形成を防いだ。It has been suggested that the Hp phenotype is associated with CAA formation. As shown in Table 4, K of phenotype Hp2-2
Patient D was diagnosed with the acute stage and 3 patients had CAA. In contrast, phenotype Hp diagnosed as acute stage
2-1 KD patients then had CAA. A patient with the phenotype Hp2-1 was recently diagnosed with the subacute stage, at which time he had CAA. Even more surprisingly, all KD patients with Hp1-1 were diagnosed with CAA at the subacute stage. The CAA formation rate of KD patients with three Hp phenotypes is Hp allele 1
The difference was found that patients with illness had a higher incidence of advanced CAA. Figure 2 shows that the duration of fever before KD diagnosis varies with Hp phenotype (Hp2-2: 6.
90 ± 2.4 days, Hp2-1 and Hp1-1: 10.0 ±
4.4 days, P = 0.05). From the above results, it was found that serum Hp level as well as phenotype was associated with CAA formation. However, KD patients with the HP 1 allele could not be detected early and the appropriate treatment could not be determined at an early stage. Therefore, patients with suspected KD with the HP 1 allele were treated with IVIG within 7 days to prevent the formation of CAA.
【0051】[0051]
【表4】 [Table 4]
【0052】実施例3.臨床データ
Kaohsiung 医科大学(台湾)のChung-Ho記念病院・小児
科で臨床試験が行われた。患者の診断はHp/Apo
A1比を用いて行われ、処置方針が決定された。KDが
疑われた各患者のデータは、年齢、Hp価、ApA1
価、Hp/ApoA1比、およびハプトグロビン表現型
を含み、表5に示す。表から分かるように、患者のHp
/Apo A1比はすべて3.5以上である。Example 3. Clinical data A clinical trial was conducted at Chung-Ho Memorial Hospital and Pediatrics at Kaohsiung Medical University (Taiwan). Patient diagnosis is Hp / Apo
The A1 ratio was used to determine the treatment strategy. The data for each patient suspected of having KD are age, Hp value, ApA1.
Values, Hp / ApoA1 ratio, and haptoglobin phenotype are shown in Table 5. As you can see from the table, the patient's Hp
The / Apo A1 ratios are all 3.5 or more.
【0053】[0053]
【表5】表5 [Table 5] Table 5
【0054】患者No1は入院前の3日間38.6℃の
熱があった。入院第1日目で患者の体温は38.6℃で
あった。細菌培養の結果は陰性であり、病状が他の知ら
れている経過から説明できなかった。患者の臨床状態
は、KDについての通常の判定基準に適合しなかった。
患者のHp/Apo A1価が3.61まで上り、入院第
2日目に静注免疫グロブリン(IVIG)で処置した。
IVIG処置後、患者の体温は急速に下り、正常範囲と
なり、血小板レベルが増加して、一般症状が改善され
た。さらに、心臓エコー検査で、患者に冠状動脈異常
(CAA)が認められなくなった。継続的な発熱とCA
Aに加えて、患者に、唇の発赤、イチゴ状の舌、手掌と
足裏の小さい肥厚と発赤および指の落屑などの症状があ
った。このことから患者がKDと思われた。Patient No. 1 had a fever of 38.6 ° C. for 3 days before being hospitalized. On the first day of hospitalization, the patient's body temperature was 38.6 ° C. The result of the bacterial culture was negative and the pathology could not be explained by other known processes. The patient's clinical status did not meet the usual criteria for KD.
The patient had an Hp / Apo A1 titer of 3.61 and was treated with intravenous immunoglobulin (IVIG) on the second day of hospitalization.
Following IVIG treatment, the patient's body temperature dropped rapidly to the normal range, platelet levels increased, and general symptoms improved. In addition, echocardiography showed that the patient no longer had coronary artery abnormalities (CAA). Continuous fever and CA
In addition to A, the patient had symptoms such as redness of the lips, a strawberry-like tongue, small thickening and redness of the palms and soles, and desquamation of the fingers. This suggested that the patient was KD.
【0055】患者No2は入院前の6日間38℃の熱が
あった。入院第1日目で患者の体温は38.7℃であっ
た。細菌培養の結果は陰性であり、病状が他の知られて
いる経過から説明できなかった。患者の臨床状態は、K
Dについての通常の判定基準に適合しなかった。Hp/
Apo A1価が4.51まで上り、患者を入院第2日目
にIVIGで処置した。IVIG処置後、患者の体温は
正常範囲まで下がり、血小板レベルが増加して、一般症
状が改善された。継続的な発熱に加えて、患者に、CA
A、イチゴ状の舌、手掌と足裏の紅斑および両掌の緩和
な肥厚などの症状が見られた。このことから患者がKD
と思われた。この患者のハプトグロビン表現型はHp2
−2であった。Patient No. 2 had a fever of 38 ° C. for 6 days before hospitalization. On the first day of hospitalization, the patient's body temperature was 38.7 ° C. The result of the bacterial culture was negative and the pathology could not be explained by other known processes. The clinical condition of the patient is K
The usual criteria for D were not met. Hp /
Apo A1 titers increased to 4.51 and patients were treated with IVIG on the second day of admission. Following IVIG treatment, the patient's body temperature dropped to the normal range, platelet levels increased, and general symptoms improved. In addition to continuous fever
A, strawberry-like tongue, erythema on palm and sole and mild thickening of both palms were observed. From this, the patient is KD
So I thought. The haptoglobin phenotype of this patient is Hp2
It was -2.
【0056】患者No3は入院前の7日間39℃の熱が
あった。この患者は、別の病院で扁桃炎と誤診されてい
た。入院第1日目で患者の体温は38.2℃であった。
細菌培養の結果は陰性であり、病状が他の知られている
経過から説明できなかった。患者の臨床状態は、KDを
決定するための通常の判定基準に適合しなかった。患者
のHp/ApA1価は5.33まで上がった。このHp
/ApA1価からして、入院2日目にIVIGで処置す
ることが決定された。IVIG処置後、患者の体温は正
常範囲にまで下がり、血小板レベルが増加して、一般症
状が改善された。継続的な発熱以外に、患者に、CA
A、唇と指の落屑、イチゴ状の舌などの症状が見られ
た。このことから患者はKDと考えられた。患者のハプ
トグロビン表現型はHp2−2であった。Patient No. 3 had a fever of 39 ° C. for 7 days before being hospitalized. The patient was misdiagnosed as tonsillitis at another hospital. On the first day of admission, the patient's body temperature was 38.2 ° C.
The result of the bacterial culture was negative and the pathology could not be explained by other known processes. The patient's clinical status did not meet the usual criteria for determining KD. The patient's Hp / ApA1 titer rose to 5.33. This Hp
/ ApA1 titer determined to be treated with IVIG on day 2 of hospitalization. Following IVIG treatment, the patient's body temperature dropped to the normal range, platelet levels increased, and general symptoms improved. In addition to continuous fever
Symptoms such as A, exfoliation of lips and fingers, and strawberry-like tongue were observed. From this, the patient was considered to be KD. The patient's haptoglobin phenotype was Hp2-2.
【0057】患者No4は入院前の4日間40.9℃の
熱があった。入院第1日目で患者の体温は39℃であっ
た。細菌培養の結果は陰性であり、病状が他の知られて
いる経過から説明できなかった。患者の臨床状態は、K
Dについての通常の判定基準に適合しなかった。発熱の
7日間処置後でも、発熱は改善しなかった。Hp/Ap
A1価は7.38まで上り、患者を直ちにIVIGで処
置した。IVIG処置後、患者の体温は正常範囲に下が
り、血小板レベルが増加して、一般症状が改善された。
継続的な発熱に加えて、患者に、CAA、手および指の
落屑、結膜炎、赤い口内などの症状があった。このこと
から患者がKDと思われた。この患者のハプトグロビン
表現型はHp2−1であった。Patient No. 4 had a fever of 40.9 ° C. for 4 days before being hospitalized. On the first day of admission, the patient's body temperature was 39 ° C. The result of the bacterial culture was negative and the pathology could not be explained by other known processes. The clinical condition of the patient is K
The usual criteria for D were not met. After 7 days treatment of fever, fever did not improve. Hp / Ap
The A1 value went up to 7.38 and the patient was immediately treated with IVIG. Following IVIG treatment, the patient's body temperature dropped to the normal range, platelet levels increased, and general symptoms improved.
In addition to persistent fever, the patient had symptoms such as CAA, hand and finger desquamation, conjunctivitis, and red mouth. This suggested that the patient was KD. The haptoglobin phenotype of this patient was Hp2-1.
【0058】患者No5は入院前の4日間38.5℃の
熱があった。この患者は、別の病院で敗血症と誤診され
ていた。入院第1日目で患者の体温は38.5℃であっ
た。細菌培養の結果は陰性であり、病状が他の知られて
いる経過から説明できなかった。患者の臨床状態は、K
Dについての通常の判定基準に適合しなかった。Hp/
Apo A1価が9.51まで上がり、患者を入院第2日
目にIVIGで処置した。IVIG処置後、患者の体温
は正常範囲にまで下がり、血小板レベルが増加して、一
般症状が改善された。継続的な発熱に加えて、患者に、
CAA、手掌と足裏の落屑、結膜炎、イチゴ状の舌など
の症状があった。このことから患者がKDと思われた。
この患者のハプトグロビン表現型はHp2−1であっ
た。Patient No. 5 had a fever of 38.5 ° C. for 4 days before hospitalization. The patient was misdiagnosed as sepsis in another hospital. On the first day of hospitalization, the patient's body temperature was 38.5 ° C. The result of the bacterial culture was negative and the pathology could not be explained by other known processes. The clinical condition of the patient is K
The usual criteria for D were not met. Hp /
The Apo A1 titer rose to 9.51 and the patient was treated with IVIG on the second day of admission. Following IVIG treatment, the patient's body temperature dropped to the normal range, platelet levels increased, and general symptoms improved. In addition to continuous fever, the patient
Symptoms included CAA, exfoliation of the palms and soles, conjunctivitis, and strawberry-like tongue. This suggested that the patient was KD.
The haptoglobin phenotype of this patient was Hp2-1.
【0059】患者No6は入院前の4日間39℃の熱が
あった。この患者は、別の病院で猩紅熱と誤診されてい
た。入院第1日目で患者の体温は37.8℃であった。
細菌培養の結果は陰性であり、病状が他の知られている
経過から説明できなかった。患者の臨床状態は、KDに
ついての通常の判定基準に適合しなかった。Hp/Ap
o A1価が4.55まで上がり、入院第2日目にIVI
Gで処置した。IVIG処置後、患者の体温は正常範囲
まで下がり、血小板レベルが増加して、一般症状が改善
された。継続的な発熱に加えて、患者に、指の落屑、結
膜炎、イチゴ状の舌などの症状があった。このことから
患者がKDと思われた。この患者のハプトグロビン表現
型はHp2−1であった。Patient No. 6 had a fever of 39 ° C. for 4 days before being hospitalized. The patient was misdiagnosed as scarlet fever at another hospital. On the first day of hospitalization, the patient's body temperature was 37.8 ° C.
The result of the bacterial culture was negative and the pathology could not be explained by other known processes. The patient's clinical status did not meet the usual criteria for KD. Hp / Ap
o A1 price increased to 4.55, IVI on the second day of hospitalization
Treated with G. Following IVIG treatment, the patient's body temperature dropped to the normal range, platelet levels increased, and general symptoms improved. In addition to persistent fever, the patient had symptoms such as finger desquamation, conjunctivitis, and a strawberry-like tongue. This suggested that the patient was KD. The haptoglobin phenotype of this patient was Hp2-1.
【0060】患者No4−6の臨床データからは、KD
の通常の判定基準によっては早期にKDであるとHP2
−1の患者を診断することができなかった。典型的でな
いKDであるからである。しかし、Hp/ApA1価を
用いると、KDの診断が可能となり、早期にIVIGで
の処置ができる。CAA症状はIVIGによる早期の処
置で防ぐことができる。From the clinical data of patient Nos. 4-6, KD
Depending on the normal criteria for
-1 patients could not be diagnosed. This is because it is an atypical KD. However, the use of Hp / ApA1 titer enables diagnosis of KD and enables early treatment with IVIG. CAA symptoms can be prevented by early treatment with IVIG.
【0061】上記の観点からしてHp/ApA1価はK
Dを失くするための指標として用い得る。From the above viewpoint, Hp / ApA1 value is K
It can be used as an index for losing D.
【図1】 KD患者のハプトグロビンの表現型を示す図
である。FIG. 1 shows the phenotype of haptoglobin in KD patients.
【図2】 (a)は患者の発熱日数およびHp表現型を示
す図であり、(b)は異なる表現型の患者のHpレベルを
示す図である。FIG. 2 (a) is a diagram showing fever days and Hp phenotype of patients, and (b) is a diagram showing Hp levels of patients with different phenotypes.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 陳 惠卿 台湾高雄市三民區寶中里十四鄰建興路二 四三號 (72)発明者 金 悦祖 台湾高雄市三民區臥龍路六十巷一弄三號 六樓 (72)発明者 邱 世欽 台湾台北縣三芝郷後▲くお▼村九鄰蘭陽 街二十一號 (72)発明者 揚 瑞成 台湾高雄市左營區博愛二路一九八號十樓 之一 (56)参考文献 上野康尚,川崎病ならびに急性小児発 熱性疾患における血清インターロイキン 6(IL6)活性の動態と意義,金沢大 学十全医学会雑誌,日本,1989年,第98 巻第1号,74−87 (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) G01N 33/68 G01N 33/53 G01N 33/92 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (72) Inventor, Chen Hui, Taiwan, Sanmin District, Kaohsiung City, Taiwan 14th Zhongli Zhongxing Road, No. 24, No. 43 (72) Inventor Kim Yuzhu, Sanmin District, Kaohsiung City, Taiwan Sanroku Rokurō (72) Inventor, Taegu Sekin Taiwan Taipei 3 Sanshiba Township ▲ Kuo ▼ Village Kulu Lanyang Street 21st Inventor (72) Inventor Yang Rui Cheng Taiwan Zhongqi Aibo Aiji Road 1 No. 98, No. 9 (56) References Yasuhisa Ueno, Kinetics and significance of serum interleukin 6 (IL6) activity in Kawasaki disease and acute childhood febrile illness, Kanazawa Univ. Journal, Japan, 1989 Year, Vol. 98, No. 1, 74-87 (58) Fields investigated (Int.Cl. 7 , DB name) G01N 33/68 G01N 33/53 G01N 33/92
Claims (14)
者のKD診断方法であって、当該患者におけるアポリポ
蛋白質Al(ApoAl)レベル(重量/容量w/vに
よる)に対するハプトグロビン(Hp)レベル(重量/
容量w/vによる)の比率をインデックスとして使用す
る方法。1. A method for diagnosing KD in a patient suspected of having Kawasaki disease (KD), wherein haptoglobin (Hp) level relative to apolipoprotein Al (ApoAl) level (by weight / volume w / v) in the patient. (weight/
Using the ratio of (by volume w / v) as an index.
者のKD診断法であって、(a)当該患者の血中ハプト
グロビン(Hp)レベル(w/v)を測定してA値を得
ること、(b)当該患者の血中アポリポ蛋白質Al(A
poAl)レベル(w/v)を測定してB値を得るこ
と、(c)A/Bの比率をインデックスとして算出する
こと、(d)段階(c)で得られたインデックスA/B
を限界値と比較すること、但し、この限界値に基づき、
陽性テスト(PPV)の予測値が70%より高いもので
ある、そして、(e)もし、このインデックスが限界値
より高い場合、当該患者がKDに罹患していると診断す
ること、を含む方法。2. A method for diagnosing KD in a patient suspected of having Kawasaki disease (KD), which comprises (a) measuring the blood haptoglobin (Hp) level (w / v) of the patient and measuring the A value. Obtaining (b) apolipoprotein Al (A
poA1) level (w / v) is measured to obtain B value, (c) A / B ratio is calculated as an index, (d) Index A / B obtained in step (c)
To a limit value, but based on this limit value,
A positive test (PPV) predictive value is higher than 70%, and (e) if this index is higher than a threshold value, diagnosing the patient as having KD. .
求項2に記載の方法。3. The method according to claim 2, wherein the limit value is higher than 2.0.
求項2に記載の方法。4. The method according to claim 2, wherein the limit value is higher than 3.0.
求項2に記載の方法。5. The method according to claim 2, wherein the limit value is higher than 3.5.
断され得る、請求項1または2に記載の方法。6. The method of claim 1 or 2, wherein KD can be diagnosed within 3-10 days after fever in a patient.
され得る、請求項6に記載の方法。7. The method of claim 6, wherein KD can be diagnosed within 5-7 days after fever in a patient.
ハプトグロビン(Hp)のフェノタイプを使用すること
によって、KDであることが疑われる患者について診断
し、早期にKDの処置戦術を決定する方法。8. Metamorphic or typical Kawasaki disease (KD),
A method of diagnosing a patient suspected of having KD by using a phenotype of haptoglobin (Hp) and determining a treatment tactic for KD at an early stage.
変態性川崎病(AKD)を診断し、早期にKDの処置戦
術を決定する方法であって、当該患者中のハプトグロビ
ンのフェノタイプを同定し、もしHpのフェノタイプが
Hp2−1またはHp1−1であれば、CAAの生成を
予防するために、当該患者のKDの処置が発症初日から
7日内に決定されること、を含む方法。9. A method of diagnosing metamorphic Kawasaki disease (AKD) in a patient suspected of having KD and determining a treatment tactic for KD at an early stage by identifying a phenotype of haptoglobin in the patient. , If the phenotype of Hp is Hp2-1 or Hp1-1, then treatment of KD in the patient is determined within 7 days from the first day of onset in order to prevent the production of CAA.
て、当該患者におけるアポリポ蛋白質(Al)の血中レ
ベル(重量/容量による)に対するハプトグロビン(H
p)の血中レベル(重量/容量による)の比率をインデ
ックスとして使用する、川崎病(KD)の診断システ
ム。10. In a patient suspected of having KD, haptoglobin (H) against blood level (by weight / volume) of apolipoprotein (Al) in the patient.
A diagnostic system for Kawasaki disease (KD) using the ratio of blood level (by weight / volume) of p) as an index.
患者のKD診断システムであって、(a)当該患者の血
中ハプトグロビン(Hp)レベル(w/v)を測定して
A値を得る手段、(b)当該患者の血中アポリポ蛋白質
Al(ApoAl)レベル(w/v)を測定してB値を
得る手段、(c)A/Bの比率をインデックスとして算
出し、次いで、このインデックスA/Bを与えられた限
界値と比較する、但し、この限界値に基づき、陽性テス
ト(PPV)の予測値が70%より高いものである、そ
して、もし、このインデックスA/Bが限界値より高い
場合、当該患者がKDに罹患していると診断する手段、
を含むシステム。11. A KD diagnostic system for a patient suspected of having Kawasaki disease (KD), comprising: (a) measuring the blood haptoglobin (Hp) level (w / v) of the patient to determine the A value. Means for obtaining, (b) means for measuring the blood apolipoprotein Al (ApoAl) level (w / v) of the patient to obtain a B value, (c) calculating the ratio of A / B as an index, and then Compare the index A / B with the given limit value, on the basis of which the predictive value of the positive test (PPV) is higher than 70%, and if this index A / B is the limit value If higher than the value, means for diagnosing the patient as suffering from KD,
System including.
p)レベル(w/v)が、Hpに特異的なリガンドを用
いる免疫分析によって測定される、請求項11に記載の
システム。12. The blood haptoglobin (H) of the patient.
The system according to claim 11, wherein p) level (w / v) is measured by immunoassay using a ligand specific for Hp.
p)レベル(w/v)が、Hpに特異的なレジェンドを
用いる免疫分析によって測定される、請求項11に記載
のシステム。13. The blood haptoglobin (H) of the patient.
12. The system of claim 11, wherein p) level (w / v) is measured by immunoassay using a legend specific for Hp.
またはKIDの診断システムであって、当該患者中のH
pのフェノタイプを同定する手段、但し、もし患者のH
pのフェノタイプがHp2−1またはHp1−1であれ
ば、CAAの生成を予防するために、当該患者のKDの
処置が発症初日から7日内に決定されることを含む、早
期にKDの処置戦術を決定するシステム。14. AD of a patient suspected of having KD
Or a KID diagnostic system, in which H in the patient
means for identifying p phenotypes, provided that H
If the phenotype of p is Hp2-1 or Hp1-1, early treatment of KD including treatment of KD of the patient is determined within 7 days from the first day of onset in order to prevent production of CAA. A system that determines tactics.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TW88113771 | 1999-08-10 | ||
TW088113771A TWI237116B (en) | 1999-08-10 | 1999-08-10 | Methods and systems for diagnosing kawasaki disease |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2001050966A JP2001050966A (en) | 2001-02-23 |
JP3534306B2 true JP3534306B2 (en) | 2004-06-07 |
Family
ID=21641882
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2000065601A Expired - Fee Related JP3534306B2 (en) | 1999-08-10 | 2000-03-09 | Methods and systems for diagnosis of Kawasaki disease |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP3534306B2 (en) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP7450179B2 (en) * | 2019-09-06 | 2024-03-15 | 地方独立行政法人福岡市立病院機構 | Kawasaki disease prevalence determination kit and Kawasaki disease prevalence determination method |
-
2000
- 2000-03-09 JP JP2000065601A patent/JP3534306B2/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
上野康尚,川崎病ならびに急性小児発熱性疾患における血清インターロイキン6(IL6)活性の動態と意義,金沢大学十全医学会雑誌,日本,1989年,第98巻第1号,74−87 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2001050966A (en) | 2001-02-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US8021836B2 (en) | Method of diagnosing infectious disease by measuring the level of soluble TREM-1 in a sample | |
JP4931962B2 (en) | Anti-HCV core protein monoclonal antibody | |
JP5166522B2 (en) | Diagnosis method | |
CN104160039B (en) | Biomarkers for kawasaki disease | |
JP4290424B2 (en) | Kit for detecting protein ESM-1 and detection method using said kit | |
US8263356B2 (en) | Antibodies and methods for predicting dental caries | |
JP2021511389A (en) | How to treat spinal muscular atrophy | |
Zito et al. | Helicobacter pylori infection and the risk of myocardial infarction: role of fibrinogen and its genetic control | |
US20030175713A1 (en) | Method for diagnosis of inflammatory diseases using CALGRANULIN C | |
JP2004500568A (en) | Inter-alpha-trypsin as a sepsis marker | |
CN107255711A (en) | Osteopontin is used for the purposes for preparing or screening acute-on-chronic liver failure diagnostic reagent | |
JP3534306B2 (en) | Methods and systems for diagnosis of Kawasaki disease | |
JP4346798B2 (en) | HCV core antigen detection or quantification method and detection or quantification reagent used therefor. | |
CN115480058A (en) | Helicobacter pylori cytotoxin associated protein antibody detection kit | |
Cho et al. | Overlapping presence of macroamylasemia and hyperamylasemia in acute pancreatitis | |
US6451542B1 (en) | Methods and systems for diagnosing Kawasaki disease | |
KR102494928B1 (en) | Method of determining immediate hypersensitivity patients using MRGPRX2 | |
JP2001050964A (en) | Assay of arthritic melanotransferrin and reagent therefor | |
JPH0688824A (en) | Examining method for infection with yellow staphylococus | |
KR102487100B1 (en) | Composition for monitoring the condition of asthma control using EDN | |
KR20230166380A (en) | Method for Providing Information for Diagnosis of Kawasaki Disease and Differential Diagnosis of Refractory Kawasaki Disease | |
JPH01296163A (en) | Igg rheumatoid factor test | |
WO2003034066A1 (en) | Method of diagnosing cerebral infarction | |
JPH09504866A (en) | Mental disorder diagnosis | |
JPS6281568A (en) | Method for measuring human plasmin-alpha2-plasmin inhibitor composite |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20040203 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20040304 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090319 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100319 Year of fee payment: 6 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |