KR102494928B1 - Method of determining immediate hypersensitivity patients using MRGPRX2 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 MRGPRX2를 이용한 아나필락시스 환자를 판별하는 방법 등에 관한 것으로, 본 발명자들은 MRGPRX2가 약물 과민 반응 환자에서 정상군 대비 유의적으로 증가된 수준을 보일 뿐만 아니라, 즉시형 과민 반응 환자에서 그 수준이 유의하게 증가함을 확인하였다. 또한, MRGPRX2 수준이 12주까지 지속적으로 높은 수치를 나타내므로 기존의 약물 과민 반응 및 아나필락시스 마커를 대체할 수 있을 것으로 기대된다.The present invention relates to a method for discriminating anaphylaxis patients using MRGPRX2, and the present inventors found that not only did MRGPRX2 show a significantly increased level compared to the normal group in patients with drug hypersensitivity reactions, but also the level was significantly increased in patients with immediate-type hypersensitivity reactions. confirmed to increase. In addition, since the level of MRGPRX2 is consistently high up to 12 weeks, it is expected to be able to replace existing drug hypersensitivity and anaphylaxis markers.

Description

MRGPRX2를 이용한 즉시형 과민 반응 환자를 판별하는 방법{Method of determining immediate hypersensitivity patients using MRGPRX2}Method of determining immediate hypersensitivity patients using MRGPRX2 {Method of determining immediate hypersensitivity patients using MRGPRX2}

본 발명은 MRGPRX2를 이용한 즉시형 과민 반응 환자를 판별하는 방법 등에 관한 것이다.The present invention relates to a method for discriminating an immediate-type hypersensitivity reaction patient using MRGPRX2, and the like.

약물유해반응(adverse drug reaction, ADR)은 약물을 예방, 진단, 치료 용량으로 사용하였을 때 나타나는 유해하고 의도되지 않은 반응으로 정의한다. 약물유해반응은 예상할 수 있는 반응인 A형(type A) 반응과 예상할 수 없는 B형(type B) 반응으로 나눈다. 이 중 B형 반응은 약물과민 반응(drug hypersensitivity reaction)이라고도 하는데 용량 의존적이지 않고 고유의 약리작용과는 무관하게 일부에게 나타나는 반응으로 이에 해당되는 반응에는 불내성(intolerance), 약물 특이체질반응(drug idiosyncrasy), 약물알레르기(drug allergy), 알레르기 유사반응(pseudoallergy)이 있다.An adverse drug reaction (ADR) is defined as an adverse and unintended reaction that occurs when a drug is used in prophylactic, diagnostic, or therapeutic doses. Adverse drug reactions are divided into predictable reactions (type A) and unexpected reactions (type B). Among them, type B reactions, also called drug hypersensitivity reactions, are not dose-dependent and appear in some people regardless of their inherent pharmacological effects. These reactions include intolerance and drug idiosyncrasy. ), drug allergy, and pseudoallergy.

아나필락시스는 급작스럽게 발생하는 심한 전신 알레르기 과민 반응으로 드물게는 사망에 이를 수 있는 심각한 알레르기 질환이다. 아나필락시스의 발생률은 정확하게 보고된 것이 거의 없다. 미국의 한 조사결과는 응급실 내원 환자 1,500명당 1명 정도에서 저혈압과 의식소실을 동반한 아나필락시스 발생을 보고하고 있으나, 경증의 환자까지 포함한다면 그 발생률은 더 높을 것이다. 우리나라에서는 시행한 빈도조사에서는 약 0.014% 정도로 보고하였고, 2001년부터 2007년까지 건강보험공단에 의뢰하여 관련 질병코드를 이용해서 빈도를 산출하였는데, 18세 이하에서 100,000명당 0.7-1.0건의 아나필락시스가 발생하여 유럽이나 북미의 8-30건보다 적었다. 또한 2008년 6월에서 2009년 3월까지 전국 소재 9개 종합병원 응급실을 방문한 18세 이하 소아청소년의 방문 10,000건당 7.23건에서 아나필락시스가 발생하였다.Anaphylaxis is a severe allergic disease that can lead to death in rare cases due to a severe systemic allergic hypersensitivity reaction that occurs suddenly. The incidence of anaphylaxis has rarely been accurately reported. A survey in the United States reports the occurrence of anaphylaxis accompanied by hypotension and loss of consciousness in about 1 out of 1,500 emergency room patients, but the incidence will be higher if mild patients are included. In a frequency survey conducted in Korea, it was reported at about 0.014%, and from 2001 to 2007, the Health Insurance Corporation was requested to calculate the frequency using related disease codes. Therefore, it was less than 8-30 cases in Europe or North America. Also, from June 2008 to March 2009, anaphylaxis occurred in 7.23 cases per 10,000 visits among children and adolescents under the age of 18 who visited the emergency rooms of 9 general hospitals nationwide.

아나필락시스는 여러 원인에 의해 다양한 기전으로 발생한다. 면역글로불린 E (immunoglobulin E, IgE)가 관여하는 면역학적 기전에 의해서 발생하는 경우로, 음식물(땅콩 등 견과류; 새우, 게 등 갑각류; 생선, 우유, 계란, 복숭아, 번데기, 메밀 등), 곤충독(벌독, 개미독 등), 약물(진통소염제, beta-lactam 항생제, 생물학 제제 등), 라텍스, 직업성 알레르겐, 방사성 조영제 등이 있다. IgE 비의존성으로는 조영제, 진통소염제, 덱스트란(dextran), 단클론항체 등이 원인이 될 수 있다. 비면역학적 기전으로는 비반세포를 직접 활성화시켜 증상이 나타나는 경우에 해당하며, 물리적 요인(운동, 추위, 열, 일광 등), 알코올, 약물(마약성 진통제) 등이 있으나 특별한 원인이 없이 특발성으로 발생하는 경우도 있다.Anaphylaxis occurs with various mechanisms by various causes. It is caused by an immunological mechanism involving immunoglobulin E (IgE), food (nuts such as peanuts; shellfish such as shrimp and crab; fish, milk, eggs, peaches, pupae, buckwheat, etc.), insect poison (bee venom, ant venom, etc.), drugs (pain relievers, beta-lactam antibiotics, biological agents, etc.), latex, occupational allergens, and radioactive contrast agents. Contrast agents, analgesics, anti-inflammatory drugs, dextran, monoclonal antibodies, etc. may be the cause of IgE-independence. Non-immunological mechanism corresponds to the case where symptoms appear by directly activating mast cells, and there are physical factors (exercise, cold, heat, sunlight, etc.), alcohol, drugs (narcotic analgesics), etc., but it occurs idiopathically without a specific cause Sometimes it does.

아나필락시스의 진단은 병력과 증상에 의해 대부분 이뤄진다. 가장 중요한 임상양상은 원인물질 또는 특정 자극에 노출된 후, 즉시 또는 수시간 내에 피부, 호흡기, 위장관 및 심장혈관 계통 등의 다양하고 심각한 증상들이 나타나는 것이다. 초기평가 시에 아나필락시스를 시사하는 과거 병력을 포함한 현 병력과 이학적 소견을 확인해야 한다. 증상이 나타나기 전 수시간 이내에 노출된 모든 물질과, 운동, 복용한 약물, 술, 발열 등과 같은 급성감염 소견, 스트레스, 여행력, 생리 등을 포함한 자세한 병력을 청취하여야 한다.Diagnosis of anaphylaxis is mostly based on history and symptoms. The most important clinical picture is the appearance of various and severe symptoms such as skin, respiratory, gastrointestinal and cardiovascular systems immediately or within a few hours after exposure to a causative agent or a specific stimulus. Current medical history and physical findings, including past medical history suggestive of anaphylaxis, should be established during the initial evaluation. A detailed medical history, including all substances exposed within a few hours before the onset of symptoms, findings of acute infections such as exercise, medications taken, alcohol, fever, stress, travel history, menstruation, etc., should be taken.

아나필락시스와 관련된 임상검사로 혈중 총 트립타제(tryptase) 농도를 특정할 수 있으며 이상적인 채혈시간은 증상 발생 후 15분-3시간 사이로, 매우 짧다. 또한, 혈중 히스타민 농도는 증상 발생 후 15-60분 사이에 측정하여야 하며 검체 취급에도 주의가 필요한 실정이다. 이러한 검사들은 특수검사로 일반적인 응급상황에서는 보편적으로 실시하기 어려운 여건이며, 특히, 혈중 트립타제는 아나필락시스 진단에 도움이 되나, 혈압이 정상이거나 특히, 발생 후 수 시간이 경과한 경우에는 이미 혈청 수치가 정상화되므로 그 이용이 제한적이다. 그러므로, 트립타제나 히스타민 농도가 정상 범위 내라고 하더라도 완전히 아나필락시스를 배제할 수 없다. As a clinical test related to anaphylaxis, the total tryptase concentration in the blood can be specified, and the ideal blood collection time is between 15 minutes and 3 hours after the onset of symptoms, which is very short. In addition, the concentration of histamine in the blood should be measured between 15 and 60 minutes after the onset of symptoms, and care must be taken in handling the specimen. These tests are special tests that are difficult to perform universally in general emergency situations. In particular, tryptase in the blood is helpful in diagnosing anaphylaxis, but blood pressure is normal or, especially if several hours have passed since the onset, the serum level is already high. normalization, so its use is limited. Therefore, even if the concentration of tryptase or histamine is within the normal range, anaphylaxis cannot be completely ruled out.

J Korean Med Assoc. 2014 Nov;57(11):934-940. Korean.J Korean Med Assoc. 2014 Nov;57(11):934-940. Korean.

본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 MRGPRX2를 이용해 아나필락시스 환자를 판별하는 방법을 제공하는 것으로서, 본 발명자들은 약물로 인한 아나필락시스 증상이 있었던 환자의 MRGPRX2의 농도를 측정한 결과, 12주까지 지속적으로 높은 수준을 나타냄을 확인하였다.The technical problem to be achieved by the present invention is to provide a method for discriminating anaphylaxis patients using MRGPRX2. As a result of measuring the concentration of MRGPRX2 in patients with drug-induced anaphylaxis symptoms, the present inventors found that the level was consistently high for up to 12 weeks. It was confirmed that

이에, 본 발명의 목적은 MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) 단백질 또는 이의 mRNA 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 약물 과민 반응 진단용 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, an object of the present invention is to provide a composition for diagnosing a drug hypersensitivity reaction comprising, as an active ingredient, an agent for measuring the expression level of Mas-related G-protein coupled receptor member X2 (MRGPRX2) protein or its mRNA.

본 발명의 다른 목적은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는, 약물 과민 반응 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for providing information necessary for diagnosing a drug hypersensitivity reaction, comprising measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA in a sample of a subject.

본 발명의 또 다른 목적은 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 약물 과민 반응 진단용 키트를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a kit for diagnosing a drug hypersensitivity reaction comprising, as an active ingredient, an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA.

본 발명의 또 다른 목적은 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 즉시형 과민 반응 진단용 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a composition for diagnosing an immediate-type hypersensitivity reaction comprising an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA as an active ingredient.

본 발명의 또 다른 목적은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는, 즉시형 과민 반응 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for providing information necessary for diagnosing an immediate-type hypersensitivity reaction, comprising measuring the expression level of MRGPRX2 protein or mRNA thereof in a sample of a subject.

본 발명의 또 다른 목적은 MRGPRX2의 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 즉시형 과민 반응 진단용 키트를 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a kit for diagnosing an immediate-type hypersensitivity reaction comprising, as an active ingredient, an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA.

그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당해 기술분야의 통상의 기술자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.However, the technical problem to be achieved by the present invention is not limited to the above-mentioned problems, and other problems not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the description below.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) 단백질 또는 이의 mRNA 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 약물 과민 반응 진단용 조성물을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides a composition for diagnosing a drug hypersensitivity reaction comprising, as an active ingredient, an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) protein or its mRNA.

본 발명의 일 실시예에서, 상기 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제는 MRGPRX2의 mRNA에 특이적으로 결합하는 프로브 또는 프라이머일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In one embodiment of the present invention, the agent for measuring the expression level of the mRNA may be a probe or primer that specifically binds to the mRNA of MRGPRX2, but is not limited thereto.

본 발명의 다른 실시예에서, 상기 단백질의 발현 수준을 측정하는 제제는 MRGPRX2의 단백질에 특이적인 항체일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the agent for measuring the expression level of the protein may be an antibody specific to the MRGPRX2 protein, but is not limited thereto.

본 발명의 또 다른 실시예에서, 상기 MRGPRX2 단백질은 서열번호 1로 이루어지는 아미노산 서열을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the MRGPRX2 protein may include the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, but is not limited thereto.

본 발명의 또 다른 실시예에서, 상기 MRGPRX2 mRNA는 서열번호 2로 이루어지는 염기 서열을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the MRGPRX2 mRNA may include the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 2, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는, 약물 과민 반응 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for providing information necessary for diagnosing a drug hypersensitivity reaction, comprising measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA in a sample of a subject.

본 발명의 일 실시예에서, 상기 시료는 혈액, 혈장 또는 혈청일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In one embodiment of the present invention, the sample may be blood, plasma or serum, but is not limited thereto.

본 발명의 다른 실시예에서, 상기 시료는 트립타제 수치가 정상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the sample may have a normal tryptase level, but is not limited thereto.

본 발명의 또 다른 실시예에서, 상기 피검체는 아나필락시스 증상이 나타나지 않는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the subject may not show symptoms of anaphylaxis, but is not limited thereto.

본 발명의 또 다른 실시예에서, 상기 방법은 대조군과 비교하여 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준이 증가된 경우 약물 과민 반응으로 진단할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the method can be diagnosed as a drug hypersensitivity reaction when the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA is increased compared to the control group, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 약물 과민 반응 진단용 키트를 제공한다.In addition, the present invention provides a kit for diagnosing drug hypersensitivity reaction comprising, as an active ingredient, an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA.

또한, 본 발명은 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 즉시형 과민 반응 진단용 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a composition for diagnosing an immediate-type hypersensitivity reaction comprising an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA as an active ingredient.

또한, 본 발명은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는, 즉시형 과민 반응 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for providing information necessary for diagnosing an immediate-type hypersensitivity reaction, comprising measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA in a sample of a subject.

본 발명의 일 실시예에서, 상기 즉시형 과민 반응은 아나필락시스를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In one embodiment of the present invention, the immediate hypersensitivity reaction may include anaphylaxis, but is not limited thereto.

본 발명의 다른 실시예에서, 상기 피검체는 약물 과민 반응 환자일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the subject may be a drug hypersensitivity reaction patient, but is not limited thereto.

본 발명의 또 다른 실시예에서, 상기 시료는 트립타제 수치가 정상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the sample may have a normal tryptase level, but is not limited thereto.

본 발명의 또 다른 실시예에서, 상기 피검체는 아나필락시스 증상이 나타나지 않는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In another embodiment of the present invention, the subject may not show symptoms of anaphylaxis, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 MRGPRX2의 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 즉시형 과민 반응 진단용 키트를 제공한다.In addition, the present invention provides a kit for diagnosing an immediate-type hypersensitivity reaction comprising, as an active ingredient, an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA.

또한, 본 발명은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는, 약물 과민 반응 또는 즉시형 과민 반응을 예측하기 위한 정보 제공 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides an information providing method for predicting a drug hypersensitivity reaction or an immediate-type hypersensitivity reaction, comprising measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA in a sample of a subject.

또한, 본 발명은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는, 약물 과민 반응 또는 즉시형 과민 반응의 진단 방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for diagnosing a drug hypersensitivity reaction or an immediate-type hypersensitivity reaction, comprising measuring the expression level of MRGPRX2 protein or mRNA thereof in a sample of a subject.

또한, 본 발명은 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 조성물의 약물 과민 반응 또는 즉시형 과민 반응 진단 용도를 제공한다.In addition, the present invention provides a diagnostic use of a drug hypersensitivity reaction or an immediate-type hypersensitivity reaction of a composition comprising an agent for measuring the MRGPRX2 protein or its mRNA expression level as an active ingredient.

본 발명자들은 MRGPRX2가 약물 과민 반응 환자에서 정상군 대비 유의적으로 증가된 수준을 보일 뿐만 아니라, 즉시형 과민 반응 환자에서 그 수준이 유의하게 증가함을 확인하였다. 또한, 즉시형 과민 반응 환자에서 MRGPRX2 수준이 12주까지 지속적으로 높은 수치를 나타내므로 기존의 약물 과민 반응 및 아나필락시스 마커를 대체할 수 있을 것으로 기대된다.The present inventors confirmed that the level of MRGPRX2 was significantly increased in patients with drug hypersensitivity reaction compared to the normal group, and the level was significantly increased in patients with immediate type hypersensitivity reaction. In addition, since MRGPRX2 levels are consistently high up to 12 weeks in patients with immediate-type hypersensitivity reactions, it is expected to be able to replace conventional markers of drug hypersensitivity reactions and anaphylaxis.

본 발명은 MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) 단백질 또는 이의 mRNA 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 약물 과민 반응 진단용 조성물 및 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 즉시형 과민 반응 진단용 조성물에 관한 것이다.The present invention provides a composition for diagnosing a drug hypersensitivity reaction containing, as an active ingredient, an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) protein or its mRNA, and an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA. It relates to a composition for diagnosing an immediate-type hypersensitivity reaction comprising as an active ingredient.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 명세서에서, 용어 “즉시형 과민 반응”은 제1형 과민 반응이라고도 하며, 주로 IgE 항체 매개형 면역반응 또는 약제가 직접적으로 비만세포를 자극하여 발생하며, 두드러기, 혈관부종, 비염, 기도수축, 가려움증, 구토, 설사, 및 아나필락시스로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 반응이 나타날 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present specification, the term “immediate hypersensitivity reaction” is also referred to as type 1 hypersensitivity reaction, and is mainly caused by an IgE antibody-mediated immune response or a drug directly stimulating mast cells, and is characterized by urticaria, angioedema, rhinitis, airway constriction, One or more reactions selected from the group consisting of pruritus, vomiting, diarrhea, and anaphylaxis may occur, but are not limited thereto.

본 명세서에서, 용어 “아나필락시스”는 알레르기 쇼크라고도 하며, 원인 노출 후 급격히 진행하는 전신 중증 알레르기 반응을 의미한다.In the present specification, the term “anaphylaxis”, also referred to as allergic shock, means a systemic severe allergic reaction that rapidly progresses after exposure to a cause.

본 명세서에서, 용어 “단백질”은 '폴리펩타이드(polypeptide)' 또는 '펩타이드(peptide)'와 호환성 있게 사용되며, 예컨대, 자연 상태의 단백질에서 일반적으로 발견되는 바와 같이 아미노산 잔기의 중합체를 말한다.As used herein, the term "protein" is used interchangeably with 'polypeptide' or 'peptide' and refers to a polymer of amino acid residues, eg as commonly found in proteins in nature.

본 명세서에서, “폴리뉴클레오티드(polynucleotide)” 또는 “핵산”은 단일 또는 이중 가닥의 형태로 된 데옥시리보핵산(deoxyribonucleic acid, DNA) 또는 리보핵산(ribonucleic acid, RNA)를 말한다. 다른 제한이 없는한, 자연적으로 생성되는 뉴클레오티드와 비슷한 방법으로 핵산에 혼성화되는 자연적 뉴클레오티드의 공지된 아날로그도 포함된다. 일반적으로 DNA는 아데닌(adenine, A), 구아닌(guanine, G), 시토신(cytosine, C), 티민(thymine, T) 등 네 가지 염기로 구성되어 있으며, RNA는 티민 대신 우라실(Uracil, U)을 가지고 있다. 핵산 이중 가닥에서 A는 T 또는 U, C는 G 염기와 수소결합을 이루는데, 이러한 염기의 관계를 ‘상보적(complementary)'이라고 한다.As used herein, “polynucleotide” or “nucleic acid” refers to deoxyribonucleic acid (DNA) or ribonucleic acid (RNA) in single or double-stranded form. Unless otherwise limited, known analogs of natural nucleotides that hybridize to nucleic acids in a manner similar to naturally occurring nucleotides are also included. In general, DNA is composed of four bases: adenine (A), guanine (G), cytosine (C), and thymine (T), and RNA uses uracil (U) instead of thymine. has In the nucleic acid double strand, A forms a hydrogen bond with T or U, and C with G base, and the relationship between these bases is called 'complementary'.

한편, 'mRNA(messenger RNA 또는 전령 RNA)'는 단백질 합성 과정에서 특정 유전자의 염기서열의 유전 정보를 리보솜(ribosome)으로 전달하여 폴리펩티드 합성(단백질 번역, translation)의 청사진 역할을 하는 RNA이다. 유전자를 주형(template)으로 하여 단일 가닥의 mRNA가 전사(transcription) 과정을 통하여 합성된다.On the other hand, 'mRNA (messenger RNA or messenger RNA)' is RNA that serves as a blueprint for polypeptide synthesis (protein translation) by transferring the genetic information of the nucleotide sequence of a specific gene to ribosome during protein synthesis. Using a gene as a template, single-stranded mRNA is synthesized through a transcription process.

본 명세서에서, “MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2)”는 비만 세포 수용체 단백질로, 유사 알레르기성 약물 반응의 원인으로 알려져 있다.In the present specification, “MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2)” is a mast cell receptor protein, which is known to cause similar allergic drug reactions.

본 명세서에서, MRGPRX2 단백질은 포유류에서 유래한 것일 수 있으며, 바람직하게는 인간에서 유래한 것이다. 가장 바람직하게, 본 발명에서의 MRGPRX2 단백질은 서열번호 1로 표시되는 인간의 MRGPRX2 (NP_473371.1) 아미노산 서열을 포함하는 것을 특징으로 한다(괄호 안은 NCBI Genebank accession number).In the present specification, the MRGPRX2 protein may be of mammalian origin, preferably of human origin. Most preferably, the MRGPRX2 protein in the present invention is characterized by comprising the amino acid sequence of human MRGPRX2 (NP_473371.1) represented by SEQ ID NO: 1 (NCBI Genebank accession number in parentheses).

상기 MRGPRX2 mRNA는 바람직하게는 서열번호 2로 표시되는 인간 MRGPRX2 mRNA (NM_054030.4) 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 한다(괄호 안은 NCBI Genebankaccession number). 상기한 인간의 MRGPRX2 mRNA transcript variant들의 coding region(exon) 등의 특징 사항은 괄호 안에 기재된 Genebank accession number로 NCBI 데이터베이스를 검색하여 나오는 서열정보에서 확인된다.The MRGPRX2 mRNA is preferably characterized in that it comprises the nucleotide sequence of human MRGPRX2 mRNA (NM_054030.4) represented by SEQ ID NO: 2 (NCBI Genebank accession number in parentheses). Characteristics such as the coding region (exon) of the above-mentioned human MRGPRX2 mRNA transcript variants are identified in the sequence information obtained by searching the NCBI database with the Genebank accession number indicated in parentheses.

본 명세서에서 사용되는 용어 "상보적(complementary)"은 소정의 혼성화 또는 어닐링 조건, 구체적으로는 생리학적 조건 하(세포 내)에서 핵산 분자 내 타겟팅 모이어티가 타겟(예컨대, MRGPRX2 유전자)에 선택적으로 혼성화할 정도로 충분히 상보적인 것을 의미하는 것으로 하나 또는 그 이상의 미스매치(mismatch) 염기서열을 가질 수 있으며, 실질적으로 상보적(substantially complementary) 및 완전히 상보적(perfectly complementary)인 것을 모두 포괄하는 의미를 가지며, 보다 구체적으로는 완전히 상보적인 것을 의미한다.As used herein, the term "complementary" means that a targeting moiety in a nucleic acid molecule selectively targets a target (e.g., the MRGPRX2 gene) under predetermined hybridization or annealing conditions, specifically physiological conditions (intracellular). It means something complementary enough to hybridize, which can have one or more mismatch base sequences, and has a meaning encompassing both substantially complementary and perfectly complementary things. , more specifically means fully complementary.

본 명세서에서, 용어 '검출'은 목적하는 물질(본 발명에서의 마커 단백질, MRGPRX2)의 존재(발현) 여부를 측정 및 확인하는 것, 또는 목적하는 물질의 존재 수준(발현 수준)의 변화를 측정 및 확인하는 것을 모두 포함하는 의미이다. 같은 맥락에서, 본 발명에서 상기 단백질의 발현수준을 측정하는 것은 발현 여부를 측정하는 것(즉, 발현 유무를 측정하는 것), 또는 상기 단백질의 질적, 양적 변화 수준을 측정하는 것을 의미한다. 상기 측정은 정성적인 방법(분석)과 정량적인 방법을 모두 포함하여 제한 없이 수행될 수 있다. 단백질 수준의 측정에 있어서 정성적 방법과 정량적 방법의 종류는 당업계에 잘 알려져 있으며, 본 명세서에서 기술한 실험법들이 이에 포함된다. 각 방법 별로 구체적 단백질 수준 비교 방식은 당업계에 잘 알려져 있다. 따라서 상기 MRGPRX2 단백질 검출은 MRGPRX2 단백질의 존재 여부 검출, 또는 상기 단백질 발현량의 증가(상향 조절) 또는 감소(하향 조절)를 확인하는 것을 포함하는 의미이다.As used herein, the term 'detection' refers to measuring and confirming the presence (expression) of a substance of interest (marker protein, MRGPRX2 in the present invention) or measuring a change in the level of existence (expression level) of the substance of interest. And it is meant to include both confirming. In the same context, measuring the expression level of the protein in the present invention means measuring the expression (ie, measuring the presence or absence of expression) or measuring the level of qualitative or quantitative change of the protein. The measurement can be performed without limitation including both qualitative methods (analysis) and quantitative methods. Types of qualitative and quantitative methods for measuring protein levels are well known in the art, and include the experimental methods described herein. Specific protein level comparison methods for each method are well known in the art. Therefore, detecting the MRGPRX2 protein means detecting the presence of the MRGPRX2 protein or confirming an increase (up-regulation) or decrease (down-regulation) of the protein expression level.

본 명세서에서 용어 “진단”은 특정 질병 또는 질환에 대한 한 객체의 감수성(susceptibility)을 판정하는 것, 한 객체가 특정 질병 또는 질환을 현재 가지고 있는지 여부를 판정하는 것, 특정 질병 또는 질환에 걸린 한 객체의 예후(prognosis)를 판정하는 것, 또는 테라메트릭스(therametrics)(예컨대, 치료 효능에 대한 정보를 제공하기 위하여 객체의 상태를 모니터링 하는 것)를 모두 포함하는 개념이다. 바람직하게 본 발명에서의 진단은 MRGPRX2의 발현 수준을 측정하여 약물 과민 반응 또는 아나필락시스의 존재 또는 발병 여부를 확인하는 것일 수 있다.As used herein, the term "diagnosis" refers to determining a subject's susceptibility to a specific disease or disorder, determining whether a subject currently has a specific disease or disorder, as long as he or she has a specific disease or disorder. It is a concept that includes both determining a subject's prognosis, or therametrics (eg, monitoring a subject's condition to provide information about treatment efficacy). Preferably, the diagnosis in the present invention may be to determine the presence or onset of drug hypersensitivity reaction or anaphylaxis by measuring the expression level of MRGPRX2.

본 명세서에서, 단백질의 '발현 증가(또는 고발현)'라는 의미는 발현되지 않던 것이 발현된 것(즉, 검출되지 않던 것이 검출된 것) 또는 정상적인 수준보다 상대적으로 과발현된 것(즉, 검출량이 많아지는 것)을 의미한다. 이의 반대적 용어의 의미는 당업자라면 상기 정의에 준하여, 반대의미를 가지는 것으로 이해 가능하다.In the present specification, the meaning of 'increased expression (or high expression)' of a protein means that a protein that was not expressed was expressed (ie, that which was not detected was detected) or that it was relatively overexpressed than a normal level (ie, the amount of detection means more). The meaning of the opposite term can be understood as having the opposite meaning according to the above definition to those skilled in the art.

본 명세서에서, 상기 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제는 MRGPRX2의 mRNA에 특이적으로 결합하는 프로브 또는 프라이머일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present specification, the agent for measuring the expression level of the mRNA may be a probe or primer that specifically binds to the mRNA of MRGPRX2, but is not limited thereto.

본 명세서에서, 상기 단백질의 발현 수준을 측정하는 제제는 MRGPRX2의 단백질에 특이적인 항체일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present specification, the agent for measuring the expression level of the protein may be an antibody specific to the protein of MRGPRX2, but is not limited thereto.

본 명세서에서, 상기 MRGPRX2의 단백질은 서열번호 1로 이루어지는 아미노산 서열을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present specification, the MRGPRX2 protein may include the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, but is not limited thereto.

본 명세서에서, 상기 MRGPRX2의 mRNA는 서열번호 2로 이루어지는 염기 서열을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present specification, the MRGPRX2 mRNA may include a nucleotide sequence consisting of SEQ ID NO: 2, but is not limited thereto.

상기 '프라이머(primer)'는 DNA 합성의 개시점(starting point)으로 작용하는 짧은 단일가닥 올리고뉴클레오티드(single strand oligonucleotide)이다. 프라이머는 적합한 완충액(buffer)와 온도 조건에서 주형(template)인 폴리뉴클레오티드에 특이적으로 결합하고, DNA 중합효소가 프라이머에 주형 DNA에 상보적인 염기를 갖는 뉴클레오사이드 트리포스페이트를 추가하여 연결함으로써 DNA가 합성된다. 프라이머는 일반적으로 15 내지 30개의 염기서열로 이루어져 있으며, 염기 구성과 길이에 따라 주형 가닥에 결합하는 온도(melting temperature, Tm)가 달라진다. 프라이머의 서열은 주형의 일부 염기 서열과 완전하게 상보적인 서열을 가질 필요는 없으며, 주형과 혼성화되어 프라이머 고유의 작용을 할 수 있는 범위 내에서의 충분한 상보성을 가지면 충분하다. 따라서 본 발명에서 상기 MRGPRX2 mRNA의 발현 수준을 측정하기 위한 프라이머는 각 유전자 서열에 완벽하게 상보적인 서열을 가질 필요는 없으며, DNA 합성을 통해 mRNA 또는 cDNA의 특정 구간을 증폭하여 mRNA의 양을 측정하려는 목적에 맞는 길이와 상보성을 갖는 것이면 충분하다. 상기 증폭 반응을 위한 프라이머는 증폭하고자 하는 mRNA의 특정 구간의 양쪽 끝부분의 주형(또는 센스, sense)과 반대편(안티센스, antisense)에 각각 상보적으로 결합하는 한 세트(쌍)으로 구성된다. 프라이머는 당업자라면 MRGPRX2의 mRNA 또는 cDNA 염기서열을 참조하여 용이하게 디자인할 수 있다. The 'primer' is a short single-stranded oligonucleotide that serves as a starting point for DNA synthesis. A primer specifically binds to a polynucleotide, which is a template, in an appropriate buffer and temperature conditions, and DNA polymerase adds a nucleoside triphosphate having a base complementary to the template DNA to the primer and connects the DNA. is synthesized Primers generally consist of 15 to 30 nucleotide sequences, and the melting temperature (Tm) of binding to the template strand varies depending on the nucleotide composition and length. The sequence of the primer does not have to have a sequence completely complementary to a part of the base sequence of the template, and it is sufficient to have sufficient complementarity within a range capable of hybridizing with the template and performing the specific function of the primer. Therefore, in the present invention, the primers for measuring the expression level of MRGPRX2 mRNA do not have to have a sequence that is perfectly complementary to each gene sequence, and it is necessary to amplify a specific section of mRNA or cDNA through DNA synthesis to measure the amount of mRNA. Anything with a length and complementarity suitable for the purpose is sufficient. The primers for the amplification reaction are composed of a set (pair) that complementarily binds to the template (or sense) and the opposite side (antisense) of both ends of a specific section of the mRNA to be amplified. Primers can be easily designed by those skilled in the art by referring to the mRNA or cDNA nucleotide sequence of MRGPRX2.

상기 '프로브(probe)'는 특정 유전자의 mRNA나 cDNA(complementary DNA)에 특이적으로 결합할 수 있는 짧게는 수개 내지 길게는 수백 개의 염기(base pair) 길이의 RNA 또는 DNA 등 폴리뉴클레오티드의 단편을 의미하며, 표지(labeling)되어 있어서 결합하는 대상 mRNA나 cDNA의 존재 유무, 발현양 등을 확인할 수 있다. 본 발명의 목적을 위해서는 MRGPRX2 mRNA에 상보적인 프로브를 피검체의 시료와 혼성화 반응(hybridization)을 수행하여 MRGPRX2 mRNA의 발현양을 측정함으로써 약물 과민 반응의 진단 또는 아나필락시스의 진단에 이용할 수 있다. 프로브의 선택 및 혼성화 조건은 당업계에 공지된 기술에 따라 적절하게 선택할 수 있다. 본 발명에서 상기 프라이머 또는 프로브는 포스포아미다이트(phosphoramidite) 고체지지체 합성법이나 기타 널리 공지된 방법을 이용하여 화학적으로 합성할 수 있다. 또한 프라이머 또는 프로브는 MRGPRX2 mRNA와의 혼성화를 방해하지 않는 범위에서 당해 기술분야에 공지된 방법에 따라 다양하게 변형시킬 수 있다. 이러한 변형의 예로는 메틸화, 캡화, 천연 뉴클레오티드 하나 이상의 동족체로의 치환 및 뉴클레오티드 간의 변형, 예를 들면 하전되지 않은 연결체(예: 메틸 포스포네이트, 포스포트리에스테르, 포스포로아미데이트, 카바메이트 등) 또는 하전된 연결체(예: 포스포로티오에이트, 포스포로디티오에이트 등), 그리고 형광 또는 효소를 이용한 표지 물질(labeling material)의 결합 등이 있다.The 'probe' is a polynucleotide fragment such as RNA or DNA with a length of several to several hundred base pairs that can specifically bind to mRNA or cDNA (complementary DNA) of a specific gene. In other words, since it is labeled, it is possible to check the presence or absence of the target mRNA or cDNA to be bound, and the expression level. For the purpose of the present invention, a probe complementary to MRGPRX2 mRNA can be used for diagnosis of drug hypersensitivity reaction or anaphylaxis by measuring the expression level of MRGPRX2 mRNA by performing a hybridization reaction with a sample of a subject. Probe selection and hybridization conditions can be appropriately selected according to techniques known in the art. In the present invention, the primer or probe may be chemically synthesized using a phosphoramidite solid support synthesis method or other well-known methods. In addition, primers or probes may be variously modified according to methods known in the art to the extent that hybridization with MRGPRX2 mRNA is not hindered. Examples of such modifications are methylation, capping, substitution of one or more natural nucleotides with homologs, and modifications between nucleotides, such as uncharged linkages such as methyl phosphonates, phosphotriesters, phosphoroamidates, carbamates, etc. ) or charged linkages (eg, phosphorothioate, phosphorodithioate, etc.), and binding of fluorescent or enzymatic labeling materials.

상기 항체란 항원성 부위에 대해서 지시되는 특이적인 단백질 분자를 의미한다. 본 발명에 사용되는 항체는 단클론 또는 다클론 항체, 면역학적으로 활성인 단편(예를 들어, Fab 또는 (Fab)2 단편), 항체 중쇄, 인간화 항체, 항체 경쇄, 유전자 조작된 단일쇄 Fν 분자, 키메릭 항체 등일 수 있다.The antibody refers to a specific protein molecule directed against an antigenic site. Antibodies used in the present invention include monoclonal or polyclonal antibodies, immunologically active fragments (eg, Fab or (Fab)2 fragments), antibody heavy chains, humanized antibodies, antibody light chains, genetically engineered single-chain Fv molecules, chimeric antibodies and the like.

MRGPRX2 단백질은 공지된 단백질이므로 본 발명에 사용되는 항체는 단백질을 항원으로 하여 면역학 분야에서 널리 알려져 있는 통상의 방법으로 제조할 수 있다. 본 발명에 따른 항체의 항원으로서 사용되는 MRGPRX2 단백질은 천연에서 추출하거나 합성될 수 있으며 DNA 서열을 기초로 하여 재조합 방법에 의해 제조될 수 있다. 유전자 재조합 기술을 이용할 경우 MRGPRX2 단백질을 코딩하는 핵산을 적절한 발현 벡터에 삽입하고, 재조합 발현 벡터로 형질전환된 형질전환체에서 MRGPRX2 단백질이 발현되도록 숙주 세포를 배양한 후 형질전환체로부터 MRGPRX2 단백질을 회수함으로써 수득될 수 있다.Since the MRGPRX2 protein is a known protein, the antibody used in the present invention can be prepared using a protein as an antigen by a conventional method widely known in the field of immunology. The MRGPRX2 protein used as the antigen of the antibody according to the present invention can be extracted from nature or synthesized and can be produced by recombinant methods based on DNA sequences. When using genetic recombination technology, nucleic acid encoding MRGPRX2 protein is inserted into an appropriate expression vector, host cells are cultured so that MRGPRX2 protein is expressed in transformants transformed with the recombinant expression vector, and then MRGPRX2 protein is recovered from transformants. can be obtained by doing

예를 들어, 다클론 항체는 MRGPRX2 단백질 항원을 동물에 주사하고 동물로부터 채혈하여 항체를 포함하는 혈청을 수득하는 방법에 의해 생산할 수 있다. 이러한 항체는 말, 소, 염소, 양, 개, 닭, 칠면조, 토끼, 마우스 또는 래트와 같은 여러 온혈 동물을 이용하여 제조할 수 있다.For example, polyclonal antibodies can be produced by a method of injecting an MRGPRX2 protein antigen into an animal and collecting blood from the animal to obtain antibody-containing serum. Such antibodies can be prepared using a variety of warm-blooded animals such as horses, cows, goats, sheep, dogs, chickens, turkeys, rabbits, mice or rats.

단클론 항체도 공지된 융합방법(fusion method)(Kohler and Milstein, European J. Immnunol. 6:511-519, 1976), 재조합 DNA 방법(미국특허 제4816567호) 및 파지 항체 라이브러리(Clackson et al., Nature, 352, 624-628, 1991; Marks et al., J. Mol. Biol. 222, 58:1-597, 1991) 기술을 이용하여 제조할 수 있다.A known fusion method for monoclonal antibodies (Kohler and Milstein, European J. Immnunol. 6:511-519, 1976), a recombinant DNA method (U.S. Patent No. 4816567), and a phage antibody library (Clackson et al., Nature, 352, 624-628, 1991; Marks et al., J. Mol. Biol. 222, 58:1-597, 1991) technique.

한편, 본 발명은 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하는 약물 과민 반응 진단용 키트 또는 아나필락시스 진단용 키트를 제공한다. On the other hand, the present invention provides a kit for diagnosing drug hypersensitivity reaction or a kit for diagnosing anaphylaxis, including an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA as an active ingredient.

본 발명의 키트는 MRGPRX2의 단백질 항체 이외에 면역학적 분석에 사용되는 당 업계에 공지된 도구 및/또는 시약을 추가로 포함할 수 있다.The kit of the present invention may further include tools and/or reagents known in the art used for immunological analysis in addition to the protein antibody of MRGPRX2.

상기에서 면역학적 분석은 항원과 항체의 결합을 측정할 수 있는 있는 방법이라면 모두 포함될 수 있다. 이러한 방법들은 당 분야에 공지되어 있으며 예를 들어, 면역세포화학 및 면역조직화학, 방사선 면역 분석법(radioimmunoassays), 효소결합면역법(ELISA: Enzyme Linked Immunoabsorbent assay), 면역 블롯(immunoblotting), 파아르 분석법(Farr assay), 면역침강, 라텍스 응집, 적혈구 응집, 비탁계법, 면역확산법, 카운터-전류 전기영동법, 단일 라디칼 면역확산법, 단백질 칩 및 면역형광법이 있다.In the above immunological analysis, any method capable of measuring the binding of an antigen and an antibody may be included. Such methods are known in the art and include, for example, immunocytochemistry and immunohistochemistry, radioimmunoassays, enzyme-linked immunoabsorbent assays (ELISAs), immunoblotting, Paar assays ( Farr assay), immunoprecipitation, latex agglutination, hemagglutination, nephelometry, immunodiffusion, counter-current electrophoresis, single radical immunodiffusion, protein chip, and immunofluorescence.

면역학적 분석에 사용되는 도구 및/또는 시약으로는 적합한 담체 또는 지지체, 검출 가능한 신호를 생성할 수 있는 표지, 용해제, 세정제가 포함된다. 또한, 표지물질이 효소인 경우에는 효소활성을 측정할 수 있는 기질 및 반응 정지제를 포함할 수 있다.Tools and/or reagents used in immunological assays include suitable carriers or supports, labels capable of producing a detectable signal, solubilizers, and detergents. In addition, when the labeling substance is an enzyme, it may include a substrate capable of measuring enzyme activity and a reaction terminating agent.

본 발명의 검출용 또는 진단용 키트에 포함되는 MRGPRX2는 바람직하게는 적합한 담체 또는 지지체에 문헌에 개시된 바와 같은 다양한 방법을 이용하여 고정될 수 있으며(Antibodies: A Labotory Manual, Harlow ＆ Lane;Cold SpringHarbor, 1988), 적합한 담체 또는 지지체의 예로는 아가로스, 셀룰로즈, 니트로셀룰로즈, 덱스트란, 세파덱스, 세파로즈, 리포솜, 카복시메틸 셀룰로즈, 폴리아크릴아미드, 폴리스테린, 반려암, 여과지, 이온교환수지, 플라스틱 필름, 플라스틱 튜브, 유리, 폴리아민-메틸 비닐-에테르-말레산 공중합체, 아미노산 공중합체, 에틸렌-말레산 공중합체, 나일론, 컵, 플랫 팩(flat packs) 등이 포함된다. 그 외의 다른 고체 기질로는 세포 배양 플레이트, ELISA 플레이트, 튜브 및 폴리머성 막이 있다. 상기 지지체는 임의의 가능한 형태, 예를 들어 구형(비드), 원통형(시험관 또는 웰 내면), 평면형(시트, 시험 스트립)을 가질 수 있다.MRGPRX2 included in the detection or diagnostic kit of the present invention may preferably be immobilized on a suitable carrier or support using various methods as disclosed in the literature (Antibodies: A Laboratory Manual, Harlow &Lane; Cold Spring Harbor, 1988 ), Examples of suitable carriers or supports include agarose, cellulose, nitrocellulose, dextran, sephadex, sepharose, liposomes, carboxymethyl cellulose, polyacrylamide, polysterin, gabbro, filter paper, ion exchange resin, plastic film, plastic tubes, glass, polyamine-methyl vinyl-ether-maleic acid copolymers, amino acid copolymers, ethylene-maleic acid copolymers, nylon, cups, flat packs, and the like. Other solid substrates include cell culture plates, ELISA plates, tubes and polymeric membranes. The support may have any conceivable shape, for example spherical (bead), cylindrical (inside a test tube or well), planar (sheet, test strip).

검출 가능한 신호를 생성할 수 있는 표지는 항원-항체 복합체의 형성을 정성 또는 정량적으로 측정가능하게 하며, 이의 예로는 효소, 형광물질, 리간드, 발광물질, 미소입자(microparticle), 레독스 분자 및 방사성 동위원소 등을 사용할 수 있다. 효소로는 β-글루쿠로니다제, β-D-글루코시다제, 우레아제, 퍼옥시다아제, 알칼라인 포스파타아제, 아세틸콜린에스테라아제, 글리코즈 옥시다아제, 헥소키나제, 말레이트 디하이드로게나아제, 글루코스-6-인산디하이드로게나아제, 인버타아제 등을 사용할 수 있다. 형광물질로는 플루오레신, 이소티오시아네이트, 로다민, 피코에리테린, 피코시아닌, 알로피코시아닌, 플루오르신이소티옥시아네이트 등을 사용할 수 있다. 리간드로는 바이오틴 유도체 등이 있으며, 발광물질로는 아크리디늄 에스테르, 루시페린, 루시퍼라아제 등이 있다. 미소입자로는 콜로이드 금, 착색된 라텍스 등이 있고 레독스 분자로는 페로센, 루테늄 착화합물, 바이올로젠, 퀴논, Ti 이온, Cs 이온, 디이미드, 1,4-벤조퀴논, 하이드로퀴논 등이 있다. 그러나 상기 예시된 것들 외에 면역학적 분석법에 사용할 수 있은 것이라면 어느 것이라도 사용할 수 있다.A label capable of generating a detectable signal enables qualitative or quantitative measurement of the formation of antigen-antibody complexes, examples of which include enzymes, fluorescent substances, ligands, luminescent substances, microparticles, redox molecules, and radioactive substances. Isotopes and the like can be used. Enzymes include β-glucuronidase, β-D-glucosidase, urease, peroxidase, alkaline phosphatase, acetylcholinesterase, glycoside oxidase, hexokinase, malate dehydrogenase, glucose-6 -Phosphate dehydrogenase, invertase, etc. can be used. As the fluorescent material, fluorescein, isothiocyanate, rhodamine, phycoerytherin, phycocyanin, allophycocyanine, fluorine isothiocyanate, and the like may be used. Ligands include biotin derivatives, and light-emitting materials include acridinium esters, luciferin, and luciferase. Microparticles include colloidal gold and colored latex, and redox molecules include ferrocene, ruthenium complex, biologen, quinone, Ti ion, Cs ion, diimide, 1,4-benzoquinone, and hydroquinone. However, any material that can be used for immunological assays other than those exemplified above may be used.

또한, 본 발명은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는, 약물 과민 반응 또는 아나필락시스 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법에 관한 것이다.In addition, the present invention relates to a method for providing information necessary for diagnosing drug hypersensitivity reaction or anaphylaxis, comprising measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA in a sample of a subject.

본 발명의 아나필락시스 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법에 있어서, 상기 피검체는 약물 과민 반응 환자일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the method for providing information necessary for diagnosis of anaphylaxis of the present invention, the subject may be a drug hypersensitivity reaction patient, but is not limited thereto.

본 발명의 아나필락시스 진단에 필요한 정보를 제공하는 방법에 있어서, MRGPRX2 수준은 약물 과민 반응 발생일로부터 12주 이상 지속적으로 높게 발현될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 즉, 본 발명의 MRGPRX2는 트립타제가 증상 발생 후 15분 내지 3시간 내에 측정해야하는 것과 달리, 증상 발생 후 12주 이상 고발현되므로 기존 아나필락시스 진단 방법의 한계를 개선한 마커로 이용할 수 있다.In the method for providing information necessary for diagnosing anaphylaxis of the present invention, the level of MRGPRX2 may be consistently high for 12 weeks or more from the date of drug hypersensitivity reaction, but is not limited thereto. That is, MRGPRX2 of the present invention is highly expressed for 12 weeks or more after symptom onset, unlike tryptase, which must be measured within 15 minutes to 3 hours after symptom onset, so it can be used as a marker that improves the limitations of existing anaphylaxis diagnosis methods.

본 발명에서, mRNA의 발현량 측정은 RT-PCR, 정량적 또는 반정량적 RT-PCR(Quantitative or semi-Quantitative RT-PCR), 정량적 또는 반정량적 리얼 타임 RT-PCR(Quantitative or semi-Quantitative real-time RT-PCR), 노던 블롯(northern blot) 및 DNA 또는 RNA 칩(chip)으로 이루어지는 군에서 하나 이상 선택된 방법을 이용하여 측정되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the measurement of the expression level of mRNA is RT-PCR, quantitative or semi-quantitative RT-PCR (Quantitative or semi-Quantitative RT-PCR), quantitative or semi-quantitative real-time RT-PCR (Quantitative or semi-Quantitative real-time It may be measured using one or more methods selected from the group consisting of RT-PCR), northern blot, and DNA or RNA chip, but is not limited thereto.

본 발명에서, 상기 단백질 발현량 측정은 웨스턴 블롯, ELISA, 방사선면역분석법, 방사면역확산법, 오우크테로니(Ouchterlony) 면역확산법, 로케트 면역전기영동, 면역조직화학염색, 면역침전분석, 보체고정분석, FACS 및 단백질 칩으로 이루어진 군에서 하나 이상 선택된 방법을 이용하여 측정되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.In the present invention, the protein expression level measurement is Western blot, ELISA, radioimmunoassay, radioimmunoassay, Ouchterlony immunodiffusion method, rocket immunoelectrophoresis, immunohistochemical staining, immunoprecipitation assay, complement fixation assay It may be measured using one or more methods selected from the group consisting of , FACS and protein chip, but is not limited thereto.

본 발명에서, 상기 시료는 약물 과민 반응을 진단하거나 아나필락시스를 진단하고자 하는 피검체로부터 채취된 것이라면 제한없이 사용할 수 있으며, 예를 들어 생검 등으로 얻어진 세포나 조직, 혈액, 전혈, 혈청, 혈장, 타액, 뇌척수액, 각종 분비물, 소변, 대변 등일 수 있다. 바람직하게는 혈액, 혈장, 혈청, 타액, 비액, 객담, 복수, 질 분비물 및 소변으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 바람직하게는 혈액, 혈장, 또는 혈청일 수 있다. 상기 시료는 검출 또는 진단에 사용하기 전에 전처리할 수 있다. 예를 들어, 균질화(homogenization), 여과, 증류, 추출, 농축, 방해 성분의 불활성화, 시약의 첨가 등을 포함할 수 있다.In the present invention, the sample can be used without limitation as long as it is collected from a subject to diagnose drug hypersensitivity or anaphylaxis, and for example, cells or tissues obtained by biopsy, blood, whole blood, serum, plasma, saliva , cerebrospinal fluid, various secretions, urine, feces, etc. Preferably, it may be selected from the group consisting of blood, plasma, serum, saliva, nasal fluid, sputum, ascites, vaginal secretion, and urine, and may preferably be blood, plasma, or serum. The sample may be pretreated prior to use for detection or diagnosis. For example, it may include homogenization, filtration, distillation, extraction, concentration, inactivation of interfering components, addition of reagents, and the like.

본 발명에서, 상기 시료는 트립타제 수치가 정상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비만세포가 활성화되면 트립타제 등 염증성 물질이 주변 조직 또는 혈액으로 분비되므로, 증상이 생긴 시점의 트립타제 수치는 평상시 기본 수치 (정상)보다 높으며, 피검체에 따라 그 수치가 다르게 나타날 수 있다.In the present invention, the sample may have a normal tryptase level, but is not limited thereto. When mast cells are activated, inflammatory substances such as tryptase are secreted into the surrounding tissues or blood, so the tryptase level at the time of symptoms is higher than the normal level (normal), and the level may vary depending on the subject.

본 발명에서, 상기 피검체는 아나필락시스 증상이 나타나지 않는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 아나필락시스 증상은 단순한 두드러기부터 심하면 사망에 이르기까지 넓은 스펙트럼을 가지고 있다. 예를 들어, 과민 반응 물질에 접촉한 직후부터 대부분 1시간 안에 기침, 흉통, 입과 손발에 저린 감각, 빈맥, 소양증을 동반한 발진, 구토 등의 증상이 나타날 수 있으며, 이어 호흡곤란, 저혈압, 의식 소실 등이 나타나 사망하는 경우도 있다.In the present invention, the subject may not show symptoms of anaphylaxis, but is not limited thereto. Anaphylaxis symptoms have a wide spectrum from simple hives to death in severe cases. For example, symptoms such as cough, chest pain, numbness in the mouth and limbs, tachycardia, rash with itching, and vomiting may appear within 1 hour after contact with a hypersensitivity substance, followed by dyspnea, hypotension, In some cases, loss of consciousness may occur and death may occur.

상기 단계의 방법으로 측정한 피검체에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 동일한 방법으로 측정한 대조구와 비교하여, MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준이 증가한 경우, 상기 피검체를 약물 과민 반응 또는 아나필락시스에 걸린 것으로 진단할 수 있다. When the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA is increased compared to the control group measured by the same method, the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA in the subject measured by the method of the above step is increased, the subject is treated with drug hypersensitivity reaction or anaphylaxis. can be diagnosed as having

본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.Since the present invention can apply various transformations and have various embodiments, specific embodiments will be illustrated in the drawings and described in detail in the detailed description. However, this is not intended to limit the present invention to specific embodiments, and should be understood to include all conversions, equivalents, or substitutes included in the spirit and scope of the present invention. In describing the present invention, if it is determined that a detailed description of related known technologies may obscure the gist of the present invention, the detailed description will be omitted.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, a preferred embodiment is presented to aid understanding of the present invention. However, the following examples are provided to more easily understand the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following examples.

[실시예][Example]

<실시예 1. 실험 방법><Example 1. Experimental method>

1.1 대상 및 시료1.1 Subject and sample

건강한 그룹, 약물 과민 반응 그룹 (ADR) 또는 약물 과민 반응 그룹에서도 약물로 인한 아나필락시스 증상을 나타낸 즉시형 과민 반응 그룹으로 분류하였다. 환자에게 투여한 약물의 종류는 IgE 매개 약물인 세팔로스포린 (cephalosporin) 계열 항생제, 페니실린 (penicillin) 계열 항생제, H2 수용체 길항제; 및 비 IgE 매개 약물인 비스테로이드 항염증제 (NSAIDs), 아스피린 (aspirin) 등이 있으며, 약물 과민 반응의 유무 및 약물 타입에 따라 환자를 분류하였다. The healthy group, the drug hypersensitivity reaction group (ADR), and the drug hypersensitivity reaction group were classified into the immediate hypersensitivity reaction group that showed symptoms of drug-induced anaphylaxis. The types of drugs administered to the patient include cephalosporin antibiotics, penicillin antibiotics, and H 2 receptor antagonists, which are IgE-mediated drugs; and non-IgE-mediated drugs such as non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) and aspirin. Patients were classified according to the presence or absence of drug hypersensitivity and drug type.

환자의 혈액을 채취하고, Serum을 분리하여 MRGPRX2의 농도를 측정하였다. The patient's blood was collected, serum was separated, and the concentration of MRGPRX2 was measured.

1.2 MRGPRX2 측정 및 통계적 분석1.2 MRGPRX2 measurement and statistical analysis

MRGPRX2 (Mas-related G-protein coupled receptor member X2) 수준은 제조업체의 지침에 따라 MyBioSource의 ELISA 키트를 사용하여 측정하였다. Mas-related G-protein coupled receptor member X2 (MRGPRX2) levels were measured using MyBioSource's ELISA kit according to the manufacturer's instructions.

구체적으로, MyBioSource 사의 Human MRGPRX2 ELISA Kit를 사용하여 제조업체의 방법에 따라 Sandwich ELISA를 시행하였다. Plates에 Standard와 Serum을 각각 50 μl씩 넣었으며, Standard는 100ng/ml을 희석하여 사용하였다. HRP-conjugate reagent 100 μl를 추가로 더하여, 60 분 동안 37°C에서 반응시켰다. 60 분 후 용액을 버리고, wsah buffer로 남은 HRP-conjugate reagent를 모두 제거해주었다. Chromogen Solution A 50 μl와 Chromogen Solution B 50 μl을 넣어 빛을 차단한 상태에서 37°C에서 15분간 반응시켰다. 50μl Stop Solution을 넣어 반응을 멈추게 한 후, ELISA reader (TECAN sunrise)로 450 nm에서 흡광도를 측정하였다.Specifically, Sandwich ELISA was performed using MyBioSource's Human MRGPRX2 ELISA Kit according to the manufacturer's method. 50 μl each of Standard and Serum was added to the plates, and 100 ng/ml of Standard was diluted and used. 100 μl of HRP-conjugate reagent was additionally added and reacted at 37°C for 60 minutes. After 60 minutes, the solution was discarded, and all remaining HRP-conjugate reagents were removed with wsah buffer. 50 μl of Chromogen Solution A and 50 μl of Chromogen Solution B were added and reacted at 37°C for 15 minutes while blocking light. After stopping the reaction by adding 50 μl Stop Solution, the absorbance was measured at 450 nm with an ELISA reader (TECAN sunrise).

<실시예 2. 실험 결과><Example 2. Experimental results>

본 발명자들은 비만세포의 IgE에 대하여 비의존적으로 활성화 되는 수용체인 MRGPRX2의 혈중 농도를 약물에 의한 아나필락시스 반응이 있는 환자에서 측정함으로써 트립타제 농도보다 더 오랜 시간 높게 유지되는지 확인하여 MRGPRX2가 약물에 의한 아나필락시스 증상 감별에 유용한 지표가 될 수 있을지 확인해 보고자 하였다.The present inventors measured the blood concentration of MRGPRX2, a receptor that is activated independently of IgE in mast cells, in patients with drug-induced anaphylactic reactions, and confirmed that MRGPRX2 was maintained higher than the tryptase concentration for a longer period of time, thereby preventing MRGPRX2 from drug-induced anaphylaxis. We wanted to see if it could be a useful indicator for symptom discrimination.

그 결과, 표 1에 나타난 바와 같이, 약물 과민 반응 (ADR)이 나타나지 않은 환자와 비교하여 약물 과민 반응 환자의 혈액에서 MRGPRX2의 농도가 현저히 높은 것으로 나타났다.As a result, as shown in Table 1, the concentration of MRGPRX2 in the blood of drug hypersensitivity patients was significantly higher than that of patients without ADR.

또한, 표 2에 나타난 바와 같이, 등록된 환자들이 약물 과민 반응이 있고 난 후 샘플 채취일 까지의 기간별로 나누어 농도를 확인해 보았다. 그 결과, 약물에 의한 아나필락시스 증상을 나타낸 즉시형 과민 반응 환자들의 혈액에서 MRGPRX2의 농도가 12주까지도 지속적으로 높은 수치를 보이고 있음을 확인하였다.In addition, as shown in Table 2, the concentration was checked by dividing the registered patients by the period from the drug hypersensitivity reaction to the sample collection date. As a result, it was confirmed that the concentration of MRGPRX2 in the blood of patients with immediate-type hypersensitivity reactions who showed symptoms of drug-induced anaphylaxis was consistently high even up to 12 weeks.

　 minmin maxmax meanmean sdsd STATSTAT p.valp.val controlcontrol 2.1352.135 41.9841.98 12.8512.85 9.759.75 -14.9251-14.9251 0.0000.000 ADRADR 1.8481.848 186.60186.60 59.0359.03 41.6341.63 TotalTotal 1.8481.848 186.60186.60 49.4049.40 41.0641.06

Figure 112020033612326-pat00001
Figure 112020033612326-pat00001

# : number # : number

1 : non-IgE type 약물의 아나필락시스1: Anaphylaxis of non-IgE type drugs

O : IgE type 약물의 아나필락시스 O: Anaphylaxis from IgE type drugs

이상의 실험 결과로부터, 본 발명자들은 약물 과민 반응이 있는 환자에서 MRGPRX2의 혈중 농도를 측정함으로써 다른 질환과의 감별이 가능할 뿐만 아니라, 트립타제보다 장시간이 지난 후에도 아나필락시스를 포함하는 즉시형 과민 반응의 유무를 확인할 수 있는 유용한 바이오마커로 사용할 수 있음을 확인하였다. From the above experimental results, the present inventors not only made it possible to differentiate from other diseases by measuring the blood concentration of MRGPRX2 in patients with drug hypersensitivity reactions, but also to determine the presence or absence of immediate-type hypersensitivity reactions including anaphylaxis even after a longer period of time than tryptase. It was confirmed that it can be used as a useful biomarker that can be identified.

전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가지는 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. The above description of the present invention is for illustrative purposes, and those skilled in the art can understand that it can be easily modified into other specific forms without changing the technical spirit or essential features of the present invention. will be. Therefore, the embodiments described above should be understood as illustrative in all respects and not limiting.

<110> THE ASAN FOUNDATION University of Ulsan Foundation For Industry Cooperation <120> Method of determining immediate hypersensitivity patients using MRGPRX2 <130> MP20-010 <160> 2 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 330 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> MRGPRX2 [Homo sapiens] <400> 1 Met Asp Pro Thr Thr Pro Ala Trp Gly Thr Glu Ser Thr Thr Val Asn 1 5 10 15 Gly Asn Asp Gln Ala Leu Leu Leu Leu Cys Gly Lys Glu Thr Leu Ile 20 25 30 Pro Val Phe Leu Ile Leu Phe Ile Ala Leu Val Gly Leu Val Gly Asn 35 40 45 Gly Phe Val Leu Trp Leu Leu Gly Phe Arg Met Arg Arg Asn Ala Phe 50 55 60 Ser Val Tyr Val Leu Ser Leu Ala Gly Ala Asp Phe Leu Phe Leu Cys 65 70 75 80 Phe Gln Ile Ile Asn Cys Leu Val Tyr Leu Ser Asn Phe Phe Cys Ser 85 90 95 Ile Ser Ile Asn Phe Pro Ser Phe Phe Thr Thr Val Met Thr Cys Ala 100 105 110 Tyr Leu Ala Gly Leu Ser Met Leu Ser Thr Val Ser Thr Glu Arg Cys 115 120 125 Leu Ser Val Leu Trp Pro Ile Trp Tyr Arg Cys Arg Arg Pro Arg His 130 135 140 Leu Ser Ala Val Val Cys Val Leu Leu Trp Ala Leu Ser Leu Leu Leu 145 150 155 160 Ser Ile Leu Glu Gly Lys Phe Cys Gly Phe Leu Phe Ser Asp Gly Asp 165 170 175 Ser Gly Trp Cys Gln Thr Phe Asp Phe Ile Thr Ala Ala Trp Leu Ile 180 185 190 Phe Leu Phe Met Val Leu Cys Gly Ser Ser Leu Ala Leu Leu Val Arg 195 200 205 Ile Leu Cys Gly Ser Arg Gly Leu Pro Leu Thr Arg Leu Tyr Leu Thr 210 215 220 Ile Leu Leu Thr Val Leu Val Phe Leu Leu Cys Gly Leu Pro Phe Gly 225 230 235 240 Ile Gln Trp Phe Leu Ile Leu Trp Ile Trp Lys Asp Ser Asp Val Leu 245 250 255 Phe Cys His Ile His Pro Val Ser Val Val Leu Ser Ser Leu Asn Ser 260 265 270 Ser Ala Asn Pro Ile Ile Tyr Phe Phe Val Gly Ser Phe Arg Lys Gln 275 280 285 Trp Arg Leu Gln Gln Pro Ile Leu Lys Leu Ala Leu Gln Arg Ala Leu 290 295 300 Gln Asp Ile Ala Glu Val Asp His Ser Glu Gly Cys Phe Arg Gln Gly 305 310 315 320 Thr Pro Glu Met Ser Arg Ser Ser Leu Val 325 330 <210> 2 <211> 2072 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> MRGPRX2 [Homo sapiens] <400> 2 actccagatc ctgcaggcat ctccccatcc tcagctgttt gccagtccca ggaaagcact 60 tctcaactca ccaactccag tagaaagaag ggtgttaagg ggcaccagtg gaggttttct 120 gagcatggat ccaaccaccc cggcctgggg aacagaaagt acaacagtga atggaaatga 180 ccaagccctt cttctgcttt gtggcaagga gaccctgatc ccggtcttcc tgatcctttt 240 cattgccctg gtcgggctgg taggaaacgg gtttgtgctc tggctcctgg gcttccgcat 300 gcgcaggaac gccttctctg tctacgtcct cagcctggcc ggggccgact tcctcttcct 360 ctgcttccag attataaatt gcctggtgta cctcagtaac ttcttctgtt ccatctccat 420 caatttccct agcttcttca ccactgtgat gacctgtgcc taccttgcag gcctgagcat 480 gctgagcacc gtcagcaccg agcgctgcct gtccgtcctg tggcccatct ggtatcgctg 540 ccgccgcccc agacacctgt cagcggtcgt gtgtgtcctg ctctgggccc tgtccctact 600 gctgagcatc ttggaaggga agttctgtgg cttcttattt agtgatggtg actctggttg 660 gtgtcagaca tttgatttca tcactgcagc gtggctgatt tttttattca tggttctctg 720 tgggtccagt ctggccctgc tggtcaggat cctctgtggc tccaggggtc tgccactgac 780 caggctgtac ctgaccatcc tgctcacagt gctggtgttc ctcctctgcg gcctgccctt 840 tggcattcag tggttcctaa tattatggat ctggaaggat tctgatgtct tattttgtca 900 tattcatcca gtttcagttg tcctgtcatc tcttaacagc agtgccaacc ccatcattta 960 cttcttcgtg ggctctttta ggaagcagtg gcggctgcag cagccgatcc tcaagctggc 1020 tctccagagg gctctgcagg acattgctga ggtggatcac agtgaaggat gcttccgtca 1080 gggcaccccg gagatgtcga gaagcagtct ggtgtagaga tggacagcct ctacttccat 1140 cagatatatg tggctttgag aggcaacttt gcccctgtct gtctgatttg ctgaactttc 1200 tcagtcctga ttttaaaaca gttaagagag tccttgtgag gattaagtga gacagtgcct 1260 atgaaacaaa cactaagtgc agtgtctctg gaactgcctt actcacaggc ttccaccaca 1320 gccctatgag agctttgcca actctgcggt ccatgactgt tcccactttt aatgaatcct 1380 acctttcgca gaaggctgaa agcagggcag aaaagatcta catttctttg gacactgcac 1440 ttgataggga ctcaaagaat gttatatttt taattaattt ctttttctct tccgtacaat 1500 ttctgtctca acaaaattag aagaattaaa tttaaaacta gctccaaaag agcagtcgtc 1560 tttcattttg gcagacctta gaatatcccc ctagcttaat aaatctttgt tgaatggctt 1620 aatgaatgaa taaactggtt aatgtttaag ttaaacctct gaaaagtctc catttaccag 1680 atttgagtca ctaaatttat tgctttcact acttttgaat tttgcaaaca tgaaattaag 1740 ttttataatt agataaatca atgtcaacac atatttaaag tttgaggtac actgtcttcc 1800 tgtggtttcc tttcacatgc catcccttaa aatcccagct acacgccttc ccattccttc 1860 ccctttgcct ttgttctaat cttccctctc tgggggctct ctaattcgtc ctggaagttt 1920 ccagtggtct tatagactcc atgttcttgg aggacaggct gtatgtcaga tttacctttt 1980 attccgaaga actcggagca tttattttgt taattaaatt gcacatattt ttaaaagtta 2040 cgtgttccac agaataaaat actaattgta aa 2072 <110> THE ASAN FOUNDATION University of Ulsan Foundation For Industry Cooperation <120> Method of determining immediate hypersensitivity patients using MRGPRX2 <130> MP20-010 <160> 2 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 330 <212> PRT <213> artificial sequence <220> <223> MRGPRX2 [Homo sapiens] <400> 1 Met Asp Pro Thr Thr Pro Ala Trp Gly Thr Glu Ser Thr Thr Val Asn 1 5 10 15 Gly Asn Asp Gln Ala Leu Leu Leu Leu Cys Gly Lys Glu Thr Leu Ile 20 25 30 Pro Val Phe Leu Ile Leu Phe Ile Ala Leu Val Gly Leu Val Gly Asn 35 40 45 Gly Phe Val Leu Trp Leu Leu Gly Phe Arg Met Arg Arg Asn Ala Phe 50 55 60 Ser Val Tyr Val Leu Ser Leu Ala Gly Ala Asp Phe Leu Phe Leu Cys 65 70 75 80 Phe Gln Ile Ile Asn Cys Leu Val Tyr Leu Ser Asn Phe Phe Cys Ser 85 90 95 Ile Ser Ile Asn Phe Pro Ser Phe Phe Thr Thr Val Met Thr Cys Ala 100 105 110 Tyr Leu Ala Gly Leu Ser Met Leu Ser Thr Val Ser Thr Glu Arg Cys 115 120 125 Leu Ser Val Leu Trp Pro Ile Trp Tyr Arg Cys Arg Arg Pro Arg His 130 135 140 Leu Ser Ala Val Val Cys Val Leu Leu Trp Ala Leu Ser Leu Leu Leu 145 150 155 160 Ser Ile Leu Glu Gly Lys Phe Cys Gly Phe Leu Phe Ser Asp Gly Asp 165 170 175 Ser Gly Trp Cys Gln Thr Phe Asp Phe Ile Thr Ala Ala Trp Leu Ile 180 185 190 Phe Leu Phe Met Val Leu Cys Gly Ser Ser Leu Ala Leu Leu Val Arg 195 200 205 Ile Leu Cys Gly Ser Arg Gly Leu Pro Leu Thr Arg Leu Tyr Leu Thr 210 215 220 Ile Leu Leu Thr Val Leu Val Phe Leu Leu Cys Gly Leu Pro Phe Gly 225 230 235 240 Ile Gln Trp Phe Leu Ile Leu Trp Ile Trp Lys Asp Ser Asp Val Leu 245 250 255 Phe Cys His Ile His Pro Val Ser Val Val Leu Ser Ser Leu Asn Ser 260 265 270 Ser Ala Asn Pro Ile Ile Tyr Phe Phe Val Gly Ser Phe Arg Lys Gln 275 280 285 Trp Arg Leu Gln Gln Pro Ile Leu Lys Leu Ala Leu Gln Arg Ala Leu 290 295 300 Gln Asp Ile Ala Glu Val Asp His Ser Glu Gly Cys Phe Arg Gln Gly 305 310 315 320 Thr Pro Glu Met Ser Arg Ser Ser Leu Val 325 330 <210> 2 <211> 2072 <212> DNA <213> artificial sequence <220> <223> MRGPRX2 [Homo sapiens] <400> 2 actccagatc ctgcaggcat ctccccatcc tcagctgttt gccagtccca ggaaagcact 60 tctcaactca ccaactccag tagaaagaag ggtgttaagg ggcaccagtg gaggttttct 120 gagcatggat ccaaccaccc cggcctgggg aacagaaagt acaacagtga atggaaatga 180 ccaagccctt cttctgcttt gtggcaagga gaccctgatc ccggtcttcc tgatcctttt 240 cattgccctg gtcgggctgg taggaaacgg gtttgtgctc tggctcctgg gcttccgcat 300 gcgcaggaac gccttctctg tctacgtcct cagcctggcc ggggccgact tcctcttcct 360 ctgcttccag attataaatt gcctggtgta cctcagtaac ttcttctgtt ccatctccat 420 caatttccct agcttcttca ccactgtgat gacctgtgcc taccttgcag gcctgagcat 480 gctgagcacc gtcagcaccg agcgctgcct gtccgtcctg tggcccatct ggtatcgctg 540 ccgccgcccc agacacctgt cagcggtcgt gtgtgtcctg ctctgggccc tgtccctact 600 gctgagcatc ttggaaggga agttctgtgg cttcttattt agtgatggtg actctggttg 660 gtgtcagaca tttgatttca tcactgcagc gtggctgatt ttttattca tggttctctg 720 tgggtccagt ctggccctgc tggtcaggat cctctgtggc tccaggggtc tgccactgac 780 caggctgtac ctgaccatcc tgctcacagt gctggtgttc ctcctctgcg gcctgccctt 840 tggcattcag tggttcctaa tattatggat ctggaaggat tctgatgtct tattttgtca 900 tattcatcca gtttcagttg tcctgtcatc tcttaacagc agtgccaacc ccatcattta 960 cttcttcgtg ggctctttta ggaagcagtg gcggctgcag cagccgatcc tcaagctggc 1020 tctccagagg gctctgcagg acattgctga ggtggatcac agtgaaggat gcttccgtca 1080 gggcaccccg gagatgtcga gaagcagtct ggtgtagaga tggacagcct ctacttccat 1140 cagatatatg tggctttgag aggcaacttt gcccctgtct gtctgatttg ctgaactttc 1200 tcagtcctga ttttaaaaca gttaagagag tccttgtgag gattaagtga gacagtgcct 1260 atgaaacaaa cactaagtgc agtgtctctg gaactgcctt actcacaggc ttccaccaca 1320 gccctatgag agctttgcca actctgcggt ccatgactgt tcccactttt aatgaatcct 1380 accttcgca gaaggctgaa agcagggcag aaaagatcta catttctttg gacactgcac 1440 ttgataggga ctcaaagaat gttatatttt taattaattt ctttttctct tccgtacaat 1500 ttctgtctca acaaaattag aagaattaaa tttaaaacta gctccaaaag agcagtcgtc 1560 tttcattttg gcagacctta gaatatcccc ctagcttaat aaatctttgt tgaatggctt 1620 aatgaatgaa taaactggtt aatgtttaag ttaaacctct gaaaagtctc catttaccag 1680 atttgagtca ctaaatttat tgctttcact acttttgaat tttgcaaaca tgaaattaag 1740 ttttataatt agataaatca atgtcaacac atatttaaag tttgaggtac actgtcttcc 1800 tgtggtttcc tttcacatgc catcccttaa aatcccagct acacgccttc ccattccttc 1860 ccctttgcct ttgttctaat cttccctctc tgggggctct ctaattcgtc ctggaagttt 1920 ccagtggtct tatagactcc atgttcttgg aggacaggct gtatgtcaga tttacctttt 1980 attccgaaga actcggagca tttatttgt taattaaatt gcacatattt ttaaaagtta 2040 cgtgttccac agaataaaat actaattgta aa 2072

Claims (20)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 약물에 의해 유발되는 즉시형 과민 반응성 예측을 위한 정보 제공 방법에 있어서,
상기 방법은 피검체의 시료에서 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
대조군과 비교하여 MRGPRX2 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준이 증가된 경우 즉시형 과민 반응성이 예측되는 것으로 진단하는 단계를 포함하고,
상기 시료는 아나필락시스 증상이 나타나지 않은 상태의 피검체로부터 분리된 것으로, 트립타제 수치가 정상인 것을 특징으로 하고,
상기 즉시형 과민 반응은 IgE 매개형 아나필락시스인 것을 특징으로 하는
약물에 의해 유발되는 즉시형 과민 반응성 예측을 위한 정보 제공 방법.
In the method of providing information for predicting immediate-type hypersensitivity reactivity induced by drugs,
The method includes measuring the expression level of MRGPRX2 protein or mRNA thereof in a sample of a subject; and
Diagnosing that immediate-type hypersensitivity reactivity is predicted when the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA is increased compared to the control group,
The sample is isolated from a subject without symptoms of anaphylaxis, characterized in that the tryptase level is normal,
Characterized in that the immediate hypersensitivity reaction is IgE-mediated anaphylaxis
An informational method for predicting drug-induced immediate hypersensitivity.
 제14항에 있어서,
상기 시료는 혈액, 혈장 또는 혈청인 것을 특징으로 하는, 방법.
According to claim 14,
The method, characterized in that the sample is blood, plasma or serum.
 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 약물에 의해 유발되는 즉시형 과민 반응성 예측용 키트에 있어서,
상기 키트는 MRGPRX2의 단백질 또는 이의 mRNA의 발현 수준을 측정하는 제제를 유효성분으로 포함하고,
상기 키트는 정상 범위의 트립타제 수준 및 아나필락시스 증상이 없는 상태의 피검체를 대상으로 하고,
상기 즉시형 과민 반응은 IgE 매개형 아나필락시스인 것을 특징으로 하는
약물에 의해 유발되는 즉시형 과민 반응성 예측용 키트.

In the kit for predicting immediate-type hypersensitivity reaction induced by a drug,
The kit includes an agent for measuring the expression level of MRGPRX2 protein or its mRNA as an active ingredient,
The kit is intended for a subject with a normal range of tryptase levels and no symptoms of anaphylaxis,
Characterized in that the immediate hypersensitivity reaction is IgE-mediated anaphylaxis
A kit for predicting drug-induced immediate hypersensitivity reactions.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017524382A (en) 2014-08-01 2017-08-31 ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー MRGPRX2 / MRGPRB2-expressing cell-based assay to detect pseudoallergic drug reactions and to identify blocking agents that prevent adverse reactions
CN107703312A (en) * 2017-11-15 2018-02-16 西安交通大学 The protein marker and method of examination medicine anaphylactoid reaction sensitive group

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107142325A (en) * 2017-06-28 2017-09-08 西安交通大学 A kind of gene marker and its application for medicine anaphylactoid reaction sensitive group examination

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2017524382A (en) 2014-08-01 2017-08-31 ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー MRGPRX2 / MRGPRB2-expressing cell-based assay to detect pseudoallergic drug reactions and to identify blocking agents that prevent adverse reactions
CN107703312A (en) * 2017-11-15 2018-02-16 西安交通大学 The protein marker and method of examination medicine anaphylactoid reaction sensitive group

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