JP3501349B2 - Ｃｒｐ測定用プロゾーン現象抑制剤、ｃｒｐの測定方法、及びｃｒｐ測定試薬 - Google Patents
Ｃｒｐ測定用プロゾーン現象抑制剤、ｃｒｐの測定方法、及びｃｒｐ測定試薬Info
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Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、Ｃ−反応性蛋白質
（Ｃ−ｒｅａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ以下ＣＲＰと
いう）にＣＲＰ抗体を反応させて生成する抗原抗体複合
体に由来する濁りを測定して検体中のＣＲＰを測定する
際に障害となるプロゾーン現象を抑制するためのＣＲＰ
測定用プロゾーン現象抑制剤、それを利用したＣＲＰの
測定方法、及びそれを用いたＣＲＰ測定試薬に関する。
（Ｃ−ｒｅａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ以下ＣＲＰと
いう）にＣＲＰ抗体を反応させて生成する抗原抗体複合
体に由来する濁りを測定して検体中のＣＲＰを測定する
際に障害となるプロゾーン現象を抑制するためのＣＲＰ
測定用プロゾーン現象抑制剤、それを利用したＣＲＰの
測定方法、及びそれを用いたＣＲＰ測定試薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】ＣＲＰは、急性炎症あるいは急性の組織
崩壊で増加する急性期蛋白の一種で、代表的な炎症マー
カーである。そのため、ＣＲＰの定量は、炎症・組織障
害を起こす種々の疾患の活動性、重症度、経過をみる際
に不可欠である。したがって、病院、臨床検査センター
等において、ＣＲＰはルーチンで測定されている。通
常、ＣＲＰの測定では、検体中のＣＲＰと試薬中の抗Ｃ
ＲＰ抗体との反応により、抗原抗体複合体を生成させ、
その複合体からＣＲＰを測定する方法（ＣＲＰ測定系と
記載することもある）が利用されている。そのような方
法として、ラテックス凝集免疫測定法（以下ラッテクス
凝集法と記載することもある）、免疫比濁法（ＴＩＡ
法）等によるものが知られている。一般に、ラテックス
凝集法は、ポリスチレン等の微粒子に抗体を感作させ
て、それを抗原と反応させ、生成する抗原抗体複合体に
由来する濁りを測定するものである。この方法では、抗
原と結合した場合の濁りの発生量が、抗体だけを用いた
場合よりも大幅に増大するため測定感度の高い方法であ
り、非特異的反応の影響も比較的、受けにくい。
崩壊で増加する急性期蛋白の一種で、代表的な炎症マー
カーである。そのため、ＣＲＰの定量は、炎症・組織障
害を起こす種々の疾患の活動性、重症度、経過をみる際
に不可欠である。したがって、病院、臨床検査センター
等において、ＣＲＰはルーチンで測定されている。通
常、ＣＲＰの測定では、検体中のＣＲＰと試薬中の抗Ｃ
ＲＰ抗体との反応により、抗原抗体複合体を生成させ、
その複合体からＣＲＰを測定する方法（ＣＲＰ測定系と
記載することもある）が利用されている。そのような方
法として、ラテックス凝集免疫測定法（以下ラッテクス
凝集法と記載することもある）、免疫比濁法（ＴＩＡ
法）等によるものが知られている。一般に、ラテックス
凝集法は、ポリスチレン等の微粒子に抗体を感作させ
て、それを抗原と反応させ、生成する抗原抗体複合体に
由来する濁りを測定するものである。この方法では、抗
原と結合した場合の濁りの発生量が、抗体だけを用いた
場合よりも大幅に増大するため測定感度の高い方法であ
り、非特異的反応の影響も比較的、受けにくい。
【０００３】しかしながら、このような濁り由来のＣＲ
Ｐ測定には、プロゾーン現象という原理的にどうしても
解決しえない問題がある。このことは、ラテックス凝集
法においてさえ免れることができない。なお、プロゾー
ン現象とは、抗体の等量以上の高濃度抗原で、抗原量が
増えるにつれて濁りが減少していく現象である。このこ
とは、ＣＲＰの血中濃度測定に際して、ＣＲＰ濃度が高
く、すぐに適切な処置を必要とする患者でも、プロゾー
ン現象により実際より極めて低いＣＲＰ測定値を示すこ
とになり、ラテックス凝集法によるＣＲＰ測定法の最大
の欠点となっている。
Ｐ測定には、プロゾーン現象という原理的にどうしても
解決しえない問題がある。このことは、ラテックス凝集
法においてさえ免れることができない。なお、プロゾー
ン現象とは、抗体の等量以上の高濃度抗原で、抗原量が
増えるにつれて濁りが減少していく現象である。このこ
とは、ＣＲＰの血中濃度測定に際して、ＣＲＰ濃度が高
く、すぐに適切な処置を必要とする患者でも、プロゾー
ン現象により実際より極めて低いＣＲＰ測定値を示すこ
とになり、ラテックス凝集法によるＣＲＰ測定法の最大
の欠点となっている。
【０００４】そこで、プロゾーン現象を解決する目的で
いくつかの試みがなされている。例えば、濁り度を測定
し終わった反応液にさらに抗原であるＣＲＰを追加し、
濁りがさらに上昇するか逆に減少するかによってプロゾ
ーン減少の有無を確認する方法もある。しかし、この方
法は、操作が煩雑なため一般的でない。また、特開昭６
２−２１８８６６号公報には、トリアルキルアミン、及
び第４級アンモニウム塩から選ばれる水溶性化合物を抗
原抗体反応系に添加する方法が提案されている。しか
し、この方法は、反応性、すなわち吸光度変化量を全体
的に低下させる方法によって測定範囲を広げており、そ
のため、低濃度領域の感度も低下させる難点がある。特
開平８−１０１１９６号公報には、アルブミン等の高分
子化合物にホスホリルコリンを２分子以上結合せしめた
高分子化合物を、プロゾーン現象抑制剤として用いるＣ
ＲＰ測定法が記載されている。しかし、この方法は、抑
制剤の調製法が煩雑であり実用に適用するためには改善
が求められている。
いくつかの試みがなされている。例えば、濁り度を測定
し終わった反応液にさらに抗原であるＣＲＰを追加し、
濁りがさらに上昇するか逆に減少するかによってプロゾ
ーン減少の有無を確認する方法もある。しかし、この方
法は、操作が煩雑なため一般的でない。また、特開昭６
２−２１８８６６号公報には、トリアルキルアミン、及
び第４級アンモニウム塩から選ばれる水溶性化合物を抗
原抗体反応系に添加する方法が提案されている。しか
し、この方法は、反応性、すなわち吸光度変化量を全体
的に低下させる方法によって測定範囲を広げており、そ
のため、低濃度領域の感度も低下させる難点がある。特
開平８−１０１１９６号公報には、アルブミン等の高分
子化合物にホスホリルコリンを２分子以上結合せしめた
高分子化合物を、プロゾーン現象抑制剤として用いるＣ
ＲＰ測定法が記載されている。しかし、この方法は、抑
制剤の調製法が煩雑であり実用に適用するためには改善
が求められている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、従来
の抗原抗体反応を利用したＣＲＰ測定法に見られる上記
の問題を解決するための、ＣＲＰ測定用プロゾーン現象
抑制剤、ＣＲＰの測定方法、及びＣＲＰ測定試薬を提供
することにある。
の抗原抗体反応を利用したＣＲＰ測定法に見られる上記
の問題を解決するための、ＣＲＰ測定用プロゾーン現象
抑制剤、ＣＲＰの測定方法、及びＣＲＰ測定試薬を提供
することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、二価の金属イ
オンを含むＣＲＰ測定用プロゾーン現象抑制剤である。
また、本発明は、プロゾーン現象を有するＣＲＰ測定系
において、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオ
ンを存在させてＣＲＰを測定することを特徴とするＣＲ
Ｐの測定方法である。さらにまた、本発明は、検体中の
ＣＲＰと、ラテックスに結合したＣＲＰ抗体とを混合し
て特異的に抗原抗体反応をさせ、それに由来する濁度を
測定することにより、該ＣＲＰを測定する方法におい
て、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオンを存
在させて該抗原抗体反応をさせ、それに由来する濁度を
測定する際のプロゾーン現象を二価の金属イオンにより
抑制することを特徴とするＣＲＰの測定方法である。さ
らにまた、本発明は、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価
の金属イオン、及び二価の金属イオン以外の非特異的反
応抑制剤との存在下に、検体中のＣＲＰとＣＲＰ抗体と
を混合して抗原抗体反応をさせ、それに由来する濁度
を、二価の金属イオンによりプロゾーン現象を抑制し
て、測定してＣＲＰを測定することを特徴とするＣＲＰ
の測定方法である。さらにまた、本発明は、必須成分と
して、 i) 非特異的反応抑制剤、 ii) ０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオン、
及び iii) ラテックスに結合したＣＲＰ抗体を含む、プロゾ
ーン現象を抑制してＣＲＰを測定するためのＣＲＰ測定
試薬である。
オンを含むＣＲＰ測定用プロゾーン現象抑制剤である。
また、本発明は、プロゾーン現象を有するＣＲＰ測定系
において、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオ
ンを存在させてＣＲＰを測定することを特徴とするＣＲ
Ｐの測定方法である。さらにまた、本発明は、検体中の
ＣＲＰと、ラテックスに結合したＣＲＰ抗体とを混合し
て特異的に抗原抗体反応をさせ、それに由来する濁度を
測定することにより、該ＣＲＰを測定する方法におい
て、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオンを存
在させて該抗原抗体反応をさせ、それに由来する濁度を
測定する際のプロゾーン現象を二価の金属イオンにより
抑制することを特徴とするＣＲＰの測定方法である。さ
らにまた、本発明は、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価
の金属イオン、及び二価の金属イオン以外の非特異的反
応抑制剤との存在下に、検体中のＣＲＰとＣＲＰ抗体と
を混合して抗原抗体反応をさせ、それに由来する濁度
を、二価の金属イオンによりプロゾーン現象を抑制し
て、測定してＣＲＰを測定することを特徴とするＣＲＰ
の測定方法である。さらにまた、本発明は、必須成分と
して、 i) 非特異的反応抑制剤、 ii) ０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオン、
及び iii) ラテックスに結合したＣＲＰ抗体を含む、プロゾ
ーン現象を抑制してＣＲＰを測定するためのＣＲＰ測定
試薬である。
【０００７】
【発明の実施の形態】本発明において、二価の金属イオ
ンとしては、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、
マンガンイオン、バリウムイオン、ニッケルイオン、コ
バルトイオン等が好適である。二価の金属イオンを供給
する化合物としては、二価の金属イオンを供給する水溶
性化合物であり、かつ、試薬の安定性や抗原抗体反応等
に特に問題を起こさない化合物が好ましく、塩化マグネ
シウム、酢酸マグネシウム、臭化マグネシウム、ヨウ化
マグネシウム、酢酸マグネシウム、塩化カルシウム、臭
化カルシウム、塩化マンガン、臭化マンガン、塩化バリ
ウム、臭化バリウム、塩化ニッケル、塩化コバルト、硫
酸コバルト等が好適である。
ンとしては、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、
マンガンイオン、バリウムイオン、ニッケルイオン、コ
バルトイオン等が好適である。二価の金属イオンを供給
する化合物としては、二価の金属イオンを供給する水溶
性化合物であり、かつ、試薬の安定性や抗原抗体反応等
に特に問題を起こさない化合物が好ましく、塩化マグネ
シウム、酢酸マグネシウム、臭化マグネシウム、ヨウ化
マグネシウム、酢酸マグネシウム、塩化カルシウム、臭
化カルシウム、塩化マンガン、臭化マンガン、塩化バリ
ウム、臭化バリウム、塩化ニッケル、塩化コバルト、硫
酸コバルト等が好適である。
【０００８】本発明では、例えば、プロゾーン現象を有
するＣＲＰ測定系において、通常、０．５ｍＭ〜１００
０ｍＭの濃度の二価の金属イオンを存在させて測定する
とより効果的にプロゾーン現象を抑制することができ
る。二価の金属イオンの濃度は、０．６ｍＭ〜５００ｍ
Ｍが好ましく、０．６５ｍＭ〜４００ｍＭがさらに好ま
しく、０．７ｍＭ〜２００ｍＭが特に好ましく、０．７
５ｍＭ〜１００ｍＭが最も好ましい。二価の金属イオン
の濃度が高すぎると抗原抗体反応の阻害が起こりやすく
なることがあり、濃度が小さすぎるとプロゾーン現象に
対し抑制効果が小さくなることもある。
するＣＲＰ測定系において、通常、０．５ｍＭ〜１００
０ｍＭの濃度の二価の金属イオンを存在させて測定する
とより効果的にプロゾーン現象を抑制することができ
る。二価の金属イオンの濃度は、０．６ｍＭ〜５００ｍ
Ｍが好ましく、０．６５ｍＭ〜４００ｍＭがさらに好ま
しく、０．７ｍＭ〜２００ｍＭが特に好ましく、０．７
５ｍＭ〜１００ｍＭが最も好ましい。二価の金属イオン
の濃度が高すぎると抗原抗体反応の阻害が起こりやすく
なることがあり、濃度が小さすぎるとプロゾーン現象に
対し抑制効果が小さくなることもある。
【０００９】本発明においてＣＲＰを測定する際には、
通常、公知の抗原抗体反応を利用したＣＲＰの測定を、
二価の金属イオン存在下に行なうこと以外は、測定操
作、反応時間、測定波長等の測定条件をそのまま、実施
してもよい。また、この場合、自動分析装置に適用する
ことができる。さらにまた、本発明の測定方法に用いる
測定試薬においては、抗原抗体反応を阻害することによ
り測定感度の低下をまねく等の問題を起こさない限り、
緩衝剤、安定化剤、防腐剤、反応促進剤、反応抑制剤等
の通常のＣＲＰ測定試薬に含むことができる成分を、そ
のまま用いることができる。
通常、公知の抗原抗体反応を利用したＣＲＰの測定を、
二価の金属イオン存在下に行なうこと以外は、測定操
作、反応時間、測定波長等の測定条件をそのまま、実施
してもよい。また、この場合、自動分析装置に適用する
ことができる。さらにまた、本発明の測定方法に用いる
測定試薬においては、抗原抗体反応を阻害することによ
り測定感度の低下をまねく等の問題を起こさない限り、
緩衝剤、安定化剤、防腐剤、反応促進剤、反応抑制剤等
の通常のＣＲＰ測定試薬に含むことができる成分を、そ
のまま用いることができる。
【００１０】本発明においては、ＣＲＰとＣＲＰ抗体と
を反応させて生成する抗原抗体複合体に由来する濁りを
測定してＣＲＰを測定するＣＲＰ測定法であれば、ラテ
ックス凝集法、ＴＩＡ法等のいずれの測定法も対象とな
るが、ラテックス凝集法の場合、特にプロゾーン現象が
問題となりやすい点から特に好適に用いられる。具体的
には、検体中のＣＲＰと、ラテックスに結合したＣＲＰ
抗体とを混合し特異的に抗原抗体反応をさせ、それに由
来する濁度を測定することにより、該ＣＲＰを測定する
方法において、二価の金属イオンを存在させて抗原抗体
反応をさせるとプロゾーン現象を効果的に抑制すること
ができる。
を反応させて生成する抗原抗体複合体に由来する濁りを
測定してＣＲＰを測定するＣＲＰ測定法であれば、ラテ
ックス凝集法、ＴＩＡ法等のいずれの測定法も対象とな
るが、ラテックス凝集法の場合、特にプロゾーン現象が
問題となりやすい点から特に好適に用いられる。具体的
には、検体中のＣＲＰと、ラテックスに結合したＣＲＰ
抗体とを混合し特異的に抗原抗体反応をさせ、それに由
来する濁度を測定することにより、該ＣＲＰを測定する
方法において、二価の金属イオンを存在させて抗原抗体
反応をさせるとプロゾーン現象を効果的に抑制すること
ができる。
【００１１】ここで、検体とは、血清、血漿、尿等の生
体試料を例示できるが、特にこれらに限定されない。ラ
テックスに結合したＣＲＰ抗体は、現在、ラテックス凝
集法によるＣＲＰ測定試薬に用いられているものであれ
ば特に限定されないが、例えば、抗ヒトＣＲＰ抗体を含
むリン酸緩衝液に、平均粒径０．０５μｍ〜０．１μｍ
のポリスチレンラテックスを添加して室温で撹拌した
後、所望によりウシアルブミンを加えて、次いで、得ら
れる混合物を遠心分離することにより、ラテックスに結
合したＣＲＰ抗体を製造することができる。ＣＲＰ抗体
としては、ヒトＣＲＰを動物に免疫して得られる抗血
清、免疫クロブリンＧ、免疫グロブリンＡ、免疫グロブ
リンＭ、それらの活性フラグメント、あるいは細胞融合
によって得られるＣＲＰモノクローナル抗体などが挙げ
られる。
体試料を例示できるが、特にこれらに限定されない。ラ
テックスに結合したＣＲＰ抗体は、現在、ラテックス凝
集法によるＣＲＰ測定試薬に用いられているものであれ
ば特に限定されないが、例えば、抗ヒトＣＲＰ抗体を含
むリン酸緩衝液に、平均粒径０．０５μｍ〜０．１μｍ
のポリスチレンラテックスを添加して室温で撹拌した
後、所望によりウシアルブミンを加えて、次いで、得ら
れる混合物を遠心分離することにより、ラテックスに結
合したＣＲＰ抗体を製造することができる。ＣＲＰ抗体
としては、ヒトＣＲＰを動物に免疫して得られる抗血
清、免疫クロブリンＧ、免疫グロブリンＡ、免疫グロブ
リンＭ、それらの活性フラグメント、あるいは細胞融合
によって得られるＣＲＰモノクローナル抗体などが挙げ
られる。
【００１２】本発明におけるＣＲＰの測定法において
は、検体中のＣＲＰ抗原とＣＲＰ抗体との抗原抗体反応
を行なう際、さらに、二価の金属イオン以外に、非特異
的反応抑制剤を存在させる手段等により、非特異的反応
を抑制させることがＣＲＰを正確に測定するために好ま
しい。ここで、非特異的反応とは、検体中のリウマチ因
子や加熱による非働化処理の結果生ずる熱変性蛋白質等
のＣＲＰ以外の成分が、ＣＲＰ測定用試薬中のＣＲＰ抗
体と非特異的に反応して、ＣＲＰ測定値の誤差を生じさ
せることをいう。本明細書では、非特異的反応を抑制す
るとは、通常、検体として例えば５００Ｕ／ｍｌのリウ
マチ因子（ＲＦ）を含むものを測定してもＣＲＰ測定値
への影響が０．５ｍｇ／ｄｌ以下の誤差であることをい
い、０．３ｍｇ／ｄｌ以下の誤差が好ましく、特に０．
１ｍｇ／ｄｌ以下の誤差がさらに好ましい。このような
非特異的反応を抑制するための非特異的反応抑制剤とし
ては、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、２−メルカプト
エタノール等のチオール化合物、γ−グロブリン若しく
はその変性物（変性ＩｇＧ）、Ｆｃ部位ブロック試薬
（抗Ｆｃ抗体のフラグメント）などが好適である。ここ
で、変性ＩｇＧとしては、γ−グロブリンが変性された
ものであれば限定されないが、尿素、塩酸グアニジン、
又は界面活性剤で変性させたγ−グロブリン、熱変性Ｉ
ｇＧを例示できる。そのうち、尿素変性ＩｇＧが好まし
く、これは、例えば、γ−グロブリンを含むＴｒｉｓ溶
液（ｐＨ７．５程度）に６当量程度の尿素を添加し、撹
拌することにより調製することができる。
は、検体中のＣＲＰ抗原とＣＲＰ抗体との抗原抗体反応
を行なう際、さらに、二価の金属イオン以外に、非特異
的反応抑制剤を存在させる手段等により、非特異的反応
を抑制させることがＣＲＰを正確に測定するために好ま
しい。ここで、非特異的反応とは、検体中のリウマチ因
子や加熱による非働化処理の結果生ずる熱変性蛋白質等
のＣＲＰ以外の成分が、ＣＲＰ測定用試薬中のＣＲＰ抗
体と非特異的に反応して、ＣＲＰ測定値の誤差を生じさ
せることをいう。本明細書では、非特異的反応を抑制す
るとは、通常、検体として例えば５００Ｕ／ｍｌのリウ
マチ因子（ＲＦ）を含むものを測定してもＣＲＰ測定値
への影響が０．５ｍｇ／ｄｌ以下の誤差であることをい
い、０．３ｍｇ／ｄｌ以下の誤差が好ましく、特に０．
１ｍｇ／ｄｌ以下の誤差がさらに好ましい。このような
非特異的反応を抑制するための非特異的反応抑制剤とし
ては、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、２−メルカプト
エタノール等のチオール化合物、γ−グロブリン若しく
はその変性物（変性ＩｇＧ）、Ｆｃ部位ブロック試薬
（抗Ｆｃ抗体のフラグメント）などが好適である。ここ
で、変性ＩｇＧとしては、γ−グロブリンが変性された
ものであれば限定されないが、尿素、塩酸グアニジン、
又は界面活性剤で変性させたγ−グロブリン、熱変性Ｉ
ｇＧを例示できる。そのうち、尿素変性ＩｇＧが好まし
く、これは、例えば、γ−グロブリンを含むＴｒｉｓ溶
液（ｐＨ７．５程度）に６当量程度の尿素を添加し、撹
拌することにより調製することができる。
【００１３】本発明において、非特異的反応抑制剤を存
在させてＣＲＰを測定するには、例えば、必須成分とし
て ｉ）非特異的反応抑制剤、 ｉｉ）０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオン、
及び ｉｉｉ）ラテックスに結合したＣＲＰ抗体を含む試薬を
用いることができる。実用的には、例えば、 ｉ）非特異的反応抑制剤と０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの
二価の金属イオンを含む第一試薬及び ｉｉ）ラテックスに結合したＣＲＰ抗体を含む第二試薬
を含むキットが特に好ましい。このキットを用いる場
合、本発明でＣＲＰの測定は、以下のように行なうこと
ができる。まず、ＣＲＰを含む検体と上記第一試薬とを
一定の割合で混合し、一定の温度条件（好ましくは２５
〜３７℃）で、それに上記第二試薬を添加して抗原抗体
反応をさせ、抗原抗体反応に由来する濁りの変化とし
て、３４０〜８００ｎｍのうちの一定波長における吸光
度変化を求める。その値から、あらかじめ、検量線測定
用試料を用いて作成した検量線からＣＲＰ値を算出す
る。
在させてＣＲＰを測定するには、例えば、必須成分とし
て ｉ）非特異的反応抑制剤、 ｉｉ）０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオン、
及び ｉｉｉ）ラテックスに結合したＣＲＰ抗体を含む試薬を
用いることができる。実用的には、例えば、 ｉ）非特異的反応抑制剤と０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの
二価の金属イオンを含む第一試薬及び ｉｉ）ラテックスに結合したＣＲＰ抗体を含む第二試薬
を含むキットが特に好ましい。このキットを用いる場
合、本発明でＣＲＰの測定は、以下のように行なうこと
ができる。まず、ＣＲＰを含む検体と上記第一試薬とを
一定の割合で混合し、一定の温度条件（好ましくは２５
〜３７℃）で、それに上記第二試薬を添加して抗原抗体
反応をさせ、抗原抗体反応に由来する濁りの変化とし
て、３４０〜８００ｎｍのうちの一定波長における吸光
度変化を求める。その値から、あらかじめ、検量線測定
用試料を用いて作成した検量線からＣＲＰ値を算出す
る。
【００１４】
【発明の効果】本発明によれば、ＣＲＰを測定する際、
ＣＲＰ測定用プロゾーン現象抑制剤として入手容易な二
価の金属イオンを用いることにより、吸光度変化量を全
体的に低下させることなくプロゾーン現象を抑制するこ
とができる。
ＣＲＰ測定用プロゾーン現象抑制剤として入手容易な二
価の金属イオンを用いることにより、吸光度変化量を全
体的に低下させることなくプロゾーン現象を抑制するこ
とができる。
【００１５】
【実施例】以下、本発明を実施例により更に詳細に説明
するが、本発明はこれら実施例によって何ら限定される
ものではない。 実施例１及び比較例１二価の金属イオンの添加によるプロゾーン現象の抑制 （１）測定用試料 １００ｍｇ／ｄｌのＣＲＰ値を有する血清を１０段階に
稀釈した血清を測定用試料（検体）とした。 （２）検量線作成用試料 ＣＲＰ０ｍｇ／ｄｌの試料と、ＣＲＰ１．１ｍｇ／ｄｌ
を含む血清（ニットーボー製）を検量線作成用試料とし
た。 （３）反応用試薬 二価の金属イオンとしてマグネシウムイオン（ＭｇＣｌ
2 ）、カルシウムイオン（ＣａＣｌ2 ）、バリウムイオ
ン（ＢａＣｌ2 ）、及びマンガンイオン（ＭｎＣｌ2 ）
を用いた場合、第一試薬（緩衝液）としては、１５０ｍ
ＭＮａＣｌ、１５ｍＭジチオスレイトール（非特異的反
応抑制剤）、所定量の上記二価の金属イオンを含む５０
ｍＭ２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラ
ジニル］エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）―ＮａＯＨ緩
衝液（ｐＨ７．５）を用いた。二価の金属イオンとして
ニッケルイオン（ＮｉＣｌ2 ）、コバルトイオン（Ｃｏ
ＳＯ4 ）を用いた場合、第一試薬として上記の第一試薬
から、ジチオスレイトールを除いたものを用いた。比較
例１として、上記それぞれの第一試薬において二価の金
属イオンを含まないものを第一試薬として用いた。第二
試薬（抗ＣＲＰ感作ラテックス懸濁液）は、ＣＲＰ抗体
として抗ヒトＣＲＰ（ヤギ，ニットーボー製）を感作し
たラテックスを０．２４％、および１５０ｍＭＮａＣｌ
を含む５０ｍＭＨＥＰＥＳ−ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ７．
５）を用いた。
するが、本発明はこれら実施例によって何ら限定される
ものではない。 実施例１及び比較例１二価の金属イオンの添加によるプロゾーン現象の抑制 （１）測定用試料 １００ｍｇ／ｄｌのＣＲＰ値を有する血清を１０段階に
稀釈した血清を測定用試料（検体）とした。 （２）検量線作成用試料 ＣＲＰ０ｍｇ／ｄｌの試料と、ＣＲＰ１．１ｍｇ／ｄｌ
を含む血清（ニットーボー製）を検量線作成用試料とし
た。 （３）反応用試薬 二価の金属イオンとしてマグネシウムイオン（ＭｇＣｌ
2 ）、カルシウムイオン（ＣａＣｌ2 ）、バリウムイオ
ン（ＢａＣｌ2 ）、及びマンガンイオン（ＭｎＣｌ2 ）
を用いた場合、第一試薬（緩衝液）としては、１５０ｍ
ＭＮａＣｌ、１５ｍＭジチオスレイトール（非特異的反
応抑制剤）、所定量の上記二価の金属イオンを含む５０
ｍＭ２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラ
ジニル］エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）―ＮａＯＨ緩
衝液（ｐＨ７．５）を用いた。二価の金属イオンとして
ニッケルイオン（ＮｉＣｌ2 ）、コバルトイオン（Ｃｏ
ＳＯ4 ）を用いた場合、第一試薬として上記の第一試薬
から、ジチオスレイトールを除いたものを用いた。比較
例１として、上記それぞれの第一試薬において二価の金
属イオンを含まないものを第一試薬として用いた。第二
試薬（抗ＣＲＰ感作ラテックス懸濁液）は、ＣＲＰ抗体
として抗ヒトＣＲＰ（ヤギ，ニットーボー製）を感作し
たラテックスを０．２４％、および１５０ｍＭＮａＣｌ
を含む５０ｍＭＨＥＰＥＳ−ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ７．
５）を用いた。
【００１６】（４）ＣＲＰ値の測定
日立７１５０形自動分析装置を用いて以下のように行っ
た。所定の測定用試料３μＬに第一試薬１５０μＬを加
え、３７℃で５分間加温した後、第二試薬１５０μＬを
加え、次いで、その５分後、７００ｎｍにおける吸光度
変化を求め、各試料の吸光度変化を求めてプロゾーン現
象の抑制効果を調べた。なお、吸光度変化は、第二試薬
添加後４．５分経過後の系の吸光度と０．５分経過後の
系の吸光度との差によって求めた。
た。所定の測定用試料３μＬに第一試薬１５０μＬを加
え、３７℃で５分間加温した後、第二試薬１５０μＬを
加え、次いで、その５分後、７００ｎｍにおける吸光度
変化を求め、各試料の吸光度変化を求めてプロゾーン現
象の抑制効果を調べた。なお、吸光度変化は、第二試薬
添加後４．５分経過後の系の吸光度と０．５分経過後の
系の吸光度との差によって求めた。
【００１７】（５）結果
図１には、種々の濃度のマグネシウムイオン（ＭｇＣｌ
2 ）存在下に上記測定操作を行ったとき求めた吸光度変
化（×１００００）のデータを示した。図１にはおい
て、ＭＧ−１．５、ＭＧ−３、ＭＧ−６、ＭＧ−１２．
５、ＭＧ−２５及びＭＧ−５０は、それぞれマグネシウ
ムイオンの濃度が１．５ｍＭ、３ｍＭ、６ｍＭ、１２．
５ｍＭ、２５ｍＭ及び５０ｍＭの場合の測定結果を示
す。同様に、図２にはカルシウムイオン（ＣａＣｌ2 ）
（ＣＡ−０．３、ＣＡ−０．７、ＣＡ−１．５及びＣＡ
−３は、それぞれカルシウムイオン濃度が０．３ｍＭ、
０．７ｍＭ、１．５ｍＭ及び３ｍＭの場合の測定結果を
示す）、図３にはバリウムイオン（ＢａＣｌ2 ）（ＢＡ
−０．３、ＢＡ−０．７、ＢＡ−１．５、ＢＡ−３及び
ＢＡ−６は、それぞれバリウムイオン濃度が０．３ｍ
Ｍ、０．７ｍＭ、１．５ｍＭ、３ｍＭ及び６ｍＭの場合
の測定結果を示す）、図４にはマンガンイオン（ＭｎＣ
ｌ2 ）（ＭＮ−０．３、ＭＮ−０．７、ＭＮ−１．５及
びＭＮ−３は、それぞれマンガンイオン濃度が、０．３
ｍＭ、０．７ｍＭ、１．５ｍＭ及び３ｍＭの場合の測定
結果を示す）、図５にはニッケルイオン（ＮｉＣｌ2 ）
（ＮＩ−６、ＮＩ−３、ＮＩ−１．５、ＮＩ−０．７及
びＮＩ−０．３は、それぞれニッケルイオン濃度が６ｍ
Ｍ、３ｍＭ、１．５ｍＭ、０．７ｍＭ及び０．３ｍＭの
場合の測定結果を示す）、図６にはコバルトイオン（Ｃ
ｏＳＯ4 ）（ＣＯ−３、ＣＯ−１．５、ＣＯ−０．７及
びＣＯ−０．３は、それぞれコバルトイオン濃度が３ｍ
Ｍ、１．５ｍＭ、０．７ｍＭ及び０．３ｍＭの場合の測
定結果を示す）での吸光度変化を示した。なお、図１〜
６において、ＢＡＳＥは、二価の金属イオンを含まない
場合（比較例１）の測定結果を示す。
2 ）存在下に上記測定操作を行ったとき求めた吸光度変
化（×１００００）のデータを示した。図１にはおい
て、ＭＧ−１．５、ＭＧ−３、ＭＧ−６、ＭＧ−１２．
５、ＭＧ−２５及びＭＧ−５０は、それぞれマグネシウ
ムイオンの濃度が１．５ｍＭ、３ｍＭ、６ｍＭ、１２．
５ｍＭ、２５ｍＭ及び５０ｍＭの場合の測定結果を示
す。同様に、図２にはカルシウムイオン（ＣａＣｌ2 ）
（ＣＡ−０．３、ＣＡ−０．７、ＣＡ−１．５及びＣＡ
−３は、それぞれカルシウムイオン濃度が０．３ｍＭ、
０．７ｍＭ、１．５ｍＭ及び３ｍＭの場合の測定結果を
示す）、図３にはバリウムイオン（ＢａＣｌ2 ）（ＢＡ
−０．３、ＢＡ−０．７、ＢＡ−１．５、ＢＡ−３及び
ＢＡ−６は、それぞれバリウムイオン濃度が０．３ｍ
Ｍ、０．７ｍＭ、１．５ｍＭ、３ｍＭ及び６ｍＭの場合
の測定結果を示す）、図４にはマンガンイオン（ＭｎＣ
ｌ2 ）（ＭＮ−０．３、ＭＮ−０．７、ＭＮ−１．５及
びＭＮ−３は、それぞれマンガンイオン濃度が、０．３
ｍＭ、０．７ｍＭ、１．５ｍＭ及び３ｍＭの場合の測定
結果を示す）、図５にはニッケルイオン（ＮｉＣｌ2 ）
（ＮＩ−６、ＮＩ−３、ＮＩ−１．５、ＮＩ−０．７及
びＮＩ−０．３は、それぞれニッケルイオン濃度が６ｍ
Ｍ、３ｍＭ、１．５ｍＭ、０．７ｍＭ及び０．３ｍＭの
場合の測定結果を示す）、図６にはコバルトイオン（Ｃ
ｏＳＯ4 ）（ＣＯ−３、ＣＯ−１．５、ＣＯ−０．７及
びＣＯ−０．３は、それぞれコバルトイオン濃度が３ｍ
Ｍ、１．５ｍＭ、０．７ｍＭ及び０．３ｍＭの場合の測
定結果を示す）での吸光度変化を示した。なお、図１〜
６において、ＢＡＳＥは、二価の金属イオンを含まない
場合（比較例１）の測定結果を示す。
【００１８】図１〜６から明らかなように、いずれの二
価の金属イオンの存在下でも、プロゾーン現象の抑制効
果が認められた。また、検体のＣＲＰ濃度の上限が１０
０ｍｇ／ｄｌであるとすると、二価の金属イオンを含ま
ないとき（比較例１）には、プロゾーン現象のため２０
ｍｇ／ｄｌ以下のみが信頼できる測定値であるが、二価
の金属イオンを入れた場合には、信頼できる測定値が少
なくとも３０ｍｇ／ｄｌ以下と大幅に広がっていること
が判明した。さらにまた、マグネシウムイオンが６ｍＭ
以上、カルシウムイオンが０．７ｍＭ以上、バリウムイ
オンが１．５ｍＭ以上、マンガンイオンが０．７ｍＭ以
上、ニッケルイオンが０．７ｍＭ以上、コバルトイオン
が０．７ｍＭ以上の場合では、ＣＲＰ１００ｍｇ／ｄｌ
の検体においても検量域（３０ｍｇ／ｄｌ）以上の測定
値を与え、過小測定値を与えないことが判明した。
価の金属イオンの存在下でも、プロゾーン現象の抑制効
果が認められた。また、検体のＣＲＰ濃度の上限が１０
０ｍｇ／ｄｌであるとすると、二価の金属イオンを含ま
ないとき（比較例１）には、プロゾーン現象のため２０
ｍｇ／ｄｌ以下のみが信頼できる測定値であるが、二価
の金属イオンを入れた場合には、信頼できる測定値が少
なくとも３０ｍｇ／ｄｌ以下と大幅に広がっていること
が判明した。さらにまた、マグネシウムイオンが６ｍＭ
以上、カルシウムイオンが０．７ｍＭ以上、バリウムイ
オンが１．５ｍＭ以上、マンガンイオンが０．７ｍＭ以
上、ニッケルイオンが０．７ｍＭ以上、コバルトイオン
が０．７ｍＭ以上の場合では、ＣＲＰ１００ｍｇ／ｄｌ
の検体においても検量域（３０ｍｇ／ｄｌ）以上の測定
値を与え、過小測定値を与えないことが判明した。
【００１９】実施例２及び比較例２及び３非特異的反応の検討
（１）測定用試料
（１．１）ＲＦの影響をみるための検体
ヒト血清（ＲＦ２０Ｕ／ｍｌ未満，ＣＲＰ約１ｍｇ／ｄ
ｌ）とＲＦ（ニットーボー製）を用い、測定用試料とし
て、ＲＦ２０Ｕ／ｍｌ未満とＣＲＰ約１ｍｇとを含む検
体、ＲＦ約５００Ｕ／ｍｌとＣＲＰ約１ｍｇとを含む検
体の２種類の検体を調製した。 （１．２）非働化処理の影響をみるための検体 非働化未処理検体としてヒト血清（ＲＦ２０Ｕ／ｍｌ未
満，ＣＲＰ約１ｍｇ／ｄｌ）を用い、また、非働化処理
検体として、非働化未処理検体を５６℃で３０分間加熱
処理した検体（非働化処理検体）を測定試料として用い
た。 （２）検量線作成用試料 実施例１に用いた検量線作成用試料をそのまま用いた。
ｌ）とＲＦ（ニットーボー製）を用い、測定用試料とし
て、ＲＦ２０Ｕ／ｍｌ未満とＣＲＰ約１ｍｇとを含む検
体、ＲＦ約５００Ｕ／ｍｌとＣＲＰ約１ｍｇとを含む検
体の２種類の検体を調製した。 （１．２）非働化処理の影響をみるための検体 非働化未処理検体としてヒト血清（ＲＦ２０Ｕ／ｍｌ未
満，ＣＲＰ約１ｍｇ／ｄｌ）を用い、また、非働化処理
検体として、非働化未処理検体を５６℃で３０分間加熱
処理した検体（非働化処理検体）を測定試料として用い
た。 （２）検量線作成用試料 実施例１に用いた検量線作成用試料をそのまま用いた。
【００２０】（３）反応用試薬
非特異的反応抑制剤及び二価の金属イオンのいずれをも
含まない試薬（比較例２に用いた試薬）の場合、第一試
薬（緩衝液）として、１５０ｍＭＮａＣｌを含む５０ｍ
Ｍ２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジ
ニル］エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）―ＮａＯＨ緩衝
液（ｐＨ７．５）を用い、また、第二試薬（抗ＣＲＰ感
作ラテックス懸濁液）として、実施例１に用いた第二試
薬を、そのまま用いた。非特異的反応抑制剤を含みかつ
二価の金属イオンを含まない試薬（比較例３に用いた試
薬）の場合、第一試薬（緩衝液）として、比較例１に用
いた第一試薬に加えさらに１５ｍＭジチオスレイトール
を含む試薬を用いた。また、第二試薬は、実施例１に用
いた第二試薬をそのまま用いた。非特異的反応抑制剤と
二価金属イオンを含む試薬（実施例２に用いた試薬）の
場合、比較例２に用いた第一試薬の成分に加えさらに１
５ｍＭジチオスレイトールと５０ｍＭ塩化マグネシウム
を含む試薬を用いた。
含まない試薬（比較例２に用いた試薬）の場合、第一試
薬（緩衝液）として、１５０ｍＭＮａＣｌを含む５０ｍ
Ｍ２−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジ
ニル］エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）―ＮａＯＨ緩衝
液（ｐＨ７．５）を用い、また、第二試薬（抗ＣＲＰ感
作ラテックス懸濁液）として、実施例１に用いた第二試
薬を、そのまま用いた。非特異的反応抑制剤を含みかつ
二価の金属イオンを含まない試薬（比較例３に用いた試
薬）の場合、第一試薬（緩衝液）として、比較例１に用
いた第一試薬に加えさらに１５ｍＭジチオスレイトール
を含む試薬を用いた。また、第二試薬は、実施例１に用
いた第二試薬をそのまま用いた。非特異的反応抑制剤と
二価金属イオンを含む試薬（実施例２に用いた試薬）の
場合、比較例２に用いた第一試薬の成分に加えさらに１
５ｍＭジチオスレイトールと５０ｍＭ塩化マグネシウム
を含む試薬を用いた。
【００２１】（４）ＣＲＰ値を求めるための測定操作
実施例１の測定操作と同様に行い吸光度変化を求め、そ
の値からＣＲＰ値を算出した。 （５）結果 ＲＦの影響をみるための検体を、非特異的反応抑制剤及
び二価の金属イオンのいずれをも含まない試薬、非特異
的反応抑制剤を含む試薬、非特異的反応抑制剤とマグネ
シウムイオンを含む試薬を用いて上記測定操作（４）を
行なって得られたＣＲＰ測定値を表１に示す。
の値からＣＲＰ値を算出した。 （５）結果 ＲＦの影響をみるための検体を、非特異的反応抑制剤及
び二価の金属イオンのいずれをも含まない試薬、非特異
的反応抑制剤を含む試薬、非特異的反応抑制剤とマグネ
シウムイオンを含む試薬を用いて上記測定操作（４）を
行なって得られたＣＲＰ測定値を表１に示す。
【００２２】
【表１】
【００２３】表１から明らかなように、試薬として、非
特異的反応抑制剤を含む試薬、又は非特異的反応抑制剤
及び二価の金属イオンとを含む試薬を用いた場合には、
検体にＲＦを大量に含んでいてもほとんどＣＲＰ測定値
に影響がないことが判明した。次に、非働化処理の影響
をみるため、非働化未処理検体及び非働化処理検体を、
非特異的反応抑制剤を含む試薬、非特異的反応抑制剤と
マグネシウムイオンを含む試薬を用いて上記測定操作
（４）を行なって得られたＣＲＰ測定値を表２に示す。
特異的反応抑制剤を含む試薬、又は非特異的反応抑制剤
及び二価の金属イオンとを含む試薬を用いた場合には、
検体にＲＦを大量に含んでいてもほとんどＣＲＰ測定値
に影響がないことが判明した。次に、非働化処理の影響
をみるため、非働化未処理検体及び非働化処理検体を、
非特異的反応抑制剤を含む試薬、非特異的反応抑制剤と
マグネシウムイオンを含む試薬を用いて上記測定操作
（４）を行なって得られたＣＲＰ測定値を表２に示す。
【００２４】
【表２】
【００２５】表２から明らかなように、試薬として、非
特異的反応抑制剤を含む試薬、又は非特異的反応抑制剤
及び二価の金属イオンとを含む試薬を用いた場合、検体
を非働化処理してもほとんどＣＲＰ測定値に影響がなか
った。
特異的反応抑制剤を含む試薬、又は非特異的反応抑制剤
及び二価の金属イオンとを含む試薬を用いた場合、検体
を非働化処理してもほとんどＣＲＰ測定値に影響がなか
った。
【図１】各種濃度のマグネシウムイオン存在下にＣＲＰ
を測定した場合の測定結果を示すグラフである。
を測定した場合の測定結果を示すグラフである。
【図２】各種濃度のカルシウムイオン存在下にＣＲＰを
測定した場合の測定結果を示すグラフである。
測定した場合の測定結果を示すグラフである。
【図３】各種濃度のバリウムイオン存在下にＣＲＰを測
定した場合の測定結果を示すグラフである。
定した場合の測定結果を示すグラフである。
【図４】各種濃度のマンガンイオン存在下にＣＲＰを測
定した場合の測定結果を示すグラフである。
定した場合の測定結果を示すグラフである。
【図５】各種濃度のニッケルイオン存在下にＣＲＰを測
定した場合の測定結果を示すグラフである。
定した場合の測定結果を示すグラフである。
【図６】各種濃度のコバルトイオン存在下にＣＲＰを測
定した場合の測定結果を示すグラフである。
定した場合の測定結果を示すグラフである。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ
Ｇ０１Ｎ 33/543 ５８７ Ｇ０１Ｎ 33/543 ５８７
33/545 33/545 Ｂ
(56)参考文献 特開 平６−213890（ＪＰ，Ａ)
特開 平８−86783（ＪＰ，Ａ)
特開 昭60−57255（ＪＰ，Ａ)
特開 昭56−2555（ＪＰ，Ａ)
特開 平２−228560（ＪＰ，Ａ)
特開 昭64−69954（ＪＰ，Ａ)
特開 昭62−218866（ＪＰ，Ａ)
特開 昭62−272157（ＪＰ，Ａ)
特開 平９−304389（ＪＰ，Ａ)
特開 平９−318632（ＪＰ，Ａ)
特開 平10−239317（ＪＰ，Ａ)
特開 昭59−46856（ＪＰ，Ａ)
特開 平10−253629（ＪＰ，Ａ)
特開 平11−344494（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
G01N 33/53
G01N 33/531
G01N 33/543 581
G01N 33/543 583
G01N 33/543 587
G01N 33/545
Claims (9)
- 【請求項１】 二価の金属イオンを含むＣＲＰ測定用プ
ロゾーン現象抑制剤。 - 【請求項２】 プロゾーン現象を有するＣＲＰ測定系に
おいて、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオン
を存在させてＣＲＰを測定することを特徴とするＣＲＰ
の測定方法。 - 【請求項３】 ＣＲＰ測定系がラテックス凝集免疫測定
法による請求項２の測定方法。 - 【請求項４】 検体中のＣＲＰと、ラテックスに結合し
たＣＲＰ抗体とを混合して特異的に抗原抗体反応をさ
せ、それに由来する濁度を測定することにより、該ＣＲ
Ｐを測定する方法において、０．５ｍＭ〜１０００ｍＭ
の二価の金属イオンを存在させて該抗原抗体反応をさ
せ、それに由来する濁度を測定する際のプロゾーン現象
を二価の金属イオンにより抑制することを特徴とするＣ
ＲＰの測定方法。 - 【請求項５】 ０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属
イオン、及び二価の金属イオン以外の非特異的反応抑制
剤との存在下に、検体中のＣＲＰとＣＲＰ抗体とを混合
して抗原抗体反応をさせ、それに由来する濁度を、二価
の金属イオンによりプロゾーン現象を抑制して、測定し
てＣＲＰを測定することを特徴とするＣＲＰの測定方
法。 - 【請求項６】 ＣＲＰ抗体が、ラテックスに結合したＣ
ＲＰ抗体である請求項５のＣＲＰの測定方法。 - 【請求項７】 非特異的反応抑制剤がチオール化合物ま
たは変性ＩｇＧである請求項５又は請求項６のＣＲＰの
測定方法。 - 【請求項８】 二価の金属イオンが、マグネシウムイオ
ン、カルシウムイオン、バリウムイオン、マンガンイオ
ン、ニッケルイオン及びコバルトイオンのいずれかから
選ばれる請求項２〜７のいずれかの方法。 - 【請求項９】 必須成分として、 i) 非特異的反応抑制剤、 ii) ０．５ｍＭ〜１０００ｍＭの二価の金属イオン、
及び iii) ラテックスに結合したＣＲＰ抗体を含む、プロゾ
ーン現象を抑制してＣＲＰを測定するためのＣＲＰ測定
試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34003198A JP3501349B2 (ja) | 1998-11-30 | 1998-11-30 | Ｃｒｐ測定用プロゾーン現象抑制剤、ｃｒｐの測定方法、及びｃｒｐ測定試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34003198A JP3501349B2 (ja) | 1998-11-30 | 1998-11-30 | Ｃｒｐ測定用プロゾーン現象抑制剤、ｃｒｐの測定方法、及びｃｒｐ測定試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000162212A JP2000162212A (ja) | 2000-06-16 |
| JP3501349B2 true JP3501349B2 (ja) | 2004-03-02 |
Family
ID=18333086
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34003198A Expired - Lifetime JP3501349B2 (ja) | 1998-11-30 | 1998-11-30 | Ｃｒｐ測定用プロゾーン現象抑制剤、ｃｒｐの測定方法、及びｃｒｐ測定試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3501349B2 (ja) |
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|---|---|---|---|---|
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| WO2003085402A1 (fr) * | 2002-04-05 | 2003-10-16 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Piece d'essai pour chromatographie et son procede de production |
| ATE349703T1 (de) * | 2002-08-09 | 2007-01-15 | Dade Behring Marburg Gmbh | Kombination von crp und d-dimer zur diagnose von tiefer venenthrombose |
| JP4877578B2 (ja) * | 2006-02-10 | 2012-02-15 | 日東紡績株式会社 | 抗原の測定法およびそれに用いるキット |
| JP4892500B2 (ja) * | 2008-02-12 | 2012-03-07 | 富士フイルム株式会社 | 非特異吸着抑制剤を用いたイムノクロマトグラフ方法 |
| JP4657328B2 (ja) * | 2008-07-18 | 2011-03-23 | 栄研化学株式会社 | 免疫反応干渉物質の除去方法 |
| WO2010058860A1 (ja) * | 2008-11-18 | 2010-05-27 | 株式会社シノテスト | 試料中のｃ反応性蛋白質の測定方法及び測定試薬 |
| WO2017109086A1 (en) * | 2015-12-22 | 2017-06-29 | Biomar Group A/S | Methods for determining pathological tissue damage in higher vertebrates |
| WO2021039492A1 (ja) * | 2019-08-30 | 2021-03-04 | コニカミノルタ株式会社 | 検体希釈液、標識化抗体分散液、サンドイッチ法 |
-
1998
- 1998-11-30 JP JP34003198A patent/JP3501349B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2000162212A (ja) | 2000-06-16 |
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