JP2008249738A - 免疫反応干渉物質の除去方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】生体試料中に含まれるリウマチ因子および/または異好性抗体の影響を除去することを特徴とする免疫反応干渉物質の除去方法。
【選択図】 無し
Description
しかしながら、この免疫測定法では、抗原を測定する際にしか利用できず、しかも酵素反応や精製等の原料調製のための煩雑な工程が必要となり、コストアップや製造ロット間差につながるという問題があった。
(1)遷移金属の存在下で、生体試料中に含まれるリウマチ因子および/または異好性抗体の影響を除去することを特徴とする免疫反応干渉物質の除去方法。
(2)遷移金属の濃度が0.1〜100mMの範囲である(1)記載の免疫反応干渉物質の除去方法。
(3)遷移金属が銅、ニッケル、およびコバルトから成る群から選択される少なくとも1種、またはそれらの塩類である(1)または(2)記載の免疫反応干渉物質の除去方法。
(4)遷移金属が酢酸ニッケル(II)である(3)記載の免疫反応物質の除去方法。
本発明に使用する遷移金属は、公知のものの中から適宜選択して使用することができる。その具体例としては、銅、ニッケル、およびコバルトから成る群から選択される少なくとも1種、またはそれらの塩類が挙げられる。中でも酢酸ニッケルが最も好ましい。
4716IU/mLのリウマチ因子を含むリウマチ因子陽性ヒト血清検体を生理食塩水で64倍まで倍々希釈した試料3μLに、それぞれ0、4、8、12、16、20mMの酢酸ニッケル(II)を含む50mMのHEPES緩衝液(pH7.4)150μLを反応セル内に加えて混合した。
混合後、5分後に抗ヒトCRP抗体(動物名:ヤギ)を感作したラテックス粒子を含有するラテックス液150μLを混合物に加え、37℃で反応させ、0.5〜2分後にかけて全自動分析装置日立7170(日立製作所製)を用いて波長570nmで吸光度を測定し、各測定点の間の吸光度変化量を求めた。
CRPの濃度を定量するため、CRP既知濃度の標準物質を測定して得られた検量線を基にして検体中のCRP濃度を算出した。その結果を図1に示す。
リウマチ因子陰性検体を用いた以外は、実施例と全く同様にしてCRPの濃度を算出した。その結果を図2に示す。
図2に示すように、酢酸ニッケル(II)の免疫反応に及ぼす影響は殆どないことが判る。
従って、図1および図2を勘案すると12、16、20mMの酢酸ニッケル(II)を添加した場合には、リウマチ因子に起因した測定誤差が著しく改善し、免疫学的測定法における干渉作用を十分に回避できたことが理解される。
これに対し、4、8mMの酢酸ニッケル(II)を添加した場合には、干渉作用の抑制効果は認められるものの、未だ不十分であり、さらに酢酸ニッケル(II)を含まない場合には、干渉作用が生じていることが判る。
Claims (4)
- 遷移金属の存在下で、生体試料中に含まれるリウマチ因子および/または異好性抗体の影響を除去することを特徴とする免疫反応干渉物質の除去方法。
- 遷移金属の濃度が0.1〜100mMの範囲である請求項1記載の免疫反応干渉物質の除去方法。
- 遷移金属が銅、ニッケル、およびコバルトから成る群から選択される少なくとも1種、またはそれらの塩類である請求項1または2記載の免疫反応干渉物質の除去方法。
- 遷移金属が酢酸ニッケル(II)である請求項3記載の免疫反応物質の除去方法。
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