JP3493706B2 - クロマトグラフィー用吸着担体 - Google Patents
クロマトグラフィー用吸着担体Info
- Publication number
- JP3493706B2 JP3493706B2 JP01865894A JP1865894A JP3493706B2 JP 3493706 B2 JP3493706 B2 JP 3493706B2 JP 01865894 A JP01865894 A JP 01865894A JP 1865894 A JP1865894 A JP 1865894A JP 3493706 B2 JP3493706 B2 JP 3493706B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- adsorption carrier
- cyclodextrin
- cooh
- support
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規なクロマトグラフ
ィー用吸着担体に関し、更に詳しくは不斉識別能を有す
るクロマトグラフィー用吸着担体に関する。
ィー用吸着担体に関し、更に詳しくは不斉識別能を有す
るクロマトグラフィー用吸着担体に関する。
【０００２】
【従来の技術】シクロデキストリン（以下、「ＣＤ」と
いう。）はＤ−グルコピラノシドがα−１，４−グルコ
シド結合してなる円筒状の環状化合物であり、環状化合
物の円筒の外側は水酸基が多く親水性を有するが、円筒
の内側は疎水性を有する。このＣＤは円筒の内側が疎水
性のため、フェニル基やナフチル基のような疎水性基を
有する様々な有機化合物が包接されるホスト化合物とし
て知られている。また、ＣＤはＤ−グルコピラノシド１
分子当たり５個の光学活性な炭素を有することから、不
斉識別能を有する化合物としても知られている。
いう。）はＤ−グルコピラノシドがα−１，４−グルコ
シド結合してなる円筒状の環状化合物であり、環状化合
物の円筒の外側は水酸基が多く親水性を有するが、円筒
の内側は疎水性を有する。このＣＤは円筒の内側が疎水
性のため、フェニル基やナフチル基のような疎水性基を
有する様々な有機化合物が包接されるホスト化合物とし
て知られている。また、ＣＤはＤ−グルコピラノシド１
分子当たり５個の光学活性な炭素を有することから、不
斉識別能を有する化合物としても知られている。
【０００３】近年、光学活性化合物の分離精製の重要性
が増し、ＣＤが有する不斉識別能をこれに利用しようと
する傾向が強まってきた。例えば、米国特許４，５３
９，３９９号公報によればクロマトグラフィー用吸着担
体として、エポキシ基、またはビニル基などを有するシ
リカゲルにＣＤを固定化させてなる吸着担体を使用し
て、光学活性化合物を分離精製する方法が知られてい
る。また、特開平２−２２８５５８号公報には、カルボ
ニルイミダゾール基を有する合成高分子等にＣＤを固定
化させてなる吸着担体を使用した方法、特開平４−２３
０８５２号公報には、アミノ基を有するシリカゲルにク
ロロ炭酸エステルで活性化したＣＤを固定化させてなる
吸着担体を使用した方法が例示されている。
が増し、ＣＤが有する不斉識別能をこれに利用しようと
する傾向が強まってきた。例えば、米国特許４，５３
９，３９９号公報によればクロマトグラフィー用吸着担
体として、エポキシ基、またはビニル基などを有するシ
リカゲルにＣＤを固定化させてなる吸着担体を使用し
て、光学活性化合物を分離精製する方法が知られてい
る。また、特開平２−２２８５５８号公報には、カルボ
ニルイミダゾール基を有する合成高分子等にＣＤを固定
化させてなる吸着担体を使用した方法、特開平４−２３
０８５２号公報には、アミノ基を有するシリカゲルにク
ロロ炭酸エステルで活性化したＣＤを固定化させてなる
吸着担体を使用した方法が例示されている。
【０００４】しかし、これらの方法では、ＣＤの固定化
量が低いため分離能が不十分で、しかも支持体にシリカ
ゲルを用いていたり、ＣＤと支持体とがカーボネート結
合やカーバメート結合で固定化されていたりするため、
アルカリ性条件下では使用できず、分離条件や溶出・洗
浄の条件に大きな制約が加わるという問題点があった。
これらの問題点を解決すべく、特開平４−１０６１０１
号公報や特開平４−２５５０３号公報は、ＣＤあるいは
その誘導体を二官能性の架橋剤と反応させたり、ＣＤに
ビニル基やアクリル基などを導入してモノマーとし、そ
れを重合させたりしてＣＤの固定化量の高い吸着担体を
得ている。しかし、それらの方法で得られた吸着担体
は、機械的強度が低いため流動性が悪く耐久性に乏し
い、製造が煩雑で実用的ではない等の問題点を有するほ
か、重合を行うことによりＣＤの不斉識別能が低下する
ため、クロマトグラフィー用吸着担体として利用できな
かった。
量が低いため分離能が不十分で、しかも支持体にシリカ
ゲルを用いていたり、ＣＤと支持体とがカーボネート結
合やカーバメート結合で固定化されていたりするため、
アルカリ性条件下では使用できず、分離条件や溶出・洗
浄の条件に大きな制約が加わるという問題点があった。
これらの問題点を解決すべく、特開平４−１０６１０１
号公報や特開平４−２５５０３号公報は、ＣＤあるいは
その誘導体を二官能性の架橋剤と反応させたり、ＣＤに
ビニル基やアクリル基などを導入してモノマーとし、そ
れを重合させたりしてＣＤの固定化量の高い吸着担体を
得ている。しかし、それらの方法で得られた吸着担体
は、機械的強度が低いため流動性が悪く耐久性に乏し
い、製造が煩雑で実用的ではない等の問題点を有するほ
か、重合を行うことによりＣＤの不斉識別能が低下する
ため、クロマトグラフィー用吸着担体として利用できな
かった。
【０００５】一方、ＣＤの持つ不斉識別能を更に向上さ
せることを目的として、特開昭６４−５３１５２号公報
には、ＣＤにアミノ酸を導入した化学修飾ＣＤを支持体
に固定化させてなる吸着担体を使用した方法が例示され
ている。しかし、この方法では、固定化量が低いことや
不斉識別能が大きく向上していないことなどのため分離
能が不十分で、しかもＣＤ修飾体を得るのが煩雑なため
実用的ではない。また、アナリティカル・ケミストリィ
（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．）、１９９０、［６２］、Ｐ．
１６１０にはＣＤの水酸基が、−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−Ｐ
ｈ、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ3 などの構造式で示されるものに
置換された化学修飾ＣＤがシリカゲルに固定化された吸
着担体を使用した方法が例示されている。しかし、この
方法は、吸着担体を得るのは前者に比べ容易ではある
が、分離能は前者と同様な理由から不十分で、しかも、
支持体にシリカゲルを用いているためアルカリ性条件下
では使用できないという問題点は残されたままである。
せることを目的として、特開昭６４−５３１５２号公報
には、ＣＤにアミノ酸を導入した化学修飾ＣＤを支持体
に固定化させてなる吸着担体を使用した方法が例示され
ている。しかし、この方法では、固定化量が低いことや
不斉識別能が大きく向上していないことなどのため分離
能が不十分で、しかもＣＤ修飾体を得るのが煩雑なため
実用的ではない。また、アナリティカル・ケミストリィ
（Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．）、１９９０、［６２］、Ｐ．
１６１０にはＣＤの水酸基が、−Ｏ−ＣＯ−ＮＨ−Ｐ
ｈ、−Ｏ−ＣＯ−ＣＨ3 などの構造式で示されるものに
置換された化学修飾ＣＤがシリカゲルに固定化された吸
着担体を使用した方法が例示されている。しかし、この
方法は、吸着担体を得るのは前者に比べ容易ではある
が、分離能は前者と同様な理由から不十分で、しかも、
支持体にシリカゲルを用いているためアルカリ性条件下
では使用できないという問題点は残されたままである。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、不斉
識別能に優れ、かつ吸着担体の製造が簡便で再現性、耐
久性に優れたクロマトグラフィー用吸着担体を提供する
ことにある。
識別能に優れ、かつ吸着担体の製造が簡便で再現性、耐
久性に優れたクロマトグラフィー用吸着担体を提供する
ことにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明は、上記目的を達
成するためになされたものであって、ＣＤの水酸基の酸
素に、カルボキシル基を有する炭化水素基を直接または
カルボニル基を介して結合したＣＤ誘導体（以下、「カ
ルボキシル基を有するＣＤ誘導体」と略記する。）を、
水に不溶性の支持体に固定化させてなることを特徴とす
るクロマトグラフィー用吸着担体に関する。以下、本発
明のクロマトグラフィー用吸着担体について詳しく説明
する。
成するためになされたものであって、ＣＤの水酸基の酸
素に、カルボキシル基を有する炭化水素基を直接または
カルボニル基を介して結合したＣＤ誘導体（以下、「カ
ルボキシル基を有するＣＤ誘導体」と略記する。）を、
水に不溶性の支持体に固定化させてなることを特徴とす
るクロマトグラフィー用吸着担体に関する。以下、本発
明のクロマトグラフィー用吸着担体について詳しく説明
する。
【０００８】本発明において使用されるＣＤとしては、
例えばα−シクロデキストリン、β−シクロデキストリ
ン、γ−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリ
ン、またはそれらα−、β−、γ−、δ−シクロデキス
トリンのヒドロキシアルキル化体、グリコシル化体など
のように水酸基を有する置換基で修飾されたものの他、
メチル化シクロデキストリン、アシル化シクロデキスト
リンであっても水酸基を１個以上有しているＣＤであれ
ば良く、またこれらの混合物やこれらの重合体であって
も良い。これらのＣＤは、分離対象とする光学異性体の
種類によって不斉識別能が異なるため、適宜選択して用
いるのが好ましく、例えばイブプロフェンなどフェニル
プロピオン酸系の抗炎症薬の分離にはβ−シクロデキス
トリン、フェニルアラニンなどの芳香族アミノ酸の分離
にはα−シクロデキストリンを用いることが好ましい。
例えばα−シクロデキストリン、β−シクロデキストリ
ン、γ−シクロデキストリン、δ−シクロデキストリ
ン、またはそれらα−、β−、γ−、δ−シクロデキス
トリンのヒドロキシアルキル化体、グリコシル化体など
のように水酸基を有する置換基で修飾されたものの他、
メチル化シクロデキストリン、アシル化シクロデキスト
リンであっても水酸基を１個以上有しているＣＤであれ
ば良く、またこれらの混合物やこれらの重合体であって
も良い。これらのＣＤは、分離対象とする光学異性体の
種類によって不斉識別能が異なるため、適宜選択して用
いるのが好ましく、例えばイブプロフェンなどフェニル
プロピオン酸系の抗炎症薬の分離にはβ−シクロデキス
トリン、フェニルアラニンなどの芳香族アミノ酸の分離
にはα−シクロデキストリンを用いることが好ましい。
【０００９】これらのＣＤを得るに際しては、公知の方
法（テトラヘドロン（Ｔｅｔｒａ−ｈｅｄｒｏｎ）、１
９８３、［３９］、Ｐ．１４１７参照）、または市販品
であるα−、β−、またはγ−シクロデキストリン（メ
ルシャン製）、ヒドロキシエチル−β−シクロデキスト
リン（Ａｌｄｒｉｃｈ製）などにより得られる。具体的
には、例えばヒドロキシプロピル−β−シクロデキスト
リンを得るに際しては、β−シクロデキストリンとクロ
ロプロピルアルコールとをアルカリ存在下で加熱するこ
とにより得られる。また、メチル−β−シクロデキスト
リンを得るに際しては、β−シクロデキストリンと水素
化ナトリウムとをジメチルスルホキシド中で加熱し、さ
らにヨウ化メチルを反応させることにより得られる。
法（テトラヘドロン（Ｔｅｔｒａ−ｈｅｄｒｏｎ）、１
９８３、［３９］、Ｐ．１４１７参照）、または市販品
であるα−、β−、またはγ−シクロデキストリン（メ
ルシャン製）、ヒドロキシエチル−β−シクロデキスト
リン（Ａｌｄｒｉｃｈ製）などにより得られる。具体的
には、例えばヒドロキシプロピル−β−シクロデキスト
リンを得るに際しては、β−シクロデキストリンとクロ
ロプロピルアルコールとをアルカリ存在下で加熱するこ
とにより得られる。また、メチル−β−シクロデキスト
リンを得るに際しては、β−シクロデキストリンと水素
化ナトリウムとをジメチルスルホキシド中で加熱し、さ
らにヨウ化メチルを反応させることにより得られる。
【００１０】また、本発明に用いられるカルボキシル基
を有するＣＤ誘導体はＣＤの水酸基の酸素にカルボキシ
ル基を置換基として有する炭化水素基を直接またはカル
ボニル基を介して結合させてなるものである。該カルボ
キシル基を有する炭化水素基は、−Ｒ−ＣＯＯＨ（Ｒは
直鎖または分岐状の飽和または不飽和あるいは脂環式ま
たは芳香族系の２価炭化水素基を表す。）で示される。
例えば、Ｒは、−ＣＨ2 −，−ＣＨ2 ＣＨ2 −，−ＣＨ
2 ＣＨ2 ＣＨ2 −，−ＣＨ2 ＣＨ（ＣＨ3 ）−，−（Ｃ
Ｈ2 ）4 −，−ＣＨ2 ＣＨ（ＣＨ2 ＣＨ3 ）−，−（Ｃ
Ｈ2 ）5 −，−（ＣＨ2 ）6 −，ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ（Ｃ
Ｈ2 ＣＨ3 ）ＣＨ2 −、−（ＣＨ2 ）8−，−ＣＨ（Ｃ
Ｈ3 ）−（ＣＨ2 ）6 −，−（ＣＨ2 ）10−，−（ＣＨ
2 ）11−，−（ＣＨ2 ）12−，−（ＣＨ2 ）14−，−
（ＣＨ2 ）16−，−（ＣＨ2 ）14ＣＨ（ＣＨ3 ）−，−
（ＣＨ2 ）17−，−（ＣＨ2 ）18−，−（ＣＨ2 ）
19−，−ＣＨ（ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ3 ）−ＣＨ2 −ＣＨ
（ＣＨ3 ）−（ＣＨ2 ）3 −、−ＣＨ＝ＣＨ−，−ＣＨ
2 ＣＨ＝ＣＨ−，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2 −，ＣＨ＝ＣＨ
−ＣＨ＝ＣＨ−，−（ＣＨ2 ）4 ＣＨ＝ＣＨ−，ＣＨ2
ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3 ）−などの炭素数１〜１９の直鎖また
は分岐状の飽和または不飽和の２価炭化水素基が挙げら
れ、−ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10−１，２−イル，−ＣＨ
2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10−１，３−イル，−ＣＨ2 −ｃｙｃ
Ｃ6 Ｈ10−１，４−イル，−ＣＨ2 ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6
Ｈ10−１，２−イル，−ＣＨ2 ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10
−１，３−イル，−ＣＨ2 ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10−
１，４−イル，−ＣＨ2 −ｃｙｃＣ7 Ｈ12−１，３−イ
ル，ＣＨ2 ｃｙｃＣ7 Ｈ12−１，４−イル，−ＣＨ2 −
フェニレン−１、２−イル，−ＣＨ2 −フェニレン−
１、３−イル，−ＣＨ2 −フェニレン−１、４−イル，
フェニレン−１，２−イル，フェニレン−１，３−イ
ル，フェニレン−１，４−イルなどの炭素数６〜１９の
脂環式または芳香族系の２価炭化水素基が挙げられる。
を有するＣＤ誘導体はＣＤの水酸基の酸素にカルボキシ
ル基を置換基として有する炭化水素基を直接またはカル
ボニル基を介して結合させてなるものである。該カルボ
キシル基を有する炭化水素基は、−Ｒ−ＣＯＯＨ（Ｒは
直鎖または分岐状の飽和または不飽和あるいは脂環式ま
たは芳香族系の２価炭化水素基を表す。）で示される。
例えば、Ｒは、−ＣＨ2 −，−ＣＨ2 ＣＨ2 −，−ＣＨ
2 ＣＨ2 ＣＨ2 −，−ＣＨ2 ＣＨ（ＣＨ3 ）−，−（Ｃ
Ｈ2 ）4 −，−ＣＨ2 ＣＨ（ＣＨ2 ＣＨ3 ）−，−（Ｃ
Ｈ2 ）5 −，−（ＣＨ2 ）6 −，ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ（Ｃ
Ｈ2 ＣＨ3 ）ＣＨ2 −、−（ＣＨ2 ）8−，−ＣＨ（Ｃ
Ｈ3 ）−（ＣＨ2 ）6 −，−（ＣＨ2 ）10−，−（ＣＨ
2 ）11−，−（ＣＨ2 ）12−，−（ＣＨ2 ）14−，−
（ＣＨ2 ）16−，−（ＣＨ2 ）14ＣＨ（ＣＨ3 ）−，−
（ＣＨ2 ）17−，−（ＣＨ2 ）18−，−（ＣＨ2 ）
19−，−ＣＨ（ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ3 ）−ＣＨ2 −ＣＨ
（ＣＨ3 ）−（ＣＨ2 ）3 −、−ＣＨ＝ＣＨ−，−ＣＨ
2 ＣＨ＝ＣＨ−，−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ2 −，ＣＨ＝ＣＨ
−ＣＨ＝ＣＨ−，−（ＣＨ2 ）4 ＣＨ＝ＣＨ−，ＣＨ2
ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ3 ）−などの炭素数１〜１９の直鎖また
は分岐状の飽和または不飽和の２価炭化水素基が挙げら
れ、−ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10−１，２−イル，−ＣＨ
2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10−１，３−イル，−ＣＨ2 −ｃｙｃ
Ｃ6 Ｈ10−１，４−イル，−ＣＨ2 ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6
Ｈ10−１，２−イル，−ＣＨ2 ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10
−１，３−イル，−ＣＨ2 ＣＨ2 −ｃｙｃＣ6 Ｈ10−
１，４−イル，−ＣＨ2 −ｃｙｃＣ7 Ｈ12−１，３−イ
ル，ＣＨ2 ｃｙｃＣ7 Ｈ12−１，４−イル，−ＣＨ2 −
フェニレン−１、２−イル，−ＣＨ2 −フェニレン−
１、３−イル，−ＣＨ2 −フェニレン−１、４−イル，
フェニレン−１，２−イル，フェニレン−１，３−イ
ル，フェニレン−１，４−イルなどの炭素数６〜１９の
脂環式または芳香族系の２価炭化水素基が挙げられる。
【００１１】本発明で用いられるカルボキシル基を有す
るＣＤ誘導体の好適な例としては、ＣＤ誘導体の水素が
次の基で置換された化合物を挙げることができる。 −ＣＨ2ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）2ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）
3ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）4ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）5ＣＯ
ＯＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）ＣＨ2ＣＯ
ＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ2）2 −ＣＯＯＨ，−Ｃ
（Ｏ）−（ＣＨ2）3−ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ
Ｈ2）4−ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ2）5−ＣＯＯ
Ｈ，−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ，
るＣＤ誘導体の好適な例としては、ＣＤ誘導体の水素が
次の基で置換された化合物を挙げることができる。 −ＣＨ2ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）2ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）
3ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）4ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）5ＣＯ
ＯＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）ＣＨ2ＣＯ
ＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ2）2 −ＣＯＯＨ，−Ｃ
（Ｏ）−（ＣＨ2）3−ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ
Ｈ2）4−ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ2）5−ＣＯＯ
Ｈ，−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）
−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ，
【化２】
【００１２】これらを得るに際しては、公知の方法（ス
ターチ（Ｓｔａｒｃｈ）、１９７１、［２３］、Ｐ．１
６７参照）などにより得ることができる。具体的には、
例えばカルボキシメチル−β−シクロデキストリンを得
るに際しては、β−シクロデキストリンとクロロ酢酸と
をアルカリ存在下で加熱して得られる。さらに、カルボ
キシプロピオニル−β−シクロデキストリンを得るに際
しては、β−シクロデキストリンと無水コハク酸または
コハク酸塩化物とをジメチルスルホキシド−ピリジン混
合液中で反応させて得られる。
ターチ（Ｓｔａｒｃｈ）、１９７１、［２３］、Ｐ．１
６７参照）などにより得ることができる。具体的には、
例えばカルボキシメチル−β−シクロデキストリンを得
るに際しては、β−シクロデキストリンとクロロ酢酸と
をアルカリ存在下で加熱して得られる。さらに、カルボ
キシプロピオニル−β−シクロデキストリンを得るに際
しては、β−シクロデキストリンと無水コハク酸または
コハク酸塩化物とをジメチルスルホキシド−ピリジン混
合液中で反応させて得られる。
【００１３】これらカルボキシル基を有するＣＤ誘導体
の、ＣＤ１分子当たりのカルボキシル基の量（以下、
「置換度」という。）は、分離対象とする光学異性体の
種類によって好ましい置換度は異なるが、１以上であれ
ば特に制限はなく、また、使用されるカルボキシル基を
有するＣＤ誘導体は、置換度の異なるＣＤの混合物（混
合物の置換度を平均したものを平均置換度という）でも
良い。これらカルボキシル基を有するＣＤ誘導体の置換
度、あるいは平均置換度は、上記の反応におけるカルボ
ン酸の量を変えることにより調節できる。例えば、前記
カルボキシメチル−β−シクロデキストリンについて
は、ＣＤ１モル当たりクロロ酢酸１８モルを反応させる
と平均置換度６〜１０のカルボキシメチル−β−シクロ
デキストリンが得られ、また、ＣＤ１モル当たりクロロ
酢酸７モルを反応させると平均置換度２〜６のカルボキ
シメチル−β−シクロデキストリンが得られる。
の、ＣＤ１分子当たりのカルボキシル基の量（以下、
「置換度」という。）は、分離対象とする光学異性体の
種類によって好ましい置換度は異なるが、１以上であれ
ば特に制限はなく、また、使用されるカルボキシル基を
有するＣＤ誘導体は、置換度の異なるＣＤの混合物（混
合物の置換度を平均したものを平均置換度という）でも
良い。これらカルボキシル基を有するＣＤ誘導体の置換
度、あるいは平均置換度は、上記の反応におけるカルボ
ン酸の量を変えることにより調節できる。例えば、前記
カルボキシメチル−β−シクロデキストリンについて
は、ＣＤ１モル当たりクロロ酢酸１８モルを反応させる
と平均置換度６〜１０のカルボキシメチル−β−シクロ
デキストリンが得られ、また、ＣＤ１モル当たりクロロ
酢酸７モルを反応させると平均置換度２〜６のカルボキ
シメチル−β−シクロデキストリンが得られる。
【００１４】本発明における水に不溶性の支持体とは、
カルボキシル基と結合可能な官能基を有するもの、また
は導入可能なものであれば特に制限はなく、アガロー
ス、デキストラン、セルロースなどの多糖体およびポリ
アクリルアミドのような所謂ソフトビーズ、ポリスチレ
ン、ポリメタクリレート、ポリビニルアルコールおよび
これらの共重合物のような硬質の合成高分子ビーズ、あ
るいはアルミナ、チタニアのような無機の硬質ビーズな
どの耐アルカリ性を有するものが望ましい。また、アル
カリ性条件下で吸着担体を使用しなければ、シリカゲル
のようなアルカリに不安定な支持体を使用することもで
きる。ビーズの粒径、形状および細孔の有無とその孔径
は特に制限はないが、通常１〜３０００μｍ、好ましく
は２〜３００μｍが適当であり、ビーズの形状は多孔性
球状が好ましい。これらの支持体は、得られた担体の用
途により適宜選択して使用するのが好ましく、例えば高
速液体クロマトグラフィー用吸着担体に使用するには、
ポリメタクリレート系などの硬質の合成高分子ビーズや
シリカゲルなどの無機の硬質ビーズが好ましい。
カルボキシル基と結合可能な官能基を有するもの、また
は導入可能なものであれば特に制限はなく、アガロー
ス、デキストラン、セルロースなどの多糖体およびポリ
アクリルアミドのような所謂ソフトビーズ、ポリスチレ
ン、ポリメタクリレート、ポリビニルアルコールおよび
これらの共重合物のような硬質の合成高分子ビーズ、あ
るいはアルミナ、チタニアのような無機の硬質ビーズな
どの耐アルカリ性を有するものが望ましい。また、アル
カリ性条件下で吸着担体を使用しなければ、シリカゲル
のようなアルカリに不安定な支持体を使用することもで
きる。ビーズの粒径、形状および細孔の有無とその孔径
は特に制限はないが、通常１〜３０００μｍ、好ましく
は２〜３００μｍが適当であり、ビーズの形状は多孔性
球状が好ましい。これらの支持体は、得られた担体の用
途により適宜選択して使用するのが好ましく、例えば高
速液体クロマトグラフィー用吸着担体に使用するには、
ポリメタクリレート系などの硬質の合成高分子ビーズや
シリカゲルなどの無機の硬質ビーズが好ましい。
【００１５】上記の、水に不溶性の支持体が有する官能
基であってカルボキシル基と結合可能な官能基として
は、アミノ基、エポキシ基、水酸基、カルボキシル基、
アルキニル基、アルケニル基などを例示することができ
るが、カルボキシル基を有するＣＤ誘導体を、多量かつ
簡便に支持体に固定化できるアミノ基やエポキシ基を有
する支持体が特に好ましい。これらの官能基を支持体に
導入するに際しては、公知の方法で適当な溶媒の存在下
で容易に行うことができる。具体的には、例えばエポキ
シ基を導入したエポキシ変性支持体は、エピクロロヒド
リンのようなエピハロヒドリン類、１，４−ブタンジオ
ールジグリシジルエーテルのようなジグリシジルエーテ
ル類、１，７−オクタジエンジエポキシドのようなジエ
ポキシド類等をアルカリ条件下で水酸基を有する支持体
と反応させることにより速やかに得ることができる。
基であってカルボキシル基と結合可能な官能基として
は、アミノ基、エポキシ基、水酸基、カルボキシル基、
アルキニル基、アルケニル基などを例示することができ
るが、カルボキシル基を有するＣＤ誘導体を、多量かつ
簡便に支持体に固定化できるアミノ基やエポキシ基を有
する支持体が特に好ましい。これらの官能基を支持体に
導入するに際しては、公知の方法で適当な溶媒の存在下
で容易に行うことができる。具体的には、例えばエポキ
シ基を導入したエポキシ変性支持体は、エピクロロヒド
リンのようなエピハロヒドリン類、１，４−ブタンジオ
ールジグリシジルエーテルのようなジグリシジルエーテ
ル類、１，７−オクタジエンジエポキシドのようなジエ
ポキシド類等をアルカリ条件下で水酸基を有する支持体
と反応させることにより速やかに得ることができる。
【００１６】また、得られたエポキシ変性支持体は、ア
ンモニア、ヒドラジン、あるいはメチルアミンのような
アミノアルカン類、１，３−プロパンジアミン、ヘキサ
メチレンジアミンのようなジアミノアルカン類、ポリア
スパラギン、ポリグルタミンのような塩基性ポリアミノ
酸類、ポリビニルアミン、ポリエチレンイミンのような
ポリアミン類等を反応させることによりアミノ基を有す
るアミノ変性支持体を得ることができる。アミノ変性支
持体は、上記のエポキシ変性支持体のかわりに、グリシ
ジルメタクリレートとそれと共重合し得るビニルモノマ
ーから成るエポキシ基含有共重合体を用いても同様にし
て得ることができる。また、アミノ変性支持体は、無水
コハク酸のような酸無水物、あるいは無水マレイン酸と
それと共重合し得るビニルモノマーから成る無水マレイ
ン酸共重合体と反応させることによりカルボキシ変性支
持体とすることもできる。本共重合体中にエチレンジア
ミンなどのジアミン類を反応させることで上記のアミノ
変性支持体を得ることもできる。
ンモニア、ヒドラジン、あるいはメチルアミンのような
アミノアルカン類、１，３−プロパンジアミン、ヘキサ
メチレンジアミンのようなジアミノアルカン類、ポリア
スパラギン、ポリグルタミンのような塩基性ポリアミノ
酸類、ポリビニルアミン、ポリエチレンイミンのような
ポリアミン類等を反応させることによりアミノ基を有す
るアミノ変性支持体を得ることができる。アミノ変性支
持体は、上記のエポキシ変性支持体のかわりに、グリシ
ジルメタクリレートとそれと共重合し得るビニルモノマ
ーから成るエポキシ基含有共重合体を用いても同様にし
て得ることができる。また、アミノ変性支持体は、無水
コハク酸のような酸無水物、あるいは無水マレイン酸と
それと共重合し得るビニルモノマーから成る無水マレイ
ン酸共重合体と反応させることによりカルボキシ変性支
持体とすることもできる。本共重合体中にエチレンジア
ミンなどのジアミン類を反応させることで上記のアミノ
変性支持体を得ることもできる。
【００１７】これらの官能基を有する支持体に、カルボ
キシル基を有するＣＤ誘導体を固定化させることにより
本発明のクロマトグラフィー用吸着担体が得られる。
キシル基を有するＣＤ誘導体を固定化させることにより
本発明のクロマトグラフィー用吸着担体が得られる。
【００１８】本発明の、カルボキシル基を有するＣＤ誘
導体を、支持体に固定化するに際しては、支持体の前記
官能基部分とカルボキシル基を有するＣＤ誘導体のカル
ボキシル基部分とを結合する。支持体自体とカルボキシ
ル基を有するＣＤ誘導体との間の長さとしては、特に制
限はないが、原子数０〜１００、好ましくは原子数０〜
１０が望ましい。本発明は、ＣＤの水酸基の酸素に、カ
ルボキシル基を有する炭化水素基を直接またはカルボニ
ル基を介して結合させたＣＤ誘導体を、水に不溶性の支
持体に固定化させてなることを特徴とするクロマトグラ
フィー用吸着担体にあるので、カルボキシル基を導入し
たＣＤ誘導体と支持体との結合方法については特に限定
されるものではないが、カルボキシル基を有するＣＤ誘
導体および支持体の官能基に応じて必要であれば、適宜
触媒や反応剤などを用いて適当な溶媒下で行うことがで
きる。例えば触媒としては、塩酸や炭酸ナトリウム、ま
たは炭酸水素ナトリウムなどの酸、アルカリが主として
用いられ、また、例えば反応剤としては、Ｎ−ヒドロキ
シコハク酸イミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド、
１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カル
ボジイミド、またはＮ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾー
ルのような縮合剤や１，４−テトラメチレンビスオキサ
ゾリンなどのビスオキサゾリン化合物が用いられる。ま
た、溶媒としては１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチ
ルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはピリジン
のような有機溶媒や、水あるいはそのリン酸や炭酸緩衝
液などが用いられる。
導体を、支持体に固定化するに際しては、支持体の前記
官能基部分とカルボキシル基を有するＣＤ誘導体のカル
ボキシル基部分とを結合する。支持体自体とカルボキシ
ル基を有するＣＤ誘導体との間の長さとしては、特に制
限はないが、原子数０〜１００、好ましくは原子数０〜
１０が望ましい。本発明は、ＣＤの水酸基の酸素に、カ
ルボキシル基を有する炭化水素基を直接またはカルボニ
ル基を介して結合させたＣＤ誘導体を、水に不溶性の支
持体に固定化させてなることを特徴とするクロマトグラ
フィー用吸着担体にあるので、カルボキシル基を導入し
たＣＤ誘導体と支持体との結合方法については特に限定
されるものではないが、カルボキシル基を有するＣＤ誘
導体および支持体の官能基に応じて必要であれば、適宜
触媒や反応剤などを用いて適当な溶媒下で行うことがで
きる。例えば触媒としては、塩酸や炭酸ナトリウム、ま
たは炭酸水素ナトリウムなどの酸、アルカリが主として
用いられ、また、例えば反応剤としては、Ｎ−ヒドロキ
シコハク酸イミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド、
１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カル
ボジイミド、またはＮ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾー
ルのような縮合剤や１，４−テトラメチレンビスオキサ
ゾリンなどのビスオキサゾリン化合物が用いられる。ま
た、溶媒としては１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチ
ルホルムアミド、ジメチルスルホキシドまたはピリジン
のような有機溶媒や、水あるいはそのリン酸や炭酸緩衝
液などが用いられる。
【００１９】本発明に従えば、カルボキシル基を有する
ＣＤ誘導体を、水に不溶性の支持体に固定化してなるこ
とを特徴とするクロマトグラフィー用吸着担体を得るこ
とが出来るが、このようなクロマトグラフィー用吸着担
体は単なる液体クロマトグラフィー用吸着担体から高速
液体クロマトグラフィー用吸着担体として利用でき、カ
ラムに充填するなどにより光学異性体だけではなく、位
置異性体や幾何異性体をはじめ様々な異性体も分離する
ことができる。
ＣＤ誘導体を、水に不溶性の支持体に固定化してなるこ
とを特徴とするクロマトグラフィー用吸着担体を得るこ
とが出来るが、このようなクロマトグラフィー用吸着担
体は単なる液体クロマトグラフィー用吸着担体から高速
液体クロマトグラフィー用吸着担体として利用でき、カ
ラムに充填するなどにより光学異性体だけではなく、位
置異性体や幾何異性体をはじめ様々な異性体も分離する
ことができる。
【００２０】
【実施例】以下、実施例をあげて本発明をさらに詳細に
説明する。但し、これらは本発明のクロマトグラフィー
用吸着担体の一例であって、本発明はこれらに何等制限
されないのは言うまでもない。
説明する。但し、これらは本発明のクロマトグラフィー
用吸着担体の一例であって、本発明はこれらに何等制限
されないのは言うまでもない。
【００２１】実施例１ カルボキシメチル−α−シクロ
デキストリン（平均置換度＝７．０）固定化吸着担体の
製造 グリシジルメタクリレートとグリセリンジメタクリレー
トから得られたエポキシ基含有ゲル状共重合体中のエポ
キシ基を１，３−プロパンジアミンにより開環変性し、
真空下で５時間乾燥した。このようにしてカルボキシル
基を有するＣＤ及びその誘導体と結合可能な基を有する
アミノ変性支持体（アミノ基；乾燥支持体１ｇ当たり４
ｍｍｏｌ）が製造された。α−シクロデキストリン１０
ｇを１３％水酸化ナトリウム水溶液１１０ｍｌに溶解さ
せ、さらに５０％クロロ酢酸ナトリウム水溶液２８ｇを
加え８０℃で１時間撹拌後、反応液を氷冷しながら１Ｎ
塩酸で中和した。この反応液にアセトン２００ｍｌを加
えた後、生じた沈澱を濾取し、残渣をアセトン洗浄する
と白色固体のカルボキシメチル−α−シクロデキストリ
ン９．０ｇが得られた。こうして得られた化合物の平均
置換度は、６０ＭＨｚの１Ｈ−ＮＭＲより７．０である
ことが確かめられた。
デキストリン（平均置換度＝７．０）固定化吸着担体の
製造 グリシジルメタクリレートとグリセリンジメタクリレー
トから得られたエポキシ基含有ゲル状共重合体中のエポ
キシ基を１，３−プロパンジアミンにより開環変性し、
真空下で５時間乾燥した。このようにしてカルボキシル
基を有するＣＤ及びその誘導体と結合可能な基を有する
アミノ変性支持体（アミノ基；乾燥支持体１ｇ当たり４
ｍｍｏｌ）が製造された。α−シクロデキストリン１０
ｇを１３％水酸化ナトリウム水溶液１１０ｍｌに溶解さ
せ、さらに５０％クロロ酢酸ナトリウム水溶液２８ｇを
加え８０℃で１時間撹拌後、反応液を氷冷しながら１Ｎ
塩酸で中和した。この反応液にアセトン２００ｍｌを加
えた後、生じた沈澱を濾取し、残渣をアセトン洗浄する
と白色固体のカルボキシメチル−α−シクロデキストリ
ン９．０ｇが得られた。こうして得られた化合物の平均
置換度は、６０ＭＨｚの１Ｈ−ＮＭＲより７．０である
ことが確かめられた。
【００２２】前記の方法によって得られたカルボキシメ
チル−α−シクロデキストリン１０ｇを０．０５Ｍ塩化
ナトリウム水溶液２４０ｍｌに溶解させ、さらにさきに
述べられた方法で得られたアミノ変性支持体１０ｇを加
えよく撹拌した。この反応液に、１−エチル ３−（３
−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド１６ｇを加
え室温で１２時間撹拌後、吸着担体を濾取し、水、アセ
トンの順で洗浄した。こうして得られた吸着担体は、反
応前後の重量増加より、乾燥吸着担体１ｇ当たりα−シ
クロデキストリンを１８０μｍｏｌ固定化していること
が確かめられた。
チル−α−シクロデキストリン１０ｇを０．０５Ｍ塩化
ナトリウム水溶液２４０ｍｌに溶解させ、さらにさきに
述べられた方法で得られたアミノ変性支持体１０ｇを加
えよく撹拌した。この反応液に、１−エチル ３−（３
−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド１６ｇを加
え室温で１２時間撹拌後、吸着担体を濾取し、水、アセ
トンの順で洗浄した。こうして得られた吸着担体は、反
応前後の重量増加より、乾燥吸着担体１ｇ当たりα−シ
クロデキストリンを１８０μｍｏｌ固定化していること
が確かめられた。
【００２３】実施例２ カルボキシメチル−β−シクロ
デキストリン（平均置換度＝３．６）固定化吸着担体の
製造 実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、市販のカルボ
キシメチル−β−シクロデキストリン（平均置換度＝
３．６、ＣＹＣＬＯＬＡＢ製）１０ｇを用いた他は実施
例１の固定化方法と同様な操作を行った。こうして得ら
れた吸着担体は、反応前後の重量増加より、乾燥吸着担
体１ｇ当たりβ−シクロデキストリンを１５０μｍｏｌ
固定化していることが確かめられた。
デキストリン（平均置換度＝３．６）固定化吸着担体の
製造 実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、市販のカルボ
キシメチル−β−シクロデキストリン（平均置換度＝
３．６、ＣＹＣＬＯＬＡＢ製）１０ｇを用いた他は実施
例１の固定化方法と同様な操作を行った。こうして得ら
れた吸着担体は、反応前後の重量増加より、乾燥吸着担
体１ｇ当たりβ−シクロデキストリンを１５０μｍｏｌ
固定化していることが確かめられた。
【００２４】実施例３ カルボキシメチル−β−シクロ
デキストリン（平均置換度＝１０．０）固定化吸着担体
の製造 β−シクロデキストリン２０ｇを１０％水酸化ナトリウ
ム水溶液２８０ｍｌに溶解させ、さらに５０％クロロ酢
酸ナトリウム水溶液６０ｇを加え８０℃で１時間撹拌
後、反応液を氷冷しながら１Ｎ塩酸で中和した。この反
応液にメタノール１８００ｍｌを加えた後、生じた沈澱
を濾取しメタノールで洗浄した。さらに、この沈澱を水
−メタノールで再結晶させると白色固体のカルボキシメ
チル−β−シクロデキストリン１１．０ｇが得られた。
こうして得られた化合物の平均置換度は、６０ＭＨｚの
１Ｈ−ＮＭＲより１０．０であることが確かめられた。
実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、上記の方法に
よって得られたカルボキシメチル−β−シクロデキスト
リン（平均置換度＝１０．０）１０ｇを用いた他は実施
例１の固定化方法と同様な操作を行った。こうして得ら
れた吸着担体は、反応前後の重量増加より、乾燥吸着担
体１ｇ当たりβ−シクロデキストリンを１３０μｍｏｌ
固定化していることが確かめられた。
デキストリン（平均置換度＝１０．０）固定化吸着担体
の製造 β−シクロデキストリン２０ｇを１０％水酸化ナトリウ
ム水溶液２８０ｍｌに溶解させ、さらに５０％クロロ酢
酸ナトリウム水溶液６０ｇを加え８０℃で１時間撹拌
後、反応液を氷冷しながら１Ｎ塩酸で中和した。この反
応液にメタノール１８００ｍｌを加えた後、生じた沈澱
を濾取しメタノールで洗浄した。さらに、この沈澱を水
−メタノールで再結晶させると白色固体のカルボキシメ
チル−β−シクロデキストリン１１．０ｇが得られた。
こうして得られた化合物の平均置換度は、６０ＭＨｚの
１Ｈ−ＮＭＲより１０．０であることが確かめられた。
実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、上記の方法に
よって得られたカルボキシメチル−β−シクロデキスト
リン（平均置換度＝１０．０）１０ｇを用いた他は実施
例１の固定化方法と同様な操作を行った。こうして得ら
れた吸着担体は、反応前後の重量増加より、乾燥吸着担
体１ｇ当たりβ−シクロデキストリンを１３０μｍｏｌ
固定化していることが確かめられた。
【００２５】実施例４ カルボキシメチル−（ヒドロキ
シプロピル−β−シクロデキストリン）（平均置換度＝
１０．０）固定化吸着担体の製造 実施例１のカルボキシメチル化法において、α−シクロ
デキストリン１０ｇの代わりに、市販のヒドロキシプロ
ピル−β−シクロデキストリン（平均置換度＝１．６、
Ａｌｄｒｉｃｈ製）８ｇを用いた他は実施例１のカルボ
キシメチル化法と同様な操作を行った。こうして得られ
た化合物の平均置換度は、６０ＭＨｚの１Ｈ−ＮＭＲよ
り１０．０であることが確かめられた。実施例１の固定
化方法において、カルボキシメチル−α−シクロデキス
トリン１０ｇの代わりに、上記の方法によって得られた
カルボキシメチル−（ヒドロキシプロピル−β−シクロ
デキストリン）（平均置換度＝１０．０）１０ｇを用い
た他は実施例１の固定化方法と同様な操作を行った。こ
うして得られた吸着担体は、反応前後の重量増加より、
乾燥吸着担体１ｇ当たりヒドロキプロピル−β−シクロ
デキストリンを１３０μｍｏｌ固定化していることが確
かめられた。
シプロピル−β−シクロデキストリン）（平均置換度＝
１０．０）固定化吸着担体の製造 実施例１のカルボキシメチル化法において、α−シクロ
デキストリン１０ｇの代わりに、市販のヒドロキシプロ
ピル−β−シクロデキストリン（平均置換度＝１．６、
Ａｌｄｒｉｃｈ製）８ｇを用いた他は実施例１のカルボ
キシメチル化法と同様な操作を行った。こうして得られ
た化合物の平均置換度は、６０ＭＨｚの１Ｈ−ＮＭＲよ
り１０．０であることが確かめられた。実施例１の固定
化方法において、カルボキシメチル−α−シクロデキス
トリン１０ｇの代わりに、上記の方法によって得られた
カルボキシメチル−（ヒドロキシプロピル−β−シクロ
デキストリン）（平均置換度＝１０．０）１０ｇを用い
た他は実施例１の固定化方法と同様な操作を行った。こ
うして得られた吸着担体は、反応前後の重量増加より、
乾燥吸着担体１ｇ当たりヒドロキプロピル−β−シクロ
デキストリンを１３０μｍｏｌ固定化していることが確
かめられた。
【００２６】実施例５ カルボキシプロピオニル−β−
シクロデキストリン（平均置換度＝６．３）固定化吸着
担体の製造 実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、市販のカルボ
キシプロピオニル−β−シクロデキストリン（平均置換
度＝６．３、ＣＹＣＬＯＬＡＢ製）１０ｇを用いた他は
実施例１の固定化方法と同様な操作を行った。こうして
得られた吸着担体は、反応前後の重量増加より、乾燥吸
着担体１ｇ当たりβ−シクロデキストリンを１５０μｍ
ｏｌ固定化していることが確かめられた。
シクロデキストリン（平均置換度＝６．３）固定化吸着
担体の製造 実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、市販のカルボ
キシプロピオニル−β−シクロデキストリン（平均置換
度＝６．３、ＣＹＣＬＯＬＡＢ製）１０ｇを用いた他は
実施例１の固定化方法と同様な操作を行った。こうして
得られた吸着担体は、反応前後の重量増加より、乾燥吸
着担体１ｇ当たりβ−シクロデキストリンを１５０μｍ
ｏｌ固定化していることが確かめられた。
【００２７】実施例６ カルボキシメチル−（β−シク
ロデキストリン−エピクロロヒドリンコポリマー）（平
均置換度＝１．９）固定化吸着担体の製造 実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、市販のカルボ
キシメチル−（β−シクロデキストリン−エピクロロヒ
ドリンコポリマー）（平均置換度＝１．９、ＣＹＣＬＯ
ＬＡＢ製）１０ｇを用いた他は実施例１の固定化方法と
同様な操作を行った。こうして得られた吸着担体は、反
応前後の重量増加より、乾燥担体１ｇ当たりβ−シクロ
デキストリンを２００μｍｏｌ固定化していることが確
かめられた。
ロデキストリン−エピクロロヒドリンコポリマー）（平
均置換度＝１．９）固定化吸着担体の製造 実施例１の固定化方法において、カルボキシメチル−α
−シクロデキストリン１０ｇの代わりに、市販のカルボ
キシメチル−（β−シクロデキストリン−エピクロロヒ
ドリンコポリマー）（平均置換度＝１．９、ＣＹＣＬＯ
ＬＡＢ製）１０ｇを用いた他は実施例１の固定化方法と
同様な操作を行った。こうして得られた吸着担体は、反
応前後の重量増加より、乾燥担体１ｇ当たりβ−シクロ
デキストリンを２００μｍｏｌ固定化していることが確
かめられた。
【００２８】比較例 β−シクロデキストリン固定化吸
着担体の製造 グリシジルメタクリレートとグリセリンジメタクリレー
トから得られたエポキシ基含有ゲル状共重合体中のエポ
キシ基を水により開環変性し、真空下で５時間乾燥し
た。この支持体１０ｇに、１，４−ジオキサン８５ｍｌ
を加え、さらに窒素雰囲気下でＮ，Ｎ’−カルボニルジ
イミダゾール１５ｇを加えて５０℃で３時間撹拌後、支
持体を濾取し１，４−ジオキサンで洗浄した。こうして
得られたＮ−カルボニルイミダゾール固定化支持体（Ｎ
−カルボニルイミダゾール基；乾燥支持体１ｇ当たり
１．８ｍｍｏｌ）約１０ｇに、β−シクロデキストリン
５０ｇとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５０ｍｌとを
加え、６０℃で１５時間撹拌後、吸着担体を濾取し水お
よびアルコールで洗浄した。こうして得られた吸着担体
は、反応前後の重量増加より、乾燥吸着担体１ｇ当たり
β−シクロデキストリンを１００μｍｏｌ固定化してい
ることが確かめられた。
着担体の製造 グリシジルメタクリレートとグリセリンジメタクリレー
トから得られたエポキシ基含有ゲル状共重合体中のエポ
キシ基を水により開環変性し、真空下で５時間乾燥し
た。この支持体１０ｇに、１，４−ジオキサン８５ｍｌ
を加え、さらに窒素雰囲気下でＮ，Ｎ’−カルボニルジ
イミダゾール１５ｇを加えて５０℃で３時間撹拌後、支
持体を濾取し１，４−ジオキサンで洗浄した。こうして
得られたＮ−カルボニルイミダゾール固定化支持体（Ｎ
−カルボニルイミダゾール基；乾燥支持体１ｇ当たり
１．８ｍｍｏｌ）約１０ｇに、β−シクロデキストリン
５０ｇとＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５０ｍｌとを
加え、６０℃で１５時間撹拌後、吸着担体を濾取し水お
よびアルコールで洗浄した。こうして得られた吸着担体
は、反応前後の重量増加より、乾燥吸着担体１ｇ当たり
β−シクロデキストリンを１００μｍｏｌ固定化してい
ることが確かめられた。
【００２９】応用例
実施例２、３、５、６および比較例で得られた吸着担体
を、各々、内径４．６ｍｍ長さ１５０ｍｍのステンレス
製クロマト管にスラリー法で充填し、高速液体クロマト
グラフ装置を用いて、メチオニン β−ナフチルアミド
（Ｍｅｔ−ＮＡ）、ダンシルバリン（Ｄｎｓ−Ｖａ
ｌ）、２−フェノキシプロピオン酸（２−ＰＰＡ）を分
析したところ、表１に示したような結果が得られた。表
中、ｋ’は（はじめに溶出される成分の保持容量−カラ
ムの空隙容量）／（カラムの空隙容量）で表されるキャ
パシティー比を示し、αは２番目に溶出する成分のキャ
パシティー比をｋ’で除した分離係数を示す。また、実
施例２で得られた吸着担体について、上記と同様の方法
で種々のカルボン酸を分析した。表２にその結果を示
す。表中のｋ’、αは表１のものと同様である。
を、各々、内径４．６ｍｍ長さ１５０ｍｍのステンレス
製クロマト管にスラリー法で充填し、高速液体クロマト
グラフ装置を用いて、メチオニン β−ナフチルアミド
（Ｍｅｔ−ＮＡ）、ダンシルバリン（Ｄｎｓ−Ｖａ
ｌ）、２−フェノキシプロピオン酸（２−ＰＰＡ）を分
析したところ、表１に示したような結果が得られた。表
中、ｋ’は（はじめに溶出される成分の保持容量−カラ
ムの空隙容量）／（カラムの空隙容量）で表されるキャ
パシティー比を示し、αは２番目に溶出する成分のキャ
パシティー比をｋ’で除した分離係数を示す。また、実
施例２で得られた吸着担体について、上記と同様の方法
で種々のカルボン酸を分析した。表２にその結果を示
す。表中のｋ’、αは表１のものと同様である。
【００３０】分析条件は、特に記載のないものは以下の
通りである。 溶離液；２％酢酸−トリエチルアミン緩衝液（ｐＨ４）
／アセトニトリル（９／１）＋０．１Ｍ塩化ナトリウム 流速；０．２ｍｌ／分 カラム温度；１５℃ 検出器；紫外分光光度計 検出波長；２５４ｎｍ さらに、実施例２で得られた吸着担体について、上記と
同様の方法でメチオニン β−ナフチルアミドをアルカ
リ溶離液下で分析した。第１図にそのクロマトグラムを
示す。溶離液以外は前述の分析条件と同一である。溶離
液を以下に示す。 溶離液；２％酢酸−トリエチルアミン（ｐＨ９．５）／
アセトニトリル（９／１）＋０．１Ｍ塩化ナトリウム
通りである。 溶離液；２％酢酸−トリエチルアミン緩衝液（ｐＨ４）
／アセトニトリル（９／１）＋０．１Ｍ塩化ナトリウム 流速；０．２ｍｌ／分 カラム温度；１５℃ 検出器；紫外分光光度計 検出波長；２５４ｎｍ さらに、実施例２で得られた吸着担体について、上記と
同様の方法でメチオニン β−ナフチルアミドをアルカ
リ溶離液下で分析した。第１図にそのクロマトグラムを
示す。溶離液以外は前述の分析条件と同一である。溶離
液を以下に示す。 溶離液；２％酢酸−トリエチルアミン（ｐＨ９．５）／
アセトニトリル（９／１）＋０．１Ｍ塩化ナトリウム
【００３１】
【表１】
【００３２】
【表２】
【００３３】これらの結果より本発明により得られたク
ロマトグラフィー用吸着担体は、従来の方法により得ら
れたクロマトグラフィー用吸着担体と比べて、高い不斉
識別能を有し、かつ従来のクロマトグラフィー用吸着担
体では不可能なアルカリ溶離液下での分離を可能とし
た。
ロマトグラフィー用吸着担体は、従来の方法により得ら
れたクロマトグラフィー用吸着担体と比べて、高い不斉
識別能を有し、かつ従来のクロマトグラフィー用吸着担
体では不可能なアルカリ溶離液下での分離を可能とし
た。
【００３４】
【発明の効果】本発明のクロマトグラフィー用吸着担体
は、応用例から明らかなように、カルボキシル基を有す
るＣＤ誘導体を、水に不溶性の支持体に固定化させるこ
とより、従来のＣＤを反応させてなるクロマトグラフィ
ー用吸着担体よりも、高い不斉識別能を示すものであ
る。また、耐久性や再現性にも優れ、しかも製造方法が
容易である。さらに、本発明のクロマトグラフィー用吸
着担体は、アルカリ性条件下での分離、溶出、洗浄を目
的とする場合には、支持体に耐アルカリ性のあるもので
あれば可能である。従って本発明に係るクロマトグラフ
ィー用吸着担体は、種々の光学異性体分離の可能性を有
するほか、単なる分析や分取手段にとどまらず幅広い工
業用分離精製設備への応用を計るための有力な手段とな
ることは明かである。
は、応用例から明らかなように、カルボキシル基を有す
るＣＤ誘導体を、水に不溶性の支持体に固定化させるこ
とより、従来のＣＤを反応させてなるクロマトグラフィ
ー用吸着担体よりも、高い不斉識別能を示すものであ
る。また、耐久性や再現性にも優れ、しかも製造方法が
容易である。さらに、本発明のクロマトグラフィー用吸
着担体は、アルカリ性条件下での分離、溶出、洗浄を目
的とする場合には、支持体に耐アルカリ性のあるもので
あれば可能である。従って本発明に係るクロマトグラフ
ィー用吸着担体は、種々の光学異性体分離の可能性を有
するほか、単なる分析や分取手段にとどまらず幅広い工
業用分離精製設備への応用を計るための有力な手段とな
ることは明かである。
【図１】実施例２の担体を用いたクロマトグラムであ
る。
る。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(56)参考文献 特開 平３−184925（ＪＰ，Ａ)
特開 平３−282363（ＪＰ，Ａ)
特開 平５−51327（ＪＰ，Ａ)
特開 平５−232098（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
G01N 30/48
C08B 37/16
Claims (10)
- 【請求項１】シクロデキストリンの水酸基の酸素に、カ
ルボキシル基を有する炭化水素基を直接またはカルボニ
ル基を介して結合させたシクロデキストリン誘導体を、
水に不溶性の支持体に固定化してなることを特徴とする
クロマトグラフィー用吸着担体。 - 【請求項２】炭化水素基の置換基のカルボキシル基を用
いて支持体に固定化されてなることを特徴とする請求項
１記載のクロマトグラフィー用吸着担体。 - 【請求項３】炭化水素基の置換基のカルボキシル基を用
いて支持体に固定化され、支持体がアミノ基またはエポ
キシ基を有することを特徴とする請求項２に記載のクロ
マトグラフィー用吸着担体。 - 【請求項４】炭化水素基が炭素数２〜２０の直鎖または
分岐状の飽和または不飽和炭化水素基あるいは炭素数７
〜２０の脂環式または芳香族炭化水素基であり、該炭化
水素基の置換基のカルボキシル基を用いて支持体に固定
化され、支持体がアミノ基またはエポキシ基を有するこ
とを特徴とする請求項３に記載のクロマトグラフィー用
吸着担体。 - 【請求項５】シクロデキストリンまたはシクロデキスト
リン誘導体が、α−、β−、γ−もしくはδ−シクロデ
キストリン、水酸基を有する置換基で修飾されたそれら
の誘導体、又は水酸基を１個以上有しているメチル化も
しくはアシル化シクロデキストリン、あるいはこれらの
混合物やこれらの重合体から選ばれることを特徴とする
請求項１ないし４のいずれかに記載のクロマトグラフィ
ー用吸着担体。 - 【請求項６】シクロデキストリン誘導体において、シク
ロデキストリンの水素が、−ＣＨ2ＣＯＯＨ，−（Ｃ
Ｈ2）2ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）3ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）4
ＣＯＯＨ，−（ＣＨ2）5ＣＯＯＨ，−ＣＨ（ＣＨ3）Ｃ
ＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）ＣＨ2ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（Ｃ
Ｈ2）2 −ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ2）3−ＣＯＯ
Ｈ，−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ2）4−ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−
（ＣＨ2）5−ＣＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（ＣＨ3）Ｃ
ＯＯＨ，−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＯＯＨ， 【化１】 で置換されていることを特徴とする請求項１ないし５の
いずれかに記載のクロマトグラフィー用吸着担体。 - 【請求項７】支持体が、カルボキシル基と結合可能な官
能基を有するもの、または導入可能なものである請求項
１ないし６のいずれかに記載のクロマトグラフィー用吸
着担体。 - 【請求項８】支持体が、ポリスチレン、ポリメタアクリ
レート、ポリビニルアルコールおよびこれらの共重合物
からなる硬質ビーズ、あるいはシリカゲルである請求項
１ないし６のいずれかに記載のクロマトグラフィー用吸
着担体。 - 【請求項９】粒径が１〜３０００μmである請求項１な
いし８のいずれかに記載のクロマトグラフィー用吸着担
体。 - 【請求項１０】液体クロマトグラフィーにおいて、光学
異性体、位置異性体および幾何異性体の分離に用いる請
求項１ないし９のいずれかに記載のクロマトグラフィー
用吸着担体。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP01865894A JP3493706B2 (ja) | 1994-02-15 | 1994-02-15 | クロマトグラフィー用吸着担体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP01865894A JP3493706B2 (ja) | 1994-02-15 | 1994-02-15 | クロマトグラフィー用吸着担体 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07225225A JPH07225225A (ja) | 1995-08-22 |
| JP3493706B2 true JP3493706B2 (ja) | 2004-02-03 |
Family
ID=11977721
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP01865894A Expired - Fee Related JP3493706B2 (ja) | 1994-02-15 | 1994-02-15 | クロマトグラフィー用吸着担体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3493706B2 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2834227A1 (fr) | 2001-12-27 | 2003-07-04 | Chiralsep Sarl | Materiaux supports optiquement actifs, leur procede de preparation et leurs utilisations |
| JP4957470B2 (ja) * | 2007-09-07 | 2012-06-20 | 神奈川県 | 多価のアニオン性シクロデキストリン化合物を用いてなる疎水性物質の分離方法、及び疎水性物質の選択的吸着剤 |
| JP5467217B2 (ja) * | 2008-03-31 | 2014-04-09 | 地方独立行政法人青森県産業技術センター | シクロデキストリン複合材料およびその製造方法 |
| JP2014028973A (ja) * | 2013-10-15 | 2014-02-13 | Aomori Prefectural Industrial Technology Research Center | シクロデキストリン複合材料およびその製造方法 |
| JP7019497B2 (ja) * | 2018-04-12 | 2022-02-15 | 株式会社島津製作所 | 馬尿酸類分析用の分離カラム、馬尿酸類分析用の液体クロマトグラフ、及び馬尿酸類の分析方法 |
-
1994
- 1994-02-15 JP JP01865894A patent/JP3493706B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH07225225A (ja) | 1995-08-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Fanali | Enantiomers separation by capillary electrochromatography | |
| Zhang et al. | Recent progress in the development of chiral stationary phases for high‐performance liquid chromatography | |
| Wenz | Cyclodextrins as building blocks for supramolecular structures and functional units | |
| Crini et al. | Synthesis and applications of adsorbents containing cyclodextrins | |
| Francotte et al. | Chromatographic resolution of racemates on chiral stationary phases: I. Influence of the supramolecular structure of cellullose triacetate | |
| Adly et al. | Cyclodextrin‐functionalized monolithic capillary columns: preparation and chiral applications | |
| Calleri et al. | Evaluation of a monolithic epoxy silica support for penicillin G acylase immobilization | |
| EP2198954B1 (en) | Packing material for liquid chromatography and process for separation and purification of biopolymer by means of the packing material | |
| Fan et al. | Cyromazine imprinted polymers for selective stir bar sorptive extraction of melamine in animal feed and milk samples | |
| JP3493706B2 (ja) | クロマトグラフィー用吸着担体 | |
| Fouad et al. | An insight into chiral monolithic stationary phases for enantioselective high‐performance liquid chromatography applications | |
| US20100041878A1 (en) | Optical Isomer separating filler | |
| Kuroda et al. | Liquid Chromatography with Aminopropylsilica Gel Modified by Heptakis (2, 3, 6-tri-O-methyl)-. BETA.-cyclodextrin Derivative. | |
| Carbonnier et al. | Coating of porous silica beads by in situ polymerization/crosslinking of 2‐hydroxypropyl β‐cyclodextrin for reversed‐phase high performance liquid chromatography applications | |
| Lin et al. | Chemically bonded cyclodextrin silica stationary phases for liquid chromatographic separation of some disubstituted benzene derivatives | |
| Ahmed et al. | Application of native and hydroxypropyl-substituted β-cyclodextrin bonded silica gel as stationary phases for high performance liquid chromatography | |
| Liao et al. | Enantioselective polymeric transporters for tryptophan, phenylalanine, and histidine prepared using molecular imprinting techniques | |
| Dai et al. | Cyclodextrin-based chiral stationary phases for high-performance liquid chromatography | |
| JPH04106101A (ja) | シクロデキストリンポリマーおよびその製造方法 | |
| JP3263986B2 (ja) | クロマトグラフィー用吸着担体 | |
| JPH06308108A (ja) | クロマトグラフィー用吸着担体及びその製造方法 | |
| JPH05264531A (ja) | クロマトグラフィー用吸着担体 | |
| Carbonnier et al. | High-performance liquid chromatographic enantioseparation of flavanones on 2-hydroxy-3-methacryloyloxypropyl β-cyclodextrin copolymer coated silica phase | |
| EP0644189B1 (en) | Resolution of stereoisomers of aliphatic epoxides | |
| JP3291123B2 (ja) | 分離剤の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091121 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121121 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121121 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131121 Year of fee payment: 10 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |