JP3287941B2 - Aqueous dispersion of stable liposomes - Google Patents
Aqueous dispersion of stable liposomesInfo
- Publication number
- JP3287941B2 JP3287941B2 JP02542894A JP2542894A JP3287941B2 JP 3287941 B2 JP3287941 B2 JP 3287941B2 JP 02542894 A JP02542894 A JP 02542894A JP 2542894 A JP2542894 A JP 2542894A JP 3287941 B2 JP3287941 B2 JP 3287941B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- liposome
- weight
- xylo
- lecithin
- oligosaccharide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、リポソームの水分散液
に係り、特には、レシチンとキシロオリゴ糖との複合体
をリポソーム膜の主成分として含有する安定性に優れた
リポソームの水分散液に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to an aqueous dispersion of liposomes, and more particularly to an aqueous dispersion of liposomes excellent in stability containing a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide as a main component of a liposome membrane. .
【０００２】[0002]
【従来の技術】脂質の閉鎖小胞であるリポソームは、元
来、生体膜モデルとしてその物理化学的諸性質を研究す
るために利用されてきた。一方、その内水層や脂質膜内
に各種物質を保持させることができるため、近年ドラッ
グ・デリバリー・システム（ＤＤＳ）としての研究が盛
んに行われている。しかしながら、リポソームは、光、
熱、温度、浸透圧等の影響を敏感に受け、化学的あるい
は物理的変化を起こしやすく、保存中にリポソーム粒子
同士の凝集や融合、さらには沈澱物の生成や不溶物の析
出など、状態変化や機能低下が起こるという欠点があ
る。この状態変化はリポソーム製剤の商品としての価値
を下げることになり、またＤＤＳとしての効果を十分に
発揮させることが難しくなる。このため、リポソーム分
散液を安定に維持することが重要な技術課題となってい
る。2. Description of the Related Art Liposomes, which are closed vesicles of lipids, have been originally used as a biomembrane model for studying various physicochemical properties thereof. On the other hand, since various substances can be retained in the inner water layer and the lipid membrane, research on a drug delivery system (DDS) has been actively conducted in recent years. However, liposomes are light,
Sensitive to heat, temperature, osmotic pressure, etc., it is susceptible to chemical or physical changes, and changes in state during storage, such as aggregation and fusion of liposome particles, generation of precipitates, and precipitation of insolubles There is a drawback that the function is deteriorated. This change in state lowers the commercial value of the liposome preparation, and makes it difficult to sufficiently exert the effect as a DDS. Therefore, maintaining a stable liposome dispersion is an important technical issue.
【０００３】これまでにもリポソームの保存時における
安定性を改良しようとする試みはいくつかなされてい
る。例えば特開昭６４−３１１４号公報では、リン脂質
を含むリポソーム膜成分物質をクロロホルム等の有機溶
媒に溶解させた後、有機溶媒を減圧留去して一旦リピッ
ドフィルムを形成させ、これを水に懸濁させてから多価
アルコールおよび／または糖類を添加してリポソームの
水分散液を調製している。しかしながら、ここでは、得
られたリポソームの低温（５℃）での安定性は詳細に検
討されているものの、室温における長期間の安定性につ
いては十分に検討されていない。Several attempts have been made to improve the stability of liposomes during storage. For example, in JP-A-64-3114, after dissolving a liposome membrane component material containing a phospholipid in an organic solvent such as chloroform, the organic solvent is distilled off under reduced pressure to form a lipid film, which is then dissolved in water. After suspension, a polyhydric alcohol and / or saccharide is added to prepare an aqueous dispersion of liposomes. However, although the stability of the obtained liposomes at low temperature (5 ° C.) has been studied in detail, the long-term stability at room temperature has not been sufficiently studied.
【０００４】また、リポソームは室温下で安定に保存す
ることが困難であるため、これを凍結保存することも試
みられている。例えば特開昭６２−３０７０８号公報に
は、グルコース、ガラクトース、マンノース、マルトー
スおよびマルトトリオースの１種または２種以上と親水
性薬物とを取り込ませたリポソームを該糖類水溶液の存
在下に凍結させることによって凍結・融解に対するリポ
ソーム膜の安定化をはかることが開示されている。しか
しながら、凍結させたリポソームは、使用するたびに融
解しなければならず、使い勝手が悪い。[0004] In addition, since it is difficult to store liposomes stably at room temperature, cryopreservation of liposomes has been attempted. For example, JP-A-62-30708 discloses that a liposome incorporating one or more of glucose, galactose, mannose, maltose and maltotriose and a hydrophilic drug is frozen in the presence of the aqueous saccharide solution. It discloses that the liposome membrane is stabilized against freezing and thawing. However, frozen liposomes must be thawed each time they are used, which is inconvenient.
【０００５】[0005]
【発明が解決しようとする課題】したがって本発明は、
室温レベルの温度域においても長期間に渡り優れた安定
性を示し、それ故簡便に使用できるリポソームの水分散
液を提供することを課題とする。Accordingly, the present invention provides
An object of the present invention is to provide an aqueous dispersion of liposomes which exhibits excellent stability over a long period of time even in a temperature range of room temperature, and which can be easily used.
【０００６】[0006]
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意検討した結果、キシロオリゴ糖が
リポソーム膜の保存安定性を大いに向上させることを見
い出した。これにつきさらに研究した結果、リン脂質の
中でもレシチンをキシロオリゴ糖と組み合わせ、しかも
両者を、単に添加・混合するのではなく、予め複合化さ
せ、この複合体を用いてリポソームを調製すると、該リ
ポソームは室温レベルの温度域においても安定性が顕著
に向上することを見い出し、本発明を完成するに至っ
た。Means for Solving the Problems As a result of intensive studies to solve the above problems, the present inventors have found that xylo-oligosaccharides greatly improve the storage stability of liposome membranes. As a result of further research on this, among the phospholipids, lecithin was combined with xylo-oligosaccharides, and both were preliminarily complexed, not simply added and mixed, and liposomes were prepared using this complex. It has been found that the stability is remarkably improved even in a temperature range of a room temperature level, and the present invention has been completed.
【０００７】すなわち、本発明は、レシチンとキシロオ
リゴ糖との複合体をリポソーム膜の主成分として含有
し、該複合体はレシチンとキシロオリゴ糖とが分子間で
親水性領域と親油性領域とからなる集合体を形成するこ
とにより構成されることを特徴とするリポソームの水分
散液を提供するものである。以下、本発明をさらに詳し
く説明する。That is, the present invention comprises a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide as a main component of the liposome membrane, and the complex comprises a hydrophilic region and a lipophilic region between lecithin and xylo-oligosaccharide. It is intended to provide an aqueous dispersion of liposomes characterized by being formed by forming an aggregate. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
【０００８】本発明で使用するレシチンとは、通常、食
品添加物の分野において乳化剤等として慣用的に使用さ
れるリン脂質の総称をいい、ホスファチジルコリン、ホ
スファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシ
トール、ホスファチィジルセリン、ホスファチジルグリ
セロール、これらのリゾ体等のアシルグリセロ型リン脂
質を指す。本発明のレシチンの起源は植物組織あるいは
動物臓器等の天然物由来のものあるいは化学合成品であ
り、前記各成分および起源は単一種類もしくは混合物と
して使用できる。そのアシル基すなわち脂肪酸残基の炭
素鎖長、炭素−炭素不飽和結合の有無、直鎖状および側
鎖状構造の区別は特に問わないが、好ましくは炭素数が
１４〜２２で、飽和または不飽和の直鎖状脂肪酸の残基
であり、かかる脂肪酸としてミリスチン酸、ペンタデカ
ン酸、パルミチン酸、パルミトオレイン酸、ペンタデカ
ン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、α−お
よびγ−リノレン酸、アラキン酸、ベヘン酸、エルシン
酸等を例示できる。[0008] Lecithin used in the present invention is a general term for phospholipids commonly used as emulsifiers and the like in the field of food additives, and includes phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylinositol, and phosphatidylserine. , Phosphatidylglycerol, and lyso forms thereof. The origin of the lecithin of the present invention is derived from natural products such as plant tissues or animal organs or chemically synthesized products, and the above-mentioned components and sources can be used alone or as a mixture. The carbon chain length of the acyl group, that is, the fatty acid residue, the presence or absence of a carbon-carbon unsaturated bond, and the difference between the linear and side-chain structures are not particularly limited, but are preferably 14 to 22 carbon atoms, and are preferably saturated or unsaturated. Residues of saturated linear fatty acids, such as myristic acid, pentadecanoic acid, palmitic acid, palmitooleic acid, pentadecanoic acid, stearic acid, oleic acid, linoleic acid, α- and γ-linolenic acid, araquine Examples thereof include acid, behenic acid, and erucic acid.
【０００９】本発明において好適に用いられるレシチン
としては、例えば大豆レシチン、菜種レシチン、卵黄レ
シチン、牛脳レシチン、牛肝臓レシチン等の天然物由来
の混合レシチンがある。これらのレシチンはアセトン、
メチルエチルケトン等の有機溶媒を用いてグリセリド等
の混合成分を分別、除去してアシルグリセロ型リン脂質
純度を高めたものが望ましく、また、メタノール、エタ
ノール、プロパノール、ブタノール等の極性有機溶媒を
用いて分別し、ホスファチジルコリン含量を高め、好ま
しくは前記アシルグリセロ型リン脂質中の含量が１０重
量％以上、好ましくは２０重量％〜１００重量％である
ものがよい。さらにまた、本発明で用いるレシチンは、
安定性、色調、臭気等を改善するために水素添加処理を
施したものがよい。なお、これら天然物由来のレシチン
は、製品としてスフィンゴミエリン等のアシルグリセロ
型以外のリン脂質を含むことがあるが、該リン脂質は本
発明の複合体の形成に何ら影響を与えない。The lecithin suitably used in the present invention includes, for example, mixed lecithin derived from natural products such as soybean lecithin, rapeseed lecithin, egg yolk lecithin, bovine brain lecithin, and bovine liver lecithin. These lecithins are acetone,
It is desirable to separate and remove mixed components such as glyceride using an organic solvent such as methyl ethyl ketone to increase the purity of acylglycerophospholipids, and to separate using a polar organic solvent such as methanol, ethanol, propanol, and butanol. The phosphatidylcholine content is increased, and preferably, the content in the acylglycero-type phospholipid is 10% by weight or more, preferably 20% by weight to 100% by weight. Furthermore, the lecithin used in the present invention is:
Those which have been subjected to a hydrogenation treatment to improve stability, color tone, odor and the like are preferred. The lecithin derived from these natural products may contain a phospholipid other than acylglycero type such as sphingomyelin as a product, but the phospholipid does not affect the formation of the complex of the present invention.
【００１０】一方、化学合成レシチンとしては、前記脂
肪酸の１種または２種の残基を有するアシルグリセロリ
ン脂質であり、１，２−ジミリストイル−３−ホスファ
チジルコリン、１，２−ジパルミトイル−３−ホスファ
チジルコリン、１，２−ジステアロイル−３−ホスファ
チジルコリン、１，２−ジオレイルホスファチジルコリ
ン、１，２−ジリノレオイル−３−ホスファチジルコリ
ン、１，２−ジベヘノイル−３−ホスファチジルコリ
ン、１−パルミトイル−２−オレオイル−３−ホスファ
チジルコリン、１−オレオイル−２−パルミトイル−３
−ホスファチジルコリン、１−ステアロイル−２−オレ
オイル−３−ホスファチジルコリン、１−オレオイル−
２−ステアロイル−３−ホスファチジルコリン、１，２
−ジミリストイル−３−ホスファチジルエタノールアミ
ン、１，２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルエタ
ノールアミン、１，２−ジステアロイル−３−ホスファ
チジルエタノールアミン、１−パルミトイル−２−オレ
オイル−３−ホスファチジルエタノールアミン、１−パ
ルミトイル−２−リノレノイル−３−ホスファチジルエ
タノールアミン、１，２−ジパルミトイル−３−ホスフ
ァチジルセリン、１，２−ジオレオイル−３−ホスファ
チジルセリン、１，２−ジミストイル−３−ホスファチ
ジルグリセロール、１，２−ジパルミトイル−３−ホス
ファチジルグリセロール、１，２−ジステアロイル−３
−ホスファチジルグリセロール、１，２−ジオレオイル
−３−ホスファチジルグリセロール等が好適である。な
おこれらのアシルグリセロ型リン脂質は、ホスファチジ
ルコリンを１０重量％以上、より好ましくは２０〜１０
０重量％の割合で含むことが望ましい。また天然物由来
のものと同様にこれらを水素添加処理して使用すること
もできる。On the other hand, chemically synthesized lecithins are acylglycerophospholipids having one or two kinds of residues of the above-mentioned fatty acids, such as 1,2-dimyristoyl-3-phosphatidylcholine, 1,2-dipalmitoyl-3-acid. Phosphatidylcholine, 1,2-distearoyl-3-phosphatidylcholine, 1,2-dioleylphosphatidylcholine, 1,2-dilinoleoyl-3-phosphatidylcholine, 1,2-dibehenoyl-3-phosphatidylcholine, 1-palmitoyl-2-oleoyl- 3-phosphatidylcholine, 1-oleoyl-2-palmitoyl-3
-Phosphatidylcholine, 1-stearoyl-2-oleoyl-3-phosphatidylcholine, 1-oleoyl-
2-stearoyl-3-phosphatidylcholine, 1,2
-Dimyristoyl-3-phosphatidylethanolamine, 1,2-dipalmitoyl-3-phosphatidylethanolamine, 1,2-distearoyl-3-phosphatidylethanolamine, 1-palmitoyl-2-oleoyl-3-phosphatidylethanolamine , 1-palmitoyl-2-linolenoyl-3-phosphatidylethanolamine, 1,2-dipalmitoyl-3-phosphatidylserine, 1,2-dioleoyl-3-phosphatidylserine, 1,2-dimistoyl-3-phosphatidylglycerol, 1 , 2-Dipalmitoyl-3-phosphatidylglycerol, 1,2-distearoyl-3
-Phosphatidylglycerol, 1,2-dioleoyl-3-phosphatidylglycerol and the like are preferred. These acylglycerophospholipids contain phosphatidylcholine in an amount of 10% by weight or more, more preferably 20 to 10%.
Desirably, it is contained in a proportion of 0% by weight. They can also be hydrogenated and used in the same manner as those derived from natural products.
【００１１】本発明においてレシチンとともにリポソー
ム膜の主成分をなすキシロオリゴ糖は、五炭糖であるキ
シロースがβ−１，４結合で連結している二糖ないし十
数糖の重合度の糖質の総称であり、キシロビオース（重
合度２：Ｘ2 ）であればβ−Ｄ−キシロピラノシル−
（１→４）−Ｄ−キシロピラノースであり、キシロトリ
オース（重合度３：Ｘ3 ）であればβ−Ｄ−キシロピラ
ノシル−（１→４）−Ｄ−キシロピラノシル−（１→
４）−Ｄ−キシロピラノースであり、他にキシロテトラ
オース（重合度４：Ｘ4 ）やキシロペンタオース（重合
度５：Ｘ5 ）、キシロヘキサオース（重合度６：Ｘ
6 ）、キシロヘプタオース（重合度７：Ｘ7 ）、キシロ
オクタオース（重合度８：Ｘ8 ）、キシロノナオース
（重合度９：Ｘ9 ）、キシロデカオース（重合度１０：
Ｘ10）、キシロウンデカオース（重合度１１：Ｘ11）、
キシロドデカオース（重合度１２：Ｘ12）、キシロトリ
デカオース（重合度（１３：Ｘ13）を挙げることができ
る（以下、これらオリゴ糖を総称してキシロビオース以
上のオリゴ糖ということがある）。In the present invention, the xylo-oligosaccharide which forms the main component of the liposome membrane together with lecithin is a saccharide having a degree of polymerization of a disaccharide or a dodecasaccharide in which xylose, a pentose, is linked by β-1,4 bonds. Xylobiose (polymerization degree 2: X 2 ) is a generic term for β-D-xylopyranosyl-
(1 → 4) -D-xylopyranose, and xylotriose (degree of polymerization 3: X 3 ), β-D-xylopyranosyl- (1 → 4) -D-xylopyranosyl- (1 →
4) a -D- xylopyranose, other xylotetraose (polymerization degree 4: X 4) and xylo maltopentaose (polymerization degree 5: X 5), xylo maltohexaose (polymerization degree 6: X
6), xylo maltoheptaose (polymerization degree 7: X 7), xylo octa ose (polymerization degree 8: X 8), Kishirononaosu (degree of polymerization 9: X 9), xylo deca ose (polymerization degree 10:
X 10 ), xyloundecaose (degree of polymerization 11: X 11 ),
Xylo dodeca Orth (polymerization degree 12: X 12), xylo tridecanol ose (polymerization degree (13: X 13) can be exemplified (hereinafter, sometimes referred to more oligosaccharide xylobiose these are collectively oligosaccharides) .
【００１２】本発明のキシロオリゴ糖の起源は、キシラ
ンを含有している天然物であればほとんど使用可能であ
るが、経済的な制約から原料の中でもキシラン含有量が
多いものが好ましい。特に好ましい原料としては、バカ
ス、トウモロコシの芯、シラカバ、ブハなどの広葉樹、
綿実殻が挙げられる。The source of the xylo-oligosaccharide of the present invention can be used almost exclusively as long as it is a natural product containing xylan. However, from the viewpoint of economical restrictions, a raw material having a high xylan content is preferable. Particularly preferred raw materials include hardwood such as bacas, corn core, birch, and bha,
Cottonseed shells.
【００１３】本発明において用いられるキシロオリゴ糖
製品としては、液状品でも粉末品でもよく、キシロビオ
ース以上のオリゴ糖を液状品の場合は固形分中、粉末品
の場合は粉末中７０重量％以上、好ましくは８０重量％
以上、より好ましくは９５重量％以上含有しているもの
が望ましい。The xylo-oligosaccharide product used in the present invention may be a liquid product or a powder product. The oligosaccharide of xylobiose or more is preferably contained in a solid content in the case of a liquid product, and 70% by weight or more in a powder in the case of a powder product. Is 80% by weight
It is desirable that the content be at least 95% by weight.
【００１４】したがって、製品としてのキシロオリゴ糖
はキシロビオース以上のオリゴ糖以外の成分として、例
えば、キシロースやグルコース等の単糖を３０重量％以
下、好ましくは２０重量％以下、より好ましくは５重量
％以下であれば含有してもよい。これらキシロビオース
以上のオリゴ糖以外の糖成分は、本発明の複合体の調製
に何ら悪影響を及ぼさない。Accordingly, the xylooligosaccharide as a product is a component other than oligosaccharides of xylobiose or higher, for example, monosaccharide such as xylose or glucose at 30% by weight or less, preferably 20% by weight or less, more preferably 5% by weight or less. May be contained. These sugar components other than oligosaccharides of xylobiose or more have no adverse effect on the preparation of the complex of the present invention.
【００１５】さらに、キシロビオース以上のオリゴ糖と
しては、キシロビオース、キシロトリオース、キシロテ
トラオースが好ましく、本発明において用いられる製品
としてのキシロオリゴ糖は、液状品の場合は固形分中、
また粉末品の場合は粉末中、キシロビオースを３０重量
％以上、好ましくは５０重量％以上含有しているもの、
またはキシロオリオース以上のキシロオリゴ糖を３０重
量％以上、好ましくは６０重量％以上含有しているもの
が望ましい。Xylobiose, xylotriose and xylotetraose are preferred as oligosaccharides of xylobiose or higher. Xylooligosaccharides as products used in the present invention are, in the case of liquid products, in solids content.
In the case of a powder product, the powder contains xylobiose in an amount of 30% by weight or more, preferably 50% by weight or more,
Alternatively, those containing xylo-oligosaccharides of at least 30% by weight, preferably at least 60% by weight, of xylo-oliose or more are desirable.
【００１６】また、本発明において用いられるキシロオ
リゴ糖製品としては、液状品の場合は固形分中、または
粉末品の場合は粉末中、キシロビオース以上のオリゴ糖
を７０重量％以上、好ましくは８０重量％以上、より好
ましくは９５重量％以上含有し、かつキシロビオース以
上のオリゴ糖として少なくともキシロビオースを３０重
量％以上、好ましくは５０重量％以上有するか、または
少なくともキシロトリオース以上のオリゴ糖を３０重量
％以上、好ましくは６０重量％以上有するものが望まし
い。The xylo-oligosaccharide product used in the present invention may contain at least 70% by weight, preferably 80% by weight of oligosaccharides of xylobiose or more in a solid content in the case of a liquid product or in a powder in the case of a powdery product. Above, more preferably 95% by weight or more, and at least 30% by weight or more of xylobiose as an oligosaccharide not less than xylobiose, preferably 50% by weight or more, or 30% by weight or more of an oligosaccharide not less than xylotriose , Preferably 60% by weight or more.
【００１７】本発明のキシロオリゴ糖製品として、具体
的にはサントリー（株）製キシロビオースミクスチャー
（液状品：固形分７５重量％以上、固形分中の単糖が２
８重量％以下、固形分中のキシロビオースが５６重量％
以上、固形分中のキシロトリオース以上のオリゴ糖が２
４重量％以下）やサントリー（株）製キシロオリゴ９５
（液状品：固形分７５重量％±１重量％、固形分中のキ
シロオリゴ糖が９５重量％以上）、あるいはサントリー
（株）製キシロオリゴ７０（液状品：固形分７５重量％
±１重量％、固形分中のオリゴ糖が７０重量％以上）が
使用できる。As the xylo-oligosaccharide product of the present invention, specifically, xylobiose mixture manufactured by Suntory Ltd. (liquid product: solid content of 75% by weight or more, solid content of 2% or more)
8% by weight or less, xylobiose in solid content is 56% by weight
As described above, oligosaccharides of xylotriose or more in solid content are 2
4% by weight or less) or Suntory Ltd. Xylooligo 95
(Liquid product: solid content of 75% by weight ± 1% by weight, xylooligosaccharide in the solid content is 95% by weight or more), or Xilioligo 70 manufactured by Suntory Ltd. (Liquid product: 75% by weight of solid content)
± 1% by weight, and the oligosaccharide in the solid content is 70% by weight or more).
【００１８】さて、本発明においては、上記レシチンと
キシロオリゴ糖とをリポソーム膜の主成分として用いる
のであるが、既述のように、それらを単に混合して用い
るのではなく、両者を予め複合化して用いる。レシチン
とキシロオリゴ糖を単に混合しても所期の効果は達成さ
れないのである。In the present invention, the above-mentioned lecithin and xylo-oligosaccharide are used as the main components of the liposome membrane. However, as described above, these are not simply mixed and used, but they are previously complexed. Used. Simply mixing lecithin and xylo-oligosaccharides does not achieve the desired effect.
【００１９】そのような本発明のレシチンとキシロオリ
ゴ糖との複合体（以下、単に複合体ということがあ
る。）は、例えば次のようにして製造することができ
る。すなわち、キシロオリゴ糖を１〜２０重量％、好ま
しくは３〜１０重量％の範囲内で含む水溶液中に、レシ
チンを１〜２５重量％、好ましくは５〜１５重量％の範
囲内で添加し、均一に攪拌する。このとき、レシチンと
キシロオリゴ糖との比率（レシチン：アシルグリセロ型
リン脂質／キシロオリゴ糖：キシロビオース以上のオリ
ゴ糖）が、重量比で、通常３０／７０〜９５／５、好ま
しくは４０／６０〜８０／２０、最も好ましくは５０／
５０〜７０／３０となるように配合する。得られた水溶
液を超音波発生装置や高圧ホモジナイザー等による複合
化処理に供した後、乾燥し、複合体を得る。ここに乾燥
方法としては、噴霧乾燥、真空凍結乾燥、瞬間真空乾燥
などがあり、適宜採用すればよい。なお複合体は、粉末
状態として得ることが以降のリポソーム調製段階におけ
る膨潤性の点から好ましく、またその粒子径はなるべく
小さいこと、具体的には０．１〜２ｍｍ程度が望まし
い。Such a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide of the present invention (hereinafter sometimes simply referred to as a complex) can be produced, for example, as follows. That is, lecithin is added to an aqueous solution containing xylo-oligosaccharide in the range of 1 to 20% by weight, preferably 3 to 10% by weight, in the range of 1 to 25% by weight, preferably 5 to 15% by weight. And stir. At this time, the ratio of lecithin to xylo-oligosaccharide (lecithin: acylglycero-type phospholipid / xylo-oligosaccharide: oligosaccharide of xylobiose or more) is usually 30/70 to 95/5, preferably 40/60 to 80 by weight ratio. / 20, most preferably 50 /
It mix | blends so that it may be set to 50-70 / 30. The obtained aqueous solution is subjected to a complexing treatment using an ultrasonic generator, a high-pressure homogenizer, or the like, and then dried to obtain a complex. Here, as a drying method, there are spray drying, vacuum freeze drying, instantaneous vacuum drying, and the like, and may be appropriately adopted. The complex is preferably obtained in a powder state from the viewpoint of swelling in the subsequent liposome preparation step, and the particle size is preferably as small as possible, specifically, about 0.1 to 2 mm.
【００２０】このようにして得られる本発明の複合体
は、構造的には十分解明されていないが、おそらくレシ
チンとキシロオリゴ糖とが特異的に分子間で親水性領域
と親油性領域とから成る集合体を形成し、複合体全体と
してレシチン単独の場合に比べてさらに強力な親水的お
よび親油的機能を有する界面活性組成物となったもので
あろうと推測される。The conjugate of the present invention thus obtained is not sufficiently elucidated in structure, but probably comprises lecithin and xylo-oligosaccharide specifically and intermolecularly, a hydrophilic region and a lipophilic region. It is presumed that an aggregate was formed, and the entire complex would be a surfactant composition having stronger hydrophilic and lipophilic functions than the case of lecithin alone.
【００２１】次に、リポソームの水分散液は公知の方法
により製造でき、例えばジャーナル・オブ・モレキュラ
ー・バイオロジーＶｏｌ．１３、２３８頁（１９６５
年）に記載された方法に準じて行うことができる。すな
わち、レシチンとキシロオリゴ糖との複合体を含むリポ
ソーム膜成分物質をクロロホルム、ジメチルスルホキサ
イド、ジメチルホルムアミド等の適当な有機溶媒に溶解
させた後、溶媒を減圧留去してリピッドフィルムを形成
させ、これを水に懸濁させてリポソーム水分散液を製造
することができる。Next, the aqueous dispersion of the liposome can be produced by a known method, for example, Journal of Molecular Biology Vol. 13, 238 (1965)
Year)). That is, a liposome membrane component substance containing a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide is dissolved in an appropriate organic solvent such as chloroform, dimethyl sulfoxide, or dimethylformamide, and the solvent is distilled off under reduced pressure to form a lipid film. This can be suspended in water to produce an aqueous liposome dispersion.
【００２２】前記リポソーム膜成分物質は、本発明の複
合体の他に、リポソーム膜の安定化剤としてコレステロ
ール、コレスタノール、カンペステロール、スティグマ
ステロール、シトステロール等のステロール類を、荷電
物質としてジセチルホスフェート、ホスファチジン酸、
ガングリオシド、ステアリルアミン等を、また酸化防止
剤としてＬ−アスコルビン酸パルミテート、Ｌ−アスコ
ルビン酸ステアレート、トコフェロールなどがあり、好
ましくはＤ体またはＤＬ体のα、β、γおよびδ−トコ
フェロールのうちの１種もしくは２種以上のトコフェロ
ール類等をそれぞれ必要に応じて加えてもよい。かかる
リポソーム膜成分物質の各成分比率は特に限定されるも
のではないが、好ましくはリポソーム膜成分物質全量に
対してステロール類は０〜０．５重量％程度、荷電物質
は０〜０．２重量％程度、酸化防止剤は０〜０．２重量
％程度である。リポソーム膜成分物質に湿る本発明の複
合体の割合は９０重量％以上、好ましくは９５〜９９重
量％である。そしてリポソームを形成させるための本発
明の複合体の使用量は、通常、水に対して０．１〜１０
重量％、好ましくは０．１〜５重量％である。０．１重
量％未満では良好なリポソームを形成せず、他方１０重
量％を超えて添加してもそれに見合う効果が得られず不
経済となる。In addition to the complex of the present invention, the liposome membrane component substance may be a liposome membrane stabilizer such as sterols such as cholesterol, cholestanol, campesterol, stigmasterol and sitosterol, and dicetyl phosphate as a charged substance. , Phosphatidic acid,
Ganglioside, stearylamine, and the like; and antioxidants such as L-ascorbic acid palmitate, L-ascorbic acid stearate, and tocopherol, and preferably D-form or DL-form α, β, γ, and δ-tocopherol. One or more tocopherols may be added as needed. The ratio of each component of the liposome membrane component substance is not particularly limited, but preferably, the sterols are about 0 to 0.5% by weight and the charged substance is 0 to 0.2% by weight based on the total amount of the liposome membrane component substance. % And the antioxidant is about 0 to 0.2% by weight. The proportion of the complex of the present invention wetted by the liposome membrane component substance is 90% by weight or more, preferably 95 to 99% by weight. The amount of the complex of the present invention used to form liposomes is usually 0.1 to 10 with respect to water.
%, Preferably 0.1 to 5% by weight. If the amount is less than 0.1% by weight, no good liposome is formed. On the other hand, if the amount exceeds 10% by weight, a corresponding effect cannot be obtained, which is uneconomical.
【００２３】かくして調製されるリポソームの水分散液
は、その安定性をさらに増大させるため１価の塩基性物
質または酸性物質を用いてｐＨを中性付近、好ましくは
ｐＨ６．０〜８．０程度に調節することが望ましい。１
価の塩基性物質としては水酸化カリウム、水酸化ナトリ
ウム、水酸化リチウム等の水酸化物、トリエチルアミ
ン、トリメチルアミン、ジイソプロパノールアミン、ジ
エタノールアミン、トリエタノールアミン、テトラメチ
ルアミン等のアミン類、好ましくは水酸化カリウム、水
酸化ナトリウム等の水酸化物を例示することができる。
１価の酸性物質としては塩酸、硝酸、臭化水素酸、ヨウ
化水素酸等を、好ましくは塩酸、硝酸等を例示すること
ができる。なおリポソームの水分散液中に共存するリポ
ソーム以外の陽イオン性物質は１価のものが望ましい。
またその濃度は可及的少量にすることがリポソームの安
定性の点から好ましく、具体的には約２０ｍＭ濃度以下
である。The aqueous dispersion of the liposome thus prepared is adjusted to a neutral pH, preferably about 6.0 to 8.0, using a monovalent basic substance or an acidic substance in order to further increase its stability. It is desirable to adjust to. 1
As the monovalent basic substance, hydroxides such as potassium hydroxide, sodium hydroxide, and lithium hydroxide; amines such as triethylamine, trimethylamine, diisopropanolamine, diethanolamine, triethanolamine, and tetramethylamine; Hydroxides such as potassium and sodium hydroxide can be exemplified.
Examples of the monovalent acidic substance include hydrochloric acid, nitric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid and the like, preferably hydrochloric acid, nitric acid and the like. The cationic substance other than the liposome coexisting in the aqueous dispersion of the liposome is preferably monovalent.
The concentration is preferably as small as possible from the viewpoint of the stability of the liposome, and specifically, it is about 20 mM or less.
【００２４】本発明のリポソームは、医薬、食品、農
薬、化粧料等としての活性成分をその親・疎水性に応じ
て、内水相内、リポソーム膜内に安定に保持することが
でき、医薬品、医薬部外品、機能性食品、食品、農薬、
化粧品の分やにおいて利用することができる。The liposome of the present invention can stably hold an active ingredient as a drug, food, pesticide, cosmetic or the like in an internal aqueous phase or a liposome membrane according to its hydrophilicity or hydrophobicity. , Quasi-drugs, functional foods, food, pesticides,
It can be used for cosmetics.
【００２５】本発明のリポソームに保持させる活性成分
は、従って疎水性物質でも親水性物質でもよく、または
両者の混合物でもよい。そのような活性成分としては、
例えば、ビタミンＡ、Ｂ1 、Ｂ2 、Ｂ6 、Ｂ12、Ｃ、
Ｄ、Ｅ、Ｋ、ＭおよびＱ、パントテニールアルコール、
パントテン酸カルシウム、ニコチン酸ベンジル、ヘスペ
リジン、ヘスペリチン等のビタミン類およびその誘導
体、アラニン、ロイシン、リジン、アスパラギン、アス
パラギン酸、システイン、プロリン、グルタミン、セリ
ン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、チロシン、
イソロイシン、バリン等のアミノ酸およびその誘導体、
リノール酸、α−およびγ−リノレン酸、ジホモ−γ−
リノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ド
コサヘキサエン酸、ミード酸、プロスタグランジン、プ
ロスタサイクリン、ロイコトリエン等の多価不飽和脂肪
酸およびその誘導体をあげることができる。また、他の
活性成分として、ピロリドンカルボン酸、グリチルリチ
ン、ビサボロール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼ
トニウム、パラベンエステル、メントール、レゾルシ
ン、ヒノキチオール、スクワレン、アントラニル酸、尿
素、副腎皮質ホルモン、卵胞ホルモン、エストロゲン、
アンドロゲン、チロキシン、脳下垂体ホルモン、脳下垂
体後葉抽出物、胸腺ホルモン、胎盤性ゴナドトロピン、
ε−アミノカプロン酸、アラントイン、ハロカルバン、
カンフル、塩化ヒドロキシアンモニウム、グルタオチン
とその誘導体、メチル−２，５−ジイソプロピル桂皮酸
エステル、パラアミノ安息香酸エステル、ビス（２−ピ
リジルオール−１−オキシド）亜鉛、アミノフェノール
型抗ヒスタミン剤、エストラジオール、エチルエストラ
ジオール、サリチル酸及びその誘導体、塩酸ジフェンド
ラミン、イソプロピルメチルフェノール、塩化クロルヘ
キシジン、アラントインクロルヒドロキシアルミニウ
ム、ホモスルファミン、スコボラミン、クロニジン、硫
酸イソソルビド、５−フルオロウラシル、塩化カプニウ
ム、アセチルコリン等も例示できる。The active ingredient retained by the liposome of the present invention may be a hydrophobic substance or a hydrophilic substance, or a mixture of both. Such active ingredients include:
For example, vitamin A, B 1, B 2, B 6, B 12, C,
D, E, K, M and Q, pantothenyl alcohol,
Vitamins and their derivatives such as calcium pantothenate, benzyl nicotinate, hesperidin, hesperitin, alanine, leucine, lysine, asparagine, aspartic acid, cysteine, proline, glutamine, serine, glutamic acid, glycine, histidine, tyrosine,
Amino acids such as isoleucine and valine and derivatives thereof,
Linoleic acid, α- and γ-linolenic acid, dihomo-γ-
Examples include polyunsaturated fatty acids such as linolenic acid, arachidonic acid, eicosapentaenoic acid, docosahexaenoic acid, mead acid, prostaglandin, prostacyclin, leukotriene, and derivatives thereof. In addition, as other active ingredients, pyrrolidone carboxylic acid, glycyrrhizin, bisabolol, benzalkonium chloride, benzethonium chloride, paraben ester, menthol, resorcinol, hinokitiol, squalene, anthranilic acid, urea, corticosteroids, estrogen, estrogen,
Androgen, thyroxine, pituitary hormone, posterior pituitary extract, thymic hormone, placental gonadotropin,
ε-aminocaproic acid, allantoin, halocarban,
Camphor, hydroxyammonium chloride, glutaotine and derivatives thereof, methyl-2,5-diisopropylcinnamate, paraaminobenzoate, bis (2-pyridylol-1-oxide) zinc, aminophenol-type antihistamine, estradiol, ethylestradiol, Salicylic acid and its derivatives, difendramin hydrochloride, isopropylmethylphenol, chlorhexidine chloride, allantoinchlorohydroxyaluminum, homosulfamine, scobolamine, clonidine, isosorbide sulfate, 5-fluorouracil, capnium chloride, acetylcholine and the like can also be exemplified.
【００２６】本発明のリポソームに配合する活性成分の
濃度はその種類と用途により一概には特定できないが、
通常、リポソーム形成に用いる水の全量に対して０．０
００００１〜３０重量％程度である。Although the concentration of the active ingredient to be incorporated in the liposome of the present invention cannot be specified unconditionally depending on its type and use,
Usually, 0.0 to the total amount of water used for liposome formation
It is about 0000-30% by weight.
【００２７】活性成分をリポソーム中に包含させる方法
としては、親水性活性成分の場合にはこれを水に溶解さ
せ、ついでこの水溶液にリピッドフィルムを懸濁させれ
ばよい。また、疎水性活性成分の場合には、これをリポ
ソーム膜成分物質とともに前記有機溶媒中に混合し、溶
媒を除去し、得られたリピッドフィルムを水に懸濁させ
ればよい。かくして活性成分の保持性に優れた安定なリ
ポソーム水分散液が得られる。As a method for incorporating the active ingredient into the liposome, in the case of a hydrophilic active ingredient, this may be dissolved in water, and then the lipid film may be suspended in the aqueous solution. In the case of a hydrophobic active ingredient, it may be mixed with the liposome membrane component substance in the organic solvent, the solvent may be removed, and the obtained lipid film may be suspended in water. Thus, a stable aqueous liposome dispersion having excellent active ingredient retention can be obtained.
【００２８】[0028]
【実施例】以下に実施例および比較例をもって本発明を
さらに詳細に説明するが、本発明はこれらにより何ら制
限されるものではない。 実施例１ 複合体の製造 キシロオリゴ糖（サントリー（株）製、商品名：キシロ
ビオースミクスチャー、固形分含量：７５重量％、キシ
ロビオース含量：６０重量％、キシロトリオース以上の
オリゴ糖含量：２０重量％）２００ｇを３リットルの水
に溶解した。これをホモミキサーで十分攪拌（１０００
ｒｐｍ）しながら粉末状大豆レシチン（日清製油（株）
製、商品名：べイシスＬＰ−２０、ホスファチジルコリ
ン含量：３０重量％）２００ｇを徐々に加え、懸濁液と
した。さらに、超音波発生装置ＵＲ−２００Ｐ（トミー
精工（株）製）を用い、２０ＫＨｚ、２００Ｗの条件下
で超音波処理を行った。この処理中、懸濁液の温度の上
昇を防ぐために１０分間の処理と５分間の停止を繰り返
し、計２時間処理した。ついでこの処理液を噴霧乾燥し
てレシチンとキシロオリゴ糖との複合体（平均粒子径
１．３ｍｍ）３６５ｇを得た。The present invention will be described in more detail with reference to the following examples and comparative examples, but the present invention is not limited thereto. Example 1 Production of Complex Xylooligosaccharide (manufactured by Suntory Ltd., trade name: Xylobiose mixture, solid content: 75% by weight, xylobiose content: 60% by weight, oligosaccharide content of xylotriose or more: 20% by weight) %) Was dissolved in 3 liters of water. This was sufficiently stirred with a homomixer (1000
rpm) while powdered soybean lecithin (Nisshin Oil Co., Ltd.)
(Trade name: Basis LP-20, phosphatidylcholine content: 30% by weight) was gradually added to obtain a suspension. Further, using an ultrasonic generator UR-200P (manufactured by Tommy Seiko Co., Ltd.), ultrasonic treatment was performed under the conditions of 20 KHz and 200 W. During this treatment, the treatment for 10 minutes and the suspension for 5 minutes were repeated in order to prevent the temperature of the suspension from rising, and the treatment was carried out for a total of 2 hours. Then, the treated liquid was spray-dried to obtain 365 g of a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide (average particle diameter: 1.3 mm).
【００２９】実施例２ 複合体の製造 キシロオリゴ糖（サントリー（株）製、商品名：キシロ
オリゴ９５（コーンコブ原料）、固形分含量：７５重量
％、キシロビオース含量：３１重量％、キシロトリオー
ス以上のオリゴ糖含量：６６重量％）５００ｇを１０リ
ットルの水に溶解した。実施例１と同様にホモミキサー
で十分攪拌しながら高純度大豆レシチン（日清製油
（株）製、商品名：ベイシスＬＳ−６０、ホスファチジ
ルコリン含量：６０重量％）１０００ｇを徐々に加え、
懸濁液とした。これを実施例１と同様の超音波処理およ
び噴霧乾燥処理に供し、レシチンとキシロオリゴ糖との
複合体（平均粒子径０．８ｍｍ）１３５０ｇを得た。Example 2 Preparation of Complex Xylooligosaccharide (manufactured by Suntory Ltd., trade name: Xylooligo 95 (raw material of corn cob), solid content: 75% by weight, xylobiose content: 31% by weight, oligo of xylotriose or more) (Sugar content: 66% by weight) was dissolved in 10 liters of water. 1000 g of high-purity soybean lecithin (trade name: Basis LS-60, phosphatidylcholine content: 60% by weight, manufactured by Nisshin Oil Co., Ltd.) was gradually added while sufficiently stirring with a homomixer in the same manner as in Example 1.
The suspension was used. This was subjected to the same ultrasonic treatment and spray drying treatment as in Example 1 to obtain 1350 g of a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide (average particle diameter 0.8 mm).
【００３０】実施例３ 実施例１で得られたレシチンとキシロオリゴ糖との複合
体を用いて以下の操作によりリポソームを調製した。Example 3 Using the complex of lecithin and xylo-oligosaccharide obtained in Example 1, liposomes were prepared by the following procedure.
【００３１】実施例１記載の複合体１５ｇ、コレステロ
ール３ｍｇ、ジセチルホスフェート０．４ｍｇおよびＤ
Ｌ−α−トコフェロール１ｍｇをナスフラスコ内で１０
０ミリリットルのクロロホルムに溶解させた後、クロロ
ホルムを減圧留去した。得られた乾燥ペースト状均一混
合物に、あらかじめ０．０１Ｍ硫酸ナトリウム水溶液に
活性成分として０．０５６Ｍ相当量のビタミンＣを溶解
させた水溶液（水酸化ナトリウムでｐＨ７．２に調整）
４００ミリリットルを加え、湯浴中で６０℃に加温して
充分に膨潤させた。ついで同温度に保持したままＴ．
Ｋ．ホモミキサー（特殊機化工業社製）を用いて攪拌
し、均一に分散した後、攪拌を続けながら室温に戻した
ところ、薄青白色のほとんど透明なリポソーム水分散液
が得られた。この水分散液について粒径測定機（サブミ
クロン粒子分析装置、Coulter 社製、モデルＮ４ＳＤ）
を用いてリポソームの平均粒径を測定したところ、１７
４ｎｍであった。また、このリポソーム水分散液は、室
温（２５〜３０℃、以下同じ）で約１年６ヶ月間、凝集
沈澱を生じることなく、状態も変化せず安定であった。15 g of the complex described in Example 1, 3 mg of cholesterol, 0.4 mg of dicetyl phosphate and D
1 mg of L-α-tocopherol was placed in an eggplant flask for 10 minutes.
After dissolving in 0 ml of chloroform, chloroform was distilled off under reduced pressure. An aqueous solution in which 0.056 M equivalent of vitamin C as an active ingredient is previously dissolved in a 0.01 M aqueous sodium sulfate solution (adjusted to pH 7.2 with sodium hydroxide) in the obtained dry paste-like homogeneous mixture.
400 ml was added, and the mixture was heated to 60 ° C. in a hot water bath to sufficiently swell. Then, while maintaining the same temperature, T.V.
K. The mixture was stirred and homogenously dispersed using a homomixer (manufactured by Tokushu Kika Kogyo Co., Ltd.), and then returned to room temperature while stirring was continued to obtain a pale blue-white almost transparent aqueous liposome dispersion. About this aqueous dispersion, a particle size analyzer (submicron particle analyzer, Coulter, model N4SD)
The average particle size of the liposome was measured using
4 nm. The aqueous liposome dispersion was stable at room temperature (25 to 30 ° C., the same applies hereinafter) for about one year and six months without causing aggregation and precipitation and without changing its state.
【００３２】この分散液をセファデックスＧ５０−メデ
ィウムを用いて室温でゲルろ過し、リポソームとリポソ
ームに保持されなかったビタミンＣとを分離した。つい
でリポソームが溶出している画分について、ビタミンＣ
濃度を「化粧品原料基準第２版注解」（第４頁、薬事日
報社、１９８４年発行）に記載の方法（すなわちリポソ
ーム０．２ｇにメタリン酸溶液５０ミリリットルを加
え、デンプン試液を指示薬とし、０．１Ｎヨウ素液で滴
定する。滴定量１ミリリットルがビタミンＣ８．８０６
ｍｇに相当する。）を用いて測定したところ、使用した
ビタミンＣ全量の４７％がリポソームに保持されている
ことが明らかになった。This dispersion was subjected to gel filtration at room temperature using Sephadex G50-Medium to separate liposomes and vitamin C not retained in the liposomes. Then, for the fraction in which the liposome was eluted,
The concentration was determined according to the method described in “Comments on Cosmetic Ingredients, 2nd Edition” (page 4, Yakuji Nippo, 1984) (ie, 50 ml of a metaphosphoric acid solution was added to 0.2 g of liposomes, and a starch reagent was used as an indicator. Titrate with 1N iodine solution, 1 ml of vitamin C 8.806
mg. ) Revealed that 47% of the total amount of vitamin C used was retained in the liposome.
【００３３】実施例４ 実施例２で得られたレシチンとキシロオリゴ糖との複合
体を用いて実施例３と同様の操作によりリポソームを以
下の通り調製した。Example 4 Using the complex of lecithin and xylo-oligosaccharide obtained in Example 2, liposomes were prepared in the same manner as in Example 3 as follows.
【００３４】実施例２に記載の複合体１０ｇ、コレステ
ロール２ｍｇ、ジセチルホスフェート０．２ｍｇ、Ｄ−
ミックストコフェロール０．５ｍｇ、クロロホルム１０
０ミリリットルおよび０．０５６Ｍ相当量のビタミンＣ
を溶解させた０．０１Ｍ硫酸ナトリウム含有水溶液（水
酸化カリウムと塩酸とでｐＨ６．７に調整）４００ミリ
リットル用い、実施例３と同様に処理して薄青白色のほ
とんど透明なリポソーム水分散液を得た。このリポソー
ム水分散液は、実施例３に記載の方法で測定した平均粒
径が１６５ｎｍであり、また室温で約１年９ヶ月間、沈
澱物を生ずることなくまた何ら状態が変化せず安定であ
った。10 g of the complex described in Example 2, 2 mg of cholesterol, 0.2 mg of dicetyl phosphate, D-
Mixed tocopherol 0.5 mg, chloroform 10
0 ml and 0.056 M equivalent of vitamin C
And 400 ml of an aqueous solution containing 0.01 M sodium sulfate (adjusted to pH 6.7 with potassium hydroxide and hydrochloric acid) in which is dissolved, and treated in the same manner as in Example 3 to obtain a pale blue-white almost transparent aqueous liposome dispersion. Obtained. This aqueous liposome dispersion had an average particle size of 165 nm as measured by the method described in Example 3, and was stable at room temperature for about one year and nine months without forming a precipitate and without any change in state. there were.
【００３５】この分散液をセファデックスＧ５０−メデ
ィウムを用いて室温でゲルろ過し、リポソームとリポソ
ームに保持されなかったビタミンＣとを分離した。つい
でリポソームの溶出している画分について、実施例３に
記載の方法で、リポソーム中のビタミンＣ濃度を求めた
ところ、使用したビタミンＣ全量の５８％がリポソーム
に保持されていた。The dispersion was subjected to gel filtration at room temperature using Sephadex G50-Medium to separate liposomes and vitamin C not retained in the liposomes. Next, the concentration of vitamin C in the liposome was determined by the method described in Example 3 for the fraction from which the liposome was eluted. As a result, 58% of the total amount of vitamin C used was retained in the liposome.
【００３６】実施例５ キシロオリゴ糖（キシロオリゴ９５）３０ｇ、粉末状大
豆レシチン（ベイシスＬＰ−２０）２０ｇおよび水２０
０ミリリットルを用い、実施例１と同様の方法によりレ
シチンとキシロオリゴ糖との複合体（平均粒子径１．０
ｍｍ）４４ｇを得た。次いで、この複合体１５ｇ、β−
シトステロール３０ｍｇ、ホスファチジン酸１０ｍｇ、
Ｄ−α−トコフェロール２０ｍｇ、クロロホルム１００
ミリリットルおよび０．０２Ｍ硫酸ナトリウム水溶液
（水酸化ナトリウムおよび塩酸でｐＨ７．０に調整）２
００ミリリットルを用い、実施例３と同様に処理し、薄
白色のほとんど透明なリポソーム水分散液（リポソーム
の平均粒子径：１５０ｎｍ）を得た。Example 5 30 g of xylo-oligosaccharide (xylo-oligo 95), 20 g of powdered soybean lecithin (Basis LP-20) and 20 parts of water
Using 0 ml, a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide (average particle size of 1.0) was prepared in the same manner as in Example 1.
mm) 44 g were obtained. Then, 15 g of this complex, β-
Sitosterol 30 mg, phosphatidic acid 10 mg,
D-α-tocopherol 20 mg, chloroform 100
Milliliter and 0.02 M aqueous sodium sulfate solution (adjusted to pH 7.0 with sodium hydroxide and hydrochloric acid) 2
Using 00 ml, the mixture was treated in the same manner as in Example 3 to obtain a pale white, almost transparent aqueous liposome dispersion (average particle diameter of liposome: 150 nm).
【００３７】実施例６ キシロオリゴ糖（キシロビオースミクスチャー）８ｇ、
高純度水添大豆レシチン（商品名：ベイシスＬＳ−６０
Ｈ、ホスファチジルコリン含量：６０重量％）４０ｇお
よび水１５０ミリリットルを用い、実施例１と同様の方
法によりレシチンとキシロオリゴ糖との複合体（平均粒
子径１．１ｍｍ）４３ｇを得た。次いで、この複合体１
０ｇ、トコフェロール１５ｍｇ、ジセチルホスフェート
５ｍｇ、Ｄ−ミックストコフェロール１０ｍｇ、クロロ
ホルム１００ミリリットルおよび０．０４Ｍ硫酸ナトリ
ウム水溶液（水酸化ナトリウムおよび塩酸でｐＨ７．５
に調整）２００ミリリットルを用い、実施例３と同様に
処理し、薄白色のほとんど透明なリポソーム水分散液
（リポソームの平均粒子径：１７０ｎｍ）を得た。Example 6 Xylooligosaccharide (xylobiose mixture) 8 g,
High purity hydrogenated soy lecithin (trade name: Basis LS-60)
H, 40 g of phosphatidylcholine (60% by weight) and 150 ml of water were used to obtain 43 g of a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide (average particle diameter 1.1 mm) in the same manner as in Example 1. Then, the composite 1
0 g, tocopherol 15 mg, dicetyl phosphate 5 mg, D-mix tocopherol 10 mg, chloroform 100 ml and 0.04 M sodium sulfate aqueous solution (pH 7.5 with sodium hydroxide and hydrochloric acid).
Using 200 ml, the same treatment as in Example 3 was carried out to obtain a pale white, almost transparent aqueous liposome dispersion (average particle diameter of liposome: 170 nm).
【００３８】比較例１ 実施例１と同じ割合で大豆レシチンとキシロオリゴ糖と
を用い、超音波処理のみを行うことなく同様に処理して
乾燥試料を調製した。この試料を用いて実施例３と同様
の操作、条件によりリポソームの水分散液を調製したと
ころ、少し白く濁っているがほとんど透明なリポソーム
水分散液が得られた。このリポソーム水分散液は、室温
で２ヶ月後に沈澱を生じた。Comparative Example 1 A dried sample was prepared by using soybean lecithin and xylo-oligosaccharide at the same ratio as in Example 1 and treating it in the same manner without performing only ultrasonic treatment. Using this sample, an aqueous dispersion of liposomes was prepared by the same operation and under the same conditions as in Example 3. As a result, an aqueous dispersion of liposome which was slightly white and cloudy but was almost transparent was obtained. This aqueous liposome dispersion precipitated after 2 months at room temperature.
【００３９】比較例２ 実施例１記載の粉末状大豆レシチン（ベイシスＬＰ−２
０）１５ｇ、コレステロール２ｍｇ、ジセチルホスフェ
ート０．４ｍｇおよびＤＬ−α−トコフェロール１ｍｇ
をナスフラスコ内で１００ミリリットルのクロロホルム
に溶解させた後、クロロホルムを減圧留去した。得られ
た乾燥ペースト状均一混合物に、０．０１Ｍ硫酸ナトリ
ウム水溶液（水酸化カリウムでｐＨ７．１に調整）４０
０ミリリットルを加え、湯浴中で６０℃に加温して充分
に膨潤させた。ついで実施例３と同様に処理したところ
白濁したリポソーム水分散液が得られた。この水分散液
は室温で半日間静置しておくと白色の沈澱を生じ、リポ
ソームの安定性が乏しいことが明らかになった。Comparative Example 2 The powdery soybean lecithin described in Example 1 (Basis LP-2)
0) 15 g, cholesterol 2 mg, dicetyl phosphate 0.4 mg and DL-α-tocopherol 1 mg
Was dissolved in 100 ml of chloroform in an eggplant-shaped flask, and chloroform was distilled off under reduced pressure. A 0.01 M sodium sulfate aqueous solution (adjusted to pH 7.1 with potassium hydroxide) 40 was added to the obtained dry paste-like homogeneous mixture.
0 ml was added, and the mixture was heated to 60 ° C. in a hot water bath to sufficiently swell. Then, the mixture was treated in the same manner as in Example 3 to obtain a cloudy aqueous liposome dispersion. When this aqueous dispersion was allowed to stand at room temperature for half a day, a white precipitate was formed, indicating that the stability of the liposome was poor.
【００４０】比較例３ 実施例１記載の粉末状大豆レシチン（ベイシスＬＰ−２
０）１５ｇ、コレステロール２ｍｇ、ジセチルホスフェ
ート０．４ｍｇおよびＤＬ−α−トコフェロール１ｍｇ
をナスフラスコ内で１００ミリリットルのクロロホルム
に溶解させた後、クロロホルムを減圧留去した。得られ
た乾燥ペースト状均一混合物に、０．０１Ｍ硫酸ナトリ
ウムと実施例２に記載のキシロオリゴ糖７ｇとを溶解さ
せた水溶液（水酸化カリウムでｐＨ７．１に調整）４０
０ミリリットルを加え、湯浴中で６０℃に加温して充分
膨潤させた。ついで実施例３と同様に処理したところ、
少し白濁しているがほとんど透明なリポソーム水分散液
が得られた。このリポソーム水分散液は、室温で１ヶ月
後に沈澱を生じた。Comparative Example 3 The powdery soybean lecithin described in Example 1 (Basis LP-2)
0) 15 g, cholesterol 2 mg, dicetyl phosphate 0.4 mg and DL-α-tocopherol 1 mg
Was dissolved in 100 ml of chloroform in an eggplant-shaped flask, and chloroform was distilled off under reduced pressure. An aqueous solution (adjusted to pH 7.1 with potassium hydroxide) in which 0.01 M sodium sulfate and 7 g of the xylo-oligosaccharide described in Example 2 are dissolved in the obtained dry paste-like homogeneous mixture 40
0 ml was added, and the mixture was heated to 60 ° C. in a hot water bath to sufficiently swell. Then, when processed in the same manner as in Example 3,
An aqueous dispersion of liposome which was slightly cloudy but almost transparent was obtained. The aqueous liposome dispersion produced a precipitate after one month at room temperature.
【００４１】比較例４ 実施例１と同じ割合で大豆レシチンと、マルトースおよ
びマルトトリオースを混合したマルトオリゴ糖とを用
い、実施例１と同様に超音波処理を行ってレシチンとマ
ルトオリゴ糖との複合体試料を調製した。この試料を用
いて実施例３と同様の操作、条件によりリポソームの水
分散液を調製したところ、少し白濁しているがほとんど
透明なリポソーム水分散液が得られた。このリポソーム
水分散液は、室温で６ヶ月後に沈澱を生じた。Comparative Example 4 Using soybean lecithin and maltooligosaccharide in which maltose and maltotriose were mixed at the same ratio as in Example 1, sonication was carried out in the same manner as in Example 1 to produce a complex of lecithin and maltooligosaccharide. Body samples were prepared. Using this sample, an aqueous dispersion of liposomes was prepared in the same manner and under the same conditions as in Example 3. As a result, an aqueous dispersion of liposome which was slightly opaque but was almost transparent was obtained. The aqueous liposome dispersion precipitated after 6 months at room temperature.
【００４２】[0042]
【発明の効果】以上述べたように、本発明によれば、室
温レベルの温度域においても長期間に渡り優れた安定性
を示すリポソームの水分散液が提供される。本発明のリ
ポソームはレシチンとキシロオリゴ糖との複合体を膜の
主成分として含有するものであり、レシチンおよびキシ
ロオリゴ糖を単に配合したもの、あるいはレシチンンと
キシロオリゴ糖以外の糖類との複合体を配合したものに
比べて、室温レベルの温度域においても長期間に渡り安
定性が顕著に高い。したがって、本発明のリポソームは
製剤としての要件を満足するものであり、簡便に使用で
き、その利用価値は大きく、また各種活性成分を保持さ
せることにより医薬品、機能性食品、食品、農薬、化粧
料等に用いることができる。As described above, according to the present invention, there is provided an aqueous dispersion of liposomes exhibiting excellent stability over a long period of time even at a room temperature. The liposome of the present invention contains a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide as a main component of the membrane, and simply contains lecithin and xylo-oligosaccharide, or contains a complex of lecithin and a saccharide other than xylo-oligosaccharide. Compared with those, stability is remarkably high over a long period of time even in a temperature range of room temperature level. Therefore, the liposome of the present invention satisfies the requirements as a pharmaceutical preparation, can be easily used, has a large utility value, and retains various active ingredients to produce a drug, a functional food, a food, a pesticide, and a cosmetic. Etc. can be used.
フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) A61K 9/127 A61K 47/24 A61K 47/26 A61K 47/36 Continued on the front page (58) Fields surveyed (Int.Cl. 7 , DB name) A61K 9/127 A61K 47/24 A61K 47/26 A61K 47/36
Claims (5)
リポソーム膜の主成分として含有し、該複合体はレシチ
ンとキシロオリゴ糖とが分子間で親水性領域と親油性領
域とからなる集合体を形成することにより構成されるこ
とを特徴とするリポソームの水分散液。1. A liposome membrane comprising a complex of lecithin and xylo-oligosaccharide as a main component, and the complex forms an aggregate of lecithin and xylo-oligosaccharide between a molecule and a hydrophilic region and a lipophilic region. An aqueous dispersion of liposomes, characterized by comprising:
重量％以上含むものである請求項１に記載のリポソーム
の分散液。2. Lecithin is phosphatidylcholine at 10
2. The liposome dispersion according to claim 1, which contains at least% by weight.
ースおよび／またはキシロトリオースを含むものである
請求項１または２に記載のリポソームの水分散液。3. The aqueous liposome dispersion according to claim 1, wherein the xylo-oligosaccharide contains at least xylobiose and / or xylotriose.
を重量比で３０：７０ないし９５：５の割合で含み、該
複合体を０．１〜１０重量％の割合で含有する請求項１
ないし３のいずれか１項に記載のリポソームの分散液。4. The complex according to claim 1, wherein the complex contains lecithin and xylo-oligosaccharide in a weight ratio of 30:70 to 95: 5, and the complex contains 0.1 to 10% by weight.
4. A dispersion of the liposome according to any one of items 3 to 3.
混合物を超音波発生装置または高圧ホモジナイザーによ
る処理に供することによって得られる請求項１ないし４
のいずれか１項に記載のリポソームの分散液。5. The complex according to claim 1, wherein said complex is obtained by subjecting a mixture of lecithin and xylo-oligosaccharide to treatment with an ultrasonic generator or a high-pressure homogenizer.
A dispersion of the liposome according to any one of the above.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP02542894A JP3287941B2 (en) | 1994-02-23 | 1994-02-23 | Aqueous dispersion of stable liposomes |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP02542894A JP3287941B2 (en) | 1994-02-23 | 1994-02-23 | Aqueous dispersion of stable liposomes |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07233049A JPH07233049A (en) | 1995-09-05 |
| JP3287941B2 true JP3287941B2 (en) | 2002-06-04 |
Family
ID=12165703
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP02542894A Expired - Fee Related JP3287941B2 (en) | 1994-02-23 | 1994-02-23 | Aqueous dispersion of stable liposomes |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3287941B2 (en) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100434898B1 (en) * | 2001-06-26 | 2004-06-07 | 나드리화장품주식회사 | Cosmetic composition containing medical plant complex extracts stabilized with liquid crystalsome |
| KR100444196B1 (en) * | 2001-06-26 | 2004-08-11 | 나드리화장품주식회사 | Cosmetic composition containing medical plant complex extracts stabilized with nanoliposome |
| KR100405410B1 (en) * | 2001-08-13 | 2003-11-14 | 코스맥스 주식회사 | Microcapsule of the Indole-3-acetic acid and cosmetic composition thereof |
| KR100490365B1 (en) * | 2002-04-25 | 2005-05-17 | 한불화장품주식회사 | Cosmetics including nanovesicle |
| FR2958851B1 (en) * | 2010-04-16 | 2012-06-29 | Xeda International | NEW ACTIVE INGREDIENT (S) FORMULATIONS OF VEGETABLE ORIGIN OR THEIR SYNTHETIC OR PLANT EXTRACT (S) CONTAINING THEM, AND LECITHIN |
-
1994
- 1994-02-23 JP JP02542894A patent/JP3287941B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH07233049A (en) | 1995-09-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3203358B2 (en) | Double layer formulation | |
| JP3825468B2 (en) | Lipid-based composition containing diacylglycerol, phospholipid, polar liquid and bioactive substance | |
| JP3687277B2 (en) | Whitening cosmetics | |
| WO2018181538A1 (en) | Nanodisc and method for producing same | |
| KR101789132B1 (en) | Cosmetic base comprising collagen-modified liposome and skin cosmetic containing the same | |
| EP2298282B1 (en) | Combination of drugs having different physical properties into single dosage form | |
| EP2471539B1 (en) | Transdermal composition of phosphatidylcholine and method for producing same | |
| JPH0347527A (en) | Method for producing nano-emulsion of oil particle in water phase, manufacture of pharmaceutical and cosmetic agent, and manufacture of nutrition solution for cellculture | |
| EP2437726A2 (en) | Formulations for the treatment of deep tissue pain | |
| JP2798302B2 (en) | Preparation of liposome and lipid complex compositions | |
| US20130267585A1 (en) | Pharmaceutical composition having a cationic excipient | |
| JP2009120584A (en) | Cosmetic composition in form of emulsion comprising continuous aqueous phase and dispersed fatty phase and preparation method thereof | |
| US20110020428A1 (en) | Gel-stabilized liposome compositions, methods for their preparation and uses thereof | |
| JP2005179313A (en) | Method for producing base agent for skin cosmetic, and skin cosmetic | |
| JP3287941B2 (en) | Aqueous dispersion of stable liposomes | |
| EP2407158A1 (en) | Ph-responsive liposome | |
| WO2021192861A1 (en) | Ionic liquid, solvent, preparation, and transdermally absorbable agent | |
| WO2000061113A1 (en) | Lipid aggregate forming compositions and their uses | |
| KR20150004798A (en) | Vesicular Formulations | |
| KR100715311B1 (en) | A cosmeticss to promote the transepidermal absorption and stabilize ursolic acid for anti-wrinkle and its manufacturing method thereof | |
| JP2807840B2 (en) | Stabilization of liposome and phospholipid dispersions | |
| CA2048471C (en) | Water-containing liposome system | |
| JPH035426A (en) | Stable electrolyte-containing lecithin dispersion | |
| HU211991A9 (en) | Liposomal products | |
| WO2021070778A1 (en) | Nanodisc |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110315 Year of fee payment: 9 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |