JP3244509B2 - Indirect agglutination reaction method using magnetic particle carrier - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、磁性粒子担体を用いた
免疫学的な粒子凝集反応分析法に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to an immunological particle agglutination analysis method using a magnetic particle carrier.

【０００２】[0002]

【従来の技術】免疫学的反応を利用した粒子凝集反応に
おいて、マイクロタイター法等の間接凝集反応法は、安
価で、簡便なことから免疫学的検査法の分野において、
広く用いられている測定法である。この方法は赤血球、
高分子粒子、もしくはゼラチン粒子などの表面に、物理
的あるいは化学的に結合した抗原又は抗体と、検体試料
中の抗体又は抗原との免疫学的反応により起こる粒子間
凝集反応を、マイクロプレートなどの測定容器底面での
粒子の凝集状態に基づいて測定するものである。これ
は、粒子が凝集していると測定容器内壁面上での転がり
易さ（又は、滑り易さ）が減少することを利用してい
る。あるいは、さらに積極的に、特開昭６４−６９９５
４号公報に開示されるているように、予め測定容器内壁
面上に抗原や抗体等を結合しておき、粒子と測定容器内
壁面の反応を利用しているものもある。これらの方法
は、微量の試料で測定できるばかりでなく、同時に多く
の検体を処理し得る点で優れた方法と言える。 しかし
ながら、前述の間接凝集反応法は、抗原抗体反応による
シグナルを測定容器底部における粒子の凝集像の差に基
づいて測定するため、測定時間が粒子の沈降速度及び測
定容器内底部での転がり速度に大きく依存する。そこ
で、粒子を磁性化させた磁性粒子担体を用い、単に重力
で沈降させていた操作を、磁石を作用させることにより
促進する方法が考えられている（特開平２−１０７９６
８号公報，特開平２−１２４４６４号公報，特開平２−
２１０２６２号公報）。2. Description of the Related Art In a particle agglutination reaction using an immunological reaction, an indirect agglutination reaction method such as a microtiter method is inexpensive and simple, and therefore, in the field of immunological test methods,
This is a widely used measurement method. This method uses red blood cells,
An antigen or antibody physically or chemically bonded to the surface of a polymer particle or a gelatin particle, and an interparticle agglutination reaction caused by an immunological reaction of the antibody or antigen in the specimen sample with a microplate or the like. The measurement is performed based on the aggregation state of the particles on the bottom surface of the measurement container. This utilizes the fact that if the particles are agglomerated, the ease of rolling (or the ease of sliding) on the inner wall surface of the measurement container is reduced. Alternatively, more positively, Japanese Patent Application Laid-Open No. 64-6995
As disclosed in Japanese Patent Publication No. 4 (1999) -A, there is a method in which an antigen, an antibody, or the like is previously bound to the inner wall surface of the measurement container and the reaction between the particles and the inner wall surface of the measurement container is utilized. These methods can be said to be excellent methods in that not only a small amount of sample can be measured but also many samples can be processed at the same time. However, in the above-described indirect agglutination reaction method, since the signal due to the antigen-antibody reaction is measured based on the difference in the aggregation image of the particles at the bottom of the measurement container, the measurement time is reduced to the sedimentation speed of the particles and the rolling speed at the bottom inside the measurement container. Depends heavily. Therefore, a method has been considered in which the operation of simply sedimentation by gravity is promoted by using a magnet by using a magnetic particle carrier in which particles are magnetized (Japanese Patent Laid-Open No. 2-10796).
No. 8, JP-A-2-124664, JP-A-2-12464
No. 210262).

【０００３】しかし、これらによって開示された免疫学
的測定法は、測定感度あるいは凝集像判定の容易さなど
の点で問題があり、充分なものとは言えない。 一般
に、磁性粒子に磁力を作用させると、磁性粒子は磁化
し、磁性粒子同士が磁気的結合を介して磁力線に沿って
チェーン状につながる。この様な現象は、例えば空気中
で鉄粉に磁石を近づけたような場合にも起こるが、この
場合には鉄粉と空気の比重の差が大きいため、重力の影
響を強く受ける。ところが、鉄粉に比べ比重の小さい磁
性粒子を空気より比重の大きい水系溶媒系に添加した場
合、相対的に重力の影響が小さくなり、より整然と磁力
線に沿って磁性粒子が並ぶ現象を起こす。この様な磁性
粒子の性質により発生する以下のような解決すべき問題
が残っている。 磁性粒子担体に磁力を作用させると、
磁性粒子担体同士が磁気的結合を介して磁力線に沿って
チェーン状につながり、このことが本来の免疫学的な磁
性粒子担体同士の反応、あるいは磁性粒子担体と測定容
器壁面との反応を阻害する形に働くため、測定感度を低
下させる傾向がある。 磁力を作用させることによって
生じた磁性粒子担体のチェーンがほぼ同方向に磁化する
ため、磁気的反発により、この磁性粒子担体のチェーン
同士は、ある程度以上近づけなくなる。このため陰性像
が広がりを持ち、陰性像と弱陽性像との差が小さくな
る。 磁力を作用させ磁性粒子担体の凝集像を判定しよ
うとすると、磁性粒子担体同士が磁気的結合を介して磁
力線に沿ってチェーン状につながるため、即ちこの磁性
粒子担体のチェーンが測定容器底面から上に向かって立
ち上がったようになっているため、凝集像を観察する
と、磁性粒子担体の多くが死角に入り、色が薄くなった
ようになって、判定が困難となる。[0003] However, the immunological measurement methods disclosed by these methods have problems in terms of measurement sensitivity and ease of judging agglutination images, and cannot be said to be sufficient. In general, when a magnetic force is applied to magnetic particles, the magnetic particles are magnetized, and the magnetic particles are connected in a chain along the lines of magnetic force via magnetic coupling. Such a phenomenon also occurs, for example, when a magnet is brought close to iron powder in the air. In this case, however, the difference in specific gravity between the iron powder and air is large, so that the magnetic powder is strongly affected by gravity. However, when magnetic particles having a lower specific gravity than iron powder are added to an aqueous solvent system having a higher specific gravity than air, the effect of gravity becomes relatively small, and a phenomenon occurs in which magnetic particles are arranged more neatly along the lines of magnetic force. The following problems to be solved remain due to the properties of such magnetic particles. When a magnetic force acts on the magnetic particle carrier,
The magnetic particle carriers are connected in a chain along the lines of magnetic force via magnetic coupling, which hinders the original reaction between the immunological magnetic particle carriers or the reaction between the magnetic particle carriers and the wall of the measurement container. Since it acts on the shape, it tends to reduce the measurement sensitivity. Since the chains of the magnetic particle carriers generated by applying the magnetic force are magnetized in substantially the same direction, the chains of the magnetic particle carriers cannot approach each other more than a certain degree due to magnetic repulsion. Therefore, the negative image has a spread, and the difference between the negative image and the weakly positive image is reduced. When trying to determine the aggregation image of the magnetic particle carriers by applying a magnetic force, the magnetic particle carriers are connected in a chain along the line of magnetic force via magnetic coupling, that is, the chains of the magnetic particle carriers move upward from the bottom surface of the measurement container. Therefore, when the aggregated image is observed, most of the magnetic particle carriers enter a blind spot and the color becomes lighter, which makes the determination difficult.

【０００４】本法のような間接凝集反応法は、凝集像を
粒子担体の持つ色の分布に基ずいて判定する方法なの
で、色が明確に判断できないと測定に支障をきたす。陽
性像は粒子担体が一様に分布していれば良いので粒子担
体の色が判別できなくてもそれほど大きな支障はない
が、陰性像あるいは弱陽性像はその色により明確に粒子
担体の分布状態が判定できないと、測定に支障をきた
す。そしてこれは、単純に磁性粒子担体の色を濃くする
とか、磁性粒子担体濃度を濃くするとかいった方法で
は、解決の難しい問題である。 しかし、磁性粒子担体
に磁力を作用させ磁性粒子担体の測定容器内壁面での凝
集像の形成を促進しようとすると、少なくとも一時的に
磁性粒子担体が磁化するため、磁性粒子担体同士が磁気
的に結合することは、簡単には避けられないのである。In the indirect agglutination reaction method such as the present method, the agglutination image is determined based on the color distribution of the particle carrier. Therefore, if the color cannot be clearly determined, the measurement is hindered. Positive images need only to have a uniform distribution of the particle carriers, so there is no major problem if the color of the particle carriers cannot be determined.However, a negative image or a weakly positive image clearly shows the distribution of the particle carriers depending on the color. If it cannot be determined, measurement will be hindered. This is a problem that is difficult to solve by simply increasing the color of the magnetic particle carrier or increasing the concentration of the magnetic particle carrier. However, if a magnetic force is applied to the magnetic particle carriers to promote the formation of an aggregated image of the magnetic particle carriers on the inner wall surface of the measurement container, the magnetic particle carriers are magnetized at least temporarily, so that the magnetic particle carriers are magnetically separated from each other. Combining is inevitable.

【０００５】[0005]

【発明が解決しようとする課題】上記のような現状に鑑
みて本発明者らは、磁性粒子担体を用いた間接凝集反応
法において、磁性粒子担体同士が磁気的に結合すること
により生じる以下の現象に基づく測定上の欠点を解決す
ることを課題とし、鋭意研究を行い本発明を完成するに
至った。In view of the above situation, the present inventors have proposed the following indirect agglutination reaction using magnetic particle carriers, which is caused by magnetic coupling between magnetic particle carriers. The purpose of the present invention is to solve the disadvantages of measurement based on phenomena.

【０００６】第１の課題は、この磁性粒子担体同士の磁
気的結合が、本来の免疫学的な反応である磁性粒子担体
同士あるいは磁性粒子担体と測定容器内壁面との反応を
阻害することにより生じる測定感度の低下をでき得る限
り防ぎ、かつ短時間での測定を可能とすることである。
第２の課題は、磁力を作用させることによって生じる磁
性粒子担体のチェーン（磁性粒子担体が磁力線に沿って
チェーン状につながったもの）が、同方向に磁化し、各
々のチェーン同士が反発し合いある程度以上近づけなく
なるために起こる凝集像（特に陰性像）の広がりを抑え
ることである。The first problem is that the magnetic coupling between the magnetic particle carriers hinders the reaction between the magnetic particle carriers or the magnetic particle carrier and the inner wall surface of the measuring container, which is the original immunological reaction. It is an object of the present invention to prevent the resulting decrease in measurement sensitivity as much as possible and to enable measurement in a short time.
A second problem is that a chain of magnetic particle carriers generated by applying a magnetic force (the magnetic particle carriers are connected in a chain along the line of magnetic force) is magnetized in the same direction, and the chains repel each other. The purpose is to suppress the spread of the aggregated image (especially the negative image) that occurs because the image cannot be approached to some extent.

【０００７】第３の課題は、磁力を作用させ凝集像を判
定する場合、磁性粒子担体が磁力線に沿ってチェーン状
につながり磁性粒子担体の多くが死角に入るため、磁性
粒子担体の測定容器内での分布状態を充分明瞭に判定で
きないという問題を解決することである。A third problem is that when a magnetic force is applied to determine an agglutination image, the magnetic particle carriers are connected in a chain along the lines of magnetic force and most of the magnetic particle carriers enter a blind spot. To solve the problem that the distribution state cannot be determined clearly enough.

【０００８】[0008]

【課題を解決するための手段】本発明は上記課題を解決
するために、磁性粒子担体を用いた間接凝集反応法にお
いて、磁性粒子担体に作用させる磁気ベクトルを時間的
に変化させることを特徴とする間接凝集反応法を提供す
る。磁気ベクトルを時間的に変化させるとは、磁性粒子
担体に作用させる磁力の強さ（磁気ベクトルの大きさ）
あるいは磁力の方向（磁気ベクトルの方向）のいづれか
一方または両方を、時間的に変化させることを意味す
る。Means for Solving the Problems In order to solve the above problems, the present invention is characterized in that in an indirect agglutination reaction method using a magnetic particle carrier, a magnetic vector acting on the magnetic particle carrier is changed with time. To provide an indirect agglutination reaction method. Changing the magnetic vector with time means the strength of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier (magnitude of the magnetic vector)
Alternatively, it means that one or both of the directions of the magnetic force (the directions of the magnetic vectors) are temporally changed.

【０００９】上記の「時間的に変化させる」とは、磁性
粒子担体に磁力を作用させ始めてから凝集像を判定する
までの期間において、磁性粒子担体に作用させる磁気ベ
クトルを、少なくとも１回は変化させることを意味す
る。本発明の最大の特徴は、磁性粒子担体に作用させる
磁気ベクトルを時間的に変化させることである。[0009] The term "temporarily change" means that the magnetic vector applied to the magnetic particle carrier is changed at least once during the period from when magnetic force is applied to the magnetic particle carrier to when the agglutination image is determined. Means to let. The greatest feature of the present invention is that the magnetic vector acting on the magnetic particle carrier is changed with time.

【００１０】磁性粒子担体に作用させる磁力の強さを変
化させることにより、主に磁力を作用させることによる
測定感度の低下を少なくすることが可能になる他、磁性
粒子担体が磁力線に沿ってチェーン状につながり立ち上
がって、磁性粒子担体の分布が不明瞭になってしまうこ
とを防ぐ効果がある。磁性粒子担体に作用させる磁力を
遮断するか充分に弱めると、磁性粒子担体が減磁し、磁
性粒子担体同士の磁気的結合が解離する。これによっ
て、上記のような効果が得られるものと考えられる。[0010] By changing the strength of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier, it is possible to reduce the decrease in the measurement sensitivity mainly due to the action of the magnetic force. This has the effect of preventing the distribution of the magnetic particle carriers from becoming obscured. When the magnetic force acting on the magnetic particle carriers is cut off or sufficiently weakened, the magnetic particle carriers are demagnetized, and the magnetic coupling between the magnetic particle carriers is dissociated. Thus, it is considered that the above effects can be obtained.

【００１１】磁性粒子担体の磁力の方向を時間的に変化
させることにより、主に磁力を作用させることにより陰
性像が広がることを防ぐ効果がある。これは、磁性粒子
担体のチェーン同士が同方向に磁化し、磁気的反発によ
ってこれらチェーン同士がある程度以上近づけなくなる
現象が、磁力の方向が時間的に変化することによって緩
和されるためであると考えられる。または、磁性粒子担
体に作用させる磁力の方向が変化する際に、磁性粒子担
体同士の磁気的結合が一時解離するためであるとも考え
られる。By changing the direction of the magnetic force of the magnetic particle carrier with time, there is an effect that the negative image is prevented from spreading by mainly applying the magnetic force. This is thought to be because the phenomenon that the chains of the magnetic particle carriers are magnetized in the same direction and the chains do not come close to each other due to magnetic repulsion to a certain extent is alleviated by a temporal change in the direction of the magnetic force. Can be Alternatively, it is considered that the magnetic coupling between the magnetic particle carriers is temporarily dissociated when the direction of the magnetic force acting on the magnetic particle carriers changes.

【００１２】磁性粒子担体に作用させる磁力の強さを変
化させることをさらに説明すると、これは、磁力の強さ
を連続的にあるいは断続的にあるいは段階的に変化させ
てもよい。そして、その例としては、一定時間毎に磁力
の強さを変化させること、一定時間毎にある範囲内で磁
力の強さを連続的に変化させること、あるいは磁性粒子
担体に作用させる磁力を一時的に又はしばらく遮断する
こと等が挙げられる。更に、これには磁性粒子担体に磁
力を作用させて凝集像の形成を促進させた後、例えば磁
気発生装置より降ろす等して磁力を遮断し、凝集像を判
定することも含まれる。To further explain changing the strength of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier, this may change the strength of the magnetic force continuously, intermittently, or stepwise. Examples of this include changing the strength of the magnetic force at fixed time intervals, continuously changing the strength of the magnetic force within a certain range at fixed time intervals, or temporarily changing the magnetic force acting on the magnetic particle carrier. For a while or for a while. Further, this includes determining the aggregated image by applying a magnetic force to the magnetic particle carrier to promote the formation of the aggregated image, and then shutting off the magnetic force by, for example, removing the magnetic aggregate from the magnetic generator.

【００１３】磁力の遮断とは、磁力を完全に遮断する必
要はなく、磁性粒子担体に対して磁力が実質的に影響し
ない程度まで弱めればよい。即ち、磁性粒子担体が磁力
線に沿ってチェーン状に並ばない程度にまで弱めればよ
い。磁性粒子担体の強磁性体の含有率、磁性粒子担体の
大きさ等により、この際の磁力の最大値は異なる。磁性
粒子担体に作用させる磁力の強さを時間的に変化させる
方法としては、例えば、使用する磁気発生装置の発生す
る磁力の強さを変化させることによって、あるいは磁気
発生装置または測定容器を移動することによっても達成
することができる。The interruption of the magnetic force does not need to be completely interrupted, but may be reduced to such an extent that the magnetic force does not substantially affect the magnetic particle carrier. That is, the magnetic particles may be weakened to such an extent that the magnetic particle carriers are not arranged in a chain along the lines of magnetic force. The maximum value of the magnetic force at this time differs depending on the content of the ferromagnetic material in the magnetic particle carrier, the size of the magnetic particle carrier, and the like. As a method of temporally changing the intensity of the magnetic force applied to the magnetic particle carrier, for example, by changing the intensity of the magnetic force generated by the magnetic generator used, or by moving the magnetic generator or the measurement container It can also be achieved by:

【００１４】磁性粒子担体に作用させる磁力の方向を変
化させることをさらに説明すると、磁力の方向を連続的
にあるいは断続的に変化させてもよい。そして、その例
としては交番磁界を用いる方法或いは磁力の方向を回転
させる方法が挙げられる。磁性粒子担体に作用させる磁
力の方向を時間的に変化させる方法としては、例えば、
使用する磁気発生装置の発生する磁力の方向を時間的に
変化させることによって、あるいは磁気発生装置又は測
定容器を移動させることによっても達成することができ
る。To further explain changing the direction of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier, the direction of the magnetic force may be changed continuously or intermittently. Examples thereof include a method using an alternating magnetic field and a method of rotating the direction of magnetic force. As a method of temporally changing the direction of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier, for example,
This can also be achieved by changing the direction of the magnetic force generated by the magnetic generator to be used with time, or by moving the magnetic generator or the measuring container.

【００１５】磁性粒子担体に作用させる磁力の強さと方
向を同時に又は、別々の時間に変化させてもよい。磁性
粒子担体に作用させる磁力は、時間軸を止めて考えた場
合（即ち、連続する時間のある瞬間を考えた場合）、不
均一な磁気ベクトルを用いても、均一な磁気ベクトルを
用いてもよい。ここで不均一な磁気ベクトルを用いる方
法とは、磁性粒子担体を磁力により直接吸引する方法で
ある。また、均一な磁気ベクトルを用いる方法とは、磁
性粒子担体に均一な磁気ベクトルを作用させることによ
り磁性粒子担体が重力の影響をより強く受けるようにな
ることを利用して、凝集像の形成を促進させる方法であ
る。The strength and direction of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier may be changed simultaneously or at different times. When the magnetic force acting on the magnetic particle carrier is considered with the time axis stopped (that is, when a moment at a continuous time is considered), it is possible to use a non-uniform magnetic vector or a uniform magnetic vector. Good. Here, the method of using a non-uniform magnetic vector is a method of directly attracting magnetic particle carriers by magnetic force. In addition, the method using a uniform magnetic vector means that a uniform magnetic vector is applied to the magnetic particle carrier so that the magnetic particle carrier is more strongly affected by gravity. It is a way to promote.

【００１６】磁性粒子担体に不均一な磁気ベクトルを作
用させる場合には、磁力の強さを変化させれば、それは
磁力の方向も変化することとなる。本発明の磁性粒子担
体を用いた間接凝集反応法とは、1)試料溶液中の被検物
質と、これに親和性を有する物質を固定化した粒子担体
との反応を、測定容器底面での粒子担体の凝集像として
判定する間接凝集反応において、前記粒子担体として磁
性粒子担体を用い、被検物質を磁性粒子担体に反応さ
せ、同時に又は次いで、当該磁性粒子担体に、磁力を作
用させる工程を包含してなる間接凝集反応法、2)試料溶
液と、試料溶液中の被検物質に親和性を有する物質、及
び試料溶液中の被検物質に対して競合する物質を固定化
した磁性粒子担体とを混合し、両者の反応溶液を形成す
る工程と、測定容器内に収容された前記反応溶液に対
し、前記測定容器中の磁性粒子担体に対して、磁力を作
用させる工程と、磁性粒子担体の前記測定容器壁面領域
での分布状態に基づいて、前記試料溶液中に含まれる前
記被検物質を測定する工程とを包含してなる間接凝集反
応法、或いは3)赤血球内部に強磁性体を封入した磁性粒
子担体を用意し、これと試料溶液とを反応させ、同時に
または次いで、当該磁性粒子担体に磁力を作用させ形成
された凝集像あるいは凝集価により、当該試料溶液中の
被検物質（例えば、ＡＢＯ式血液型抗体あるいは不規則
抗体等の赤血球表面抗原と反応する物質）を測定する間
接凝集反応法、において各磁力を作用させ始めてから凝
集像を観察又は判定するまでの過程で磁気ベクトルを時
間的に変化させる方法を含むものである。In the case of applying a non-uniform magnetic vector to the magnetic particle carrier, if the strength of the magnetic force is changed, the direction of the magnetic force will also change. The indirect agglutination reaction method using the magnetic particle carrier of the present invention is: 1) a reaction between a test substance in a sample solution and a particle carrier on which a substance having an affinity for the substance is immobilized, In the indirect agglutination reaction determined as an agglutination image of the particle carrier, using a magnetic particle carrier as the particle carrier, reacting the test substance with the magnetic particle carrier, simultaneously or subsequently, a step of applying a magnetic force to the magnetic particle carrier Indirect agglutination reaction method, which includes 2) a sample solution and a substance having an affinity for the test substance in the sample solution, and
A substance that competes for the analyte of fine sample solution mixed and immobilized magnetic particle carrier, a step of forming both the reaction solution, to said reaction solution contained in the measurement container, the Applying a magnetic force to the magnetic particle carrier in the measurement container, and measuring the test substance contained in the sample solution based on a distribution state of the magnetic particle carrier in the measurement container wall region. Or 3) preparing a magnetic particle carrier encapsulating a ferromagnetic substance inside erythrocytes, reacting this with a sample solution, and simultaneously or subsequently, applying a magnetic force to the magnetic particle carrier. An indirect agglutination reaction method for measuring a test substance (for example, a substance that reacts with an erythrocyte surface antigen such as an ABO blood group antibody or an irregular antibody) in the sample solution based on an agglutination image or agglutination value formed by the action; In Te is intended to include a method for temporally changing the magnetic vector in the course of up to observing or determining the agglutination image since the start of the action of the magnetic force.

【００１７】いずれの場合においても、被検物質に親和
性を有する物質もしくは被検物質に対して競合する物質
を測定容器内壁面に、予め固定化させた測定容器を用い
ることができる。測定容器内壁面に被検物質に親和性を
有する物質を予め固定化させた場合、試料溶液を当該測
定容器に添加後、試料溶液中の被検物質を予め測定容器
と反応させる工程の後、洗浄する工程は行ってもよく、
又は行わなくてもよい。In any case, it is possible to use a measurement container in which a substance having an affinity for the test substance or a substance that competes with the test substance is immobilized on the inner wall surface of the measurement container in advance. When a substance having an affinity for the test substance is previously immobilized on the inner wall surface of the measurement container, after the sample solution is added to the measurement container, after the step of reacting the test substance in the sample solution with the measurement container in advance , The washing step may be performed,
Alternatively, it may not be performed .

【００１８】予め磁性粒子担体又は測定容器内壁面に被
検物質と競合する物質を固定化させて測定する場合に
は、逆に測定容器内壁面又は磁性粒子担体に被検物質に
親和性を有する物質を固定化するか、試料溶液の希釈液
又は磁性粒子担体の分散液中に被検物質に親和性を有す
る物質を添加しておくことが望ましい。本発明では、便
宜上測定容器内壁面に磁性粒子担体が広がった場合を陽
性、測定容器内壁面の一部に収束した場合を陰性と表現
する。但し、予め磁性粒子担体又は測定容器内壁面に、
被検物質と競合する物質を固定化させて測定する場合、
陽性像と陰性像の前記表現が逆になる場合がある。When a substance competing with the test substance is immobilized on the magnetic particle carrier or the inner wall surface of the measuring container in advance and the measurement is carried out, on the contrary, the inner wall surface of the measuring container or the magnetic particle carrier has an affinity for the test substance. It is desirable to immobilize the substance or to add a substance having an affinity for the test substance to a diluted solution of the sample solution or a dispersion of the magnetic particle carrier. In the present invention, for convenience, the case where the magnetic particle carrier spreads on the inner wall surface of the measurement container is expressed as positive, and the case where it converges on a part of the inner wall surface of the measurement container is expressed as negative. However, beforehand on the magnetic particle carrier or the inner wall of the measurement container,
When measuring by immobilizing a substance that competes with the test substance,
The expression of the positive and negative images may be reversed.

【００１９】磁性粒子担体とは、強磁性体（鉄、コバル
ト、ニッケル等の強磁性金属あるいはこれらを含む合
金、もしくは非磁性体中に前記強磁性金属あるいは強磁
性合金を充分に含有しているもの、または強磁性金属中
あるいは強磁性合金中に非磁性体を含有しているものも
含む）単独で粒子状に成型した磁性粒子担体、もしくは
強磁性体を核としてその表面をポリスチレン、シリカゲ
ル、ゼラチン、ポリアクリルアミド等で被覆した磁性粒
子担体、ポリスチレン、シリカゲル、ゼラチン、ポリア
クリルアミド等に微粉末状の強磁性体を分散させて粒子
状に成型した磁性粒子担体、あるいはポリスチレン、シ
リカゲル、ゼラチン、ポリアクリルアミド等の粒子を核
として強磁性体を被覆した磁性粒子担体、あるいは赤血
球又はマイクロカプセルに強磁性体を封入して調製した
磁性粒子担体を用いることができる。磁性粒子担体は、
色素を被覆もしくは粒子中に分散、封入させ、着色して
もよい。磁性粒子担体は、外部から磁力を作用させてい
る間は磁化し、外部からの磁力の遮断により速やかに減
磁する性質を持つものであることが望ましい。磁性粒子
担体の粒子径は、０．０１〜１００μｍで、好ましくは
０．５〜１０μｍである。磁性粒子担体の比重は、１〜
１０で、好ましくは１〜２である。この様な磁性粒子担
体としては、例えば当分野ですでに免疫磁気分離用担体
としてエンザイムイムノアッセイ、フルオロイムノアッ
セイ、ケミルミネッセンスイムノアッセイ、ラジオイム
ノアッセイ等で用いられている固相担体あるいは細胞分
離用の担体として用いられているものなど何等制限なく
採用することができる。The magnetic particle carrier is a ferromagnetic material (ferromagnetic metal such as iron, cobalt, nickel or the like or an alloy containing them, or a non-magnetic material sufficiently containing the ferromagnetic metal or ferromagnetic alloy). Magnetic particles or magnetic particles or ferromagnetic alloys or ferromagnetic alloys containing a non-magnetic material), or a magnetic particle carrier molded into a single particle, or a ferromagnetic material whose core is polystyrene, silica gel, Magnetic particle carriers coated with gelatin, polyacrylamide, etc., polystyrene, silica gel, gelatin, polya
Acrylamide or the like to a fine powder of a ferromagnetic body by dispersing magnetic particles carrier was molded into particles or polystyrene, silica gel, gelatin, magnetic particle carrier particles polyacrylamide coated ferromagnetic as nuclei, or red blood cells, Alternatively, a magnetic particle carrier prepared by encapsulating a ferromagnetic substance in microcapsules can be used. The magnetic particle carrier is
The dye may be coated or dispersed in the particles, encapsulated, and colored. The magnetic particle carrier desirably has a property of being magnetized while a magnetic force is being applied from the outside, and having a property of being rapidly demagnetized by shutting off the magnetic force from the outside. The particle size of the magnetic particle carrier is 0.01 to 100 μm, preferably 0.5 to 10 μm. The specific gravity of the magnetic particle carrier is 1 to
10, preferably 1 to 2. Such magnetic particle carriers include, for example, solid carriers or carriers for cell separation which are already used in the art as immunomagnetic separation carriers such as enzyme immunoassay, fluoroimmunoassay, chemiluminescence immunoassay, and radioimmunoassay. It can be adopted without any restrictions such as those that are used.

【００２０】試料溶液としては、ヒトあるいは動物の血
液、血清、血漿、尿、髄液、唾液、汗、腹水、羊水、ヒ
トあるいは動物の細胞あるいは臓器の抽出液、ヒトある
いは動物の糞便の抽出液、細胞あるいは菌体の培養液、
抽出液、植物の抽出液、または、これらの希釈液など液
状のものであればどのようなものでも対象となる。被検
物質としては、従来免疫学的測定法により測定されてい
るもの、あるいは測定可能であるものであればいかなる
ものも対象となる。例えばＣＲＰ（Ｃ反応性蛋白）、α
−フェトプロテイン、ＣＥＡ、ＲＦ（リューマチ因
子）、抗マイコプラズマ抗体、各種ホルモン、アレルゲ
ン、レアギン、ＩｇＥ、アルブミン、ヘモグロビン、ウ
イルス関連抗原抗体、その他感染症関連抗原抗体、各種
血液型関連抗原抗体などが挙げられる。特に臨床検査の
場において緊急を要することのある測定項目、例えばＡ
ＢＯ式血液型抗体、不規則抗体、Ｂ型肝炎ウイルス関連
抗原抗体（ＨＢｓ抗原、ＨＢｓ抗体、ＨＢｃ抗体、ＨＢ
ｅ抗原、ＨＢｅ抗体、Ｐｒｅ−Ｓ１抗原、Ｐｒｅ−Ｓ１
抗体、Ｐｒｅ−Ｓ２抗原、Ｐｒｅ−Ｓ２抗体等）、Ｃ型
肝炎ウイルス（ＨＣＶ）関連抗原抗体、エイズウイルス
（ＨＩＶ）関連抗原抗体、梅毒トレポネーマ関連抗体、
成人Ｔ細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶ−Ｉ）関連抗原抗
体等は特に好適である。Examples of the sample solution include human or animal blood, serum, plasma, urine, cerebrospinal fluid, saliva, sweat, ascites, amniotic fluid, extracts of human or animal cells or organs, and extracts of human or animal feces. , Cell or cell culture,
Any liquid, such as an extract, a plant extract, or a diluent thereof, is a target. As the test substance, any substance which has been conventionally measured by an immunological measurement method or any substance which can be measured can be used. For example, CRP (C-reactive protein), α
-Fetoprotein, CEA, RF (rheumatoid factor), anti-mycoplasma antibody, various hormones, allergens, reagin, IgE, albumin, hemoglobin, virus-related antigen antibodies, other infectious disease-related antigen antibodies, various blood group-related antigen antibodies, etc. . Measurement items that may be urgent, especially in clinical testing settings, such as A
BO blood group antibody, irregular antibody, hepatitis B virus-related antigen antibody (HBs antigen, HBs antibody, HBc antibody, HB
e antigen, HBe antibody, Pre-S1 antigen, Pre-S1
Antibody, Pre-S2 antigen, Pre-S2 antibody, etc.), hepatitis C virus (HCV) -related antigen antibody, AIDS virus (HIV) -related antigen antibody, syphilis treponemal-related antibody,
Adult T-cell leukemia virus (HTLV-I) -related antigens and antibodies are particularly suitable.

【００２１】被検物質に親和性を有する物質とは、例え
ば被検物質を抗原として測定する場合には、被検物質に
対する抗体であり、被検物質が或抗原に対する抗体であ
る場合には、被検物質である抗体に反応する抗原であっ
てもよい。また、被検物質が糖鎖である場合には、その
糖鎖と反応するレクチンを用いたり、逆に被検物質がレ
クチンである場合には、そのレクチンと反応する糖鎖を
用いることもできる。即ち、被検物質に親和性を有する
物質とは被検物質と反応する物質を指す。The substance having an affinity for the test substance is, for example, an antibody against the test substance when the test substance is measured as an antigen, and an antibody against the antigen when the test substance is an antibody against a certain antigen. there antigen which reacts to an antibody which is the test substance
You may . In addition, when the test substance is a sugar chain, a lectin that reacts with the sugar chain can be used, and when the test substance is a lectin, a sugar chain that reacts with the lectin can be used. . That is, the substance having an affinity for the test substance refers to a substance that reacts with the test substance.

【００２２】被検物質に対して競合する物質とは、被検
物質と被検物質に親和性を有する物質との反応を競合的
に阻害する物質を指す。即ち、被検物質そのものあるい
は被検物質と免疫学的に類似な物質である。例えば、被
検物質が抗原で、被検物質に親和性を有する物質がその
抗原に対する抗体であるような場合、被検物質に対して
競合する物質とはその抗原そのもの、あるいはその抗原
のエピトープまたはエピトープの類似体を持つ物質であ
る。被検物質が抗体で被検物質に親和性を有する物質が
その抗体に対する抗原である場合、被検物質に対して競
合する物質とはその抗体そのもの、その抗体の認識する
抗原上の同一のエピトープもしくはその近傍のエピトー
プを認識する抗体、あるいはこれらの抗体の抗原認識部
位を持つフラグメントである。The substance that competes with the test substance refers to a substance that competitively inhibits the reaction between the test substance and a substance having an affinity for the test substance. That is, the test substance itself or a substance immunologically similar to the test substance. For example, when the test substance is an antigen and the substance having an affinity for the test substance is an antibody against the antigen, the substance competing for the test substance is the antigen itself, or an epitope of the antigen or A substance that has an analog of an epitope. When the test substance is an antibody and the substance having an affinity for the test substance is an antigen against the antibody, the substance competing for the test substance is the antibody itself or the same epitope on the antigen recognized by the antibody. or a fragment having an antibody, or an antigen recognition site of these antibodies recognizes an epitope near the.

【００２３】測定容器は、間接凝集反応において一般的
に用いられている容器であれば、その種類、材質、形状
は何ら制限されない。例えば、ガラス、ポリスチレン、
ポリ塩化ビニル、ポリメタクリレート等からなる試験管
あるいはマイクロプレート、トレイ等である。測定容器
の試料を収容する領域（ウェル）の底面は、Ｕ型、Ｖ型
もしくはＵＶ型など底面中央から周辺にかけて傾斜をも
つ形状であることが望ましい。測定容器の試料を収容す
る部分は、試験管のように１つの容器に対して１つしか
ないものもあるが、便宜上総てウェルと呼ぶことにす
る。The type, material and shape of the measuring container are not particularly limited as long as they are generally used in the indirect agglutination reaction. For example, glass, polystyrene,
Test tubes, microplates, trays, etc., made of polyvinyl chloride, polymethacrylate, etc. It is desirable that the bottom surface of the region (well) of the measurement container for accommodating the sample has a shape such as U-shaped, V-shaped or UV-shaped, which has a slope from the center to the periphery of the bottom surface. Although there is only one portion of a measurement container for accommodating a sample such as a test tube for one container, it is referred to as a well for convenience.

【００２４】被検物質に親和性を有する物質あるいは被
検物質に対して競合する物質を、磁性粒子担体あるいは
測定容器内壁面に固定化させる方法は、特に限定された
ものではなく、公知の方法が好適に採用される。例え
ば、疎水結合、親水吸着、共有結合等の物理化学的方法
を用いればよい。さらに、必要があればＢＳＡ、カゼイ
ン、ゼラチン、卵白アルブミン、各種界面活性剤等のマ
スキング剤で処理してもよい。The method of immobilizing a substance having an affinity for a test substance or a substance that competes with the test substance on the magnetic particle carrier or the inner wall surface of the measurement container is not particularly limited, and a known method can be used. Is preferably adopted. For example, a physicochemical method such as a hydrophobic bond, a hydrophilic adsorption, and a covalent bond may be used. Further, if necessary, it may be treated with a masking agent such as BSA, casein, gelatin, ovalbumin, and various surfactants.

【００２５】本発明の免疫学的測定法に用いる磁性粒子
担体の分散液もしくは試料溶液の希釈液については、各
種水系溶液を用いることができる。例えば精製水、生理
食塩水、各種緩衝液等の水系溶媒で、各種タンパク質、
各種糖類、各種動物血清、各種防腐剤、各種界面活性
剤、各種合成高分子化合物、各種天然高分子化合物、各
種合成低分子化合物、各種塩類等を添加することができ
る。測定容器内壁面に被検物質と親和性を有する物質も
しくは被検物質に対して競合する物質を固定化させて測
定する場合には、特にカゼインを添加した溶液を用いる
ことが望ましい。Various aqueous solutions can be used as the dispersion of the magnetic particle carrier or the dilution of the sample solution used in the immunoassay of the present invention. For example, purified water, physiological saline, aqueous solvents such as various buffers, various proteins,
Various sugars, various animal serums, various preservatives, various surfactants, various synthetic high molecular compounds, various natural high molecular compounds, various synthetic low molecular compounds , various salts, and the like can be added. When the measurement is performed by immobilizing a substance having an affinity for the test substance or a substance that competes with the test substance on the inner wall surface of the measurement container, it is particularly preferable to use a solution to which casein is added.

【００２６】本発明の免疫学的測定法は、測定容器内あ
るいは別の容器内にて、試料溶液を希釈液にて希釈して
測定することができる。また、試料溶液を希釈液にて連
続希釈することにより凝集価として被検物質の濃度を判
定することも可能である。連続希釈には、従来受身赤血
球凝集反応等でよく使用されるダイリュータを用いるこ
ともできる。The immunoassay of the present invention can be carried out by diluting a sample solution with a diluent in a measuring container or another container. It is also possible to determine the concentration of a test substance as an agglutination value by serially diluting a sample solution with a diluent. For the serial dilution, a diluter which is conventionally often used in a passive hemagglutination reaction or the like can also be used.

【００２７】[0027]

【作用】磁性粒子担体に作用させる磁気ベクトルを時間
的に変化させることにより、磁力を作用させることによ
って生じる測定感度の低下を最小限に止め、かつ短時間
に粒子凝集像を形成させることができるようになった。
また、磁性粒子担体同士がチェーン状につながって、陰
性像が収束しきれない現象あるいは凝集像判定時にこの
チェーンが立ち上がって磁性粒子担体の多くが死角に入
ることを防げるため、粒子凝集像（特に陰性像）が明瞭
に判定可能となった。By changing the magnetic vector acting on the magnetic particle carrier with time, a decrease in measurement sensitivity caused by the action of a magnetic force can be minimized, and a particle aggregation image can be formed in a short time. It became so.
In addition, since the magnetic particle carriers are connected in a chain shape and a negative image cannot be completely converged, or the chain rises during the judgment of the agglutination image and most of the magnetic particle carriers can be prevented from entering the blind spot, the particle agglutination image (particularly, Negative image) can be clearly determined.

【００２８】[0028]

【実施例】以下、実施例及び比較例にしたがって本発明
を説明するが、本発明はこれら実施例によって何等限定
されるものではない。 実施例１ 磁力遮断の効果 (1) ＨＢｓ抗原の測定 精製ＨＢｓ抗原（明治乳業社製）を後述の比較例１の
(1) に示した希釈液Ａにて2.0ng/ml,1.0ng/ml,0.5ng/m
l,0.25ng/ml,0.13ng/ml,0.063ng/ml,0.031ng/mlとなる
様に希釈した各溶液を調製し、比較例１の(3) の抗ＨＢ
ｓ抗体結合マイクロプレートのレーン１，２のＡ，Ｂ，
Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇの各２ウェルづつに２５μｌづつ、
それぞれ順に各溶液を加えた。また、レーン１，２のＨ
の２ウェルには、比較例１の(1) に示した希釈液Ａを２
５μｌづつ加えた。このマイクロプレートの各ウェル
に、比較例１の(2) の抗ＨＢｓ抗体結合磁性粒子担体懸
濁液２５μｌを加え、マイクロプレートミキサーにて約
１分間攪拌の後、マイクロプレートを後述の比較例２の
(1) に示した装置１に乗せ、５分間磁力を作用させた。
装置より降ろすと、急速に磁性粒子担体の色が現れ、磁
性粒子担体の分布状態が判定可能な状態となった。そこ
で約１〜２分後に、各ウェルの凝集像を観察判定した。The present invention will be described below with reference to examples and comparative examples, but the present invention is not limited to these examples. Example 1 Effect of magnetic shielding (1) Measurement of HBs antigen Purified HBs antigen (manufactured by Meiji Dairies Co., Ltd.) was used in Comparative Example 1 described below.
2.0 ng / ml, 1.0 ng / ml, 0.5 ng / m with diluent A shown in (1)
l, 0.25 ng / ml, 0.13 ng / ml, 0.063 ng / ml, and 0.031 ng / ml were prepared, and the anti-HB of Comparative Example 1 (3) was prepared.
A, B, in lanes 1 and 2 of the antibody-binding microplate
25 μl for each of 2 wells of C, D, E, F, G
Each solution was added in order. In addition, H of lanes 1 and 2
In the two wells, the diluent A shown in (1) of Comparative Example 1 was placed in two wells.
Add 5 μl each. To each well of the microplate was added 25 μl of the suspension of the magnetic particle carrier bound to the anti-HBs antibody of Comparative Example 1 (2), and the mixture was stirred for about 1 minute with a microplate mixer. of
The device was placed on the device 1 shown in (1) and a magnetic force was applied for 5 minutes.
When the magnetic particle carrier was lowered from the apparatus, the color of the magnetic particle carrier rapidly appeared, and the distribution state of the magnetic particle carrier became a state in which it could be determined. Then, after about 1 to 2 minutes, the aggregation image of each well was observed and determined.

【００２９】図７に示すようにウェル底面に一様に広が
った像を示した場合を陽性（＋）、図８に示すようにウ
ェル底面に広がりきれずに僅かに収束した像を示した場
合を弱陽性（±）、図９に示すようにウェル底面中央に
磁性粒子担体がほぼ収束した像を示した場合を陰性
（−）と判定した。結果を表１に示した。A case where an image uniformly spread on the bottom of the well is shown as shown in FIG. 7 is positive (+), and a case where an image which is not fully spread on the bottom of the well and is slightly converged as shown in FIG. 8 is shown. Was determined to be weakly positive (±), and the case where the magnetic particle carrier almost converged at the center of the bottom of the well as shown in FIG. 9 was determined to be negative (−). The results are shown in Table 1.

【００３０】[0030]

【表１】 [Table 1]

【００３１】表１に示すように、良好な結果が得られ
た。 上記操作において、マイクロプレートを装置より
降ろさず、装置１の角形フェライト磁石１を装置より引
き出しても急速に凝集像が現れ、磁性粒子担体の分布状
態が判定可能な状態となり、表１と同様な結果が得られ
た。 少なくとも凝集像を判定する際に、磁力を遮断す
るか充分に弱めることにより、凝集像を判定し易くなる
ことが確認された。As shown in Table 1, good results were obtained. In the above operation, even if the microplate is not lowered from the apparatus and the rectangular ferrite magnet 1 of the apparatus 1 is pulled out of the apparatus, an agglomerated image appears rapidly, and the distribution state of the magnetic particle carrier can be determined. The result was obtained. It was confirmed that, at least in determining the aggregated image, the magnetic force was cut off or sufficiently weakened to facilitate the determination of the aggregated image.

【００３２】実施例２ 間欠磁力とＨＢｓ抗原測定 (1) 磁気発生装置の製作 装置２：図２に示すように、水平な板（実験台）の上に
100x100x10mmの大きさの角型フェライト磁石１をＮ極が
上を向くように置き、発砲スチロール製支持柱３の７０
ｍｍの高さの溝６と１１０ｍｍの溝７に180x150x2mm の
鉄板２、５を差し込んで水平に配した。磁石１の磁極と
鉄板２、５との距離は、それぞれ６０ｍｍ、１００ｍｍ
となる。測定容器は、この下の鉄板２上のほぼ中央に置
く。 (2) ＨＢｓ抗原の測定 精製ＨＢｓ抗原（明治乳業社製）を希釈液Ａにて2.0ng/
ml,1.0ng/ml,0.5ng/ml,0.25ng/ml,0.13ng/ml,0.063ng/m
l,0.031ng/mlとなる様に希釈した各溶液を調製し、比較
例１の(3) の抗ＨＢｓ抗体結合マイクロプレートのレー
ン１，２のＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇの各２ウェルづ
つに２５μｌづつ、それぞれ順に各溶液を加えた。ま
た、レーン１，２のＨの２ウェルには、比較例１の(1)
に示した希釈液Ａを２５μｌづつ加えた。比較例１の
(2) の抗ＨＢｓ抗体結合磁性粒子担体懸濁液２５μｌを
各穴に加え、マイクロプレートミキサーにて約１分間攪
拌の後、前記装置２に乗せ５分間磁力を作用させた。但
し、装置１の角形フェライト磁石１を３０秒間の内１０
秒間引き抜いて、磁力を作用させる時間を２／３にし
た。そして、マイクロプレートを装置より降ろし、約１
〜２分後に各ウェルの凝集像を観察した。Example 2 Intermittent Magnetic Force and Measurement of HBs Antigen (1) Fabrication of Magnetic Generator Apparatus 2: As shown in FIG. 2, on a horizontal plate (test bench)
A square ferrite magnet 1 having a size of 100 × 100 × 10 mm is placed so that the N pole faces upward.
The 180 × 150 × 2 mm iron plates 2 and 5 were inserted into the groove 6 having a height of 6 mm and the groove 7 having a height of 110 mm, and were arranged horizontally. The distance between the magnetic pole of the magnet 1 and the iron plates 2 and 5 is 60 mm and 100 mm, respectively.
Becomes The measuring container is placed substantially at the center on the iron plate 2 below. (2) Measurement of HBs antigen Purified HBs antigen (manufactured by Meiji Dairies Co., Ltd.)
ml, 1.0ng / ml, 0.5ng / ml, 0.25ng / ml, 0.13ng / ml, 0.063ng / m
, each solution diluted to 0.031 ng / ml was prepared, and A, B, C, D, E, F, and F in lanes 1 and 2 of the anti-HBs antibody-bound microplate of Comparative Example 1 (3). Each solution was added in order of 25 μl to each of two wells of G. In addition, the two wells of H in lanes 1 and 2 contain (1) of Comparative Example 1.
Was added in 25 μl portions. Comparative Example 1
25 μl of the anti-HBs antibody-bound magnetic particle carrier suspension of (2) was added to each well, and the mixture was stirred for about 1 minute with a microplate mixer. However, the square ferrite magnet 1 of the device 1 was moved for 10 seconds within 30 seconds.
For 2 seconds, the time for applying the magnetic force was reduced to 2/3. Then, lower the microplate from the device, and
After about 2 minutes, the aggregation image of each well was observed.

【００３３】図７に示すようにウェル底面に一様に広が
った像を示した場合を陽性（＋）、図８に示すようにウ
ェル底面に広がりきれずに僅かに収束した像を示した場
合を弱陽性（±）、図９に示すようにウェル底面中央に
磁性粒子担体がほぼ収束した像を示した場合を陰性
（−）と判定した。結果を表２に示した。A case where an image uniformly spread on the bottom of the well is shown as shown in FIG. 7 is positive (+), and a case where an image which is not fully spread on the bottom of the well and is slightly converged as shown in FIG. 8 is shown. Was determined to be weakly positive (±), and the case where the magnetic particle carrier almost converged at the center of the bottom of the well as shown in FIG. 9 was determined to be negative (−). The results are shown in Table 2.

【００３４】[0034]

【表２】 [Table 2]

【００３５】前記装置２にて磁力を５分間作用させ続け
た場合に比べ、測定感度の若干の上昇が確認された。ま
た、データは示さないが装置２にて同様な操作を５分間
の２／３即ち３分２０秒間連続して行なった場合の凝集
像（陰性像）は本実施例ほど明瞭なものではなかった。
本実施例により、磁性粒子担体に間欠的に磁力を作用さ
せることにより、より高感度な測定が可能となることが
示された。It was confirmed that the measurement sensitivity was slightly increased as compared with the case where the magnetic force was kept applied for 5 minutes in the device 2. Although no data is shown, the aggregation image (negative image) obtained when the same operation was continuously performed on the apparatus 2 for 2/3 of 5 minutes, that is, for 3 minutes and 20 seconds, was not as clear as in this example. .
According to the present example, it was shown that more sensitive measurement can be performed by intermittently applying a magnetic force to the magnetic particle carrier.

【００３６】実施例３ ＳＮ反転の効果 (1) ＨＢｓ抗原の測定 精製ＨＢｓ抗原（明治乳業社製）を比較例１の(1) に示
した希釈液Ａにて2.0nml,1.0ng/ml,0.5ng/ml,0.25ng/m
l,0.13ng/ml,0.063ng/ml,0.031ng/mlとなる様に希釈し
た各溶液を調製し、比較例１の(3) の抗ＨＢｓ抗体結合
マイクロプレートのレーン１，２のＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，
Ｅ，Ｆ，Ｇの各２ウェルづつに２５μｌづつ、それぞれ
順に各溶液を加えた。また、レーン１，２のＨの２ウェ
ルには、比較例１の(1) に示した希釈液Ａを２５μｌづ
つ加えた。比較例１の(2) の抗ＨＢｓ抗体結合磁性粒子
担体懸濁液２５μｌを各穴に加え、マイクロプレートミ
キサーにて約１分間攪拌の後、実施例２の(1)で示した
装置２に乗せ５分間磁力を作用させた。但し、装置２の
角形フェライト磁石１を１５秒毎に装置より引き出し
て、ＳとＮを裏返した。尚、磁石を引出しＳとＮを反転
させ再度配置するのに、１回毎約５秒間を要したため、
実際に磁力を作用させた時間は、３分３０秒程度であっ
た。その後、マイクロプレートを装置より降ろし、約１
〜２分後に各ウェルの凝集像を観察した。Example 3 Effect of SN Reversal (1) Measurement of HBs Antigen Purified HBs antigen (manufactured by Meiji Dairy Co., Ltd.) was diluted to 2.0 nml, 1.0 ng / ml with the diluent A shown in (1) of Comparative Example 1. 0.5ng / ml, 0.25ng / m
, 0.13 ng / ml, 0.063 ng / ml, and 0.031 ng / ml were prepared, and each of the anti-HBs antibody-binding microplates of Comparative Example 1 (3) was subjected to A, B, C, D,
Each solution was added in order of 25 μl to each of two wells E, F, and G. Further, 25 μl of the diluent A shown in (1) of Comparative Example 1 was added to the two wells of H in lanes 1 and 2. 25 μl of the anti-HBs antibody-bound magnetic particle carrier suspension of Comparative Example 1 (2) was added to each well, and after stirring for about 1 minute with a microplate mixer, the mixture was added to the apparatus 2 shown in (2) of Example 2. A magnetic force was applied for 5 minutes. However, the square ferrite magnet 1 of the apparatus 2 was pulled out of the apparatus every 15 seconds, and S and N were turned over. In addition, since it took about 5 seconds each time to draw out the magnets, reverse the S and N, and arrange them again,
The time when the magnetic force was actually applied was about 3 minutes and 30 seconds. Then, lower the microplate from the device, and
After about 2 minutes, the aggregation image of each well was observed.

【００３７】図１０に示すようにウェル底面に一様に広
がった像を示した場合を陽性（＋）、図１１に示すよう
にウェル底面に広がりきれずに僅かに収束した像を示し
た場合を弱陽性（±）、図１２に示すようにウェル底面
中央に磁性粒子担体が小さく収束した像を示した場合を
陰性（−）と判定した。結果を表３に示した。A case where an image uniformly spread on the bottom of the well is shown as shown in FIG. 10 is positive (+), and a case where an image which is not fully spread on the bottom of the well and is slightly converged as shown in FIG. 11 is shown. Was determined as weakly positive (±), and the case where the magnetic particle carrier showed a small converged image at the center of the bottom of the well as shown in FIG. 12 was determined as negative (−). The results are shown in Table 3.

【００３８】[0038]

【表３】 [Table 3]

【００３９】実施例１，２の結果に比べ測定感度の低下
が確認されたが、実施例１，２に比べ特に陰性像が非常
に良く収束したため、判定は非常に容易であった。この
陰性像は比較例１に示した陰性像と同等であった。本実
施例により、磁性粒子担体に作用させる磁力のＳＮを反
転させる操作を行なうことにより、陰性像がより小さく
収束し、凝集像の判定がより明瞭になることが示され
た。 実施例４ 交番磁界を用いた測定 (1) 磁気発生装置の製作 装置３：図３に示すように、水平な板（実験台）の上に
180x150x 2mmの鉄板２を水平に置き、この上に電磁石８
を乗せ、さらにその上にもう１枚の鉄板５を紙製の支柱
１０をかませて水平に乗せた。尚、ここで用いた電磁石
８は、20mmφx100mmの円柱状の鉄芯に、0.26mmφのエナ
メル線９を約３千回巻き付けて製作したソレノイドで、
エナメル線９の両端に交流５０Ｈｚ、８０Ｖの電圧をか
けた。この時、電磁石８の両端の磁力は約２２０ガウス
（ＡＣ）前後で、測定容器を配する装置内は約９ガウス
（ＡＣ）前後であった。測定容器は、下の鉄板２上のほ
ぼ中央に置く。 (2) ＨＢｓ抗原の測定 精製ＨＢｓ抗原（明治乳業社製）を実施例１の(2) に示
した希釈液Ａにて2.0ng/ml,1.0ng/ml,0.5ng/ml,0.25ng/
ml,0.13ng/ml,0.063ng/ml,0.031ng/mlとなる様に希釈し
た各溶液を調製し、比較例１の(3) の抗ＨＢｓ抗体結合
マイクロプレートのレーン１，２のＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，
Ｅ，Ｆ，Ｇの各２ウェルづつに２５μｌづつ、それぞれ
順に各溶液を加えた。また、レーン１，２のＨの２ウェ
ルには、比較例１の(1) に示した希釈液Ａを２５μｌづ
つ加えた。比較例１の(2) の抗ＨＢｓ抗体結合磁性粒子
担体懸濁液２５μｌを各穴に加え、マイクロプレートミ
キサーにて約１分間攪拌の後、前記(1) で示した装置３
に乗せ１０分間磁力を作用させた。そして、マイクロプ
レートを装置より降ろし、約１〜２分後に各ウェルの凝
集像を観察した。Although a decrease in the measurement sensitivity was confirmed as compared with the results of Examples 1 and 2, the judgment was very easy because the negative image converged particularly well compared to Examples 1 and 2. This negative image was equivalent to the negative image shown in Comparative Example 1. According to the present example, it was shown that by performing the operation of reversing the SN of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier, the negative image converges smaller and the judgment of the aggregated image becomes clearer. Example 4 Measurement Using Alternating Magnetic Field (1) Fabrication of Magnetic Generator Apparatus 3: As shown in FIG. 3, on a horizontal plate (test bench)
Place the iron plate 2 of 180x150x 2mm horizontally, and place the electromagnet 8
, And another iron plate 5 was placed horizontally with a paper support 10 caught thereon. The electromagnet 8 used here is a solenoid manufactured by winding an enamel wire 9 of 0.26 mmφ about 3,000 times around a cylindrical iron core of 20 mmφx100 mm.
A voltage of AC 50 Hz and 80 V was applied to both ends of the enamel wire 9. At this time, the magnetic force at both ends of the electromagnet 8 was about 220 Gauss (AC), and the inside of the apparatus in which the measurement container was arranged was about 9 Gauss (AC). The measuring container is placed almost at the center on the lower iron plate 2. (2) Measurement of HBs antigen Purified HBs antigen (manufactured by Meiji Dairy Co., Ltd.) was diluted with the diluent A shown in (2) of Example 1 to 2.0 ng / ml, 1.0 ng / ml, 0.5 ng / ml, 0.25 ng / ml.
ml, 0.13 ng / ml, 0.063 ng / ml, and 0.031 ng / ml were prepared, and the anti-HBs antibody-bound microplates of Comparative Example 1 (3), lanes 1 and 2, B, C, D,
Each solution was added in order of 25 μl to each of two wells E, F, and G. Further, 25 μl of the diluent A shown in (1) of Comparative Example 1 was added to the two wells of H in lanes 1 and 2. 25 μl of the anti-HBs antibody-bound magnetic particle carrier suspension of Comparative Example 1 (2) was added to each well, and the mixture was stirred for about 1 minute with a microplate mixer.
And applied magnetic force for 10 minutes. Then, the microplate was lowered from the apparatus, and after about 1 to 2 minutes, an aggregation image of each well was observed.

【００４０】図１０に示すようにウェル底面に一様に広
がった像を示した場合を陽性（＋）、図１１に示すよう
にウェル底面に広がりきれずに僅かに収束した像を示し
た場合を弱陽性（±）、図１２に示すようにウェル底面
中央に磁性粒子担体が小さく収束した像を示した場合を
陰性（−）と判定した。結果を表４に示した。A case where the image uniformly spread on the bottom of the well as shown in FIG. 10 is positive (+), and a case where the image is slightly converged without being fully spread on the bottom of the well as shown in FIG. 11. Was determined as weakly positive (±), and the case where the magnetic particle carrier showed a small converged image at the center of the bottom of the well as shown in FIG. 12 was determined as negative (−). The results are shown in Table 4.

【００４１】[0041]

【表４】 [Table 4]

【００４２】実施例１，２の何れの結果よりも、陰性像
が明瞭に観察された。この陰性像は重力を用いて沈降さ
せた比較例１と同等に収束していた。本実施例により、
磁性粒子担体に作用させる磁力は交番磁界を用いても測
定可能であることが示され、かつ交番磁界を用いれば陰
性像がより明瞭になることも示された。 比較例１ 重力沈降によるＨＢｓ抗原測定 (1) 希釈液Ａの調製 カゼインナトリウム（和光純薬社製）１５グラムを０．
０５％ＮａＮ3 −１００ｍＭＮａＣｌ−５０ｍＭトリス
塩酸緩衝液（ｐＨ８）３リットルに加えて溶解した。以
下、希釈液Ａとは上記組成のものをさす。 (2) 抗ＨＢｓ抗体結合磁性粒子担体の調製 磁性粒子担体（Dynabeads M-450 uncoated, ダイナル社
製）と抗ＨＢｓモノクローナル抗体（シノテスト社製）
を混合し、３７℃で３０分間反応させた。ここに希釈液
Ａ約２０倍量を加えて反応させた後、希釈液Ａにて洗浄
し、磁性粒子担体が約０．１％となるように希釈液Ａに
て再分散させて、抗ＨＢｓ抗体結合磁性粒子担体懸濁液
を調製した。 (3) 抗ＨＢｓ抗体結合マイクロプレートの調製 抗ＨＢｓモノクローナル抗体（シノテスト社製）を、
０．０５％ＮａＮ3 を含む等張化燐酸緩衝液（ＰＢＳ）
にて希釈し、９６穴Ｕ型マイクロプレート（ヌンク社
製）の全ウェルに５０μｌづつ分注した。室温または３
７℃にて反応させた後、全ウェルの液を吸引除去し希釈
液Ａ１００〜２００μｌを全ウェルに加え、再度室温ま
たは３７℃にて反応させた。しかる後に、全ウェルを精
製水にて洗浄し、抗ＨＢｓ抗体結合マイクロプレートと
した。 (4) ＨＢｓ抗原の測定 精製ＨＢｓ抗原（明治乳業社製）を希釈液Ａにて2.0ng/
ml,1.0ng/ml,0.5ng/ml,0.25ng/ml,0.13ng/ml,0.063ng/m
l,0.031ng/mlとなる様に希釈した各溶液を調製し、前記
(3) の抗ＨＢｓ抗体結合マイクロプレートのレーン１，
２のＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇの各２ウェルづつに２
５μｌづつ、それぞれ順に各溶液を加えた。また、レー
ン１，２のＨの２ウェルには、前記(1) に示した希釈液
Ａを２５μｌづつ加えた。前記(2) の抗ＨＢｓ抗体結合
磁性粒子担体懸濁液２５μｌを各穴に加え、マイクロプ
レートミキサーにて約１分間攪拌の後、室温にて約２時
間放置し、凝集像を観察判定した。[0042] than any of the results of Examples 1 and 2, negative image was clearly observed. This negative image was converged as in Comparative Example 1 settled using gravity. According to this embodiment,
It was shown that the magnetic force acting on the magnetic particle carrier can be measured even by using an alternating magnetic field, and that the use of an alternating magnetic field makes the negative image clearer. Comparative Example 1 HBs antigen measurement by gravity sedimentation (1) Preparation of diluent A 15 g of sodium caseinate (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added to 0.1 g of HBs antigen.
The solution was added to 3 liters of 05% NaN3-100 mM NaCl-50 mM Tris-HCl buffer (pH 8) and dissolved. Hereinafter, the diluent A refers to one having the above composition. (2) Preparation of anti-HBs antibody-bound magnetic particle carrier Magnetic particle carrier (Dynabeads M-450 uncoated, manufactured by Dynal) and anti-HBs monoclonal antibody (manufactured by Sinotest)
And reacted at 37 ° C. for 30 minutes. After adding about 20 times the amount of the diluent A, the mixture was reacted with the diluent A, washed with the diluent A, and re-dispersed with the diluent A so that the magnetic particle carrier became about 0.1%. An antibody-bound magnetic particle carrier suspension was prepared. (3) Preparation of anti-HBs antibody binding microplate Anti-HBs monoclonal antibody (manufactured by Sinotest) was
Isotonic phosphate buffer (PBS) containing 0.05% NaN3
And dispensed 50 μl to all wells of a 96-well U-type microplate (manufactured by Nunc). Room temperature or 3
After the reaction at 7 ° C, the liquid in all wells was removed by suction, 100 to 200 µl of diluent A was added to all wells, and the reaction was performed again at room temperature or 37 ° C. Thereafter, all wells were washed with purified water to obtain an anti-HBs antibody-bound microplate. (4) Measurement of HBs antigen Purified HBs antigen (manufactured by Meiji Dairies Co., Ltd.)
ml, 1.0ng / ml, 0.5ng / ml, 0.25ng / ml, 0.13ng / ml, 0.063ng / m
l, prepare each solution diluted to 0.031 ng / ml, and
Lane 3 of the anti-HBs antibody-bound microplate of (3)
2 for each 2 wells of A, B, C, D, E, F, G
Each solution was added in order of 5 μl. To the two wells of H in lanes 1 and 2, 25 μl of the diluent A shown in (1) was added. 25 μl of the anti-HBs antibody-bound magnetic particle carrier suspension of the above (2) was added to each well, and the mixture was stirred for about 1 minute with a microplate mixer, left at room temperature for about 2 hours, and an aggregation image was observed and determined.

【００４３】図４に示すようにウェル底面に一様に広が
った像を示した場合を陽性（＋）、図５に示すようにウ
ェル底面に広がりきれずに僅かに収束した像を示した場
合を弱陽性（±）、図６に示すようにウェル底面中央に
磁性粒子担体が完全に収束した像を示した場合を陰性
（−）と判定した。結果を表５に示した。A case where an image spread uniformly on the bottom of the well as shown in FIG. 4 is positive (+), and a case where an image which is not fully spread on the bottom of the well and converges slightly as shown in FIG. 5 is shown. Was determined as weakly positive (±), and the case where an image in which the magnetic particle carrier was completely converged at the center of the bottom of the well as shown in FIG. 6 was determined as negative (−). Table 5 shows the results.

【００４４】[0044]

【表５】 [Table 5]

【００４５】結果は、陰性像、弱陽性像及び陽性像とも
非常に明瞭であったが、凝集像判定までに長時間を要し
た。 比較例２ 磁力を時間的に変化させない状態での凝集像 (1) 磁気発生装置の製作 装置１：図１に示すように、水平な板（実験台）の上に
100x100x10mmの大きさの角型フェライト磁石１をＮ極が
上を向くように置き、発砲スチロール製支持柱３の５０
ｍｍの高さの溝４に180x150x2mm の鉄板２を差し込んで
水平に配した。測定容器は、この鉄板２上のほぼ中央に
置く。この角形フェライト磁石１の磁極は100x100mm の
面にあり、その磁極表面の磁束密度は中央が約２５０ガ
ウスで４隅は約１１００ガウスであった。 (2) ＨＢｓ抗原の測定 精製ＨＢｓ抗原（明治乳業社製）を比較例１の(1) に示
した希釈液Ａにて2.0ng/ml,1.0ng/ml,0.5ng/ml,0.25ng/
ml,0.13ng/ml,0.063ng/ml,0.031ng/mlとなる様に希釈し
た各溶液を調製し、比較例１の(3) の抗ＨＢｓ抗体結合
マイクロプレートのレーン１，２のＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，
Ｅ，Ｆ，Ｇの各２ウェルづつに２５μｌづつ、それぞれ
順に各溶液を加えた。また、レーン１，２のＨの２ウェ
ルには、比較例１の(1) に示した希釈液Ａを２５μｌづ
つ加えた。このマイクロプレートの各ウェルに、比較例
１の(2) の抗ＨＢｓ抗体結合磁性粒子担体懸濁液２５μ
ｌを加え、マイクロプレートミキサーにて約１分間攪拌
の後、マイクロプレートを前記装置１に乗せ、５分間磁
力を作用させた。その後マイクロプレートの各ウェルに
形成された凝集像を観察した。陰性像と陽性像に差はあ
るものの、色が薄くて各ウェル内での磁性粒子担体の分
布が明確に確認できなかった。このため、凝集像の図及
び判定結果の表は掲載できなかった。The results were very clear for the negative image, the weakly positive image and the positive image, but it took a long time to judge the agglutination image. Comparative Example 2 Aggregation image without changing magnetic force over time (1) Fabrication of magnetic generator Apparatus 1: As shown in FIG. 1, on a horizontal plate (experimental bench)
A square ferrite magnet 1 having a size of 100 × 100 × 10 mm is placed so that the N pole faces upward.
The iron plate 2 of 180 × 150 × 2 mm was inserted into the groove 4 having a height of 2 mm and arranged horizontally. The measuring container is placed almost at the center on the iron plate 2. The magnetic poles of this square ferrite magnet 1 were on a surface of 100 × 100 mm, and the magnetic flux density on the surface of the magnetic pole was about 250 gauss at the center and about 1100 gauss at the four corners. (2) Measurement of HBs antigen Purified HBs antigen (manufactured by Meiji Dairy Co., Ltd.) was diluted to 2.0 ng / ml, 1.0 ng / ml, 0.5 ng / ml, 0.25 ng / ml with the diluent A shown in (1) of Comparative Example 1.
ml, 0.13 ng / ml, 0.063 ng / ml, and 0.031 ng / ml were prepared, and the anti-HBs antibody-bound microplates of Comparative Example 1 (3), lanes 1 and 2, B, C, D,
Each solution was added in order of 25 μl to each of two wells E, F, and G. Further, 25 μl of the diluent A shown in (1) of Comparative Example 1 was added to the two wells of H in lanes 1 and 2. To each well of the microplate, 25 μl of the suspension of the magnetic particle carrier bound with the anti-HBs antibody of Comparative Example 1 (2) was added.
After stirring for about 1 minute with a microplate mixer, the microplate was placed on the device 1 and a magnetic force was applied for 5 minutes. Thereafter, the aggregation image formed in each well of the microplate was observed. Although there was a difference between the negative image and the positive image, the color was light and the distribution of the magnetic particle carrier in each well could not be clearly confirmed. For this reason, the figure of the aggregation image and the table of the judgment result could not be published.

【００４６】[0046]

【発明の効果】以上のように、本発明により凝集像、特
に陰性像を明瞭に判定することができるようになった。
磁力の強さを時間的に変化させることにより、主に磁力
を作用させることによる測定感度の低下を防ぐ効果があ
る他、磁性粒子担体の分布が不明瞭になってしまうこと
を防ぐ効果があることが、確認された。また、磁力の方
向を時間的に変化させることにより、主に磁力を作用さ
せることにより磁性粒子担体が同方向に磁化されること
によって起こる陰性像が広がる現象を防ぐ効果があるこ
とが、確認された。As described above, according to the present invention, an agglutination image, in particular, a negative image can be clearly determined.
By changing the strength of the magnetic force over time, there is an effect of preventing a decrease in measurement sensitivity mainly due to the action of the magnetic force, and an effect of preventing the distribution of the magnetic particle carrier from being unclear. That was confirmed. In addition, it was confirmed that by changing the direction of the magnetic force with time, the effect of preventing a negative image from spreading due to the magnetic force being applied to the magnetic particle carrier and being magnetized in the same direction. Was.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】本発明に用いることのできる磁気発生装置を示
した説明図である。FIG. 1 is an explanatory diagram showing a magnetic generator that can be used in the present invention.

【図２】本発明に用いることのできる磁気発生装置を示
した説明図である。FIG. 2 is an explanatory diagram showing a magnetic generator that can be used in the present invention.

【図３】本発明に用いることのできる磁気発生装置を示
した説明図である。FIG. 3 is an explanatory diagram showing a magnetic generator that can be used in the present invention.

【図４】重力のみにより沈降させた場合の２時間後の陽
性像（＋）をウェルの真上から観察した場合の像を、示
した説明図である。ウェル底面に一様に広がった像を示
している。FIG. 4 is an explanatory diagram showing an image obtained when a positive image (+) after 2 hours is observed from directly above a well when sedimentation is performed only by gravity. An image spread uniformly on the bottom of the well is shown.

【図５】重力のみにより沈降させた場合の２時間後の弱
陽性像（±）をウェルの真上から観察した場合の像を、
示した説明図である。ウェル底面に広がりきれずに僅か
に収束した像を示している。FIG. 5 shows an image obtained by observing a weak positive image (±) 2 hours after sedimentation only by gravity from directly above a well.
FIG. It shows an image that is slightly converged without being able to spread on the bottom of the well.

【図６】重力のみにより沈降させた場合の２時間後の陰
性像（−）をウェルの真上から観察した場合の像を、示
した説明図である。ウェル底面に完全に収束した像を示
している。FIG. 6 is an explanatory diagram showing an image obtained when a negative image (−) after 2 hours when sedimentation is caused only by gravity is observed from directly above a well. A completely converged image is shown on the bottom of the well.

【図７】磁力を作用させた後、磁力を遮断して１〜２分
後の陽性像（＋）をウェルの真上から観察した場合の像
を、示した説明図である。ウェル底面に一様に広がった
像を示している。FIG. 7 is an explanatory diagram showing an image when a positive image (+) is observed from directly above a well 1 to 2 minutes after the magnetic force is applied and the magnetic force is cut off. An image spread uniformly on the bottom of the well is shown.

【図８】磁力を作用させた後、磁力を遮断して１〜２分
後の弱陽性像（±）をウェルの真上から観察した場合の
像を、示した説明図である。ウェル底面に広がりきれず
に僅かに収束した像を示している。FIG. 8 is an explanatory diagram showing an image when a weak positive image (±) is observed from directly above a well 1 to 2 minutes after the magnetic force is applied and the magnetic force is cut off. It shows an image that is slightly converged without being able to spread on the bottom of the well.

【図９】磁力を作用させた後、磁力を遮断して１〜２分
後の陰性像（−）をウェルの真上から観察した場合の像
を、示した説明図である。ウェル底面にほぼ収束した像
を示している。FIG. 9 is an explanatory diagram showing an image in the case where a negative image (-) is observed from directly above a well 1-2 minutes after the magnetic force is cut off after applying the magnetic force. An image almost converged on the bottom of the well is shown.

【図１０】磁力を作用させた後、磁力を遮断して１〜２
分後の陽性像（＋）をウェルの真上から観察した場合の
像を、示した説明図である。ウェル底面に一様に広がっ
た像を示している。FIG. 10 is a diagram showing a case where the magnetic force is applied and then the magnetic force is cut off;
FIG. 5 is an explanatory diagram showing an image when a positive image (+) after a minute is observed from directly above a well. An image spread uniformly on the bottom of the well is shown.

【図１１】磁力を作用させた後、磁力を遮断して１〜２
分後の弱陽性像（±）をウェルの真上から観察した場合
の像を、示した説明図である。ウェル底面に広がりきれ
ずに僅かに収束した像を示している。FIG. 11 is a diagram showing a case where a magnetic force is applied and then the magnetic force is cut off;
FIG. 5 is an explanatory diagram showing an image when a weak positive image (±) after a minute is observed from directly above a well. It shows an image that is slightly converged without being able to spread on the bottom of the well.

【図１２】磁力を作用させた後、磁力を遮断して１〜２
分後の陰性像（−）をウェルの真上から観察した場合の
像を、示した説明図である。ウェル底面に小さく収束し
た像を示している。FIG. 12 is a diagram showing a case where a magnetic force is applied and then the magnetic force is cut off;
FIG. 4 is an explanatory diagram showing an image when a negative image (−) after minutes is observed from directly above a well. A small converged image is shown on the bottom of the well.

【符号の説明】[Explanation of symbols]

１ 角形フェライト磁石 ２ 鉄板 ３ 発泡スチロール製支持柱 ４ ５０ｍｍの高さの溝 ５ 鉄板 ６ ７０ｍｍの高さの溝 ７ １１０ｍｍの高さの溝 ８ 電磁石 ９ エナメル線 １０ 紙製の支柱 DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Square-shaped ferrite magnet 2 Iron plate 3 Styrofoam support pillar 4 50-mm high groove 5 Iron plate 6 70-mm high groove 7 110-mm high groove 8 Electromagnet 9 Enamel wire 10 Paper support

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 秋葉 千佳子 神奈川県相模原市大野台２丁目29番14号 株式会社シノテスト相模原事業所内 (72)発明者 宮本 憲人 東京都三鷹市下連雀８丁目10番16号 日 鉄鉱業株式会社内 (56)参考文献 特開 昭62−118255（ＪＰ，Ａ) 特開 昭62−287159（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−189560（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−144367（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) G01N 33/543 585 G01N 33/553 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continuing on the front page (72) Inventor Chikako Akiba 2-29-14 Ohnodai, Sagamihara City, Kanagawa Prefecture Inside the Sinotest Sagamihara Works (72) Inventor Norihito Miyamoto 8-10-16 Shimorenjaku, Mitaka City, Tokyo Japan (56) References JP-A-62-118255 (JP, A) JP-A-62-287159 (JP, A) JP-A-3-189560 (JP, A) JP-A-3-144367 ( JP, A) (58) Field surveyed (Int. Cl. ⁷ , DB name) G01N 33/543 585 G01N 33/553

Claims (4)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項１】 磁性粒子担体を用いた間接凝集反応法に
おいて、磁性粒子担体に作用させる磁気ベクトルを時間
的に変化させることにより磁性粒子担体同士の磁気的結
合を解離させ、凝集像を判定することを特徴とする間接
凝集反応法。1. A Indirect agglutination method using the magnetic particle carrier, the magnetic binding between the magnetic particle carrier by Rukoto temporally changing the magnetic vector to be applied to the magnetic particle carrier
An indirect agglutination reaction method characterized in that dissociation is performed and an agglutination image is determined. 【請求項２】 磁気ベクトルの時間的変化が、磁性粒子
担体に作用させる磁力の強さを時間的に変化させること
であることを特徴とする請求項1記載の間接凝集反応
法。2. The indirect agglutination reaction method according to claim 1, wherein the temporal change of the magnetic vector is a temporal change of the intensity of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier. 【請求項３】 磁気ベクトルの時間的変化が、磁性粒子
担体に作用させる磁力の方向を時間的に変化させること
であることを特徴とする請求項1記載の間接凝集反応
法。3. The indirect agglutination reaction method according to claim 1, wherein the temporal change of the magnetic vector is a temporal change of the direction of the magnetic force acting on the magnetic particle carrier. 【請求項４】 磁気ベクトルの時間的変化が、磁性粒子
担体に磁力を作用させ始めてから磁性粒子担体の凝集像
を判定するまでの工程での磁力の遮断であることを特徴
とする請求項１記載の間接凝集反応法。4. The magnetic vector according to claim 1, wherein the temporal change of the magnetic vector is the interruption of the magnetic force in a process from the start of applying the magnetic force to the magnetic particle carrier to the determination of the aggregation image of the magnetic particle carrier. The indirect agglutination reaction method as described above.